CN107164442B - 一种胶原蛋白多肽及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种胶原蛋白多肽，胶原蛋白多肽的制备方法包括：碱溶步骤、第一酶解步骤、第二酶解步骤和灭酶步骤，在上述各步骤中均采用了微波辅助技术，制备方法简单，流程少，所获取的胶原蛋白多肽的收率和纯度均较高，且肽具有较高的生物活性，能够很好地改善饮用者的身体状况。本发明还公开了一种胶原蛋白多肽酒，酒香醇厚，肽的人体吸收率高，补充营养，提高人体免疫力，且促进血液循环，具有很好地保健功效。
Description
技术领域
本发明涉及一种胶原蛋白，尤其涉及一种胶原蛋白多肽及应用。
背景技术
胶原蛋白(collagen)是一种生物性高分子物质，是一种白色、不透明、无支链的纤维性蛋白质。它可以补充皮肤各层所需的营养，使皮肤中胶原活性增强，有滋润皮肤，延缓衰老、美容、消皱、养发等功效。但胶原蛋白会随着年龄的增长而慢慢减少，女性在20岁时胶原蛋白已经开始老化、流失，含量逐年下降，25岁则进入流失的高峰期，40岁时，含量不到18岁时的一半，老年人脸上沟沟坎坎的皱纹，正是因为胶原蛋白和水分流失，造成皮肤塌陷。胶原蛋白的流失导致支撑皮肤的胶原肽键和弹力网断裂，其螺旋网状结构随即被破坏，皮肤组织被氧化、萎缩、塌陷，肌肤就会出现干燥、皱纹、松弛无弹性等衰老现象。所以，要延缓衰老必须要补充胶原蛋白。
另一方面，胶原蛋白是一种大分子，不易被皮肤吸收。胶原蛋白是不溶性的，但胶原蛋白在酸、碱、热、酶的作用下水解，会产生胶原蛋白水解产物(胶原肽)。胶原肽有着十分近似的氨基酸组成和含量，由于大分子的解体和分子量的降低，它们的溶解度随之增大，可溶于冷水。正是由于分子量大幅度地降低和水溶性的急剧提高，胶原肽极易被人体的皮肤所吸收与利用。与大分子胶原蛋白相比，胶原肽则是胶原更为理想的补充源，人体通过吸收胶原水解产物，补充和修复异常胶原，改善皮肤弹性，消除皱纹，人体随之恢复健康。
此外，胶原蛋白肽除了能够美容抗衰老外，还可以提高人体免疫功能，活化细胞机能，使人体处于健康的状态。
为了更好地发挥胶原蛋白的价值，已有不少研究者致力于胶原蛋白多肽的制备，但是，现有的制备方法存在以下不足：
(1)工艺复杂繁琐，操作不便利；
(2)胶原蛋白多肽的收率较低，浪费原材料，成本较高；
(3)胶原蛋白多肽的纯度较低，杂质较多，对产品的性能造成一定的影响。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种胶原蛋白多肽，该胶原蛋白多肽的制备方法简单，流程少，产品的收率和纯度均较高。
本发明的目的之二在于提供一种胶原蛋白多肽酒，酒香醇厚，肽的人体吸收率高，补充营养，提高人体免疫力，且促进血液循环，具有很好地保健功效。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种胶原蛋白多肽，所述胶原蛋白多肽的制备方法包括：
碱溶步骤：取原材料，绞碎，加入纯净水调配成料液，并调节所述料液的pH值为9-10，然后置于微波提取装置中加热18-25min，控制温度在45-55℃，关闭微波并保温1-1.5h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将所述蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8-9，然后加入第一蛋白酶，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将所述第一混合液置于微波提取装置中加热18-25min，控制温度在50-60℃，并保持所述第一混合液的pH值7.5以上，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将所述第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6-7，然后加入第二蛋白酶，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将所述第二混合液置于微波提取装置中加热18-25min，控制温度在55-60℃，当所述第二混合液的pH值降至5-6时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将所述第二酶解液置于微波提取装置中加热10-18min，控制温度在85-95℃，即得所述胶原蛋白多肽。
进一步地，还包括：去脂步骤：将原材料装入滤网，用蒸馏水反复冲洗后，使用脱脂剂进行脱脂，滤掉脂质，取脱脂后的原材料进行绞碎；浓缩步骤：将所述胶原蛋白多肽的温度降至室温，进行浓缩处理。
进一步地，在所述去脂步骤中，所述原材料为动物皮肤、动物蹄腱、动物骨头和动物鳞甲中的一种或任意组合；所述脱脂剂为三氯甲烷、乙醇和水的混合物，按照体积比算，三氯甲烷：乙醇：水＝(1-2):(1-2):1；在所述浓缩步骤中，将所述胶原蛋白多肽进行浓缩处理，直至胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％为止。
