CN104026331A - 老陈醋醋糟饲料的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明为一种老陈醋醋糟饲料的制备方法，解决了醋糟因蛋白质低、纤维含量高、质地较疏松、不易制粒等特点，在动物饲料生产中应用受到局限的问题。本发明是通过筛选可以提高醋糟蛋白质、降低粗纤维和改善其适口性的微生物复合菌对醋糟进行发酵，使其在动物生产中更广泛的应用，提高动物对醋糟的利用率，降低养殖成本，使山西省老陈醋醋糟变废为宝，增加农民经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及动物营养及非常规饲料资源开发利用技术领域，具体是一种老陈醋醋糟饲料的制备方法。
背景技术
山西是产醋大省，山西老陈醋醋糟资源丰富。山西老陈醋酿造的主要原料是以高梁、豌豆、小米、玉米、大米、小麦麸等优质的粮食作物为主以及以谷糠、稻壳等辅料。醋糟为酿醋后所得的副产物，营养丰富，可以作为畜禽饲料合理利用，一方面变废为宝，改善环境，另一方面，缓解了人畜争粮的紧张局面。目前大多周边养殖户采用直接饲喂，或晒干后添加到日粮中使用，效果不佳。鉴于醋糟产量大，相对蛋白质含量低，粗纤维含量高，质地疏松，不易制粒，利用量受到一定局限，所以利用微生物发酵醋糟目的是改善其营养结构和适口性，提高醋糟可利用率，利用山西老陈醋丰富的地方非常规饲料资源，降低养殖成本，增加农民经济效益。
发明内容
本发明的目的是为了解决上述现有技术中存在的问题，而提供一种老陈醋醋糟饲料的制备方法。本发明就是通过筛选可以提高醋糟蛋白质、降低粗纤维和改善其适口性的微生物复合菌对醋糟进行发酵，使其在动物生产中更广泛的应用，提高动物对醋糟的利用率，降低养殖成本，也能使山西省老陈醋醋糟变废为宝。
本发明是通过如下技术方案实现的：
一种老陈醋醋糟饲料的制备方法，包括如下步骤：
1）菌种筛选
筛选黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌作为发酵菌种。
筛选出合适的菌种是发酵的前提，申请人以醋糟（配有一定比例豆粕和麸皮及葡萄糖等营养物）为底物，对霉菌、酵母菌、细菌等进行筛选试验研究，确定了符合山西老陈醋醋糟用作饲料的发酵菌种，分别为黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌，这些均是重要的发酵工业菌种。黑曲霉、米曲霉、酵母菌均喜欢偏酸性和潮湿的环境，繁殖能力很强，前二者为好氧性，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、聚糖酶，后者为兼性厌氧，进行好氧发酵时，产生大量的菌体蛋白，在缺氧条件下发酵积累酒精；乳酸菌利用碳水化合物发酵产生乳酸，改善适口性，定植在动物体内，有效地抑制有害菌的生长，减少肠道内有害菌产生的毒素对机体的毒害，提高免疫力，提供营养物质，改善胃肠道功能，被广泛应用于食品和饲料行业。芽孢杆菌能产生多种消化酶，提高动物对营养物质的消化吸收，具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶，如果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等，这些酶能够破坏植物饲料细胞的细胞壁，促使细胞的营养物质释放出来，并能消除饲料中的抗营养因子，减少抗营养因子对动物消化利用的障碍。
2）菌种扩大培养
取选好的菌种先通过液体培养基进行一级扩培，再通过醋糟培养基进行二级扩培，最后得到对应的菌曲，即黑曲霉菌曲、米曲霉菌曲、酵母菌菌曲、乳酸菌菌曲和芽孢杆菌菌曲；
液体培养基培养是指在液体培养基内部进行的微生物培养过程，也称做液体深层发酵。菌种通过液体培养基进行一级扩培具体步骤为：黑曲霉、米曲霉和酵母菌的培养基由下列原料组成：葡萄糖 20g、蛋白胨 10g、酵母粉 5g、琼脂 15g、蒸馏水 1000ml，PH值为6.5-6.8；乳酸菌培养基由下列原料组成：蛋白胨 10g、牛肉膏 10g、酵母浸膏 5.0g、葡萄糖 20g、土温80 1.0ml、磷酸氢二钾 2.0g、C2H3NaO2﹒3H2O 0.2g 、MgSO4﹒7H2O 5.0g、柠檬酸二铵 2.0g、MnSO4﹒4H2O 0.05g、琼脂 25g、蒸馏水 1000ml，PH值为6.0-6.5；芽孢杆菌培养基由下列原料组成：蛋白胨 10.0g、牛肉提取物 3.0g、NaCl 5.0g、琼脂 15.0g、蒸馏水 1000ml，PH值为7.0；将黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌灭菌后分别接种于对应的培养基中，在频率为90-110r/min、温度为30-32℃的条件下震荡培养10-24h，最后分别得到黑曲霉液体菌液、米曲霉液体菌液、酵母菌液体菌液、乳酸菌液体菌液和芽孢杆菌液体菌液，并将其贮存于4℃冰箱中待醋糟培养基二级扩培使用。
菌种通过醋糟培养基二级扩培具体步骤为：醋糟培养基由醋糟、麸皮、豆粕、葡萄糖、小苏打按质量比为80:18:1:1:0.2混合灭菌制成，将一级扩培好的黑曲霉液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到黑曲霉菌曲，其中，黑曲霉液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的米曲霉液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到米曲霉菌曲，其中，米曲霉液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的酵母菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到酵母菌菌曲，其中，酵母菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的乳酸菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中压瓷密闭培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到乳酸菌菌曲，其中，乳酸菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的芽孢杆菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中压瓷密闭培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到芽孢杆菌菌曲，其中，芽孢杆菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10。
3）醋糟自然发酵
将鲜醋糟（含水量约为65%）堆成长条垛形状，自然堆积不压实，利用其中固有的微生物发酵产热，醋糟垛温度会升高至65-70℃，保持该温度1-2天后进行翻搅，之后重新堆积成长条垛形状继续发酵产热，65-70℃的温度下再保持1-2天，最后得到自然发酵醋糟（含水率约为50%），这个过程即达到了巴氏灭菌的目的。
4）加营养物
取步骤3）中自然发酵醋糟并向其内加入麸皮、豆粕、葡萄糖和小苏打，其中，醋糟（以醋糟的风干值计）、麸皮、豆粕、葡萄糖和小苏打的质量比为80:18:1:1:0.2，搅拌均匀得到配方醋糟，PH值为6.5-7.0。
5）有氧发酵
取步骤2）中得到的黑曲霉菌曲、米曲霉菌曲和酵母菌菌曲，并按质量比为1：1：1混合均匀，得到复合菌曲A曲，将A曲接种于步骤4）得到的配方醋糟中，A曲与配方醋糟的质量比为1:10，混合均匀后进行为期7-10天的有氧发酵；有氧发酵主要是黑曲霉等菌种可以产生淀粉酶、糖化酶等功能，裂解大分子有机物和难溶无机物，便于动物吸收利用，改善营养结构，提高动物饲料消化利用率。
6）厌氧发酵
取步骤2）中得到的芽孢杆菌菌曲和乳酸菌菌曲，并按质量比为1：1混合均匀，得到复合菌曲B曲，将B曲接种于步骤5）有氧发酵好的配方醋糟中，B曲与配方醋糟的质量比为1:10，混合均匀后装入容器压瓷密闭，进行为期10-15天的厌氧发酵；厌氧发酵主要是乳酸菌等微生物大量生长繁殖，提高产品游离氨基酸、活性酶以及生物活性小肽等，提高其营养价值，改良产品的适口性。
7）晾晒
将步骤6）中厌氧发酵好的醋糟开封后在阴凉通风处晾干，就得到了本发明所述的老陈醋醋糟饲料，最后装袋即可。
老陈醋醋糟发酵前后营养成分对比如下表1：
表1 醋糟、醋糟+营养物发酵前和发酵后营养成分比较 （风干样）
从表1可以得出，本发明发酵醋糟与现有市购粗饲料发酵剂发酵醋糟营养成分变化比较结果如下表2：
表2
由表2可以得出，本发明与现有技术相比较明显的有益效果为：粗蛋白、钙提高的幅度大，总能、粗脂肪和中性洗涤纤维降低的幅度较大，还可以不同程度的降低粗纤维和中性洗涤纤维，这些有益效果利于动物消化吸收。
同等比例配入肉兔日粮中，首先从物理性状来看，本发明发酵醋糟配合饲料制粒效果和适口性均好于现有技术发酵醋糟配合饲料，其次平均日增重提高了19.87%，平均料肉比降低了13.89%。
具体实施方式
实施例1
一种老陈醋醋糟饲料的制备方法，包括如下步骤：
1）菌种筛选
筛选黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌作为发酵菌种。
2）菌种扩大培养
