CN107556353A - 一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用 - Google Patents
一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107556353A CN107556353A CN201710993667.XA CN201710993667A CN107556353A CN 107556353 A CN107556353 A CN 107556353A CN 201710993667 A CN201710993667 A CN 201710993667A CN 107556353 A CN107556353 A CN 107556353A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- luning
- derivatives
- preparation
- derivative
- inflammatory
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种普鲁宁衍生物及其制备方法与在抗炎和平喘药物中的应用。在普鲁宁结构上引入糖基、脂肪链、氨基或者醚基后,得到的普鲁宁衍生物,其水溶性、溶出速度和生物利用度显著提高。本发明的普鲁宁衍生物具有更好的抗炎和平喘作用,对于由急、慢性支气管炎以及感冒等引起的各种气喘疗效显著;在抗炎方面也表现出了优异的性能,未见毒副作用,具有很高的医学价值和广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用。
背景技术
咳、痰、喘是呼吸系统疾病的常见症状,日常生活中尤常见于急、慢性支气管炎、感冒等所引起,临床是以咳嗽、咯痰伴有喘息及反复发作为特征,是由于感染或非感染因素引起的气管、支气管粘膜及周围组织的急、慢性非特异性炎症。属中医学的咳嗽、痰饮、哮喘范畴,是一种常见病、多发病。特别是中老年人由于环境因素和生活习惯的影响,容易产生咳嗽、咯痰等支气管炎症状,发病期间没有很好的进行治疗控制,而逐渐发展成为疾病的。
支气管哮喘(哮喘)是临床常见病和多发病,近年来发病率呈上升趋势。其发病机制尚未完全阐明。鉴于人体试验的局限性,目前对哮喘病因、发病机制及治疗等方面的研究很大程度上需要通过动物模型来进行,建立良好的支气管哮喘动物模型具有重要意义。
目前已上市的该类药物还是具有服药量多和服用不方便的特点,而且效果并不明显。因此有必要继续研制出服用安全、疗效可靠的平喘抗炎新药物。柚皮素是黄酮类化合物的苷元,是一种黄酮类物质,具有,抗菌,消炎,抗癌,解痉和利胆,治疗心血管疾病,降胆固醇等方面的作用。研究表明黄酮化合物在治疗平喘抗炎方面有很好的疗效,因此,制备溶解度高,效果好、服用方便的平喘抗炎的黄酮化合物是本发明的宗旨。
黄酮化合物广泛存在于芸香科植物中,不同类型的黄酮类化合物在人体中的代谢途径和生物利用度不同,苷元型黄酮化合物易于人体的吸收和利用,可通过小肠壁直接吸收进入血液,而糖苷型的黄酮化合物需要在肠腔中微生物的作用下,通过降解和代谢途径转化为苷元型黄酮,才能被人体吸收和利用。因此,苷元型黄铜化合物具有更高的生物利用价值和营养价值。但苷元型黄酮一般在水中的溶解度低,不利于苷元黄酮的生物利用和发挥黄酮苷元的药效。因此,为增加苷元黄酮的溶解性,科研人员在溶剂中加入碱如:在溶液中加入NaOH、KOH等,或者加入有机溶剂如:乙醇,二甲基亚砜等,能大大提高苷元黄酮的溶解性,但是强碱和有机溶剂对人体有害,会限制苷元黄酮开发利用。
普鲁宁是单糖基化柚皮素,国内外的药理研究表明:普鲁宁具有杀菌、抗氧化、抗病毒、抗缺血、抗肿瘤、消炎、抗过敏等多种药理活性(Grzechulska J,ApplCatal B,2002,36(1):45-51;Daghrir R,Ind Eng Chem Res,2013,52(10):3581- 3599)。普鲁宁最初由韩国民间药物山桃中提取所得,其在自然界中主要分布于苏木科、蔷薇科、大戟科等植物中。其在自然界中含量少且提取率低,又因水溶性、脂溶性差,较难获得,价格昂贵。目前普鲁宁的制备方法主要有一下两种,化学合成法和酶法水解柚皮苷法。相对于化学法合成普鲁宁,反应条件苛刻、产物分离繁琐且对环境危害大的缺点;利用酶法(α-L-鼠李糖苷酶切掉柚苷鼠李糖糖基后得到普鲁宁(胡群芳Modern Food Science and Technology 2015,Vol.31,No.1))水解柚苷制备普鲁宁的条件温和、转化率高、安全环保,因此研究酶法制备普鲁宁具有很高的应用价值。但是普鲁宁在水中溶性和脂溶性都极低(<10mg/L),这大大限制了普鲁宁的应用,使普鲁宁生物利用度较低。
本发明旨在提高普鲁宁的在水中的溶解度,来提高普鲁宁的生物利用度。因此,本发明通过在普鲁宁的糖基上链接更多的糖基,以及羟基上醚基、氨基等基团,使获得的普鲁宁衍生物溶解度是普鲁宁的35倍以上,药物制剂的半衰期也有明显的延长,普鲁宁衍生物生物利用度提高5倍以上。具体实施方法如下:
一种普鲁宁衍生物,其特征在于化学结构式如I所示:
R1选自H或(Glc)n,其中n<10;
R2选自H或Rha;
R3选自H,OH,OCH3,OC2H5,OC3H7,CH3COO,CH3,CF3,C1-C6-NH2(其中C1-C6为具有1-6个C的烷基、环烷基、烯烃基、环烯烃基,尤其是环戊基氨基、环己基氨基;以及吗啡啉基、甲基哌嗪基),NH2,CH3NH,(CH3)2N,(CH3CH2)2N, CH3CONH,CN,Br,Cl,F,甲酰基,乙酰基,氨基酸酰基,氨基酸酰氨基(R’- CH-CONH-),寡肽酰基,寡肽酰氨基等。
R4选自H,OH,OCH3,CH3COO,CH3,CF3,NH2,CH3NH,CH3CONH, CN,Br,Cl,F。
