CN103283596B - 茅岩莓快繁与规范化栽培方法 - Google Patents

茅岩莓快繁与规范化栽培方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供茅岩莓快繁与规范化栽培方法,取野生茅岩莓原始枝条经组培方法繁殖得到茅岩莓幼苗、茅岩莓幼苗栽培管理和茅岩莓大田栽培管理方法。该方法具有增殖速度快,生产周期短,设备简单,占地面积少,能节省人力、物力等,便于工厂化生产;本培养方法出芽快,增殖率高,方法简单,生产成本低,可批量生产,应用价值高;茅岩莓的生产可以在人为控制条件下进行,不受季节、气候条件与土壤等因素的制约,可排除病虫害的侵袭和农药残留的影响,严格控制茅岩莓的质量;本发明不需要另外栽种茅岩莓苗,茅岩莓种植成本大大降低,茅岩莓叶的产量上升,其经济效益显著提高;使用本发明提供的组培快繁技术得到的茅岩莓幼苗进行人工栽培,可以得到个体差异小,品质均一的茅岩莓成品;可以保存茅岩莓的种质资源,同时有利于保护茅岩莓野生资源,减少对自然资源的破坏。

Description

茅岩莓快繁与规范化栽培方法
技术领域
本发明涉及一种茅岩莓从幼苗快速繁殖到长期规范化栽培管理茅岩莓的方法,属于农业栽培技术领域。
背景技术
我国的传统中草药已有数千年的历史,至今仍在我国和许多国家和地区广为使用。人类已经从植物中发现了许多具有高度生理活性的药物,目前从植物来源的药物占药物总量的25%以上。但由于传统的中草药获取方法是以采集和消耗大量的野生植物资源为代价的,当采集和消耗量超过自然资源的再生能力时,必然会导致物种的濒危甚至灭绝。同时随着自然生态环境的日益破坏,也进一步导致药用植物资源的匮乏。生物技术的蓬勃发展为从根本上改变传统药材的生产提供了一个崭新的方法,植物组织和细胞培养技术则是其中一个重要的手段。我国自1964年罗士韦教授首先报道了人参组织培养获得成功的研究成果以来,许多科学家先后从事了多种药用植物的组织培养研究。至今,我国药用植物的组织培养研究迅速发展。目前,世界各国对植物的药用开发和研究都十分重视,就以美国来说,其成药中有47%是以植物为原料制成的。
为了解决药用植物的供需矛盾,人们采用人工栽培的方法扩大药源。但在人工栽培的药用植物中,有不少名贵药材等生产周期较长,如人参、黄连,如果以常规方法育种或育苗,需要花费很长的时间;另有一些药用植物如贝母、番红花等,因繁殖系数小、耗种量大,导致育种速度很慢,生产成本增加。利用植物的有性繁殖方式对其有效成分含量波动比较大,所以利用植物组织培养技术解决药用植物的植株再生与繁殖问题迫在眉睫。近年来,国内外在这方面已做了大量工作,已成功离体培养获得试管植株的药用植物至少有200种,如:云南黑节草、延龄草、高山红景天、莪术、水母雪莲、星花绣线菊、溪黄草、玉叶金花、辽东榴木等;其中包括一些具有抗癌有效成分的珍稀植物,如红豆杉、艾、黄杨、大戟属植物、长春花、米仔兰、狗牙花和香榧等。
茅岩莓又名土家甘露、土家神茶、观音草等。其有效成分主要是二氢杨梅素、黄酮,同时含有亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸等人体必需的17种氨基酸和钾、钙、铁、锌、硒等14种微量元素,其中黄酮最高检测含量为9.31%,是目前发现的所有植物中黄酮含量最高的,被称植物中的“黄酮之王”。
黄酮广泛存在于植物中,是许多中草药的有效成分,具有杀菌抗炎、清热解毒、镇痛消肿、降脂降压、润喉止咳、提高人体免疫力等功能。对金黄葡萄球菌、甲、乙型链球菌、肺炎双球菌、流感杆菌等有很强的杀灭能力,能排出人体的有害酸酞和酮体,消除血液里的血垢,调节血脂、血压、软化血管、调节肾功能,加强肾小管的重吸收;特别是治疗上呼吸道感染、急慢性咽炎、支气管炎效果明显。黄酮在人体内代谢快,不蓄积,且人体自身不能合成,所以我们需要经常补充。 茅岩莓茶就是采用这种纯天然野生植物茅岩莓,采用土家传统制茶方法结合现代科学制茶工艺精制加工而成。具有消炎杀菌、降血脂、软化血管、抑制血小板聚集、抗血栓、抗肿瘤、调节肠胃、对神经系统疾病效果明显。
