CN108185160A - 一种肉牛饲料的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及肉牛饲养领域，具体涉及一种肉牛饲料的制备方法。本发明添加富含多种营养成分的松针粉，如脂类物质、含氮化合物、粗纤维、可溶性碳水化合物、矿物质、维C、维E和胡萝卜素A等，延胡索可增强肉牛体质抗逆能力，减小应激原，添加微量元素，补充肉牛生长过程中所需营养素，增加免疫力，添加含有大蒜素的大蒜皮和大蒜梗，可增加肉牛胃液分泌和胃肠蠕动，刺激食欲及促进消化，从而促进肉牛生长，同时大蒜素可对有害菌有明显的抑制杀灭作用，但对多数有益菌则无抑制杀灭作用防治多种疾病，提高肉牛免疫力，添加啤酒糟，散发着独特的香味，使肉牛立即产生食欲感，使之迅速摄食，增强了饲料的适口性，起到了诱食增食的作用。

Description

一种肉牛饲料的制备方法
技术领域
本发明涉及肉牛饲养领域，具体涉及一种肉牛饲料的制备方法。
背景技术
随着经济社会的快速发展，人们对于牛肉及其制品的需求越来越大，这就给肉牛养殖企业带来的巨大的商机。
牛肉含有丰富的蛋白质、氨基酸以及微量元素等成分，具有极高的营养价值，已成为消费者家常食用肉类之一，牛肉消费量的逐渐增加带动了养殖业的发展，牛的养殖量越来越大，目前养牛场为了加快肉牛生长速度、追求更大的经效益，在饲料中添加多种促进肉牛生长或者增强体抗力的药物，包括一些激素类或抗生素类的物质。部分药物在一定时间内会残留于肉牛体内，对牛肉食用者的健康造成较大影响。这些措施一是不能有效促进肉牛生长，二是大大降低了肉牛的免疫力，反而增大了肉牛患病的风险。由于牛的养殖周期长，饲料成本较高，养殖户收益并不理想，在一定程度上限制了肉牛养殖业的发展。除此之外，如今常用的肉牛饲料营养比较单一，极易造成肉牛的营养物质缺乏，而且普遍存在饲料转化率较低、影响肉牛食欲等问题，不仅造成饲料浪费，而且引起肉牛养殖整体效益水平下降，给农户带来损失。牛的生长阶段通常可分为哺乳期、架子前期、架子后期和育肥期。育肥期的一般指12-18月龄的肉牛，这个时期的肉牛相对生长强度大，重点促进骨骼、内脏和肌肉的生长。但现有的肉牛饲料，普遍存在适口性差，营养不均衡的缺点，影响育肥期的肉牛的生长。
总结来说，现如今的肉牛饲料主要存在着以下的几个缺点：（1）在肉牛的养殖过程中，大多数农户会在成品饲料中添加激素类药物或抗生素类药物以缩短养殖周期，却导致了肉牛养殖质量下降、有药物残留等问题。（2）如今常用的肉牛饲料营养比较单一，适口性差，营养不均衡，极易造成肉牛的营养物质缺乏，而且普遍存在饲料转化率较低、影响肉牛食欲等问题，造成饲料浪费的问题。
因此，我们有必要重新研制出一种新型的肉牛饲料，以此来解决现如今肉牛养殖行业所存在的问题，更好的适应于社会与有关部门的需求。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：本发明的目的是针对目前肉牛饲料营养不全面，不能显著刺激肉牛体重的增长和肉牛肉质的提高，提供一种肉牛饲料的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
一种肉牛饲料的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟290~300份，辣蓼5~10份，木薯渣155~200份，碳酸钙0.5~0.8份，营养盐溶液100~120份混合，调节pH至5.0~5.2，搅拌均匀，灭菌，得灭菌后混合物，取黑曲霉培养液、酿酒酵母培养液和地衣芽孢杆菌培养液混合，得混合菌液，取混合菌液接种至灭菌后混合物中，发酵，取发酵物干燥，粉碎过筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽加入正己烷混合，超声，旋转蒸发，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，加热回流，旋转蒸发，得皂化液，冷却，取皂化液加入水混合，用正己烷萃取2~3次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至2~3，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液2~3次，合并萃取液，调节pH至7~7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）取尿素加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，搅拌混合，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤2~3次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水混合，搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入富集油脂，研磨6~7次，得乳化液，喷雾干燥，得油脂微囊，备用；
（4）按质量份数计，取松针粉8~12份，延胡索5~7份，大蒜皮2~3份，蒜梗4~6份，啤酒糟25~30份，复合微量元素12~15份，步骤（1）备用的过筛颗粒80~120份，步骤（3）备用的油脂微囊50~60份混合均匀，于35~45℃搅拌30~40min，得肉牛饲料。
所述步骤（1）中黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，25~30℃培养5~7d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，25~33℃、180rpm培养12~15h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，30~35℃、180rpm振荡培养12~18h，得地衣芽胞杆菌培养液。
所述步骤（1）中营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖50~60份，尿素75~80份，磷酸二氢钾25~30份，水100~150份混合。
