CN105663197A - 细叶鼠曲草总黄酮的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种细叶鼠曲草总黄酮的提取方法，该方法包括：(1)将细叶鼠曲草洗净、干燥，粉碎得到草粉；(2)用乙醇浸泡草粉；(3)超声波处理三次合并滤液，冷却，得到提取液；(4)提取液抽真空，浓缩去乙醇，得到浓缩液；(5)浓缩液上吸附树脂层析分离，上柱后先用纯净水洗杂质，再用乙醇洗脱，得到洗脱液：(6)洗脱液真空浓缩，获得黄色提取物，即为细叶鼠曲草黄酮。本发明方法首次采用超声提取细叶鼠曲草总黄酮，方法简便，快捷，产品成本低廉；采用大孔吸附树脂纯化，提取细叶鼠曲草总黄酮充分。适用于提取鼠曲草类植物其中的有效成分。

Description

细叶鼠曲草总黄酮的提取方法
所属领域
本发明属于从与天然植物中提取活性成分的方法，具体来说，属于细叶鼠曲草总黄酮的提取纯方法。
背景技术
细叶鼠曲草（GnaphaliumjaponicumThunb）为菊科鼠曲草属植物，鼠曲草属植物全世界共有200多种，分布广泛，资源蕴藏量大。我国鼠曲草属植物有20余种，在民间有相当长的使用史，俗称“面蒿”、“清明菜”，是具有浓郁的民族资源特色食品；同时也是丰富的药用资源，中药词典里称之为“天青地白”，广泛用于痛风、炎症、痈疮肿毒，肠炎痢疾，活血止血等病症,细叶鼠曲草就是其中的一种。细叶鼠曲草主要分布在我国长江以南，生长在海拔780～1200m的山坡阳处草地,全草入药，味甘、性平，入肝、脾、肺、小肠四经，清热利湿，解毒清肿，主治结膜炎、咽喉肿痛、尿道炎;畲族同胞常由于治疗小儿黄疸及成人肝病，疗效显著。
细叶鼠曲草属植物的主要化学成分为黄酮和二萜类，目前国内外对细叶鼠曲草黄酮类化合物的研究还相当缺乏，而黄酮类成分具有抗氧化、抗菌作用及止咳平喘、降血脂、治疗肝病及皮肤病，局部扩张血管的作用。但中国专利数据库中涉及细叶鼠曲草的专利申请件均直接将细叶鼠曲草作为药材用于药物组合物，例如2013106026547号《一种治疗肠系膜脂肪炎的中药》、2013107027621号《一种治疗腹型偏头痛的中药》、201410304958X号《一种用于治疗反流性食管炎的中药及其制备方法》、2014103122551号《一种治疗肠白塞病的中药》等，目前尚无涉及提取细叶鼠曲草黄酮的申请件。
常用的提取黄酮的方法为水煎法、回流提取和酶法提取。水煎法和回流提取耗时，酶法需要找到适宜的酶种，而采用超声提取，具有方法简便，操作快捷、耗时短的特点，已广泛应用于各种植物黄酮的提取方面，如银杏叶总黄酮、维药多伞阿魏总黄酮、葛根总黄酮等。然而提取纯化细叶鼠曲草总黄酮的方法未见相关报道。
发明内容
本发明旨在提供一种细叶鼠曲草总黄酮的提取方法，有效地提取细叶鼠曲草黄酮，为后续保健食品和药品的开发奠定基础。
为实现上述发明目的，发明人提供的技术方法包括：
(1)将细叶鼠曲草洗净、干燥，接着粉碎，得到草粉；
(2)用乙醇浸泡草粉；
(3)超声波处理，超声三次合并滤液，冷却，得到提取液；
(4)提取液抽真空，浓缩去乙醇，得到浓缩液；
(5)浓缩液上吸附树脂层析分离，上柱后先用纯净水洗杂质，再用乙醇洗脱，得到洗脱液：
(6)将洗脱液真空浓缩，获得黄色提取物，即为细叶鼠曲草黄酮。
上述方法的第(1)步中，所述粉碎的细叶鼠曲草细度为过20～40目筛。
上述方法的第(2)步中，所述乙醇为质量分数80%的医用乙醇，乙醇用量为药材原料质量30倍，浸泡草粉时间为0.5h以上。
上述方法的第(3)步中，所述超声波处理的功率为常规功率及以上，温度控制在60℃，处理时间为0.5h，处理后所得细叶鼠曲草总黄酮纯度为2mg/g。
上述方法的第(4)步中，所述浓缩温度控制在40℃～50℃。
上述方法的第(5)步中，所述吸附树脂为D101大孔吸附树脂或聚酰胺；所述纯净水用量为２倍柱体积的量；所述乙醇的质量分数为60%～70%。
上述方法的第(6)步中，所述真空浓缩的真空度控制在0.06MPa。
本发明的方法首次采用超声提取细叶鼠曲草总黄酮，方法简便，快捷，价格低廉；采用大孔吸附树脂纯化，提取细叶鼠曲草总黄酮充分。适用于提取鼠曲草类植物其中的有效成分。
具体实施方式
实施例1将细叶鼠曲草洗净、干燥，粉碎过20目筛，然后用质量分数80%的医用乙醇浸泡半小时，乙醇用量为药材原料质量30倍；接着，以常规功率进行超声波处理半小时，温度控制在60℃，超声三次合并滤液，处理后所得细叶鼠曲草总黄酮提取液纯度为2mg/g；之后将提取液抽真空，在40℃～50℃下浓缩除去乙醇；再将浓缩液上大孔吸附树脂D101，上柱后先用２倍柱体积纯净水洗杂质，再用质量分数为60%的乙醇洗脱，得到洗脱液，最后真空浓缩，获得纯度为40%的总黄酮提取物。
实施例2将细叶鼠曲草洗净、干燥，粉碎过40目筛，然后用质量分数80%的医用乙醇浸泡半小时，乙醇用量为药材原料质量30倍；接着，以160W功率进行超声波处理半小时，温度控制在60℃，超声三次合并滤液，处理后得到提取液；之后将提取液抽真空，40℃～50℃浓缩去乙醇；此后同实施例1，获得纯度为40%的总黄酮提取物。
实施例3将细叶鼠曲草洗净、干燥，粉碎过20目筛，然后用质量分数80%的医用乙醇浸泡半小时，乙醇用量为药材原料质量30倍；接着，以160W功率进行超声波处理半小时，温度控制在60℃，超声三次合并滤液，处理后得到提取液；之后将提取液抽真空，40℃～50℃浓缩去乙醇，此后同实施例1，获得纯度为40%的总黄酮提取物。