进一步地，在所述碱溶步骤中，取原材料，绞碎至60-100目，按照固液比1：(20-25)加入纯净水调配成料液，并加入所述原材料质量2-5％的稳定剂，接着用氨水、NaOH溶液、Na2CO3溶液或NaHCO3溶液调节所述料液的pH值至9.5，然后置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在48℃，关闭微波并保温1.2h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
在所述第一酶解步骤中，将所述蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8.5，然后加入胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶，所述胰蛋白酶、所述角蛋白酶和所述菠萝蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的2-5％、1-2％和1-3％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将所述第一混合液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在55℃，并保持所述第一混合液的pH值为7.6-8，得到第一酶解液；
在所述第二酶解步骤中，将所述第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6.5，然后加入木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶，所述木瓜蛋白酶和所述巯基蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的2-4％和0.5-2％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将所述第二混合液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热21min，控制温度在58℃，当所述第二混合液的pH值降至5.5时，得到第二酶解液；
在所述灭酶步骤中，将所述第二酶解液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中，加热15min，控制温度在90℃，即得所述胶原蛋白多肽。
进一步地，在所述碱溶步骤中，按照固液比1：23加入纯净水配成料液，所述稳定剂为黄原胶、刺槐豆胶、瓜尔豆胶和魔芋精粉中的一种或任意组合；所述微波提取装置的频率为2550MHz，功率为21KW；
在所述第一酶解步骤中，所述胰蛋白酶、所述角蛋白酶和所述菠萝蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的3％、1.5％和2％；所述微波提取装置的频率为2600MHz，功率为20KW；
在所述第二酶解步骤中，所述木瓜蛋白酶和所述巯基蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的3％和1.5％；所述微波提取装置的频率为2450MHz，功率为19KW；
在所述灭酶步骤中，所述微波提取装置的频率为2700MHz，功率为20KW。
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
一种胶原蛋白多肽酒，包括所述的胶原蛋白多肽，以及米酒。
进一步地，所述胶原蛋白多肽酒的制备方法包括：
勾兑步骤：将所述胶原蛋白多肽加入到所述米酒中，勾兑至酒精度为22-28％vol，得到勾兑原酒；
浸泡步骤：将所述勾兑原酒置于20-30℃的条件下，静置85-95天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将所述浸泡酒置于频率为2200-2400MHz，功率为18-20KW的微波提取装置中加热35-40min，期间保持温度为35-40℃，得到陈化酒；
过滤步骤：取所述陈化酒，用800-1000目过滤器过滤，取滤液；然后将所述滤液用超滤膜过滤，取超滤透过液，即获取所述胶原蛋白多肽酒；其中，所述超滤膜的允许通过分子量≦10000道尔顿。
进一步地，所述米酒的制备过程如下：将糯米用水浸泡4-5h，然后蒸熟，待温度降至30-40℃时，加入酒曲，放在25-30℃的条件下，静置28-30h，得到米酒原液；取去脂后的动物皮肤、动物蹄腱、动物骨头和动物鳞甲中的一种或任意组合，绞碎，得到碎料；按照固液比1：(15-18)将所述碎料加入所述米酒原液中，浸泡20-30天，用800-1000目过滤器过滤，取滤液，灭菌，即得。
进一步地，还包括调配步骤，对所述胶原蛋白多肽酒的颜色和/或口味进行调整。
进一步地，在所述勾兑步骤中，将所述胶原蛋白多肽加入到所述米酒中，勾兑至酒精度为26％vol；所述胶原蛋白多肽中胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％；在所述浸泡步骤中，将所述勾兑原酒置于25℃的条件下，静置90天；在所述陈化步骤中，将所述浸泡酒置于频率为2300MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热38min，期间保持温度为38℃。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
