CN108704065A - 一种增强免疫力的保健颗粒及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种增强免疫力的保健颗粒及其制备方法，以黄精、黑枸杞、大枣、陈皮、甘草为主要原料药，经提取、浓缩、制粒、干燥等步骤制备得到。本发明以中医理论为指导，以药食同源中药材为原料，取黄精、黑枸杞填精髓、补益肝肾、补诸虚的功效，大枣则取其补中益气、滋补肝肾、养血安神、调理气血以固表的作用，取陈皮理气健脾的功效，以其助脾运，使补而不腻，增强机体吸收，甘草取其调和诸药，并辅助补气的作用，从而达到滋补肝肾、益卫固表、扶正固本之效，从而提高机体的免疫机能；采取包含提取、浓缩、制粒、干燥等步骤的中药颗粒制备方法，制备得到了中药复方降脂颗粒，过程简单，易于实现，设备要求低，克服了传统中药汤剂煎煮、携带、贮藏不方便的缺陷，食用方便，同时通过免疫药理实验证明了其具有显著增强免疫功能，市场前景广阔。

Description

一种增强免疫力的保健颗粒及其制备方法

技术领域

本发明涉及保健食品领域，具体涉及一种增强免疫力的保健颗粒及其制备方法。

背景技术

《黄帝内经》中提出，“正气存内，邪不可干；邪之所凑，其气必虚”，即正气充足则邪气无法侵袭人体，邪气一旦侵入人体则表明正气已经虚衰。由此可见，正气起到了守卫人体免受邪气侵害的功能。而这与西医理论中免疫功能学说实质相同。根据整理相关传统中医理论，则可发现，可以通过扶正祛邪这一基本治则出发，通过补中益气，补气固表，充盈卫气以达到调节人体免疫能力的功效。

免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等），处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。免疫系统作为人体中非常重要一个系统，是人体健康的前提，免疫力较差的人就会选择一些保健品来进行提高自己的免疫能力。国家食品药品监督管理局数据显示：截至2016年8月6日，我国共批准了16593个保健食品，其中用于调节免疫力的保健品占31.94%，主要包括动物初乳、植物营养、名贵动植物、维生素和矿物质等诸多类别。其中，动物初乳保健品是以动物初乳为原料制成的保健品，由于动物初乳中含有优质蛋白和免疫蛋白，可提高机体免疫力，但是这类保健品不适用于孕期妈妈；植物营养保健品是以天然或珍贵植物为原料，提取出有效营养成分的保健品，这些保健品主要是把天然植物中最有用的营养精华提取浓缩，如从大豆中提取蛋白，从红豆、黑豆、银杏叶等植物中提取营养物，这类保健品大多不适宜儿童和孕妇吃；名贵动植物保健品是以名贵中药或有药用价值的动植物为主要原料的补养型保健品，如人参、鹿茸、灵芝、银杏、乌鸡、鳖等，像市场上的西洋参灵芝口服液之类的，这类保健品适合中老年朋友服用，并不适合儿童服用，孕妇最好也不要服用；维生素和矿物质保健品是以维生素和矿物质为主要成分的营养型保健品，这类保健品主要含维生素和矿物质（微量元素和宏量元素），这些营养素是人体所需的，有些容易缺乏、不易从普通食物中摄取足够的量，还有如孕妇、乳母、儿童等特殊人群，需要增加用量，针对这样的人群，如准妈妈营养组合，家庭“十”“全”健康礼盒，亲子大礼包等等。然而，这些保健品虽然都具有良好的增强免疫力的功效，但大都是口服液或粉剂，携带极其不方便，而且普遍价格高，长期服用代价大。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有显著增强免疫功能且便携易服的增强免疫力的保健颗粒及其制备方法。

为了解决上述问题，本发明采用以下技术方案：一种增强免疫力的保健颗粒，由以下重量份数的原料药制成：黄精4—20份、黑枸杞10—24份、大枣6—20份、陈皮1—9份、甘草1—9份。

