CN108048368B - 一株植物乳杆菌ua-416株及其应用 - Google Patents

一株植物乳杆菌ua-416株及其应用 Download PDF

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Abstract

一株植物乳杆菌UA‑416株及其应用,属于功能性食品微生物领域,填补了植物乳杆菌在降尿酸和抗通风作用中的空白。本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA‑416株,该菌株已于2017年7月25日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M2017419。本发明的植物乳杆菌UA‑416株可以有效降低血尿酸水平,提高尿素氮、肌酐水平,抑制血清中黄嘌呤氧化酶活性,对尿酸血症或痛风具有预防和治疗作用。

Description

一株植物乳杆菌UA-416株及其应用
技术领域
本发明属于功能性食品微生物技术领域,具体涉及一株植物乳杆菌UA-416株及其应用。
背景技术
痛风是长期嘌呤代谢障碍或血尿酸增高引起组织损伤的一组异质性疾病。痛风的生化标志是高尿酸血症,指细胞外液的尿酸盐呈超饱和状态,一般认为血尿酸416μmol/L时为高尿酸血症,约5~12%高尿酸血症患者会发展成为痛风。痛风的急性发作是尿酸钠在关节及关节周围组织以结晶形式沉积引起的急性炎症反应。痛风不仅可以侵犯骨和关节,而且还容易累及肾脏和心血管系统高尿酸血症及原发性痛风,与肥胖症、高脂血症、高血压病、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病呈显著正相关。因此,痛风是危害人类健康的一种严重的代谢性疾病。流行病学调查显示,随着人民生活水平的提高和生活节奏的加快,痛风患病率与日俱增,我国痛风的发病率高于世界平均水平。目前抗痛风多以合成化学药物治疗为主,包括抗炎类药,如秋水仙碱、非甾体类抗炎药(Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs,NSAIDs)、糖皮质激素等;促进尿酸排泄药和抑制尿酸生成药,如别嘌呤醇。但西药大多显示其具有较严重的不良反应,比如肝肾损害、超敏变态反应、骨髓抑制等,限制了其安全使用。目前急需研制和开发出选择性强、无副作用、高效并且不会使痛风在停药后产生反弹的全新抗痛风新药。
乳酸菌作为一种安全的食品级微生物,在预防和治疗代谢调控类疾病中发挥着重要作用,如改善肠道功能、降血脂、降胆固醇、抗动脉粥样硬化、降血糖、预防和治疗骨质疏松等。而痛风与糖尿病、高血脂症等同属代谢调控类疾病,且密切相关。目前,关于乳酸菌降尿酸和抗痛风的报道较少。
发明内容
为了填补植物乳杆菌在降尿酸和抗通风作用中的空白,本发明提供一株植物乳杆菌UA-416株及其应用。
本发明为解决技术问题所采用的技术方案如下:
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株,该菌株已于2017年7月25日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M2017419。
本发明提供的一种菌剂,其活性成分为上述的一株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)UA-416株。
作为优选的实施例,所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的浓度为108CFU/g以上。
作为优选的实施例,所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的浓度为1010~1011CFU/g。
本发明还提供了上述的一种菌剂的制备方法,包括以下步骤:
将植物乳杆菌UA-416株扩大培养到20L,6000r/min离心20min,生理盐水重悬,再次6000r/min离心20min,生理盐水重悬、洗净,再次6000r/min离心20min,收集菌泥,溶于500mL冻干保护剂中,冻干得到植物乳杆菌UA-416发酵剂,菌数为1.0×109CFU/g;
所述冻干保护剂为:将90g低聚果糖和10g海藻糖溶于三级水中,定容至500mL所得。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株还可以用于制备具有降尿酸作用或具有抗痛风作用的产品。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株在制备具有降尿酸作用产品中的应用,制备所述具有降尿酸作用产品的方法主要包括以下步骤:
步骤一、植物乳杆菌UA-416发酵剂的制备
