CN108207490A - 一化性蛹虫草培育方法 - Google Patents

Abstract

本发明提出了一种一化性蛹虫草培育方法，其包括菌种准备—培养基配制—菌种扩配—接种—硬化—培育—采收等步骤，本发明通过将虫草菌接种到一化性有机柞蚕蛹上所培育出的一化性有机柞蚕蛹虫草其蛋白质含量高、氨基酸种类多，所含虫草素、虫草酸、虫草多糖、SOD以及磷、钾、锌、硒等矿物质元素均能达到或超过天然冬虫夏草，且虫草素含量是冬虫夏草的3—5倍，多种生物活性物也远远高于其它菌类，是冬虫夏草的理想替代品。

Description

一化性蛹虫草培育方法

技术领域

本发明涉及蛹虫草，具体涉及一种一化性蛹虫草培育方法。

背景技术

蛹虫草(Cordyceps militsris)，又称北冬虫夏草，北虫草，是子囊菌亚门，麦角菌目，麦角菌科，虫草属的模式种，与冬虫夏草是同属不同种，也是一种久负盛名的药用真菌。可全草入药，具有特殊的药用价值和滋补功效。含有虫草酸、虫草素、虫草多糖、超氧化物歧化酶SOD和微量元素硒等多种生物活性物质，可促进机体新陈代谢，提高机体的免疫功能。《本草纲目》、《中华药海》记载：“全草，味甘性平，有益肺肾，神精髓和止血化痰的功能”等。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚、阳痿遗精、腰起酸痛、病后虚弱、久咳虚弱、劳咳痰血、自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药，与人参、鹿茸一起并列为三大补药。

蛹虫草生理独特，生态复杂，自然界是鳞翅目昆虫的蛹体感染虫草菌后形成的虫与真菌两部分组成复合体，主要生长在针、阔叶林或混交林地表土层中。在冬季幼虫蛰居土里，菌类寄生其中，吸取营养，幼虫体内充满菌丝而死。到了夏季，从幼虫尸体上面生出幼苗，形似草，夏至前后采集而得到。蛹虫草自然分布资源数量很少，价格昂贵。采用传统人工栽培，是把虫草菌注入到活的蚕蛹身上，模拟自然条件得到蛹虫草。但采用这种方法培育，注射技术难以控制，容易污染，产量低，一般农户难以操作。

随着我国亚健康人群的增多，人们养生保健意识的增强，健康观念开始偏向“绿色”、“天然”，对合成药物越来越抗拒，更喜欢天然的中医药。由于人们对冬虫夏草的狂热需求，导致野生冬虫夏草被过渡开采，资源越来越短缺，国家不得不对其进行保护。在冬虫夏草无法进行商业化人工栽培、市场极度匮乏、价格居高不下的情况下，蛹虫草就成为了国内外真菌界、医药界、保健食品界、生物界等各行业（学科）多年来开发的重点。

柞蚕（Antherea pernyi），鳞翅目大蚕蛾科柞蚕属，古称春蚕、槲蚕、栎蚕，也叫山蚕，是一种吐丝昆虫 ，因喜食柞树叶得名。茧可缫丝，主要用于织造柞丝绸，虫体可食用，可做药材，是我国特有的一种具有重要经济价值的昆虫资源。河南省南召县地处伏牛山领域，植被丰富，雨水充沛，蚕业发展很好，这里富有大量的橡树，通过给蚕喂食橡树叶，培育出一化性柞蚕，其是一种完全变态昆虫，一生经历卵、柞蚕种、幼虫、蛹和成虫四个发育阶段，是一种经济价值较高的绢丝昆虫。蚕蛹，具有极高的营养价值，含有丰富的蛋白质（鲜蚕蛹含粗蛋白占51％，）、脂肪酸（粗脂肪占29％）、维生素（包含维生素A、维生素B₂、维生素D及麦角甾醇等）。因此，若能将蚕蛹进行深加工，打破传统的单一食法，创造出多种类、多口味、易携带、易存储的蚕蛹食品，将是一项重要的生物工程。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种一化性蛹虫草培育方法，该方法通过一化性有机柞蚕蛹培育出一化性蛹虫草。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一化性蛹虫草培育方法，包括以下方法步骤：