(1)本发明所提供胶原蛋白多肽，制备方法简单，流程少，釆用微波辅助酶解技术制备，能够提高蛋白酶的转化率，获取收率和纯度均较高的产品，而且更为重要的是提高了胶原蛋白多肽的生物活性，志愿者在饮用后身体状况能够得到大大的改善。其中，碱溶步骤即对蛋白质进行改性，利用微波提取装置处理能够加促蛋白质在弱碱液中的溶解度，提高胶原蛋白的提取率，进而提高了胶原蛋白多肽的产率；然后经过两次酶解处理，且均采用复合酶进行酶解，酶解过程均使用微波辅助，酶解效率高，多肽产率高，且在此条件下，得到的蛋白多肽的纯度高，杂质少；最后微波灭酶，得到产率和纯度均较高的胶原蛋白多肽。
(2)本发明所提供的胶原蛋白多肽酒，酒香醇厚，饮用后人体对蛋白多肽的吸收率高，补充营养，提高人体免疫力，促进血液循环，具有很好地保健功效；且酒体的酒精度在22-28％Vol，非浓烈酒，口感好。在制备过程中，釆用微波技术进行陈化，有效促进了酒内的有效成分融合，加速酒体陈化，缩短生产周期，满足社会对胶原蛋白肽酒的需求，提高了企业效益。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
一种胶原蛋白多肽，胶原蛋白多肽的制备方法包括：
碱溶步骤：取原材料，绞碎，加入纯净水调配成料液，并调节料液的pH值为9-10，然后置于微波提取装置中加热18-25min，控制温度在45-55℃，关闭微波并保温1-1.5h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8-9，然后加入第一蛋白酶，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将第一混合液置于微波提取装置中加热18-25min，控制温度在50-60℃，并保持第一混合液的pH值7.5以上，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6-7，然后加入第二蛋白酶，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将第二混合液置于微波提取装置中加热18-25min，控制温度在55-60℃，当第二混合液的pH值降至5-6时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将第二酶解液置于微波提取装置中加热10-18min，控制温度在85-95℃，即得胶原蛋白多肽。
作为进一步的实施方式，还包括去脂步骤：将原材料装入滤网，用蒸馏水反复冲洗后，使用脱脂剂进行脱脂，滤掉脂质，取脱脂后的原材料进行绞碎。原材料为动物皮肤、动物蹄腱、动物骨头和动物鳞甲中的一种或任意组合；脱脂剂为三氯甲烷、乙醇和水的混合物，按照体积比算，三氯甲烷：乙醇：水＝(1-2):(1-2):1。
作为进一步的实施方式，还包括浓缩步骤：将胶原蛋白多肽的温度降至室温，进行浓缩处理。优选地，浓缩至胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％为止。
作为进一步的实施方式，在碱溶步骤中，取原材料，绞碎至60-100目，按照固液比1：(20-25)加入纯净水调配成料液，并加入原材料质量2-5％的稳定剂，接着用氨水、NaOH溶液、Na2CO3溶液或NaHCO3溶液调节料液的pH值至9.5，然后置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在48℃，关闭微波并保温1.2h，过滤，取滤液，得到蛋白液。
作为进一步的实施方式，在碱溶步骤中，按照固液比1：23加入纯净水配成料液，稳定剂为黄原胶、刺槐豆胶、瓜尔豆胶和魔芋精粉中的一种或任意组合；微波提取装置的频率为2550MHz，功率为21KW。
作为进一步的实施方式，在第一酶解步骤中，将蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8.5，然后加入胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶，胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的2-5％、1-2％和1-3％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将第一混合液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在55℃，并保持第一混合液的pH值为7.6-8，得到第一酶解液。
作为进一步的实施方式，在第一酶解步骤中，胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的3％、1.5％和2％；微波提取装置的频率为2600MHz，功率为20KW。
作为进一步的实施方式，在第二酶解步骤中，将第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6.5，然后加入木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶，木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的2-4％和0.5-2％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将第二混合液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热21min，控制温度在58℃，当第二混合液的pH值降至5.5时，得到第二酶解液。
作为进一步的实施方式，在第二酶解步骤中，木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的3％和1.5％；微波提取装置的频率为2450MHz，功率为19KW。
作为进一步的实施方式，在灭酶步骤中，将第二酶解液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中，加热15min，控制温度在90℃，即得胶原蛋白多肽。优选地，微波提取装置的频率为2700MHz，功率为20KW。
本发明所提供胶原蛋白多肽，制备方法简单，流程少，釆用微波辅助酶解技术制备，能够提高蛋白酶的转化率，获取收率和纯度均较高的产品，而且更为重要的是提高了胶原蛋白多肽的生物活性，志愿者在饮用后身体状况能够得到大大的改善。其中，碱溶步骤即对蛋白质进行改性，利用微波提取装置处理能够加促蛋白质在弱碱液中的溶解度，提高胶原蛋白的提取率，进而提高了胶原蛋白多肽的产率；然后经过两次酶解处理，且均采用复合酶进行酶解，酶解过程均使用微波辅助，酶解效率高，多肽产率高，且在此条件下，得到的蛋白多肽的纯度高，杂质少；最后微波灭酶，得到产率和纯度均较高的胶原蛋白多肽。微波辅助蛋白酶解具有作用时间短，酶解速度快，酶解产物可控的优点。
一种胶原蛋白多肽酒，胶原蛋白多肽酒的制备方法包括：
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为22-28％vol，得到勾兑原酒；
浸泡步骤：将勾兑原酒置于20-30℃的条件下，静置85-95天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于频率为2200-2400MHz，功率为18-20KW的微波提取装置中加热35-40min，期间保持温度为35-40℃，得到陈化酒；
过滤步骤：取陈化酒，用800-1000目过滤器过滤，取滤液；然后将滤液用超滤膜过滤，取超滤透过液，即获取胶原蛋白多肽酒；其中，超滤膜的允许通过分子量≦10000道尔顿。
作为进一步的实施方式，米酒的制备过程如下：将糯米用水浸泡4-5h，然后蒸熟，待温度降至30-40℃时，加入酒曲，放在25-30℃的条件下，静置28-30h，得到米酒原液；取去脂后的动物皮肤、动物蹄腱、动物骨头和动物鳞甲中的一种或任意组合，绞碎，得到碎料；按照固液比1：(15-18)将碎料加入米酒原液中，浸泡20-30天，用800-1000目过滤器过滤，取滤液，灭菌，即得。
作为进一步的实施方式，还包括调配步骤，对胶原蛋白多肽酒的颜色和/或口味进行调整。
作为进一步的实施方式，在勾兑步骤中，将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为26％vol；胶原蛋白多肽中胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％；在浸泡步骤中，将勾兑原酒置于25℃的条件下，静置90天；在陈化步骤中，将浸泡酒置于频率为2300MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热38min，期间保持温度为38℃。
本发明所提供的胶原蛋白多肽酒，酒香醇厚，饮用后人体对蛋白多肽的吸收率高，补充营养，提高人体免疫力，促进血液循环，具有很好地保健功效；且酒体的酒精度在22-28％Vol，非浓烈酒，口感好。在制备过程中，釆用微波技术进行陈化，有效促进了酒内的有效成分融合，加速酒体陈化，缩短生产周期，满足社会对胶原蛋白肽酒的需求，提高了企业效益。
此外，米酒在制备过程中包括对去脂的胶原蛋白原材料的浸泡，原材料中的很多营养成分会流散到米酒中，大大增加了米酒的营养价值。然后，再用此米酒制备胶原蛋白多肽酒，使得制备出来的产品中含有了胶原蛋白多肽以及更多的营养成分。消费者在饮用该胶原蛋白多肽酒时，既能够很好地吸收其内的蛋白多肽，也能够吸收其他营养成分，营养丰富，提高人体免疫力，同时含有一定的酒精成分，促进血液循环，具有很好地保健功效。
以下是本发明具体的实施例，在下述实施例中所采用的原材料、设备等除特殊限定外均可以通过购买方式获得。
实施例1
一种胶原蛋白多肽酒，按照以下方法制备而成：
A、制备胶原蛋白多肽
去脂步骤：将原材料(猪蹄腱)装入滤网，用蒸馏水反复冲洗后，使用脱脂剂进行脱脂，滤掉脂质；其中，脱脂剂为三氯甲烷、乙醇和水的混合物，按照体积比算，三氯甲烷：乙醇：水＝(1-2):(1-2):1；
碱溶步骤：取去脂后的原材料，绞碎至60-100目，按照固液比1：23加入纯净水调配成料液，并加入原材料质量3％的黄原胶，接着用氨水溶液调节料液的pH值至9.5，然后置于频率为2550MHz，功率为21KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在48℃，关闭微波并保温1.2h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8.5，然后加入胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶，胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的3％、1.5％和2％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将第一混合液置于频率为2600MHz，功率为20KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在55℃，并保持第一混合液的pH值为7.6-8，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6.5，然后加入木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶，木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的3％和1.5％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将第二混合液置于频率为2450MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热21min，控制温度在58℃，当第二混合液的pH值降至5.5时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将第二酶解液置于频率为2700MHz，功率为20KW的微波提取装置中，加热15min，控制温度在90℃，即得胶原蛋白多肽；
浓缩步骤：将胶原蛋白多肽的温度降至室温，然后进行浓缩处理，直至胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％为止。
B、胶原蛋白多肽与酒基质复合
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为26％vol，得到勾兑原酒；其中，米酒的制备过程如下：将糯米用水浸泡4-5h，然后蒸熟，待温度降至30-40℃时，加入酒曲，放在25-30℃的条件下，静置28-30h，得到米酒原液；取去脂后的猪蹄腱绞碎，得到碎料；按照固液比1：18将碎料加入米酒原液中，浸泡20-30天，用800-1000目过滤器过滤，取滤液，灭菌，即得；
浸泡步骤：将勾兑原酒置于25℃的条件下，静置90天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于频率为2300MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热38min，期间保持温度为38℃，得到陈化酒；
过滤步骤：取陈化酒，用800目过滤器过滤，取滤液；然后将滤液用超滤膜过滤，取超滤透过液，即获取胶原蛋白多肽酒；其中，超滤膜的允许通过分子量≦10000道尔顿；
调配步骤，对胶原蛋白多肽酒的颜色和/或口味进行调整；检验合格灌装，即成。
实施例2
实施例2与实施例1的不同之处在于：
碱溶步骤：取去脂后的原材料(鱼鳞)，绞碎至60-100目，按照固液比1：20加入纯净水调配成料液，并加入原材料质量5％的刺槐豆胶，接着用NaOH溶液调节料液的pH值至9，然后置于频率为2750MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热25min，控制温度在45℃，关闭微波并保温1.5h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8，然后加入胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶，胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的5％、1％和1％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将第一混合液置于频率为2500MHz，功率为21KW的微波提取装置中加热22min，控制温度在52℃，并保持第一混合液的pH值为7.6-7.8，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为7，然后加入木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶，木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的4％和2％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将第二混合液置于频率为2650MHz，功率为21KW的微波提取装置中加热19min，控制温度在60℃，当第二混合液的pH值降至6时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将第二酶解液置于频率为2750MHz，功率为19KW的微波提取装置中，加热18min，控制温度在85℃，即得胶原蛋白多肽。
其它与具体实施例1相同。
实施例3
实施例3与实施例1的不同之处在于：
碱溶步骤：取去脂后的原材料(羊皮)，绞碎至60-100目，按照固液比1：25加入纯净水调配成料液，并加入原材料质量3％的瓜尔豆胶，接着用Na2CO3溶液调节料液的pH值至10，然后置于频率为2600MHz，功率为21KW的微波提取装置中加热18min，控制温度在55℃，关闭微波并保温1h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将蛋白液的温度降至室温，调整pH值为9，然后加入胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶，胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的3.5％、1.3％和2.5％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将第一混合液置于频率为2550MHz，功率为22KW的微波提取装置中加热24min，控制温度在56℃，并保持第一混合液的pH值为7.6-7.8，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6，然后加入木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶，木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的2.5％和0.8％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将第二混合液置于频率为2450MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热25min，控制温度在55℃，当第二混合液的pH值降至5时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将第二酶解液置于频率为2580MHz，功率为20KW的微波提取装置中，加热17min，控制温度在92℃，即得胶原蛋白多肽。
其它与具体实施例1相同。
实施例4
实施例4与实施例1的不同之处在于：
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为22％vol，得到勾兑原酒；
浸泡步骤：将勾兑原酒置于28℃的条件下，静置88天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于频率为2400MHz，功率为18KW的微波提取装置中加热35min，期间保持温度为40℃，得到陈化酒；
过滤步骤：取陈化酒，用1000目过滤器过滤。
其它与具体实施例1相同。
实施例5
实施例5与实施例1的不同之处在于：
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为28％vol，得到勾兑原酒；
浸泡步骤：将勾兑原酒置于23℃的条件下，静置95天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于频率为2200MHz，功率为20KW的微波提取装置中加热36min，期间保持温度为37℃，得到陈化酒。
其它与具体实施例1相同。
对比例1
对比例1与实施例1的不同之处在于
碱溶步骤：用NaOH溶液调节料液的pH值至11，然后置于频率为2850MHz，功率为23KW的微波提取装置中加热10min，控制温度在60℃；
第一酶解步骤：将蛋白液的温度降至室温，调整pH值为10，然后加入胰蛋白酶，胰蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的7％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将第一混合液置于频率为2300MHz，功率为15KW的微波提取装置中加热25min，控制温度在45℃；
第二酶解步骤：将第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为8，然后加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的添加量分别为蛋白液中蛋白质含量的6％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将第二混合液置于频率为2800MHz，功率为25KW的微波提取装置中加热19min，控制温度在60℃，当第二混合液的pH值降至6时，得到第二酶解液。
其它与具体实施例1相同。
对比例2
对比例2与实施例1的不同之处在于：
碱溶步骤：取去脂后的原材料，绞碎至60-100目，按照固液比1：23加入纯净水调配成料液，并加入原材料质量3％的黄原胶，接着用氨水溶液调节料液的pH值至9.5，然后置于水浴锅中，控制温度在48℃，保持1.4h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将第一混合液置于水浴锅中加热20min，控制温度在55℃，并保持第一混合液的pH值为7.6-8，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将第二混合液置于水浴锅中加热21min，控制温度在58℃，当第二混合液的pH值降至5.5时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将第二酶解液置于水浴锅中，加热15min，控制温度在90℃，即得胶原蛋白多肽。
