CN108200863B - 一种用于培养公石松的培养基及其应用 - Google Patents

一种用于培养公石松的培养基及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种用于培养公石松的培养基及其应用，该培养基由如下比例的原料组分组成：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶23～27g∶5～7g∶18～22g∶1.8～2.2g∶90～110g∶0.8～1.2g，其中每升MS培养基中含有6‑BA 1.8～2.2mg、NAA 0.8～1.2mg和KT 0.15～0.25mg。本发明的特定组分配方法培养基能够实现公石松的一步成苗快速繁殖。

Description

一种用于培养公石松的培养基及其应用
技术领域
本发明属于植物栽培技术领域，具体涉及一种用于培养公石松的培养基及其应用。
背景技术
公石松，兰科开唇兰属植物，是一种名贵药材，主要分布在福建省漳州市中部山区，因其生长在深山溪谷边的岩石缝中，故得名″公石松″，在福建闽南地区广受消费者欢迎，具有一定的市场开发潜力。目前，其售价约是普通青草的10到20倍，性辛味苦，有利尿解热、清火祛湿的功效，民间常用于治疗疮毒，也可用于治疗脱肛。据民间医生介绍：公石松是野生天然植物，性寒味甘，药性甘淡而清利，性凉而不寒，味甘而不苦，具有清热凉血、生津降火、利水通络、治咳等功效，是男女老幼四季皆宜的理想凉茶饮品，坊间常结合食疗，用于治疗消除无名肿毒等常见疾病。
公石松作为漳州地区道地中草药品种，目前尚未有人工栽培的记录，市场上销售以本地或外地(国)野生公石松为主，加上人们保健意识的增强，渐渐得到人们的认识和重视，野生公石松价格呈逐年上涨趋势，在每年5到10月，鲜品市场价格已超过金线莲，每市斤达150元，仍然供不应求。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种用于培养公石松的培养基。
本发明的另一目的在于提供上述培养基的应用。
本发明的具体技术方案如下：
一种用于培养公石松的培养基，由如下比例的原料组分组成：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶23～27g∶5～7g∶18～22g∶1.8～2.2g∶90～110g∶0.8～1.2g，其中每升MS培养基中含有6-BA 1.8～2.2mg、NAA 0.8～1.2mg和KT 0.15～0.25mg。
在本发明的一个优选实施方案中，由如下比例的原料组分组成：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶25g∶6g∶20g∶2g∶100g∶1.0g，其中每升MS培养基中含有6-BA 2mg、NAA 1.0mg和KT 0.2mg。
一种上述培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)按比例称取各原料组分；
(2)将蔗糖、卡拉胶、胡萝卜泥、蛋白胨、香蕉泥和活性炭加入到MS培养基中，加热同时搅匀；
(3)将步骤(2)所得的物料分装后进行高压蒸汽灭菌，再于室温冷却至凝固；
(4)将步骤(3)所得的物料于夏季时放置3～5d或于冬季时放置5～8d，排除污染的培养基后，即得。
一种公石松的培养方法，包括如下步骤：
(1)将经清洗和消毒所得的红杆公石松外植体或红杆公石松组培无菌苗放入权利要求1或2所述的培养基中进行培养得具有2～3片叶、高度为6～7cm的瓶苗，培养条件具体如下：生长温度为5～35℃，光照强度为1500lx～4000lx，15～30d消毒一次，其中光照具体为：夏季昼光照，冬季夜光照，时长均为10～12h；
(2)步骤(1)所得的瓶苗进行炼苗15～20d后进行移栽至移栽基质中，其中炼苗时不能有阳光直射，以漫射光为主，光照强度不高于20000lx；移栽当日浇定根水，移栽的株行距为1.8～2.2cm×4.5～5.5cm，深度为0.8～1.2cm；
(3)对移栽后的瓶苗用40～50％的甲霜恶霉灵可湿性粉剂800～1000倍液喷洒；
(4)移栽一星期后，每隔6～8d喷洒一次10％氨基酸800倍液，并于采收前13～16d停止喷洒，移栽15d内的温度为20～27℃，空气相对湿度为70～80％，移栽基质的湿度为70～75％；
(5)移栽至单株重8～10g，植株高度15～20cm，有5～6片叶，叶宽3～4cm，叶长4～6cm，茎粗0.6～0.8cm，叶背呈紫红色，叶面金黄脉网明显，茎呈绿色时即可采收。
在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(1)中的光照强度为3500lx。
在本发明的一个优选实施方案中，所述步骤(1)中的生长温度为15～28℃。
