CN108324926A - 干细胞提取物和抗菌肽的组合物及其用途 - Google Patents

干细胞提取物和抗菌肽的组合物及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明涉及干细胞提取物和抗菌肽的组合物及其用途。本发明提供一种组合物，其包含干细胞提取物和抗菌肽，其中所述抗菌肽包括防御素。本发明还提供所述的组合物用于制备治疗多种组织损伤的药物组合物的用途。本发明将干细胞提取物与抗菌肽组合，使得各种活性成分得到了有效保存和缓慢释放，更利于损伤部位细胞存活和修复。

Description

干细胞提取物和抗菌肽的组合物及其用途
技术领域
本发明属于生物、医药技术领域。具体而言，本发明涉及干细胞提取 物和抗菌肽的组合物和用途。
背景技术
组织损伤是指由于各种有害因素，导致组织原来结构破坏和生理功能 异常的状态，组织损伤后修复过程非常缓慢，尤其在上皮组织、结缔组织、 肌肉组织中，很难恢复到原来结构完整和机械力学正常的状态。
干细胞提取物包括多种大量的活性信号蛋白分子，如成纤维细胞生长 因子(FGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、干细胞生长因子(SCF)、表皮细胞 生长因子(EGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、内皮细胞生长因子(VEGF)、 细胞集落刺激因子(GM-CSF)、纤溶酶原激活物抑制剂-1、胶原蛋白、透 明质酸等。
宿主防御肽也被称为抗菌肽(AMPs)，带正电荷，其级结构以β折叠 链为主，有3对二硫键。抗菌肽的保护作用已存在于动植物中数百万年， 抗菌肽满足制药工业的许多要求，例如：(1)具有广泛的抗细菌活性；(2) 与传统的抗生素不同，其诱导的抗性很小；不会产生抗体；(3)可以与常 规抗生素协同作用；(4)部分抗菌肽具有直接中和内毒素的作用。在治疗 局部感染中有十分广泛的应用前景。抗菌肽包括防御素。防御素多数包括 29～42个氨基酸残基，含3对分子内二硫键，相对分子质量为2～6ku。 根据其二硫键位置的不同可分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素3类。
发明内容
在一些实施方案中，本发明所述干细胞提取物的来源包括但不限于华 通胶组织干细胞、脂肪干细胞、骨膜干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞、 乳腺组织干细胞、子宫内膜干细胞、嗅觉干细胞、神经干细胞、上皮干细 胞、心脏干细胞和牙齿干细胞的提取物。
干细胞提取物可以增加加速伤口闭合和增强再上皮化，提高微血管密 度和创伤微循环的水平进而增加血管生成，调节炎症和调节细胞结构重 塑。防御素能有效杀灭革兰阴性细菌和革兰阳性细菌，还具有抗病毒作用， 细胞毒作用和免疫调节作用。已经发现干细胞提取物和和抗菌肽具有协同 作用，能够有效促进伤口愈合。
因此，在一些实施方案中，本发明提供一种组合物，其包含干细胞提 取物和抗菌肽，其中所述抗菌肽包括防御素。在一些实施方案中，所述抗 菌肽包括α-防御素，β-防御素，和θ-防御素。在一些实施方案中，所述抗 菌肽包括β-防御素如人β防御素，例如HBD-1、HBD-2、HBD-3、HBD-4 中的一种或多种。在一些实施方案中，干细胞提取物为传代华通胶组织干 细胞提取物。
在一些实施方案中，本发明的组合物还包含保湿剂、透皮吸收促进剂、 电解质溶液中的一种或多种。
在一些实施方案中，本发明的组合物可以是药物组合物，优选制成不 同剂型，例如液体剂型，气体剂型，固体剂型，半固体剂型，例如溶液剂、 乳剂、混悬剂，例如外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、 贴剂，例如栓剂、滴剂。
在一些实施方案中，本发明的组合物可以制备为凝胶，包括水性凝胶 和油性凝胶，所述凝胶剂可以包括天然、半合成及合成高分子材料其中优 选所述水性凝胶包括海藻酸盐、明胶、果胶、纤维素及其衍生物、淀粉及 其衍生物、西黄耆胶，优选油性凝胶包括聚氧乙烯、胶体硅、铝皂、锌皂、 脂肪油、液体石蜡。在一些实施方案中，本发明的组合物可以制备为海藻 酸钠/壳聚糖缓释给药系统。
在一些实施方案中，本发明所述组合物治疗是指改善由致病因素导致 的多种组织疾病状态，或延迟、终止或逆转各类组织病症的发展，或者延 迟或预防各类组织病症的发生，包括对各类组织的营养支持、修复、重建 (例如乳房再造)、成块、美容治疗、治疗性治疗、组织增大(例如膀胱增大) 和组织密封(如离体器官保存)。其中所述组合物治疗范围包括但不限于 软骨组织、半月板组织、韧带组织、腱组织、椎间盘组织、牙周组织、皮 肤组织、黏膜组织、血管组织、肌肉组织、筋膜组织、骨膜组织、眼组织、 心包组织、肺组织、滑膜组织、神经组织、肾组织、骨髓、泌尿和生殖系 统组织、肠组织、肝组织、胰腺组织、脾组织或脂肪组织损伤的药物组合 物。