其它与具体实施例1相同。
对比例3
对比例3与实施例1的不同之处在于：
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为32％vol，得到勾兑原酒；
浸泡步骤：将勾兑原酒置于35℃的条件下，静置100天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于频率为2500MHz，功率为22KW的微波提取装置中加热42min，期间保持温度为38℃，得到陈化酒。
其它与具体实施例1相同。
对比例4
对比例4与实施例1的不同之处在于：
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为15％vol，得到勾兑原酒；且在制备米酒的过程中，不需要用去脂原材料与米酒原液浸泡，米酒原液即为最终的米酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于频率为2500MHz，功率为22KW的微波提取装置中加热42min，期间保持温度为38℃，得到陈化酒。
其它与具体实施例1相同。
对比例5
对比例5与实施例1的不同之处在于：
勾兑步骤：将胶原蛋白多肽加入到米酒中，勾兑至酒精度为30％vol，得到勾兑原酒；
陈化步骤：将浸泡酒置于水浴锅中加热42min，期间保持温度为38℃，得到陈化酒。
其它与具体实施例1相同。
效果评价及性能检测
1、胶原蛋白多肽纯度和收率测试
取实施例1-3和对比例1-2的胶原蛋白多肽，对其纯度和收率进行测试，测试方法为常规测试方法。测试结果见下表1所示。
表1 实施例1-5和对比例1-5的胶原蛋白多肽的纯度和收率记录表
注：实施例4-5对比例3-5的胶原蛋白多肽的制备方法与实施例1相同，故此不再进行重复测试。
从表1的数据可得，实施例1-3的胶原蛋白多肽纯度均在78％以上，收率均在88％以上；特别是实施例1，纯度达到83％，收率为91％。上述结果表明了，实施例1-5借助微波辅助技术对胶原蛋白多肽进行提取，并且严格把握操作过程中的参数，能够获取纯度和产率均较高的产品。而对比例1-2的胶原蛋白多肽的纯度和收率均较低，特别是对比例2采取传统水浴法提取胶原蛋白多肽，纯度仅为60％，收率仅为66％。
2、感官测试
选200名志愿者，上述200名志愿者均不会对酒精过敏。将上述200名志愿者分为10组，每组20名，然后每组的志愿者分别饮用实施例1-5和对比例1-5的胶原蛋白多肽酒，并记录以下4个项目：色泽、滋味及香味、风味和组织形态的得分。其中，上述4个项目的评价指标如表1所示，结果越接近评价指标，则获取的分数越高，每个项目的分数均为该组内10名志愿者的平均分，总分即为4个项目分数的加和。
表2 感官测试结果记录表
从表2的数据可得，实施例1-5的胶原蛋白多肽酒在色泽、滋味及香味、风味和组织形态这4个评价项目中均获取的较高的得分，总分均在88分以上，特别是实施例1取得了94分，分数最高，为最佳实施例。而对比例2采用传统的水浴法对胶原蛋白多肽进行酶解，对比例5在水浴中进行酒体陈化，它们的最终得分均分别为76分和74分，分数较低，可见，传统的水浴法获得的产品质量较差，而微波辅助技术下获得的产品质量好，口感佳，能够提高企业收益。
3、理化指标测试
分别对实施例1-5和对比例1-5的胶原蛋白多肽酒的相关理化指标进行测试，测试的项目和对应的指标见下表3所示，测试方法均为常规测试方法。测试结果见表4所示。
表3 理化指标
表4 理化指标测试结果记录表
注：“√”表示达标；“×”表示不达标。
从表4的记录可得，实施例1-5的胶原蛋白多肽酒，在上述11个测试项目中均达标，符合出厂标准。而对比例1-5的胶原蛋白多肽酒，均在某些项目中不达标，特别是在“肽含量”项目中均不及格，表明了对比例1-5的酒体中肽含量较低。
4、饮用效果测试
选200名志愿者，上述200名志愿者均不会对酒精过敏，且身体情况相当，睡眠时均会出现手脚冰凉状况。将上述200名志愿者分为10组，每组20名，然后分别饮用实施例1-5和对比例1-5的胶原蛋白多肽酒，每天在晚饭后1-1.5h后饮用一次，每次饮用量为30ml，然后在饮用1周后分别对志愿者进行跟踪访问，记录志愿者入睡耗时、睡眠质量、起床时感受、白天精神状态、手脚冰凉改善等情况，具体结果详见下表5。
表5 实施例1-5和对比例1-5的胶原蛋白多肽酒的饮用情况记录表
从表5的记录结果可得，志愿者在连续饮用一周实施例1-5的胶原蛋白多肽酒后，身体状况均得到了改良，能够很快入睡，且睡眠质量好，不会出现失眠状况，手脚不冰凉，且醒后头脑清晰，不晕沉，白天精神饱满，不易疲倦，说明了志愿者的身体状况得到了改善。而饮用对比例1-5的胶原蛋白多肽酒的志愿者，身体改善情况则一般，逊于实施例1-5的产品。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (7)