普鲁宁衍生物的制备方法,其特征在于,包括:①柚苷在固定化鼠李糖苷酶作用下反应,重结晶获得普鲁宁;②普鲁宁在环糊精葡萄糖基转移酶和环糊精条件下反应并重结晶葡萄糖基化的普鲁宁衍生物;③将硫酸二甲酯与普鲁宁反应得到R3、R4甲氧基的普鲁宁衍生物;④将硫酸二异丙酯与普鲁宁反应得到R3、R4为异丙氧基的修饰的普鲁宁衍生物;⑤将甲醛与普鲁宁反应得到R3、R4甲基的普鲁宁衍生物;⑥将环丁胺与普鲁宁反应得到R3、R4环丁基的普鲁宁衍生物;⑦将乙酸酐与普鲁宁反应得到R3、R4乙酰基的普鲁宁衍生物。
发明内容
本发明第一个目的,提供一个普鲁宁衍生物的制备方法。
本发明第二个目的,提供一个普鲁宁衍生物对急、慢性支气管炎以及感冒等引起的炎症、哮喘等急症的药物制备方法。
本发明普鲁宁衍生物是通过一下途径实现的。
1.制备普鲁宁衍生物
(一)以市售质量浓度为50~98%的柚苷溶于氢氧化钠或氢氧化钾溶液的摩尔浓度为0.1~1mol/L中,在30~40℃条件下处理30min,即柚苷溶液。将制备出的柚苷溶液泵入截留分子量为1000~1500Da的聚醚砜膜超滤器中,控制超滤压力为0.1~0.3 MPa,进行超滤处理,直至超滤截留液体积降低至化橘红中的黄酮化合物溶液体积的 1/10~1/20时停止,分别收集超滤滤过液和超滤截留液,对收集的超滤滤过液,即为柚苷超滤溶液,将柚苷超滤溶液浓缩至膏状。
将膏状柚苷泵入反应釜中,然后加入活性不低于100U/mg的糖苷酶溶液,膏状柚苷:糖苷酶溶液=1:0.05~1。在25~70℃恒温搅拌1~20h,然后泵入500~1000Da 的聚醚砜膜超滤器中,在温度不高于50℃、流速不低于15mL/min、操作压力0.6~ 1.1MPa的条件下超滤分离回收,截留液中主要为糖苷酶,返回到糖苷酶容器中重复利用。对收集的超滤液,即为普鲁宁溶液。然后过大孔树脂即可得到纯度为98%以上的普鲁宁。
(二)葡萄糖基化普鲁宁
以普鲁宁为原料,溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入环糊精葡萄糖基转移酶和环糊精,反应并重结晶葡萄糖基化的普鲁宁衍生物。
(三)以制得的普鲁宁和普鲁宁糖基化产物为原料,选择性的对R3或R4位的OH基修饰。即可以得到所需的普鲁宁衍生物。
制备实例1:取100mg的普鲁宁,加入5ml乙醇(95%),和30mg硫酸二甲酯,再加入15mg氢氧化钠。在室温下搅拌5小时。反应完成后,加入20ml水,然后用乙醚提取。醚层用无水硫酸钠干燥。去除乙醚后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为甲氧基的普鲁宁化合物(P- 3J,允许含有不大于10%的R4基为甲氧基)。产品化学结构已通过1H NMR、MS等鉴定。具体反应式见图1 。
制备实例2:取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和30mg硫酸二异丙酯,再加入15mg氢氧化钠。在室温下搅拌2-20小时。反应完成后,加入20ml 水,然后用石油醚:乙酸乙酯=2:1的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为异丙氧基的普鲁宁衍生物(P-3B,允许含有不大于10%的 R4基为异丙氧基)。产品化学结构已通过1HNMR、MS等鉴定。具体反应式见图2 。
制备实例3:取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和1ml甲醛,再加入15mg氢氧化钠或氢氧化钾。在室温下搅拌1-5小时。反应完成后,加入20 ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=1:3的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为去氧甲基的普鲁宁衍生物(P-3J-1,允许含有不大于10%的 R4基为去氧甲基)。产品化学结构已通过1HNMR、MS等鉴定具体反应式见图3 。
制备实例4:取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和0.5ml乙酸酐。在室温下搅拌5-10小时。反应完成后,加入20ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=1:1的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用 95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为乙酰基的普鲁宁衍生物(P-3X,允许含有不大于10%的R4基为乙酰基)。产品化学结构已通过1H NMR、MS等鉴定。具体反应式见图4 。
制备实例5:取100mg的普鲁宁,加入5ml的含无水的异丙醇和0.5环戊胺,加入催化剂RhH(PPh3)4(5mol%)。搅拌回流2-10小时。反应完成后,加入20ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=1:1的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为环戊胺基的普鲁宁衍生物(P-3W,允许含有不大于10%的R4基为环戊胺基)。产品化学结构已通过1H NMR、MS等鉴定。具体反应式见图5 。
2.本发明的普鲁宁衍生物的药效是通过一下实验方案得到的。
(一).制备普鲁宁衍生物在医药上可接受的制剂。
本发明用普鲁宁衍生物制备止咳化痰的药物,其成分中可以含有0.1-10%wt普鲁宁衍生物。所说的普鲁宁衍生物药物可以由普鲁宁单体组成,或者由普鲁宁衍生物与其他有效成分或常规制药辅料组成。
上述的普鲁宁衍生物药物是通过选择通用剂型的常规辅料或者不加辅料,用常规方法制备成所需的不同剂型的药物制剂。加入的辅料可以为固体、半固态或者液体物质,作为普鲁宁衍生物的载体、赋形剂或者介质。因此,普鲁宁衍生物药物制剂可以为片剂、粉剂、小药囊剂、甘香酒剂、混悬剂、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂、吸入剂、软或硬胶囊、无菌注射液等各种剂型。