在一些实施方案中，本发明的组合物包括用于治疗实例包括但不限于 皮肤创面或创伤(例如瘢痕、外伤创面、缺血创面、糖尿病创面、严重灼伤、 火器伤、激光伤、辐射伤、湿疹、皮肤溃疡(例如褥疮(压力)溃疡、静脉溃 疡和糖尿病溃疡)；黏膜糜烂(如口腔黏膜糜烂、鼻粘膜糜烂、宫颈糜烂)， 疝、骨损伤、腱或韧带的撕裂或破裂、以及手术切口，例如与皮肤癌切除 相关的手术切口；美容性病症(例如重建手术和组织成块)；血管病症(例如 血管疾病，例如外周动脉疾病、腹主动脉瘤、颈动脉疾病和静脉疾病；血 管损伤；不合适的血管发育)；肌肉疾病(例如先天性肌病；重症肌无力； 炎症、神经和肌源性肌肉疾病；和肌肉营养失调，例如迪谢内肌营养不良、 贝克肌营养不良、肌强直性营养不良、肢带型肌营养不良、面肩肱型肌营 养不良、先天肌营养不良、眼咽肌营养不良、末梢肌营养不良和 Emery-Dreifuss肌营养不良)治疗的药物组合物。在一些实施方案中，药物 组合物可以用于治疗感染组织损伤。
本发明的组合物中包含干细胞提取物，所述提取物没有特别的限制， 可以通过已知的方法进行提取。在一些实施方案中，可以通过物理方法或 化学方法提取，例如可以采用酶溶、渗透压冲击和/或化学试剂法进行提取， 也可以通过例如反复冻融法、超声破碎法、匀浆研磨法、高压匀浆法以及 珠式研磨法提取。
在一些实施方案中，本发明提供制备干细胞提取物的方法，所述方法 包括传代培养干细胞，例如P2-P10代或更多代细胞建库，将传代培养的 干细胞通过加氩低氧进行细胞培养，然后获得干细胞提取物。在一些实施 方案中，加氩低氧细胞培养混合气体中的氧气含量低于空气中氧气含量， 例如可以采用例如1-20％氧气，例如1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、 8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、 20％或其之间的任意浓度的氧气(O2)和氩气进行培养，例如可以采用 2-15％、3％-10％、4-8％、5％的氧气和氩气进行培养。在一些实施方案中， 加氩低氧细胞培养混合气体可以加入二氧化碳(CO2)，例如可以采用例如 1-20％氧气，例如1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、 11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％或其之间的 任意浓度的氧气(O2)，1-20％(例如1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、 8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、 20％或其之间的任意浓度)的二氧化碳(CO2)、和60-98％的氩气进行培 养。在一些实施方案中，加氩低氧进行细胞培养的细胞可以通过电解质溶 液同时进行处理。在一些实施方案中，电解质溶液进行处理的细胞通过例 如反复冻融法、超声破碎法、匀浆研磨法、高压匀浆法以及珠式研磨法等 物理方法进行提取。在一些实施方案中，提取物中可以加入1-15％体积的 白蛋白，例如人白蛋白。在一些实施方案中，本发明的方法的整个过程不 使用动物蛋白血清。在一些实施方案中，通过本发明的方法获得的干细胞 提取物包含可溶性细胞组分。
在一些实施方案中，本发明的组合物包括人源抗菌肽，例如人β防御 素HBD-1、人β防御素HBD-2、人β防御素HBD-3、人β防御素HBD-4 中的一种或组合，以上抗菌肽序列已公开。在一些实施方案中，所述抗菌 肽可以通过合成获得。例如通过全自动高通量多肽合成仪合成。
在一些实施方案中，提供一种含人干细胞提取物和抗菌肽的缓释生物 凝胶剂。在一些实施方案中，所述制剂含有人干细胞提取物1-20％(例如 1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、 14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％或其之间的任意浓度)，人源抗 菌肽0.5-5％(例如0.5％、1％、2％、3％、4％、5％或其之间的任意浓度)和水凝胶75-98％。在一些实施方案中，所述制剂含有人干细胞提取物 1-20％(例如1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、 12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％或其之间的任意 浓度)，人源抗菌肽0.5-5％(例如0.5％、1％、2％、3％、4％、5％或其之 间的任意浓度)，保湿剂0.5-1.5％，透皮吸收促进剂0.25％-1％，和余量水凝胶。在一些实施方案中，所述水凝胶为海藻酸钠-壳聚糖交联微胶囊水凝 胶。在一些实施方案中，所述凝胶制剂氢离子浓度指数值为6.0-8.0。在一 些实施方案中，每10ml缓释凝胶溶液中，包括以下成分：稳定剂0.1-1g， 保湿剂0.5-1ml，透皮吸收促进剂0.25-1ml和电解质溶液如勃脉力A余量。