茅岩莓具有三降、三抗、三调节等作用。降血粘:抑制血小板聚集,降低血浆纤维蛋白原浓度,增强红细胞变形能力而起降血粘度的作用。降血压:通过扩张大、小动脉及在根本上软化血管而起到降压作用。降血糖:促使组织细胞强力利用血糖,活化胰脏功能,促进胰岛细胞分泌。抗血栓:溶栓、预防血栓形成。抗肿瘤:诱导肿瘤细胞凋亡,抑制癌细胞生长,中和致癌物质。抗衰老:捕捉自由基,防止自由基对脑、心肌和血管内皮细胞的氧化损伤。调节血脂:降低甘油三酯、胆固醇,升高高密度脂蛋白。降血压、降血粘度。调节免疫:活化免疫细胞,提高抗病能力。调节肠胃:杀灭胃肠道幽门螺旋杆菌,抑制胃肠道菌群失调。杀灭病菌,抗感染,防止胃肠炎、盱炎。
茅岩莓从悬崖峭壁或高高的山坡里采取母本,通过扦插枝条成苗或组培育苗,经过三年培育后才能达到高产。高产过后开始开花,经过开花后的茅岩莓新叶又开始萎缩,又必需重新培育新幼苗,这也是让研发人员在产量上一直没有攻破的难题,正因为茅岩莓植物的这一生长个性决定了它的珍贵。起初茅岩莓植物只稀疏的生长在悬崖峭壁或高高的山坡里生长,繁殖缓慢特为稀少,以至于现在只能在特定山坡采用原始枝条才能保证茅岩莓的产品质量。我们为了能大量提供茅岩莓幼苗、并保持一致性,又不破坏当地野生植物资料,提供一种确切实可行的种苗繁殖和栽培方法。
迄今为止,在国内外尚未见关于茅岩莓组织培养快繁与模拟自然环境栽培的报道。我们通过大量试验,终于摸索出一套成熟的方法,成功实现了茅岩莓的组培快繁,可以快速培育出大量幼苗,为实现工业化人工栽培茅岩莓提供可能。茅岩莓的组培快繁技术方法的成功建立,可以为大规模人工栽培茅岩莓提供种苗,为现代科技农业提供了一种切实可行的开发项目。
发明内容
本发明采用的技术方案包括:取野生茅岩莓原始枝条经组培方法繁殖得到茅岩莓幼苗、茅岩莓幼苗栽培管理和茅岩莓大田栽培管理方法。
因此,本发明提供茅岩莓快繁与规范化栽培方法,其具体步骤包括:
(1)外植体的选取与灭菌:选用茅岩莓的假鳞茎上芽体作为培养材料,经洗洁精和自来水洗净,置流水下冲洗10-30分钟后,置于75%酒精中处理10-30秒,然后再经0.1%的升汞消毒后用无菌水冲洗,切去外植体变色的部分后备用;
(2)芽体的萌发:将灭菌处理后的芽体接种在MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照12小时,光照强度1000LX,接种后6-8天芽体的萌发,10天左右形成带叶的小苗;
(3)丛生芽诱导和增殖培养:将小苗切下转接于MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L培养基上,直至形成丛生芽, pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX。30天左右为一个生长周期,以保持高速度递增,增殖系数为5以上;
(4)生根培养:选择MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L+NAA 0.5mg/L作为生根培养基,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX,生根率达到90%以上,只需要25天左右形成完整植株;
(5)试管苗的移栽:选取根系生长良好的试管苗,放入清水中把根部的琼脂清洗干净,移载到沙土或富养土中,注意保水保温保湿,避雨移载1个月后,移载成活率达到90%以上;
(6)茅岩莓幼苗预处理:将试管苗移栽四个月后,不进行施肥和保湿,而进行喷洒促生长溶液,每亩喷洒50 kg,每次间隔10天左右,喷洒三次;
(7)病虫害防治:茅岩莓卷叶病发生,在病穴处喷施25%阿克泰水分散粒剂2500~5000倍液;茅岩莓炭疽病发生,在病穴处喷施50%多菌灵600-800倍液,每5~7天喷1次,连喷2 ~ 3次;
