CN109828066B - 液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，该方法为制备混标溶液和供试中药溶液，用液相色谱和质谱联用技术进样测定，通过将精确分子量、保留时间与混标溶液中的化学成分对照，实现中药提取液中相应化学成分的定性及含量测定，还提供了上述方法的应用，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8‑姜酚和10‑姜酚中的一种或一种以上的含量。本发明能够实现中药中含有上述10种化学成分中一种或以上成分的同时检测定量，测定方法快速、高效、灵敏度高且测定方法简单易行，为中药的质量控制提供方法学依据。
Description
技术领域
本发明属于中药中化学成分测定技术领域，具体涉及一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法及应用。
背景技术
中药及其复方的化学成分复杂，药材来源不一，主要成分含量差异较大，易导致成药质量不稳定，影响药效，按照传统的分析方法，检测的成分单一或者较少，需要较长的检测周期，较多的人力和物力，检测成本高，不能满足目前不同中药复方的需要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法及应用，该方法能够将中药中含有苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的同时检测出来并定量，测定快速、高效、灵敏度高且测定方法简单易行，一次进样可以同时测定10种化学成分中的一种或者一种以上，为中药的质量控制提供依据。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，该方法包括以下步骤：
S1、混标溶液的制备：
分别称取苯甲酰乌头原碱标准品、苯甲酰新乌头原碱标准品、白术内酯I标准品、白术内酯II标准品、白术内酯III标准品、党参炔苷标准品、甘草苷标准品、甘草素标准品、8-姜酚标准品和10-姜酚标准品，分别加无水乙醇溶解定容，分别得到10个标准品溶液，分别为苯甲酰乌头原碱标准品溶液、苯甲酰新乌头原碱标准品溶液、白术内酯标准品溶液、白术内酯II标准品溶液、白术内酯III标准品溶液、党参炔苷标准品溶液、甘草苷标准品溶液、甘草素标准品溶液、8-姜酚标准品溶液和10-姜酚标准品溶液，分别吸取等体积的各标准品溶液混合均匀后，得到混标溶液；
S2、供试中药溶液的制备：
将中药加入蒸馏水浸泡后，回流提取2次，将两次的提取液合并后，置于温度为70℃的旋转蒸发仪蒸干后，加入无水乙醇超声溶解，定容后，得到供试中药溶液；
S3、测定：
将S1得到的混标溶液和S2得到的供试中药溶液按照以下设定的液相色谱串联质谱条件下进样：
S301、液相色谱条件：
采用反向高效液相色谱进行分离，仪器型号为Dionex UltiMate 3000UHPLC，粒径为1.9μm的50×2.1mm的Hypersil Gold C18色谱柱，柱温为30℃；流动相为乙腈+水；梯度洗脱条件为：洗脱时间为0min～6mi n时，乙腈占流动相的体积比为25％～80％，洗脱时间为6min～7min时，乙腈占流动相的体积比为80％～95％，洗脱时间为7min～7.5min时，乙腈占流动相的体积比为95％～100％，洗脱时间为7.5min～8.5min时，乙腈占流动相的体积比为100％；流速为0.3mL/min；
S302、质谱条件：
以质谱作为检测器，仪器型号为Q-Exactive-Obitriap MS，离子源为电喷雾离子源；电喷雾的电压为+4.0kV和-3.5kV；扫描模式为正离子扫描和负离子扫描，正离子扫描的扫描范围为200Da～700Da，负离子扫描的扫描范围为200Da～500Da；分辨率为17500，毛细管温度为300℃；鞘气流速为35L/h；S-lens电压为50V；
S4、判断：
设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内。
本发明还提供了上述的液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法上述的应用，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的含量。
