CN108508118A - 一种附子理中丸的质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种采用高效液相色谱法测定附子理中丸特定时间点甘草苷和甘草酸的溶出量并以此为基础绘制溶出曲线评价产品质量一致性的附子理中丸质量控制方法。本发明公开方法填补了附子理中丸在溶出度质量控制项目方面的空缺，加强了附子理中丸的生产质量控制，为临床用药提供了依据。

Description

一种附子理中丸的质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种附子理中丸的质量控制方法。

背景技术

附子理中丸收载于《中华人民共和国药典》2015版一部，由附子(制)、党参、炒白术、干姜和甘草组成，具有温中健脾的功效，用于脾胃虚寒，脘腹冷痛，呕吐泄泻,手足不温。

药品质量是保障药品有效性、安全性和稳定性的关键。药典附子理中丸项下质量控制方法中，采用显微鉴别法和薄层色谱法对部分药味进行定性鉴别，检查项下规定了乌头碱限量，含量测定项下规定了佐使药甘草中的甘草苷最低限量标准。为更好地控制附子理中丸质量，有文献报道采用液相色谱、液相色谱-质谱、气相色谱-质谱等方法，对附子理中丸进行定性鉴别、指纹图谱分析、多成分含量和总生物碱含量测定。但是，未见有对附子理中丸的溶出度进行质量控制的报道。

需建立附子理中丸溶出度质量控制项目，以更好地控制其生产质量，保证其各批次间生产质量的均一性和稳定性。

发明内容

为建立附子理中丸的溶出度质量控制项目，本发明提供了一种附子理中丸的溶出量质量控制方法。

本发明附子理中丸溶出度检测方法，它包括如下步骤：

(1)溶出：取待检附子理中丸，置于溶出介质中，放置时间t后，取溶出液作为供试品溶液；

(2)测定溶出量：采用高效液相色谱法测定供试品溶液中甘草苷和甘草酸含量，即为附子理中丸的甘草苷和甘草酸的溶出量；

所述色谱条件：色谱柱为C18柱；流动相为0.05％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱程序如下表；检测波长：甘草苷、甘草酸为235nm

步骤(1)中，所述溶出介质为水、0.25％十二烷基硫酸钠溶液、0.5％盐酸水溶或pH6.8的磷酸盐缓冲液；所述待检附子理中丸置于溶出介质中后，进行旋桨，旋桨的转速为80-12转/分钟。

步骤(1)中，所述t在0.25-96小时之间。

步骤(2)中，所述色谱柱为Agilent HC-C18。

步骤(2)中，所述流速为1mL/min。

步骤(2)中，进样量为15μL。

步骤(2)中，柱温为25℃。

步骤(2)中，还测定对照品的含量；所述对照品的制备方法为：分别精密称取甘草苷、甘草酸对照品，分别加甲醇溶解并稀释至刻度，分别配制成甘草苷、甘草酸的对照品溶液。

本发明还提供了一种附子理中丸的质量控制方法，所述方法包括以下步骤：

1)测定附子理中丸的溶出量：按照前述任意一项方法，测定附子理中丸的甘草苷和甘草酸的溶出量；

2)计算理论溶出量：将权利要求1～5任意一项所述方法中的放置时间t带入如下模型：甘草苷溶出模型：甘草酸溶出模型：计算理论溶出量Q；

3)若步骤1)测定的溶出量与步骤2)计算的理论溶出量接近，则待检附子理中丸的溶出度优良，反之则不佳。

本发明还提供了一种附子理中丸的稳定性控制方法，所述方法包括以下步骤：

a、测定附子理中丸的溶出量：按照前述任意一项方法，测定不同批次的附子理中丸在不同时间点t1、t2…tn的甘草苷和甘草酸的溶出量；

b、建立溶出模型：以时间点t1、t2…tn为横坐标，以检测的甘草苷或甘草酸的溶出量为纵坐标，分别建立不同批次的甘草苷、甘草酸的溶出曲线；

c、计算各批次甘草苷、甘草酸的溶出曲线的相似因子f₂，若相似因子f₂≧50，则各批次的溶出性质一致性优良，反之则不佳。

本发明附子理中丸等的溶出度检测方法，填补了附子理中丸在溶出度质量控制项目方面的空缺，加强了附子理中丸生产质量的均一性和稳定性，为临床用药提供了保障。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