1.一种胶原蛋白多肽，其特征在于，所述胶原蛋白多肽的制备方法包括：
去脂步骤：将原材料装入滤网，用蒸馏水反复冲洗后，使用脱脂剂进行脱脂，滤掉脂质，取脱脂后的原材料进行绞碎；所述原材料为动物皮肤、动物蹄腱、动物骨头和动物鳞甲中的一种或任意组合；所述脱脂剂为三氯甲烷、乙醇和水的混合物，按照体积比算，三氯甲烷：乙醇：水＝(1-2):(1-2):1；
碱溶步骤：取原材料，绞碎至60-100目，按照固液比1：(20-25)加入纯净水调配成料液，并加入所述原材料质量2-5％的稳定剂，接着用氨水、NaOH溶液、Na2CO3溶液或NaHCO3溶液调节所述料液的pH值至9.5，然后置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在48℃，关闭微波并保温1.2h，过滤，取滤液，得到蛋白液；
第一酶解步骤：将所述蛋白液的温度降至室温，调整pH值为8.5，然后加入胰蛋白酶、角蛋白酶和菠萝蛋白酶，所述胰蛋白酶、所述角蛋白酶和所述菠萝蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的2-5％、1-2％和1-3％，充分搅拌均匀，得到第一混合液；接着将所述第一混合液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热20min，控制温度在55℃，并保持所述第一混合液的pH值为7.6-8，得到第一酶解液；
第二酶解步骤：将所述第一酶解液的温度降至室温，调整pH值为6.5，然后加入木瓜蛋白酶和巯基蛋白酶，所述木瓜蛋白酶和所述巯基蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的2-4％和0.5-2％，充分搅拌均匀，得到第二混合液；接着将所述第二混合液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中加热21min，控制温度在58℃，当所述第二混合液的pH值降至5.5时，得到第二酶解液；
灭酶步骤：将所述第二酶解液置于频率为2400-2750MHz，功率为19-22KW的微波提取装置中，加热15min，控制温度在90℃，即得所述胶原蛋白多肽；
浓缩步骤：将所述胶原蛋白多肽的温度降至室温，将所述胶原蛋白多肽进行浓缩处理，直至胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％为止。
2.如权利要求1所述的胶原蛋白多肽，其特征在于：在所述碱溶步骤中，按照固液比1：23加入纯净水配成料液，所述稳定剂为黄原胶、刺槐豆胶、瓜尔豆胶和魔芋精粉中的一种或任意组合；所述微波提取装置的频率为2550MHz，功率为21KW；
在所述第一酶解步骤中，所述胰蛋白酶、所述角蛋白酶和所述菠萝蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的3％、1.5％和2％；所述微波提取装置的频率为2600MHz，功率为20KW；
在所述第二酶解步骤中，所述木瓜蛋白酶和所述巯基蛋白酶的添加量分别为所述蛋白液中蛋白质含量的3％和1.5％；所述微波提取装置的频率为2450MHz，功率为19KW；
在所述灭酶步骤中，所述微波提取装置的频率为2700MHz，功率为20KW。
3.一种胶原蛋白多肽酒，其特征在于，包括权利要求1或者2任一项所述的胶原蛋白多肽，以及米酒。
4.如权利要求3所述的胶原蛋白多肽酒，其特征在于，所述胶原蛋白多肽酒的制备方法包括：
勾兑步骤：将所述胶原蛋白多肽加入到所述米酒中，勾兑至酒精度为22-28％vol，得到勾兑原酒；
浸泡步骤：将所述勾兑原酒置于20-30℃的条件下，静置85-95天，得到浸泡酒；
陈化步骤：将所述浸泡酒置于频率为2200-2400MHz，功率为18-20KW的微波提取装置中加热35-40min，期间保持温度为35-40℃，得到陈化酒；
过滤步骤：取所述陈化酒，用800-1000目过滤器过滤，取滤液；然后将所述滤液用超滤膜过滤，取超滤透过液，即获取所述胶原蛋白多肽酒；其中，所述超滤膜的允许通过分子量≦10000道尔顿。
5.如权利要求4所述的胶原蛋白多肽酒，其特征在于，所述米酒的制备过程如下：将糯米用水浸泡4-5h，然后蒸熟，待温度降至30-40℃时，加入酒曲，放在25-30℃的条件下，静置28-30h，得到米酒原液；取去脂后的动物皮肤、动物蹄腱、动物骨头和动物鳞甲中的一种或任意组合，绞碎，得到碎料；按照固液比1：(15-18)将所述碎料加入所述米酒原液中，浸泡20-30天，用800-1000目过滤器过滤，取滤液，灭菌，即得。
6.如权利要求4所述的胶原蛋白多肽酒，其特征在于，还包括调配步骤，对所述胶原蛋白多肽酒的颜色和/或口味进行调整。
7.如权利要求4所述的胶原蛋白多肽酒，其特征在于，在所述勾兑步骤中，将所述胶原蛋白多肽加入到所述米酒中，勾兑至酒精度为26％vol；所述胶原蛋白多肽中胶原蛋白多肽的质量分数为15-30％；
在所述浸泡步骤中，将所述勾兑原酒置于25℃的条件下，静置90天；
在所述陈化步骤中，将所述浸泡酒置于频率为2300MHz，功率为19KW的微波提取装置中加热38min，期间保持温度为38℃。
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