将植物乳杆菌UA-416株扩大培养到20L,6000r/min离心20min,生理盐水重悬,再次6000r/min离心20min,生理盐水重悬、洗净,再次6000r/min离心20min,收集菌泥,溶于500mL冻干保护剂中,冻干得到植物乳杆菌UA-416发酵剂,菌数为1.0×109CFU/g;
所述冻干保护剂为:将90g低聚果糖和10g海藻糖溶于三级水中,定容至500mL所得;
步骤二、发酵降尿酸药食同源组合物的制备
按照重量份将30~50份玉米须、20~40份芹菜籽、10~30份桑葚、10~20份针叶樱桃粉混合均匀,加10~20倍重量份数的水热回流提取2~3次,每次1~2h,经过滤后将滤液浓缩至1/2~1/4体积,获得发酵降尿酸药食同源组合物;
步骤三、发酵产品的制备
向上述制得的药食同源组合物中加入低聚果糖10g/L和葡萄糖20g/L,115℃高压灭菌20min;将培养好的植物乳杆菌UA-416发酵剂按体积分数为1%的接种量接入灭菌后的药食同源组合物中,37℃培养16h后将发酵液制成冻干粉,即得药食同源组合物发酵固体饮料;所得药食同源组合物发酵固体饮料具有降尿酸作用。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株还可以用于制备用于预防和/或治疗痛风的产品。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株作为功能性益生菌在制备食品、保健品或药品中的应用。
本发明的有益效果是:
本发明以从传统发酵食品中分离鉴定的乳酸菌为研究对象,经大量的实验筛选获得一株乳酸菌新菌株,命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株。本发明采用氧嗪酸钾建立高尿酸血症模型小鼠灌胃给予植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株连续7天,探讨植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株对高尿酸血症模型小鼠的治疗作用。研究结果显示,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株可以有效降低血尿酸水平,提高尿素氮、肌酐水平,抑制血清中黄嘌呤氧化酶活性。
以日常摄入植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株或其菌制剂,可明显降低氧嗪酸钾盐致高尿酸血症模型小鼠的血清尿酸,抑制黄嘌呤氧化酶活性,对尿酸血症或痛风具有预防和治疗作用,因此,本发明提供的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)UA-416株可以用于制备抗高尿酸血症或抗痛风功能的食品、药品或保健品等,同时本发明提供的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株还可以作为功能性益生菌应用于食品、保健品和药品领域,应用前景非常广阔。开展具有降尿酸和抗痛风作用乳酸菌的筛选,受众人群广泛,市场空间巨大。
具体实施方式
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株,已于2017年7月25日保藏于中国典型培养物保藏中心,简称CCTCC,地址为:湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内(武汉大学保藏中心),保藏编号为:CCTCC NO:M2017419。
本发明的一种菌剂,其活性成分为上述的一株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)UA-416株。
上述所说的菌剂具有至少一项以下功能:
(a1)降低血清中尿酸水平;
(a2)提高血清中肌酐水平;
(a3)提高血清中尿素氮水平;
(a4)抑制血清中黄嘌呤氧化酶活性。
上述所说的一种菌剂是用含有一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的菌液制备得到的粉剂,制备粉剂的方法为冷冻干燥或其它工艺。
作为优选的实施例,所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的浓度为108CFU/g以上。