普鲁宁衍生物药物的制剂包括:胶囊剂,其内含物含有0.5-99%wt的普鲁宁衍生物,通常可由不少于0.5%wt的普鲁宁衍生物与其他有效成分或各种常规辅料组成;片剂,其成分中含有不少于0.1%wt的普鲁宁衍生物;可由不少于0.1%wt的普鲁宁衍生物与其他有效成分或各种常规辅料组成;吸入剂,其内含物含有0.1-99%wt的普鲁宁衍生物,通常可由不少于0.1%wt的普鲁宁衍生物与其他有效成分或各种常规辅料组成;其与粉剂、小药囊剂、甘香酒剂、混悬剂、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂、软或硬胶囊、无菌注射液各种剂型其内有0.5-10%wt的普鲁宁衍生物以及可接受的额辅料。
(二).本发明是通过以下方法进行药效评价。
发明人对普鲁宁衍生物进行实验动物小白鼠的平喘实验。实验表明:普鲁宁衍生物对刺激小鼠引起哮喘的耐受时间,与空白对照组比较,均有显著的延长,在统计学上有显著差异;与阳性对照物抗炎平喘胶囊比较,耐受时间延长,疗效较阳性对照药物抗炎平喘胶囊显著。
发明人对普鲁宁衍生物进行实验动物小白鼠的抗炎实验。结果表明:普鲁宁衍生物对小鼠耳肿胀抗炎效果表现优异,与空白对照组比较,有显著的增加,统计学上有显著差异(P<0.05)。与阳性对照药物阿司匹林比较,对小鼠耳肿胀抗炎效果显著增加,统计学上有显著差异(P<0.05),疗效较阳性对照药物阿司匹林显著。说明普鲁宁衍生物具有抗炎的作用。
本发明的实验证明,普鲁宁衍生物不仅具有很好平喘抗炎作用,而且在小鼠实验中没有毒性。动物实验表明,当1500mg/kg剂量的普鲁宁衍生物口服给药动物时,动物未见毒性反应,该剂量相当于人服用剂量为4-6g普鲁宁衍生物/kg体重。
本发明所述的普鲁宁衍生物药物在0.1-700mg普鲁宁衍生物/kg体重/天,具有良好的平喘抗炎效果,优选的日剂量为1-100mg普鲁宁衍生物/kg体重/天。
综上所述,说明普鲁宁衍生物具有良好的平喘抗炎效果,能很好的治疗临床中由于急、慢性支气管炎以及感冒等引起的哮喘。因此,可用于制备抗炎平喘药物。
附图说明
图1 :化合物P-3J反应方程式
图2 :化合物P-3B反应方程式
图3 :化合物P-3J-1反应方程式
图4 :化合物P-3X反应方程式
图5 :化合物P-3W反应方程式
图6 :普鲁宁衍生物(P-3J)的液相色谱图
图7 普鲁宁衍生物(P-3J)的质谱图
图8 普鲁宁衍生物(P-3J)的1H NMR表征图
图9 普鲁宁HPLC谱图
图10 :普鲁宁的质谱图
图11 .普鲁宁的1H NMR表征图
图12 :普鲁宁衍生物(P-3J)颗粒剂溶解度的测定
下面结合实施案例对本发明做进一步的说明。
各实施例中所涉及的材料用料配比及成分含量中的固体与固体、液体与液体以及液体与固体的比分别以wt/wt(质量比)、v/v(体积比)、wt/v(重量/体积比)计算,除非另有说明。
实施案例1:普鲁宁的制备
将膏状柚苷泵入反应釜中,然后加入活性不低于100U/mg的糖苷酶溶液,膏状柚苷:糖苷酶溶液=1:0.05~1。在25~70℃恒温搅拌1~20h,然后泵入 500~1000Da的聚醚砜膜超滤器中,在温度不高于50℃、流速不低于15 mL/min、操作压力0.6~1.1MPa的条件下超滤分离回收,截留液中主要为糖苷酶,返回到糖苷酶容器中重复利用。对收集的超滤液,即为普鲁宁溶液。然后过大孔树脂即可得到纯度为98%以上的普鲁宁。所得固体分别以1HNMR、 13C NMR、ESI-MS、HPLC等方法进行表征。HPLC保留时间:9.7min;1H NMR(300MHz,Acetone-d6)δ7.48(s,1H),6.83(d,J=8.1Hz,1H),6.77(d,J=1.9 Hz,1H),6.69(d,J=8.2Hz,1H),6.12(d,J=1.9Hz,2H),4.99(d,J=7.5Hz,1H), 4.70(s,1H),4.41(d,J=23.3Hz,2H),3.89(d,J=10.2Hz,2H),3.80(d,J=1.9Hz, 3H),3.71(s,1H),3.53(s,2H),3.46(d,J=8.5Hz,2H),3.41-3.30(m,3H),2.90-2.83 (m,2H),2.09(d,J=6.6Hz,1H)。ESI-MS:(M-H)-(C21H22O10):理论值m/z 433.1,实际值:m/z 433.1。
实施案例2:普鲁宁衍生物(P-3J)的制备
取100mg的普鲁宁,加入5ml乙醇(95%),和30mg硫酸二甲酯,再加入15 mg氢氧化钠。在室温下搅拌5小时。反应完成后,加入20ml水,然后用乙醚提取。醚层用无水硫酸钠干燥。去除乙醚后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为甲氧基的普鲁宁衍生物(P-3J,允许含有不大于10%的R4基为甲氧基)。热水重结晶,固体分别以1H NMR、ESI-MS、HPLC等方法进行表征。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.95(s,1H),9.47(s,1H),7.58(dd,J=8.5,2.2Hz,1H),7.46(d,J=2.2Hz,1H),7.11(d,J= 8.7Hz,1H),6.84(s,1H),6.82(d,J=2.0Hz,1H),6.46(d,J=2.0Hz,1H),5.41(d,J =4.8Hz,1H),5.14(d,J=4.6Hz,1H),5.09(t,J=5.6Hz,2H),4.63(t,J=5.5Hz, 1H),3.88(s,3H),3.72(dd,J=10.2,5.1Hz,1H),3.54–3.41(m,2H),3.33–3.22(m, 2H),3.19(dt,J=13.9,7.0Hz,1H).ESI-MS:(M-H)-(C22H22O11):理论值m/z 461.1,实际值:m/z 461.1。
实施案例3:普鲁宁衍生物(P-3B)的制备