进一步，由以下重量份数的原料药制成：黄精10—18份、黑枸杞16—24份、大枣6—14份、陈皮3—7份、甘草1—6份。

进一步，由以下重量份数的原料药制成：黄精14—18份、黑枸杞20—24份、大枣10—14份、陈皮5—7份、甘草3—5份。

本发明还提供了一种增强免疫力的保健颗粒的制备方法，包括以下步骤：

（1）提取：按照配方准确称取所述原料药组分，混合均匀后置于提取灌中，加入8—12倍水，在160—180℃持续加热至沸腾，在80—100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤得到水煎液，过滤完毕后将滤饼再次置于所述提取罐中，按照以上条件重复提取操作一次后，合并两次水煎液，即为提取液；

（2）浓缩：将所述提取液转入减压浓缩装置中，在60—80℃下减压浓缩7—9小时，得到相对密度为1.30—1.50的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在40—60℃下持续干燥18—24小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在60—80℃下持续干燥60—72小时，粉碎成80—100目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：糊精=1:1.4—1:1.8的比例，向所述黑晶复方浸膏粉中加入糊精，混合均匀后，加入体积分数为75%的乙醇，所述乙醇的添加量为所述黑晶复方浸膏粉的0.4—0.8倍，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将所述黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在60—70℃下持续干燥18—36小时，即可得到黑晶复方颗粒。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

（1）本发明取黄精、黑枸杞填精髓、补益肝肾、补诸虚的功效，大枣则取其补中益气、滋补肝肾、养血安神、调理气血以固表的作用，取陈皮理气健脾的功效，以其助脾运，使补而不腻，增强机体吸收，甘草取其调和诸药，并辅助补气的作用，从而达到滋补肝肾、益卫固表、扶正固本之效，从而提高机体的免疫机能。

（2）本发明以中医理论为指导，以药食同源中药材为原料，采取包含提取、浓缩、制粒、干燥等步骤的中药颗粒制备方法，制备得到了中药复方降脂颗粒，过程简单，易于实现，设备要求低，克服了传统中药汤剂煎煮、携带、贮藏不方便的缺陷，食用方便，同时通过免疫药理实验证明了其具有显著增强免疫功能，市场前景广阔。

附图说明

图1为本发明的工艺流程示意图。

图2为本发明感官评价统计表。

具体实施方式

为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。

1.具体实施例

本发明的具体实施方式及实施例如下：

实施例1：

（1）提取：按照配方准确称取黄精40g、黑枸杞100g、大枣60g、陈皮10g、甘草10g，混合均匀后置于提取灌中，加入1.76 L水后在160℃下持续加热至沸腾，并在80℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入1.76 L水后在160℃下持续加热至沸腾，并在80℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在60℃下减压浓缩9小时，得到相对密度为1.30的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在40℃下持续干燥24小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在60℃下持续干燥72小时，粉碎成80目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.4的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.4的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在60℃下持续干燥36小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例2：

（1）提取：按照配方准确称取黄精100g、黑枸杞160g、大枣60g、陈皮30g、甘草10g，混合均匀后置于提取灌中，加入3.60 L水后在170℃下持续加热至沸腾，并在90℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入3.60 L水后在170℃下持续加热至沸腾，并在90℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在70℃下减压浓缩8小时，得到相对密度为1.40的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在50℃下持续干燥21小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在70℃下持续干燥66小时，粉碎成90目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.6的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.6的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在65℃下持续干燥27小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例3：

（1）提取：按照配方准确称取黄精120g、黑枸杞170g、大枣100g、陈皮50g、甘草30g，混合均匀后置于提取灌中，加入5.64 L水后在180℃下持续加热至沸腾，并在100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入5.64 L水后在180℃下持续加热至沸腾，并在100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在80℃下减压浓缩7小时，得到相对密度为1.50的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在60℃下持续干燥18小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在80℃下持续干燥60小时，粉碎成100目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.8的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.8的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在70℃下持续干燥18小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例4：

