CN109007476A - 一种富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品发酵领域，提出一种富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料，包括豆腐黄浆水发酵产物，在所述发酵黄浆水饮料中苷元型异黄酮的含量为10～200μg·mL‑1，所述苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素。本发明还提出所述发酵黄浆水饮料的制备方法。本发明的有益技术效果体现在：筛选了异黄酮转化效率高的益生菌，使发酵产品中糖苷型异黄酮最大程度地转化为苷元型异黄酮。提高了黄浆水中大豆异黄酮的生物利用价值，在益生菌发酵完成后添加调味剂及果汁，不仅最大程度的获得苷元型异黄酮，还增加了果汁中丰富的营养物质，水果清香与豆香味相辅相成，口感细腻温和，营养均衡统一。这对利用黄浆水研制功能性饮料提供了一种新模式。
Description
技术领域
本发明属于食品发酵领域，具体涉及一种黄浆水发酵饮料及其制备方法。
背景技术
黄浆水，是生产豆腐过程中形成的副产物，富含各种营养物质，如大豆蛋白、大豆低聚糖、大豆异黄酮、及各矿物质，很适合微生物的生长。其中含有的大豆异黄酮具有诸多生理功能，如抗肿瘤、抗氧化、预防心脑血管疾病，预防骨质疏松，以及对妇女更年期综合征均有较好的效果。经研究表明，糖苷型异黄酮可经β～葡萄糖苷酶转化为生物活性较高的苷元型异黄酮，许多微生物均可以产β～葡萄糖苷酶。目前对于黄浆水的综合利用大多是对其中有益成分的提取制备，如分离提取大豆低聚糖、大豆异黄酮，以及发酵黄浆水生产食醋、制作豆腐凝固剂、米酒或作为辅料添加到果冻等食品制作中。
利用黄浆水制备饮料大体分为两种。不发酵直接调配和添加乳粉或果汁发酵黄浆水。直接调配的黄浆水饮料无法将黄浆水中的生物活性物质高效利用起来，只能获得单一的调配饮料。经微生物发酵的黄浆水，不仅能将黄浆水利用起来，还获得了特殊的发酵风味。CN105077423A发明专利中在黄浆水中添加了蔗糖、乳糖、果汁以及酸味剂后使用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌进行发酵，获得灭菌型发酵黄浆水饮料。未提及黄浆水中大豆异黄酮的利用度。CN 104621253A专利中提供了添加鲜乳、甜味剂后发酵，再辅以果汁及其他添加剂制得活性乳酸饮料，但获得的大豆异黄酮仅为40ug/ml，且未提及苷元型异黄酮的比例，也有其他相关专利中表明苷元型异黄酮含量较低的问题。
如何选择合适的发酵菌种，获得苷元型异黄酮含量较高且营养丰富的黄浆水发酵饮料是当前亟待解决的问题。
发明内容
为了获得高含量的苷元型异黄酮发酵饮料，本发明筛选了一种益生菌发酵剂组合，优化了发酵条件并复配果汁，提供了一种品质口感极佳并富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料。
本发明的另一目的是提出所述富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料的制备方法。
实现本发明目的技术方案为：
一种富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料，包括豆腐黄浆水发酵产物，在所述发酵黄浆水饮料中苷元型异黄酮的含量为10～200μg/mL，所述苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素。
所述的发酵黄浆水饮料，进一步地，包括豆腐黄浆水发酵产物和其他成分，以豆腐黄浆水为基数，其他成分及其比例(w/v)为：果汁或发酵后的果汁0～20％、糖1～8％、有机酸0.02～0.3％、稳定剂0.05～0.4％；
所述果汁为鲜榨果汁、复原果汁、浓缩果汁中的一种或多种；所述有机酸为柠檬酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、酒石酸中的一种或多种，所述稳定剂为黄原胶、果胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠中的一种或多种。试验中发现，有机酸的加入量超过0.3％则口味过酸，因此限定为0.02～0.3％。
一种富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料的制备方法，包括以下操作：
以新鲜豆腐黄浆水为主要原料，加入益生菌发酵；所述益生菌为鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、肠膜明串珠菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌、凝结芽孢杆菌、酪酸梭菌和双歧杆菌中的一种或两种。
本发明的一种优选技术方案为，所述制备方法包括步骤：
1)新鲜豆腐黄浆水经离心后，取上清液，加入果汁，调节pH至6.0～7.0，灭菌，灭菌后将活化好的益生菌以2～6％的接种量接入发酵；
2)向发酵产物中加入其他成分；
3)步骤2)所得液体进行均质、脱气和无菌灌装。
本发明的又一种优选技术方案为，所述的制备方法包括步骤：
1)新鲜豆腐黄浆水经离心后，取上清液，调节pH至6.0～7.0，灭菌，灭菌后冷却至32～40℃，将活化好的益生菌以2～6％的接种量接入到黄浆水上清液中发酵；