优选地，S2中所述浸泡的时间为30min～40min。
优选地，S2中所述回流提取中第一次回流提取时间为30min，第二次回流提取时间为20min。
优选地，S2中所述超声溶解的时间为5min～10min。
优选地，S2中所述中药和蒸馏水的质量和体积比为1g:(8～20)mL。
优选地，S4中所述液相色谱条件下，判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分的方法为：供试中药溶液中出现的色谱保留时间与质谱精确分子量质量色谱峰保留时间与混标溶液一致，允许偏差小于±2.5％。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
本发明能够将中药中含有苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的同时检测出来并定量，测定快速、高效、灵敏度高且测定方法简单易行，一次进样可以同时测定10种化学成分中的一种或者一种以上，为中药的质量控制提供依据。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。
附图说明
图1是本发明的实施例1的空白溶剂正离子模式基峰色谱图。
图2是本发明的实施例1的空白溶剂正离子模式质谱图。
图3是本发明的实施例1的空白溶剂负离子模式基峰色谱图。
图4是本发明的实施例1的空白溶剂负离子模式质谱图。
图5是本发明的实施例1的混标溶液正离子模式基峰色谱图。
图6是本发明的实施例1的混标溶液正离子模式质谱图。
图7是本发明的实施例1的混标溶液负离子模式基峰色谱图。
图8是本发明的实施例1的混标溶液负离子模式质谱图。
图9是本发明实施例1的供试中药溶液正离子模式基峰色谱图。
图10是本发明的实施例1的供试中药溶液正离子模式质谱图。
图11是本发明的实施例1的供试中药溶液负离子模式基峰色谱图。
图12是本发明的实施例1的供试中药溶液负离子模式质谱图。
具体实施方式
实施例1
本实施例的液相色谱串联质谱测定中药中化学成分方法，该方法包括以下步骤：
S1、混标溶液的制备：
分别称取苯甲酰乌头原碱标准品1.6mg、苯甲酰新乌头原碱标准品1.6mg、白术内酯I标准品1.09mg、白术内酯II标准品1.2mg、白术内酯III标准品1.1mg、党参炔苷标准品1.3mg、甘草苷标准品1.6mg、甘草素标准品1.2mg、8-姜酚标准品2.0mg和10-姜酚标准品2.2mg，分别加无水乙醇溶解定容到5mL的容量瓶中，分别得到10个标准品溶液，分别为苯甲酰乌头原碱标准品溶液、苯甲酰新乌头原碱标准品溶液、白术内酯标准品溶液、白术内酯II标准品溶液、白术内酯III标准品溶液、党参炔苷标准品溶液、甘草苷标准品溶液、甘草素标准品溶液、8-姜酚标准品溶液和10-姜酚标准品溶液，分别吸取等体积的各标准品溶液混合均匀后，得到混标溶液；
S2、供试中药溶液的制备：
称取5g复方中药置于圆底烧瓶中，加入50mL蒸馏水浸泡30min后，回流提取2次，第一次回流提取时间为30min，第二次回流提取时间为20min，将两次的提取液合并后，置于温度为70℃的旋转蒸发仪蒸干后，加入无水乙醇超声溶解5min，定容到10mL的容量瓶中后，得到供试中药溶液；所述复方中药中含制附子1g、党参1g、干姜1g、白术1g、和甘草1g；
S3、测定：
将S1得到的混标溶液和S2得到的供试中药溶液按照以下设定的液相色谱串联质谱条件下进样：
S301、液相色谱条件：
采用反向高效液相色谱进行分离，仪器型号为Dionex UltiMate 3000UHPLC，粒径为1.9μm的50×2.1mm的Hypersil Gold C18色谱柱，柱温为30℃；流动相为乙腈+水；梯度洗脱条件为：洗脱时间为0min～6mi n时，乙腈占流动相的体积比为25％～80％，洗脱时间为6min～7min时，乙腈占流动相的体积比为80％～95％，洗脱时间为7min～7.5min时，乙腈占流动相的体积比为95％～100％，洗脱时间为7.5min～8.5min时，乙腈占流动相的体积比为100％；流速为0.3mL/min；
S302、质谱条件：