（1）提取：按照配方准确称取黄精140g、黑枸杞200g、大枣100g、陈皮50g、甘草35g，混合均匀后置于提取灌中，加入4.20 L水后在160℃下持续加热至沸腾，并在80℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入4.20 L水后在160℃下持续加热至沸腾，并在80℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在60℃下减压浓缩9小时，得到相对密度为1.30的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在40℃下持续干燥24小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在60℃下持续干燥72小时，粉碎成80目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.4的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.4的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在60℃下持续干燥36小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例5：

（1）提取：按照配方准确称取黄精140g、黑枸杞200g、大枣120g、陈皮50g、甘草40g，混合均匀后置于提取灌中，加入5.50 L水后在170℃下持续加热至沸腾，并在90℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入4.95 L水后在170℃下持续加热至沸腾，并在90℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在70℃下减压浓缩8小时，得到相对密度为1.40的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在50℃下持续干燥21小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在70℃下持续干燥66小时，粉碎成90目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.6的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.6的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在65℃下持续干燥27小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例6：

（1）提取：按照配方准确称取黄精160g、黑枸杞220g、大枣130g、陈皮60g、甘草50g，混合均匀后置于提取灌中，加入7.44 L水后在180℃下持续加热至沸腾，并在100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入7.44 L水后在180℃下持续加热至沸腾，并在100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在80℃下减压浓缩7小时，得到相对密度为1.50的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在60℃下持续干燥18小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在80℃下持续干燥60小时，粉碎成100目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.8的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.8的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在70℃下持续干燥18小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例7：

（1）提取：按照配方准确称取黄精180g、黑枸杞240g、大枣140g、陈皮70g、甘草50g，混合均匀后置于提取灌中，加入5.44 L水后在160℃下持续加热至沸腾，并在80℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入5.44 L水后在160℃下持续加热至沸腾，并在80℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在60℃下减压浓缩9小时，得到相对密度为1.30的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在40℃下持续干燥24小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在60℃下持续干燥72小时，粉碎成80目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.4的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.4的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在60℃下持续干燥36小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例8：

（1）提取：按照配方准确称取黄精180g、黑枸杞240g、大枣140g、陈皮70g、甘草60g，混合均匀后置于提取灌中，加入6.90 L水后在170℃下持续加热至沸腾，并在90℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入6.90 L水后在170℃下持续加热至沸腾，并在90℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在70℃下减压浓缩8小时，得到相对密度为1.40的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在50℃下持续干燥21小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在70℃下持续干燥66小时，粉碎成90目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.6的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.6的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在65℃下持续干燥27小时，即可得到黑晶复方颗粒。

实施例9：

（1）提取：按照配方准确称取黄精200g、黑枸杞240g、大枣200g、陈皮90g、甘草90g，混合均匀后置于提取灌中，加入9.84 L水后在180℃下持续加热至沸腾，并在100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤后，将药渣再次置于提取罐中，再加入9.84 L水后在180℃下持续加热至沸腾，并在100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤；将两次过滤得到的水煎液合并即为提取液；

（2）浓缩：将提取液转入减压浓缩装置中，在80℃下减压浓缩7小时，得到相对密度为1.50的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在60℃下持续干燥18小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在80℃下持续干燥60小时，粉碎成100目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：辅料=1:1.8的比例，向黑晶复方浸膏粉中加入辅料，辅料为糊精，混合均匀后，按照黑晶复方浸膏粉：乙醇=1:0.8的比例加入体积分数为75%的乙醇后，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在70℃下持续干燥18小时，即可得到黑晶复方颗粒。

2.颗粒功效检测

样品总多糖测定：称取黑晶复方颗粒0.5g，加入30mL去离子水，采用超声提取法进行提取，取参数为超声功率：80Hz、超声温度：40℃、超声时间：50min；过滤，所得滤液定容至100mL。精密量取1mL定溶于50mL容量瓶中。采用紫外-可见分光光度法进行检测，检测波长为487nm；显色方式为苯酚-浓硫酸显色法。以无水葡萄糖为对照品，计算总黄酮含量。

