CN108835603A - 一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱及其制备方法，采用天然抗菌抑菌生物活性物质作为基础配方进行调配，其主要成份如下：石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐，不含有人工化学合成食品添加剂，可以有效灭活蔬菜沙拉中的李斯特氏菌，对李斯特氏菌具有极好的抗性，确保消费者健康，具有更为安全营养的价值。另外，本发明在保证蔬菜沙拉产品的食用安全性，确保消费者可在家中享用安全美味的蔬菜沙拉的同时，还可以保证消费者从蔬菜中获取足够的营养。
Description
技术领域
本发明涉及蔬菜沙拉酱领域，尤其是一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱及其制备方法。
背景技术
目前，随着消费者健康意识的逐步提高，再加之国家大力推行新版中国膳食指南，因此消费者对于果蔬类产品的消费量与日俱增。这些方便可口营养丰富的蔬菜沙拉(凉拌菜)也越来越受到消费者的日益青睐。然而，由于我国对于果蔬产品在采后没有相应的消毒、清洗的规范要求，因此在我国与蔬菜相关的食源性疾病暴发不断增加，对消费者健康造成了严重影响，进而对我国整个食品安全战略造成了极大的负面影响与负担。
在我国，消费者在准备蔬菜沙拉过程中，可能出现食源性致病菌污染的途径有以下几个方面：1.蔬菜在田间生长过程中就已经被食源性致病菌污染；2.蔬菜在采收过程中被食源性致病菌污染；3.蔬菜在运输以及在消费终端(超市或农贸市场)被二次污染；4.消费者将买回的蔬菜在家中进行蔬菜沙拉制备中，出现二次污染。以上这些因素，都成为导致蔬菜沙拉引发食源性疾病暴发的潜在原因。然而，目前国内市场中尚未有真正意义的抗食源性致病细菌的蔬菜沙拉酱，因此我国消费者在进行蔬菜沙拉消费过程中，仍然暴露于食源性疾病暴发风险当中。
单核细胞增生李斯特菌是一种可引起脑膜炎、败血症、流产等严重侵袭疾病的食源性病原菌，其易感人群主要为孕妇，老人，新生儿和免疫缺陷人群。该致病菌由于其发病潜伏期长(3天-260天)，患者致死率高(13-30％)，从而引起人们广泛关注。2000年该致病菌被世界卫生组织食品安全工作计划列为必检的食源性致病菌。大多数发达国家人类李斯特菌病发生率约为每一百万人2-15例，死亡率为13-34％。美国每年大约发生1600例严重临床李斯特氏菌病，260人死亡。2015年，欧盟地区发生2200例临床李斯特氏菌病，270人死亡。2011，美国由单核细胞增生李斯特氏菌污染哈蜜瓜导致28个州暴发李斯特氏菌病，147人感染，30死亡。2017.01-2018.06，南非，由单核细胞增生李斯特氏菌污染即食肉制品导致李斯特氏菌病大暴发，1049人感染，209人死亡。中国李斯特氏菌病暴发规律尚不清楚，但该致病菌在各类食品中的污染率一直居高不下，成为危害中国消费者公共健康的一个巨大隐患。
现阶段，果蔬产品中污染单核细胞增生李斯特氏菌事件屡有发生，因此为确保我国消费者健康，提升我国食品安全大国形象，开发出抗李斯特氏菌蔬菜沙拉酱具有重大经济和社会双重意义。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的是提供一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱及其制备方法，对李斯特氏菌具有极好的抗性，保证蔬菜沙拉产品的食用安全性。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱，包括石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐；
所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物、所述牛至提取物、所述肉桂精油、所述橄榄油与所述柠檬汁的体积比为1：1：1：0.5：0.5：0.5；
所述食盐的重量与所述石榴皮提取物的体积比为0.05：1。
优选地，所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物、所述牛至提取物、所述肉桂精油的质量浓度均为10％。
本发明还提供了上述一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐充分混合，即得抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱。
优选地，所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物与所述牛至提取物的制备方法相同；
所述石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮放入在鼓风干燥机中，45℃热空气干燥48h，随后将干燥充分的石榴皮进行精细研磨，取石榴皮干燥粉末100g放入在500mL的70％乙醇水溶液中浸泡，240g震荡6h，随后将溶液采用Whatman1号滤纸进行过滤；得到的滤液在旋转蒸发器中进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取物；并将浓缩提取物放入干燥器进行干燥。完全干燥的提取物进行称重，然后加入到灭菌超纯水中，剧烈震荡保证提取物彻底溶解，随后将提取物溶液用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到质量浓度为10％的石榴皮提取物。