在一些实施方案中，本发明的组合物包含凝胶稳定剂如海藻酸钠-壳聚 糖交联微胶囊。海藻酸钠/壳聚糖缓释微胶囊作为一个优良的缓释给药系 统，符合制药工业的要求，具有良好的生物相容度和机械强度，原料易得、 价格便制备工艺简单且可工业化生产，海藻酸钠/壳聚糖微胶囊的在药物缓 释、控释制剂领域具有广泛的应用前景。在一些实施方案中，本发明的组 合物可以制成水凝胶。水凝胶具有含水分多，提供湿性愈合环境，促进黑色结痂自溶，水凝胶自身无粘性，易在换药时冲洗清除，水凝胶可填充腔 隙对于空腔伤口填充有益，水凝胶柔和，减少疼痛刺激，可用于保护外露 骨骼、筋膜、肌腱等组织，内含抗菌肽对感染伤口亦有抗菌作用。
在一些实施方案中，本发明的组合物包含保湿剂如甘油、丙二醇、山 梨醇、三甲基甘氨酸。在一些实施方案中，本发明的组合物包含电解质溶 液如勃脉力A。在一些实施方案中，本发明的组合物包含透皮吸收促进剂 如冰片。
在一些实施方案中，本发明的组合物如含人干细胞提取物和抗菌肽的 缓释生物凝胶剂，可制成不同剂型，如填充剂型、覆盖剂型等。在一些实 施方案中，本发明的组合物可以用于多种组织创伤治疗。
本发明提供一种促进伤口愈合的组合物，例如含人华通胶组织来源干 细胞提取物和抗菌肽的缓释生物凝胶剂。利用华通胶组织来源干细胞的多 种大量的活性信号蛋白分子和抗菌肽为治疗皮肤损伤等疾病提供了安全、 有效、使用方便的治疗制剂。本发明解决三个层面需要：①满足伤口生物 学需要：吸收渗液、湿润环境、维持合适的渗透压、保护创面新生肉芽组 织，防止感染；②满足医务人员需要：减少换药工作量、操作简便易清洁、有利于伤口愈合、易于观察、容易储存、安全性好；③满足病人需要：加 速伤口愈合、换药无痛、减少换药次数、无明显异物感、无异味易接受。
在一些实施方案中，本发明的组合物如含人干细胞提取物和抗菌肽的 缓释生物凝胶剂所含成分和体积百分数如下：
人干细胞提取物母液占总体积的3％
海藻酸钠-壳聚糖交联微胶囊水凝胶占总体积的95％
人源抗菌肽母液 0.5％
保湿剂 1％
透皮吸收促进剂 0.5％
所述该凝胶制剂氢离子浓度指数值为 6.0-8.0；
其中，每10ml缓释凝胶溶液中，包括以下成分：
稳定剂 0.1-1g
保湿剂 0.5-1ml
透皮吸收促进剂 0.25-1ml
勃脉力A余量。
在一些实施方案中，干细胞可以按照传统方法传代、培养P2-P4代细 胞建库，优选的，使用第P5代细胞。在一些实施方案中，第P5代细胞处 理方式为：换用加氩低氧细胞培养气体，优选的，使用加氩低氧细胞培养 混合气体比例为：5％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、90％氩气(Ar)。 在一些实施方案中，第P5代细胞使用勃脉力A处理12-24小时后，收集 培养干细胞和上清液，经过低温高压超声破碎，离心过滤后所得所有产物， 提取物包含细胞破碎可溶性细胞组分。
在一些实施方案中，含人干细胞提取物和抗菌肽的缓释生物凝胶剂的 制备方法，包括以下步骤：
(1)干细胞提取物制备：选取P2-15例如P5代干细胞细胞进行复苏。 可以采用常用培养基例如含10％人血白蛋StemPrOTM MSC SFM无血清培 养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，货号：A1033201)，接种于T160 细胞培养瓶中，放置于5％CO2、37℃细胞培养箱中，每天观察细胞生长 密度，适时更换细胞培养液。待细胞生长融合度程度达到70％-80％。细胞经批次质检合格后，以0.9％的氯化钠洗涤细胞2次，优选的，换用加氩 低氧细胞培养气体(5％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、90％氩气(Ar)) 与勃脉力A注射液进行饥饿培养12-24小时，当细胞融合度达到90％以上 后，收集细胞及上清液，使用低温超高压连续流细胞破碎机，完全破碎细 胞，设置离心机5000g离心10min，取上清液使用0.22um滤膜过滤，按照体积比例加入3％人血白蛋白，均匀混合后即为干细胞提取物母液；整个 过程不使用动物蛋白血清，产品免于动物蛋白检验。干细胞批次质量检验 方法为：使用流式细胞仪检测干细胞表面分子，检测指标为：CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、CD31、CD34、CD45 表达阴性。
(2)人源抗菌肽制备：所述的人源抗菌肽为人工合成纯化。其序列已公 开。
(3)生物凝胶制剂制备：按配比，将药用高分子稳定剂、保湿剂、透皮 吸收促进剂，干细胞提取物、抗菌肽、凝胶等按比例进行混合均匀后，分 装到预充一次性凝胶管中，放到-80℃冰箱中冻存待用。
本发明将干细胞提取物、抗菌肽和水凝胶结合，使得细胞分泌的各种 活性成分都得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，可以增加细胞 迁移，进而加速伤口闭合和增强再上皮化，提高微血管密度和组织创伤微 循环的水平进而增加血管生成，促进肉芽组织形成，调节炎症和调节细胞 外基质重塑。
本发明提供一种含人干细胞提取物和抗菌肽的缓释生物凝胶剂制备 方法和用途。本发明将干细胞提取物与抗菌肽，通过海藻酸钠-壳聚糖交联 微胶囊，制备成一种新型缓释生物凝胶剂，使得各种活性成分得到了有效 保存和缓慢释放，更利于损伤部位细胞存活和修复。该发明可制备成多种 剂型，用于多种组织创伤治疗。