菌种准备—培养基配制—菌种扩配—接种—硬化—培育—采收，其中：

所述菌种准备，是购买优质菌种，选用适应性强、见光后转色出草快、性状稳定的速生高产的菌种，初次栽培应选购菌种量多的固体菌种；

所述培养基的配制，是将2g的磷酸二氢钾，1g的硫酸镁，1g的柠檬酸铵，30g的葡萄糖，3g的蛋白胨，50mg的维生素B1分别用天平称量好，按以上配比分别装入容器中，搅拌均匀，最后在玻璃容器中稀释至1000mL容量，分装到500ml的三角瓶里，每瓶300ml培养液，用塑料薄膜封口后，整齐摆放到高压灭菌锅里，关紧盖子，打开电源加热至121℃，高压灭菌30分钟，冷却后取出备用；

所述菌种扩配，用试管母种转扩栽培，用酒精消毒双手，在酒精灯上消毒器具，将发满试管的蛹虫草母种切成0.5cm×0.5cm大小的菌种块，从试管里取出，接种到盛有上述液体培养基的三角瓶里，每瓶接种母种10块左右，封好瓶口，然后放在120转/分钟、温度21℃条件下的摇床上进行震荡培养8天，待液体培养基内形成均匀小球后，就能作为蛹虫草栽培用的菌种；

所述接种，用无菌接种枪，调整至每次注射菌种原液0.5ml，对每个蚕蛹进行注射接种，注射点为蚕蛹正面头部向下第三关节处，接种动作要快，以免菌种受到污染；将接种好菌种的蚕蛹子实体，完成一批后，及时转移到硬化室培养筐里进行菌丝培养；

所述硬化，小心将培养筐整齐摆放在培养架上，放在避光环境下进行培养，室温控制在15℃-18℃，保持空气湿度60％；经过5-8天的培养，当培养筐里的料面布满蛹虫草的菌丝后，将温度提高到20℃-23℃，继续栽培15天，完成营养生长；菌丝体成熟后，每天在白天增加光照，打开灯光14小时，光照为1000勒克斯，温度控制在20℃，到了晚上关闭光源10小时，温度设定至10℃，进行昼夜光照和温差刺激，促进菌丝快速生长，继续培养7天，菌丝体由白色逐渐转为桔黄色；然后打开培养架上方的日光灯，全天增加光照，光照为1000勒克斯，促使菌丝体转色和刺激原基形成；

所述培育，经过前期菌丝体生长阶段，在培养基料面有突起并形成有小米粒状原基时，蛹虫草就出来了，打开换气扇，不断补充新鲜空气，并保持室温在18℃-22℃，空气相对湿度提高至80％-85％；经过一段时间的生长，在子实体形成后，经常移动培养盒的位置，将靠近架子边的培养盒与中间的交换位置，以保证从各个方向的光照能照到子实体，受光均匀，使子实体正常生长形态，提高品质和产量；如发现个别污染应及时挑出，以免影响整个培养室的环境；

所述采收，在子实体长至7—8厘米，顶端出现很多小刺，且呈桔红色或桔黄色棒状时，子实体已经成熟；打开培养盒的封口膜小心取出成熟的子实体，将采收下的子实体放入洁净的器具内，低温烘干或晾干，避免在太阳光下晒以防退色；干燥后的子实体，存放在低温干燥密闭的塑料袋内或直接作为商品出售。

为了避免在接种过程中菌种受到污染，所述接种整个过程需要在无菌环境条件下进行操作，先用75%的酒精擦拭工作台面、接种工具、操作人员双手，对易引起菌种和培养料污染的物品进行消毒。

所述接种步骤中，两批之间要用紫外灯给超净工作台灭菌消毒。

所述一化性蛹虫草产品包括有机柞蚕蛹虫草干品、有机柞蚕蛹虫草粉、蛹虫草胶囊以及含片。

本发明采用上述技术方案所设计的一化性蛹虫草培育方法，通过将虫草菌接种到一化性有机柞蚕蛹上所培育出的一化性有机柞蚕蛹虫草，是动物和植物的结合体，其蛋白质含量高、氨基酸种类多，所含虫草素、虫草酸、虫草多糖、SOD以及磷、钾、锌、硒等矿物质元素均能达到或超过天然冬虫夏草，且虫草素含量是冬虫夏草的3—5倍，多种生物活性物也远远高于其它菌类。本发明制备方法科学，制得的产品功效佳，是冬虫夏草的理想替代品。