优选地，所述肉桂精油提取的制备方法，包括以下步骤；
肉桂经过研磨，得到40-60目肉桂颗粒；取200g肉桂颗粒加入500mL的水中，水蒸气蒸馏4h，收集蒸馏液；将蒸馏液通过旋转蒸发仪进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取液；向浓缩提取液中加入灭菌的超纯水，得到质量浓度为10％的肉桂精油。
优选地，所述柠檬汁的制备方法，包括以下步骤：
将新鲜的青柠檬，表面洗净，切半，利用手柄式榨汁器将柠檬汁挤出，随后采用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到柠檬汁。
本发明提供了一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱及其制备方法，采用了天然抗菌抑菌生物活性物质作为基础配方进行调配，其主要成份如下：石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐，不含有人工化学合成食品添加剂，可以有效灭活蔬菜沙拉中的李斯特氏菌，对李斯特氏菌具有极好的抗性，确保消费者健康，具有更为安全营养的价值。另外，本发明在保证蔬菜沙拉产品的食用安全性，确保消费者可在家中享用安全美味的蔬菜沙拉的同时，还可以保证消费者从蔬菜中获取足够的营养。
具体实施方式
本发明提供的一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱，包括石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐；
所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物、所述牛至提取物、所述肉桂精油、所述橄榄油与所述柠檬汁的体积比为1：1：1：0.5：0.5：0.5；
所述食盐的重量与所述石榴皮提取物的体积比为0.05：1。
本发明中，采用了天然抗菌抑菌生物活性物质作为基础配方进行调配，其主要成份如下：石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐，不含有人工化学合成食品添加剂，可以有效灭活蔬菜沙拉中的李斯特氏菌，对李斯特氏菌具有极好的抗性，确保消费者健康，具有更为安全营养的价值。另外，本发明在保证蔬菜沙拉产品的食用安全性，确保消费者可在家中享用安全美味的蔬菜沙拉的同时，还可以保证消费者从蔬菜中获取足够的营养。
石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油与柠檬汁的体积比为1：1：1：0.5：0.5：0.5；食盐的重量与石榴皮提取物的体积比为0.05：1。其中石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油都具有天然抗菌抑菌活性，可对李斯特氏菌均具有灭活作用。橄榄油与柠檬汁主要是调和沙拉酱风味与口感，同时橄榄油与柠檬汁与前几种天然抗菌活性成份混用，对于李斯特氏菌灭活具有协同效用，可更好杀灭李斯特氏菌；食盐对沙拉酱进行调味。
在本发明的实施例中，石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油的质量浓度均为10％。
本发明还提供了上述一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐充分混合，即得抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱。
在此，石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐均同上所述，在此不再赘述。
在本发明的实施例中，石榴皮提取物、木槿花萼提取物与牛至提取物的制备方法相同；石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮放入在鼓风干燥机中，45℃热空气干燥48h，随后将干燥充分的石榴皮进行精细研磨，取石榴皮干燥粉末100g放入在500mL的70％乙醇水溶液中浸泡，240g震荡6h，随后将溶液采用Whatman1号滤纸进行过滤；得到的滤液在旋转蒸发器中进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取物；并将浓缩提取物放入干燥器进行干燥。完全干燥的提取物进行称重，然后加入到灭菌超纯水中，剧烈震荡保证提取物彻底溶解，随后将提取物溶液用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到质量浓度为10％的石榴皮提取物。
需要说明的是，由于石榴皮提取物、木槿花萼提取物与牛至提取物的制备方法相同，因此木槿花萼提取物与牛至提取物的制备方法仅需将石榴皮提取物的制备方法中，石榴皮改为木槿花萼或牛至。
需要说明的是，按照上述步骤制得的石榴皮提取物、木槿花萼提取物与牛至提取物，需保存在棕色试剂瓶中，4℃避光，备用
在本发明的实施例中，肉桂精油的制备方法，包括以下步骤；
肉桂经过研磨，得到40-60目肉桂颗粒；取200g肉桂颗粒加入500mL的水中，水蒸气蒸馏4h，收集蒸馏液；将蒸馏液通过旋转蒸发仪进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取液；向浓缩提取液中加入灭菌的超纯水，得到质量浓度为10％的肉桂精油。
