CN107177655A - 一种桑叶蛋白多肽及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种桑叶蛋白多肽，该桑叶蛋白多肽的制备方法包括：预处理步骤、蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤、灭酶活步骤和浓缩步骤。本发明还提供一种桑叶蛋白多肽在制备保健饮品上的应用。本发明的蛋白多肽利用桑叶为原料，通过蛋白改性、两次酶解、灭酶活和浓缩等步骤制备得到，不仅提取方便，而且适合人体食用。

Description

一种桑叶蛋白多肽及应用
技术领域
本发明涉及一种蛋白多肽，尤其涉及一种桑叶蛋白多肽及应用。
背景技术
桑树属桑科桑属，为落叶乔木，据研究，干桑叶中含粗蛋白25-45％，碳水化合物20-25％，粗脂肪5％，以及丰富的钾、钙和维生素C、B1、B2、A等，还有各种微量元素铜、锌、硼、锰等物质。桑叶中含有蜕皮固酮、羽扁豆酮以及靶香甙、桑甙等许多氨基酸、维生素、绦原酸、叶酸、延胡索酸、内消旋肌酸、植物雌激素等人体所必需的各种生理活性物质，具有抗应激、降血糖、降血脂、降血压、抗炎、抗衰老、增强肌体耐力、抗肿瘤和调节肾上腺素功能等效果，桑叶因含有许多生理活性成分，而具有营养保健功能，是国家卫生部公布的药食两用品。目前，国内桑叶的用途主要用于养殖蚕，但是由于纺织业工业化的发展，人造蚕丝的质量和手感越来越接近手工蚕丝，因此人工养蚕的数量也逐渐减少，这也造成了桑叶的大批量剩余，现有的学者逐渐开始进行桑叶活性肽的研究。
但是，现有的桑叶活性肽的存在以下缺陷：
(1)提取困难，目前桑叶活性肽的化学提取法反应快，产量大，但是提取出的肽类活性低，而物理提取法虽然肽类活性高，但是反应慢，产量小；
(2)专利CN201510908614.4公开了一种微波辅助与膜过滤制备桑叶蛋白多肽的方法，但该方法得到的桑活性肽不适于应用在饮品中。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种桑叶蛋白多肽，该蛋白多肽利用桑叶为原料，通过蛋白改性、两次酶解、灭酶活和浓缩等步骤制备得到，不仅提取方便，而且适合人体食用。
本发明的第二个目的是为了提供一种将桑叶蛋白多肽应用在保健饮品中，该保健饮品既含有桑叶蛋白的丰富营养，又具有多肽功能，有益于身体健康。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种桑叶蛋白多肽，其制备方法包括：
预处理步骤：取新鲜桑木叶经洗涤去除杂质，干燥后，粉碎至10-30目，得到桑叶粉；
蛋白改性步骤：常温下，向桑叶粉中依次加入纯净水和稳定剂后，调节pH为8-9，再加热至50-60℃，在此温度下保温0.8-1.5h，过滤得到桑叶粗滤液；
一次酶解步骤：待桑叶粗滤液降至常温，再调节pH为8-9后，向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶和果胶酶，充分搅拌，再次加热12-16min，温度控制在50-60℃，在加热过程中保持pH值大于7.5，得到一次酶解液；
二次酶解步骤：待一次酶解液降至常温，再次调整pH值至7.6-7.7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，充分搅拌，再次加热12-16min，温度控制在50-60℃，当pH值降至7.1-7.3，酶解完成，得到二次酶解液；
灭酶活步骤：将二次酶解液加温至85-95℃，保持8-12min，离心，得到蛋白肽液；
浓缩步骤：待蛋白肽液降至常温，过滤浓缩后，得到桑叶蛋白多肽。
进一步地，所述蛋白改性步骤中，稳定剂为亚硫酸氢钠。