所述步骤（1）中黑曲霉培养液、酿酒酵母培养液和地衣芽孢杆菌培养液的质量比为5：5：1；混合菌液的接种量为13%，发酵条件为28~35℃发酵培养4~6d。
所述步骤（2）中预处理的瓜蒌籽为：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛；预处理瓜蒌籽与正己烷的质量比为1：9；超声条件：58~60℃、150~180W超声60~65min；瓜蒌籽油、氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液的质量比为20：1：24，80~85℃加热回流1~2h；皂化液与水的质量比为1：4~6。
所述步骤（3）中尿素、质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸的质量比为1：7~9：4，搅拌条件：70~75℃搅拌混合40~60min；β-环糊精、明胶和水的质量比为5：4：5，于50~55℃加入β-环糊精质量70~80%的富集油脂。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明通过麦槽、辣蓼和木薯渣共同发酵，发酵产物中富含丰富的黄酮类物质，蛋白质，粗纤维等等，黄酮具有抗微生物、杀虫、抗氧化的作用，肉牛食入后提高了体内活性氧自由基，可保护肉牛免受自由基的不良作用，自由基的消除，能提高机体的抗病力等作用，可调动动物体非特异性抗微生物的潜能，且毒副作用小，无残留，另一方面通过混菌发酵麦槽和木薯渣，提高饲料添加剂的活性成分含量，添加高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌进行蛋白酶生产，提高产物蛋白酶活力，进而提升肉牛饲料的营养价值，由于是固态发酵，因此选用麦糟作为介质以达到物料需具有疏松性的要求，而且麦糟的蛋白质含量较高，可以用作氮源，木薯渣具有高含量的淀粉，所选黑曲霉菌株具有高产淀粉酶和糖化酶的特点，有益于消化率低的蛋白质和直链淀粉的发酵降解促进消化，以在获得高含量黄酮成分的基础上获得最大化的蛋白含量，摄取足够的蛋白和纤维，有利于肉牛肉质的提升；
（2）本发明通过对瓜蒌籽中油脂的提取，通过尿素包合，得到固相的尿素包合富集油脂，脂肪酸的不饱和键和尿素分子的特殊结构，依靠微弱的范德华力进行选择性包合，且过程为可逆反应，饱和脂肪酸和单不饱和脂肪优先被选择包合进尿素四面体结构形成包合物结晶，而较难被包合的亚麻酸、亚油酸等不饱和脂肪酸则留在溶液中被富集，山瓜蒌籽中含有丰富的脂肪、蛋白质、粗纤维及碳水化合物，且脂肪酸多为油酸、亚油酸、亚麻酸等不饱和脂肪酸，具有极高的营养价值和保健价值，但因为油脂流动性较差、与水不混溶等特点，使得其喂养肉牛时具有一定得困难，利用微胶囊技术，将油脂微滴包埋在稳定的可食用壁材里，制成一种固体粉末油脂，粉末油脂具有良好的流散性和稳定性，包埋后的粉末油脂能一定程度上避免外界不良环境，并可掩盖本身的不良风味，促进肉牛对不饱和脂肪酸的摄取，增加肉牛生长所需的营养元素；
（3）本发明还添加松针粉，其富含多种营养成分，如脂类物质、含氮化合物、粗纤维、可溶性碳水化合物、矿物质、维生素C和维生素E、胡萝卜素A等， 延胡索具有增强肉牛体质抗逆能力，减小应激原的作用，添加微量元素，补充肉牛生长过程中所需要营养素，增加免疫力，添加大蒜皮和大蒜梗，含有的大蒜素有增加肉牛胃液分泌和胃肠蠕动，刺激食欲及促进消化的作用，从而促进肉牛生长，显著提高饲料报酬，同时大蒜皮和大蒜梗中含有的大蒜素可对有害菌有明显的抑制杀灭作用，但对多数有益菌则无抑制杀灭作用防治多种疾病，提高肉牛免疫力，添加啤酒糟，散发着独特的香味，使肉牛立即产生食欲感，使之迅速摄食，增强了饲料的适口性，起到了诱食增食的作用。
具体实施方式
黑曲霉、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌：实验室-80℃斜面保存。
黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，25~30℃培养5~7d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，25~33℃、180rpm培养12~15h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，30~35℃、180rpm振荡培养12~18h，得地衣芽胞杆菌培养液。
营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖50~60份，尿素75~80份，磷酸二氢钾25~30份，水100~150份混合。
瓜蒌籽预处理：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛。
β-环糊精：购于上海庭璞实业有限公司。
复合微量元素：购于北京优利保生物技术有限公司。
一种肉牛饲料的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟290~300份，辣蓼5~10份，木薯渣155~200份，碳酸钙0.5~0.8份，营养盐溶液100~120份混合，调节pH至5.0~5.2，搅拌均匀，121℃灭菌20min，得灭菌后混合物，取黑曲霉、酿酒酵母和地衣芽孢杆菌培养液按质量比5：5：1混合，得混合菌液，按13%接种量接种至灭菌后混合物中，于28~35℃发酵培养4~6d，取发酵物干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽按质量比1：9加入正己烷混合，于58~60℃、150~180W超声60~65min，旋转蒸发回收正己烷，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油按质量比20：1：24加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，80~85℃加热回流1~2h，旋转蒸发去甲醇，得皂