CN107441479B - 海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法，其制法包括（1）将罗非鱼皮胶原蛋白肽与壳聚糖加入去离子水中，充分溶解后过滤，得到A组分；（2）50℃~80℃水浴中熔化蜂蜡，加入植物油，得到B组分；（3）A组分和B组分混合，加入甘油，灭菌，得到海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏。本发明烧烫伤膏可加速烧烫伤口的愈合和皮肤组织再生、无毒副作用，并且能够使伤口快速愈合。
Description
技术领域
本发明涉及生物医用材料领域，具体涉及一种海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法。
背景技术
各种烧伤、烫伤、创伤等皮肤损伤是临床常见病。迄今为止，各种原因导致的皮肤创伤及其愈合形成的疤痕组织依然严重威胁着人类的健康和生活质量。因此，研制能够加速烧烫伤创面愈合，帮助创伤组织在结构和功能上得到双重修复的制剂或者敷料一直是创伤治疗领域的重点和难点。目前用于烧烫伤的外用敷料多种多样，但大多属于水凝胶类，市售的烧烫伤敷料大多都存在着价格高、治疗周期长、易感染、见效慢等特点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，其可加速烧烫伤口的愈合和皮肤组织再生、无毒副作用，并且能够使伤口快速愈合。以解决现有烧烫伤膏治疗周期长、易感染、见效慢、价格高等问题。
本发明以天然高分子壳聚糖与罗非鱼皮多肽为原料制备天然无毒的新型烧烫伤修复材料，通过二者的协同效应可改善局部微循环和组织营养状况，提高烧烫伤创面愈合速度，减少深度烧烫伤创面愈合的瘢痕形成。
本发明的目的还在于提供所述烧烫伤膏的制备方法。
本发明的海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏由以下质量份组分制备得到：
A组分+B组分 5—10
甘油 1
A ：B= 1 ：5—10
其中：
A组分质量份组成如下
罗非鱼皮胶原蛋白肽 2--10
壳聚糖 2--10
去离子水 10--30
B组分质量分组成如下
蜂蜡 1
植物油 10—5；
所述罗非鱼皮胶原蛋白肽、壳聚糖等组分可为市售产品，作为优选，罗非鱼皮胶原蛋白肽分子量为1-3KDa，壳聚糖分子量为1-3KDa、脱乙酰度为85%~95%，
植物油优选芝麻油，甘油为分析级。
所述海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏制备方法包括以下步骤：
（1）将罗非鱼皮胶原蛋白肽与壳聚糖加入去离子水中，充分溶解后过滤，得到A组分；
（2）50℃~80℃水浴中熔化蜂蜡，加入植物油，得到B组分；
（3）A组分和B组分混合，加入甘油，灭菌，得到海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，储存在4℃温度下备用。
步骤（1）中，采用0.45μm滤膜过滤除去材料中不溶于水的杂质。
步骤（3）中，采用环氧乙烷灭菌可以除去制备的烧烫伤膏中微生物。
所述罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备方法如下：
罗非鱼皮中加入蒸馏水，煮软后打碎成匀浆液，添加中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酶解后升温100℃灭酶，酶解液冷却至常温后离心去渣，上清液过滤，经蒸发、浓缩、干燥得到罗非鱼皮胶原蛋白肽粉状。
我国罗非鱼年产量约占世界罗非鱼总产量的三分之一，是世界罗非鱼养殖第一大国。罗非鱼产量虽高，但其加工形式相对单一，主要以冻罗非鱼或者冻罗非鱼片等粗加工方式为主。在加工过程中产生了大量的鱼皮、鱼鳞、鱼骨等下脚料。目前这些下脚料除了作饲料外，没有高附加值的利用手段，这造成资源的极大浪费和污染环境。罗非鱼皮含有丰富的胶原蛋白，可作为制备胶原蛋白肽的理想原料。胶原蛋白经水解后得到的胶原蛋白肽具有抗氧化性、抗疲劳、抗衰老、血管紧张素转化酶抑制、促进骨组织再生等多种生物活性。但该多肽缺少抗菌和消炎的作用。
壳聚糖具有生物相容性好、可降解、无免疫原性、无毒副作用、来源丰富等潜在优势，同时还具有很好的止血、抗菌、消炎和促进伤口愈合功能，在止血及创伤修复中有很好的应用，能够加快伤口愈合。
本发明与现有技术相比，具有如下优点：
第一，海洋活性肽与壳聚糖具有良好的抗氧化性、抗疲劳、抗衰老、血管紧张素转化酶抑制、促进骨组织再生以及止血、抗菌、消炎和促进伤口愈合等特点，同时又都具有生物相容性和可吸收性；
第二，蜂蜡是适龄的工蜂腹部的4对蜡腺分泌出来的一种脂肪性物质，具有收敛生肌、止痛、调理的作用，芝麻油具有人体必须的不饱和脂肪酸和氨基酸，含有丰富的维生素E和一些微量元素可有效的促进细胞分裂和延缓衰老，有利于维持细胞膜的完整和功能正常；
第三，本发明里海产品加工过程中产生的大量的鱼皮、鱼鳞、鱼骨等下脚料，既解决环保问题，又提高其附加值；
第四，通过上述成分者的有效协同效应可加速烧烫伤口的愈合和皮肤组织再生。
具体实施方式
实施例1
（1）将罗非鱼皮胶原蛋白肽与壳聚糖加入去离子水中，充分溶解后0.45μm滤膜过滤，得到A组分；
（2）50℃水浴中熔化蜂蜡，加入植物油，得到B组分；
（3）A组分和B组分混合，加入甘油，环氧乙烷灭菌，得到海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，储存在4℃温度下备用。