具体实施方式

下面对本发明一化性蛹虫草培育方法作具体说明。

本发明一化性蛹虫草培育方法，包括以下方法步骤：

菌种准备—培养基配制—菌种扩配—接种—硬化—培育—采收。

所述菌种准备，是购买优质菌种，选用适应性强、见光后转色出草快、性状稳定的速生高产的菌种，初次栽培应选购菌种量多的固体菌种。

蛹虫草的菌种不能长期保存，也不要多次转管扩繁，否则菌种容易退化、变异，使子实体生长不良，而且产量和质量都会有明显下降。因此采用人工栽培，需要经常留种，更新原来保存的菌种。为了保证菌种的种性、纯度和活力，应尽量到有关单位购买优质菌种，以便达到生产优质高产蛹虫草的目的。

优质菌种是栽培成功和高效的关键。选用适应性强、见光后转色出草快、性状较稳定的速生高产的菌种，初次栽培应选购菌种量多的固体菌种，有栽培经验和规模栽培者可直接购买斜面试管种和液体菌种，一般建议采用液体菌种来接种。

所述培养基的配制，是将2g的磷酸二氢钾，1g的硫酸镁，1g的柠檬酸铵，30g的葡萄糖，3g的蛋白胨，50mg的维生素B1分别用天平称量好，按以上配比分别装入容器中，搅拌均匀，最后在玻璃容器中稀释至1000mL容量，分装到500ml的三角瓶里，每瓶300ml培养液，用塑料薄膜封口后，整齐摆放到高压灭菌锅里，关紧盖子，打开电源加热至121℃，高压灭菌30分钟，冷却后取出备用。

所述菌种扩配，用试管母种转扩栽培，用酒精消毒双手，在酒精灯上消毒器具，将发满试管的蛹虫草母种切成大约0.5cm×0.5cm大小的菌种块，从试管里取出，接种到盛有上述液体培养基的三角瓶里，每瓶接种母种10块左右，封好瓶口，然后放在120转/分钟，21℃条件下的摇床上进行震荡培养8天左右，待液体培养基内形成均匀小球后，就可作为蛹虫草栽培用的菌种。

所述接种，为了避免在接种过程中菌种受到污染，整个接种过程需要在超净工作台等无菌环境条件下进行操作。先用75%的酒精擦拭工作台面、接种工具、操作人员双手等易引起菌种和培养料污染的物品，进行消毒。用无菌接种枪，调整至每次注射菌种原液0.5ml，对每个蚕蛹进行注射接种，注射点为蚕蛹正面头部向下第三关节处，接种动作要快，以免菌种受到污染。将接种好菌种的蚕蛹子实体，完成一批后，及时转移到硬化室里进行菌丝培养。注意两批之间要用紫外灯给超净工作台灭菌消毒。

所述硬化，即菌丝培养，培养室是蛹虫草生产的重要场所，要求具有调节温度、湿度和光照的条件。目前大都采用智能人工气候室，方便调节，减较劳动强度，可一年四季栽培。培养室里放有培养架，进行立体栽培可节省空间。为了操作和管理方便，架高一般在2米左右，分成四层，每层上安装有日光灯，保证培养盒都有光线照到。

蛹虫草属中低温菌类，菌丝最适宜的生长温度为15—25℃，子座最适宜生长温度为18—22℃，如果低于或高于这个温度范围，生长减慢，高于30℃会很快死亡。小心将培养盒整齐摆放在培养架上。初始阶段，是菌丝体生长阶段，既要控光又控温。放在避光环境下进行培养，这时不要打开灯光，温度要低一点，室温控制在15℃-18℃，较低的温度，想来捣乱的杂菌也就不来了。保持空气湿度60％。经过5-8天的培养，当培养筐里的料面布满蛹虫草的菌丝后，将温度提高到20℃-23℃，继续栽培15天左右，菌丝就可吃透整个蚕蛹子实体，完成营养生长。菌丝体成熟后，进入了它的生殖生长的时期，需要进行光照刺激和温差刺激，促使它转色。最好昼夜能差上10℃左右，每天在白天增加光照，打开灯光14小时，光照为1000勒克斯，温度控制在20℃左右，到了晚上关闭光源10小时，温度设定至10℃左右，进行昼夜光照和温差刺激，促进菌丝快速生长，继续培养7天左右，菌丝体由白色逐渐转为桔黄色，如温度适宜、菌种优良，经过7—10天菌丝可转完色。这时应打开培养架上方的日光灯，全天增加光照，光照为1000勒克斯，促使菌丝体转色和刺激原基形成。