附图说明

图1为附子理中丸高效液相色谱图。其中，A为对照品高效液相色谱图；B为供试品高效液相色谱图；C为阴性对照高效液相色谱图；峰1为甘草苷色谱峰；峰2为甘草酸色谱峰。

具体实施方式

实施例1附子理中丸溶出度质量控制方法

(1)溶出操作：接通溶出仪电源，分别量取新配制并超声后的0.25％十二烷基硫酸钠900ml置各溶出杯内，待溶出介质(溶出介质为水、0.25％十二烷基硫酸钠溶液、0.5％盐酸水溶或pH6.8的磷酸盐缓冲液)温度恒定在37±0.5℃后，设置转速为100转/分钟，取附子理中丸6丸，分别投人6个溶出杯内，盖紧杯盖，立即启动旋桨并计时；在第0.5、1、1.5、2、4、12、24、48h时取溶出液体2mL(补加溶出介质2ml)，迅速用0.22μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。

(2)溶出量测定：

色谱条件：色谱柱为Agilent HC-C18(250mm×4.6mm，5.0μm)；流动相为0.05％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱程序如下表；流速为1mL/min；检测波长：甘草苷、甘草酸为235nm；进样量为15μL；柱温为25℃。

对照品溶液的配制：分别精密称取甘草苷、甘草酸对照品适量，置于棕色容量瓶中，分别加甲醇溶解并稀释至刻度，配制成甘草苷、甘草酸浓度分别为304.5mg·L^-1、616.0mg·L^-1的对照品溶液。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μL，注入高效液相色谱仪，测定，取6丸溶出量的平均值，计算各时间点甘草苷和甘草酸累计溶出量即为相应时间点附子理中丸甘草苷和甘草酸溶出量。

(3)溶出度性质：

计算理论溶出量：将放置时间t带入如下模型：甘草苷溶出模型：甘草酸溶出模型：计算理论溶出量Q；

若步骤前述测定的溶出量与计算的理论溶出量接近，则待检附子理中丸的溶出度优良，反之则不佳。

(4)一致性评价：

绘制各批次附子理中丸甘草苷和甘草酸溶出曲线，各批次间甘草苷溶出曲线应满足相似因子f₂≧50，则各批次的溶出性质一致性优良，反之则不佳。

以下用实验例的方式来说明本发明的有益效果：

实验例1用本发明方法评价市售附子理中丸质量

(1)仪器与试药：

ZRS-8G智能溶出度仪(天津天大天发科技有限公司)、METTLERTOLEDOPH检测计、ARSS4CN1/10型分析天平(奥豪斯仪器有限公司)、ARSS4CN1/1分析天平(奥豪斯仪器有限公司)、DL-720D超声机(上海之信仪器有限公司)、Agilent-1260高效液相色谱系统(美国安捷伦公司)、色谱柱Agilent HC-C18(250×4.6mm，5.0μm)；

甘草酸对照品(成都普思生物科技公司1050-0025)、甘草苷对照品(成都普思生物科技公司161213-04)、市售附子理中丸(浓缩丸)批号：厂家1：1605081、1602053、1605052，厂家2：1605211、1605201、1609231，厂家3：81151215、81140804、81151012厂家4：160102、160202、160302，厂家5：160104、2:150703、160204。色谱纯乙腈，其他试剂均为分析纯。

(2)溶出操作：接通溶出仪电源，分别量取新配制并超声后的0.25％十二烷基硫酸钠900ml置各溶出杯内，待溶出介质0.25％十二烷基硫酸钠温度恒定在37±0.5℃后，设置转速为100转/分钟，取附子理中丸样品6丸，分别投人6个溶出杯内，盖紧杯盖，立即启动旋桨并计时；在第0.5、1、1.5、2、4、12、24、48h时取溶出液体2mL(补加溶出介质2ml)，迅速用0.22μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。

(3)溶出量测定：

色谱条件：色谱柱为Agilent HC-C18(250mm×4.6mm，5.0μm)；流动相为0.05％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱程序如下表；流速为1mL/min；检测波长：甘草苷、甘草酸为235nm；进样量为15μL；柱温为25℃。

