CN108815116A - 一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏、制备方法及应用 - Google Patents

一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏、制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏、制备方法及应用，白藜芦醇软膏包括以下组分：羟丙基‑β‑环糊精、纯化水、白藜芦醇、无水乙醇、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、十六醇、十八醇、白凡士林、羊毛脂、甘油、三乙醇胺、吐温‑80、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、冰片。将白藜芦醇用丙基‑β‑环糊精包裹制备成稳定性好的包合物，通过丙基‑β‑环糊精自身气味掩盖药物的不良气味、最大限度降低了药物的刺激性，再把白藜芦醇包合物加入含有冰片的乳化基质中，能促进药物渗透进入皮下从而更好的发挥药理作用，将白藜芦醇的药效最大化，在提升药效的前提下可以减少白藜芦醇添加量、大大降低了毒副作用；总有效率为87.75﹪，不会复发，也没有任何不良症状。

Description

一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏、制备方法及应用
技术领域
本发明涉及一种软膏及制备方法，具体涉及一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏、制备方法及应用，属于生物技术与新医药。
背景技术
病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，以真皮成纤维细胞增殖并产生过量的胞外基质(Ⅰ、Ⅲ型胶原，粘蛋白和粘多糖等)为特点,是一种皮肤结缔组织增生性疾病。本病常发生在烧伤、外科手术及外伤后，不仅影响美观，甚至可以引起严重的功能障碍，给患者身心健康带来严重危害。因此，病理性瘢痕的防治在皮肤外科及烧伤整形科领域是一项重要课题。
目前病理性瘢痕的治疗方法较多，但因其发病机制尚未完全阐明，故治疗没有取得突破性进展。常用的治疗方法，如手术、激素局部注射、冷冻等，均为有创性治疗，且疗效均不甚理想，如手术可使瘢痕祛除，但复发率高，而且有可能术后新形成的瘢痕会更大；激素瘢痕内注射及冷冻，可使瘢痕变软、缩小，但不会完全消退，达不到预期的效果。
因此，通过更深入的揭示病理性瘢痕的发病机制，并寻找一种新的有效的防治病理性瘢痕的天然药物将具有重要的意义。在中国，中医药防治疾病有着悠久的历史，许多宝贵的经验与方法值得进一步深入挖掘，白藜芦醇是一种存在于虎杖、藜芦、决明等中草药植物中的多酚类化合物，2009年发表在首都医科大学学报上的《白藜芦醇对人皮肤癌细胞株a431生长抑制机制实验研究》一文揭示了白藜芦醇具有抗炎、抗氧化、抑制血小板聚集、改善微循环、保护线粒体功能等多种生物学活性及药理作用，有研究表明它能通过多种途径抑制细胞增殖，诱导其凋亡，因此具有对抗增生性疾病的作用，因而可以考虑将其作为对抗增生性疾病的成分使用，但是由于其自身的溶解性和稳定性较差，因而需要添加足够的量才能起到药效，但是白藜芦醇药物的刺激性较强、具有一定的毒副作用，限制了其应用于人体和功效的发挥，临床试验表明对抗增生性疾病的效果并不好。目前尚无能够有效从根本上治愈病理性瘢痕的成药。
发明内容
针对上述现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏，能够降低刺激性和毒副作用，在无创无痛的前提下能够有效治愈病理性瘢痕，不会复发、也不会对人体造成伤害；本发明的另一个目的是提供一种白藜芦醇软膏的制备方法及应用，操作简单易于实施，制得的白藜芦醇软膏可以彻底治愈病理性瘢痕。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏，包括以下组分：羟丙基-β-环糊精、纯化水、白藜芦醇、无水乙醇、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、十六醇、十八醇、白凡士林、羊毛脂、甘油、三乙醇胺、吐温-80、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、冰片。
优选的，所述各组分的量为：羟丙基-β-环糊精90g、纯化水220ml、白藜芦醇10g、无水乙醇30ml、硬脂酸100g、单硬脂酸甘油酯75g、十六醇20g、十八醇20g、白凡士林50g、羊毛脂20g、甘油50g、三乙醇胺8g、吐温-805g、尼泊金甲酯1g、尼泊金乙酯1g、冰片9g。
本发明还提供了上述可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取90g的羟丙基-β-环糊精于干净的烧杯中，加入120ml纯化水，搅拌使其溶解；
(2)待溶解完毕后，称取10g的白藜芦醇于试管中，避光，加30ml无水乙醇溶解，然后滴加进步骤(1)的烧杯中，避光继续搅拌，得到包合物溶液；
(3)将包合物溶液放入冰箱中静置90分钟，抽滤，将滤液倒入培养皿中，用打好孔的保鲜膜盖上，放入-80℃冰箱中冷冻，24小时后取出放入真空冷冻干燥机中干燥，待包合物成白色蓬松的块状物时，即得白藜芦醇环糊精分子包合物；
(4)称取硬脂酸100g、单硬脂酸甘油酯75g、十六醇20g、十八醇20g、白凡士林50g、羊毛脂20g，混合加热融化，保持温度80℃；
(5)另取甘油50g、三乙醇胺8g、吐温-805g、尼泊金甲酯1g、尼泊金乙酯1g、冰片9g，加纯化水100mL，加热溶解，保持温度80℃，在搅拌下缓缓加入到步骤(4)的油相中，继续搅拌乳化形成基质；最后再加入步骤(3)的白藜芦醇环糊精分子包合物250g，搅拌均匀至室温即可。