化液，冷却至室温，取皂化液按质量比1：4~6加入水混合，用正己烷萃取2~3次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至2~3，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液2~3次，合并萃取液，调节pH至7~7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）取尿素按质量比1：7~9：4加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，于70~75℃搅拌混合40~60min，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤2~3次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水按质量比5：4：5混合，于50~55℃搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入β-环糊精质量70~80%的富集油脂，研磨6~7次，得乳化液，进风温度140℃、出风温度90℃喷雾干燥，得油脂微囊；
（4）按质量份数计，取松针粉8~12份，延胡索5~7份，大蒜皮2~3份，蒜梗4~6份，啤酒糟25~30份，复合微量元素12~15份，步骤（1）备用的过筛颗粒80~120份，步骤（3）备用的油脂微囊50~60份混合均匀，于35~45℃搅拌30~40min，得肉牛饲料。
实施例1
黑曲霉、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌：实验室-80℃斜面保存。
黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，25℃培养5d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，25℃、180rpm培养12h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，30℃、180rpm振荡培养12h，得地衣芽胞杆菌培养液。
营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖50份，尿素75份，磷酸二氢钾25份，水100份混合。
瓜蒌籽预处理：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛。
β-环糊精：购于上海庭璞实业有限公司。
复合微量元素：购于北京优利保生物技术有限公司。
一种肉牛饲料的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟290份，辣蓼5份，木薯渣155份，碳酸钙0.5份，营养盐溶液100份混合，调节pH至5.0，搅拌均匀，121℃灭菌20min，得灭菌后混合物，取黑曲霉、酿酒酵母和地衣芽孢杆菌培养液按质量比5：5：1混合，得混合菌液，按13%接种量接种至灭菌后混合物中，于28℃发酵培养4d，取发酵物干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽按质量比1：9加入正己烷混合，于58℃、150W超声60min，旋转蒸发回收正己烷，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油按质量比20：1：24加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，80℃加热回流1h，旋转蒸发去甲醇，得皂化液，冷却至室温，取皂化液按质量比1：4加入水混合，用正己烷萃取2次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至2，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液2次，合并萃取液，调节pH至7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）取尿素按质量比1：7：4加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，于70℃搅拌混合40min，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤2次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水按质量比5：4：5混合，于50℃搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入β-环糊精质量70%的富集油脂，研磨6次，得乳化液，进风温度140℃、出风温度90℃喷雾干燥，得油脂微囊；
（4）按质量份数计，取松针粉8份，延胡索5份，大蒜皮2份，蒜梗4份，啤酒糟25份，复合微量元素12份，步骤（1）备用的过筛颗粒80份，步骤（3）备用的油脂微囊50份混合均匀，于35℃搅拌30min，得肉牛饲料。
实施例2
黑曲霉、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌：实验室-80℃斜面保存。
黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，27℃培养6d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，30℃、180rpm培养13h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，33℃、180rpm振荡培养17h，得地衣芽胞杆菌培养液。
营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖55份，尿素78份，磷酸二氢钾27份，水120份混合。
