CN107496288A - 一种象牙香米祛斑液及其制备方法 - Google Patents

一种象牙香米祛斑液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及祛斑液加工技术领域，特别涉及一种象牙香米祛斑液及其制备方法，本申请的象牙香米祛斑液由如下重量份的原料制成：45份‑55份的象牙香米精油、13份‑17份的芦荟提取物、12份‑19份的油茶花提取物、21份‑31份的大米胚芽提取物、13份‑17份的葡萄籽提取物、3份‑9份的柠檬酸和10份‑19份的甘油醇溶液；通过使用植物提取物进行复配，能安提高祛斑液的祛斑能力，是一种安全、有效的祛斑产品；本申请还采用超临界CO2萃取法提取象牙香米精油，结合预处理，提高象牙香米精油成分的析出。

Description

一种象牙香米祛斑液及其制备方法
【技术领域】
本发明涉及祛斑液加工技术领域，特别涉及一种象牙香米祛斑液及其制备方法。
【背景技术】
象牙香米是由蒋志农教授与云南声农稻作研究所合作培育研发的全新粳型香软米品种，源出于植物王国云南西双版纳，于2012年第三季度正式完成“象牙香米”产权保护，并推向市场。象牙香米的米体纯白，不透明，介于糯米与粳米之间。象牙香米属新型粳型香软米品种，颜色介于糯米与普通粳米之间，洁白莹润，光若凝脂，口感香软油润，柔糯回甜，冷饭不回生，香味纯正持久；象牙香米香味独特，芳香怡人，而且象牙香米的提取物中有丰富的氨基酸，和抑制体外酪氨酸酶活性的能力，如果能有效利用其中的精油成分制备祛斑液，将会提高祛斑液品质，还能提高象牙香米的深加工能力，进一步提高象牙香米的利用价值，然而，由于大米精油的相提取过程中，由于大米中含有丰富的蛋白质、直链淀粉等物质，处理起来比较麻烦，精油往往会被大量淀粉包裹，将不利于精油成分的析出，因此目前还没有关于制备象牙香米精油应用于化妆品领域的报道，市面上的祛斑液主要祛斑成分主要为柠檬酸或柠檬提取物等富含维生素C的成分，然而维生素C具有很强的光敏作用，使用不当在太阳光照射下反而会加深黑色素沉积，造成皮肤长斑，因此，有必要提供一种提高象牙香米精油提取率的提取方法，从而填补象牙香米精油应用于化妆品的美白、祛斑液领域的空白。
【发明内容】
鉴于上述内容，有必要提供一种提高象牙香米精油提取率的提取方法，从而填补象牙香米精油应用于化妆品的美白、祛斑液领域的空白。
为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种象牙香米祛斑液，所述祛斑液由如下重量份的原料制成：45份-55份的象牙香米精油、13份-17份的芦荟提取物、12份-19份的油茶花提取物、21份-31份的大米胚芽提取物、13份-17份的葡萄籽提取物、3份-9份的柠檬酸和10份-19份的甘油醇溶液。
进一步的，所述象牙香米精油提取方法包括如下步骤：
(1)预处理：将新鲜的象牙香米放入1-2倍质量倍数的冰水中浸泡3-5h，然后，再过滤取象牙香米在-17℃～-12℃的条件下进行急冻，急冻12h-14h后将象牙香米放入光照强度为1000Lx-2000Lx的灯箱中进行光照，光照30min后将象牙香米研磨到40目-70目得到象牙香米粉；
(2)生物酶预处理：按照50mg/g-60mg/g的添加量向步骤(1)的象牙香米粉中添加质量浓度为2％的生物酶混合液，搅拌均匀后在25℃的恒温箱中静置2h-3h；然后放入烘箱中进行干燥，直至含水率为2％-5％，得到象牙香米干粉；
(3)超声预处理：将步骤(2)中的象牙香米干粉与水混合，干粉与水的比例为1-3:1-2，然后超声提取器中进行超声处理，所述超声处理的超声功率密度为200w/L-300w/L；超声处理温度为100℃-120℃；超声处理按照“打开超声进行超声处理10s-关闭超声20s-打开超声进行超声处理10s”的处理方式进行重复处理，超声处理的总时长为270s；
(4)超临界CO2萃取：将步骤(3)超声处理后的象牙香米粉末放置在萃取釜中进行CO2的超临界萃取，所述超临界萃取的流量为33L/min，萃取压力为55MPa，萃取温度为55℃、解析温度50℃，萃取时间为3h；萃取结束后萃取物进入分离罐进行分离得到象牙香米精油。
进一步的，所述步骤(1)象牙香米的淀粉含量为20％-25％。
进一步的，所述步骤(1)的冰水温度为-2℃～0℃。
进一步的，所述步骤(1)灯箱中用于光照处理的光为蓝光、红光、紫光和白光，光照方式为按照“蓝光30s-红光30s-紫光30s-白光30s-蓝光30s”的方式进行光照。
进一步的，所述步骤(2)生物酶混合液由如下重量份的原料制成：10份-20份的果胶酶、20份-40份的淀粉酶、30份-40份的糖化酶和350份-400份质量百分数为3％的氯化钠溶液；所述果胶酶的酶活力为2000u/g-3000u/g；所述淀粉酶的酶活力为2500u/g-3500u/g；所述糖化酶的酶活力为2500u/g-3500u/g。
本发明还提供了一种象牙香米祛斑液的制备方法，所述方法包括如下步骤：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃-2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃-4℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃-60℃的水浴中加热3h-4h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d-12d，得到所述象牙香米祛斑液。
本发明具有如下有益效果：
本申请使用象牙香米精油、芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物、柠檬酸和甘油醇溶液做为原料制备象牙香米祛斑液，配方中，象牙香米精油含有丰富的氨基酸，能有效提亮肤色，而且具有很强的抑制体外酪氨酸酶活性的能力，香米精油分子小，能有效渗透到皮肤当中提高皮肤的抗酶活能力，还具有很强的琐水能力，象牙香米精油用于制备祛斑液，可以有效提高祛斑液的品质；然而象牙香米精油分子小，容易被皮肤吸收，不能在皮肤表面形成保护膜，因此，申请人添加了芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物等这些分子量比较大的物质，这些物质不仅本身具有抑制体外酪氨酸酶活性的能力，还能与象牙香米精油分子进行交联，从而在人体皮肤表面形成保护膜，提高祛斑液的祛斑能力，本申请还采用柠檬酸和甘油醇溶液对各种精油成分进行调和，有效提高祛斑液的中各成分的溶解度。
2、本申请的象牙香米精油提取方法采用超临界CO2萃取法提取，该方法操作简单、成熟，而且提取率高、纯度高杂质少；由于本申请的象牙香米其精油成分含量低，淀粉、蛋白质含量高，要提取精油如果不进行预处理将会大大影响精油的产出率，本申请的预处理采用冰水对象牙香米进行浸泡，浸泡后，大米内部充分吸水，而且淀粉吸水后会膨胀，在急冻条件下内部会凝结成不规则的冰晶，冰晶会穿破大米细胞，有利于细胞内溶物质的析出，经过冰冻预处理后，本申请还使用了灯光对大米进行光照，不同颜色的光会产生不同波长的辐射，更进一步的对大米细胞进行破壁处理，由于本申请的象牙香米其含有丰富的大分子物质，尤其是淀粉，淀粉的包裹将会导致精油成分很难析出，为此本申请使用果胶酶、淀粉酶、糖化酶处理将大分子的果胶、淀粉分解成单糖成分，大分子物质分解后，还通过超声处理、破碎，更有效的保证了精油的析出效率，提高象牙香米的精油产量。
【具体实施方式】
本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
本说明书(包括任何附加权利要求、摘要)中公开的任一特征，除非特别叙述，每个特征只是一系列等效或类似特征中的一个例子而已。
实施例1：
本实施例的象牙香米祛斑液由如下重量份的原料制成：45份的象牙香米精油、16份的芦荟提取物、12份的油茶花提取物、21份的大米胚芽提取物、17份的葡萄籽提取物、3份的柠檬酸和10份的甘油醇溶液。
其中，上述象牙香米精油提取方法包括如下步骤：
(1)预处理：将新鲜的象牙香米(其中，象牙香米的淀粉含量为20％。)放入1倍质量倍数的冰水(其中，冰水温度为-2℃。)中浸泡3h，然后，再过滤取象牙香米在-17℃的条件下进行急冻，急冻12h后将象牙香米放入光照强度为1000Lx的灯箱中(其中，灯箱中用于光照处理的光为蓝光、红光、紫光和白光，光照方式为按照“蓝光30s-红光30s-紫光30s-白光30s-蓝光30s”的方式进行光照。)进行光照，光照30min后将象牙香米研磨到40目得到象牙香米粉；
(2)生物酶预处理：按照50mg/g的添加量向步骤(1)的象牙香米粉中添加质量浓度为2％的生物酶混合液，搅拌均匀后在25℃的恒温箱中静置2h；然后放入烘箱中进行干燥，直至含水率为2％，得到象牙香米干粉；
(3)超声预处理：将步骤(2)中的象牙香米干粉与水混合，干粉与水的比例为1:1，然后超声提取器中进行超声处理，所述超声处理的超声功率密度为200w/L；超声处理温度为100℃；超声处理按照“打开超声进行超声处理10s-关闭超声20s-打开超声进行超声处理10s”的处理方式进行重复处理，超声处理的总时长为270s；
(4)超临界CO2萃取：将步骤(3)超声处理后的象牙香米粉末放置在萃取釜中进行CO2的超临界萃取，所述超临界萃取的流量为33L/min，萃取压力为55MPa，萃取温度为55℃、解析温度50℃，萃取时间为3h；萃取结束后萃取物进入分离罐进行分离得到象牙香米精油。
上述生物酶混合液由如下重量份的原料制成：10份的果胶酶、20份的淀粉酶、30份的糖化酶和350份质量百分数为3％的氯化钠溶液；其中，果胶酶的酶活力为2000u/g；其中，淀粉酶的酶活力为2500u/g；其中，糖化酶的酶活力为2500u/g。
本实施例象牙香米祛斑液的制备方法包括如下步骤：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
上述象牙香米祛斑液中油茶花提取物的制备方法为：将新鲜油茶花进行研磨，然后向油茶花中加入3倍质量份数体积百分数为75％(v/v)的乙醇溶液，然后在110℃的恒温条件下进行蒸馏，收集蒸馏产生的气体，冷凝后在3000r/min条件下进行离心分离20min，取上层液体，得到油茶花提取物，油茶花提取物中油茶花精油含量为874.48mg/g。
上述象牙香米祛斑液中大米胚芽提取物的制备方法为：将大米胚芽按照胚芽与水比例为1:1加水进行研磨，然后放入80℃水浴锅中预热，然后再加入和混合液同等质量比的质量百分数为5％的NaOH溶液，然后放入恒温磁力搅拌器中震荡，使蛋白质溶于5％的NaOH溶液中，4000r/min离心20分钟，收集上清液，即为清蛋白；取上述提取后的残留物，然后加入质量百分数为7％的氯化钠溶液，充分溶解后，按同样方法收集上清液，即为球蛋白；再将残留物加入体积百分数为80％的乙醇溶液，溶解，收集上清液，即为醇溶性蛋白；然后将上述清蛋白、球蛋白和醇溶性蛋白混合得到大米胚芽提取物，大米胚芽提取物中蛋白质重量为465.87mg/g。
上述象牙香米祛斑液中葡萄籽提取物的制备方法为：将含水率为70％的葡萄籽粉碎至80目，得到葡萄籽粉；然后将葡萄籽粉用石油醚按质量比为1：4的比例在60℃的温度条件下浸提2h，期间每20min搅拌1次，得到浸提液，该浸提液用纱布过滤，即得籽油粗提液；在粗提液中按质量比为1g：80的比例加入活性白土，持续搅拌1.5min后，静置35min，倒出上清液，即得脱色粗提液；脱色粗提液于65℃、真空度为-0.07MPa的条件下真空浓缩至除尽石油醚得到毛油；在毛油中加入质量分数为17％的NaOH溶液，在沸水浴中以7.5m3/h的流量真空抽气30min后加入活性白土，使其在沸水浴中脱色10min后静置至室温，并在速率为4000r/min的条件下离心20min，分别得到下层活性白土和上层清液，该上层清液即为脱色毛油；其中：NaOH溶液与毛油的体积比为1：240；活性白土与毛油的质量比为1：5；然后将脱色毛油过50目活性炭柱，滤去脱色毛油中的油脂和残留活性白土得到提取物I；在下层活性白土中按质量比为1g：20的比例加入石油醚，经7.5m3/h的流量进行真空抽滤，得到滤液，该滤液于65℃、真空度为-0.07MPa的条件真空浓缩，得回收油，再将回收油在沸水浴中以7.5m3/h的流量真空抽气30min后过50目活性炭柱，即得提取物II；合并提取物I和提取物II得到葡萄籽提取物，葡萄籽提取物中的葡萄籽精油含量为438.97mg/g。
上述象牙香米祛斑液中芦荟提取物的制备方法为：将新鲜芦荟去皮后进行研磨，然后向芦荟中加入4倍质量份数体积百分数为75％(v/v)的乙醇溶液，然后在110℃的恒温条件下进行回流提取，提取时间为24h，然后进行过滤，取滤液，挥去乙醇，直至浓缩到浓缩物的含水量为5％得到芦荟提取物，芦荟提取物中的芦荟多糖含量为324.76mg/g。
实施例2：
本实施例的象牙香米祛斑液由如下重量份的原料制成：55份的象牙香米精油、17份的芦荟提取物、19份的油茶花提取物、31份的大米胚芽提取物、18份的葡萄籽提取物、9份的柠檬酸和19份的甘油醇溶液。
其中，上述象牙香米精油提取方法包括如下步骤：
(1)预处理：将新鲜的象牙香米(其中，象牙香米的淀粉含量为25％。)放入2倍质量倍数的冰水(其中，冰水温度为0℃。)中浸泡5h，然后，再过滤取象牙香米在-12℃的条件下进行急冻，急冻14h后将象牙香米放入光照强度为2000Lx的灯箱中(其中，灯箱中用于光照处理的光为蓝光、红光、紫光和白光，光照方式为按照“蓝光30s-红光30s-紫光30s-白光30s-蓝光30s”的方式进行光照。)进行光照，光照30min后将象牙香米研磨到70目得到象牙香米粉；
(2)生物酶预处理：按照60mg/g的添加量向步骤(1)的象牙香米粉中添加质量浓度为2％的生物酶混合液，搅拌均匀后在25℃的恒温箱中静置3h；然后放入烘箱中进行干燥，直至含水率为5％，得到象牙香米干粉；
(3)超声预处理：将步骤(2)中的象牙香米干粉与水混合，干粉与水的比例为3:2，然后超声提取器中进行超声处理，所述超声处理的超声功率密度为300w/L；超声处理温度为120℃；超声处理按照“打开超声进行超声处理10s-关闭超声20s-打开超声进行超声处理10s”的处理方式进行重复处理，超声处理的总时长为270s；
(4)超临界CO2萃取：将步骤(3)超声处理后的象牙香米粉末放置在萃取釜中进行CO2的超临界萃取，所述超临界萃取的流量为33L/min，萃取压力为55MPa，萃取温度为55℃、解析温度50℃，萃取时间为3h；萃取结束后萃取物进入分离罐进行分离得到象牙香米精油。
上述生物酶混合液由如下重量份的原料制成：20份的果胶酶、40份的淀粉酶、40份的糖化酶和400份质量百分数为3％的氯化钠溶液；其中，果胶酶的酶活力为3000u/g；其中，淀粉酶的酶活力为3500u/g；其中，糖化酶的酶活力为3500u/g。
本实施例象牙香米祛斑液的制备方法包括如下步骤：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为4℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入60℃的水浴中加热4h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化12d，得到所述象牙香米祛斑液。
上述象牙香米祛斑液中油茶花提取物的制备方法为：将新鲜油茶花进行研磨，然后向油茶花中加入3倍质量份数体积百分数为75％(v/v)的乙醇溶液，然后在110℃的恒温条件下进行蒸馏，收集蒸馏产生的气体，冷凝后在3000r/min条件下进行离心分离20min，取上层液体，得到油茶花提取物，油茶花提取物中油茶花精油含量为874.48mg/g。
上述象牙香米祛斑液中大米胚芽提取物的制备方法为：将大米胚芽按照胚芽与水比例为1:1加水进行研磨，然后放入80℃水浴锅中预热，然后再加入和混合液同等质量比的质量百分数为5％的NaOH溶液，然后放入恒温磁力搅拌器中震荡，使蛋白质溶于5％的NaOH溶液中，4000r/min离心20分钟，收集上清液，即为清蛋白；取上述提取后的残留物，然后加入质量百分数为7％的氯化钠溶液，充分溶解后，按同样方法收集上清液，即为球蛋白；再将残留物加入体积百分数为80％的乙醇溶液，溶解，收集上清液，即为醇溶性蛋白；然后将上述清蛋白、球蛋白和醇溶性蛋白混合得到大米胚芽提取物，大米胚芽提取物中蛋白质重量为465.87mg/g。
上述象牙香米祛斑液中葡萄籽提取物的制备方法为：将含水率为70％的葡萄籽粉碎至80目，得到葡萄籽粉；然后将葡萄籽粉用石油醚按质量比为1：4的比例在60℃的温度条件下浸提2h，期间每20min搅拌1次，得到浸提液，该浸提液用纱布过滤，即得籽油粗提液；在粗提液中按质量比为1g：80的比例加入活性白土，持续搅拌1.5min后，静置35min，倒出上清液，即得脱色粗提液；脱色粗提液于65℃、真空度为-0.07MPa的条件下真空浓缩至除尽石油醚得到毛油；在毛油中加入质量分数为17％的NaOH溶液，在沸水浴中以7.5m3/h的流量真空抽气30min后加入活性白土，使其在沸水浴中脱色10min后静置至室温，并在速率为4000r/min的条件下离心20min，分别得到下层活性白土和上层清液，该上层清液即为脱色毛油；其中：NaOH溶液与毛油的体积比为1：240；活性白土与毛油的质量比为1：5；然后将脱色毛油过50目活性炭柱，滤去脱色毛油中的油脂和残留活性白土得到提取物I；在下层活性白土中按质量比为1g：20的比例加入石油醚，经7.5m3/h的流量进行真空抽滤，得到滤液，该滤液于65℃、真空度为-0.07MPa的条件真空浓缩，得回收油，再将回收油在沸水浴中以7.5m3/h的流量真空抽气30min后过50目活性炭柱，即得提取物II；合并提取物I和提取物II得到葡萄籽提取物，葡萄籽提取物中的葡萄籽精油含量为438.97mg/g。
上述象牙香米祛斑液中芦荟提取物的制备方法为：将新鲜芦荟去皮后进行研磨，然后向芦荟中加入4倍质量份数体积百分数为75％(v/v)的乙醇溶液，然后在110℃的恒温条件下进行回流提取，提取时间为24h，然后进行过滤，取滤液，挥去乙醇，直至浓缩到浓缩物的含水量为5％得到芦荟提取物，芦荟提取物中的芦荟多糖含量为324.76mg/g。
实施例3：
本实施例的象牙香米祛斑液由如下重量份的原料制成：49份的象牙香米精油、13份的芦荟提取物、15份的油茶花提取物、26份的大米胚芽提取物、13份的葡萄籽提取物、6份的柠檬酸和15份的甘油醇溶液。
其中，上述象牙香米精油提取方法包括如下步骤：
(1)预处理：将新鲜的象牙香米(其中，象牙香米的淀粉含量为22％。)放入1.5倍质量倍数的冰水(其中，冰水温度为-1℃。)中浸泡4h，然后，再过滤取象牙香米在-15℃的条件下进行急冻，急冻13h后将象牙香米放入光照强度为1500Lx的灯箱中(其中，灯箱中用于光照处理的光为蓝光、红光、紫光和白光，光照方式为按照“蓝光30s-红光30s-紫光30s-白光30s-蓝光30s”的方式进行光照。)进行光照，光照30min后将象牙香米研磨到50目得到象牙香米粉；
(2)生物酶预处理：按照55mg/g的添加量向步骤(1)的象牙香米粉中添加质量浓度为2％的生物酶混合液，搅拌均匀后在25℃的恒温箱中静置2.5h；然后放入烘箱中进行干燥，直至含水率为3％，得到象牙香米干粉；
(3)超声预处理：将步骤(2)中的象牙香米干粉与水混合，干粉与水的比例为2:1，然后超声提取器中进行超声处理，所述超声处理的超声功率密度为250w/L；超声处理温度为110℃；超声处理按照“打开超声进行超声处理10s-关闭超声20s-打开超声进行超声处理10s”的处理方式进行重复处理，超声处理的总时长为270s；
(4)超临界CO2萃取：将步骤(3)超声处理后的象牙香米粉末放置在萃取釜中进行CO2的超临界萃取，所述超临界萃取的流量为33L/min，萃取压力为55MPa，萃取温度为55℃、解析温度50℃，萃取时间为3h；萃取结束后萃取物进入分离罐进行分离得到象牙香米精油。
上述生物酶混合液由如下重量份的原料制成：15份的果胶酶、30份的淀粉酶、35份的糖化酶和370份质量百分数为3％的氯化钠溶液；其中，果胶酶的酶活力为2500u/g；其中，淀粉酶的酶活力为3000u/g；其中，糖化酶的酶活力为3000u/g。
本实施例象牙香米祛斑液的制备方法包括如下步骤：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为1℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为3℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入58℃的水浴中加热3.5h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化11d，得到所述象牙香米祛斑液。
上述象牙香米祛斑液中油茶花提取物的制备方法为：将新鲜油茶花进行研磨，然后向油茶花中加入3倍质量份数体积百分数为75％(v/v)的乙醇溶液，然后在110℃的恒温条件下进行蒸馏，收集蒸馏产生的气体，冷凝后在3000r/min条件下进行离心分离20min，取上层液体，得到油茶花提取物，油茶花提取物中油茶花精油含量为874.48mg/g。
上述象牙香米祛斑液中大米胚芽提取物的制备方法为：将大米胚芽按照胚芽与水比例为1:1加水进行研磨，然后放入80℃水浴锅中预热，然后再加入和混合液同等质量比的质量百分数为5％的NaOH溶液，然后放入恒温磁力搅拌器中震荡，使蛋白质溶于5％的NaOH溶液中，4000r/min离心20分钟，收集上清液，即为清蛋白；取上述提取后的残留物，然后加入质量百分数为7％的氯化钠溶液，充分溶解后，按同样方法收集上清液，即为球蛋白；再将残留物加入体积百分数为80％的乙醇溶液，溶解，收集上清液，即为醇溶性蛋白；然后将上述清蛋白、球蛋白和醇溶性蛋白混合得到大米胚芽提取物，大米胚芽提取物中蛋白质重量为465.87mg/g。
上述象牙香米祛斑液中葡萄籽提取物的制备方法为：将含水率为70％的葡萄籽粉碎至80目，得到葡萄籽粉；然后将葡萄籽粉用石油醚按质量比为1：4的比例在60℃的温度条件下浸提2h，期间每20min搅拌1次，得到浸提液，该浸提液用纱布过滤，即得籽油粗提液；在粗提液中按质量比为1g：80的比例加入活性白土，持续搅拌1.5min后，静置35min，倒出上清液，即得脱色粗提液；脱色粗提液于65℃、真空度为-0.07MPa的条件下真空浓缩至除尽石油醚得到毛油；在毛油中加入质量分数为17％的NaOH溶液，在沸水浴中以7.5m3/h的流量真空抽气30min后加入活性白土，使其在沸水浴中脱色10min后静置至室温，并在速率为4000r/min的条件下离心20min，分别得到下层活性白土和上层清液，该上层清液即为脱色毛油；其中：NaOH溶液与毛油的体积比为1：240；活性白土与毛油的质量比为1：5；然后将脱色毛油过50目活性炭柱，滤去脱色毛油中的油脂和残留活性白土得到提取物I；在下层活性白土中按质量比为1g：20的比例加入石油醚，经7.5m3/h的流量进行真空抽滤，得到滤液，该滤液于65℃、真空度为-0.07MPa的条件真空浓缩，得回收油，再将回收油在沸水浴中以7.5m3/h的流量真空抽气30min后过50目活性炭柱，即得提取物II；合并提取物I和提取物II得到葡萄籽提取物，葡萄籽提取物中的葡萄籽精油含量为438.97mg/g。
上述象牙香米祛斑液中芦荟提取物的制备方法为：将新鲜芦荟去皮后进行研磨，然后向芦荟中加入4倍质量份数体积百分数为75％(v/v)的乙醇溶液，然后在110℃的恒温条件下进行回流提取，提取时间为24h，然后进行过滤，取滤液，挥去乙醇，直至浓缩到浓缩物的含水量为5％得到芦荟提取物，芦荟提取物中的芦荟多糖含量为324.76mg/g。
对照组1：
本对照组不选用冰水进行预处理，其它方法与实施例1完全相同。
对照组2：
本对照组不选用光照进行预处理，其它方法与实施例1完全相同。
对照组3：
本对照组不使用生物酶混合液进行预处理，其它方法与实施例1完全相同。
对照组4：
本对照组的祛斑液不添加象牙香米精油，而是由如下重量份的原料制成：16份的芦荟提取物、12份的油茶花提取物、21份的大米胚芽提取物、17份的葡萄籽提取物、3份的柠檬酸和10份的甘油醇溶液。
本对照组祛斑液的制备方法为：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
本对照组中芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。
对照组5：
本对照组的祛斑液不添加芦荟提取物，而是由如下重量份的原料制成：45份的象牙香米精油、12份的油茶花提取物、21份的大米胚芽提取物、17份的葡萄籽提取物、3份的柠檬酸和10份的甘油醇溶液。
本对照组祛斑液的制备方法为：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
本对照组中油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。
对照组6：
本对照组的祛斑液不添加油茶花提取物，而是由如下重量份的原料制成：45份的象牙香米精油、16份的芦荟提取物、21份的大米胚芽提取物、17份的葡萄籽提取物、3份的柠檬酸和10份的甘油醇溶液。
其中，甘油醇溶液由甘油、乙醇按照质量比为15:1的比例制成。
本对照组祛斑液的制备方法为：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
本对照组中芦荟提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。
对照组7：
本对照组的祛斑液不添加大米胚芽提取物，而是由如下重量份的原料制成：45份的象牙香米精油、16份的芦荟提取物、12份的油茶花提取物、17份的葡萄籽提取物、3份的柠檬酸和10份的甘油醇溶液。
本对照组祛斑液的制备方法为：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
本对照组中芦荟提取物、油茶花提取物和葡萄籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。
对照组8：
本对照组的祛斑液不添加葡萄籽提取物，而是由如下重量份的原料制成：45份的象牙香米精油、16份的芦荟提取物、12份的油茶花提取物、21份的大米胚芽提取物、3份的柠檬酸和10份的甘油醇溶液。
本对照组祛斑液的制备方法为：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物和大米胚芽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物和大米胚芽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
本对照组中芦荟提取物、油茶花提取物和大米胚芽提取物的提取方法与实施例1完全一致。
对照组9：
本对照组的祛斑液不添加柠檬酸，而是由如下重量份的原料制成：45份的象牙香米精油、16份的芦荟提取物、12份的油茶花提取物、21份的大米胚芽提取物、17份的葡萄籽提取物和10份的甘油醇溶液。
本对照组祛斑液的制备方法为：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃的水浴中加热3h，最后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d，得到所述象牙香米祛斑液。
本对照组中芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物的提取方法与实施例1完全一致。
对照组10
采用市售祛斑液(兰蔻)。
对照组11：
柠檬汁。
测试试验：
测定实施例1-3和对照组1-3的精油产量，具体情况见表1：
表1
组别 象牙香米的精油产量(mg/g)
实施例1 523.21
实施例2 523.56
实施例3 524.43
对照组1 309.23
对照组2 308.93
对照组3 234.71
由上表可知，实施例1-3象牙香米的精油产量比对照组1-3要高，说明在象牙香米精油提取中，冰水预处理、光照预处理、生物酶处理步骤可明显提高象牙香米的精油产量。
参数测试：
测试实施例1-3和对照组4-10的在低相对湿度(RH30％)条件下的吸湿率、在高相对湿度(RH80％)条件下的吸湿率、12h的保湿率、失水率、2h时皮肤水分含量MMV值、油脂含量，具体情况见表2：
本发明采用测定酪氨酸酶活性的方法来计算象牙香米祛斑液对酪氨酸酶活性的抑制能力，用实施例1-3和对照组4-11的祛斑液和蒸馏水混合，将祛斑液配置成5mg/ml的祛斑溶液，并将祛斑溶液稀释成不同梯度，然后取实施例1-3和对照组4-11的不同梯度的祛斑溶液各30μl与10μl的酪氨酸酶液混合，在30℃下保温15min，然后测定当酪氨酸酶活力下降一半时祛斑溶液的浓度(IC50)；将上述祛斑液在太阳光照射下照射3h后，再测定对体外酪氨酸酶活性抑制率的IC50值，具体情况见表2：
表2
由上表可知，实施例1-3对体外酪氨酸酶活性的抑制率明显低于对照组4-9，更低于对照组10，说明实施例1-3比对照组10的抑制酪氨酸酶活性效果较好；而对照组4-8的对体外酪氨酸酶活性的抑制率低于对照组10，说明本申请的象牙香米精油、芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和柠檬酸都具有良好的抑制酪氨酸酶活性效果，抑制酪氨酸酶活性效果好，能有效抑制黑色素沉积，起到美白的效果；而将本申请的象牙香米精油、芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和柠檬酸复配使用应用于祛斑效果更佳；实施例1-3和对照组4-8光照后对体外酪氨酸酶活性的抑制率基本无变化，而对照组9-11对体外酪氨酸酶活性的抑制率明显提高，说明本申请的象牙香米精油、芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物对光照不敏感，不会在太阳照射下分解从而影响祛斑液的对体外酪氨酸酶活性的抑制率。