进一步地，所述蛋白改性步骤中，桑叶粉、稳定剂和纯净水的固液比为1：(0.1-0.2)：(13-17)。
进一步地，所述一次酶解步骤中，桑叶粗滤液、碱性蛋白酶和果胶酶的体积比为1：(0.02-0.04)：(0.01-0.02)。
进一步地，所述二次酶解步骤中，一次酶解液与多肽复合酶的体积比为1：(0.01-0.03)。
进一步地，所述蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为微波加热，微波加热的频率为2500MHz，功率为20KW。
实现本发明的第二个目的可以通过采取如下技术方案达到：
上述的桑叶蛋白多肽在制备保健饮品上的应用。
进一步地，桑叶蛋白多肽在制备保健酒的应用，所述保健酒的制备方法包括：
勾兑步骤：向桑叶蛋白多肽中加入米酒勾兑，勾兑至酒精度为25-30度，浸泡150-200天，得到桑叶酒母液；
陈化步骤：对桑叶酒母液进行微波陈化处理后，微滤去沉渣，再超滤，得到桑叶蛋白肽原酒；
成品步骤：将桑叶蛋白肽原酒灌装、封口、杀菌，检验合格后，得到桑叶蛋白肽酒，上市。
进一步地，所述陈化步骤中，微波陈化的温度为35-45℃，时间为46-48min。
进一步地，所述陈化步骤中，微滤的滤网的孔径为800-1000目，超滤的滤网为一万分子量超滤膜。
本发明的有益效果在于：
1、本发明的桑叶蛋白多肽，该蛋白多肽利用桑叶为原料，通过蛋白改性、两次酶解、灭酶活和浓缩等步骤制备得到，不仅提取方便，而且适合人体食用；
2、本发明将桑叶蛋白多肽应用在保健饮品中，该保健饮品既含有桑叶蛋白丰富营养，又具有多肽功能，有益于身体健康。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
一种桑叶蛋白多肽，其制备方法包括：
预处理步骤：取新鲜桑木叶经洗涤去除杂质，干燥后，粉碎至10-30目，得到桑叶粉，桑叶粉为该目数是为了便于与米酒充分接触、发酵，如果目数过大，桑叶粉会漂浮在米酒表面，并且难以与米酒发酵反应；
蛋白改性步骤：常温下，向桑叶粉中依次加入纯净水和亚硫酸氢钠，桑叶粉、稳定剂和纯净水的固液比为1：(0.1-0.2)：(13-17)，调节pH为8-9，再加热至50-60℃，在此温度下保温0.8-1.5h，过滤得到桑叶粗滤液；该步骤中，向桑叶粉中加入纯净水而不是酸碱是为了保证人体健康，如果加入酸碱液损伤人体；
一次酶解步骤：待桑叶粗滤液降至常温，再调节pH为8-9后，向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶和果胶酶，加入果胶酶可以提高桑叶的出汁率，加入碱性蛋白酶和果胶酶则是因为大部分蛋白质保留在桑叶粗滤液的滤渣中，加入碱性蛋白酶和果胶酶可以加快过滤速度，又可有效水解桑叶蛋白质为氨基酸和多肽，提高桑叶汁的营养含量和人体吸收率，桑叶粗滤液、碱性蛋白酶和果胶酶的体积比为1：(0.02-0.04)：(0.01-0.02)，充分搅拌，再次加热12-16min，温度控制在50-60℃，在加热过程中保持pH值大于7.5，得到一次酶解液；
二次酶解步骤：待一次酶解液降至常温，再次调整pH值至7.6-7.7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，一次酶解液与多肽复合酶的体积比为1：(0.01-0.03)，充分搅拌，再次加热12-16min，温度控制在50-60℃，当pH值降至7.1-7.3，酶解完成，得到二次酶解液；
灭酶活步骤：将二次酶解液加温至85-95℃，保持8-12min，离心，得到蛋白肽液；
浓缩步骤：待蛋白肽液降至常温，过滤浓缩后，得到桑叶蛋白多肽。
作为进一步地实施方式，蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为微波加热，微波加热的频率为2500MHz，功率为20KW。