瓜蒌籽预处理：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛。
β-环糊精：购于上海庭璞实业有限公司。
复合微量元素：购于北京优利保生物技术有限公司。
一种肉牛饲料的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟295份，辣蓼7份，木薯渣175份，碳酸钙0.6份，营养盐溶液110份混合，调节pH至5.1，搅拌均匀，121℃灭菌20min，得灭菌后混合物，取黑曲霉、酿酒酵母和地衣芽孢杆菌培养液按质量比5：5：1混合，得混合菌液，按13%接种量接种至灭菌后混合物中，于30℃发酵培养5d，取发酵物干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽按质量比1：9加入正己烷混合，于59℃、170W超声63min，旋转蒸发回收正己烷，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油按质量比20：1：24加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，83℃加热回流1h，旋转蒸发去甲醇，得皂化液，冷却至室温，取皂化液按质量比1：5加入水混合，用正己烷萃取2次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至2，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液2次，合并萃取液，调节pH至7，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）取尿素按质量比1：7：4加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，于73℃搅拌混合50min，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤2次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水按质量比5：4：5混合，于52℃搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入β-环糊精质量75%的富集油脂，研磨6次，得乳化液，进风温度140℃、出风温度90℃喷雾干燥，得油脂微囊；
（4）按质量份数计，取松针粉10份，延胡索6份，大蒜皮2份，蒜梗5份，啤酒糟27份，复合微量元素13份，步骤（1）备用的过筛颗粒100份，步骤（3）备用的油脂微囊55份混合均匀，于40℃搅拌35min，得肉牛饲料。
实施例3
黑曲霉、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌：实验室-80℃斜面保存。
黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，30℃培养7d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，33℃、180rpm培养15h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，35℃、180rpm振荡培养18h，得地衣芽胞杆菌培养液。
营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖60份，尿素80份，磷酸二氢钾30份，水150份混合。
瓜蒌籽预处理：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛。
β-环糊精：购于上海庭璞实业有限公司。
复合微量元素：购于北京优利保生物技术有限公司。
一种肉牛饲料的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟300份，辣蓼10份，木薯渣200份，碳酸钙0.8份，营养盐溶液120份混合，调节pH至5.2，搅拌均匀，121℃灭菌20min，得灭菌后混合物，取黑曲霉、酿酒酵母和地衣芽孢杆菌培养液按质量比5：5：1混合，得混合菌液，按13%接种量接种至灭菌后混合物中，于35℃发酵培养6d，取发酵物干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽按质量比1：9加入正己烷混合，于60℃、180W超声65min，旋转蒸发回收正己烷，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油按质量比20：1：24加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，85℃加热回流2h，旋转蒸发去甲醇，得皂化液，冷却至室温，取皂化液按质量比1：6加入水混合，用正己烷萃取3次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至3，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液3次，合并萃取液，调节pH至7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）取尿素按质量比1：9：4加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，于75℃搅拌混合60min，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤3次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水按质量比5：4：5混合，于55℃搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入β-环糊精质量80%的富集油脂，研磨7次，得乳化液，进风温度140℃、出风温度90℃喷雾干燥，得油脂微囊；