取筛选好的菌种先通过液体培养基进行一级扩培，再通过醋糟培养基进行二级扩培，最后得到对应的菌曲，即黑曲霉菌曲、米曲霉菌曲、酵母菌菌曲、乳酸菌菌曲和芽孢杆菌菌曲。
菌种通过液体培养基一级扩培具体步骤为：黑曲霉、米曲霉和酵母菌的培养基由下列原料组成：葡萄糖 20g、蛋白胨 10g、酵母粉 5g、琼脂 15g、蒸馏水 1000ml，PH值为6.5-6.8；乳酸菌培养基由下列原料组成：蛋白胨 10g、牛肉膏 10g、酵母浸膏 5.0g、葡萄糖 20g、土温80 1.0ml、磷酸氢二钾 2.0g、C2H3NaO2﹒3H2O 0.2g 、MgSO4﹒7H2O 5.0g、柠檬酸二铵 2.0g、MnSO4﹒4H2O 0.05g、琼脂 25g、蒸馏水 1000ml，PH值为6.0-6.5；芽孢杆菌培养基由下列原料组成：蛋白胨 10.0g、牛肉提取物 3.0g、NaCl 5.0g、琼脂 15.0g、蒸馏水 1000ml，PH值为7.0；将黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌灭菌后分别接种于对应的培养基中，在频率为90-110r/min、温度为30-32℃的条件下震荡培养10-24h，最后分别得到黑曲霉液体菌液、米曲霉液体菌液、酵母菌液体菌液、乳酸菌液体菌液和芽孢杆菌液体菌液，并将其贮存于4℃冰箱中待醋糟培养基二级扩培使用；菌种通过醋糟培养基二级扩培具体步骤为：醋糟培养基由醋糟、麸皮、豆粕、葡萄糖、小苏打按质量比为80:18:1:1:0.2混合灭菌制成，将一级扩培好的黑曲霉液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到黑曲霉菌曲，其中，黑曲霉液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的米曲霉液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到米曲霉菌曲，其中，米曲霉液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的酵母菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到酵母菌菌曲，其中，酵母菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的乳酸菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中压瓷密闭培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到乳酸菌菌曲，其中，乳酸菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的芽孢杆菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中压瓷密闭培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到芽孢杆菌菌曲，其中，芽孢杆菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10。
3）醋糟自然发酵
将鲜醋糟（含水量约为65%）堆成宽2m、高1.5m的长条垛形状（长度根据醋糟量多少或场地大小而定），自然堆积不压实，利用其中固有的微生物发酵产热，醋糟垛温度会升高至65-70℃，保持该温度1-2天后进行翻搅，之后重新堆积成长条垛形状继续发酵产热，65-70℃的温度下再保持1-2天，最后得到自然发酵醋糟（含水率约为50%），这个过程即达到了巴氏灭菌的目的。
4）加营养物
取步骤3）中自然发酵醋糟并向其内加入麸皮、豆粕、葡萄糖和小苏打，其中，醋糟、麸皮、豆粕、葡萄糖和小苏打的质量比为80:18:1:1:0.2，搅拌均匀得到配方醋糟。
5）有氧发酵
取步骤2）中得到的黑曲霉菌曲、米曲霉菌曲和酵母菌菌曲，并按质量比为1：1：1混合均匀，得到复合菌曲A曲，将A曲接种于步骤4）得到的配方醋糟中，A曲与配方醋糟的质量比为1:10，混合均匀后进行为期7-10天的有氧发酵。
6）厌氧发酵
取步骤2）中得到的芽孢杆菌菌曲和乳酸菌菌曲，并按质量比为1：1混合均匀，得到复合菌曲B曲，将B曲接种于步骤5）有氧发酵好的配方醋糟中，B曲与配方醋糟的质量比为1:10，混合均匀后装入容器内压瓷密闭，进行为期10-15天的厌氧发酵；
7）晾晒
将步骤6）中厌氧发酵好的醋糟开封后在阴凉通风处晾干，装袋即可。
Claims (2)
1.一种老陈醋醋糟饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）菌种筛选