综上所述，使用本发明的方法提取象牙大米精油能有效提高象牙香米精油的提取效率、同时本申请的祛斑液都选自植物成分，不会对皮肤造成刺激，在提高祛斑液的祛斑能力，达到美白效果的同时，还能安全有效的应用于皮肤。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (7)

1.一种象牙香米祛斑液，其特征在于，所述祛斑液由如下重量份的原料制成：45份-55份的象牙香米精油、13份-17份的芦荟提取物、12份-19份的油茶花提取物、21份-31份的大米胚芽提取物、13份-17份的葡萄籽提取物、3份-9份的柠檬酸和10份-19份的甘油醇溶液。
2.一种象牙香米祛斑液，其特征在于，所述象牙香米精油提取方法包括如下步骤：
(1)预处理：将新鲜的象牙香米放入1-2倍质量倍数的冰水中浸泡3-5h，然后，再过滤取象牙香米在-17℃～-12℃的条件下进行急冻，急冻12h-14h后将象牙香米放入光照强度为1000Lx-2000Lx的灯箱中进行光照，光照30min后将象牙香米研磨到40目-70目得到象牙香米粉；
(2)生物酶预处理：按照50mg/g-60mg/g的添加量向步骤(1)的象牙香米粉中添加质量浓度为2％的生物酶混合液，搅拌均匀后在25℃的恒温箱中静置2h-3h；然后放入烘箱中进行干燥，直至含水率为2％-5％，得到象牙香米干粉；
(3)超声预处理：将步骤(2)中的象牙香米干粉与水混合，干粉与水的比例为1-3:1-2，然后超声提取器中进行超声处理，所述超声处理的超声功率密度为200w/L-300w/L；超声处理温度为100℃-120℃；超声处理按照“打开超声进行超声处理10s-关闭超声20s-打开超声进行超声处理10s”的处理方式进行重复处理，超声处理的总时长为270s；
(4)超临界CO2萃取：将步骤(3)超声处理后的象牙香米粉末放置在萃取釜中进行CO2的超临界萃取，所述超临界萃取的流量为33L/min，萃取压力为55MPa，萃取温度为55℃、解析温度50℃，萃取时间为3h；萃取结束后萃取物进入分离罐进行分离得到象牙香米精油。
3.根据权利要求2所述一种象牙香米祛斑液，其特征在于，所述步骤(1)象牙香米的淀粉含量为20％-25％。
4.根据权利要求2所述一种象牙香米祛斑液，其特征在于，所述步骤(1)的冰水温度为-2℃～0℃。
5.根据权利要求2所述一种象牙香米祛斑液，其特征在于，所述步骤(1)灯箱中用于光照处理的光为蓝光、红光、紫光和白光，光照方式为按照“蓝光30s-红光30s-紫光30s-白光30s-蓝光30s”的方式进行光照。
6.根据权利要求2所述一种象牙香米祛斑液，其特征在于，所述步骤(2)生物酶混合液由如下重量份的原料制成：10份-20份的果胶酶、20份-40份的淀粉酶、30份-40份的糖化酶和350份-400份质量百分数为3％的氯化钠溶液；所述果胶酶的酶活力为2000u/g-3000u/g；所述淀粉酶的酶活力为2500u/g-3500u/g；所述糖化酶的酶活力为2500u/g-3500u/g。
7.制备如权利要求1-6任意一项所述的一种象牙香米祛斑液的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)按所述重量份称取各原料成分，将芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物分别放入温度为0℃-2℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物和葡萄籽提取物；然后再将象牙香米精油放入温度为2℃-4℃的冰柜中进行冷藏，冷藏时间为12h得到冷藏后的象牙香米精油；
(2)向透明质酸钠中缓慢加入步骤(1)冷藏后的芦荟提取物、油茶花提取物、大米胚芽提取物、葡萄籽提取物和象牙香米精油，混合均匀后再加入甘油醇溶液搅拌均匀后，将所有混合物放入玻璃瓶中密封，并放入55℃-60℃的水浴中加热3h-4h，最后再向玻璃瓶中加入柠檬酸混合均匀后将混合物从密封的玻璃瓶转至陶瓷瓶中进行密封陈化10d-12d，得到所述象牙香米祛斑液。
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