CN107144564A - 化学成分拉非及其衍生物快速检测和检测卡研制方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种化学成分拉非及其衍生物快速检测和检测卡研制方法。所述方法首先用提取液浸泡待测样品，充分混匀后静置；其次，取上层清液用微孔滤膜进行过滤，滤液为待检样品处理液；第三，取滤液若干，加入4倍体积的检测液混匀后，静置显色；第四，将50微升混合液移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。所述检测卡研制方法包括以下步骤：制备试纸基材、制备浸泡液、浸泡试纸基材、制备检测试纸、制备检测卡。所述方法适合现场快速检测食品、药品、保健食品中化学成分拉非及其衍生物。

Description

化学成分拉非及其衍生物快速检测和检测卡研制方法
技术领域
本发明属于食品、药品、保健食品检测技术领域，具体涉及一种食品、药品、保健食品中化学成分拉非及其衍生物快速检测和检测卡的研制方法。
背景技术
1、术语解释：
食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪：简称为检测仪，又可称手持式食品安全快速检测仪，利用反射光谱与显色物跟检测成分浓度呈比例的原理，通过内部公式计算得到检测成分的浓度数值的仪器。
拉非及其衍生物特指：他达拉非、氨基他达拉非以及甲基被氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧等基团取代的化合物。
2、现有技术
近年来，人们对自身的养生越来越重视。但是市场上标示各种功能的保健食品、功能性药品、食品鱼龙混杂，不法分子公然制假售假，为了使原本不具有治疗作用的保健品、食品或宣称为纯中药制剂的功能性药品达到某一种疗效，他们在其中添加各种化学药物，欺骗消费者，以获取高额利润。有不法分子在标示无危害的食品、功能性药品、保健食品中违禁添加壮阳类化学药物PDE5型抑制剂拉非及其拉非衍生物，如他达拉非(品牌名：西力士cialis)和氨基他达拉非等。违禁添加化学药物他达拉非和氨基他达拉非的这些产品，会对用户的身体健康造成伤害，比如冠心病、高血压、脑血栓等心血管疾病患者在不知情的情况下服用该制剂，由于对化学药品的用法用量无法控制等原因，易引起心肌梗死，甚至有可能造成突然死亡的后果。
在国家食品药品监督管理总局关于市场上查获的31种假冒保健食品并涉嫌违法添加药物成分的通告(2015年第88号)中，就提到假冒深圳市宝和堂保健品有限公司生产的御和坊牌海狗胶囊(批次：2014/06/05)，检出违禁添加他达拉非。
目前检测他达拉非、氨基他达拉非等拉非类衍生物的方法多为高效液相色谱法、液-质联用法、UPLC-MS/MS法(超高效液相色谱-质谱联用)、化学方法、快检定性法等方法。仪器方法存在的共同问题是：检测耗时长、操作复杂、对检测人员专业素质要求高，因而基层推广应用困难，使用范围受到局限；采用目测比色易出现误检及漏检等问题，且只能对保健食品进行他达拉非、氨基他达拉非的定性粗筛，不能准确判定拉非及其衍生物的含量。
与本方案相近的申请号为200910040854.1的专利《一种药品、保健食品和食品中拉非类PDE5型抑制剂的快速检测方法》存在的不足之处是，该专利只能进行目测判定，易出现误判、漏判的问题；专利申请号为200710064562.2的专利《一种检测他达拉非及其衍生物的方法》存在的不足为目测判定，易出现漏检问题，且样品前处理过于复杂，不适用于基层现场快速检测的需求。
发明内容
为了解决现有的针对保健食品、功能性药品、食品中拉非及其衍生物快检方法中存在的误检漏检、只能定性检测；仪器方法中存在的检测成本高、耗时长、对人员专业素质要求高及样品前处理复杂繁琐等问题，本发明提供一种保健食品、药品、食品中化学成分拉非及其衍生物快速检测法及检测卡研制方法。利用所述检测卡，依据所述检测方法，可现场快速检测保健食品、功能性药品、食品中拉非及其衍生物的含量；大幅度降低误检与漏检率。
为实现上述目标，本发明采用以下技术方案：
一种化学成分拉非及其衍生物快速检测方法，所述方法首先用提取液浸泡待测样品，充分混匀后静置；其次，取上层清液用微孔滤膜进行过滤，滤液为待检样品处理液；第三，取滤液若干，加入4倍体积的检测液混匀后，静置显色；第四，将50微升混合液移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。所述方法适合现场快速检测食品、药品、保健食品中拉非及其衍生物。
所述提取液为有机试剂，选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、丙酮、甲醇或者其组合。
优选的，提取液为乙酸乙酯和三氯甲烷的混合液，体积比为1:5。
所述检测液为盐酸、硝酸、硫酸中的一种，含量为10.00％～85.00％。
优选的，检测液为硫酸，含量为50％。
一种拉非及其衍生物快速检测卡研制方法，包括以下步骤：
1)制备试纸基材：以吸水纸作为拉非及其衍生物检测试纸的基材；