上述的桑叶蛋白多肽在制备保健饮品上的应用。
作为进一步地实施方式，桑叶蛋白多肽在制备保健酒的应用，保健酒的制备方法包括：
勾兑步骤：向桑叶蛋白多肽中加入米酒勾兑，勾兑至酒精度为25-30度，浸泡150-200天，得到桑叶酒母液；
陈化步骤：对桑叶酒母液进行微波陈化处理，微波陈化的温度为35-45℃，时间为46-48min，微滤去沉渣，微滤的滤网的孔径为800-1000目，再用一万分子量超滤膜超滤，得到桑叶蛋白肽原酒；
成品步骤：将桑叶蛋白肽原酒灌装、封口、杀菌，检验合格后，得到桑叶蛋白肽酒，上市。
实施例1：
一种桑叶蛋白多肽的制备方法包括：
预处理步骤：取新鲜桑木叶经洗涤去除杂质，干燥后，粉碎至20目，得到桑叶粉；
蛋白改性步骤：常温下，向桑叶粉中依次加入纯净水和亚硫酸氢钠，桑叶粉、稳定剂和纯净水的固液比为1：0.2：15，调节pH为8.5，再加热至55℃，在此温度下保温1h，过滤得到桑叶粗滤液；
一次酶解步骤：待桑叶粗滤液降至常温，再调节pH为8.5后，向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶和果胶酶，桑叶粗滤液、碱性蛋白酶和果胶酶的体积比为1：0.03：0.02，充分搅拌，再次加热15min，温度控制在55℃，在加热过程中保持pH值大于7.5，得到一次酶解液；
二次酶解步骤：待一次酶解液降至常温，再次调整pH值至7.6，向一次酶解液中加入多肽复合酶，一次酶解液与多肽复合酶的体积比为1：0.02，充分搅拌，再次加热15min，温度控制在55℃，当pH值降至7.2，酶解完成，得到二次酶解液；
灭酶活步骤：将二次酶解液加温至90℃，保持10min，离心，得到蛋白肽液；
浓缩步骤：待蛋白肽液降至常温，过滤浓缩后，得到桑叶蛋白多肽。
其中，蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为微波加热，微波加热的频率为2500MHz，功率为20KW。
实施例2：
一种桑叶蛋白多肽的制备方法包括：
预处理步骤：取新鲜桑木叶经洗涤去除杂质，干燥后，粉碎至10目，得到桑叶粉；
蛋白改性步骤：常温下，向桑叶粉中依次加入纯净水和亚硫酸氢钠，桑叶粉、稳定剂和纯净水的固液比为1：0.1：13，调节pH为8，再加热至50℃，在此温度下保温0.8h，过滤得到桑叶粗滤液；
一次酶解步骤：待桑叶粗滤液降至常温，再调节pH为8后，向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶和果胶酶，桑叶粗滤液、碱性蛋白酶和果胶酶的体积比为1：0.02：0.01，充分搅拌，再次加热12min，温度控制在50℃，在加热过程中保持pH值大于7.5，得到一次酶解液；
二次酶解步骤：待一次酶解液降至常温，再次调整pH值至7.6，向一次酶解液中加入多肽复合酶，一次酶解液与多肽复合酶的体积比为1：0.01，充分搅拌，再次加热12min，温度控制在50℃，当pH值降至7.1，酶解完成，得到二次酶解液；
灭酶活步骤：将二次酶解液加温至85℃，保持8min，离心，得到蛋白肽液；
浓缩步骤：待蛋白肽液降至常温，过滤浓缩后，得到桑叶蛋白多肽。
其中，蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为微波加热，微波加热的频率为2500MHz，功率为20KW。
实施例3：
一种桑叶蛋白多肽的制备方法包括：
预处理步骤：取新鲜桑木叶经洗涤去除杂质，干燥后，粉碎至30目，得到桑叶粉；
蛋白改性步骤：常温下，向桑叶粉中依次加入纯净水和亚硫酸氢钠，桑叶粉、稳定剂和纯净水的固液比为1：0.2：17，调节pH为9，再加热至60℃，在此温度下保温1.5h，过滤得到桑叶粗滤液；
