CN108623675A - 鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺 - Google Patents
鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108623675A CN108623675A CN201710169066.7A CN201710169066A CN108623675A CN 108623675 A CN108623675 A CN 108623675A CN 201710169066 A CN201710169066 A CN 201710169066A CN 108623675 A CN108623675 A CN 108623675A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extraction
- spirulina
- solid
- ethyl alcohol
- phycocyanin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明公开了鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺,它涉及螺旋藻中活性物质的提取工艺技术领域。将新鲜螺旋藻称重,然后离心洗涤1‑3次,称重藻泥,加0.5‑4倍的藻泥重量的水,搅拌均匀,冻融两次,在零下20℃下冷冻过夜,在室温中溶解,第二次溶解后,再加入藻泥2‑8倍重量的水,放置2‑8h后,离心,得上清液a和固体b,固体b经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体c,其中上清液a用于藻蓝蛋白的提取;固体b的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取;固体c用于螺旋藻多糖的提取;此工艺较为简单,能充分有效的利用现有的螺旋藻资源,实现了对螺旋藻的综合利用和深度开发,对螺旋藻产业发展具有积极的意义。
Description
技术领域
本发明涉及鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺,属于螺旋藻中活性物质的提取工艺技术领域。
背景技术
螺旋藻是蓝藻门,蓝藻纲,断增藻目,颤藻科中的螺旋藻属低等水生植物。螺旋藻不仅具有很高的营养价值,而且含有大量的对人体有益的生理活性物质,在食品、医药和生物工程领域有广泛应用。螺旋藻中含有丰富的蛋白质、叶绿素、多糖、β-胡萝卜素以及γ-亚麻酸、脂肪等生物活性物质。螺旋藻的主要成分是蛋白质,占干重的60% -70%,且包含人体所需的8种氨基酸及多种生物活性物质,具有特殊的医疗保健作用。叶绿素的含量也很高,能达到1.5g/100g。
由于螺旋藻所含以上多种生物活性物质可作为新型的药食两用资源,现己成为当前微藻研究的焦点之一。现在对螺旋藻的利用基本上是以原藻干粉或其他剂型的形式进入市场,技术含量低,尤其是对其生物活性成分的开发利用不足。虽有部分螺旋藻活性物质提取的报道,在其在提取和加工的时候,往往只是单一的针对某一种活性物质,不能兼顾多种生物活性物质的利用,从而不能充分有效的利用现有的螺旋藻资源,造成资源的浪费。因此,进行螺旋藻的综合利用和深度开发,实现螺旋藻中多种活性成分的综合开发,对螺旋藻产业发展具有积极的意义。
针对上述现状,本发明提供了一种鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的综合提取工艺。
发明内容
针对上述问题,本发明要解决的技术问题是提供一种制备方法简单, 能够实现对螺旋藻中多种活性成分进行综合开发利用的提取工艺。
本发明的鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的综合提取工艺包括以下步骤:步骤一、综合提取前处理,将新鲜螺旋藻称重,然后离心洗涤1-3次,称重藻泥,加0.5-4倍的藻泥重量的水,搅拌均匀,冻融两次,在零下20℃下冷冻过夜,在室温中溶解,第二次溶解后,再加入藻泥2-8倍重量的水,放置2-8h后,离心,得上清液a和固体b,固体b经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体c,其中上清液a用于藻蓝蛋白的提取;固体b的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取;固体c用于螺旋藻多糖的提取;
步骤二、藻蓝蛋白的提取,在上清液a中,用4-6mol/L的盐酸调pH到4.0-4.5之间,搅拌半小时后进行离心,离心条件为在4000rpm下离心15min,将上清液经6k滤膜超滤一次,再加4倍体积蒸馏水超滤一次,调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末;步骤三、叶绿素锌钠盐的提取,将固体b经乙醇索式提取方式提取6-12h,乙醇索式提取方式具体步骤为在90%的乙醇中,加入过量硫酸锌,盐酸调pH2-3即可,接着用10%NaOH溶液调pH7-8,过滤除去不溶性杂质,将滤液继续调pH11-12,维持pH11-12,在 60℃下搅拌皂化1-2h,用石油醚萃取至醚层显淡黄色,浓缩皂化液至1/3体积,用盐酸调节pH值2-3,有沉淀析出,过滤,滤饼依次用水,石油醚洗涤各两次后,用丙酮溶解滤饼,再用10%的NaOH乙醇溶液调pH11-12,过滤,烘干,即得叶绿素锌钠盐;
步骤四、螺旋藻多糖的提取,在固体c中加入藻泥干重10倍量水,在0.5-5%中性蛋白酶,pH=7.0,35-45℃条件下搅拌提取2-5h,离心条件为在4000rpm下离心处理15min,将离心所得的上清液减压浓缩至1/6体积,加入2-5倍量95%乙醇,在4℃下放置4-12h,过滤后,滤饼用无水乙醇洗1-3次,烘干,即得螺旋藻多糖。
本发明的有益效果:此工艺较为简单,此工艺兼顾多种生物活性物质的利用,能充分有效的利用现有的螺旋藻资源,在鲜螺旋藻中提取到藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖多种物质,不会造成资源的浪费。并且实现了对螺旋藻的综合利用和深度开发,对螺旋藻产业发展具有积极的意义。
具体实施方式
本具体实施方式采用以下技术方案:所述鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的综合提取工艺包括以下步骤:步骤一、综合提取前处理,将新鲜螺旋藻称重,然后离心洗涤1-3次,称重藻泥,加0.5-4倍的藻泥重量的水,搅拌均匀,冻融两次,在零下20℃下冷冻过夜,在室温中溶解,第二次溶解后,再加入藻泥2-8倍重量的水,放置2-8h后,离心,得上清液a和固体b,固体b经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体c,其中上清液a用于藻蓝蛋白的提取;固体b的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取;固体c用于螺旋藻多糖的提取;
步骤二、藻蓝蛋白的提取,在上清液a中,用4-6mol/L的盐酸调pH到4.0-4.5之间,搅拌半小时后进行离心,离心条件为在4000rpm下离心15min,将上清液经6k滤膜超滤一次,再加4倍体积蒸馏水超滤一次,调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末;步骤三、叶绿素锌钠盐的提取,将固体b经乙醇索式提取方式提取6-12h,乙醇索式提取方式具体步骤为在90%的乙醇中,加入过量硫酸锌,盐酸调pH2-3即可,接着用10%NaOH溶液调pH7-8,过滤除去不溶性杂质,将滤液继续调pH11-12,维持pH11-12,在 60℃下搅拌皂化1-2h,用石油醚萃取至醚层显淡黄色,浓缩皂化液至1/3体积,用盐酸调节pH值2-3,有沉淀析出,过滤,滤饼依次用水,石油醚洗涤各两次后,用丙酮溶解滤饼,再用10%的NaOH乙醇溶液调pH11-12,过滤,烘干,即得叶绿素锌钠盐;
步骤四、螺旋藻多糖的提取,在固体c中加入藻泥干重10倍量水,在0.5-5%中性蛋白酶,pH=7.0,35-45℃条件下搅拌提取2-5h,离心条件为在4000rpm下离心处理15min,将离心所得的上清液减压浓缩至1/6体积,加入2-5倍量95%乙醇,在4℃下放置4-12h,过滤后,滤饼用无水乙醇洗1-3次,烘干,即得螺旋藻多糖。
实施例1:
将新鲜螺旋藻6kg,离心洗涤1次,称重藻泥2kg,加2L水,搅拌均匀,冻融两次,在零下20℃冷冻过夜,室温溶解,第二次溶解后,再加入6L水,放置3h,离心,得上清液a和固体b,将上清液a用6mol/L盐酸调pH到4.2-4.5之间,搅拌半小时后离心,离心条件为4000rpm下离心15min,上清液经6k滤膜超滤一次,再加4倍蒸馏水超滤一次,调pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末;
固体b经乙醇索氏提取方式提取8h,所述的乙醇索氏提取方式的具体步骤为在90%乙醇,加入过量硫酸锌,将盐酸调pH2-3即可,上清用10%NaOH溶液调pH7-8,过滤除去不溶性杂质,滤液继续调pH11-12,维持pH11-12在 60℃搅拌皂化1.5h,用石油醚萃取至醚层显淡黄色,浓缩皂化液至1/3体积,用盐酸调节pH值2-3,有沉淀析出,过滤,滤饼依次用水,石油醚洗涤各两次后,用丙酮溶解滤饼,再用10%NaOH乙醇溶液调pH11-12,过滤,烘干,即得叶绿素锌钠盐。
经乙醇索氏提取方式提取后的固体c加入藻泥(藻泥含水量一般在80%,)干重10倍量水,在2%中性蛋白酶,pH=7.0,40℃条件下搅拌提取3h,离心条件为在4000rpm离心15min,将上清液减压浓缩至1/6体积,加入3倍量95%乙醇,在4℃下静置6h,过滤后,滤饼用无水乙醇洗2次,烘干,即得螺旋藻多糖。
实施例2:
将新鲜螺旋藻10kg,离心洗涤1次,称重藻泥4kg,加4L水,搅拌均匀,冻融两次,在零下20℃冷冻过夜,室温溶解,第二次溶解后,再加入12L水,放置3h,离心,得上清液a和固体b,将上清液a,用5mol/L盐酸调pH到4.2-4.5之间,搅拌半小时后离心,离心条件为在4000rpm下离心15min,将上清液经6k滤膜超滤一次,再加4倍蒸馏水超滤一次,调pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末;
固体b经乙醇索氏提取方式提取10h,所述的乙醇索氏提取方式的具体步骤为在90%乙醇,加入过量硫酸锌,盐酸调pH2-3即可,将上清液用10%NaOH溶液调pH7-8,过滤除去不溶性杂质,滤液继续调pH11-12,维持pH11-12 60℃搅拌皂化1.5h,用石油醚萃取至醚层显淡黄色,浓缩皂化液至1/3体积,用盐酸调节pH值2-3,有沉淀析出,过滤,滤饼依次用水,石油醚洗涤各两次后,用丙酮溶解滤饼,再用10%NaOH乙醇溶液调pH11-12,过滤,烘干,即得叶绿素锌钠盐;
经乙醇索氏提取方式提取后的固体c加入藻泥(藻泥含水量一般在80%)干重10倍量水,在3%中性蛋白酶,pH=7.0,40℃条件下搅拌提取4h,离心条件为在4000rpm下离心15min,将上清液减压浓缩至1/6体积,加入3倍量95%乙醇,在4℃下静置8h,过滤后,滤饼用无水乙醇洗2次,烘干,即得螺旋藻多糖。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (1)
1.鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺,其特征在于:具体的工艺包括以下步骤:步骤一、综合提取前处理,将新鲜螺旋藻称重,然后离心洗涤1-3次,称重藻泥,加0.5-4倍的藻泥重量的水,搅拌均匀,冻融两次,在零下20℃下冷冻过夜,在室温中溶解,第二次溶解后,再加入藻泥2-8倍重量的水,放置2-8h后,离心,得上清液(a)和固体(b),固体(b)经乙醇索式提取方式提取后得到提取液和固体(c),其中上清液(a)用于藻蓝蛋白的提取;固体(b)的提取液用于叶绿素锌钠盐的提取;固体(c)用于螺旋藻多糖的提取;
步骤二、藻蓝蛋白的提取,在上清液(a)中,用4-6mol/L的盐酸调pH到4.0-4.5之间,搅拌半小时后进行离心,离心条件为在4000rpm下离心15min,将上清液经6k滤膜超滤一次,再加4倍体积蒸馏水超滤一次,调节pH7.0后冷冻干燥即得藻蓝蛋白粉末;步骤三、叶绿素锌钠盐的提取,将固体(b)经乙醇索式提取方式提取6-12h,乙醇索式提取方式具体步骤为在90%的乙醇中,加入过量硫酸锌,盐酸调pH2-3即可,接着用10%NaOH溶液调pH7-8,过滤除去不溶性杂质,将滤液继续调pH11-12,维持pH11-12,在 60℃下搅拌皂化1-2h,用石油醚萃取至醚层显淡黄色,浓缩皂化液至1/3体积,用盐酸调节pH值2-3,有沉淀析出,过滤,滤饼依次用水,石油醚洗涤各两次后,用丙酮溶解滤饼,再用10%的NaOH乙醇溶液调pH11-12,过滤,烘干,即得叶绿素锌钠盐;
步骤四、螺旋藻多糖的提取,在固体(c)中加入藻泥干重10倍量水,在0.5-5%中性蛋白酶,pH=7.0,35-45℃条件下搅拌提取2-5h,离心条件为在4000rpm下离心处理15min,将离心所得的上清液减压浓缩至1/6体积,加入2-5倍量95%乙醇,在4℃下放置4-12h,过滤后,滤饼用无水乙醇洗1-3次,烘干,即得螺旋藻多糖。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710169066.7A CN108623675A (zh) | 2017-03-21 | 2017-03-21 | 鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710169066.7A CN108623675A (zh) | 2017-03-21 | 2017-03-21 | 鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108623675A true CN108623675A (zh) | 2018-10-09 |
Family
ID=63686427
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710169066.7A Pending CN108623675A (zh) | 2017-03-21 | 2017-03-21 | 鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108623675A (zh) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108727510A (zh) * | 2018-06-06 | 2018-11-02 | 广西大学 | 螺旋藻多糖提取物及其制备方法和增强免疫功能的应用 |
CN109593128A (zh) * | 2018-12-30 | 2019-04-09 | 张德智 | 使用新鲜螺旋藻工业化联产藻蓝蛋白、螺旋藻多糖和蛋白饲料的方法 |
CN110156797A (zh) * | 2019-04-28 | 2019-08-23 | 北海生巴达生物科技有限公司 | 一种从螺旋藻中提取叶绿素的工艺 |
CN111690053A (zh) * | 2020-07-15 | 2020-09-22 | 中国科学院水生生物研究所 | 一种螺旋藻生物活性物质分级分离方法 |
CN112300271A (zh) * | 2020-11-13 | 2021-02-02 | 周巍 | 一种从螺旋藻中提取多种活性物质的方法及其应用 |
CN113122018A (zh) * | 2021-04-19 | 2021-07-16 | 广东普萃特医生物工程有限公司 | 一种藻蓝色素的超临界裂解工艺 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101348754A (zh) * | 2007-07-16 | 2009-01-21 | 青岛啤酒股份有限公司 | 一种螺旋藻提取液及其制备方法 |
CN101607988A (zh) * | 2009-07-03 | 2009-12-23 | 威海格瑞安生物工程有限公司 | 从螺旋藻中提取藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的工艺 |
CN104672325A (zh) * | 2015-03-11 | 2015-06-03 | 福建农林大学 | 一种用新鲜螺旋藻制备藻蓝蛋白的方法 |
WO2016181719A1 (ja) * | 2015-05-12 | 2016-11-17 | Dic株式会社 | カロテノイドの精製物を得る方法 |
-
2017
- 2017-03-21 CN CN201710169066.7A patent/CN108623675A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101348754A (zh) * | 2007-07-16 | 2009-01-21 | 青岛啤酒股份有限公司 | 一种螺旋藻提取液及其制备方法 |
CN101607988A (zh) * | 2009-07-03 | 2009-12-23 | 威海格瑞安生物工程有限公司 | 从螺旋藻中提取藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的工艺 |
CN104672325A (zh) * | 2015-03-11 | 2015-06-03 | 福建农林大学 | 一种用新鲜螺旋藻制备藻蓝蛋白的方法 |
WO2016181719A1 (ja) * | 2015-05-12 | 2016-11-17 | Dic株式会社 | カロテノイドの精製物を得る方法 |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108727510A (zh) * | 2018-06-06 | 2018-11-02 | 广西大学 | 螺旋藻多糖提取物及其制备方法和增强免疫功能的应用 |
CN109593128A (zh) * | 2018-12-30 | 2019-04-09 | 张德智 | 使用新鲜螺旋藻工业化联产藻蓝蛋白、螺旋藻多糖和蛋白饲料的方法 |
CN109593128B (zh) * | 2018-12-30 | 2020-04-03 | 张德智 | 使用新鲜螺旋藻工业化联产藻蓝蛋白、螺旋藻多糖和蛋白饲料的方法 |
CN110156797A (zh) * | 2019-04-28 | 2019-08-23 | 北海生巴达生物科技有限公司 | 一种从螺旋藻中提取叶绿素的工艺 |
CN111690053A (zh) * | 2020-07-15 | 2020-09-22 | 中国科学院水生生物研究所 | 一种螺旋藻生物活性物质分级分离方法 |
CN112300271A (zh) * | 2020-11-13 | 2021-02-02 | 周巍 | 一种从螺旋藻中提取多种活性物质的方法及其应用 |
CN113122018A (zh) * | 2021-04-19 | 2021-07-16 | 广东普萃特医生物工程有限公司 | 一种藻蓝色素的超临界裂解工艺 |
CN113122018B (zh) * | 2021-04-19 | 2023-11-14 | 普萃超临界(广东)高新技术有限公司 | 一种藻蓝色素的超临界裂解工艺 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN108623675A (zh) | 鲜螺旋藻中藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的提取工艺 | |
CN101607988A (zh) | 从螺旋藻中提取藻蓝蛋白、叶绿素和螺旋藻多糖的工艺 | |
CN103044560A (zh) | 一种白芨多糖的制备方法 | |
CN103214595B (zh) | 硫酸软骨素钠的制备方法 | |
CN107385001A (zh) | 从海参深加工副产物中提取海参低聚肽和海参多糖的工艺 | |
CN106244659A (zh) | 制备畜禽软骨胶原蛋白多肽的方法 | |
CN102453106A (zh) | 一种白芨多糖的制备方法 | |
CN110256598A (zh) | 一种不同生物活性香菇多糖的制备方法 | |
CN1985852A (zh) | 利用海参煮汁提取海参多糖等多种活性成分的方法 | |
CN106262764B (zh) | 天然澄清剂及其应用 | |
CN107177655A (zh) | 一种桑叶蛋白多肽及应用 | |
CN101965982A (zh) | 一种用蚕丝肽制作饮料的方法 | |
CN110882314B (zh) | 一种洗眼液及其制备方法 | |
CN112442136A (zh) | 一种银耳功能性成分的提取方法 | |
CN106721868A (zh) | 有机枸杞澄清汁的制备方法 | |
CN103445157B (zh) | 一种超滤酶在制备人参汁中的澄清方法 | |
CN102273633A (zh) | 一种牡蛎肽口服液的制造方法 | |
CN101972278A (zh) | 一种治疗高血压的蚕丝肽复方胶囊的制作方法 | |
CN110713551B (zh) | 一种多糖、硫酸化多糖和在美白淡斑化妆品中的应用 | |
CN104356252B (zh) | 从木耳菜中同时制备木耳菜植物胶、木耳菜叶绿素铜钠盐的工艺方法 | |
CN107177459A (zh) | 一种地龙蛋白多肽酒及其制备方法 | |
TWI564028B (zh) | 洋桔梗萃取物之應用 | |
CN108486201B (zh) | 一种白果生物活性多肽的提取方法 | |
CN105166917A (zh) | 柠檬酵素营养液及其制备方法 | |
CN101933944B (zh) | 骨肽注射液的制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20181009 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |