CN107213164A - 微生态土壤复合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种微生态土壤复合物的制备方法；微生态土壤复合物中包含粪便微生物群落、土壤微生物群落、无菌土壤和辅料，制备方法为选择健康的成年人，采集粪便，进行粪便微生物群落体外人工培养，选择没有病原微生物污染的土壤微生物群落，人工培养，分离培养的粪便微生物群落和土壤微生物群落，制成冻干粉，冻干粉与无菌土壤和辅料混合制备而成；由本发明提供的微生态土壤复合物的制备方法制备的微生态土壤复合物创造了一个微生态的环境，更有利于调节肠道微生物，有利于刺激机体免疫系统的发育。

Description

微生态土壤复合物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种土壤复合物，尤其涉及一种微生态土壤复合物的制备方法。

背景技术

该发明是基于卫生假说理论，卫生假说(hygiene hypothesis)是一种医学假说，指因缺少接触传染源、共生微生物(如胃肠道菌群，益生菌)与寄生物，从而抑制了免疫系统的正常发展，增加了免疫系统相关疾病发病率。1989年，Strachan发现兄弟姐妹较多的家庭，花粉症较少发生，在总结前人的报导以及基于相关调查数据，提出‘hygienehypothesis’这个概念。研究卫生假说发生原因，有人发现无菌鼠免疫系统发育不全，极微量的病原菌就可以导致无菌鼠的感染死亡。目前的卫生假说研究进一步证明，卫生假说除与免疫系统疾病相关外，还与孤独症、癌症、糖尿病的发生相关。孤独症是近年来发生率逐年增加的一种大脑广泛发育障碍，患者多数生活不能自理，对家庭对社会带来严重的负担。美国发生率1975年为5000分之一，而2014年已增长为1/68。究其原因，初步研究表明，其发生机理为：过于清洁导致免疫系统紊乱，免疫因子分泌失调，而免疫因子是神经发育的重要调控因子，如长期使用干扰素可引起抑郁症。还有多项报导，过于清洁还可以导致白血病与皮肤病癌的发生。

由于人体中的微生物，肠道微生物最为丰富多样，而胃肠道具有人体最大的免疫组织，包括派伊尔淋巴集结(peyer’s patch)和肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nod(MLN))，肠道微生物通过对该免疫组织的影响在影响着全身免疫系统的发育。近些年来，支持卫生假说理论的研究不断得以报导。最新的研究表明，肠道微生物与免疫系统疾病、多种肠道疾病和孤独症关系密切，而土壤与土壤微生物是影响肠道微生物群落结构的重要因素。过于清洁易患免疫系统疾病，不清洁又容易引起各种感染，本发明通过提供制备微生态土壤复合物的方法，可以弥补现代人生活环境过于清洁而造成的微生物和土壤的缺失，又阻止病原微生物和人体接触的机会，从而通过微生态土壤复合物达到治疗与预防疾病发生的作用。

发明内容

本发明目的在于提供了一种能够通过人体自带的微生态和土壤相结合形成的微生态土壤复合物的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供了一种微生态土壤复合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、选择至少一个健康指标均正常的成年人，采集粪便并进行病原微生物与寄生虫检测和筛选，低温冷藏备用；

S2、粪便微生物群落培养基配制：选取含有丰富的可食用纤维素、糖、蛋白、脂肪和各种维生素的食物，按照纤维素：淀粉：蛋白质：脂肪的干重比为10～15：40～45：30～40：5～15配制，粉碎后高压灭菌，制成培养基，冷却后备用；

S3、将步骤S1中筛选得到的粪便样品在厌氧条件下接种到步骤S2制备得到的粪便微生物群落培养基中，在37～40℃温度的厌氧条件下进行培养，得到粪便微生物群落；

S4、将采集得到的没有受到人类与牲畜污染的一种或者一种以上的土壤微生物群落，按一定比例接种于类似土质并进行高压灭菌后的土壤培养基中，在无菌环境下扩大培养；

S5、分别将步骤S3中得到的粪便微生物群落和步骤S4中扩大培养得到的至少一种土壤微生物群落分离出来，并制备成冻干粉；

S6、采集没有受到污染的无菌土壤，无菌土壤中重金属和有毒物污染物含量达到食品级标准，进行高压灭菌，冷却后备用；

S7、将步骤S5制备得到的冻干粉、步骤S6制备得到的无菌土壤以及辅料按一定比例混合均匀，得到微生态土壤复合物。

进一步的，所述粪便微生物群落包括细菌、真菌、古细菌、病毒和寄生虫中的一种或者多种。

进一步的，粪便样品为病原微生物和致病性寄生虫阴性粪便样品。

进一步的，所述无菌土壤为红土、黄土、黑土和褐土中的一种或者多种。

进一步的，所述辅料为天然无毒的有机材料和无机材料中的一种或者多种。

更进一步的，所述有机材料为蛋白、脂肪、糖、淀粉和纤维素中的一种或者多种。

更进一步的，所述无机材料为草木灰和滑石粉中的一种或者多种。

本发明提供的微生态土壤复合物的制备方法能够制备一种具有调节人体皮肤粘膜或肠道微生态结构与组成作用的微生态土壤复合物，用于制作成胶囊、散剂、玩具或游乐与治疗的场所，本发明还通过采集经检测健康指标均合格的人体粪便，利用粪便中肠道微生物分泌的大量多种神经递质与神经递质前体物，补充人体所需的多种微生物，增加人体微生态的稳定性，从而起到疾病的治疗与预防作用。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例详细说明如后。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例一微生态土壤复合物玩具

S1、选择目前可以检测的健康指标均正常的20～30岁成年人一人，采集粪便100克，并进行病原微生物和致病性寄生虫阴性样本检测和筛选，低温冷藏备用；

S2、选取含有丰富的可食用纤维素、糖、蛋白、脂肪和各种维生素的食物，按照纤维素：淀粉：蛋白质：脂肪的干重比为10～15：40～45：30～40：5～15配制，进行粉碎后，混合，再加入0.5～1倍混合物重量的超纯水，搅拌均匀，高压灭菌，制成培养基，冷却后备用；

S3、将50克粪便厌氧条件下接种到5千克培养基中，厌氧条件下37℃条件下培养30天；

S4、经高通量测序检测，采集不含大肠杆菌、多种肠道细菌、病原微生物种类，也没有人类与牲畜污染的无污染土壤微生物群落，按1：10000比例接种于相类似土质高压灭菌后的土壤培养基中，在无菌环境下扩大培养12个月；

S5、分别将步骤S3中得到的粪便微生物群落和步骤S4中扩大培养得到的土壤微生物群落分离出来，并制备成冻干粉；

S6、采集无污染的无菌土壤，无菌土壤中重金属和有毒物污染物含量达到食品级标准，高压灭菌，冷却后备用；

S7、微生物群落冻干粉：淀粉：无菌土壤按照重量比为1：100：10000进行混合均匀；

S8、将混合物掺水制备成油泥，供幼儿使用。

实施例二微生态土壤复合物游乐场

S1、选择健康20～50岁健康成年人10人，健康指标均正常，每人采集粪便60克，并进行病原微生物和致病性寄生虫阴性样本检测和筛选，低温冷藏备用；

S2、选取含有丰富的可食用纤维素、糖、蛋白、脂肪和各种维生素的食物，按照纤维素：淀粉：蛋白质：脂肪的干重比为10～15：40～45：30～40：5～15的范围内制备不同培养基，进行粉碎后，混合，再加入0.5～1倍混合物重量的超纯水，搅拌均匀，高压灭菌，制成不同的培养基，冷却后备用；

S3、将每份50克粪便在厌氧条件下分别接种到5千克不同培养基中，这样，每一种培养基培养出来的菌群种类不同，厌氧条件下37℃条件下培养30天；

S4、从全国不同区域、不同土质和气候10个地方采集没有人类与牲畜污染的土壤10份，每份按1：10000比例接种于对应的类似土质高压灭菌后的土壤培养基中，在无菌环境下扩大培养6～12个月；

S5、分别将步骤S3中得到的粪便微生物群落和步骤S4中扩大培养得到的土壤微生物群落分离出来，并制备成冻干粉；

S6、采集无污染的无菌土壤，无菌土壤中重金属和有毒物污染物含量达到食品级标准，高压灭菌，冷却后备用；

S7、微生物群落冻干粉：草木灰：无菌土壤按照1：50：1000比例混合均匀；

S8、将混合物制备成沙坑，供婴幼儿娱乐使用。

为了证明本发明实施例二中供体的健康情况，提供供体身体健康指标表，见下表：

通过本发明提供的微生态土壤复合物的制备方法制备的微生态土壤复合物中具有增加人体微生物群落多样性和调节微生物群落结构组成作用的微生物，由于现代生活方式过于清洁，人体所接触的微生物数量与种类较少，导致人体微生态多样性降低，微生态环境易于被抗生素等破坏，进而导致微生态紊乱和多种疾病的发生。

本发明制备的微生态土壤复合物与普通的土壤相较，优势在于：

1)本发明制备的微生态土壤复合物具有调节人体皮肤粘膜或肠道微生态结构与组成作用：研究发现，土壤对人体皮肤粘膜与肠道微生态结构与类型具有重要影响，且对人体微生物的影响无可替代。传统的放牧与农耕时代，人们在生产过程中可接触足够量的土壤与灰尘来维持人体健康，但随着人类生活方式的改变，生活中已完全摒弃土壤与灰尘，因此导致人体微生态的失调，进一步引起各种疾病的发生；本发明将制备的微生态土壤复合物制作成胶囊、散剂、玩具或游乐与治疗的场所，通过食用、皮肤表面涂抹和儿童玩耍等方式与土壤接触，用于调节人体微生态的结构与组成，从面达到预防与治疗疾病的作用。

2)本发明制备的微生态土壤复合物含有肠道微生物群落和土壤微生物群落，这些微生物具有增加人体微生物群落多样性和调节微生物群落结构组成的作用：多项研究表明，人类生活环境中的微生物是人体微生物群落的重要来源。由于现代生活方式过于清洁，所接触的微生物数量与种类较少，导致人体微生态多样性降低，微生态环境易于被抗生素等破坏，进而导致微生态紊乱和多种疾病的发生；该项发明可以及时补充人体所需的多种微生物，增加人体微生态的稳定性，从而起到疾病的治疗与预防作用。

3)本发明制备的微生态土壤复合物通过调节人体微生态，有进一步刺激免疫系统发育的功能：近年来多项研究发现，人体免疫系统的健康发育与维持，需要多种人体体表与粘膜表面的微生物不断刺激，人体微生物种类降低，免疫系统将得不到充分的刺激，易于引起免疫失衡，进而引起相关疾病的发生。

4)本发明通过调节人体微生态和刺激免疫系统发育，进一步影响儿童大脑发育的功能：人体免疫因子参与神经发育，因此免疫系统参与神经系统的调控。本发明通过采集经检测健康指标均合格的人体粪便，利用粪便中肠道微生物分泌的大量多种神经递质与神经递质前体物，补充人体所需的多种微生物，增加人体微生态的稳定性；另外，由于微生态土壤复合物可以调节人体免疫系统的发育，因此间接调控了人体神经系统的发育，因此，本发明制备的微生态土壤复合物通过调节肠道微生态，对神经系统也起着直接的调节作用从而起到疾病的治疗与预防作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，并不用于限制本发明，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、选择至少一个健康指标均正常的成年人，采集粪便样品并进行病原微生物与寄生虫检测和筛选，低温冷藏备用；

S2、粪便微生物群落培养基配制：选取含有丰富的可食用纤维素、糖、蛋白、脂肪和各种维生素的食物，按照纤维素：淀粉：蛋白质：脂肪的干重比为10～15：40～45：30～40：5～15配制，粉碎后高压灭菌，制成培养基，冷却后备用；

S3、将步骤S1中筛选得到的粪便样品在厌氧条件下接种到步骤S2制备得到的粪便微生物群落培养基中，在37～40℃温度的厌氧条件下进行培养，得到粪便微生物群落；

S4、将采集得到的没有受到人类与牲畜污染的一种或者一种以上的土壤微生物群落，按一定比例接种于类似土质并进行高压灭菌后的土壤培养基中，在无菌环境下扩大培养；

S5、分别将步骤S3中得到的粪便微生物群落和步骤S4中扩大培养得到的至少一种土壤微生物群落分离出来，并制备成冻干粉；

S6、采集没有受到污染的无菌土壤，无菌土壤中重金属和有毒物污染物含量达到食品级标准，进行高压灭菌，冷却后备用；

S7、将步骤S5制备得到的冻干粉、步骤S6制备得到的无菌土壤以及辅料按一定比例混合均匀，得到微生态土壤复合物。

2.根据权利要求1所述的微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：所述粪便微生物群落包括细菌、真菌、古细菌、病毒和寄生虫中的一种或者多种。

3.根据权利要求1所述的微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：所述粪便样品为病原微生物和致病性寄生虫阴性粪便样品。

4.根据权利要求1所述的微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：所述无菌土壤包括红土、黄土、黑土和褐土中的一种或者多种。

5.根据权利要求1所述的微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：所述辅料包括天然无毒的有机材料和无机材料中的一种或者多种。

6.根据权利要求5所述的微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：所述有机材料包括蛋白、脂肪、糖、淀粉和纤维素中的一种或者多种。

7.根据权利要求5所述的微生态土壤复合物的制备方法，其特征在于：所述无机材料包括草木灰和滑石粉中的一种或者多种。