附图说明
图1为本发明的方法制备的缓释生物凝胶填充剂型。
图2为本发明的方法制备的缓释生物凝胶覆盖剂型。
图3清洁伤口中不同实施组与对照组治疗效果对比图。
图4为污染伤口中不同实施组与对照组治疗效果对比图。
具体实施方式
下面结合附图与具体实施方案对本发明进一步说明，其具体实施方案 应该理解为仅为举例说明，不是限定性的，不能以下述举例说明来限定本 发明的保护范围。
本发明的华通胶组织来源干细胞提取物和抗菌肽的缓释生物凝胶剂， 按照体积份数，包括以下成分：
人华通胶组织来源干细胞提取物母液占总体积的3％
海藻酸钠-壳聚糖交联微胶囊水凝胶占总体积的95％
人源抗菌肽母液 0.5％
保湿剂 1％
透皮吸收促进剂 0.5％
所述该凝胶制剂氢离子浓度指数值为6.0-8.0；
其中，每10ml缓释凝胶溶液中，包括以下成分：
稳定剂 0.1-1g
保湿剂 0.5-1ml
透皮吸收促进剂 0.25-1ml
勃脉力A余量
所述该凝胶制剂中，其特征在于，包括以下成分：
所述华通胶组织干细胞可商业购买，如购自中国科学院典型培养物保 藏委员会细胞库(干细胞库)，目录号为SCSP-403，按照传统方法传代、 培养P2-P4代细胞建库，优选的，使用第P5代细胞。所述第P5代细胞处 理方式为：换用加氩低氧细胞培养气体，其特征在于，优选的，使用加氩 低氧细胞培养混合气体比例为：5％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、90％ 氩气(Ar)。同时，第P5代细胞使用勃脉力A处理12-24小时后，收集培 养干细胞和上清液，经过低温高压超声破碎，离心过滤后所得所有产物， 提取物包含成纤维细胞生长因子(FGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、干细 胞生长因子(SCF)、表皮细胞生长因子(EGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、 内皮细胞生长因子(VEGF)、细胞集落刺激因子(GM-CSF)、纤溶酶原激活物抑制剂-1、胶原蛋白、透明质酸等，包含但不仅限于此。
所述人源抗菌肽为人β防御素HBD-1、人β防御素HBD-2、人β防 御素HBD-3、人β防御素HBD-4中的一种或组合，以上抗菌肽序列已公 开，其来源使用全自动高通量多肽合成仪合成，设备为美国AAPPTEC公 司，型号为Apex 396SC。
所述缓释生物凝胶剂，其特征在于，优选的，所述稳定剂为海藻酸钠 -壳聚糖交联微胶囊。
所述缓释生物凝胶剂，其特征在于，优选的，所述保湿剂为三甲基甘 氨酸。
所述缓释生物凝胶剂，其特征在于，优选的，所述勃脉力A注射液为 德国贝朗医疗股份公司生产，进口药品注册证号为H20171078。
所述缓释生物凝胶剂，其特征在于，优选的，所述透皮吸收促进剂为 冰片。
上述含人华通胶组织来源干细胞提取物和抗菌肽的缓释生物凝胶剂 的制备方法，包括以下步骤：
(1)华通胶组织来源干细胞提取物制备：选取P5代华通胶组织干细胞 细胞进行复苏，优选的，用含10％人血白蛋StemPrOTM MSC SFM无血清 培养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，货号：A1033201)，接种于 T160细胞培养瓶中，放置于5％CO2、37℃细胞培养箱中，每天观察细胞 生长密度，适时更换细胞培养液。待细胞生长融合度程度达到70％-80％。 细胞经批次质检合格后，以0.9％的氯化钠洗涤细胞2次，优选的，换用加 氩低氧细胞培养气体(5％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、90％氩气(Ar)) 与勃脉力A注射液进行饥饿培养12-24小时，当细胞融合度达到90％以上 后，收集细胞及上清液，使用低温超高压连续流细胞破碎机，完全破碎细 胞，设置离心机5000g离心10min，取上清液使用0.22um滤膜过滤，按照 体积比例加入3％人血白蛋白，均匀混合后即为人华通胶组织来源干细胞 提取物母液；整个过程不使用动物蛋白血清，产品免于动物蛋白检验。干 细胞批次质量检验方法为：使用流式细胞仪检测干细胞表面分子，检测指 标为：CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、 CD31、CD34、CD45表达阴性。
(2)人源抗菌肽制备：所述的人源抗菌肽为人工合成纯化。
(3)生物凝胶制剂制备：按配比，将药用高分子稳定剂、保湿剂、透皮 吸收促进剂，干细胞提取物、抗菌肽、凝胶等按比例进行混合均匀后，分 装到预充一次性凝胶管中，放到-80℃冰箱中冻存待用。
所述含人华通胶组织来源干细胞提取物和抗菌肽的缓释生物凝胶剂， 可制成不同剂型，如填充剂型、覆盖剂型等，在多种组织创伤治疗中的用 途。
本发明将华通胶组织来源干细胞提取物与水凝胶结合，使得细胞分泌 的各种活性成分都得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，可以增 加细胞迁移，进而加速伤口闭合和增强再上皮化，提高微血管密度和组织 创伤微循环的水平进而增加血管生成，促进肉芽组织形成，调节炎症和调 节细胞外基质重塑。