所述培育，即出草培育，经过前期菌丝体生长阶段，等培养基料面有突起，并形成有小米粒状原基时，蛹虫草就出来了，这时就要加强室内通风换气，打开换气扇，不断补充新鲜空气，并保持室温在18℃-22℃，空气相对湿度提高至80％-85％。否则，二氧化碳积累过多，子座不能正常分化，影响生长发育。

温度对子实体的生长十分重要，在子实体生长阶段不需要太大的温差刺激，以免畸形草发生，平时要严格把好关。子实体到了出草管理阶段，对湿度要求更加严格，认真做好湿度管理工作。如湿度太大，容易诱发基内气生菌丝，对子实体生长不利。湿度太小，容易使培养基提早失水而影响产量。

当培养室里的湿度较小时，要打开空气加湿器，增加室内的湿度。

当湿度太大时，培养盒里会布满水珠，不利于子实体的生长。要加强室内通风，换气，有效降低空气的相对湿度。减少培养盒内湿度，促使蛹虫草的子实体生长。

经过一段时间的生长，就会看着蛹虫草向一边倒了。这是由于蛹虫草在生长过程中具有较强的趋光性，像向日葵一样，光源在哪儿，子实体就容易朝哪儿长，朝光源方向弯曲，生长不良。因此在子实体形成后，为了不让他们都长成歪脑袋，根据生长情况，调整培养盒与光源的相对方向。经常移动培养盒的位置，将靠近架子边的培养盒与中间的交换位置，以保证从各个方向的光照能照到子实体，受光均匀，使子实体正常生长形态，提高品质和产量。

平时注意观察室内情况，认真做好记录，严格控制好室内的温度、湿度和光照。如发现个别污染应及时挑出，以免影响整个培养室的环境。

所述采收，经过40天左右的精心栽培，子实体长至7—8厘米，一般不再生长，在顶端出现很多小刺时，呈桔红色或桔黄色棒状，表明子实体已经成熟，这时可以采收了。采收时，打开培养盒的封口膜小心取出子实体，注意不要碰伤表皮，也不要用力太大，以免拉断，影响商品价值。取出成熟的子实体后，采收下的子实体放入洁净的器具内，低温烘干或晾干，不要在太阳光下晒以免退色。干燥后的子实体，应存放在密闭的塑料袋内或直接作为商品出售。暂不出售，应密封好放在低温干燥处贮存。

本发明一化性蛹虫草培育方法培育的一化性蛹虫草与冬虫夏草的药效和化学成分对比分析如下：

一化性柞蚕蛹虫草的多种药效是由其所含的化学成分决定的，经检测对比分析，一化性柞蚕蛹虫草与天然野生的冬虫夏草化学成分基本一致，多数有效成分普遍高于天然冬虫夏草，其功效作用更加明显。由于蛹虫草价格仅为冬虫夏草的十分之一，而营养药用价值可与其比肩，被誉为北冬虫夏草，深受消费者喜爱。

本发明培育的一化性蛹虫草，经药化、药理、“三致”（致畸、致癌、致突变）及临床试验，具有抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、抗病毒、增强免疫功能，同时在辅助治疗心律失常、调节脂类代谢、镇咳平喘、祛痰、保肝护肝、慢性肾炎和肾功能衰竭等方面功效良好，且药性温和，价格适中，无毒副作用，老少病弱需要者，一年四季节能放心食用，已成为替代天然野生冬虫夏草的上佳代用品。本发明产品可制作成有机柞蚕蛹虫草干品、有机柞蚕蛹虫草粉、蛹虫草胶囊以及含片等。

蛹虫草作为冬虫夏草的保健品生产替代品，广泛用于制药，深受消费者青睐。人工培育蛹虫草，不仅占地少，栽培周期短，而且经济效益好，是农村农民致富的好项目，为我国名贵药材产业化生产开辟了新途径。