在本发明的一个优选实施方案中，所述移栽基质包括重量比为5.5～6.5∶1.5～2.5∶1.5～2.5的泥炭土、腐熟木屑和细沙，且每公斤移栽基质中含有5～7.5kg熟石灰或适量多菌灵可湿性粉剂。
本发明的有益效果是：
1、本发明的特定组分配方法培养基能够实现公石松的一步成苗快速繁殖。
2、本发明的培养方法实现了公石松的人工培植，解决了公石松的产业化问题。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明的技术方案进行进一步的说明和描述。
实施例1培养基的配制
(1)按比例称取各原料组分：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶25g∶6g∶20g∶2g∶100g∶1.0g，其中每升MS培养基中含有6-BA 2mg、NAA 1.0mg和KT 0.2mg，其中MS母液配制表如下：
Figure BDA0001505856910000031
(2)将蔗糖、卡拉胶、胡萝卜泥、蛋白胨、香蕉泥和活性炭加入到MS培养基中，加热同时搅匀；
(3)将步骤(2)所得的物料分装后进行高压蒸汽灭菌，再于室温冷却至凝固；
(4)将步骤(3)所得的物料于夏季时放置3～5d或于冬季时放置5～8d，排除污染的培养基后，即得。
实施例2公石松的培养
(1)将经清洗和消毒所得的红杆公石松外植体或红杆公石松组培无菌苗放入实施例1制备的培养基中进行培养得具有2～3片叶、高度为6～7cm的瓶苗，培养条件具体如下：生长温度为5～35℃(优选15～28℃)，光照强度为1500lx～4000lx(优选35001x)，15～30d消毒一次(可用福尔马林熏蒸、洒喷新吉尔灭或配合紫外灯进行)，其中光照具体为：夏季昼光照，冬季夜光照，时长均为10～12h；该步骤分为两种情形，当采用自然生长的植株作为外植体时包括清洗，消毒，接种三步；当采用组培无菌苗时直接进行无菌接种，具体如下：
a、自然生长植株外植体
清洗：野外取回公石松活体植株，用自来水冲洗、洗洁精浸泡20分钟，将茎段、叶片以及根部清洗干净，用吸水纸将表面水分吸干，置于经75％酒精表面消毒的超净工作台内备用。
消毒、接种：用经高压灭菌的不锈钢盘、手术刀、镊子进行无菌操作，切除公石松活体叶片、根部，留整株茎段完全浸没于70％酒精中，20秒后夹出，无菌水过洗3遍，然后浸入0.1％升汞溶液，15分钟后取出放在不锈钢盘上进行切段，每段长度1-1.5厘米，至少保留一个芽点，最后夹如预备好的诱导培养基中进行诱导，每瓶水平放置5个茎段，以一半切面没入培养基为佳。
b、无菌苗材料
当已有公石松无菌苗材料时，直接将材料从培养瓶中夹出，去除叶片、根部，将茎段切为1-1.5厘米茎段，放入准备好的成苗培养基中进行成苗培养，每瓶水平放置25个茎段，以一半切面没入培养基为佳；
(2)步骤(1)所得的瓶苗进行炼苗15～20d后进行移栽至移栽基质中，移栽前进行炼苗能够显著提高公石松移栽成活率，其中炼苗以大棚或林下炼苗为佳，炼苗时不能有阳光直射，以漫射光为主，光照强度不高于20000lx，否则易出现叶片灼伤现象；移栽当日浇定根水，移栽的株行距为1.8～2.2cm×4.5～5.5cm，深度为0.8～1.2cm；移栽基质包括重量比为5.5～6.5∶1.5～2.5∶1.5～2.5的泥炭土、腐熟木屑和细沙，且每公斤移栽基质中含有5～7.5kg熟石灰或适量50％多菌灵可湿性粉剂；移栽环境具体如下：公石松在长期的系统发育过程中形成了喜阴凉、潮湿的生态习性。栽培公石松最好选择地势开阔、座北朝南、周围有高大阔叶林、远离污染源的地段。大棚种植应尽量模拟类似野生环境，大棚南北走向，棚顶及四周先覆盖薄膜再盖上遮阳网，便于人工控制棚内温度、光照、湿度，有条件的要安装空调、抽风机、水帘系统及微喷灌系统；
(3)对移栽后的瓶苗用40～50％的甲霜恶霉灵可湿性粉剂800～1000倍液喷洒；
(4)移栽一星期后，每隔7d喷洒一次10％氨基酸800倍液，并于采收前15d停止喷洒，移栽15d内的温度为20～27℃，空气相对湿度为70～80％，如果温度明显偏高，可以覆盖遮阳网并开启微喷灌设施降温增湿，以免高温造成叶片烧伤，移栽基质的湿度为70～75％；移栽期间大棚四周围上防虫网，利用糖醋液诱杀小地老虎，或利用细菌、真菌、病毒、植物浸提液、抗生素等生物农药杀灭病虫，化学防治需选用高效、低度、低残留农药；
(5)移栽4个月后，至单株重8～10g，植株高度15～20cm，有5～6片叶，叶宽3～4cm，叶长4～6cm，茎粗0.6～0.8cm，叶背呈紫红色，叶面金黄脉网明显，茎呈绿色时即可采收。采收时抖净根部泥土，再用清水洗净植株，置于塑料筐中沥干即为成品，也可进行烘干密封、避光保存。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。