样品总黄酮测定：黑晶复方颗粒1.0g，加入30mL的80％的乙醇，采用超声提取法进行提取，取参数为超声功率：50Hz、超声温度：40℃、超声时间：50min，过滤，所得滤液定容至50mL。采用紫外-可见分光光度法进行检测，检测波长为500nm；显色方式为亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法。以芦丁为对照品，计算总黄酮含量。

统计检测结果如下表所示：

从以上测试结果可以看出：本发明所述的黑晶复方颗粒中标志性成分总多糖的含量约为420.2 mg/g/，总黄酮的含量约为10.9 mg/g。

3.食品质量检测

以实施例5的样品作为检测对象，共计1000g，以10g/袋进行分装，其中400g样品用于送检，300g用于样品感官评价，300g用于样品用于企业备份留存。

送检目的与要求：产品营养成分检测是指向消费者提供食物营养特性的一种描述，是食品类产品生产销售的组成部分，营养成分检测要求具有国家资质的检测机构按照《预包装食品营养标签通则》（GB28050－2011）中相关规定进行检测对比。

检测单位：英格尔检测技术服务（上海）有限公司，拥有国家CMA资质，CNAS资质，检测领域包括化工、能源、环境、生物、食品等，具有食品检验机构资质认定证书，证书编号F2015090079，单位地址：上海市闵行区瓶北路155号。

检测方法：按照国家标准要求，分别以GB5009.5-2016第一法、GB GB5009.5-2016、GB28050-2011、GB28050-2011与GB5009.91-2017第二法。

检测结果及质量评价：如下表所示，能量、蛋白质、脂肪、碳水化合物与钠五项指标均按照国家标准《预包装食品营养标签通则》（GB28050－2011）进行检测，国家标准中没有对检测指标制定标准，五项指标检测对消费者起到指导作用，有助于消费者据自身需求确定食用量。当某营养成分含量数值≤“0”界限值时，其外包装上含量应标示为“0”；营养素参考值是专用于食品标签的、比较食品营养成分含量多少的参考标准，是消费者选择食品时的一种营养参照尺度；NRV%表示本包装食品营养素含量占推荐摄入量的百分比，计算公式为：X/NRV×100% = Y %其中：X =食品中某营养素的含量，NRV =该营养素的营养素参考值，Y % =计算结果。脂肪营养素参考值为2%，样品属于低脂产品，脂肪摄入量少。

上表中，营养素参考值：用于比较和描述能量或营养成分含量的多少，营养素参考值主要依据我国居民膳食营养素推荐摄入量（RNI）和适宜摄入量（AI）而制定；

NRV（%）：表示本包装食品营养素含量占推荐摄入量的百分比=检测结果/日推荐摄入量×100%；

标签标示值：当某营养成分含量检测结果数低于“0”界限值时，营养标签上其含量应标示为“0”。

4.感官评价与口味品鉴

评价对象：以300g实施例5的样品；

调查范围：北京中医药大学；

调查对象：北京中医药大学学生为调查总体，随机抽取30名学生作为调查的具体对象；

调查方法：问卷调查，依据文献参考与样品特点，确定色泽与滋味气味为主要评价项目，设定色泽满分40分、滋味气味满分40分、溶解度满分20分，对黑晶颗粒进行综合评分，有差距的酌情扣分。

调查时间：2018年5月27日—2018年5月29日。

评鉴结果分析：对黑晶复方颗粒成品进行感官评价，感官评价如图2所示，调查结果显示，受试样品颗粒在溶解度上非常符合大众喜好，评分达到18.03分，已超过90%；在色泽方面较为接近受众群体需求，评分达到35.33分，相当接近90%；在滋味气味方面略低于前二者，分析原因可能是产品的香味受到调查人群的认可，但味道偏淡，分析原因可能是用于测试的颗粒用量较少味道淡，增至12g后滋味有所提升，12g为黑晶复方颗粒推荐日摄入量。因此，黑晶复方颗粒在推荐日摄入量下色泽、滋味气味与溶解度上满足消费者要求，被消费者接纳。