将白藜芦醇软膏分别于皮肤瘢痕部位外涂，每日早晚各涂一次，使用周期为90天可治疗病理性瘢痕。
相对于现有技术，本发明具有如下优势：
(1)本发明在白藜芦醇软膏的制备时，先把白藜芦醇用丙基-β-环糊精(是一种无臭、无毒、微带甜味、可食用的白色结晶粉末)包裹制备成包合物，这不仅能增加药物的溶解性能、提高药物的稳定性，还能通过丙基-β-环糊精自身气味掩盖药物的不良气味、最大限度降低了药物的刺激性；然后再把白藜芦醇包合物加入含有冰片的乳化基质中，冰片是龙脑香科植物龙脑香的树脂和挥发油加工品提取获得的结晶，在本发明中添加准确的量能促进药物渗透进入皮下从而更好的发挥药理作用，将白藜芦醇的药效最大化，在不降低药效的前提下可以减少白藜芦醇添加量、大大降低了毒副作用；
(2)由于上述特殊的制备工艺，结合其余组分的合理配比，使得白藜芦醇的溶解性和稳定性更好、冰片可以将白藜芦醇的药效最大化，从而不需要添加较大的量即可充分发挥治疗功效、应用于人体的安全性更高，无发红、发疹和水疱等现象；经临床试验表明，对于病理性瘢痕的治疗效果非常好，总有效率为87.75﹪，不会复发，也没有任何不良症状，可以充分抑制病理性瘢痕组织成纤维细胞的增殖，具有根治病理性瘢痕的功效。
附图说明
图1为未使用白藜芦醇而正常培养的病理性瘢痕成纤维细胞生长情况扫描电镜图(放大1200倍)；
图2为未使用白藜芦醇而正常培养的病理性瘢痕成纤维细胞生长情况扫描电镜图(放大4000倍)；
图3为10μmol/L白藜芦醇作用于病理性瘢痕成纤维细胞48小时后的扫描电镜图(放大1200倍)；
图4为10μmol/L白藜芦醇作用于病理性瘢痕成纤维细胞48小时后的扫描电镜图(放大4000倍)；
图5为10μmol/L白藜芦醇作用于病理性瘢痕成纤维细胞48小时后的扫描电镜图(放大5000倍)；
图6为10μmol/L白藜芦醇作用于病理性瘢痕成纤维细胞48小时后的扫描电镜图(放大2000倍)；
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
1.先制备白藜芦醇包合物
称取90g的羟丙基-β-环糊精于干净的烧杯中，加入120ml纯化水，搅拌使其溶解。待溶解完毕后，称取10g的白藜芦醇于试管中，避光，加30ml无水乙醇溶解，然后滴加进上述烧杯中，避光继续搅拌。待包合结束后，将包合物溶液放入冰箱中静置90分钟，抽滤，将滤液倒入培养皿中，用打好孔的保鲜膜盖上，放入-80℃冰箱中冷冻，24小时后取出放入真空冷冻干燥机中干燥，待包合物成白色蓬松的块状物时，即得白藜芦醇环糊精分子包合物。
2.制备白藜芦醇软膏
称取硬脂酸100g、单硬脂酸甘油酯75g、十六醇20g、十八醇20g、白凡士林50g、羊毛脂20g，混合加热融化，保持温度80℃，得到油相；
另取甘油50g、三乙醇胺8g、吐温-805g、尼泊金甲酯1g、尼泊金乙酯1g、冰片9g，加纯化水100mL，加热溶解，保持温度80℃，在搅拌下缓缓加入到上述油相中，继续搅拌乳化形成基质；然后再加入白藜芦醇包合物250g，搅拌均匀至室温即可。
质量控制：
①性状：本品为乳剂型基质的乳白色软膏，在自然亮光处检视色泽一致(取本品适量涂于玻璃板上观察应均匀，细腻)，具一定的粘稠性，易于涂布于皮肤或黏膜处，不融化，但可软化；
②稳定性：离心稳定性，将软膏10g置于离心管中，2500r·min，30min，无分层；耐热试验，将软管置于55℃，恒温6h，无分层；耐寒试验，于－5℃将软膏放置24h，无分层；
③皮肤刺激性试验：取健康家兔3只，剃去家兔的背毛4cm2，休息24小时，使剃毛所产生的刺激症状痊愈后，取0.5g本软膏均匀地涂在剃毛部位形成薄层。24h后观察，无发红、发疹和水疱等现象。
临床试验：
在前期临床研究中，将68例病理性瘢痕患者(共96块瘢痕)，随机分为治疗组和对照组。治疗组外用白藜芦醇软膏，对照组外用美宝疤痕软膏，分别于皮肤瘢痕部位外涂，每日早晚各涂一次，使用周期为90天。两组治疗前后均进行温哥华瘢痕量表(Vancouverscarscale,VSS)评分，治疗结束后进行临床疗效判定，具体临床效果如下：
1.两组治疗前后VSS评分比较
两组患者治疗前的VSS评分无统计学显著差异，具有可比。经使用白藜芦醇软膏和美宝疤痕软膏后，两组的VSS积分均降低(P﹤0.05)，但以治疗组的降低程度明显，优于对照组(P﹤0.05)，见表1。
表1两组治疗前后VSS评分结果
注：治疗前后采用配对t检验，两组间采用成组t检验。两组治疗前比较：p﹥0.05，两组治疗后比较p﹤0.05，治疗组自身前后比较p﹤0.01，对照组自身前后比较p﹤0.01，两组差值比较p﹤0.05.t值分别为0.63、2.27、7.65、7.67、3.24。
2.两组临床疗效比较
治疗组治愈15例，显效28例，总有效率为87.75﹪，对照组治愈10例，显效22例，有效率为68.08﹪。两组间有效率比较，治疗组显著优于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。
表2两组临床疗效比较
注：两组间有效率比较用卡方检验，χ2值为4.87，p﹤0.05。
图1和图2为正常培养的病理性瘢痕成纤维细胞生长情况。图1可见细胞铺展良好，细胞间镶嵌连接，相邻细胞的间隙很窄，图2可见胞膜完整，表面微绒毛丰富、卷曲成丛状、规则排列。
图3至图6为白藜芦醇干预病理性瘢痕成纤维细胞48小时后的情况。图3可见细胞间隙增宽，细胞明显回缩，铺展面积减小；图4可见细胞表面的微绒毛逐渐消失；图5可见胞膜表面出泡现象，最后图6显示胞体固缩，细胞裂解成许多胞膜完整、大小不一的凋亡小体状结构，表明白藜芦醇组分对病理性瘢痕成纤维细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用，为本发明将白藜芦醇应用于临床治愈病理性瘢痕提供了理论依据。