需要说明的是，按照上述步骤制得的肉桂精油需保存在棕色试剂瓶中，4℃避光，备用。
在本发明的实施例中，柠檬汁的制备方法，包括以下步骤：
将新鲜的青柠檬，表面洗净，切半，利用手柄式榨汁器将柠檬汁挤出，随后采用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到柠檬汁。
需要说明的是，按照上述步骤制得的柠檬汁需要放入无菌容器内，4℃，保存备用。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱及其制备方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例中橄榄油为市场上销售的产品(欧丽薇兰Olivoilà压榨纯正橄榄油)；食盐为市售普通海晶盐。
实施例1
石榴皮提取物、木槿花萼提取物与牛至提取物的制备方法相同；石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮放入在鼓风干燥机中，45℃热空气干燥48h，随后将干燥充分的石榴皮进行精细研磨，取石榴皮干燥粉末100g放入在500mL的70％乙醇水溶液中浸泡，240g震荡6h，随后将溶液采用Whatman1号滤纸进行过滤；得到的滤液在旋转蒸发器中进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取物；并将浓缩提取物放入干燥器进行干燥。完全干燥的提取物进行称重，然后加入到灭菌超纯水中，剧烈震荡保证提取物彻底溶解，随后将提取物溶液用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到质量浓度为10％的石榴皮提取物，并置于棕色试剂瓶4℃避光保存，备用。
实施例2
木槿花萼提取物与牛至提取物的制备方法参考石榴皮提取物的制备方法；
肉桂精油提取的制备方法，包括以下步骤；
肉桂经过研磨，得到40-60目肉桂颗粒；取200g肉桂颗粒加入500mL的水中，水蒸气蒸馏4h，收集蒸馏液；将蒸馏液通过旋转蒸发仪进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取液；向浓缩提取液中加入灭菌的超纯水，得到质量浓度为10％的肉桂精油，并置于棕色试剂瓶4℃避光保存，备用；
实施例3
柠檬汁的制备方法，包括以下步骤：
将新鲜的青柠檬，表面洗净，切半，利用手柄式榨汁器将柠檬汁挤出，随后采用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到柠檬汁，并放入无菌容器内，4℃，保存备用。
实施例4
抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱，包括体积比为1：1：1：0.5：0.5：0.5的实施例1制得的石榴皮提取物、实施例1制得的木槿花萼提取物、实施例1制得的牛至提取物、实施例2制得的肉桂精油、橄榄油、实施例3制得的柠檬汁，及食盐；食盐的重量与石榴皮提取物的体积比为0.05：1；
抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐充分混合，即得抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱。
1、抗李斯特氏菌体外实验
1.1李斯特氏菌培养，-80℃冷冻保存纯化的李斯特氏菌菌株，无菌操作条件下，在脑心浸液琼脂平板上，划线活化，接种后的平板放置在30℃生化培养箱中，培养18-24h，取出平板，观察生长菌落的纯度，备用。将一次活化的纯菌落在无菌操作条件下，用无菌一次性接种针从平板上挑取纯的单个菌落，接种在10mLL脑心浸液肉汤中，30℃生化培养箱中，培养18-24h，菌体浓度达到109cfu/mLL，备用；并按照国家检测标准进行生理生化鉴定，结果见表1。
1.2取1mLL菌液，加入到9mLL灭菌生理盐水中，混匀稀释，使其菌液浓度为108cfu/mLL，以此类推，将菌液10倍稀释到101cfu/mLL，备用。
1.3将上述的一系列菌液，各取0.1mLL放入到实施例4制得的的1mL抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱中，震荡混匀，计时30s，1min，2min，3min，5min，10min。将不同处理时间的样品，采用MPN方法，确定抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱中李斯特氏菌存活数量，来确定实施例4的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱的抗李斯特氏菌效果。
1.4MPN方法，根据李斯特氏菌人工污染沙拉酱的样品污染状况的估计，选取3个适宜连续稀释度的样品稀释液(液体样品可包括未经稀释沙拉酱)，接种于10mL LB1肉汤(含有0.1％丙酮酸钠)，每一稀释度接种3管，每管接种1mL(如果接种量需要超过1mL，则用双料LB1增菌液)于30℃±1℃培养24h±2h。每管各移取0.1mL，转种于10mL LB2增菌液(含有0.1％丙酮酸钠)内，于30℃±1℃培养24h±2h。根据证实为单核细胞增生李斯特氏菌阳性的试管管数，查MPN检索表，报告每g(mL)样品中单核细胞增生李斯特氏菌的最可能数，以MPN/g(mL)表示。用接种环从各管中移取1环，接种李斯特氏菌显色平板(含有0.1％丙酮酸钠)，36℃±1℃培养24h-48h。自每块平板上挑取5个典型菌落(5个以下全选)，按照国家检测标准进行生理生化鉴定。