筛选黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌作为发酵菌种；
2）菌种扩大培养
取选好的菌种先通过液体培养基进行一级扩培，再通过醋糟培养基进行二级扩培，最后得到对应的菌曲，即黑曲霉菌曲、米曲霉菌曲、酵母菌菌曲、乳酸菌菌曲和芽孢杆菌菌曲；
3）醋糟自然发酵
将鲜醋糟堆成长条垛形状，自然堆积不压实，利用其中固有的微生物发酵产热，保持1-2天后进行翻搅，之后重新堆积成长条垛形状继续发酵产热，保持1-2天，最后得到自然发酵醋糟；
4）加营养物
取步骤3）中自然发酵醋糟并向其内加入麸皮、豆粕、葡萄糖和小苏打，其中，醋糟、麸皮、豆粕、葡萄糖和小苏打的质量比为80:18:1:1:0.2，搅拌均匀得到配方醋糟；
5）有氧发酵
取步骤2）中得到的黑曲霉菌曲、米曲霉菌曲和酵母菌菌曲，并按质量比为1：1：1混合均匀，得到复合菌曲A曲，将A曲接种于步骤4）得到的配方醋糟中，A曲与配方醋糟的质量比为1:10，混合均匀后进行为期7-10天的有氧发酵；
6）厌氧发酵
取步骤2）中得到的芽孢杆菌菌曲和乳酸菌菌曲，并按质量比为1：1混合均匀，得到复合菌曲B曲，将B曲接种于步骤5）有氧发酵好的配方醋糟中，B曲与配方醋糟的质量比为1:10，混合均匀后装入容器内压瓷密闭，进行为期10-15天的厌氧发酵；
7）晾晒
将步骤6）中厌氧发酵好的醋糟开封后在阴凉通风处晾干，装袋即可。
2.根据权利要求1所述的老陈醋醋糟饲料的制备方法，其特征在于：步骤2）的菌种扩大培养过程中，菌种通过液体培养基一级扩培具体步骤为：黑曲霉、米曲霉和酵母菌的培养基由下列原料组成：葡萄糖 20g、蛋白胨 10g、酵母粉 5g、琼脂 15g、蒸馏水 1000ml，PH值为6.5-6.8；乳酸菌培养基由下列原料组成：蛋白胨 10g、牛肉膏 10g、酵母浸膏 5.0g、葡萄糖 20g、土温80 1.0ml、磷酸氢二钾 2.0g、C2H3NaO2﹒3H2O 0.2g、MgSO4﹒7H2O 5.0g、柠檬酸二铵 2.0g、MnSO4﹒4H2O 0.05g、琼脂 25g、蒸馏水 1000ml，PH值为6.0-6.5；芽孢杆菌培养基由下列原料组成：蛋白胨 10.0g、牛肉提取物 3.0g、NaCl 5.0g、琼脂 15.0g、蒸馏水 1000ml，PH值为7.0；将黑曲霉、米曲霉、酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌灭菌后分别接种于对应的培养基中，在频率为90-110r/min、温度为30-32℃的条件下震荡培养10-24h，最后分别得到黑曲霉液体菌液、米曲霉液体菌液、酵母菌液体菌液、乳酸菌液体菌液和芽孢杆菌液体菌液，并将其贮存于4℃冰箱中待醋糟培养基二级扩培使用；菌种通过醋糟培养基二级扩培具体步骤为：醋糟培养基由醋糟、麸皮、豆粕、葡萄糖、小苏打按质量比为80:18:1:1:0.2混合灭菌制成，将一级扩培好的黑曲霉液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到黑曲霉菌曲，其中，黑曲霉液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的米曲霉液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到米曲霉菌曲，其中，米曲霉液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的酵母菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中通气搅拌培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到酵母菌菌曲，其中，酵母菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的乳酸菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中压瓷密闭培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到乳酸菌菌曲，其中，乳酸菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10；将一级扩培好的芽孢杆菌液体菌液倒入醋糟培养基中搅拌均匀，之后置于发酵罐中压瓷密闭培养，培养温度为30-32℃、培养时间为12-24h，最后得到芽孢杆菌菌曲，其中，芽孢杆菌液体菌液与醋糟培养基的质量比为1：10。
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