实施例1
(1)华通胶组织来源干细胞提取物制备：选取P5代华通胶组织干细胞 细胞进行复苏，用含10％人血白蛋StemPrOTM MSC SFM无血清培养基(赛 默飞世尔科技(中国)有限公司，货号：A1033201)，接种于T160细胞培 养瓶中，放置于5％CO2、37℃细胞培养箱中，每天观察细胞生长密度， 适时更换细胞培养液。待细胞生长融合度程度达到70％-80％。细胞经批 次质检合格后，以0.9％的氯化钠洗涤细胞2次，优选的，换用加氩低氧细 胞培养气体(5％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、90％氩气(Ar))与勃 脉力A注射液进行饥饿培养12-24小时，当细胞融合度达到90％以上后， 收集细胞及上清液，使用低温超高压连续流细胞破碎机，完全破碎细胞， 设置离心机5000g离心10min，取上清液使用0.22um滤膜过滤，按照体积比例加入3％人血白蛋白，均匀混合后即为人华通胶组织来源干细胞提取 物母液；整个过程不使用动物蛋白血清，产品免于动物蛋白检验。干细胞 批次质量检验方法为：使用流式细胞仪检测干细胞表面分子，检测指标为： CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、CD31、 CD34、CD45表达阴性。
(2)人源抗菌肽制备：人源抗菌肽β防御素HBD-1为人工合成纯化。
(3)生物凝胶制剂制备：按配比，将药用高分子稳定剂海藻酸钠-壳聚 糖交联微胶囊溶于勃脉力A中制成水凝胶占95％、保湿剂三甲基甘氨酸 占1％、透皮吸收促进剂冰片占0.5％，华通胶来源干细胞提取物3％、抗 菌肽HBD-1占0.5％进行混合均匀后，分装到预充一次性凝胶管中，放到 -80℃冰箱中冻存待用。
实施例2
(1)华通胶组织来源干细胞提取物制备：选取P6代华通胶组织干细胞 细胞进行复苏，优选的，用含10％人血白蛋StemPrOTM MSC SFM无血清 培养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，货号：A1033201)，接种于T160细胞培养瓶中，放置于5％CO2、37℃细胞培养箱中，每天观察细胞 生长密度，适时更换细胞培养液。待细胞生长融合度程度达到70％-80％。细胞经批次质检合格后，以0.9％的氯化钠洗涤细胞2次，优选的，换用加 氩低氧细胞培养气体(4％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、91％氩气(Ar)) 与勃脉力A注射液进行饥饿培养12-24小时，当细胞融合度达到90％以上 后，收集细胞及上清液，使用低温超高压连续流细胞破碎机，完全破碎细 胞，设置离心机5000g离心10min，取上清液使用0.22um滤膜过滤，按照体积比例加入5％人血白蛋白，均匀混合后即为人华通胶组织来源干细胞 提取物母液；整个过程不使用动物蛋白血清，产品免于动物蛋白检验。干 细胞批次质量检验方法为：使用流式细胞仪检测干细胞表面分子，检测指 标为：CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、 CD31、CD34、CD45表达阴性。
(2)人源抗菌肽制备：人源抗菌肽β防御素HBD-2为人工合成纯化。
(3)生物凝胶制剂制备：按配比，将药用高分子稳定剂海藻酸钠-壳聚 糖交联微胶囊溶于勃脉力A中制成水凝胶占95％、保湿剂三甲基甘氨酸 占1％、透皮吸收促进剂冰片占0.5％，华通胶来源干细胞提取物3％、抗 菌肽HBD-2占0.5％进行混合均匀后，分装到预充一次性凝胶管中，放到 -80℃冰箱中冻存待用。
实施例3
(1)华通胶组织来源干细胞提取物制备：选取P7代华通胶组织干细胞 细胞进行复苏，优选的，用含10％人血白蛋StemPrOTM MSC SFM无血清 培养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，货号：A1033201)，接种于 T160细胞培养瓶中，放置于5％CO2、37℃细胞培养箱中，每天观察细胞 生长密度，适时更换细胞培养液。待细胞生长融合度程度达到70％-80％。 细胞经批次质检合格后，以0.9％的氯化钠洗涤细胞2次，优选的，换用加 氩低氧细胞培养气体(3％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、92％氩气(Ar)) 与勃脉力A注射液进行饥饿培养12-24小时，当细胞融合度达到90％以上 后，收集细胞及上清液，使用低温超高压连续流细胞破碎机，完全破碎细 胞，设置离心机5000g离心10min，取上清液使用0.22um滤膜过滤，按照 体积比例加入7％人血白蛋白，均匀混合后即为人华通胶组织来源干细胞 提取物母液；整个过程不使用动物蛋白血清，产品免于动物蛋白检验。干 细胞批次质量检验方法为：使用流式细胞仪检测细胞干表面分子，检测指 标为：CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、 CD31、CD34、CD45表达阴性。