作为优选的实施例,所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的浓度为1010~1011CFU/g。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株还可以用于制备具有降尿酸作用或具有抗痛风作用的产品,受众受众人群广泛,市场空间巨大。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株还可以用于制备用于预防和/或治疗痛风的产品。所说的产品可以为食品、保健品或药品。以日常摄入植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株或其菌剂代替抗痛风药物,可明显降低氧嗪酸钾盐致高尿酸血症模型小鼠的血清尿酸,抑制黄嘌呤氧化酶活性,对尿酸血症或痛风具有预防和治疗作用,且安全、无毒副作用。
本发明的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株作为功能性益生菌在制备食品、保健品或药品中的应用,具有广阔的产业前景。所说的食品具体可以是功能性食品,例如例如功能性饮料、功能性菌剂等。
以下结合实施例对本明作进一步详细说明。
以下实施例中所用到的试验材料,如无特殊说明,均购自常规生化试剂商店。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。
实验材料:
ICR小鼠(体重18~22g,5~6周龄):长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。
基础饲料:长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。
固体BCP培养基:溶剂为水,含酵母膏2.5g/L、蛋白胨5g/L、葡萄糖5g/L、溴甲酚紫0.04g/L、琼脂15g/L;pH 7.0。
液体BCP培养基与固体BCP培养基的区别仅在于不加入琼脂。
固体MRS(de Man,Rogosa,Sharpe)培养基:溶剂为水,含蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、KH2PO42g/L、乙酸钠5g/L、柠檬酸钠5g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、MnSO4·4H2O0.05g/L、吐温-801mL/L、琼脂15g/L、葡萄糖20g/L;pH 6.6。
液体MRS培养基与固体MRS培养基的区别仅在于不加入琼脂。
采用南京建成尿酸检测试剂盒检测血清中的尿酸含量;采用南京建成尿素氮检测试剂盒检测血清中的尿素氮含量;采用南京建成肌酐检测试剂盒检测血清中的肌酐含量;采用南京建成黄嘌呤氧化酶检测试剂盒检测血清中的黄嘌呤氧化酶含量。
实施例1本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的制备
一、植物乳杆菌菌株的分离
1、样本取材:传统发酵食品辣酱。
取固体辣酱5g,加入45mL生理盐水(为10倍稀释)混匀,取0.5mL稀释液,再次用生理盐水进行倍比稀释至10-3,取100μL液体(10-1、10-2、10-3)涂布于固体BCP培养基中进行培养(培养温度37℃,培养时间48~72h)。挑取产黄圈的单菌落接种于固体MRS培养基平板上继续培养(培养温度37℃,培养时间48h),经固体MRS培养基平板反复划线培养纯化(培养温度37℃,培养时间48h),得到多株纯培养菌种。
2、将上述获得的多株纯培养菌种分别接种于液体MRS培养基中培养(培养温度37℃,培养时间14~18h),然后加入20%甘油,置于-80℃冰箱中保存。
3、经革兰氏染色阳性、过氧化氢酶试验阴性、吲哚试验阴性、产硫化氢试验阴性、明胶液化试验阴性、水解淀粉试验阴性和硝酸盐还原试验阴性从多株纯培养菌种中筛选出多株植物乳杆菌,选取其中的1株命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株。
二、菌株的鉴定
1、本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的生理生化鉴定结果如下:
革兰氏阳性,过氧化氢酶阴性,联苯胺试验阴性,吲哚试验阴性,乙酰甲基甲醇试验阳性;
不运动的杆菌;
最适生长温度为37~42℃,适宜pH为5.0~7.0;
在15℃和45℃能够生长;
耐受6.5%NaCl;
不水解淀粉,不液化明胶,不产生硫化氢;
发酵葡萄糖产酸不产气;
在液体MRS培养基中呈均匀浑浊生长,久置菌体呈白色沉淀。
2、本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株的API 50CH(法国梅里埃公司)鉴定结果如下:
能利用核糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘露糖、甘露醇、山梨醇、苦杏仁苷、熊果苷、N-乙酰-葡萄糖胺、七叶醇、柳醇、纤维二糖、菊糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、山梨糖、松三糖、棉籽糖、牻牛儿糖、葡萄糖酸盐;