1.5最终确认抗菌效果
MPN计数结果确认：
根据抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱中李斯特氏菌存活的MPN结果，最终判断该沙拉酱抗李斯特氏菌的效果。选择性培养基中加入了丙酮酸钠可以最大限度的将受损伤细胞进行恢复，更为准确有效的评估本发明的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱的抗李斯特氏菌效果。
根据证实为单核细胞增生李斯特氏菌阳性的试管管数，查MPN检索表，报告每g(mL)样品中单核细胞增生李斯特氏菌的最可能数，以MPN/g(mL)表示。用接种环从各管中移取1环，接种李斯特氏菌显色平板，36℃±1℃培养24h-48h。自每块平板上挑取5个典型菌落(5个以下全选)，按照国家检测标准进行生理生化鉴定，结果见表2。
表1每g(mL)检样中单核细胞增生李斯特氏菌最可能数(MPN)检索表
注1：本表采用3个稀释度，0.1g(mL)、0.01g(mL)、0.001g(mL)，每个稀释度接种3管。
注2：表内所列检样量如改用1g(mL)、0.1g(mL)、0.01g(mL)时，表内数字应相应降低10倍，如改用0.01g(mL)、0.001g(mL)、0.0001g(mL)时，则表内数据应相应增高10倍，其余类推。
表2李斯特氏菌(108cfu/mL)体外抗李斯特氏菌沙拉酱抗菌结果(MPN/mL)
实施例4中抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱对于所测试的81株李斯特氏菌体外抗性结果表明，以108cfu/mL重度污染水平接菌到沙拉酱中处理不同时间30s，1min，2min，3min，5min，10min，结果表明所测试的李斯特氏菌对于沙拉酱的杀菌效果展示出了不同的差异性，30s处理时间仍然有少数李斯特氏菌存活，而当处理时间延伸到1min以上，则未发现有李斯特氏菌存活(丙酮酸钠协助受损细胞恢复条件下)，表明实施例4制得的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱在较短的处理时间内就可有效灭活各种李斯特氏菌，其具有极好的抗李斯特氏菌效果。
2、抗李斯特氏菌沙拉酱与蔬菜混匀后不同处理时间对李斯特氏菌灭活效果评估
2.1蔬菜沙拉人工污染，将叶菜类蔬菜(生菜，菠菜，白菜，黄瓜)等，进行常规的清洗，之后在洁净的案板上进行切割，将切好的蔬菜进行称重，425g一份，每种蔬菜准备15份。将不同浓度的李斯特氏菌菌液1mL采用点种方式人工污染到蔬菜中，将人工污染的蔬菜放置在洁净的生物安全柜内，室温鼓风20分钟进行菌株在蔬菜上的吸附，随后按照无菌操作的方式将人工污染的蔬菜放入到无菌的样品均质袋中，放置冰箱冷藏过夜，让菌株进一步在蔬菜上吸附。
2.2将人工污染李斯特氏菌的蔬菜取出25g，根据GB 4789.302016国家检测标准来确定人工污染李斯特氏菌的污染水平。
2.3400g人工污染的蔬菜与10mL，20mL，30mL，40mL，50mL实施例4制得的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱进行混匀，混匀后，分别计时30s，1min，2min，3min，5min，10min。
2.4每个不同处理时间的蔬菜沙拉，各取25g，放入到无菌的带有滤网的均质袋中，分别加入225mL灭菌的生理盐水，进行机械均质拍打230rpm，2min。
2.5将经过机械拍打均质的样品混悬液，按照1.4MPN方法去检测李斯特氏菌的存活数量。
2.6MPN方法，根据李斯特氏菌人工污染蔬菜沙拉的样品污染状况(108cfu/g，105cfu/g，102cfu/g)的估计，选取3个适宜连续稀释度的样品稀释液(液体样品可包括未经稀释沙拉酱)，接种于10mL LB1肉汤(含有0.1％丙酮酸钠)，每一稀释度接种3管，每管接种1mL(如果接种量需要超过1mL，则用双料LB1增菌液)于30℃±1℃培养24h±2h。每管各移取0.1mL，转种于10mLLB2增菌液(含有0.1％丙酮酸钠)内，于30℃±1℃培养24h±2h。根据证实为单核细胞增生李斯特氏菌阳性的试管管数，查MPN检索表，报告每g(mL)样品中单核细胞增生李斯特氏菌的最可能数，以MPN/g(mL)表示。用接种环从各管中移取1环，接种李斯特氏菌显色平板(含有0.1％丙酮酸钠)，36℃±1℃培养24h-48h。自每块平板上挑取5个典型菌落(5个以下全选)，按照国家检测标准进行生理生化鉴定，结果见表3-5。
表3人工污染李斯特氏菌蔬菜沙拉(108cfu/g)抗李斯特氏菌沙拉酱抗菌结果(MPN/g)
81株李斯特氏菌以108cfu/g重度污染水平进行人工污染接菌于蔬菜中，随后实施例4的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱对于人工污染的蔬菜沙拉进行混匀处理，混匀后静置处理不同时间30s，1min，2min，3min，5min，10min，结果表明所测试的李斯特氏菌对于沙拉酱的杀菌效果展示出了不同的差异性，30s，1min，2min处理时间仍然有少数李斯特氏菌存活，而当处理时间延伸到3min及以上，则未发现有李斯特氏菌存活(丙酮酸钠协助受损细胞恢复条件下)，表明实施例4制得的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱在较短的处理时间内就可有效灭活各种李斯特氏菌，其具有极好的抗李斯特氏菌效果。