以质谱作为检测器，仪器型号为Q-Exactive-Obitriap MS，离子源为电喷雾离子源；电喷雾的电压为+4.0kV和-3.5kV；扫描模式为正离子扫描和负离子扫描，正离子扫描的扫描范围为200Da～700Da，负离子扫描的扫描范围为200Da～500Da；分辨率为17500，毛细管温度为300℃；鞘气流速为35L/h；S-lens电压为50V；
S4、判断：
设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内；所述液相色谱条件下，判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分的方法为：供试中药溶液中出现的色谱保留时间与质谱精确分子量与混标溶液一致，允许偏差小于±2.5％。
本实施例还提供了上述的液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法上述的应用，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的含量。
表1 10种化学成分的线性关系
| 序号 | 化学成分名称 | 线性方程 | R<sup>2</sup> | 线性范围(μg/mL) |
| 1 | 苯甲酰乌头原碱 | Y＝1.30096×10<sup>6</sup>+2.96711×10<sup>7</sup>X | 0.9997 | 0.0534～13.35 |
| 2 | 苯甲酰新乌头原碱 | Y＝3.23048×10<sup>6</sup>+4.15598×10<sup>7</sup>X | 0.9990 | 0.0534～13.35 |
| 3 | 白术内酯I | Y＝0.661164×10<sup>6</sup>+4.50195×10<sup>6</sup>X | 0.9991 | 0.15～7.5 |
| 4 | 白术内酯II | Y＝1.2047×10<sup>6</sup>+1.04983×10<sup>7</sup>X | 0.9990 | 0.04～10 |
| 5 | 白术内酯III | Y＝0.262776×10<sup>6</sup>+3.44136×10<sup>6</sup>X | 0.9997 | 0.0366～9.15 |
| 6 | 党参炔苷 | Y＝-0.832617×10<sup>6</sup>+1.57023×10<sup>6</sup>X | 0.9967 | 0.0434～4.34 |
| 7 | 甘草苷 | Y＝0.249671×10<sup>6</sup>+4.84318×10<sup>7</sup>X | 0.9988 | 0.0534～2.67 |
| 8 | 甘草素 | Y＝1.75844×10<sup>7</sup>+8.96752×10<sup>7</sup>X | 0.9968 | 0.04～10 |
| 9 | 8-姜酚 | Y＝0.122472×10<sup>6</sup>+0.86701×10<sup>6</sup>X | 0.9966 | 0.066～16.5 |
| 10 | 10-姜酚 | Y＝-0.759044×10<sup>6</sup>+0.466293×10<sup>6</sup>X | 0.9999 | 0.0734～18.35 |
由表1可知，本实施例的检测方法线性关系良好(相关系数R2均大于0.995，线性关系见表1)；并且精密度、重现性、24h稳定性良好，RSD均小于0.3％、添加回收率大于99％，测得复方中药中含有的10种化学成分的含量分别为：苯甲酰乌头原碱2.248μg/g、苯甲酰新乌头原碱16.464μg/g、白术内酯I 0.632μg/g、白术内酯II 4.158μg/g、白术内酯III 3.788μg/g、党参炔苷51.802μg/g、甘草苷15.664μg/g、甘草素5.918μg/g、8-姜酚2.282μg/g和10-姜酚1.600μg/g。
图1～12为本实施例的空白溶剂、混标溶液和供试中药溶液的正、负离子模式质谱图和质谱图，由图可知，由图可知，本实施例的中药中含有混标溶液中对应的共10种化学成分，用本实施例液液相色谱串联质谱测定中药中化学成分的方法可行性强，设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内。
实施例2
本实施例的液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，该方法包括以下步骤：