不能利用阿东醇、阿拉伯糖、糖原、卫矛醇、麦芽糖、肌醇、α-甲基-D-葡萄糖苷、α-甲基-D-甘露糖苷、淀粉、鼠李糖、木糖醇、D-松二糖、D-塔格糖、D-米苏糖、葡萄糖酸盐、D-阿拉伯糖醇、岩糖、L-阿拉伯糖醇、2-酮基-葡萄糖酸盐、5-酮基-葡萄糖酸盐。
3、16S rDNA序列同源性分析
(1)CTAB法提取菌株基因组DNA
将分离的多株植物乳杆菌接种于液体MRS培养基中,37℃培养16h,取10mL培养液,10000r/min离心10min,离心后弃去上清液,用TE缓冲液清洗菌体1次;将清洗后的菌体重悬浮于1.9mL的TE缓冲液中,加入0.1mL质量分数为10%的SDS溶液、10μL浓度为20mg/mL的蛋白酶K、5μL浓度为50mg/mL的溶菌酶,混匀后在37℃的水浴锅中水浴1h;水浴后,向体系中加入300μL 5M的NaCl溶液和300μL质量分数为10%的CTAB-NaCl溶液,混匀后在65℃的水浴锅中水浴20min;水浴后,向体系中加入等体积的氯仿-异戊醇溶液(氯仿溶液与异戊醇溶液的体积比为24:1),充分混匀后10000r/min离心30min;吸取上清液至新的离心管中,加入等体积的酚-氯仿-异戊醇溶液(酚溶液、氯仿溶液、异戊醇溶液的体积比为25:24:1),充分混匀后10000r/min离心30min;吸取上清液至新的离心管中,加入0.6倍体积的异戊醇溶液,在-20℃的条件下放置2h,然后10000r/min离心20min,弃去上清液;用体积分数为70%的乙醇溶液清洗沉淀,然后10000r/min离心20min,在室温条件下放置至乙醇完全控干;将沉淀溶于20μLTE缓冲液中,加入1μL的RNA酶并在37℃的水浴锅中水浴1h,获得菌株基因组DNA,置于-20℃保存。
(2)PCR扩增
①扩增引物:根据乳酸杆菌的16S rDNA序列的保守区域,采用Jung-Hoon Yoon等人设计的引物,序列如下:
16sF:5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3';
16sR:5'-AGAAAGGAGGTGATCCAGC-3'。
②PCR反应体系如表1所示:
表1
体系组分 反应体系
TaKaRaExTaq(5U/μL) 0.25μL
10×ExTaqBuffer(Mg<sup>2+</sup>Plus)5μL 5μL
dNTPMixture(各2.5mmol/L) 4μL
基因组DNA 1μL
正向引物(10μmol/L) 1μL
反向引物(10μmol/L) 1μL
灭菌双馏水 37.75μL
总体积 50μL
③PCR扩增程序如下:
④检测PCR扩增产物
预先制备质量分数为1%的琼脂糖凝胶(加入10mg/mL的溴化乙锭EB),PCR扩增结束后,吸取5μLPCR扩增产物和1μL的6×Loading buffer混合均匀,用移液器加入到琼脂糖凝胶板的点样孔中进行电泳。目标片段长度约为1500bp,使用DL2000的DNAMarker,以1×TAE作为电泳液,电泳电压为100V,电泳时间为40min。
(3)16S rDNA基因序列分析
将验纯后的产物送到长春库美进行测序;获得各菌株的16S rDNA序列通过BLAST程序与GenBank库中已知菌株的序列信息进行同源性比对分析,鉴定待测菌株;以16S rDNA序列同源性大于99%为标准进行属种归类,然后再将待测菌株与模式菌株的16S rDNA序列利用MEGA4.0软件中的Neighbor-Joining法构建系统发育树。16s rDNA序列如序列表中的SEQ ID NO:1所示。
基于上述分析结果可以确定,本发明的菌株UA-416为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。
三、菌株的保藏
本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株,已于2017年7月10日保藏于中国典型培养物保藏中心,简称CCTCC,地址为:湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内(武汉大学保藏中心),保藏编号为:CCTCC NO:M2017419。
实施例2本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株对氧嗪酸钾盐致小鼠高尿酸血症的影响
1、动物模型的建立及分组
60只雄性昆明小鼠,体重22~25g随机分成3组,每组20只,分组处理如下:模型组和UA-416组连续7天罐胃酵母膏(15g/kg)每天2次、乙胺丁醇(250mg/kg)每天1次,UA-416组每天罐胃浓度为1.0×109CFU/mL的植物乳杆菌UA-416菌液(12ml/kg体重)。末次给药后2h,一次性腹腔注射氧嗪酸钾(300mg/kg)。空白对照组给予同等剂量罐胃或腹腔注射灭菌生理盐水。试验结束后,取各组小鼠摘取眼球采血,3000r/min离心15min,收集血清。按试剂盒(南京建成生物工程研究所)操作检测血清中的尿酸、肌酐、尿素氮、黄嘌呤氧化酶活性。
2、血清中相关指标检测
表2
注:*与模型组比较,差异显著(P&lt;0.05),**与模型组比较,差异极显著(P&lt;0.01)。
通过上述试验可知:腹腔注射氧嗪酸钾能明显提高小鼠血清中尿酸水平,建立高尿酸血症。植物乳杆菌UA-416能降低血清中尿酸水平到90.89nmol/L,与模型组相比差异性显著(P&lt;0.01)。与模型组相比,发酵产品可明显提高高尿酸血症小鼠血清中肌酐水平(P&lt;0.05)。植物乳杆菌UA-416及其发酵产品均能显著性降低小鼠血清中尿素氮水平,与模型组相比差异性均极显著(P&lt;0.01)。
实施例3发酵降尿酸药食同源组合物的制备
1、植物乳杆菌UA-416发酵剂的制备
将植物乳杆菌UA-416扩大培养到20L,6000r/min离心20min,生理盐水重悬,再次6000r/min离心20min,生理盐水重悬洗净,再次6000r/min离心20min,收集菌泥,溶于500mL冻干保护剂中,冻干可得植物乳杆菌UA-416发酵剂,菌数约为1.0×109CFU/g。
所用的冻干保护剂配方:90g低聚果糖和10g海藻糖溶于三级水中,定容至500mL。
2、发酵降尿酸药食同源组合物的制备
按照重量份将玉米须30~50份、芹菜籽20~40份、桑葚10~30份、针叶樱桃粉10~20份混合均匀,加10~20倍重量份数的水热回流提取2~3次,每次1~2h,过滤,滤液浓缩至1/2~1/4体积,获得发酵降尿酸药食同源组合物。
3、发酵产品的制备
向上述制得的药食同源组合物中加入低聚果糖10g/L和葡萄糖20g/L,115℃高压灭菌20min;然后将培养好的植物乳杆菌UA-416发酵剂按1%(体积分数)的接种量接入灭菌后的药食同源组合物中,37℃培养16h后将发酵液制成冻干粉,即得药食同源组合物发酵固体饮料。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
&lt;110&gt; 吉林省命之元生物科技有限公司
&lt;120&gt; 一株植物乳杆菌UA-416株及其应用
&lt;160&gt; 1
&lt;170&gt; SIPOSequenceListing 1.0
&lt;210&gt; 1
&lt;211&gt; 1461
&lt;212&gt; DNA/RNA
&lt;213&gt; 人工序列(Artificial Sequence)
&lt;400&gt; 1
acttcaccct aatcatctgt cccaccttag gcggctggtt cctaaaaggt taccccaccg 60
actttgggtg ttacaaactc tcatggtgtg acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt 120
attcaccgcg gcatgctgat ccgcgattac tagcgattcc gacttcatgt aggcgagttg 180
cagcctacaa tccgaactga gaatggcttt aagagattag cttactctcg cgagttcgca 240
actcgttgta ccatccattg tagcacgtgt gtagcccagg tcataagggg catgatgatt 300
tgacgtcatc cccaccttcc tccggtttgt caccggcagt ctcaccagag tgcccaactt 360
aatgctggca actgataata agggttgcgc tcgttgcggg acttaaccca acatctcacg 420
acacgagctg acgacaacca tgcaccacct gtatccatgt ccccgaaggg aacgtctaat 480
ctcttagatt tgcatagtat gtcaagacct ggtaaggttc ttcgcgtagc ttcgaattaa 540
accacatgct ccaccgcttg tgcgggcccc cgtcaattcc tttgagtttc agccttgcgg 600
ccgtactccc caggcggaat gcttaatgcg ttagctgcag cactgaaggg cggaaaccct 660
ccaacactta gcattcatcg tttacggtat ggactaccag ggtatctaat cctgtttgct 720
acccatactt tcgagcctca gcgtcagtta cagaccagac agccgccttc gccactggtg 780
ttcttccata tatatacgca tttcaccgct acacatggag ttccactgtc ctcttctgca 840
ctcaagtttc ccagtttccg atgcacttct tcggttgagc cgaaggcttt cacatcagac 900
ttaaaaaacc gcctgcgctc gctttacgcc caataaatcc ggacaacgct tgccacctac 960
gtattaccgc ggctgctggc acgtagttag ccgtggcttt ctggttaaat accgtcaata 1020
cctgaacagt tactctcaga tatgttcttc tttaacaaca gagttttacg agccgaaacc 1080
cttcttcact cacgcggcgt tgctccatca gactttcgtc cattgtggaa gattccctac 1140
tgctgcctcc cgtaggagtt tgggccgtgt ctcagtccca atgtggccga ttaccctctc 1200
aggtcggcta cgtatcattg ccatggtgag ccgttacctc accatctagc taatacgccg 1260
cgggaccatc caaaagtgat agccgaagcc atctttcaaa ctcggaccat gcggtccaag 1320
ttgttatgcg gtattagcat ctgtttccag gtgttatccc ccgcttctgg gcaggtttcc 1380
cacgtgttac tcaccagttc gccactcact caaatgtaaa tcatgatgca agcaccaatc 1440
aataccagag ttcgttcgac t 1461

Claims (9)

1.一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株,其特征在于,该菌株已于2017年7月25日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M2017419。
2.一种菌剂,其活性成分为权利要求1所述的一株植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)UA-416株。
3.根据权利要求2所述的一种菌剂,其特征在于,所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)UA-416株的浓度为108CFU/g以上。
4.根据权利要求2所述的一种菌剂,其特征在于,所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)UA-416株的浓度为1010~1011CFU/g。
5.权利要求2所述的一种菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将植物乳杆菌UA-416株扩大培养到20L,6000r/min离心20min,生理盐水重悬,再次6000r/min离心20min,生理盐水重悬、洗净,再次6000r/min离心20min,收集菌泥,溶于500mL冻干保护剂中,冻干得到植物乳杆菌UA-416发酵剂,菌数为1.0×109CFU/g;
所述冻干保护剂为:将90g低聚果糖和10g海藻糖溶于三级水中,定容至500mL所得。
6.权利要求1所述的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株在制备具有降尿酸作用或具有抗痛风作用产品中的应用。
7.根据权利要求6所述的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株在制备具有降尿酸作用产品中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、植物乳杆菌UA-416发酵剂的制备
将植物乳杆菌UA-416株扩大培养到20L,6000r/min离心20min,生理盐水重悬,再次6000r/min离心20min,生理盐水重悬、洗净,再次6000r/min离心20min,收集菌泥,溶于500mL冻干保护剂中,冻干得到植物乳杆菌UA-416发酵剂,菌数为1.0×109CFU/g;
所述冻干保护剂为:将90g低聚果糖和10g海藻糖溶于三级水中,定容至500mL所得;
步骤二、发酵降尿酸药食同源组合物的制备
按照重量份将30~50份玉米须、20~40份芹菜籽、10~30份桑葚、10~20份针叶樱桃粉混合均匀,加10~20倍重量份数的水热回流提取2~3次,每次1~2h,经过滤后将滤液浓缩至1/2~1/4体积,获得发酵降尿酸药食同源组合物;
步骤三、发酵产品的制备
向上述制得的药食同源组合物中加入低聚果糖10g/L和葡萄糖20g/L,115℃高压灭菌20min;将培养好的植物乳杆菌UA-416发酵剂按体积分数为1%的接种量接入灭菌后的药食同源组合物中,37℃培养16h后将发酵液制成冻干粉,即得药食同源组合物发酵固体饮料;所得药食同源组合物发酵固体饮料具有降尿酸作用。
8.权利要求1所述的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株在制备用于预防和/或治疗痛风产品中的应用。
9.权利要求1所述的一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)UA-416株作为功能性益生菌在制备食品、保健品或药品中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109718308A (zh) * 2019-03-06 2019-05-07 青岛东海药业有限公司 一种葛根芹菜籽组合物制剂及其应用
CN110055199B (zh) * 2019-05-24 2020-07-07 吉林省命之元生物科技有限公司 一株植物乳杆菌ua149株及其应用
TWI779213B (zh) * 2019-07-03 2022-10-01 大江生醫股份有限公司 植物乳桿菌菌株用於調控軟骨細胞的IL-1β基因、基質金屬肽酶MMP1a基因、及基質金屬肽酶抑制因子TIMP1基因的表現量的用途
CN111567711A (zh) * 2020-05-13 2020-08-25 淮北师范大学 一种具有高生物可利用度的黄嘌呤氧化酶抑制活性酵素饮料的制备方法
CN114317308B (zh) * 2020-09-30 2023-10-31 宁波倍益嘉生物科技有限公司 一种降嘌呤和尿酸的益生菌株、组合物及其应用
CN112795500B (zh) * 2020-12-21 2022-04-22 扬州大学 一株可缓解高尿酸血症的植物乳杆菌及其用途
CN114149947B (zh) * 2021-12-02 2022-09-27 山东宝来利来生物工程股份有限公司 一株产尿酸氧化酶并抑制黄嘌呤氧化酶的植物乳杆菌及其应用
CN115191607A (zh) * 2022-05-10 2022-10-18 珠海益何生物技术有限公司 一种植物乳杆菌yu28菌株及其应用
CN115287240A (zh) * 2022-09-14 2022-11-04 天津科技大学 一株具有高尿酸血症及痛风防治作用的植物乳杆菌及其应用
CN115287239A (zh) * 2022-09-14 2022-11-04 天津科技大学 一株具有体外降解核苷、嘌呤及降尿酸能力的植物乳杆菌及其应用
CN116064333A (zh) * 2023-02-14 2023-05-05 北京三元食品股份有限公司 母乳源植物乳杆菌及其产品和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106834162A (zh) * 2016-12-09 2017-06-13 大连医科大学 可降低血尿酸的短乳杆菌dm9218、基因片段及重组蛋白
CN107208029A (zh) * 2014-11-18 2017-09-26 株式会社明治 具有嘌呤摄取能力的乳酸菌及其用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107208029A (zh) * 2014-11-18 2017-09-26 株式会社明治 具有嘌呤摄取能力的乳酸菌及其用途
CN106834162A (zh) * 2016-12-09 2017-06-13 大连医科大学 可降低血尿酸的短乳杆菌dm9218、基因片段及重组蛋白

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
日常多吃什么食物可以快速排出体内的尿酸?;大学生知识网;《大学生知识网》;20171226;第1-12页 *
杨殿斌等.降血尿酸乳酸菌筛选及其对高尿酸血症模型大鼠作用研究.《中国微生态学杂志》.2013,第25卷(第2期),第125-128页. *
降血尿酸乳酸菌筛选及其对高尿酸血症模型大鼠作用研究;杨殿斌等;《中国微生态学杂志》;20130228;第25卷(第2期);第125-128页 *

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