(8)茅岩莓大田移苗:到第二年3~4月份左右按照株距100cm、行距100cm的要求移植大田后,6~9月份用两层遮阳网进行覆盖,并采用滴管方式进行补水;
(9)除草与肥水管理:见草就拔,间隔一定时间施用茅岩莓所需肥料,每亩施入1:3人畜粪水1000 ~ 1500kg,每次间隔30天左右。5月进入雨季,要及时清沟排水,如遇长期干旱,应及时浇水,条件好的地方可以将水灌入围沟内,透水1晚(晚6点至翌日8点)后将水排放,水深以低于厢面5 cm 为宜;
(10)次年茅岩莓的管理:3月下旬~4月上旬,茅岩莓重新发芽后,每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天左右,除去杂草;
(11)采摘茅岩莓管理:以后每年6月下旬~9月上旬,采摘茅岩莓较老叶片用于茅岩莓茶叶制作,采摘茅岩莓叶片后每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天左右,除去杂草。
在一个具体实施方案中,步骤(1)中采用0.1%升汞进行消毒,消毒时间控制优选在7-15分钟。
在另一个具体实施方案中,步聚(6)中所述促生长溶液为0.1-0.5%(kg/L)的2,4-D水溶液。
技术效果
1、通过在缺水、缺肥的极恶劣生长条件下促进细胞增殖速度的处理方式,大大的消耗植物体内的营养成分,破坏茅岩莓的开花条件,延长了茅岩莓的营养生长期。
2、增殖速度快,生产周期短,设备简单,占地面积少,能节省人力、物力等,便于工厂化生产。
3、本培养方法出芽快,增殖率高,方法简单,生产成本低,可批量生产,应用价值高。
4、茅岩莓的生产可以在人为控制条件下进行,不受季节、气候条件与土壤等因素的制约,可排除病虫害的侵袭和农药残留的影响,严格控制茅岩莓的质量。
5、本发明不需要另外栽种茅岩莓苗,茅岩莓种植成本大大降低,茅岩莓叶的产量上升,其经济效益显著提高。
6、使用本发明提供的组培快繁技术得到的茅岩莓幼苗进行人工栽培,可以得到个体差异小,品质均一的茅岩莓成品。
7、可以保存茅岩莓的种质资源,同时有利于保护茅岩莓野生资源,减少对自然资源的破坏:通过对茅岩莓进行控花管理,使茅岩莓不开花,茅岩莓叶片不会变小,不会影响茅岩莓叶片的产量,因此不需要进行规模化采伐茅岩莓枝条,保护了当地野生茅岩莓的资源,更好的保护了张家界当地原生态优良环境。
具体实施方式
下面,本发明将用实施例进行进一步的说明,但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。
实施例1
取材:茅岩莓带芽根茎段为外植体
1、外植体的选取与灭菌:采自湖南张家界的茅岩莓鲜嫩芽茎段等幼嫩组织,作为培养材料,经洗洁精和自来水洗净,置流水下冲洗30分钟后,置于75%酒精中处理30秒,然后再经0.1%的升汞消毒10分钟后用无菌水冲洗,切去外植体变色的部分后备用。
2、芽体的萌发:将灭菌处理后的芽体接种在MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照12小时,光照强度1000LX;接种后6-8天芽体的萌发,10天左右形成带叶的小苗。
3、丛生芽诱导和增殖培养:将小苗切下转接于MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L培养基上,直至形成丛生芽, pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX。30天左右为一个生长周期,以保持高速度递增,增殖系数为5以上。
4、生根培养:选择MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L+NAA 0.5mg/L作为生根培养基,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX,生根率达到90%以上,只需要25天左右形成完整植株。
5、试管苗的移栽:选取根系生长良好的试管苗,放入清水中把根部的琼脂清洗干净,移载到沙土中,注意保水保温保湿,避雨移载1个月后,移载成活率达到90%以上。
6、茅岩莓幼苗预处理:将试管苗移栽四个月后,不进行施肥和保湿,而进行喷洒0.3%的2,4-D水溶液,每亩喷洒50 kg,每次间隔10天左右,喷洒三次。
7、病虫害防治:茅岩莓卷叶病发生,在病穴处喷施25%阿克泰水分散粒剂2500~5000倍液;茅岩莓炭疽病发生,在病穴处喷施50%多菌灵600-800倍液,每5~7天喷1次,连喷2 ~ 3次。
8、茅岩莓大田移苗:到第二年3月份中旬按照株距100cm、行距100cm的要求移植大田后,6~9月份用两层遮阳网进行覆盖,并采用滴管方式进行补水。
9、除草与肥水管理:见草就拔,间隔一定时间施用茅岩莓所需肥料,每亩施入1:3人畜粪水1000 ~ 1500kg,每次间隔30天左右。5月进入雨季,要及时清沟排水,如遇长期干旱,应及时浇水,条件好的地方可以将水灌入围沟内,透水1晚(晚6点至翌日8点)后将水排放,水深以低于厢面5 cm 为宜。
10、次年茅岩莓的管理:3月下旬~4月上旬,茅岩莓重新发芽后,每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天左右,除去杂草。
11、采摘茅岩莓管理:以后每年6月下旬~9月上旬,采摘茅岩莓较老叶片用于茅岩莓茶叶制作,采摘茅岩莓叶片后每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天左右,除去杂草。
实施例2
取材:茅岩莓带芽根茎段为外植体
1、外植体的选取与灭菌:采自湖南张家界的茅岩莓鲜嫩芽茎段等幼嫩组织,作为培养材料,经洗洁精和自来水洗净,置流水下冲洗20分钟后,置于75%酒精中处理30秒,然后再经0.1%的升汞消毒10分钟后用无菌水冲洗,切去外植体变色的部分后备用。
2、芽体的萌发:将灭菌处理后的芽体接种在MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照12小时,光照强度1000LX;接种后6-8天芽体的萌发,10天左右形成带叶的小苗。
3、丛生芽诱导和增殖培养:将小苗切下转接于MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L培养基上,直至形成丛生芽, pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX。30天左右为一个生长周期,以保持高速度递增,增殖系数为5以上。
4、生根培养:选择MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L+NAA 0.5mg/L作为生根培养基,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX,生根率达到90%以上,只需要25天左右形成完整植株。
5、试管苗的移栽:选取根系生长良好的试管苗,放入清水中把根部的琼脂清洗干净,移载到沙土中,注意保水保温保湿,避雨移载1个月后,移载成活率达到90%以上。
6、茅岩莓幼苗预处理:将试管苗移栽四个月后,不进行施肥和保湿,而进行喷洒0.4%的2,4-D水溶液,每亩喷洒50 kg,每次间隔10天左右,喷洒三次。
7、病虫害防治:茅岩莓卷叶病发生,在病穴处喷施25%阿克泰水分散粒剂2500~5000倍液;茅岩莓炭疽病发生,在病穴处喷施50%多菌灵600-800倍液,每5~7天喷1次,连喷2 ~ 3次。
8、茅岩莓大田移苗:到第二年4月份中旬按照株距100cm、行距100cm的要求移植大田后,6~9月份用两层遮阳网进行覆盖,并采用滴管方式进行补水。