S1、混标溶液的制备：
分别称取苯甲酰乌头原碱标准品1.6mg、苯甲酰新乌头原碱标准品1.6mg、白术内酯I标准品1.09mg、白术内酯II标准品1.2mg、白术内酯III标准品1.1mg、党参炔苷标准品1.3mg、甘草苷标准品1.6mg、甘草素标准品1.2mg、8-姜酚标准品2.0mg和10-姜酚标准品2.2mg，分别加无水乙醇溶解定容到5mL的容量瓶中，分别得到10个标准品溶液，分别为苯甲酰乌头原碱标准品溶液、苯甲酰新乌头原碱标准品溶液、白术内酯标准品溶液、白术内酯II标准品溶液、白术内酯III标准品溶液、党参炔苷标准品溶液、甘草苷标准品溶液、甘草素标准品溶液、8-姜酚标准品溶液和10-姜酚标准品溶液，分别吸取等体积的各标准品溶液混合均匀后，得到混标溶液；
S2、供试中药溶液的制备：
称取5黑顺片置于圆底烧瓶中，加入100mL蒸馏水浸泡40min后，回流提取2次，第一次回流提取时间为30min，第二次回流提取时间为20min，将两次的提取液合并后，置于温度为70℃的旋转蒸发仪蒸干后，加入无水乙醇超声溶解5min，定容到10mL的容量瓶中后，得到供试中药溶液；
S3、测定：
将S1得到的混标溶液和S2得到的供试中药溶液按照以下设定的液相色谱串联质谱条件下进样：
S301、液相色谱条件：
采用反向高效液相色谱进行分离，仪器型号为Dionex UltiMate 3000UHPLC，粒径为1.9μm的50×2.1mm的Hypersil Gold C18色谱柱，柱温为30℃；流动相为乙腈+水；梯度洗脱条件为：洗脱时间为0min～6mi n时，乙腈占流动相的体积比为25％～80％，洗脱时间为6min～7min时，乙腈占流动相的体积比为80％～95％，洗脱时间为7min～7.5min时，乙腈占流动相的体积比为95％～100％，洗脱时间为7.5min～8.5min时，乙腈占流动相的体积比为100％；流速为0.3mL/min；
S302、质谱条件：
以质谱作为检测器，仪器型号为Q-Exactive-Obitriap MS，离子源为电喷雾离子源；电喷雾的电压为+4.0kV和-3.5kV；扫描模式为正离子扫描和负离子扫描，正离子扫描的扫描范围为200Da～700Da，负离子扫描的扫描范围为200Da～500Da；分辨率为17500，毛细管温度为300℃；鞘气流速为35L/h；S-lens电压为50V；
S4、判断：
设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内；所述液相色谱条件下，判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分的方法为：供试中药溶液中出现的色谱保留时间与质谱精确分子量与混标溶液一致，允许偏差小于±2.5％。
本实施例还提供了上述的液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法的应用，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的含量。
本实施例测得含有上述化学成分的两种，分别为苯甲酰乌头原碱和苯甲酰新乌头原碱，测得含量分别为：苯甲酰乌头原碱10.24μg/g、苯甲酰新乌头原碱78.32μg/g。
实施例3
本实施例的液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，该方法包括以下步骤：
S1、混标溶液的制备：
分别称取苯甲酰乌头原碱标准品1.6mg、苯甲酰新乌头原碱标准品1.6mg、白术内酯I标准品1.09mg、白术内酯II标准品1.2mg、白术内酯III标准品1.1mg、党参炔苷标准品1.3mg、甘草苷标准品1.6mg、甘草素标准品1.2mg、8-姜酚标准品2.0mg和10-姜酚标准品2.2mg，分别加无水乙醇溶解定容到5mL的容量瓶中，分别得到10个标准品溶液，分别为苯甲酰乌头原碱标准品溶液、苯甲酰新乌头原碱标准品溶液、白术内酯标准品溶液、白术内酯II标准品溶液、白术内酯III标准品溶液、党参炔苷标准品溶液、甘草苷标准品溶液、甘草素标准品溶液、8-姜酚标准品溶液和10-姜酚标准品溶液，分别吸取等体积的各标准品溶液混合均匀后，得到混标溶液；
S2、供试中药溶液的制备：