（4）按质量份数计，取松针粉12份，延胡索7份，大蒜皮3份，蒜梗6份，啤酒糟30份，复合微量元素15份，步骤（1）备用的过筛颗粒120份，步骤（3）备用的油脂微囊60份混合均匀，于45℃搅拌40min，得肉牛饲料。
对比例1
黑曲霉、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌：实验室-80℃斜面保存。
黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，30℃培养7d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，33℃、180rpm培养15h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，35℃、180rpm振荡培养18h，得地衣芽胞杆菌培养液。
营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖60份，尿素80份，磷酸二氢钾30份，水150份混合。
瓜蒌籽预处理：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛。
β-环糊精：购于上海庭璞实业有限公司。
复合微量元素：购于北京优利保生物技术有限公司。
一种肉牛饲料的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟300份，辣蓼10份，木薯渣200份，碳酸钙0.8份，营养盐溶液120份混合，调节pH至5.2，搅拌均匀，121℃灭菌20min，得灭菌后混合物，取黑曲霉、酿酒酵母和地衣芽孢杆菌培养液按质量比5：5：1混合，得混合菌液，按13%接种量接种至灭菌后混合物中，于35℃发酵培养6d，取发酵物干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽按质量比1：9加入正己烷混合，于60℃、180W超声65min，旋转蒸发回收正己烷，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油按质量比20：1：24加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，85℃加热回流2h，旋转蒸发去甲醇，得皂化液，冷却至室温，取皂化液按质量比1：6加入水混合，用正己烷萃取3次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至3，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液3次，合并萃取液，调节pH至7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）按质量份数计，取松针粉12份，延胡索7份，大蒜皮3份，蒜梗6份，啤酒糟30份，复合微量元素15份，步骤（1）备用的过筛颗粒120份，于45℃搅拌40min，得肉牛饲料。
对比例2
黑曲霉、酿酒酵母、地衣芽胞杆菌：实验室-80℃斜面保存。
黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，30℃培养7d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，33℃、180rpm培养15h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，35℃、180rpm振荡培养18h，得地衣芽胞杆菌培养液。
营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖60份，尿素80份，磷酸二氢钾30份，水150份混合。
瓜蒌籽预处理：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛。
β-环糊精：购于上海庭璞实业有限公司。
复合微量元素：购于北京优利保生物技术有限公司。
一种肉牛饲料的制备方法，包括如下步骤：
（1）按质量份数计，取麦糟300份，辣蓼10份，木薯渣200份，碳酸钙0.8份，营养盐溶液120份混合，调节pH至5.2，搅拌均匀，121℃灭菌20min，得灭菌后混合物，取黑曲霉、酿酒酵母和地衣芽孢杆菌培养液按质量比5：5：1混合，得混合菌液，按13%接种量接种至灭菌后混合物中，于35℃发酵培养6d，取发酵物干燥，粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，备用；
（2）取预处理瓜蒌籽按质量比1：9加入正己烷混合，于60℃、180W超声65min，旋转蒸发回收正己烷，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油按质量比20：1：24加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，85℃加热回流2h，旋转蒸发去甲醇，得皂化液，冷却至室温，取皂化液按质量比1：6加入水混合，用正己烷萃取3次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至3，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液3次，合并萃取液，调节pH至7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
（3）取尿素按质量比1：9：4加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，于75℃搅拌混合60min，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤3次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水按质量比5：4：5混合，于55℃搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入β-环糊精质量80%的富集油脂，研磨7次，得乳化液，进风温度140℃、出风温度90℃喷雾干燥，得油脂微囊；