2)制备浸泡液；
3)浸泡试纸基材：将拉非及其衍生物检测试纸基材放入浸泡液中浸润10分钟；
4)制备检测试纸：将拉非及其衍生物检测试纸基材放在温度为57摄氏度的真空干燥箱，烘干2小时后晾干；
5)制备检测卡：将检测试纸裁剪成条状，制作检测卡。
所述浸泡液的组分为：由二甘醇醚(0.20％～2.00％)、EDTA(2.50％～8.00％)、蔗糖(2.00％～10.00％)组成，体积比为3:2:5。
所述拉非及其衍生物检测卡的检出限为0.50mg/g，检测范围为0.50mg/g～4.00mg/g；所述拉非及其衍生物检测卡与所述食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪相配合可进行拉非及其衍生物定量检测。
本发明的优点和有益效果为：
1)快速检测：现有准确度高的拉非及其衍生物检测方法，如高效液相色谱、液-质联用、拉曼光谱检测，检测成本高、检测周期长、对人员专业素质要求高；本发明研制的拉非检测卡，二十五分钟即可得出检测结果，适用于现场快速检测保健食品、药品、食品中拉非及其衍生物含量。
2)准确度高：本发明筛选了针对性样品前处理方法，改善了保健食品、药品、食品基质干扰引起拉非及其衍生物快速检测时易出现的误检和漏检的问题。
3)结果定量：常规的拉非及其衍生物快检方法只通过目测定性，本发明中拉非及其衍生物检测卡与食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪配套进行定量检测。
具体实施方式
实施例1：片剂、软胶囊、硬胶囊保健食品中拉非及其衍生物快速检测方法
检测过程如下：
1)待测样品前处理：称取0.10克样品，放入2ml离心管内，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
2)检测：取100微升待检样品处理液加入1.5ml离心管中，加入400微升检测液混匀,静置显色15分钟，混匀后取50微升移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。
实施例2：液态酒类或口服液保健食品中拉非及其衍生物快速检测方法
检测过程如下：
1)待测样品前处理：量取0.10毫升样品，放入2ml离心管内，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取无色液体层为待检样品处理液。
2)检测：取100微升待检样品处理液加入1.5ml离心管中，加入400微升检测液混匀,静置显色15分钟，混匀后取50微升移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。
实施例3：药品中拉非及其衍生物快速检测方法
检测过程如下：
1)待测样品前处理：称取0.10克碾碎的药品，放入2ml离心管中，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
2)检测：取100微升待检样品处理液加入1.5ml离心管中，加入400微升检测液混匀,静置显色15分钟，混匀后取50微升移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。
实施例4：固体食品中拉非及其衍生物快速检测方法
检测过程如下：
1)待测样品前处理：称取0.10克剪碎的食品，放入2ml离心管中，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
2)检测：取100微升待检样品处理液加入1.5ml离心管中，加入400微升检测液混匀,静置显色15分钟，混匀后取50微升移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。
实施例5：液态食品中拉非及其衍生物快速检测方法
检测过程如下：
1)待测样品前处理：量取0.10毫升液体食品，放入2ml离心管中，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
2)检测：取100微升待检样品处理液加入1.5ml离心管中，加入400微升检测液混匀,静置显色15分钟，混匀后取50微升移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。
实施例6：拉非及其衍生物快速检测卡制备方法
制备过程如下：
1)制备试纸基材：以吸水纸作为拉非及其衍生物检测试纸的基材；
2)制备浸泡液：取二甘醇醚(0.20％～2.00％)溶液30ml、EDTA(2.50％～8.00％)溶液20ml和蔗糖(2.00％～10.00％)50ml；将各组分放入反应器中混合制得浸泡液；
3)浸泡试纸基材：将拉非及其衍生物检测试纸基材放入浸泡液中浸润10分钟；
4)制备检测试纸：将拉非及其衍生物检测试纸基材放在温度为57摄氏度的真空干燥箱中，烘干2小时后晾干，得到拉非及其衍生物检测试纸；
5)制备检测卡：将检测试纸裁剪成条状，制作检测卡。
