CN106923339A - 一种养生降脂复合酵素及其制作方法 - Google Patents

一种养生降脂复合酵素及其制作方法 Download PDF

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刘文娟
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Abstract

本发明提供了一种养生降脂复合酵素及其制作方法，属于酵素的技术领域。本发明以蔬菜和/或水果为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体方法是：一、将底物洗净后削皮，切片，再加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温下发酵，离心处理后取上清液；二、接种复合菌，恒温发酵；即得到养生降脂复合酵素。本发明的养生降脂复合酵素对于分解脂肪有效果。

Description

一种养生降脂复合酵素及其制作方法
技术领域
本发明属于酵素的技术领域；具体涉及一种养生降脂复合酵素及其制作方法。
背景技术
酵素是一种蛋白质酶生物催化剂，参与生物体内的多种重要生理代谢活动。目前酵素可分为由一种水果或蔬菜发酵的单一酵素和多种复合酵素，通常复合水果酵素的综合抗氧化等活性能力要强于单一水果酵素，它们之间可能存在协同作用达到单一酵素所不能有的有益效果。
目前国内市场上已经出现了各种各样的酵素制品，原料扩展到水果、蔬菜、植物、菇类、中草药等，从自然发酵法、一次发酵、二次发酵到添加各种组合有益菌形成了不同的发酵工艺得到的不同风味和保健作用的酵素制品。但是关于酵素包含具体的营养物质以及发酵过程中的生物活性成分、作用机理、微生物种类数量仍然不是很清楚，需要进一步的研究。
发明内容
本发明目的是提供来一种营养价值高的风味酵素。
本发明所述养生降脂复合酵素是以蔬菜和/或水果为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温不避光发酵，离心处理后取上清液，得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，室温下不避光发酵；即得到养生降脂复合酵素。
上述蔬菜为苦瓜和/或胡萝卜，两者组合时按任意比配比。上述水果为草莓、火龙果、菠萝及柠檬中的一种或者其中几种的混合，水果为组合物时，各种水果之间按任意比配比。
进一步限定上述的底物为草莓、菠萝和火龙果的组合，其中草莓、菠萝和火龙果的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者上述的底物为草莓、苦瓜和胡萝卜的组合，其中草莓、苦瓜和胡萝卜的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者上述的底物为胡萝卜、火龙果、菠萝和柠檬的组合，其中胡萝卜、火龙果、菠萝和柠檬的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者上述的底物为火龙果、苦瓜、胡萝卜和草莓的组合，其中火龙果、苦瓜、胡萝卜和草莓的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者上述的底物为柠檬、火龙果和苦瓜的组合，其中柠檬、火龙果和苦瓜的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)。
步骤一中底物与冰糖按(2～5)：(1～2)的质量比混合得到混合料。
步骤一中底物的质量与冰糖的总质量之比为(3～6)：(1～2)。
步骤一中以3000～5000r/min速率离心10～15min。
步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1×107个/mL～10×107个/mL，乳酸菌的接种量为2×107个/mL～10×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2×107个/mL～10×107个/mL。
步骤二中发酵温度恒定在30℃～40℃，发酵时间16h～36h。
本发明步骤一中发酵时间为2～4月；若发酵时间超过5个月，出现了很多不利于益生菌再次生长繁殖的有害物质，对步骤二的复合菌的生长起抑制作用，使其正常的生长周期出现变化，菌体早衰致使在酵素发酵的后期出现其他的代谢产物降低了酵素活性。
本发明采用复合菌对果蔬进行二次发酵获得复合酵素，清澈透亮呈红棕色，散发着更加浓重的酒香味和果香味，口味更加酸甜好喝；并且含有大量的黄酮类的化合物的花青素物质以及其他的多酚类和有机酸等，如类胡萝卜素，维生素C和E，硒，叶酸，膳食纤维，二硫代硫酮，异硫氰酸酯，硫代葡萄糖酸盐，吲哚类，酚类，黄酮类，蛋白酶抑制剂，葱属植物化合物，植物固醇和柠檬烯等，复合酵素的各物质之间互补并协同作用，解毒酶的诱导抑制亚硝胺的形成，稀释和黏附消化道的致癌物质，改变激素代谢和起抗氧化作用。
本发明菌接种量为枯草芽孢杆菌1.0×107个/mL，乳酸菌2.1×107个/mL，酿酒酵母菌2.0×107个/mL条件下对草莓、菠萝和火龙果组成的水果组合底物进行处理，发酵36hDPPH自由基清除率为70.22％、羟自由基清除率80.98％的果蔬发酵工艺，发酵16h的超氧阴离子清除率42.33％、SOD酶活力19.64、脂肪酶活力为6.93的果蔬发酵工艺。与步骤一获得的原液相比，DPPH自由基清除率由原液43.91％升高到提升率为59.94％，羟自由基清除率由原液45.48％升高到提升率为78.06％、超氧阴离子自由基清除率是原液7.36％的5.75倍、SOD酶活力是原液8.01的2.46倍、脂肪酶活力是原液1.335的6.1倍。不同组合的酵素都表现强的抗氧化活性和SOD酶活性，脂肪酶的活力较强，说明此种果蔬发酵酵素有助于身体代谢的平衡，保持生命活力；可提高身体免疫，增强身体抵抗力；长期服用兼具有分解脂肪、保持苗条身材的效果。
具体实施方式
下述实施方式中用到的枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)和酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)：天津农学院农学与资源环境学院生物技术系保藏菌种。乳酸菌(lactic acid bacteria)分离于自制的圆白菜泡菜发酵液。
具体实施方式一：本实施方式中复合酵素是以草莓、菠萝和火龙果的组合为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述草莓、菠萝和火龙果之间的质量比为1：1：1，所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再按底物与冰糖按2：1的质量比加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖(这部分冰糖的总量与混合料的质量比为6:1)的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温发酵2个月，以5000r/min的速率离心12min后取上清液，得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，将温度恒定在30℃条件下进行发酵，发酵36小时；即得到养生降脂复合酵素；
其中，步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1.0×107个/mL，乳酸菌的接种量为2.1×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2.0×107个/mL。
本实施方式方法获得的复合酵素的清澈透亮呈红棕色，散发着更加浓重的酒香味和果香味，口味更加酸甜好喝。