表4人工污染李斯特氏菌蔬菜沙拉(105cfu/g)抗李斯特氏菌沙拉酱抗菌结果(MPN/g)
81株李斯特氏菌以105cfu/g中度污染水平进行人工污染接菌于蔬菜中，随后实施例4的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱对于人工污染的蔬菜沙拉进行混匀处理，混匀后静置处理不同时间30s，1min，2min，3min，5min，10min，结果表明所测试的李斯特氏菌对于沙拉酱的杀菌效果展示出了不同的差异性，30s，1min处理时间仍然有少数李斯特氏菌存活，而当处理时间延伸到2min及以上，则未发现有李斯特氏菌存活(丙酮酸钠协助受损细胞恢复条件下)，表明实施例4制得的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱在较短的处理时间内就可有效灭活各种李斯特氏菌，其具有极好的抗李斯特氏菌效果。
表5人工污染李斯特氏菌蔬菜沙拉(102cfu/g)抗李斯特氏菌沙拉酱抗菌结果(MPN/g)
81株李斯特氏菌以102cfu/g低度污染水平进行人工污染接菌于蔬菜中，随后实施例4的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱对于人工污染的蔬菜沙拉进行混匀处理，混匀后静置处理不同时间30s，1min，2min，3min，5min，10min，结果表明所测试的李斯特氏菌对于沙拉酱的杀菌效果展示出了不同的差异性，30s处理时间仍然有少数李斯特氏菌存活，而当处理时间延伸到1min及以上，则未发现有李斯特氏菌存活(丙酮酸钠协助受损细胞恢复条件下)，表明实施例4制得的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱在较短的处理时间内就可有效灭活各种李斯特氏菌，其具有极好的抗李斯特氏菌效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱，其特征在于，包括石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐；
所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物、所述牛至提取物、所述肉桂精油、所述橄榄油与所述柠檬汁的体积比为1：1：1：0.5：0.5：0.5；
所述食盐的重量与所述石榴皮提取物的体积比为0.05：1。
2.如权利要求1所述的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱，其特征在于，所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物、所述牛至提取物、所述肉桂精油的质量浓度均为10％。
3.一种如权利要求1或2任一项所述的抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮提取物、木槿花萼提取物、牛至提取物、肉桂精油、橄榄油、柠檬汁和食盐充分混合，即得抗李斯特氏菌的蔬菜沙拉酱。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述石榴皮提取物、所述木槿花萼提取物与所述牛至提取物的制备方法相同；
所述石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：
将石榴皮放入在鼓风干燥机中，45℃热空气干燥48h，随后将干燥充分的石榴皮进行精细研磨，取石榴皮干燥粉末100g放入在500mL的70％乙醇水溶液中浸泡，240g震荡6h，随后将溶液采用Whatman1号滤纸进行过滤；得到的滤液在旋转蒸发器中进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取物；并将浓缩提取物放入干燥器进行干燥。完全干燥的提取物进行称重，然后加入到灭菌超纯水中，剧烈震荡保证提取物彻底溶解，随后将提取物溶液用0.22um Millipore过滤器进行过滤除菌，得到质量浓度为10％的石榴皮提取物。
5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述肉桂精油提取的制备方法，包括以下步骤；
肉桂经过研磨，得到40-60目肉桂颗粒；取200g肉桂颗粒加入500mL的水中，水蒸气蒸馏4h，收集蒸馏液；将蒸馏液通过旋转蒸发仪进行40℃真空蒸发，直至90％的液体被蒸发，得到浓缩提取液；向浓缩提取液中加入灭菌的超纯水，得到质量浓度为10％的肉桂精油。
6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述柠檬汁的制备方法，包括以下步骤：
将新鲜的青柠檬，表面洗净，切半，利用手柄式榨汁器将柠檬汁挤出，随后采用0.22umMillipore过滤器进行过滤除菌，得到柠檬汁。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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