2)向发酵产物中加入果汁、糖、有机酸、稳定剂；
3)步骤2)所得液体进行均质、脱气和无菌灌装。
其中，步骤1)中菌种活化的方式为：取甘油保藏菌种，按体积比1～4％接种于已灭菌的～液体培养基中，于30～42℃培养10～20h，重复活化2到3次。
其中，加入的果汁为苹果汁、山楂汁、桃汁、橙汁、葡萄汁、西柚汁、石榴汁、西番莲汁、梨汁中的一种。
更优选地，所述益生菌为以下菌种中的一种：鼠李糖乳杆菌，副干酪乳杆菌，鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，鼠李糖乳杆菌和肠膜明串珠菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，凝结芽孢杆菌和肠膜明串珠菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，副干酪乳杆菌和酿酒酵母(2～1)：(1～5)的混合菌种，酪酸梭菌和植物乳杆菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，混合的比例为活菌数目之比。
在实验中，使用了菌种比例1：1，1：2，2：1，1：5和5：1进行发酵，对异黄酮的转化没有显著差异，因此在实际操作中采用1：(0.8～1.2)的比例即可。
其中，步骤1)中发酵的时间为26～28h，发酵温度为27～42℃。
其中，步骤1)中灭菌的条件为：高压蒸汽灭菌，灭菌温度95～115℃，灭菌时间10～20min；灭菌后自然冷却至32～40℃。
本发明的有益技术效果体现在以下方面：
1.筛选了异黄酮转化率较高的益生菌，使发酵产品中糖苷型异黄酮最大程度地转化为苷元型异黄酮。
2.本发明提高了黄浆水中大豆异黄酮的生物利用价值，在益生菌发酵完成后添加调味剂及果汁，不仅最大程度的获得苷元型异黄酮，还增加了果汁中丰富的营养物质，水果清香与豆香味相辅相成，口感细腻温和，营养均衡统一。这对利用黄浆水研制功能性饮料提供了一种新模式。
具体实施方式
以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。
下面实施例中，益生菌的活化条件为：按体积比取1～4％的甘油保藏菌种，接种于已灭菌的液体培养基中，于30～42℃培养10～20h，重复活化2～3次，备用。下面实施例中，发酵黄浆水大豆异黄酮含量的测定使用高效液相色谱法，具体方法如下：
测定的样品前处理：取10mL黄浆水置于～40℃冰箱预冷冻，用于真空冷冻干燥处理，获得发酵液的冻干粉。60％乙腈震荡提取2h。提取滤液经低速离心，滤液低温蒸发至干，蒸干后的残留物溶解于80％的甲醇并定容至10mL，经0.22μm微孔滤膜过滤进行HPLC分析。
异黄酮测定条件：色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18柱(4.6mm×100mm，3.5um)；流动相：A为0.5％冰醋酸水，B为乙腈；流速：0.6mL·min-1；柱温：30℃；检测器：Agilent-G1314A紫外检测器；检测波长：260nm；进样量：20μL。
实施例1
一种由鼠李糖乳杆菌单独发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心15min后，取上清液，使用食品级碳酸钠调节pH至6.5，高压蒸汽灭菌，灭菌温度115℃，时间15min，灭菌后使其自然冷却至35℃，将活化好的鼠李糖乳杆菌以5％的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为37℃，发酵24h。
按料浆比(w/v)在上述发酵黄浆水中添加浓缩苹果汁6％(市购的6倍浓缩苹果汁)、白砂糖5％、柠檬酸0.15％、黄原胶0.1％、羧甲基纤维素钠0.2％。
将调配完成的饮料进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到7.3*108CFU/ml，产品中大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为135.64μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的85±0.75％。大豆苷转化率达到86.16±3.22％、染料木苷转化率达到82.42±4.10％。
所得黄浆水活性乳酸饮料酸甜适口，口感细腻，有清新的豆香味和苹果清香，无豆腥味，颜色鲜亮，无分层，无肉眼可见沉淀，状态均一稳定，4℃保存15天无明显变化，活菌数达到1.56*109CFU/ml，略有上升后基本保持稳定。
实施例2
一种由鼠李糖乳杆菌单独发酵苹果汁～黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心15min后，取上清液，加入15％复原苹果汁，使用食品级碳酸钠调节pH至6.0，高压蒸汽灭菌，灭菌温度95℃，时间15min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的鼠李糖乳杆菌以5％的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为37℃，发酵22h。
按料浆比(w/v)在得到的发酵黄浆水中添加白砂糖6％、柠檬酸0.1％、黄原胶0.1％、羧甲基纤维素钠0.2％。