对照品溶液的配制：分别精密称取甘草苷、甘草酸对照品适量，置于棕色容量瓶中，分别加甲醇溶解并稀释至刻度，配置成甘草苷、甘草酸浓度分别为304.5mg·L-1、616.0mg·L-1的对照品溶液。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与各特定时间点供试品溶液各15μL，注入高效液相色谱仪，测定，计算各时间点甘草苷和甘草酸累计溶出量，取6丸溶出量的平均值，即为相应时间点附子理中丸甘草苷和甘草酸溶出量。

按照上述方法，分别测定5个厂家，每个厂家3个批次的附子理中丸样品甘草苷和甘草酸的溶出量，结果见表1。

表1五厂家各3批次附子理中丸甘草苷、甘草酸各时间点累积溶出量

(4)溶出性质检测

使用厂家5的不同时间点的溶出度，根据公式计算理论溶出量：将放置时间t带入如下模型：甘草苷溶出模型：甘草酸溶出模型：计算理论溶出量Q；

根据计算，厂家1的溶出度符合模型，其溶出性质优良。

实验结果说明，本发明方法可以用于溶出性质的检测。

(5)一致性评价：

按如下公式计算各厂家各批次溶出曲线间的f₂值：

R_t为t时间参比样品平均溶出量；(曲线一)

T_t为t时间受试样品平均溶出量；(曲线二)

n为取样时间点的个数。

各厂家各批次间附子理中丸甘草苷和甘草酸溶出曲线f₂值见表2。

表2同一厂家不同批次间指标成分f₂值比较

由表2可以看出，厂家2、厂家3、厂家4与厂家5三种批次间甘草苷和甘草酸成分溶出行为均相似，说明这些厂家生产的附子理中丸稳定性和均一性较好。厂家1中部分批次存在甘草苷、甘草酸成分溶出行为不相似的情况，提示厂家1不同批次样品的质量可能存在一定差异性。

实验结果说明，本发明方法可以用于有效评价附子理中丸不同批次的溶出度的一致性。

本发明附子理中丸的溶出度检测方法，填补了附子理中丸在溶出度质量控制项目方面的空缺，加强了附子理中丸生产质量的均一性和稳定性，为临床用药提供了保障。

Claims (10)

1.一种附子理中丸溶出度检测方法，其特征在于：它包括如下步骤：

(1)溶出：取待检附子理中丸，置于溶出介质中，放置时间t后，取溶出液作为供试品溶液；

(2)测定溶出量：采用高效液相色谱法测定供试品溶液中甘草苷和甘草酸含量，即为附子理中丸的甘草苷和甘草酸的溶出量；

所述色谱条件：色谱柱为C18柱；流动相为0.05％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)，梯度洗脱程序如下表；检测波长：甘草苷、甘草酸为235nm

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述溶出介质为水、0.25％十二烷基硫酸钠溶液、0.5％盐酸水溶或pH6.8的磷酸盐缓冲液；所述待检附子理中丸置于溶出介质中后，进行旋桨，旋桨的转速为80-12转/分钟。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述t在0.25-96小时之间。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述色谱柱为AgilentHC-C18。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述流速为1mL/min。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，进样量为15μL。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，柱温为25℃。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，还测定对照品的含量；所述对照品的制备方法为：分别精密称取甘草苷、甘草酸对照品，分别加甲醇溶解并稀释至刻度，分别配制成甘草苷、甘草酸的对照品溶液。

9.一种附子理中丸的质量控制方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1)测定附子理中丸的溶出量：按照权利要求1～8任意一项所述方法，测定附子理中丸的甘草苷和甘草酸的溶出量；

2)计算理论溶出量：将权利要求1～5任意一项所述方法中的放置时间t带入如下模型：甘草苷溶出模型：甘草酸溶出模型：计算理论溶出量Q；

3)若步骤1)测定的溶出量与步骤2)计算的理论溶出量接近，则待检附子理中丸的溶出度优良，反之则不佳。

10.一种附子理中丸的稳定性控制方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

a、测定附子理中丸的溶出量：按照权利要求1～8任意一项所述方法，测定不同批次的附子理中丸在不同时间点t1、t2…tn的甘草苷和甘草酸的溶出量；

b、建立溶出模型：以时间点t1、t2…tn为横坐标，以检测的甘草苷或甘草酸的溶出量为纵坐标，分别建立不同批次的甘草苷、甘草酸的溶出曲线；

c、计算各批次甘草苷、甘草酸的溶出曲线的相似因子f₂，若相似因子f₂≧50，则各批次的溶出性质一致性优良，反之则不佳。