9、除草与肥水管理:见草就拔,间隔一定时间施用茅岩莓所需肥料,每亩施入1:3人畜粪水1000 ~ 1500kg,每次间隔30天左右。5月进入雨季,要及时清沟排水,如遇长期干旱,应及时浇水,条件好的地方可以将水灌入围沟内,透水1晚(晚6点至翌日8点)后将水排放,水深以低于厢面5 cm 为宜。
10、次年茅岩莓的管理:3月下旬~4月上旬,茅岩莓重新发芽后,每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天左右,除去杂草。
11、采摘茅岩莓管理:以后每年6月下旬~9月上旬,采摘茅岩莓较老叶片用于茅岩莓茶叶制作,采摘茅岩莓叶片后每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天左右,除去杂草。

Claims (2)

1.一种茅岩莓快繁与规范化栽培方法,其具体步骤包括:
(1)外植体的选取与灭菌:选用茅岩莓的假鳞茎上芽体作为培养材料,经洗洁精和自来水洗净,置流水下冲洗10-30分钟后,置于75%酒精中处理10-30秒,然后再经0.1%的升汞消毒后用无菌水冲洗,切去外植体变色的部分后备用;
(2)芽体的萌发:将灭菌处理后的芽体接种在MS+6-BA1.2mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照12小时,光照强度1000LX,接种后6-8天芽体萌发,10天形成带叶的小苗;
(3)丛生芽诱导和增殖培养:将小苗切下转接于MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L培养基上,直至形成丛生芽, pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX,30天左右为一个生长周期,以保持高速度递增,增殖系数为5以上;
(4)生根培养:选择MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.4mg/L+NAA 0.5mg/L作为生根培养基,pH值为5.8,培养温度23-27℃,每天光照16小时,光照强度1000LX,生根率达到90%以上,只需要25天形成完整植株;
(5)试管苗的移栽:选取根系生长良好的试管苗,放入清水中把根部的琼脂清洗干净,移载到沙土或富养土中,注意保水保温保湿,避雨移载1个月后,移载成活率达到90%以上;
(6)茅岩莓幼苗预处理:将试管苗移栽四个月后,不进行施肥和保湿,而进行喷洒促生长溶液,每亩喷洒50 kg,每次间隔10天,喷洒三次,其中促生长溶液是指0.1-0.5%的2,4-D水溶液,其浓度为质量kg/体积L比,
(7)病虫害防治:茅岩莓卷叶病发生,在病穴处喷施25%阿克泰水分散粒剂2500~5000倍液;茅岩莓炭疽病发生,在病穴处喷施50%多菌灵600-800倍液,每5~7天喷1次,连喷2 ~ 3次;
(8)茅岩莓大田移苗:到第二年3~4月份按照株距100cm、行距100cm的要求移植大田后,6~9月份用两层遮阳网进行覆盖,并采用滴管方式进行补水;
(9)除草与肥水管理:见草就拔,间隔一定时间施用茅岩莓所需肥料,每亩施入1:3人畜粪水1000 ~ 1500kg,每次间隔30天;5月进入雨季,要及时清沟排水,如遇长期干旱,应及时浇水,条件好的地方将水灌入围沟内,透水1晚,1晚是指从晚6点至翌日8点,后将水排放,水深以低于厢面5 cm 为宜;
(10)次年茅岩莓的管理:3月下旬~4月上旬,茅岩莓重新发芽后,每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天,除去杂草;
(11)采摘茅岩莓管理:以后每年6月下旬~9月上旬,采摘茅岩莓较老叶片用于茅岩莓茶叶制作,采摘茅岩莓叶片后每亩施入1:3人畜粪水1000 kg,每次间隔30天,除去杂草。
2.权利要求1的方法,步骤(1)中采用0.1%升汞进行消毒,消毒时间控制在7-15分钟。
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