Claims (6)

1.一种细叶鼠曲草总黄酮的提取方法，其特征包括：
(1)将细叶鼠曲草洗净、干燥，接着粉碎，得到草粉；
(2)用乙醇浸泡草粉；
(3)超声波处理，超声三次合并滤液，冷却，得到提取液；
(4)提取液抽真空，浓缩去乙醇，得到浓缩液；
(5)浓缩液上吸附树脂层析分离，上柱后先用纯净水洗杂质，再用乙醇洗脱，得到洗脱液：
(6)将洗脱液真空浓缩，获得黄色提取物，即为细叶鼠曲草黄酮。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于第(1)步中，所述粉碎的细叶鼠曲草细度为过20～40目筛。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于第(2)步中，所述乙醇为质量分数80%的医用乙醇，乙醇用量为药材原料质量30倍，浸泡草粉时间为0.5h以上。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于第(3)步中，所述超声波处理的功率为常规功率及以上，温度控制在60℃，处理时间为0.5h，处理后所得细叶鼠曲草总黄酮纯度为2mg/g。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于第(4)步中，所述浓缩温度控制在40℃～50℃。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于第(5)步中，所述吸附树脂为D101大孔吸附树脂或聚酰胺；所述纯净水用量为２倍柱体积的量；所述乙醇的质量分数为60%～70%。
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