一次酶解步骤：待桑叶粗滤液降至常温，再调节pH为9后，向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶和果胶酶，桑叶粗滤液、碱性蛋白酶和果胶酶的体积比为1：0.04：0.02，充分搅拌，再次加热16min，温度控制在60℃，在加热过程中保持pH值大于7.5，得到一次酶解液；
二次酶解步骤：待一次酶解液降至常温，再次调整pH值至7.7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，一次酶解液与多肽复合酶的体积比为1：0.03，充分搅拌，再次加热16min，温度控制在60℃，当pH值降至7.3，酶解完成，得到二次酶解液；
灭酶活步骤：将二次酶解液加温至95℃，保持12min，离心，得到蛋白肽液；
浓缩步骤：待蛋白肽液降至常温，过滤浓缩后，得到桑叶蛋白多肽。
其中，蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为微波加热，微波加热的频率为2500MHz，功率为20KW。
实施例4：
一种桑叶蛋白肽酒，其制备方法包括：
勾兑步骤：向实施例1得到的桑叶蛋白多肽中加入米酒勾兑，勾兑至酒精度为26度，浸泡180天，得到桑叶酒母液；
陈化步骤：对桑叶酒母液进行微波陈化处理，微波陈化的温度为40℃，时间为46min，微滤去沉渣，微滤的滤网的孔径为800目，再用一万分子量超滤膜超滤，得到桑叶蛋白肽原酒；
成品步骤：将桑叶蛋白肽原酒灌装、封口、杀菌，检验合格后，得到桑叶蛋白肽酒，上市。
实施例5：
一种桑叶蛋白肽酒，其制备方法包括：
勾兑步骤：向实施例2得到的桑叶蛋白多肽中加入米酒勾兑，勾兑至酒精度为25度，浸泡150天，得到桑叶酒母液；
陈化步骤：对桑叶酒母液进行微波陈化处理，微波陈化的温度为35℃，时间为47min，微滤去沉渣，微滤的滤网的孔径为800目，再用一万分子量超滤膜超滤，得到桑叶蛋白肽原酒；
成品步骤：将桑叶蛋白肽原酒灌装、封口、杀菌，检验合格后，得到桑叶蛋白肽酒，上市。
实施例6：
一种桑叶蛋白肽酒，其制备方法包括：
勾兑步骤：向实施例3得到的桑叶蛋白多肽中加入米酒勾兑，勾兑至酒精度为30度，浸泡200天，得到桑叶酒母液；
陈化步骤：对桑叶酒母液进行微波陈化处理，微波陈化的温度为45℃，时间为48min，微滤去沉渣，微滤的滤网的孔径为1000目，再用一万分子量超滤膜超滤，得到桑叶蛋白肽原酒；
成品步骤：将桑叶蛋白肽原酒灌装、封口、杀菌，检验合格后，得到桑叶蛋白肽酒，上市。
对比例1：
对比例1与实施例1不同之处在于，预处理步骤中，粉碎至100目，得到桑叶粉。
对比例2：
对比例2与实施例1不同之处在于，蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为水浴加热。
对比例3：
对比例3与实施例1不同之处在于，一次酶解步骤中，只向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶，桑叶粗滤液和碱性蛋白酶的体积比为1：0.04。
对比例4：
对比例1与实施例1不同之处在于，桑叶蛋白肽酒制备方法的陈化步骤未采用微波陈化处理。
对比例5：
对比例5为市面上酒精度为30度的白酒。
性能检测与效果评定
实验1
检验实施例1-3和对比例1-3的桑叶蛋白肽的提取率，结果如下表所示。
表1实施例1-3和对比例1-3的提取率
由上表可见，本发明的实施例1-3的桑叶蛋白提取率以及活性肽得率均高于对比例1-3，说明预处理步骤中粉碎目数小、微波加热以及碱性蛋白酶和果胶酶协同作用均能提高桑叶蛋白的提取率以及活性肽得率，而且实施例1为最优实施例。
实验2