取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和30mg硫酸二异丙酯,再加入15mg氢氧化钠。在室温下搅拌2-20小时。反应完成后,加入20ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=2:1的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为异丙氧基的普鲁宁衍生物(P-3B,允许含有不大于10%的R4基为异丙氧基)。产品化学结构已通过1H NMR、MS等鉴定。1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.91(s,1H),9.14(s,1H),7.42(dd,J=8.5,2.6Hz,1H), 7.41(d,J=2.4Hz,1H),7.04(d,J=4.7Hz,1H),6.84(s,1H),6.82(d,J=2.0Hz, 1H),6.32(d,J=2.0Hz,1H),5.21(d,J=5.3Hz,1H),5.12(d,J=3.6Hz,1H),5.02 (t,J=3.6Hz,2H),4.65(t,J=5.0Hz,1H),4.35(t,J=4.6Hz,1H),3.78(s,3H),3.68 (dd,J=10.2,5.1Hz,1H),3.51–3.37(m,2H),3.31–3.21(m,2H),3.19(dt,J=13.9, 7.0Hz,1H),1.12(dt,J=13.9Hz,6H).ESI-MS:(M-H)-(C24H28O10):理论值m/z 476.1,实际值:m/z 476.1。
实施案例4:普鲁宁衍生物(P-3J-1)的制备
制备实例3:取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和1ml甲醛,再加入15mg氢氧化钠或氢氧化钾。在室温下搅拌1-5小时。反应完成后,加入20ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=1:3的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为去氧甲基的普鲁宁衍生物(P- 3J-1,允许含有不大于10%的R4基为去氧甲基)。产品化学结构已通过1HNMR、MS等鉴定。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.92(s,1H),9.44(s,1H),7.56 (dd,J=8.4Hz,1H),7.45(d,J=2.3Hz,1H),7.10(d,J=8.6Hz,1H),6.85(s,1H), 6.83(d,J=2.3Hz,1H),6.47(d,J=2.3Hz,1H),5.43(d,J=4.6Hz,1H),5.12(d,J= 4.4Hz,1H),5.10(t,J=5.3Hz,2H),4.68(t,J=5.1Hz,1H),3.85(s,3H),3.73(dd,J =10.1,5.4Hz,1H),3.52–3.40(m,2H),3.32–3.21(m,2H),3.19(dt,J=13.9,7.0 Hz,1H),2.12(d,J=7.2Hz,3H).ESI-MS:(M-H)-(C22H24O9):理论值m/z 432.1,实际值:m/z 432.1。
实施案例5:普鲁宁衍生物(P-3X)的制备
取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和0.5ml乙酸酐。在室温下搅拌5-10小时。反应完成后,加入20ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=1:1的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用 95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为乙酰基的普鲁宁衍生物(P-3X,允许含有不大于10%的R4基为乙酰基)。产品化学结构已通过1H NMR、MS等鉴定。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.92(s,1H), 9.43(s,1H),7.56(dd,J=8.3,2.1Hz,1H),7.43(d,J=2.0Hz,1H),7.10(d,J=8.4Hz,1H),6.81(s,1H),6.79(d,J=2.0Hz,1H),6.44(d,J=2.4Hz,1H),5.38(d,J= 4.2Hz,1H),5.24(d,J=4.2Hz,1H),5.11(t,J=5.9Hz,2H),4.59(t,J=5.9Hz,1H), 3.86(s,3H),3.68(dd,J=5.0Hz,1H),3.51–3.38(m,2H),3.30–3.21(m,2H),3.17 (dt,J=13.2Hz,1H),2.43(t J=7.4Hz,3H).ESI-MS:(M-H)–(C23H24O11):理论值 m/z 476.4,实际值:m/z 476.4。
实施案例6:普鲁宁衍生物(P-3W)的制备
取100mg的普鲁宁,加入5ml的含5%水的异丙醇和0.5环戊胺。搅拌回流2- 10小时。反应完成后,加入20ml水,然后用石油醚:乙酸乙酯=1:1的混合溶剂提取。有机溶剂层用无水硫酸钠干燥。去除混合溶剂后,粗产物用95%乙醇溶解后,用柱层析方法(硅胶柱)纯化,即可以得到所需的R3基为环戊胺基的普鲁宁衍生物(P-3W,允许含有不大于10%的R4基为环戊胺基)。产品化学结构已通过1H NMR、MS等鉴定。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.95(s,1H), 9.45(s,1H),7.57(d,J=4.2Hz,1H),7.44(d,J=2.2Hz,1H),7.07(d,J=8.3Hz, 1H),6.81(s,1H),6.79(d,J=2.0Hz,1H),6.43(d,J=2.5Hz,1H),5.40(d,J=4.5 Hz,1H),5.11(d,J=4.3Hz,1H),5.05(t,J=5.1Hz,2H),4.59(t,J=5.1Hz,1H), 3.91(s,3H),3.71(dd,J=10.1Hz,1H),3.51–3.48(m,2H),3.41–3.36(m,4H), 3.35–3.21(m,2H),3.19(dt,J=13.9,7.0Hz,1H),2.06(dd,J 7.0Hz,4H).ESI-MS: (M-H)–(C25H29NO9):理论值m/z=487.5,实际值:m/z=487.5。
