CN107970305A - 龙眼核多酚的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括龙眼核粉制备、酶解、提取与分离、干燥四个步骤,通过酶解将龙眼核粉所含的物质释放出来,然后使用乙醇提取,经大孔树脂吸附后再洗脱,经浓缩、真空冷冻干燥后制得龙眼核多酚。本方法操作简单,能充分提取龙眼核中的多酚,提取100g龙眼核,提取物重量为8.3‑10.1g,提取物中相思子碱含量为96.8‑98.5%。

Description

龙眼核多酚的提取方法
技术领域
本发明涉及龙眼加工技术领域,具体涉及一种龙眼核多酚的提取方法。
背景技术
龙眼是著名的亚热带水果,在我国南方、尤其是福建泉州盛产。龙眼核的重量占龙眼果实鲜重的17%,至今还没有综合利用,每年废弃的龙眼核重量达几十万吨,除龙眼果肉具有很高的营养价值外,龙眼核也有显著的活性功效。如能利用龙眼核开发出潜力较高的天然产物,变废为宝,既能保护环境,又能增加经济效益。
多酚是含负氧化态氮原子的存在于生物有机体中的环状化合物,具有多种生物活性,在植物体内还具有良好的分布和较强的输导能力,对癌症疼痛有一定的缓解作用,多酚抗癌作用,尤其是对肺癌的抑制功效已经引起人类的关注。
目前有关龙眼核多酚提取的研究还很少,甘钊生发表在《食品与生物》上的《龙眼核多酚提取工艺研究》给出的最优提取条件为:料液比1:33,提取剂(乙醇)浓度60%、提取温度80℃,提取时间150min。该方法提取的多酚量不多,且纯度较低。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供了一种龙眼核多酚的提取方法。
本发明是通过以下技术方案予以实现的:
一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:1.5~3.5的比例混匀,调节pH值为4.5~6.5,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为45~60℃下酶解30~90min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入60~75%的乙醇溶液,在50~60℃条件下浸提60~150min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用4~6倍柱体积水冲洗,再用10~15倍柱体积的45~80%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
所述步骤S1中,所述烘干温度为40~60℃,烘干时间为8~15h。
所述步骤S1中龙眼核粉粒径为100~200目。
所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的0.8~3.5‰。
所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.5~0.8:0.3~0.6。
所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为3~8:1。
所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为1.5~3BV/h。。
所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的30~50%。
所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-45~-33℃,真空度为45~70Pa,冻干时间为2.5~6h。
本发明的有益效果在于:本发明使用酶解法提取龙眼核多酚,具有以下优势:1、酶解能充分释放龙眼核的成分,提高多酚提取率;2、使用不同的乙醇溶液提取、洗脱,
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的技术方案作进一步描述,但要求保护的范围并不局限于所述。
实施例一
一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:1.5的比例混匀,调节pH值为4.5,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为45℃下酶解30min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入60%的乙醇溶液,在50℃条件下浸提60min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用4倍柱体积水冲洗,再用10倍柱体积的45%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
所述步骤S1中,所述烘干温度为40℃,烘干时间为8h。
根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中龙眼核粉粒径为100目。
所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的0.8‰。
所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.5:0.3。
所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为3:1。
所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为1.5BV/h。。
所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的30%。
所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-45℃,真空度为45Pa,冻干时间为2.5h。
实施例二
一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:1.8的比例混匀,调节pH值为5.2,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为55℃下酶解46min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入63%的乙醇溶液,在52℃条件下浸提68min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用5倍柱体积水冲洗,再用12倍柱体积的56%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
所述步骤S1中,所述烘干温度为48℃,烘干时间为12h。
根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中龙眼核粉粒径为125目。
所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的1.2‰。
所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.6:0.4。
所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为5:1。
所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为1.9BV/h。。
所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的38%。
所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-41℃,真空度为50Pa,冻干时间为3.5h。
实施例三
一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:2.1的比例混匀,调节pH值为5.4,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为56℃下酶解68min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入68%的乙醇溶液,在58℃条件下浸提93min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用5倍柱体积水冲洗,再用14倍柱体积的65%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
所述步骤S1中,所述烘干温度为57℃,烘干时间为13h。
根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中龙眼核粉粒径为160目。
所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的2.3‰。
所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.7:0.5。
所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为7:1。
所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为2.8BV/h。。
所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的46%。
所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-38℃,真空度为58Pa,冻干时间为4h。
实施例四
一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:3.2的比例混匀,调节pH值为5.9,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为57℃下酶解82min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入72%的乙醇溶液,在58℃条件下浸提145min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用6倍柱体积水冲洗,再用14倍柱体积的72%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
所述步骤S1中,所述烘干温度为53℃,烘干时间为13h。
根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中龙眼核粉粒径为180目。
所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的2.9‰。
所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.7:0.5。
所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为6.1:1。
所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为2.6BV/h。。
所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的46%。
所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-36℃,真空度为64Pa,冻干时间为5.3h。
实施例五
一种龙眼核多酚的提取方法,该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:3.5的比例混匀,调节pH值为6.5,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为60℃下酶解90min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入75%的乙醇溶液,在60℃条件下浸提150min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用6倍柱体积水冲洗,再用15倍柱体积的80%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
所述步骤S1中,所述烘干温度为60℃,烘干时间为15h。
根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中龙眼核粉粒径为200目。
所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的3.5‰。
所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.8:0.6。
所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为8:1。
所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为3BV/h。。
所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的50%。
所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-33℃,真空度为70Pa,冻干时间为6h。
实验例一
使用《龙眼核多酚提取工艺研究》给出的提取条件提取龙眼核多酚:料液比1:33,提取剂(乙醇)浓度60%、提取温度80℃,提取时间150min。
取龙眼核600g,平均分成6份,每份100g,分别按实施例一、实施例二、实施例三、实施例四、实施例五、实验例一的方法提取龙眼核多酚,以单宁酸为标样,使用普鲁士蓝法(PB法)测定提取物中多酚的含量,结果如表1所示。
表1龙眼核多酚提取结果
项目 提取物重量/g 提取物中多酚含量/%
实施例一 9.6 97.6
实施例二 8.9 97.8
实施例三 8.3 98.5
实施例四 9.2 97.1
实施例五 10.1 96.8
实验例一 5.2 84.3
从上表可知,采用本方法在不同条件下提取100g龙眼核,提取物重量为8.3-10.1g,提取物中相思子碱含量为96.8-98.5%,高于实验例一的提取物重量5.2mg,提取物中相思子碱含量为95.3%。因此,采用本方法提取龙眼核多酚相较现有技术在提取物重量及纯度上均具有显著的效果,有较大的应用价值。