5.药理学验证

通过查阅相关古方及各味中药的药效作用，咨询收集临床专家验方，先后设计了以下七组复方，进行相关药理学验证：

复方1：枸杞150g、枳椇子180g、陈皮60g、香附60g；

复方2：黄芪150g、女贞子300g、陈皮60g、覆盆子90g；

复方3：黄精140g、黑枸杞200g、大枣120g、陈皮50g、甘草40g（实施例5）；

复方4：黄芪300g、酒苁蓉300g、大枣100g、甘草50g；

复方5：黄芪100g、酒苁蓉100g、大枣50g、甘草30g；

复方6：黄芪200g、女贞子60g、黄精60g；

复方7：人参100g、枸杞100g、大枣100g、陈皮100g。

（1）复方中各药味化学成分的药理学研究基础

根据现代药理学研究发现，多糖类物质、黄酮类物质、皂苷类物质以及微量元素等均具有不同程度上的增强免疫的功效。其中，以多糖类物质的研究最为深入。现已开发出香菇多糖、茯苓多糖、黄芪多糖等作为增强免疫的制剂。而上述几种化学物质，在枸杞、陈皮、香附、枳椇子、黄芪、黄精、女贞子、覆盆子、黑枸杞、大枣、甘草、酒苁蓉以及人参中均有报道。

首先，多糖为枸杞及黑枸杞的主要活性成分，有报道称枸杞多糖可以调节小鼠的免疫能力，而黑枸杞的干果中则多糖含量高达10.89%~16.74%左右，且具有增强免疫的功效。其次，黑枸杞除具有红枸杞的全部活性成分外，还有着更为丰富的营养物质，例如更多的微量元素、花青素等，使其具有更好的药物活性以及增强免疫的能力。而黄精中的粗多糖可以增强正常小鼠细胞、体液和单核-巨噬细胞的免疫功能，且能促进正常小鼠免疫器官：胸腺与脾脏的发育。而黄芪、大枣、甘草、女贞子也分别有研究表明其中富含多糖类成分且具有增强免疫的功效。

而黑枸杞、陈皮中丰富的微量元素；黄精、大枣中的总皂苷类物质；大枣中的三萜酸类；人参中人参皂苷等均有报道称具有提高免疫的功效。因此，上述7组复方，在现代药理学研究中，均发现含有增强免疫的活性物质，其药味本身在单独使用或者复配的情况下，有实验研究数据证明其可增强免疫能力。综上所述，使得7组复方具有潜在的增强免疫能力的功效。

（2）增强免疫药效学实验

①实验动物及饲养条件

根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中有关要求，选择正常BALB/c小鼠为本研究实验动物及模型。

BALB/c小鼠，雄性，18-22g，90只。由中国医学科学院药用植物研究所动物实验中心提供，许可证编号：SYXK（京）2013-0023。在中国医学科学院药用植物研究所动物房饲养，实验期间自然光照，自由饮食，温度23~26℃，湿度45%~65%。

②受试药物

a.复方1提取浓缩液

将每人每天应服用药物的重量，按比例折合成小鼠的灌胃量，计算一次应提取浓缩的药味总重量，将复方中各味药材按照复方比例进行折算、称重，采用实施例5所述的水提法，提取2次，水煎液用8层纱布过滤，合并水煎液，旋转蒸发浓缩至浓度为0.75 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

b.复方2提取浓缩液

按比例称取复方2各药味，具体提取方法实施例5，水煎液浓缩至浓度为1 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

c.复方3提取浓缩液

按比例称取复方3各药味，具体提取方法实施例5，水煎液浓缩至浓度为1.09 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

d.复方4提取浓缩液

按比例称取复方4各药味，具体提取方法实施例5，水煎液浓缩至浓度为1.25 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

e.复方5提取浓缩液

按比例称取复方5组各药味，具体提取方法实施例5，水煎液浓缩至浓度为0.47 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

f.复方6提取浓缩液

按比例称取复方6各药味，具体提取方法实施例5，水煎液浓缩至浓度为0.37 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

g.复方7提取浓缩液

按比例称取复方7各药味，具体提取方法实施例5，水煎液浓缩至浓度为0.667 g/mL，取浓缩液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取。

h.阳性对照药

根据香菇多糖胶囊使用说明书，将每人每天应服用药物的重量，按比例折合成小鼠的灌胃量，称量适量香菇多糖胶囊内容物，蒸馏水溶解，配置为30.83 mg/mL阳性药液，4℃保存，取阳性药液14mL，为7天使用量，冷藏于4℃冰箱，随用随取