实施案例7:普鲁宁及其衍生物纯度分析
1、液相分析条件:色谱柱(型号C18 250×4.6mm);流速:1.0ml/min;流动相:0.5%醋酸溶液:乙腈=7:3;检测波长:346nm;进样量:10μl。
2、流动相的制备:用超纯水与冰乙酸(试剂纯)制备0.5%的醋酸溶液 1000ml,用液相用抽滤器过滤至无肉眼可见杂质,超声半小时除气泡;取500 ml乙腈(分析纯),用液相用抽滤器过滤至无肉眼可见杂质,超声半小时除气泡。
3、已知浓度样品溶液的配制及分析:取5.0mg样品分别溶于10ml 50% DMSO溶液中,震荡使完全溶解。用注射器及针筒式滤膜过滤器过滤每种浓度溶液1ml于液相进样瓶中,做高效液相分析。
4、样品纯度分析:取任意一浓度的样品溶液做高效液相分析,通过峰面积百分比计算纯度。
从峰面积可以得到糖基化普鲁宁纯度为98.3%。
实施案例8:普鲁宁及其衍生物药物致豚鼠平喘药理学实验
将SPF级豚鼠放入喷雾装置箱内,超声波雾化器恒压喷入2%氯化乙酰胆碱和0.1%组织胺混合液气雾15s。选择150s内出现哮喘反应的50只豚鼠进行试验。根据豚鼠引喘潜伏期随机分为模型对照组组、阳性药物组、受试样品低、中、高剂量组(相当于临床用量的1.875、3.75、7.5倍),10只/组,雌雄各半。各组动物按照10ml/kg灌胃给药,1h后将豚鼠放入喷雾装置箱内,每次1只。按筛选时同样条件恒压喷雾2%氯化乙酰胆碱和0.1%组织胺混合液15s。记录喷雾开始至症状出现的时间(以抽搐、跌倒为准),作为给药1h后的潜伏时间。第二天,各组动物继续灌胃给药,连续6d,末次给药1h后,记录致喘的潜伏时间。
表一本发明制剂对组织胺所致豚鼠哮喘影响(X±S)
组别 | 动物数(只) | 潜伏期(S) |
生理盐水 | 10 | 104.6±32.9 |
阳性对照组1 | 10 | 231.7±95.1* |
本发明小剂量组 | 10 | 235.5±93.9* |
本发明中剂量组 | 10 | 257.2±101.2** |
本发明大剂量组 | 10 | 278.2±118.6** |
注:1阳性对照组药物为抗炎平喘胶囊;*P<0.01;**P<0.001
豚鼠经呼吸道吸入一定量的磷酸组胺后,可以造成类似人类的“哮喘”模型,本发明的受试样品低、中、高剂量组(相当于临床用量的1.875、3.75、7.5 倍)喷雾给豚鼠后可以抗动物组织胺引起的“哮喘”症状,表现为跌倒期延长,与生理盐水组相比较有非常显著意义,经统计学处理分别为P<0.01, P<0.001和P<0.001.
实施案例9:普鲁宁及其衍生物药物对哮喘大鼠模型的影响
SPF级SD大鼠,180-220g,单一性别。检疫合格后,将60只大鼠随机分为正常对照组10只和模型组60只。模型组大鼠于实验第0天腹腔注射0.6%OVA- Alum致敏液1mL/只;于实验第7、14天腹腔注射0.2%OVA-Alum致敏液1mL/ 只;正常对照组大鼠给予等量的生理盐水。于实验第15天,模型组大鼠每天吸入2.0ppm臭氧1h,连续7天。于实验第21天,模型组大鼠随机分为模型对照组、阳性药物(氢氧化铝为佐剂)1组、受试样品低、中、高剂量组,10只/组。除正常对照组外,各组大鼠分别按照10mL/kg体重灌胃给药,给药30min后将大鼠置于雾化吸入箱中以1%OVA溶液激发30min,连续7天。末次给药1h,大鼠麻醉后放血处死,结扎左肺,用5mL冷5%NaHCO3灌洗右侧肺叶,重复3次,回收支气管肺泡灌洗液(BALF)。于4℃,1500rpm,离心10min,收集上清液。 ELISA检测BALF中ICAM-1、VCAM-1、L-选择素含量测定,病理组织学检查左肺组织和免疫组化检测肺组织NF-κB p65的表达。
表二普鲁宁及其衍生物药物对哮喘大鼠模型的影响
NF-κB p65细胞因子水平增高是哮喘的重要特征之一。如表结果可知,与对照组相比,以氢氧化铝为佐剂的哮喘组NF-κB p65细胞因子ICAM-1、VCAM- 1水平无显著增高。而以低糖基化普鲁宁为佐剂的哮喘组NF-κB p65细胞因子 ICAM-1、VCAM-1、L-选择素含量水平显著高于自身相应对照组,也显著高于以氢氧化铝为佐剂和无佐剂哮喘组
实施案例10普鲁宁及其衍生物药物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的药理学实验
SPF级NIH小鼠,雄性,60只。随机为模型对照组、阳性对照组(阿司匹林)、受试药物低、中、高剂量组,10只/组。各组小鼠按照20ml/kg体重灌胃给药,1次/天,连续2天。末次给药0.5h后,在小鼠右耳涂布二甲苯0.05ml/只,右耳给予蒸馏水。2h后处死小鼠,剪下左右耳片,用直径9mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片,测量两耳片重量差为肿胀度。
表三低糖基化普鲁宁对小鼠耳肿胀试验影响
阳性药(阿司匹林),普鲁宁及其衍生物的低、中、高剂量组,对二甲苯引起的耳肿胀有明显的抑制作用(P<0.05~0.01),其中,以普鲁宁及其衍生物的中、高剂量组效果最明显。该实验表明普鲁宁及其衍生物具有明显的抗炎活性。
实施例11普鲁宁及其衍生物颗粒剂溶出度的测定
1分析方法学的建立
检测波长的确定:分别称普鲁宁衍生物和辅料适量,用甲醇配制成适宜浓度的溶液,并以甲醇为空白对照,于200~700nm范围内进行扫描。结果表明在 346nm处有普鲁宁衍生物的最大吸收峰;而辅料在此处对普鲁宁衍生物的测定均无干扰。因此,选定346nm作为测定波长。标准曲线:精密称普鲁宁衍生物适量,用甲醇配制成系列浓度的溶液,于346nm处测定吸收度,以浓度(C) 对吸收度(A)进行线性回归。