(2)人源抗菌肽制备：人源抗菌肽β防御素HBD-3中为人工合成纯化。
(3)生物凝胶制剂制备：按配比，将药用高分子稳定剂海藻酸钠-壳聚 糖交联微胶囊溶于勃脉力A中制成水凝胶占95％、保湿剂三甲基甘氨酸 占1％、透皮吸收促进剂冰片占0.5％，华通胶来源干细胞提取物3％、抗 菌肽HBD-3占0.5％进行混合均匀后，分装到预充一次性凝胶管中，放到 -80℃冰箱中冻存待用。
实施例4
(1)华通胶组织来源干细胞提取物制备：选取P8代华通胶组织干细胞 细胞进行复苏，优选的，用含10％人血白蛋StemPrOTM MSC SFM无血清 培养基(赛默飞世尔科技(中国)有限公司，货号：A1033201)，接种于 T160细胞培养瓶中，放置于5％CO2、37℃细胞培养箱中，每天观察细胞 生长密度，适时更换细胞培养液。待细胞生长融合度程度达到70％-80％。 细胞经批次质检合格后，以0.9％的氯化钠洗涤细胞2次，优选的，换用加 氩低氧细胞培养气体(1％氧气(O2)、5％二氧化碳(CO2)、94％氩气(Ar)) 与勃脉力A注射液进行饥饿培养12-24小时，当细胞融合度达到90％以上 后，收集细胞及上清液，使用低温超高压连续流细胞破碎机，完全破碎细 胞，设置离心机5000g离心10min，取上清液使用0.22um滤膜过滤，按照 体积比例加入9％人血白蛋白，均匀混合后即为人华通胶组织来源干细胞 提取物母液；整个过程不使用动物蛋白血清，产品免于动物蛋白检验。干 细胞批次质量检验方法为：使用流式细胞仪检测干细胞表面分子，检测指 标为：CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166表达阳性；CD14、 CD31、CD34、CD45表达阴性。
(2)人源抗菌肽制备：人源抗菌肽人β防御素HBD-4为人工合成纯化。
(3)生物凝胶制剂制备：按配比，将药用高分子稳定剂海藻酸钠-壳聚 糖交联微胶囊溶于勃脉力A中制成水凝胶占95％、保湿剂三甲基甘氨酸 占1％、透皮吸收促进剂冰片占0.5％，华通胶来源干细胞提取物3％、抗 菌肽HBD-4占0.5％进行混合均匀后，分装到预充一次性凝胶管中，放到 -80℃冰箱中冻存待用。。
本发明缓释生物凝胶剂对清洁创伤愈合应用评价
(1)选取7周龄的SD雌性大鼠24只，平均分为8组，①空白对照生 理盐水组；②阴性对照组；③只含细胞提取物的凝胶组；④只含抗菌肽的 凝胶组；⑤实施例1组；⑥实施例2组；⑦实施例3组；⑧实施例4组； 制备大鼠皮损模型，剃毛后使用手术刀切割皮损约3厘米的伤口。
(2)造模成功后，按照①空白组皮损部位涂抹生理盐水；②阴性对照组 涂抹未添加细胞提取物和抗菌肽的凝胶；③只含细胞提取物的凝胶；④只 含抗菌肽的凝胶；⑤实施例1组涂抹实施例1制得的生物凝胶；⑥实施例 2组涂抹实施例2制得的生物凝胶；⑦实施例3组涂抹实施例3制得的生 物凝胶；⑧实施例4组抹实施例4制得的生物凝胶，分组进行治疗，分别 在给药后的第1、3、5、7、9、11、13天对伤口的直径进行测量，并统计。
(3)数据分析，结果表明对大鼠背部伤口愈合，只含细胞提取物的凝胶 组或只含抗菌肽的凝胶组，优于空白对照生理盐水组和阴性对照组 (p＜0.05)；含有细胞提取物和抗菌肽的实施例组优于只含细胞提取物的凝 胶组或只含抗菌肽的凝胶组及对照组(p＜0.05)，说明同时含细胞提取物和 抗菌肽两种物质的凝胶，对伤口愈合具有协同作用。
本发明缓释生物凝胶剂对污染创伤愈合应用评价：
(1)选取7周龄的SD雌性大鼠24只，平均分为8组，①空白对照生 理盐水组；②阴性对照组；③只含细胞提取物的凝胶组；④只含抗菌肽的 凝胶组；⑤实施例1组；⑥实施例2组；⑦实施例3组；⑧实施例4组； 制备大鼠皮损模型，剃毛后使用手术刀切割皮损约3厘米的伤口。
(2)污染伤口制备：以标准金黄色葡菌株ATCC25923，按照1×106个/ml配制成菌液，涂抹于切割伤口上。
(3)污染伤口造模成功后，按照①空白组皮损部位涂抹生理盐水；②阴 性对照组涂抹未添加细胞提取物和抗菌肽的凝胶；③只含细胞提取物的凝 胶；④只含抗菌肽的凝胶；⑤实施例1组涂抹实施例1制得的生物凝胶； ⑥实施例2组涂抹实施例2制得的生物凝胶；⑦实施例3组涂抹实施例3 制得的生物凝胶；⑧实施例4组抹实施例4制得的生物凝胶，分组进行治 疗，分别在给药后的第1、3、5、7、9、11、13、15天对伤口的直径进行 测量，并统计。
(4)数据分析，结果表明对大鼠背部伤口愈合，只含细胞提取物的凝 胶组或只含抗菌肽的凝胶组，明显优于空白对照生理盐水组和阴性对照组 (p＜0.01)；含有细胞提取物和抗菌肽的实施例组明显优于只含细胞提取物 的凝胶组或只含抗菌肽的凝胶组及对照组(p＜0.01)，说明同时含细胞提取 物和抗菌肽两种物质的凝胶，对污染伤口愈合更具有协同作用。