③分组及给药方案

小鼠采购到货后，首先在中国医学科学院药用植物研究所实验动物中心动物房中适应性喂养3天，3天后，小鼠称重，将小鼠按照体重随机分组，每组10只，分别为空白对照组、阳性药物组和各配方处理组。其中空白对照组为不给药组，每天灌胃相同剂量（体积）的蒸馏水。所有组均每天灌胃1次，连续灌胃30天，各组均正常饮食饮水。第31天取相关脏器与血液，腹腔液，测定相关指标。具体给药方案如下表所示：

④免疫相关指标的选择与检测方法

免疫指标的选择：根据《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中对免疫调节功能产品检测指标的指导及建议，选取体重、脏器指数（脾脏指数、胸腺指数）、血清溶血素水平及小鼠单核-巨噬细胞吞噬能力为本实验的检测指标。同时对其进行相关免疫因子检测。通过查阅相关文献，选择白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（INF-γ）为本次实验测定的免疫因子。

免疫指标检测方法：小鼠连续给药30天后，称量小鼠重量，脱颈处死，取脾脏、胸腺，摘眼球取血，取腹腔液，测定相关指标。

a.体重

灌胃，禁食12h后，测小鼠体重

b.脏器指数

小鼠采取脱颈的方法处死，摘取脾脏及胸腺，用生理盐水洗去血液，滤纸吸干多余生理盐水后称重，计算脏器指数。

脏器指数=脏器重量（mg）/体重（g）

c.血清溶血素水平测定

选择用血清溶血素水平结果来反应小鼠的体液免疫功能的强弱。实验结果以小鼠血清HC50值表示。血清溶血素实验方法及数据处理如下：

灌胃第26天时，对小鼠进行致敏实验。其操作为：各组每只小鼠在腹腔注射2%的压积羊血红细胞，剂量为每只小鼠0.2mL。灌胃第30天后，禁食12小时，乙醚麻醉小鼠，对其进行摘眼球取血，取血时注意血应贴壁滑落，以防止出现溶血现象。血在4℃下静置24小时后，离心，分离血清。取一96孔培养板划分设置对照孔与样品孔。对照孔为空白对照，每孔中加入100μL已经稀释过的SA缓冲液；样品孔每孔中加入已用SA缓冲液稀释过的血清100μL（血清稀释方法为：取血清10μL，用1mL稀释后的SA缓冲液进行稀释）。装样完毕后，空白孔和样品孔再依次加入10%(v/v)的压积羊血红细胞50μL，补体100μL。覆膜后，将96孔培养板放置于恒温水浴中，37℃，30min，取出，置入离心机中，以每分钟1500转的转速离心10min。精密吸取各培养孔中的上清液50μL，放入另一新的96孔培养板中，其后每孔加入文齐试剂150μL。同时，在本块96孔培养板内设置半数溶血孔，半数溶血孔中加入10%(v/v) 压积羊血红细胞12.5μL后加入文齐试剂补至200μL。震荡，混匀，覆膜，放置10min后，用全自动酶标仪在540nm处测定各孔光密度值，计算HC50值。

血清中溶血素的含量用半数溶血值（HC50）表示，其计算公式如下。判定标准则是：若受试样品组的HC50值显著高于对照组的HC50值，则可判定该项实验的实验结果为阳性。