2普鲁宁衍生物溶出度的测定方法
称取化含有普鲁宁83nmol(50mg)的固体颗粒,以及含有普鲁宁衍生物 83nmol的固体颗粒样品进行溶出度试验。每组样品平行测定3份,按中国药典 2015版第二法进行。溶出介质为900mL的蒸馏水,温度为37±0.5℃,转速为100±3rpm。分别在3、6、9、12、15min取样5mL并补入相同体积的溶出介质,样品经0.8μm微孔滤膜过滤。取续滤液稀释后于346nm处测定吸收度,计算化普鲁宁衍生物的溶出度。
3测定结果
标准曲线方程C=16.6307A+0.396,R2=0.9903,线性范围:1.858~54.873 μg/mL。本发明采用体外溶出度实验以普鲁宁原料药为对照,测定普鲁宁衍生物在体外的溶出情况,结果表明,普鲁宁衍生物在体外溶出情况良好。结果见表三
表三普鲁宁衍生物-聚乙烯吡咯烷酮K30颗粒的溶出速率
从表一可以看出,原料药普鲁宁在15min体外累计溶出的百分比为 13.13%,而在本发明的普鲁宁衍生物在3-15min内达到标量的94.15%- 8.93%,制成的普鲁宁衍生物后的溶出速度均高于普鲁宁。因此糖基化增加了药物的体外释放速度。
实施例12普鲁宁衍生物(P-3J)颗粒剂溶解度的测定
普鲁宁衍生物颗粒剂溶于水,溶解能力的大小直接影响到药物在溶液体系和细胞体系的应用。因为普鲁宁在水溶液中稳定,所以我们利用紫外分光光度法对饱和状态的普鲁宁的水溶液进行溶解度值的测定。本实验中,我们配制2.7 g/L普鲁宁的水溶液,按照一定比例稀释后测吸光度做出标准曲线,对346nm 区间的特征峰进行积分作为纵坐标。再测定配制的饱和溶液稀释液的吸光值,通过内标法得到稀释液的浓度,最后计算出饱和溶液浓度。标准曲线图如图12 。
标准曲线方程为y=1356.6739A-26.42,R2=0.9864。饱和溶液经50倍稀释后,吸光度积分值为710.53,浓度为0.473g/L,则普鲁宁衍生物的溶解度是 23.65g/L。
实施案例13普鲁宁衍生物的毒理学实验
在28±1℃的温度,70±5%的湿度条件下,选取7-8周龄,健康的清洁级 NIH小鼠20只雌雄各半,体重在20-22g。将饲料和水消毒,试验前和试验的观察期内,均按正常饲料条件饲养。
将普鲁宁衍生物溶解在0.5%Tween80中,浓度为300mg/ml,将该液体经口给药小鼠,给药剂量为0.4ml/20g小鼠体重。给药后观察1,4,8,12小时,以后每12h观察一次。观察死亡情况,每天记录小鼠体重变化以及其他的症状。第 10天,断颈处死小鼠,取各器官进行病理检查。
在第10天,全部小鼠存活,2.0g/kg剂量的普鲁宁衍生物未见毒性反应。小鼠各器官病理检查正常,没有发现病变,10天内小鼠体重未见减轻。因此,说明本发明的普鲁宁衍生物药物在口服给药动物时未见毒性。
实施案例14普鲁宁及其衍生物胶囊制剂
如表四:按以下成分配比制备成明胶胶囊
成分 | 组分(%) |
干燥淀粉 | 35 |
普鲁宁或普鲁宁衍生物 | 60 |
微粉硅胶 | 5 |
总计 | 100 |
将辅料与普鲁宁衍生物混合均匀,装入明胶胶囊中,即得。装量:100mg/胶囊。
实施案例15普鲁宁及其衍生物片剂
如表五:按以下成分配比制备成片剂
成分 | 组分 |
普鲁宁或普鲁宁衍生物 | 500g |
淀粉 | 472.5g |
淀粉胶(14%) | 25.0g |
硬脂酸镁 | 2.5g |
总计 | 1000g |
将普鲁宁衍生物与淀粉混合均匀,加淀粉浆继续搅拌使成软材,用10目尼龙帅质粒,80-90℃通风干燥,干粒加入硬脂酸镁,经过12目嗮整粒,混匀,压成片剂。共得10000片,每片片重约为0.1g。
实施案例16普鲁宁及其衍生物吸入剂
如表六:按以下成分配比制备成片剂
成分 | 组分(g) |
普鲁宁或普鲁宁衍生物 | 100 |
乳糖 | 500 |
泊洛沙姆 | 1 |
微粉硅胶 | 10 |
L-亮氨酸 | 0.5 |
PEG400(50%)水溶液 | 300 |
总计 | 911.5 |
将普鲁宁或普鲁宁衍生物、乳糖、泊洛沙姆、L-亮氨酸用PEG400水溶液溶解,再进行喷雾干燥,所得喷雾干燥粉末加入微粉硅胶,混合均匀,分装于胶囊型干粉吸入装置中。
实施案例17普鲁宁及其衍生物的生物利用度实验
1、样品制备:分别取普鲁宁编号为①和普鲁宁衍生物编号为②两个样品;
2、试验方法:试验动物采用体重约2kg的健康家兔40只(由中山大学实验动物中心提供),动物随机分为四组,预先禁食12h后,分别灌胃给予上述样品,剂量为300mg/kg(相当于70kg成人日服用剂量4g),给予样品后密集测定血浆中普鲁宁和普鲁宁衍生物的含量,至达峰时间后半小时,检测血药峰浓度(Cmax);
试验样品灌胃结束后,停药一段时间,至动物体内样品完全代谢,然后静脉注射给予等剂量样品溶液,并测定血浆中样品含量(μg/mL),以此作为参比数据;
结果见表七:
表七:普鲁宁衍生物生物利用度
试验结果表明:本发明所述普鲁宁衍生物(②号样品)中吸收率高,为普鲁宁(①号样品)的5.72倍,其生物利用度大大提高。
Claims (16)
1.一种普鲁宁及其衍生物,其特征在于化学结构式如I所示:
R1选自H或(Glc)n,其中n<10;
R2选自H或Rha;
R3选自H,OH,OCH3,OC2H5,OC3H7,CH3COO,CH3,CF3,C1-C6-NH2(其中C1-C6为具有1-6个C的烷基、环烷基、烯烃基、环烯烃基,尤其是环戊基氨基、环己基氨基;以及吗啡啉基、甲基哌嗪基),NH2,CH3NH,(CH3)2N,(CH3CH2)2N,CH3CONH,CN,Br,Cl,F,甲酰基,乙酰基,氨基酸酰基,氨基酸酰氨基(R’-CH-CONH-),寡肽酰基,寡肽酰氨基等。
R4选自H,OH,OCH3,CH3COO,CH3,CF3,NH2,CH3NH,CH3CONH,CN,Br,Cl,F。
2.权利要求1所述的式I的普鲁宁类化合物,其中R1=H,Glc;R2=H,Rha;R3=OH,OCH3,OC3H7.