以上所述，本发明的内容并不局限在上述的实施例中，但本发明的保 护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技 术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都 应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种组合物，其包含干细胞提取物和抗菌肽，其中所述干细胞提取物的来源包括但不限于华通胶组织干细胞、脂肪干细胞、骨膜干细胞、表皮干细胞、毛囊干细胞、乳腺组织干细胞、子宫内膜干细胞、子宫内膜干细胞、嗅觉干细胞、神经干细胞、上皮干细胞、心脏干细胞和牙齿干细胞的提取物，所述抗菌肽包括防御素，例如α-防御素，β-防御素，和θ-防御素。
2.权利要求1所述的组合物，其中所述抗菌肽包括β-防御素如人β防御素。
3.权利要求1或2所述的组合物，其中所述抗菌肽包括人β防御素，例如HBD-1、HBD-2、HBD-3、HBD-4中的一种或多种。
4.权利要求1-3中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含保湿剂、透皮吸收促进剂、电解质溶液中的一种或多种。
5.权利要求1-4中任一项所述的组合物，其中所述组合物为药物组合物，优选制成不同剂型，例如液体剂型，气体剂型，固体剂型，半固体剂型，例如溶液剂、乳剂、混悬剂，例如外用溶液剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂，例如栓剂、滴剂，所述组合物可以通过包括但不限于植入、注射、手术附着、移植其它组织的方式施用，例如所述组合物可以在体外或体内成形为所需形状和/或大小。
6.权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所述组合物为凝胶，包括水性凝胶和油性凝胶，所述凝胶剂可以包括天然、半合成及合成高分子材料其中优选所述水性凝胶包括海藻酸盐、明胶、果胶、纤维素及其衍生物、淀粉及其衍生物、西黄耆胶，优选油性凝胶包括聚氧乙烯、胶体硅、铝皂、锌皂、脂肪油、液体石蜡。
7.权利要求1-6中任一项所述的组合物，其中所述组合物治疗是指改善由致病因素导致的多种组织疾病状态，或延迟、终止或逆转各类组织病症的发展，或者延迟或预防各类组织病症的发生，包括对各类组织的营养支持、修复、重建(例如乳房再造)、成块、美容治疗、治疗性治疗、组织增大(例如膀胱增大)和组织密封(如离体器官保存)，其中所述组合物治疗范围包括但不限于软骨组织、半月板组织、韧带组织、腱组织、椎间盘组织、牙周组织、皮肤组织、黏膜组织、血管组织、肌肉组织、筋膜组织、骨膜组织、眼组织、心包组织、肺组织、滑膜组织、神经组织、肾组织、骨髓、泌尿和生殖系统组织、肠组织、肝组织、胰腺组织、脾组织或脂肪组织损伤的药物组合物。
8.权利要求1-7中任一顶所述的组合物，其中所述组合物优选为用于治疗实例包括但不限于皮肤创面或创伤(例如瘢痕、外伤创面、缺血创面、糖尿病创面、严重灼伤、火器伤、激光伤、辐射伤、湿疹、皮肤溃疡(例如褥疮(压力)溃疡、静脉溃疡和糖尿病溃疡)；黏膜糜烂(如口腔黏膜糜烂、鼻粘膜糜烂、宫颈糜烂)，疝、骨损伤、腱或韧带的撕裂或破裂、以及手术切口，例如与皮肤癌切除相关的手术切口；美容性病症(例如重建手术和组织成块)；血管病症(例如血管疾病，例如外周动脉疾病、腹主动脉瘤、颈动脉疾病和静脉疾病；血管损伤；不合适的血管发育)；肌肉疾病(例如先天性肌病；重症肌无力；炎症、神经和肌源性肌肉疾病；和肌肉营养失调，例如迪谢内肌营养不良、贝克肌营养不良、肌强直性营养不良、肢带型肌营养不良、面肩肱型肌营养不良、先天肌营养不良、眼咽肌营养不良、末梢肌营养不良和Emery-Dreifuss肌营养不良，例如用于治疗感染组织损伤。
9.权利要求1-8中任一项所述的组合物用于制备药物组合物的用途。
10.权利要求9所述的用途，其中所述药物组合物用于治疗皮肤创面或创伤(例如瘢痕、外伤创面、缺血创面、糖尿病创面、严重灼伤、火器伤、激光伤、辐射伤、湿疹、皮肤溃疡(例如褥疮(压力)溃疡、静脉溃疡和糖尿病溃疡)；黏膜糜烂(如口腔黏膜糜烂、鼻粘膜糜烂、宫颈糜烂)，疝、骨损伤、腱或韧带的撕裂或破裂、以及手术切口，例如与皮肤癌切除相关的手术切口；美容性病症(例如重建手术和组织成块)；血管病症(例如血管疾病，例如外周动脉疾病、腹主动脉瘤、颈动脉疾病和静脉疾病；血管损伤；不合适的血管发育)；肌肉疾病(例如先天性肌病；重症肌无力；炎症、神经和肌源性肌肉疾病；和肌肉营养失调，例如迪谢内肌营养不良、贝克肌营养不良、肌强直性营养不良、肢带型肌营养不良、面肩肱型肌营养不良、先天肌营养不良、眼咽肌营养不良、末梢肌营养不良和Emery-Dreifuss肌营养不良，例如用于治疗感染组织损伤。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108888634A (zh) * 2018-09-06 2018-11-27 广州苿莱生物科技有限公司 毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法及应用
CN110179827A (zh) * 2019-06-27 2019-08-30 北京三有利和泽生物科技有限公司 牙源性间充质干细胞的应用