（4）按质量份数计，取松针粉12份，蒜梗6份，啤酒糟30份，复合微量元素15份，步骤（1）备用的过筛颗粒120份，步骤（3）备用的油脂微囊60份混合均匀，于45℃搅拌40min，得肉牛饲料。
对比例3：北京某生物技术有限公司生产的肉牛饲料
方法：选择60头12-18月龄的肉牛，肉牛称重并分为6组，各使用实施例与对比例所制备的肉牛饲料，每天喂食4-6次，每次的饲喂量以肉牛半小时内吃完为限，试验持续10天，试验期间，记录肉牛试验初期和期末的称量体重，并记录每天的采食量、腹泻率和日增重。
肉牛饲料具体检测情况如表1
表1
检测项目 实施例1 实施例2 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
试验结束平均体重（kg） 147.07±1.20 152.5±1.40 169.68±1.55 140.01±2.2 139.05±1.35 127.07±1.1
平均日增重（kg） 1.56±29.0 1.62±39.32 1.98±49.58 1.25±27.85 1.05±31.52 0.97±27.0
平均采食量（kg/天） 7.325±82.64 7.85±79.42 8.88±91.35 7.0±82.6 6.95±22.64 6.25±22.64
腹泻率 5.68 4.81 1.32 5.21 4.88 6.88
注：初始平均体重（kg）：实施例1为100.07±1.20，实施例2为101.5±1.40，实施例3为101.68±1.55，对比例1为100.01±2.2，对比例2为102.05±1.35，对比例3为101.07±1.1。
由上可知，本发明所制备的肉牛饲料可以有效的促进肉牛的生长发育，且能保证肉牛少腹泻的情况，是一种安全且高效的肉牛饲料，值得推广和使用。

Claims (6)

1.一种肉牛饲料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：
按质量份数计，取麦糟290~300份，辣蓼5~10份，木薯渣155~200份，碳酸钙0.5~0.8份，营养盐溶液100~120份混合，调节pH至5.0~5.2，搅拌均匀，灭菌，得灭菌后混合物，取黑曲霉培养液、酿酒酵母培养液和地衣芽孢杆菌培养液混合，得混合菌液，取混合菌液接种至灭菌后混合物中，发酵，取发酵物干燥，粉碎过筛，收集过筛颗粒，备用；
取预处理瓜蒌籽加入正己烷混合，超声，旋转蒸发，得瓜蒌籽油，取瓜蒌籽油加入氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液，加热回流，旋转蒸发，得皂化液，冷却，取皂化液加入水混合，用正己烷萃取2~3次，收集萃取液上层油相，取萃取液下层水相，调节pH至2~3，静置分层，取上清液，再用正己烷萃取上清液2~3次，合并萃取液，调节pH至7~7.2，抽滤，取抽滤液，旋转蒸发，合并萃取液上层油相和旋转蒸发后抽滤液，得混合脂肪酸；
取尿素加入质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸，搅拌混合，冷却，抽滤，取抽滤结晶物用正己烷洗涤2~3次，旋转蒸发，得富集油脂，取 β-环糊精、明胶和水混合，搅拌溶解，倒入胶体磨，再加入富集油脂，研磨6~7次，得乳化液，喷雾干燥，得油脂微囊，备用；
按质量份数计，取松针粉8~12份，延胡索5~7份，大蒜皮2~3份，蒜梗4~6份，啤酒糟25~30份，复合微量元素12~15份，步骤（1）备用的过筛颗粒80~120份，步骤（3）备用的油脂微囊50~60份混合均匀，于35~45℃搅拌30~40min，得肉牛饲料。
2.根据权利要求1所述的肉牛饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中黑曲霉培养液：取黑曲霉接种至PDA液体培养基，25~30℃培养5~7d，挑取培养液按质量比1：10加入质量分数0.1%吐温-80洗脱孢子，得黑曲霉培养液；酿酒酵母菌培养液：取酿酒酵母菌接种至YPD液体培养基，25~33℃、180rpm培养12~15h，得酿酒酵母培养液；地衣芽孢杆菌培养液：取地衣芽孢杆菌接种至液体LB培养基，30~35℃、180rpm振荡培养12~18h，得地衣芽胞杆菌培养液。
3.根据权利要求1所述的肉牛饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中营养盐溶液：按质量份数计，葡萄糖50~60份，尿素75~80份，磷酸二氢钾25~30份，水100~150份混合。
4.根据权利要求1所述的肉牛饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中黑曲霉培养液、酿酒酵母培养液和地衣芽孢杆菌培养液的质量比为5：5：1；混合菌液的接种量为13%，发酵条件为28~35℃发酵培养4~6d。
5.根据权利要求1所述的肉牛饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中预处理的瓜蒌籽为：将烘干的瓜蒌籽粉粹，过 80目筛；预处理瓜蒌籽与正己烷的质量比为1：9；超声条件：58~60℃、150~180W超声60~65min；瓜蒌籽油、氢氧化钠和质量分数为70%的甲醇溶液的质量比为20：1：24，80~85℃加热回流1~2h；皂化液与水的质量比为1：4~6。
6.根据权利要求1所述的肉牛饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中尿素、质量分数为80%的甲醇溶液和混合脂肪酸的质量比为1：7~9：4，搅拌条件：70~75℃搅拌混合40~60min；β-环糊精、明胶和水的质量比为5：4：5，于50~55℃加入β-环糊精质量70~80%的富集油脂。
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