根据Q/JCWOOIS对实施例4-6、对比例4的桑叶蛋白肽酒以及对比例5的白酒进行检验，检验结果如下：
表2实施例4-6和对比例4-5的感官结果
表3实施例4-6和对比例4-5的指标结果
a酒精度标签标示值与实测值不得超过±1.0％vol
b总糖标签标示值与实测值不得超过±10.0％
c甲醇、氰化物指标按100％vol酒精度折算
由表2-3可见，实施例4-6的感官效果优于对比例4-5的感官效果，并且总糖、肽含量、总酸、总酯均高于对比例4-5，说明实施例4-6的微波陈化处理步骤能够增加前述物质的浸出率，而且实施例4为最优实施例。
综上所述，本发明的桑叶蛋白多肽，该蛋白多肽利用桑叶为原料，通过蛋白改性、两次酶解、灭酶活和浓缩等步骤制备得到，该制备方法提取率高，桑叶蛋白多肽应用的保健饮品既含有桑叶蛋白丰富营养，又具有多肽功能，有益于身体健康。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种桑叶蛋白多肽，其特征在于，其制备方法包括：
预处理步骤：取新鲜桑木叶经洗涤去除杂质，干燥后，粉碎至10-30目，得到桑叶粉；
蛋白改性步骤：常温下，向桑叶粉中依次加入纯净水和稳定剂后，调节pH为8-9，再加热至50-60℃，在此温度下保温0.8-1.5h，过滤得到桑叶粗滤液；
一次酶解步骤：待桑叶粗滤液降至常温，再调节pH为8-9后，向桑叶粗滤液中加入碱性蛋白酶和果胶酶，充分搅拌，再次加热12-16min，温度控制在50-60℃，在加热过程中保持pH值大于7.5，得到一次酶解液；
二次酶解步骤：待一次酶解液降至常温，再次调整pH值至7.6-7.7，向一次酶解液中加入多肽复合酶，充分搅拌，再次加热12-16min，温度控制在50-60℃，当pH值降至7.1-7.3，酶解完成，得到二次酶解液；
灭酶活步骤：将二次酶解液加温至85-95℃，保持8-12min，离心，得到蛋白肽液；
浓缩步骤：待蛋白肽液降至常温，过滤浓缩后，得到桑叶蛋白多肽。
2.如权利要求1所述的桑叶蛋白多肽，其特征在于，所述蛋白改性步骤中，稳定剂为亚硫酸氢钠。
3.如权利要求1所述的桑叶蛋白多肽，其特征在于，所述蛋白改性步骤中，桑叶粉、稳定剂和纯净水的固液比为1：(0.1-0.2)：(13-17)。
4.如权利要求1所述的桑叶蛋白多肽，其特征在于，所述一次酶解步骤中，桑叶粗滤液、碱性蛋白酶和果胶酶的体积比为1：(0.02-0.04)：(0.01-0.02)。
5.如权利要求1所述的桑叶蛋白多肽，其特征在于，所述二次酶解步骤中，一次酶解液与多肽复合酶的体积比为1：(0.01-0.03)。
6.如权利要求1所述的桑叶蛋白多肽，其特征在于，所述蛋白改性步骤、一次酶解步骤、二次酶解步骤和灭酶活步骤中，加温均为微波加热，微波加热的频率为2500MHz，功率为20KW。
7.如权利要求1-6任一项所述的桑叶蛋白多肽在制备保健饮品上的应用。
8.如权利要求7所述的桑叶蛋白多肽的应用，其特征在于，桑叶蛋白多肽在制备保健酒的应用，所述保健酒的制备方法包括：
勾兑步骤：向桑叶蛋白多肽中加入米酒勾兑，勾兑至酒精度为25-30度，浸泡150-200天，得到桑叶酒母液；
陈化步骤：对桑叶酒母液进行微波陈化处理后，微滤去沉渣，再超滤，得到桑叶蛋白肽原酒；
成品步骤：将桑叶蛋白肽原酒灌装、封口、杀菌，检验合格后，得到桑叶蛋白肽酒，上市。
9.如权利要求8所述的桑叶蛋白多肽的应用，其特征在于，所述陈化步骤中，微波陈化的温度为35-45℃，时间为46-48min。
10.如权利要求8所述的桑叶蛋白多肽的应用，其特征在于，所述陈化步骤中，微滤的滤网的孔径为800-1000目，超滤的滤网为一万分子量超滤膜。
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