Claims (10)

1.一种龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:该方法包括以下步骤:
S1、龙眼核粉制备:龙眼核烘干、粉碎得龙眼核粉;
S2、酶解:龙眼核粉与水以重量比为1:1.5~3.5的比例混匀,调节pH值为4.5~6.5,然后加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶,在温度为45~60℃下酶解30~90min得酶解液;
S3、提取与纯化:向酶解液中加入60~75%的乙醇溶液,在50~60℃条件下浸提60~150min,离心、过滤后取滤液流经大孔吸附树脂,然后用4~6倍柱体积水冲洗,再用10~15倍柱体积的45~80%乙醇溶液洗脱大孔吸附树脂得洗脱液;
S4、干燥:洗脱液浓缩,然后真空冷冻干燥得龙眼核多酚。
2.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中,所述烘干温度为40~60℃,烘干时间为8~15h。
3.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S1中龙眼核粉粒径为100~200目。
4.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S2中加入纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶的总量为龙眼核粉的0.8~3.5‰。
5.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S2中超纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶质量比为1:0.5~0.8:0.3~0.6。
6.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S2中大孔吸附树脂为极性树脂。
7.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S3中加入的乙醇溶液与酶解液体积比为3~8:1。
8.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S3中滤液流经大孔吸附树脂的流速为1.5~3BV/h。。
9.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S4中洗脱液浓缩至原体积的30~50%。
10.根据权利要求1所述龙眼核多酚的提取方法,其特征在于:所述步骤S4中真空冷冻干燥温度为-45~-33℃,真空度为45~70Pa,冻干时间为2.5~6h。
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