罗非鱼皮胶原蛋白肽分子量为3KDa，壳聚糖分子量为1KDa、脱乙酰度为95%；
各组分用量（克）如下：
A组分+B组分 5，其中A ：B= 1 ：10
甘油（分析级） 1
A组分质量份组成如下
罗非鱼皮胶原蛋白肽 10
壳聚糖 2
去离子水 30
B组分质量分组成如下
蜂蜡 1
芝麻油 5。
实施例2
（1）将罗非鱼皮胶原蛋白肽与壳聚糖加入去离子水中，充分溶解后0.45μm滤膜过滤，得到A组分；
（2）80℃水浴中熔化蜂蜡，加入植物油，得到B组分；
（3）A组分和B组分混合，加入甘油，环氧乙烷灭菌，得到海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，储存在4℃温度下备用。
罗非鱼皮胶原蛋白肽分子量为1KDa，壳聚糖分子量为3KDa、脱乙酰度为85%；
各组分用量（克）如下：
A组分+B组分 10，其中，A ：B= 1 ：5
甘油（分析级）1
其中：
A组分质量份组成如下
罗非鱼皮胶原蛋白肽 2
壳聚糖 10
去离子水 10
B组分质量分组成如下
蜂蜡 1
芝麻油 10。
实施例3
（1）将罗非鱼皮胶原蛋白肽与壳聚糖加入去离子水中，充分溶解后0.45μm滤膜过滤，得到A组分；
（2）60℃水浴中熔化蜂蜡，加入植物油，得到B组分；
（3）A组分和B组分混合，加入甘油，环氧乙烷灭菌，得到海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，储存在4℃温度下备用。
罗非鱼皮胶原蛋白肽分子量为2KDa，壳聚糖分子量为2KDa、脱乙酰度为90%；
各组分用量（克）如下：
A组分+B组分 7，其中，A ：B= 1 ：8
甘油（分析级） 1
其中：
A组分质量份组成如下
罗非鱼皮胶原蛋白肽 6
壳聚糖 6
去离子水 20
B组分质量分组成如下
蜂蜡 1
芝麻油 7。
实施例4 治愈烧烫伤效果试验
实验动物采用新西兰兔，每组20只，雌雄各半。分别与烫伤后7、14、21d观察。新西兰兔背部用10%的硫化钠脱毛后观察，剃毛面积约10cm×15cm，待脱毛干净后用生理盐水清洗干净。实验动物进行麻醉，在背部脱毛区用75%乙醇消毒后，使用YLS-5Q台式超级控温烫伤仪在兔背部中线外侧2cm各制备2个烫伤创面，创面面积为3cm2，烫伤条件为：烫头温度100℃、作用压力1000 g、烫头与皮肤接触时间为6s。分别将实施例1-3所得的烧烫伤膏和汕头市美宝制药有限公司市售的湿润烧烫伤膏涂抹在伤口处。每天定时换药，于各取样时间点计算创面愈合率。表1是各时间点创面愈合率情况。
计算创面愈合率的方法如下：先将创面标记在半透明的称量纸上，再用剪刀剪出与伤口大小相同的称量纸，把称量纸放在标准心电图纸上数格子计算创面伤口大小。按以下公式计算创面愈合率：
创面愈合率（%）=（原始创面面积-未愈合创面面积）/原始创面面积×100%。
表1
| 取样天数 | 7d | 14d | 21d |
| 市售烧烫伤膏 | 25.3±0.9 | 67.7±1.2 | 81.4±1.0 |
| 实施例1 | 36.3±1.1 | 76.5±0.8 | 98.8±0.7 |
| 实施例2 | 35.7±0.9 | 78.9±1.2 | 99.2±0.6 |
| 实施例3 | 35.6±1.2 | 79.2±1.3 | 99.3±1.2 |
由表1可知，本发明的烧烫伤膏对于新西兰兔皮肤烫伤修复效果，各取样点的创面平均愈合率均高于市售烧烫伤膏组，且21天时创面平均愈合率为99.1%，高于市售烧烫伤膏组17%以上，说明本发明的烧烫伤膏医用敷料促进伤口愈合作用非常好。
Claims (6)
1.一种海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，其特征在于由以下质量份组分制备得到：
A组分+B组分 5—10
甘油 1
A ：B= 1 ：5—10
其中：
A组分质量份组成如下
罗非鱼皮胶原蛋白肽 2--10
壳聚糖 2--10
去离子水 10--30
B组分质量份 组成如下
蜂蜡 1
植物油 10—5。
2.根据权利要求1所述烧烫伤膏，其特征在于罗非鱼皮胶原蛋白肽分子量为1-3KDa，壳聚糖分子量为1-3KDa、脱乙酰度为85%~95%，植物油选芝麻油，甘油为分析级。
3.权利要求1或2所述烧烫伤膏的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）将罗非鱼皮胶原蛋白肽与壳聚糖加入去离子水中，充分溶解后过滤，得到A组分；
（2）50℃~80℃水浴中熔化蜂蜡，加入植物油，得到B组分；
（3）A组分和B组分混合，加入甘油，灭菌，得到海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏，储存在4℃温度下备用。
4.根据权利要求3所述方法，其特征在于步骤（1）中，采用0.45μm滤膜过滤。
5.根据权利要求3或4所述方法，其特征在于步骤（3）中，采用环氧乙烷灭菌。
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于步骤（1）中，所述罗非鱼皮胶原蛋白肽由下述方法制备得到：罗非鱼皮中加入蒸馏水，煮软后打碎成匀浆液，添加中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，酶解后升温100℃灭酶，酶解液冷却至常温后离心去渣，上清液过滤，经蒸发、浓缩、干燥得到罗非鱼皮胶原蛋白肽粉状。
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