称取5g白术置于圆底烧瓶中，加入40mL蒸馏水浸泡30min后，回流提取2次，第一次回流提取时间为30min，第二次回流提取时间为20min，将两次的提取液合并后，置于温度为70℃的旋转蒸发仪蒸干后，加入无水乙醇超声溶解7.5min，定容到10mL的容量瓶中后，得到供试中药溶液；
S3、测定：
将S1得到的混标溶液和S2得到的供试中药溶液按照以下设定的液相色谱串联质谱条件下进样：
S301、液相色谱条件：
采用反向高效液相色谱进行分离，仪器型号为Dionex UltiMate 3000UHPLC，粒径为1.9μm的50×2.1mm的Hypersil Gold C18色谱柱，柱温为30℃；流动相为乙腈+水；梯度洗脱条件为：洗脱时间为0min～6mi n时，乙腈占流动相的体积比为25％～80％，洗脱时间为6min～7min时，乙腈占流动相的体积比为80％～95％，洗脱时间为7min～7.5min时，乙腈占流动相的体积比为95％～100％，洗脱时间为7.5min～8.5min时，乙腈占流动相的体积比为100％；流速为0.3mL/min；
S302、质谱条件：
以质谱作为检测器，仪器型号为Q-Exactive-Obitriap MS，离子源为电喷雾离子源；电喷雾的电压为+4.0kV和-3.5kV；扫描模式为正离子扫描和负离子扫描，正离子扫描的扫描范围为200Da～700Da，负离子扫描的扫描范围为200Da～500Da；分辨率为17500，毛细管温度为300℃；鞘气流速为35L/h；S-lens电压为50V；
S4、判断：
设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内；所述液相色谱条件下，判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分的方法为：供试中药溶液中出现的色谱保留时间与质谱精确分子量与混标溶液一致，允许偏差小于±2.5％。
本实施例还提供了上述的液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法上述的应用，能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚中的一种或一种以上的含量。
本实施例测得含有上述化学成分的三种，分别为术内酯I、白术内酯II和白术内酯III，测得含量分别为：白术内酯I 3.148μg/g、白术内酯II19.79μg/g、白术内酯III 19.94μg/g。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制。凡是根据发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变化，均仍属于本发明技术方案的保护范围内。
Claims (5)
1.一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
S1、混标溶液的制备：
分别称取苯甲酰乌头原碱标准品、苯甲酰新乌头原碱标准品、白术内酯I标准品、白术内酯II标准品、白术内酯III标准品、党参炔苷标准品、甘草苷标准品、甘草素标准品、8-姜酚标准品和10-姜酚标准品，分别加无水乙醇溶解定容，分别得到10个标准品溶液，分别为苯甲酰乌头原碱标准品溶液、苯甲酰新乌头原碱标准品溶液、白术内酯标准品溶液、白术内酯II标准品溶液、白术内酯III标准品溶液、党参炔苷标准品溶液、甘草苷标准品溶液、甘草素标准品溶液、8-姜酚标准品溶液和10-姜酚标准品溶液，分别吸取等体积的各标准品溶液混合均匀后，得到混标溶液；
S2、供试中药溶液的制备：
将中药加入蒸馏水浸泡后，回流提取2次，将两次的提取液合并后，置于温度为70℃的旋转蒸发仪蒸干后，加入无水乙醇超声溶解，定容后，得到供试中药溶液；所述中药中含制附子1g、党参1g、干姜1g、白术1g、和甘草1g；
S3、测定：
将S1得到的混标溶液和S2得到的供试中药溶液按照以下设定的液相色谱串联质谱条件下进样：
S301、液相色谱条件：
采用反相 高效液相色谱进行分离，仪器型号为DionexUltiMate3000UHPLC，粒径为1.9μm的50×2.1mm的HypersilGoldC18色谱柱，柱温为30℃；流动相为乙腈+水；梯度洗脱条件为：洗脱时间为0min～6mi n时，乙腈占流动相的体积比为25％～80％，洗脱时间为6min～7min时，乙腈占流动相的体积比为80％～95％，洗脱时间为7min～7.5min时，乙腈占流动相的体积比为95％～100％，洗脱时间为7.5min～8.5min时，乙腈占流动相的体积比为100％；流速为0.3mL/min；