Claims (4)

1.一化性蛹虫草培育方法，其特征是包括以下方法步骤：

菌种准备—培养基配制—菌种扩配—接种—硬化—培育—采收，其中：

所述菌种准备，是购买优质菌种，选用适应性强、见光后转色出草快、性状稳定的速生高产的菌种，初次栽培应选购菌种量多的固体菌种；

所述培养基的配制，是将2g的磷酸二氢钾，1g的硫酸镁，1g的柠檬酸铵，30g的葡萄糖，3g的蛋白胨，50mg的维生素B1分别用天平称量好，按以上配比分别装入容器中，搅拌均匀，最后在玻璃容器中稀释至1000mL容量，分装到500ml的三角瓶里，每瓶300ml培养液，用塑料薄膜封口后，整齐摆放到高压灭菌锅里，关紧盖子，打开电源加热至121℃，高压灭菌30分钟，冷却后取出备用；

所述菌种扩配，用试管母种转扩栽培，用酒精消毒双手，在酒精灯上消毒器具，将发满试管的蛹虫草母种切成0.5cm×0.5cm大小的菌种块，从试管里取出，接种到盛有上述液体培养基的三角瓶里，每瓶接种母种10块左右，封好瓶口，然后放在120转/分钟、温度21℃条件下的摇床上进行震荡培养8天，待液体培养基内形成均匀小球后，就能作为蛹虫草栽培用的菌种；

所述接种，用无菌接种枪，调整至每次注射菌种原液0.5ml，对每个蚕蛹进行注射接种，注射点为蚕蛹正面头部向下第三关节处，接种动作要快，以免菌种受到污染；将接种好菌种的蚕蛹子实体，完成一批后，及时转移到硬化室培养筐里进行菌丝培养；

所述硬化，小心将培养筐整齐摆放在培养架上，放在避光环境下进行培养，室温控制在15℃-18℃，保持空气湿度60％；经过5-8天的培养，当培养筐里的料面布满蛹虫草的菌丝后，将温度提高到20℃-23℃，继续栽培15天，完成营养生长；菌丝体成熟后，每天在白天增加光照，打开灯光14小时，光照为1000勒克斯，温度控制在20℃，到了晚上关闭光源10小时，温度设定至10℃，进行昼夜光照和温差刺激，促进菌丝快速生长，继续培养7天，菌丝体由白色逐渐转为桔黄色；然后打开培养架上方的日光灯，全天增加光照，光照为1000勒克斯，促使菌丝体转色和刺激原基形成；

所述培育，经过前期菌丝体生长阶段，在培养基料面有突起并形成有小米粒状原基时，蛹虫草就出来了，打开换气扇，不断补充新鲜空气，并保持室温在18℃-22℃，空气相对湿度提高至80％-85％；经过一段时间的生长，在子实体形成后，经常移动培养盒的位置，将靠近架子边的培养盒与中间的交换位置，以保证从各个方向的光照能照到子实体，受光均匀，使子实体正常生长形态，提高品质和产量；如发现个别污染应及时挑出，以免影响整个培养室的环境；

所述采收，在子实体长至7—8厘米，顶端出现很多小刺，且呈桔红色或桔黄色棒状时，子实体已经成熟；打开培养盒的封口膜小心取出成熟的子实体，将采收下的子实体放入洁净的器具内，低温烘干或晾干，避免在太阳光下晒以防退色；干燥后的子实体，存放在低温干燥密闭的塑料袋内或直接作为商品出售。

2.根据权利要求1所述的一化性蛹虫草培育方法，其特征是所述接种整个过程需要在无菌环境条件下进行操作，先用75%的酒精擦拭工作台面、接种工具、操作人员双手，对易引起菌种和培养料污染的物品进行消毒。

3.根据权利要求1所述的一化性蛹虫草培育方法，其特征是根据权利要求1所述的一化性蛹虫草培育方法，其特征是所述接种步骤中，两批之间要用紫外灯给超净工作台灭菌消毒。

4.根据权利要求1所述的一化性蛹虫草培育方法，其特征是根据权利要求1所述的一化性蛹虫草培育方法，其特征是所述一化性蛹虫草产品包括有机柞蚕蛹虫草干品、有机柞蚕蛹虫草粉、蛹虫草胶囊以及含片。