最后应说明的是：显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。

Claims (12)

1.一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于：所述方法首先用提取液浸泡待测样品，充分混匀后静置；其次，取上层清液用微孔滤膜进行过滤，滤液为待检样品处理液；第三，取滤液若干，加入4倍体积的检测液混匀后，静置显色；第四，将50微升混合液移取到检测卡观察窗中间位置，计时一分钟后在仪器上读取检测结果。
2.如权利要求1所述的一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于：所述方法适合现场快速检测食品、药品、保健食品中化学成分拉非及其衍生物。
3.如权利要求1所述的一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于：所述提取液为有机试剂，选自二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、丙酮、甲醇或者某两种的组合。
4.如权利要求1所述的一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于：所述检测液为盐酸、硝酸、硫酸中的一种，含量为10.00％～85.00％。
5.如权利要求1所述的一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于：所述方法针对待检样品，分别制定相应的前处理方法，分别是：
1)样品若为片剂、软胶囊、硬胶囊保健食品，则采取以下前处理方法：称取0.10克样品，放入2ml离心管内，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
2)样品若为液态酒类或口服液保健食品，则采取以下前处理方法：量取0.10毫升样品，放入2ml离心管内，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取无色液体层为待检样品处理液。
3)样品若为药品，则采取以下前处理方法:称取0.10克碾碎的药品，放入2ml离心管中，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
4)样品若为固体食品，则采取以下前处理方法:称取0.10克剪碎的食品，放入2ml离心管中，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液；
5)样品若为液态食品，则采取以下前处理方法:量取0.10毫升液体食品，放入2ml离心管中，加入0.90毫升提取液，充分混匀，静置5分钟，取上层清液用微孔滤膜过滤，滤液为待检样品处理液。
6.如权利要求1所述一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于，所述方法检测他达拉非的含N杂环上的甲基被氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧等基团取代的化合物。
7.如权利要求3所述的一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于：提取液为乙酸乙酯和三氯甲烷的混合液，体积比为1:5。
8.如权利要求4所述一种化学成分拉非及其衍生物快速检测法，其特征在于，所述检测液为硫酸，含量为50％。
9.一种化学成分拉非及其衍生物快速检测卡研制方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)制备试纸基材：以吸水纸作为拉非及其衍生物检测试纸的基材；
2)制备浸泡液；由二甘醇醚(0.20％～2.00％)、EDTA(2.50％～8.00％)、蔗糖(2.00％～10.00％)组成；
3)浸泡试纸基材：将拉非及其衍生物检测试纸基材放入浸泡液中浸润10分钟；
4)制备检测试纸：将晾干后的拉非及其衍生物检测试纸基材放在温度为57摄氏度真空干燥箱中干燥2小时，得到拉非及其衍生物检测试纸；
5)制备检测卡：将检测试纸裁剪成条状，制作检测卡。
10.如权利要求8所述的一种拉非及其衍生物快速检测卡研制方法，其特征在于：所述浸泡液由二甘醇醚(0.20％～2.00％)、EDTA(2.50％～8.00％)和蔗糖(2.00％～10.00％)组成，各组分的比例为3:2:5。
11.如权利要求9所述的一种拉非及其衍生物快速检测卡研制方法，其特征在于：所述拉非及其衍生物检测卡的检出限为0.50mg/g，检测范围为0.50mg/g～4.00mg/g。
12.如权利要求9所述的一种拉非及其衍生物快速检测卡研制方法，其特征在于：所述拉非及其衍生物检测卡与所述食品中危害因子及非法添加药物智能化综合检测仪相配合可进行拉非及其衍生物定量检测。
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