CN110613680A (zh) * 2019-10-23 2019-12-27 河南创新生物科技研究院有限公司 一种用于创伤伤口的凝胶制剂的制备方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1504573A (zh) * 2003-09-01 2004-06-16 广州暨南大学医药生物技术研究开发中 一种能自行裂解成具抗菌和修复功能多肽的融合蛋白
JP2005154338A (ja) * 2003-11-26 2005-06-16 Japan Science & Technology Agency 塩基性抗菌性ペプチドを有効成分とする細胞増殖剤
CN102031268A (zh) * 2010-09-21 2011-04-27 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 VEGF-165及HβD3双基因质粒载体及其构建方法
CN102327601A (zh) * 2011-09-26 2012-01-25 西北大学 一种抗感染和促进伤口愈合的止血剂及其制备方法
CN102985091A (zh) * 2010-03-03 2013-03-20 新科蒂斯公司 使用抗微生物肽螯合化合物治疗皮肤疾病和异常的组合物和方法
KR101320165B1 (ko) * 2011-07-26 2013-10-23 주식회사 바이오에프디엔씨 간엽줄기세포의 무항생제 배양액 조성물
CN106474155A (zh) * 2016-10-19 2017-03-08 天津普瑞赛尔生物科技有限公司 含有人脐带间充质干细胞提取物的外用凝胶制剂及其制备方法和用途
CN107320768A (zh) * 2017-06-30 2017-11-07 广州润虹医药科技股份有限公司 用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料及其制备方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1504573A (zh) * 2003-09-01 2004-06-16 广州暨南大学医药生物技术研究开发中 一种能自行裂解成具抗菌和修复功能多肽的融合蛋白
JP2005154338A (ja) * 2003-11-26 2005-06-16 Japan Science & Technology Agency 塩基性抗菌性ペプチドを有効成分とする細胞増殖剤
CN102985091A (zh) * 2010-03-03 2013-03-20 新科蒂斯公司 使用抗微生物肽螯合化合物治疗皮肤疾病和异常的组合物和方法
CN102031268A (zh) * 2010-09-21 2011-04-27 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 VEGF-165及HβD3双基因质粒载体及其构建方法
KR101320165B1 (ko) * 2011-07-26 2013-10-23 주식회사 바이오에프디엔씨 간엽줄기세포의 무항생제 배양액 조성물
CN102327601A (zh) * 2011-09-26 2012-01-25 西北大学 一种抗感染和促进伤口愈合的止血剂及其制备方法
CN106474155A (zh) * 2016-10-19 2017-03-08 天津普瑞赛尔生物科技有限公司 含有人脐带间充质干细胞提取物的外用凝胶制剂及其制备方法和用途
CN107320768A (zh) * 2017-06-30 2017-11-07 广州润虹医药科技股份有限公司 用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料及其制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
伊鲁士等: "《脂肪干细胞与再生医学》", 30 April 2015, 人民军医出版社 *
李楠等: ""hBD2修饰真皮多能干细胞促进感染创面修复的初步实验研究"", 《第三军医大学学报》 *
沈柏均 等: "《人脐带血 基础与临床》", 30 November 2016, 山东大学出版社 *
郝磊 等: ""hPDGF-A／hBD2双基因修饰骨髓源间充质干细胞外源基因体外与体内的表达"", 《中国实验血液学杂志》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108888634A (zh) * 2018-09-06 2018-11-27 广州苿莱生物科技有限公司 毛囊干细胞提取物冻干粉的制备方法及应用
CN110179827A (zh) * 2019-06-27 2019-08-30 北京三有利和泽生物科技有限公司 牙源性间充质干细胞的应用
CN110613680A (zh) * 2019-10-23 2019-12-27 河南创新生物科技研究院有限公司 一种用于创伤伤口的凝胶制剂的制备方法

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