样品HC50=(样品光密度值-空白光密度值)/(SRBC半数溶血时的光密度值-空白光密度值)×稀释倍数

d.小鼠单核巨噬细胞吞噬能力的测定

灌胃第26天时，对小鼠进行致敏，采用以下操作：各组每只小鼠在腹腔注射0.2mL的 2%压积羊血红细胞。灌胃30天后，禁食12小时，乙醚麻醉小鼠，脱颈处死。将处死的小鼠保持头低臀高的姿态，腹腔注入4mL的含有小牛血清的Hank's液，轻揉小鼠腹部，以便腹腔巨噬细胞能够充分的被Hank's液洗出。实验时应注意腹腔注射Hank's液的位置，应有落空感，及按揉小鼠腹部时避免出血。按揉之后，小鼠放平，剪开小鼠的腹部，将胶头吸管插入小鼠腹腔中，吸取约2mL左右的腹腔洗液，将腹腔洗液置于试管内，备用。注意防止小鼠的毛发掉入腹腔洗液中。用移液枪吸取试管内腹腔洗液0.5mL，再加入0.5mL的1%鸡血红细胞悬液，混合均匀在一个试管内。用移液枪吸取0.5mL的混合液，缓慢滴于洁净的载玻片上，铺均。载玻片在37℃的孵箱内，孵育20min。孵育结束后，拿出载玻片迅速用生理盐水将未贴壁细胞冲洗掉。其后用甲醇溶液滴于载玻片上进行固定约lmin左右，之后将载玻片上用Giemsa液进行染色，大约15min。用蒸馏水轻轻冲洗载玻片，自然晾干。显微镜计数，计算吞噬率。吞噬率为每100个巨噬细胞中，吞噬鸡红细胞的巨噬细胞所占的百分率。

本实验以吞噬百分率表示小鼠巨噬细胞的吞噬能力，吞噬百分率需进行数据转换，转换公式为，公式中P为吞噬百分率，用小数表示。在进行方差分析时，若受试样品组的吞噬百分率与对照组相比较，其差异均有显著性，则可判定该项实验结果阳性。

e.白细胞介素-6（IL-6）

按照试剂盒中提供的相关使用说明，将血清等所用样品、试剂等按要求配置。将96孔板划分为标准曲线区、样品区及空白区。按照要求进行加样，在标准曲线区、样品区、空白区中依次加入标准液、样品，及稀释液。盖膜、压紧后、在恒温37℃，湿润的环境下孵化2h。取出，倒掉孔中多余液体，尽可能倒尽，用洗液洗涤4次，每次使用350μL的洗液。其后，尽可能除去孔中洗液。每孔均加入100μL的已稀释好的抗体检测溶液，盖膜，密封，在37℃的潮湿环境下孵化1h后，倒尽孔中液体，洗液洗涤4次（方法同上）。每孔再加入100μL的已稀释过的HRP，在37℃湿润环境下孵化40min，其后重复上述步骤进行洗板。洗板后，每孔加入100μL的TMB，避光37℃的条件下孵化20min后每孔加入100μL的停止液，37℃避光下孵化20min之后，在450nm与630nm下采用酶标仪读取吸光度（A）。并计算血清中白细胞介素-6的含量。

f.肿瘤坏死因子-α（TNF-α）

按照试剂盒中提供的相关使用说明，将血清等所用样品、试剂等按要求配置，稀释。将96孔板划分为标准曲线区、样品区。按照要求进行加样，在标准曲线区、样品区中依次加入标准液、样品溶液后再加入50μL的混合型抗体。盖膜，室温下孵化1h。取出后，弃去液体后，用洗液洗板3次，每次每孔350μL，最后一次洗板后，倒扣培养板，用纸吸取多余液体。每孔加入100μL的显色液，避光常温孵化20min。再加入100μL的终止液，振摇1min后，在450nm下进行检测,读取吸光度（A）。并计算血清中肿瘤坏死因子-α的含量。

g.干扰素-γ（INF-γ）

按要求配置相关试剂及样品。按照要求在96孔板依次加入标品、样品。盖好膜后在室温下孵化2.5h。弃去液体，用洗液洗涤4次，每孔每次使用300μL的洗液，其后，除尽孔中洗液。每孔均加入100μL的配置后的抗体溶液，盖膜，室温下培养1h后，弃去液体并洗涤，洗涤方式同上。其后，每孔加入100μL的HRP，在室温轻摇条件下培养45min，重复上述步骤进行洗板。洗板后，每孔加入100μL的TMB，避光、室温、轻摇条件下孵化30min后每孔加入100μL的停止液后立即在450nm下采用酶标仪读取吸光度（A）。并计算血清中干扰素-γ的含量。