3.一种制备权利要求1-2任意一种式I的普鲁宁类化合物的方法,其特征在于:以普鲁宁、柚皮苷等天然产物衍生化得到式I所示的普鲁宁类化合物的方法。
4.一种普鲁宁的制备方法,其特征在于通过例如酶转化技术,将柚果皮中含量丰富的成分柚皮苷转化成普鲁宁。
5.权利要求4所述的普鲁宁的制备方法,其特征在于以柚皮苷为原料,溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入固定化鼠李糖苷酶反应并重结晶获得普鲁宁。
6.权利要求1所述的普鲁宁衍生物的制备方法,其特征通过例如酶转化技术,将普鲁宁转化为葡萄糖基化的普鲁宁衍生物。
7.权利要求6所述的葡萄糖基化的普鲁宁衍生物的制备方法,其特征在于以普鲁宁为原料,溶于磷酸盐缓冲溶液中,加入环糊精葡萄糖基转移酶和环糊精,反应并重结晶葡萄糖基化的普鲁宁衍生物。
8.权利要求1所述的普鲁宁衍生物的制备方法,其特征在于,包括:将硫酸二甲酯与普鲁宁反应得到R3、R4为甲氧基的普鲁宁衍生物。
9.权利要求1所述的普鲁宁衍生物的制备方法,其特征在于,包括:将硫酸二异丙酯与普鲁宁反应得到R3、R4为异丙氧基的普鲁宁衍生物。
10.权利要求1所述的普鲁宁衍生物的制备方法,其特征在于,包括:将甲醛与普鲁宁反应得到R3、R4为甲基的普鲁宁衍生物。
11.权利要求1所述的普鲁宁衍生物的制备方法,其特征在于,包括:将环戊胺与普鲁宁反应得到R3、R4为环丁基的普鲁宁衍生物。
12.权利要求1所述的普鲁宁及其衍生物的制备方法,其特征在于,包括:将乙酸酐与普鲁宁反应得到R3、R4为乙酰基的普鲁宁衍生物。
13.权利要求1所述的普鲁宁及其衍生物在制备用于在抗炎、平喘药物中的应用。
14.权利要求1所述,普鲁宁及其衍生物在抗炎、平喘药物中的应用,其特征在于普鲁宁及其衍生物以及在药学上可接受的载体,或者作为有效成分的普鲁宁及其衍生物与其他有效成分或常规的制药辅料组成。
15.一种药用组合物,其包含至少一种权利要求1所述的化合物或它的药学上可接受的晶体,及其药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或它们的组合。
16.权利要求13所述,其特征是在于药物含有0.001-100%wt的普鲁宁或普鲁宁衍生物,优选0.01-50%wt的普鲁宁或普鲁宁衍生物,更优选0.1-10%wt的普鲁宁或普鲁宁衍生物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710993667.XA CN107556353A (zh) | 2017-10-23 | 2017-10-23 | 一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710993667.XA CN107556353A (zh) | 2017-10-23 | 2017-10-23 | 一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN107556353A true CN107556353A (zh) | 2018-01-09 |
Family
ID=60985989
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710993667.XA Pending CN107556353A (zh) | 2017-10-23 | 2017-10-23 | 一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN107556353A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108693286A (zh) * | 2018-05-18 | 2018-10-23 | 中科广化(重庆)新材料研究院有限公司 | 一种药物中基因毒性杂质硫酸二异丙酯的检测方法 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1318371A (zh) * | 2000-02-25 | 2001-10-24 | Basf公司 | 黄酮的新用途 |
CN1430967A (zh) * | 2003-01-21 | 2003-07-23 | 中山大学 | 柚皮苷用于制备治疗急、慢性支气管炎的药物 |
CN1555793A (zh) * | 2004-01-08 | 2004-12-22 | 中山大学 | 柚皮素及其盐用于制备止咳化痰药物 |
CN1864675A (zh) * | 2006-02-06 | 2006-11-22 | 中国人民解放军第二军医大学 | 柚皮素及其衍生物用于制备抗心脑系统疾病产品的用途 |
JP5042519B2 (ja) * | 2006-04-18 | 2012-10-03 | 東洋精糖株式会社 | ナリンジン組成物、その製造方法及び用途 |
CN103242398A (zh) * | 2013-04-26 | 2013-08-14 | 四川古蔺肝苏药业有限公司 | 二氢黄酮化合物及其制备方法与应用 |
CN105820201A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-08-03 | 江西农业大学 | 从五指毛桃果中提取乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷的方法及其用途 |
-
2017
- 2017-10-23 CN CN201710993667.XA patent/CN107556353A/zh active Pending
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1318371A (zh) * | 2000-02-25 | 2001-10-24 | Basf公司 | 黄酮的新用途 |
CN1430967A (zh) * | 2003-01-21 | 2003-07-23 | 中山大学 | 柚皮苷用于制备治疗急、慢性支气管炎的药物 |
CN1555793A (zh) * | 2004-01-08 | 2004-12-22 | 中山大学 | 柚皮素及其盐用于制备止咳化痰药物 |