将调配完成的饮料进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到1.42*109CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为97.66μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的50±2.1％。大豆苷转化率达到62.72±0.05％、染料木苷转化率达到85.28±0.74％。
所得黄浆水活性乳酸饮料具有豆制品发酵特有的风味，略有豆腥味，颜色暗淡，稳定性较好，4℃贮存15天未有分层现象，无肉眼可见沉淀，贮藏过程中活菌数有下降趋势。
实施例3
一种由副干酪乳杆菌单独发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心15min后，取上清液，使用食品级碳酸钠调节pH至6.0，高压蒸汽灭菌，灭菌温度115℃，时间15min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的副干酪乳杆菌以5％的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为37℃，发酵24h。
按料浆比(w/v)在所得发酵黄浆水中添加浓缩苹果汁6％、白砂糖5％、柠檬酸0.15％、黄原胶0.1％、羧甲基纤维素钠0.2％。
将调配完成的饮料进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数3.3*108CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为95.10μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的66.28±0.33％。大豆苷转化率达到62.98±0.5％、染料木苷转化率达到81.57±0.35％。
实施例4
一种由副干酪乳杆菌单独发酵苹果汁～黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心15min后，取上清液，加入15％复原苹果汁(6倍浓缩的苹果汁加纯水稀释还原)，使用食品级碳酸钠调节pH至6.0，高压蒸汽灭菌，灭菌温度95℃、时间15min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的副干酪乳杆菌以3％的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为32℃，发酵18h。
按料浆比(w/v)在上述发酵黄浆水中添加白砂糖6％、柠檬酸0.1％、黄原胶0.1％、羧甲基纤维素钠0.2％。
将调配完成的饮料进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到3.4*108CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为56.95μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的12±2.9％。大豆苷转化率为49.06±0.55％、染料木苷转化率为65.94±0.54％。
所得黄浆水活性饮料酸甜适口，口感细腻，有清新的豆香味，苹果香气不明显，无分层，无肉眼可见沉淀，状态均一稳定，4℃环境下贮存15天无明显变化，活菌数略有下降，但仍超过106CFU/ml。
实施例5
一种由鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆菌发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心10min后，取上清液，使用食品级碳酸钠调节pH至6.0，高压蒸汽灭菌，灭菌温度115℃、时间10min，灭菌后使其自然冷却至40℃。将活化好的鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆菌按1:1(活菌数之比)的比例以2％(两种菌共2％)的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为35℃，发酵20h。
按料浆比(w/v)在所得发酵黄浆水中添加浓缩苹果汁4％、白砂糖4％、柠檬酸0.15％、黄原胶0.1％、羧甲基纤维素钠0.2％。
将调配完成的饮料进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到6.5*108CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为140.69μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的92±1.9％。大豆苷转化率达到91.33±2.46％、染料木苷转化率达到93.88±1.84％。
通过适当地调味，所得发酵黄浆水饮料酸甜可口、香气宜人，为富含苷元型异黄酮的功能性黄浆水饮料。
以上实施例1～5比较，可见两种菌种的组合优于单一菌种对黄浆水中糖苷型异黄酮的转化效果。发酵后添加果汁可保持贮藏期间活菌数稳定。
实施例6
一种由鼠李糖乳杆菌发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心10min后，取上清液，使用食品级碳酸钠调节pH至6.0，高压蒸汽灭菌，灭菌温度95℃、时间15min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的鼠李糖乳杆菌以5％的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为37℃，发酵18h。
按料浆比(w/v)在所得发酵黄浆水中添加白砂糖4％、柠檬酸0.15％、羧甲基纤维素钠0.3％。
将调配完成的饮料进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到7.4*108CFU/ml。产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为140.77μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的83.94±0.83％。大豆苷转化率为88.16±4.1％、染料木苷转化率为87.71±0.38％。
所得黄浆水活性饮料具有豆制品发酵特有的风味，有豆腥味，颜色暗淡，稳定性较好，4℃贮存15天未有分层现象，无肉眼可见沉淀，活菌数下降较快。
比较果汁的不同添加方式的试验：不加果汁储存过程中活菌数会迅速下降，发酵前添加复原果汁储存过程中活菌数也会下降，发酵后添加苹果汁储存过程中活菌数会略有上升，最后维持稳定。
实施例7
一种由凝结芽孢杆菌和肠膜明串珠菌发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心10min后，取上清液，加入5％复原苹果汁，使用食品级碳酸钠调节pH至6.2，高压蒸汽灭菌，灭菌温度95℃、时间15min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的凝结芽孢杆菌和肠膜明串珠菌按1:1(活菌数之比)的比例以4％(两种菌共4％)的接种量接入到黄浆水中接入到黄浆水中，发酵温度为35℃，发酵20h。
按料浆比(w/v)在上述发酵黄浆水中添加白砂糖6％、柠檬酸0.15％、黄原胶0.1％，羧甲基纤维素钠0.25％。
将调配完成的进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到5.6*108CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为125.65μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的64.32±0.25％。大豆苷转化率为73.66±10.34％、染料木苷转化率为68.30±0.43％。
实施例8
一种由鼠李糖乳杆菌和肠膜明串珠菌发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心10min后，取上清液，使用食品级碳酸钠调节pH至6.0，高压蒸汽灭菌，灭菌温度115℃、时间10min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的鼠李糖乳杆菌和肠膜明串珠菌按1:1(活菌数之比)的比例以5％(两种菌共5％)的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为32℃，发酵20h。
按料浆比(w/v)在所得发酵黄浆水中添加浓缩苹果汁8％、白砂糖5％、柠檬酸0.2％、羧甲基纤维素钠0.25％。
将调配完成的进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到6.08*108CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为129.73μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的90.25±0.7％。大豆苷转化率为90.15±0.38％、染料木苷转化率为93.45±0.89％。
实施例9
一种由副干酪乳杆菌和酿酒酵母发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心10min后，取上清液，加入10％复原苹果汁，使用食品级碳酸钠调节pH至6.2，高压蒸汽灭菌，灭菌温度95℃、时间15min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的副干酪乳杆菌和酿酒酵母1:1(活菌数之比)的比例以6％(两种菌共6％)的接种量接入到黄浆水中接入到黄浆水中，发酵温度为38℃，发酵26h。
按料浆比(w/v)在所得发酵黄浆水中添加白砂糖5％、柠檬酸0.15％、黄原胶0.2％，海藻酸钠0.1％。
将调配完成的进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到1.06*109CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为121.63μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的40.20±0.7％。大豆苷转化率为24.75±0.32％、染料木苷转化率为46.95±0.69％。
实施例10
一种由酪酸梭菌和植物乳杆菌发酵黄浆水饮料的制作方法，步骤如下：
新鲜黄浆水经3500r/min离心10min后，取上清液，使用食品级碳酸钠调节pH至6.8，高压蒸汽灭菌，灭菌温度115℃、时间10min，灭菌后使其自然冷却至40℃，将活化好的酪酸梭菌和植物乳杆菌按1:1(活菌数之比)的比例以4％(两种菌共4％)的接种量接入到黄浆水中，发酵温度为38℃，发酵26h。
按料浆比(w/v)在所得发酵黄浆水中添加浓缩苹果汁6％、白砂糖4％、柠檬酸0.1％、黄原胶0.05％，羧甲基纤维素钠0.2％。
将调配完成的进行均质、脱气和无菌灌装，制得黄浆水活性乳酸饮料，活菌数达到8.34*108CFU/ml，产品大豆异黄酮含量(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素)总量为139.89μg·mL-1，苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素达到总异黄酮的86.86±0.7％。大豆苷转化率为86.67±0.2％、染料木苷转化率为89.23±0.69％。
以上实施例1～10比较，可知在发酵之前不添加果汁，大豆苷和染料木苷的转化率都明显增高，更有利于黄浆水中糖苷型异黄酮转化为苷元型异黄酮。发酵后添加果汁可保持贮藏期间活菌数稳定。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及实例，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对本方法的判别模型作出一定的补充和优化。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料，其特征在于，包括豆腐黄浆水发酵产物，在所述发酵黄浆水饮料中苷元型异黄酮的含量为10～200μg·mL-1，所述苷元型异黄酮包括大豆苷元和染料木素。
2.根据权利要求1所述的发酵黄浆水饮料，其特征在于，包括豆腐黄浆水发酵产物和其他成分，以豆腐黄浆水为基数，其他成分及其比例(w/v)为：果汁或发酵后的果汁0～20％、糖1～8％、有机酸0.02～0.3％、稳定剂0.03～0.45％；
所述果汁为鲜榨果汁、复原果汁、浓缩果汁中的一种或多种；所述有机酸为柠檬酸、苹果酸、葡萄糖酸、乳酸、酒石酸中的一种或多种，所述稳定剂为黄原胶、果胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠中的一种或多种。
3.一种富含苷元型异黄酮的发酵黄浆水饮料的制备方法，其特征在于，包括以下操作：
以新鲜豆腐黄浆水为主要原料，加入益生菌发酵；所述益生菌为鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、肠膜明串珠菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌、凝结芽孢杆菌、酪酸梭菌和双歧杆菌中的一种或两种。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括步骤：
1)新鲜豆腐黄浆水经离心后，取上清液，加入果汁，调节pH至6.0～7.0，灭菌，灭菌后将活化好的益生菌以2～6％的接种量接入发酵；
2)向发酵产物中加入糖、有机酸、稳定剂；
3)步骤2)所得液体进行均质、脱气和无菌灌装。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括步骤：
1)新鲜豆腐黄浆水经离心后，取上清液，调节pH至6.0～7.0，灭菌，灭菌后冷却至32～40℃，将活化好的益生菌以2～6％的接种量接入到黄浆水上清液中发酵；
2)向发酵产物中加入其他成分；
3)步骤2)所得液体进行均质、脱气和无菌灌装。
6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中益生菌活化的方式为：取甘油保藏菌种，按体积比1～4％接种于已灭菌的液体培养基中，于30～42℃培养10～20h，重复活化2到3次。
7.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，加入的果汁为苹果汁、山楂汁、桃汁、橙汁、葡萄汁、西柚汁、石榴汁、西番莲汁、梨汁中的一种。
8.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，所述益生菌为以下菌种中的一种：鼠李糖乳杆菌，副干酪乳杆菌，鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，鼠李糖乳杆菌和肠膜明串珠菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，凝结芽孢杆菌和肠膜明串珠菌(2～1)：(1～5)的混合菌种，副干酪乳杆菌和酿酒酵母(2～1)：(1～5)的混合菌种，酪酸梭菌和植物乳杆菌(2～1)：(1～5)的混合菌种；混合的比例为活菌数目之比。
9.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中发酵的时间为16～28h，发酵温度为27～42℃。
10.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中灭菌的条件为：高压蒸汽灭菌，灭菌温度95～115℃，灭菌时间10～20min；灭菌后自然冷却至32～40℃。
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