⑤药理实验结果

药理实验结果表明，灌胃给药30天后，复方3组浓缩液可以使正常小鼠的体液免疫功能，单核-巨噬细胞功能及相关免疫因子出现不同程度的增强效果。相关具体表现如下：（1）对正常小鼠的体重、脾脏指数无明显影响，但可在一定程度上促进胸腺的发育，胸腺指数增长率在13.35%左右；（2）可以使小鼠的血清溶血素水平明显提高78.60%，使小鼠的单核-巨噬细胞的吞噬能力明显增强约49.55%左右，提高小鼠体液免疫与非特异性免疫能力；（3）可明显增强小鼠血清中的白细胞介素-6的含量，提升约216.94%左右；（4）可在一定程度上提高血清中肿瘤坏死因子-α与干扰素-γ的含量，分别约为31.16%和27.73%。根据保健食品相关要求，本实验以血清溶血素水平及单核-巨噬细胞吞噬能力为评判指标，最终确定，复方3组的复方对正常小鼠具有明显的免疫促进作用。

在其余各组方中，均有不同的表现：（1）复方1组、复方2组、复方5组、复方7组均显示出具有增强正常小鼠单核巨噬细胞吞噬能力的作用，但对血清中血清溶血素含量影响较小；（2）复方1组可显著显著提高小鼠血清中白细胞介素-6与肿瘤坏死因子-α的含量；（3）复方7组可以显著促进小鼠脾脏发育而复方5组可以显著促进胸腺的发育。但上述组方均没有复方3组效果明显，且达不到保健食品评价标准的要求。

需要说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制。尽管参照实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应该理解，对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，都不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (4)

1.一种增强免疫力的保健颗粒，其特征在于：由以下重量份数的原料药制成：黄精4—20份、黑枸杞10—24份、大枣6—20份、陈皮1—9份、甘草1—9份。

2.根据权利要求1所述的一种增强免疫力的保健颗粒，其特征在于：由以下重量份数的原料药制成：黄精10—18份、黑枸杞16—24份、大枣6—14份、陈皮3—7份、甘草1—6份。

3.根据权利要求1所述的一种增强免疫力的保健颗粒，其特征在于：由以下重量份数的原料药制成：黄精14—18份、黑枸杞20—24份、大枣10—14份、陈皮5—7份、甘草3—5份。

4.根据权利要求1—3中任一所述的一种增强免疫力的保健颗粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）提取：按照配方准确称取所述原料药组分，混合均匀后置于提取灌中，加入8—12倍水，在160—180℃持续加热至沸腾，在80—100℃下持续沸腾0.5小时后，采用纱布过滤得到水煎液，过滤完毕后将滤饼再次置于所述提取罐中，按照以上条件重复提取操作一次后，合并两次水煎液，即为提取液；

（2）浓缩：将所述提取液转入减压浓缩装置中，在60—80℃下减压浓缩7—9小时，得到相对密度为1.30—1.50的稠膏时，转入鼓风干燥箱中在40—60℃下持续干燥18—24小时至稠膏结块后，转入真空干燥器中在60—80℃下持续干燥60—72小时，粉碎成80—100目的干浸膏粉，制得黑晶复方浸膏粉；

（3）制粒：按照黑晶复方浸膏粉：糊精=1:1.4—1:1.8的比例，向所述黑晶复方浸膏粉中加入糊精，混合均匀后，加入体积分数为75%的乙醇，所述乙醇的添加量为所述黑晶复方浸膏粉的0.4—0.8倍，采用制粒机制粒，得到黑晶复方湿颗粒；

（4）干燥：将所述黑晶复方湿颗粒置于鼓风干燥箱中，在60—70℃下持续干燥18—36小时，即可得到黑晶复方颗粒。