Claims (4)

1.一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏，其特征在于，包括以下组分：羟丙基-β-环糊精、纯化水、白藜芦醇、无水乙醇、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、十六醇、十八醇、白凡士林、羊毛脂、甘油、三乙醇胺、吐温-80、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、冰片。
2.根据权利要求1所述的可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏，其特征在于，所述各组分的量为：羟丙基-β-环糊精90g、纯化水220ml、白藜芦醇10g、无水乙醇30ml、硬脂酸100g、单硬脂酸甘油酯75g、十六醇20g、十八醇20g、白凡士林50g、羊毛脂20g、甘油50g、三乙醇胺8g、吐温-805g、尼泊金甲酯1g、尼泊金乙酯1g、冰片9g。
3.一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)称取90g的羟丙基-β-环糊精于干净的烧杯中，加入120ml纯化水，搅拌使其溶解；
(2)待溶解完毕后，称取10g的白藜芦醇于试管中，避光，加30ml无水乙醇溶解，然后滴加进步骤(1)的烧杯中，避光继续搅拌，得到包合物溶液；
(3)将包合物溶液放入冰箱中静置90分钟，抽滤，将滤液倒入培养皿中，用打好孔的保鲜膜盖上，放入-80℃冰箱中冷冻，24小时后取出放入真空冷冻干燥机中干燥，待包合物成白色蓬松的块状物时，即得白藜芦醇环糊精分子包合物；
(4)称取硬脂酸100g、单硬脂酸甘油酯75g、十六醇20g、十八醇20g、白凡士林50g、羊毛脂20g，混合加热融化，保持温度80℃；
(5)另取甘油50g、三乙醇胺8g、吐温-805g、尼泊金甲酯1g、尼泊金乙酯1g、冰片9g，加纯化水100mL，加热溶解，保持温度80℃，在搅拌下缓缓加入到步骤(4)的油相中，继续搅拌乳化形成基质；最后再加入步骤(3)的白藜芦醇环糊精分子包合物250g，搅拌均匀至室温即可。
4.一种可治愈病理性瘢痕的白藜芦醇软膏的应用，其特征在于，白藜芦醇软膏用于治疗病理性瘢痕。
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