S302、质谱条件：
以质谱作为检测器，仪器型号为Q-Exactive-ObitriapMS，离子源为电喷雾离子源；电喷雾的电压为+4.0kV和-3.5kV；扫描模式为正离子扫描和负离子扫描，正离子扫描的扫描范围为200Da～700Da，负离子扫描的扫描范围为200Da～500Da；分辨率为17500，毛细管温度为300℃；鞘气流速为35L/h；S-lens电压为50V；
S4、判断：
设置空白溶剂作为对照，在S301所述液相色谱与S302所述质谱条件下，据色谱保留时间与质谱精确分子量判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分；将S1得到的混标溶液稀释成5个质量浓度梯度，每个化学成分的各质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制10个化学成分的标准工作曲线，用标准工作曲线对S2得到的供试中药溶液进行定量，供试中药溶液中化学成分的响应值在仪器检测的线性范围内；S4中所述液相色谱条件下，判断供试中药溶液中是否存在相应的化学成分的方法为：供试中药溶液中出现的色谱保留时间与质谱精确分子量质量色谱峰保留时间与混标溶液一致，允许偏差小于±2.5％；
苯甲酰乌头原碱的线性方程为Y＝1.30096×106+2.96711×107X，R2 ＝0.9997，线性范围为0.0534～13.35μg/mL；
苯甲酰新乌头原碱的线性方程为Y＝3.23048×106+4.15598×107X，R2 ＝0.9990，线性范围为0.0534～13.35μg/mL；
白术内酯I的线性方程为Y＝0.661164×106+4.50195×106X，R2 ＝0.9991，线性范围为0.15～7.5μg/mL；
白术内酯II的线性方程为Y＝1.2047×106+1.04983×107X，R2 ＝0.9990，线性范围为0.04～10μg/mL；
白术内酯III的线性方程为Y＝0.262776×106+3.44136×106X，R2 ＝0.9997，线性范围为0.0366～9.15μg/mL；
党参炔苷的线性方程为Y＝-0.832617×106+1.57023×106X，R2 ＝0.9967，线性范围为0.0434～4.34μg/mL；
甘草苷的线性方程为Y＝0.249671×106+4.84318×107X，R2 ＝0.9988，线性范围为0.0534～2.67μg/mL；
甘草素的线性方程为Y＝1.75844×107+8.96752×107X，R2 ＝0.9968，线性范围为0.04～10μg/mL；
8-姜酚的线性方程为Y＝0.122472×106+0.86701×106X，R2 ＝0.9966，线性范围为0.066～16.5μg/mL；
10-姜酚的线性方程为Y＝-0.759044×106+0.466293×106X，R2 ＝0.9999，线性范围为0.0734～18.35μg/mL；
能测定中药中含有的化学成分为苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III、党参炔苷、甘草苷、甘草素、8-姜酚和10-姜酚的含量。
2.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述浸泡的时间为30min～40min。
3.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述回流提取中第一次回流提取时间为30min，第二次回流提取时间为20min。
4.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述超声溶解的时间为5min～10min。
5.根据权利要求1所述的一种液相色谱质谱联用法测定中药中化学成分的方法，其特征在于，S2中所述中药和蒸馏水的质量和体积比为1g:(8～20)mL。
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