Claims (1)

1.一种公石松的培养方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）将经清洗和消毒所得的红杆公石松外植体或红杆公石松组培无菌苗放入培养基中进行培养得具有2~3片叶、高度为6~7cm的瓶苗，培养条件具体如下：生长温度为15~28℃，光照强度为3500lx，15~30d消毒一次，其中光照具体为：夏季昼光照，冬季夜光照，时长均为10~12h；上述培养基由如下比例的原料组分组成：MS培养基: 蔗糖: 卡拉胶: 胡萝卜泥: 蛋白胨: 香蕉泥: 活性炭=1L: 25g: 6g: 20g: 2g: 100g: 1.0g，其中每升MS培养基中含有6-BA 2mg、NAA 1.0mg和KT 0.2mg；该培养基的制备方法包括如下步骤：
a、按比例称取各原料组分；
b、将蔗糖、卡拉胶、胡萝卜泥、蛋白胨、香蕉泥和活性炭加入到MS培养基中，加热同时搅匀；
c、将步骤b所得的物料分装后进行高压蒸汽灭菌，再于室温冷却至凝固；
d、将步骤c所得的物料于夏季时放置3~5d或于冬季时放置5~8d，排除污染的培养基后，即得；
（2）步骤（1）所得的瓶苗进行炼苗15~20d后进行移栽至移栽基质中，其中炼苗时不能有阳光直射，以漫射光为主，光照强度不高于20000lx；移栽当日浇定根水，移栽的株行距为1.8~2.2cm×4.5~5.5cm，深度为0.8~1.2cm；该移栽基质包括重量比为5.5~6.5:1.5~2.5:1.5~2.5的泥炭土、腐熟木屑和细沙，且每公斤移栽基质中含有5~7.5kg熟石灰或适量多菌灵可湿性粉剂；
（3）对移栽后的瓶苗用40~50%的甲霜恶霉灵可湿性粉剂800~1000倍液喷洒；
（4）移栽一星期后，每隔6~8d喷洒一次10%氨基酸800倍液，并于采收前13~16d停止喷洒，移栽15d内的温度为20~27℃，空气相对湿度为70~80%，移栽基质的湿度为70~75%；
（5）移栽至单株重8~10g，植株高度15~20cm，有5~6片叶，叶宽3~4cm，叶长4~6cm，茎粗0.6~0.8cm，叶背呈紫红色，叶面金黄脉网明显，茎呈绿色时即可采收。
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