CN1864675A (zh) * | 2006-02-06 | 2006-11-22 | 中国人民解放军第二军医大学 | 柚皮素及其衍生物用于制备抗心脑系统疾病产品的用途 |
JP5042519B2 (ja) * | 2006-04-18 | 2012-10-03 | 東洋精糖株式会社 | ナリンジン組成物、その製造方法及び用途 |
CN103242398A (zh) * | 2013-04-26 | 2013-08-14 | 四川古蔺肝苏药业有限公司 | 二氢黄酮化合物及其制备方法与应用 |
CN105820201A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-08-03 | 江西农业大学 | 从五指毛桃果中提取乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷的方法及其用途 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
JULIE RAKEL MIKELL: "Bioconversion of 7-Hydroxyflavanone: Isolation, Characterization and Bioactivity Evaluation of Twenty-One Phase I and Phase II Microbial Metabolites", 《CHEM. PHARM. BULL.》 * |
VON LUDWIG REICHEL: "Zur Synthese von Hydroxyflavanonglucosiden unter milden Bedingungen", 《LIEBIGS ANN. CHEM》 * |
许波: "环状糊精葡萄糖基转移酶的研究进展", 《食品科学》 * |
陈俊: "重组α-L-鼠李糖苷酶制备普鲁宁", 《中国现代应用药学》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108693286A (zh) * | 2018-05-18 | 2018-10-23 | 中科广化(重庆)新材料研究院有限公司 | 一种药物中基因毒性杂质硫酸二异丙酯的检测方法 |
CN108693286B (zh) * | 2018-05-18 | 2020-08-07 | 中科广化(重庆)新材料研究院有限公司 | 一种药物中基因毒性杂质硫酸二异丙酯的检测方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101437529B (zh) | 具有抗病毒活性的黄酮类化合物 | |
CN103694375B (zh) | 一种三萜-环糊精共价化合物及其制备方法和用途 | |
CN111437302B (zh) | 黄杞叶水提后大孔树脂处理后的提取物在制备糖尿病药物中的应用及其分析方法 | |
CN101747305B (zh) | 硝克柳胺化合物晶v型、其制法和其药物组合物与用途 | |
CN101920019B (zh) | 亲水性聚合物-葛根素特异性缀合的非溶血性缀合物 | |
CN102702300A (zh) | 一种预防或治疗自身免疫性糖尿病的化合物及其制备方法和用途 | |
CN107722089A (zh) | 一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在止咳化痰药物中的应用 | |
CN107556353A (zh) | 一种普鲁宁及其衍生物的制备及其在抗炎和平喘药物中的应用 | |
CN100443498C (zh) | 白薇总皂苷及其皂苷化合物在抗炎药物中的应用 | |
CN107573393A (zh) | 一种低糖基化普鲁宁的制备及其在抗炎平喘药物中的应用 | |
CN1325502C (zh) | 岩白菜素五乙酰化物及其应用 | |
CN106008485A (zh) | 格列美脲的药物组合物及其在生物医药中的应用 | |
CN106188176B (zh) | 连翘脂素葡萄糖醛酸衍生物、制备方法及其应用 | |
CN101058594A (zh) | 草珊瑚有效成分及其制备方法和其药物组合物与用途 | |
CN103156840B (zh) | 17-氢-9-去氢穿心莲内酯-3-硫酸酯钠(或钾)、17-氢-9-去氢穿心莲内酯-3,19-二硫酸酯钠(或钾)组合物的一次制备方法及其制备药物用途 | |
CN102898322B (zh) | 一种化合物及其制法和用途 | |
CN113069554B (zh) | 一种齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒的制备方法及其应用 | |
CN104383547B (zh) | 天山雪莲提取物磷脂复合物、口腔崩解片及其制备方法 | |
CN103145658A (zh) | 17-氢-9-去氢穿心莲内酯-3-硫酸酯钠(或钾)、17-氢-9-去氢穿心莲内酯-19-硫酸酯钠(或钾)、17-氢-9-去氢穿心莲内酯-3,19-二硫酸酯钠(或钾)组合物的一次制备方法及其制备药物用途 | |
CN103159708A (zh) | 17-氢-9-去氢穿心莲内酯-3-硫酸酯钠(或钾)、17-氢-9-去氢穿心莲内酯-19-硫酸酯钠(或钾)组合物的一次制备方法及其制备药物用途 | |
CN102584846B (zh) | 一种抗甲型h1n1流感病毒的莪术醇衍生物 | |
CN107722088A (zh) | 一种低糖基化普鲁宁的制备及其在止咳化痰药物中的应用 | |
CN101824061B (zh) | 一种来自中药黄芩的黄芩苷离子对药物和制备方法及其用途 | |
CN101307043B (zh) | 6,8-二羟甲基白杨素和6,8-二羟甲基醚白杨素及其制备方法与药物用途 | |
CN103159717B (zh) | 17-氢-9-去氢穿心莲内酯-3,19-二硫酸酯化物、制备方法及其制备药物用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20180109 |
|
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |