CN108835630A - 一种具有高sod酶活力的口服液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有高SOD酶活力的口服液及其制备方法，所述方法包括将可食植物原料进行榨汁，然后进行离心(1000‑4000rpm，0‑30min)去除大颗粒，使用两道超滤膜进行分离(第一次分离采用管式膜，孔径60‑120kD；第二道分离为卷式膜，孔径8‑30kD)；之后，再进行超高压处理，压力200‑600MPa，时间为1‑20min。经过本发明方法处理后激活了SOD酶，其酶活力提高到了10000U/ml以上，有效解决了产品中SOD酶活性低的问题。经本发明方法制得的产品更有益于人体健康。
Description
技术领域
本发明属于生物领域，具体涉及一种具有高SOD酶活力的口服液及其制备方法。
背景技术
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，缩写SOD)是一类广泛存在于各类生物体内的氧化还原酶，它是一种能清除体内超氧自由基阴离子的金属酶，能有效地预防超氧自由基阴离子对机体的毒害作用，是一种疗效广泛的药用酶。
迄今为止，已从细菌、真菌、藻类、昆虫、鱼类、植物和哺乳动物等生物体内分离得到了SOD。由于金属辅基的不同，这些SOD目前可以分为四种类型：Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD、Ni-SOD。植物源的SOD被证明对人体健康有积极的作用，SOD酶的常见植物材料有沙棘、猕猴桃、桑葚、蓝莓、刺梨等，但是单位重量或体积SOD酶活性较低。前期研究已经利用DEAE离子交换分离技术从植物果实中纯化出了超氧化物歧化酶，其分子量为30～35kDa。但现有DEAE离子交换分离技术存在成本高、分离时间长、产物得率低等缺点，应用到大规模生产实践难度大。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种具有高SOD酶活力的口服液及其制备方法，经过本发明方法处理后产品中SOD酶活性高且稳定，提升了产品的保健功能，有效解决了SOD酶在加工过程中的酶活力损失和不稳定的问题。因此，经本发明方法制得的产品更有益于人体健康。
本发明所提供的具有高SOD酶活力的口服液的制备方法，包括下述步骤：
1)对可食植物原料进行制汁处理，得到植物汁液；
2)对植物汁液进行离心处理，收集上清液；
3)对上清液进行双道超滤分离，收集滤液；
4)对所得滤液进行超高压处理，得到具有高SOD酶活力的液体；
5)将所述具有高SOD酶活力的液体制成口服液。
上述方法步骤1)中，所述可食植物原料可为可食植物根、茎、叶、果实等，具体可为蓝莓、猕猴桃、桑葚、沙棘、刺梨等果实中的一种或几种。
所述制汁处理的工艺具体可为破碎榨汁。
步骤2)中，所述离心处理的工艺条件为：1000-4000rpm、0-30min(端点0不取)；具体可为3000rpm、10min。
步骤3)中，所述双道超滤分离中，超滤膜孔径为：管式膜60-120kD，卷式膜8-30kD；具体地，所述超滤膜孔径为：管式膜100kD，卷式膜10kD。
步骤4)中，所述超高压处理的压力可为：200-600MPa，时间可为：1-20min，具体地，所述超高压处理的压力可为550MPa，时间可为5min。
所述超高压处理的温度在0-40℃范围内。
所述超高压处理的传压介质优选为水。
步骤5)中，采用本领域常规方法将具有高SOD酶活力的液体制成口服液。
通过上述方法制备得到的具有高SOD酶活力的口服液也属于本发明的保护范围。
所述具有高SOD酶活力的口服液的可溶性固形物为2-15°Brix，pH为2.0-6.0。
上述工艺处理可以激活SOD酶，提高口服液中SOD酶的活性，保障产品的保健功能。
本发明的有益效果在于：
1)本发明采用离心和不同截留分子量双超滤的方式对口服液进行了分离，可以有效提升其酶活力，大大提升了产品的保健功能；
2)本发明采用超高压处理方法激活SOD酶，提高其酶活力。
3)本发明采用的技术相比于传统DEAE离子交换分离技术，具有成本低、效率高、实践性强等优点。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
一种具有高SOD酶活力的口服液的加工方法，包括将蓝莓、桑葚、沙棘、刺梨进行破碎制汁、离心、超滤和超高压处理。具体方法包括：将植物果实制汁后分装到适宜容器中，在下述条件下进行离心处理，取上清液进行双道超滤分离；之后进行超高压处理，传压介质为水。
其中，所述口服液的加工方法包括以下步骤:
(1)选用新鲜或冷冻无腐烂变质的蓝莓、桑葚、沙棘、刺梨的果实原料；
(2)清洗干净；
(3)将果实进行破碎制汁；
(4)用四层纱布过滤，将皮渣与汁液分离，得到汁液。
(5)离心处理，所述条件为:3000rpm、10min。
(6)超滤分离，所述条件为:管式膜100kD，卷式膜10kD。
(7)超高压处理，所述条件为压力550MPa、时间为5min。
按所述方法制得的具有高SOD酶活力的口服液，其可溶性固形物约为8°Brix，pH为3.7。
实施例2
一种具有高SOD酶活力的口服液的加工方法，包括将蓝莓、猕猴桃、沙棘、刺梨进行制汁、离心、超滤和超高压处理，具体方法包括：将原料制汁后分装到适宜容器中，在下述条件下进行离心处理，取上清液进行超滤分离；之后进行超高压处理。
其中，所述口服液的加工方法包括以下步骤：
(1)选用新鲜或冷冻无腐烂变质的蓝莓、猕猴桃、沙棘、刺梨的果实原料；
(2)清洗干净；
(3)将果实输送至螺旋榨汁机，进行制汁；
(4)用四层纱布过滤，将果核、皮渣与汁液分离，得到原汁；
(5)离心处理，所述条件为:3000rpm、10min。
(6)超滤分离，所述条件为:管式膜100kD，卷式膜10kD。
(7)超高压处理，所述条件为压力550MPa，时间为5min。
按所述方法制得的具有高SOD酶活力的口服液，其可溶性固形物约为10°Brix左右，pH为2.7。
对比例1-1
一种果汁的加工方法，与实施例1的区别仅在于：未采用超滤浓缩和超高压处理。
对比例1-2
一种果汁的加工方法，与实施例1的区别在于：仅采用超滤浓缩处理，未采用超高压处理。
对比例1-3
一种果汁的加工方法，与实施例1的区别在于：未采用超滤浓缩，其他步骤相同。
对比例1-4
一种果汁的加工方法，与实施例1的区别在于：超滤分离条件为：仅采用管式膜100kD，其他步骤相同。
对比例2-1
一种果汁的加工方法，与实施例1的区别仅在于：未采用超滤浓缩和超高压处理。
对比例2-2
一种果汁的加工方法，与实施例1的区别在于：仅采用超滤浓缩处理，未采用超高压处理。
结论1：
分别检验实施例1和对比例1制备的果蔬汁的SOD酶活性。结果见下表1。其中SOD活性检测方法为WST-1法(参考文献Peskin，A.V.，&Winterbourn，C.C.(2000).Amicrotiterplate assay for superoxide dismutase using a water-soluble tetrazolium salt(WST-1).Clinica Chimica Acta，293(1–2)，157-166.)。WST-1即2-(4-Iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2，4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium，monosodium salt。WST-1可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-1产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。
表1
| 项目 | SOD酶活性U/mL |
| 实施例1 | 11052.7 |
| 对比例1-1 | 6102.5 |
| 对比例1-2 | 9257.4 |
| 对比例1-3 | 6832.5 |
| 对比例1-4 | 6958.5 |
表1结果表明：超滤浓缩使得SOD酶活力相比对比例1-1提升34％左右，达到9257.4U/mL；超滤处理之后继续使用超高压处理可以激活SOD，使得酶活力相比对比例1-2提升20％左右，超过10000U/mL。说明该制备方法技能显著激活果蔬汁SOD酶活力。
结论2：
分别检验实施例2和对比例2-1、对比例2-2制备的果汁的SOD酶活性。其中SOD活性检测方法实验例1相同。结果见下表2。
表2
表2结果表明:超滤浓缩处理可以使得果汁SOD酶活力相比对比例2-1提升37％左右，达到8072.9U/mL；超滤浓缩+超高压可以继续激活SOD，使得酶活力相比对比例2-2提升25％左右，达到10091.13U/mL。说明该制备方法能显著激活果蔬汁SOD酶活力。
Claims (7)
1.一种具有高SOD酶活力的口服液的制备方法，包括下述步骤：
1)对可食植物原料进行制汁处理，得到植物汁液；
2)对植物汁液进行离心处理，收集上清液；
3)对上清液进行双道超滤分离，收集滤液；
4)对所得滤液进行超高压处理，得到具有高SOD酶活力的液体；
5)将所述具有高SOD酶活力的液体制成口服液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中，所述可食植物原料为可食植物根、茎、叶、果实；
所述制汁处理的工艺为破碎榨汁。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤2)中，所述离心处理的工艺条件为：1000-4000rpm、0-30min。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：步骤3)中，所述双道超滤分离中，超滤膜孔径为：管式膜60-120kD，卷式膜8-30kD。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：步骤4)中，所述超高压处理的压力为：200-600MPa，时间为：1-20min。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于：步骤4)中，所述超高压处理的温度在0-40℃范围内；
所述超高压处理的传压介质为水。
7.通过权利要求1-6中任一项所述的方法制备得到的具有高SOD酶活力的口服液，所述口服液的可溶性固形物为2-15°Brix，pH为2.0-6.0。
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