DPPH自由基清除率由原液43.91％升高到提升率为59.94％，羟自由基清除率由原液45.48％升高到提升率为78.06％、超氧阴离子自由基清除率是原液7.36％的5.75倍、SOD酶活力是原液8.01U/mL的2.46倍、脂肪酶活力是原液1.335U/mL的6.1倍。本实施方式制备的复合酵素表现强的抗氧化活性和SOD酶活性，脂肪酶的活力较强，说明此种果蔬发酵复合酵素对于分解脂肪有效果。
具体实施方式二：本实施方式所述的复合酵素是以草莓、苦瓜和胡萝卜的组合为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述草莓、苦瓜和胡萝卜之间的质量比为1：2：1，所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再按底物与冰糖按2：1的质量比加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖(这部分冰糖的总量与底物的质量比为4:1)的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温发酵3个月，以4000r/min的速率离心10min后取上清液，得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，将温度恒定在35℃条件下进行发酵，发酵30小时；即得到养生降脂复合酵素；
其中，步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1.0×107个/mL，乳酸菌的接种量为2.1×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2.0×107个/mL。
具体实施方式三：本实施方式所述的复合酵素是以胡萝卜、火龙果、菠萝和柠檬的组合为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述胡萝卜、火龙果、菠萝和柠檬之间的质量比为1：2：2：1，所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再按底物与冰糖按2：1的质量比加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖(这部分冰糖的总量与底物的质量比为6:1)的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温发酵4个月，以3000r/min的速率离心15min后取上清液，得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，将温度恒定在38℃条件下进行发酵，发酵32小时；即得到养生降脂复合酵素；
其中，步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1.0×107个/mL，乳酸菌的接种量为2.1×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2.0×107个/mL。
具体实施方式四：本实施方式所述的复合酵素是以火龙果、苦瓜、胡萝卜和草莓的组合为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述火龙果、苦瓜、胡萝卜和草莓之间的质量比为2：2：1：1，所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再按底物与冰糖按2：1的质量比加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖(这部分冰糖的总量与底物的质量比为4:1)的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温发酵3个月，以5000r/min的速率离心15min后取上清液，得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，将温度恒定在35℃条件下进行发酵，发酵18小时；即得到养生降脂复合酵素；
其中，步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1.0×107个/mL，乳酸菌的接种量为2.1×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2.0×107个/mL。
具体实施方式五：本实施方式所述的复合酵素是以柠檬、火龙果和苦瓜的组合为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述柠檬、火龙果和苦瓜之间的质量比为2：1：2，所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合；具体制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再按底物与冰糖按2：1的质量比加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖(这部分冰糖的总量与底物的质量比为5:1)的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温发酵4个月，以3000r/min的速率离心15min后取上清液，得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，将温度恒定在40℃条件下进行发酵，发酵16小时；即得到养生降脂复合酵素；
其中，步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1.0×107个/mL，乳酸菌的接种量为2.1×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2.0×107个/mL。
具体实施方式一至五产生的天然酵素原液以及DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率、SOD酶活力、脂肪酶活力见表1。
表1：
由表1可知，本发明的方法制备复合酵素的表现强的抗氧化活性和SOD酶活性，脂肪酶的活力较强，说明此种果蔬发酵复合酵素对于分解脂肪有效果。
采用不同配比复合菌进行发酵，按具体实施方式一的方法进行处理，来验证发明效果，菌株的配比见表1，1水平是上述三种菌的加量为：酿酒酵母菌3×107个，枯草芽孢杆菌3.1×107，乳酸菌3.22×107个。2水平为：酿酒酵母菌6×107个，枯草芽孢杆菌6.2×107个，乳酸菌6.44×107个。将4个处理的菌种组合加入到酵素原液中，测定DPPH、羟自由基、超氧阴离子自由基清除能力和脂肪酶以及SOD酶共五种活性能力，然后运用DPS数据处理软件对实验数据进行分析和处理，结果如表3所示。
表2：不同菌的数量比表
表3：
由表3可知，不同配比复合菌制备的复合酵素都表现强的抗氧化活性和SOD酶活性，脂肪酶的活力较强，对于分解脂肪有效果，组别2条件下制得的复合酵素对于分解脂肪效果最好。

Claims (10)

1.一种养生降脂复合酵素，其特征在于所述复合酵素是以蔬菜和/或水果为底物，用冰糖发酵后取上清液，然后接种复合菌后发酵而成的，其中所述的复合菌为枯草芽孢杆菌、乳酸菌和酿酒酵母菌的组合。
2.根据权利要求1所述的一种养生降脂复合酵素，其特征在于所述蔬菜为苦瓜和/或胡萝卜。
3.根据权利要求1所述的一种养生降脂复合酵素，其特征在于所述水果为草莓、火龙果、菠萝及柠檬中的一种或者其中几种的混合。
4.如权利要求1所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于该制作方法是按下述步骤进行的：
步骤一、将底物洗净后削皮，切片，再加入冰糖混匀得到混合料，然后以一层混合料，一层冰糖的方式放入玻璃罐中，封紧罐口，室温下不避光发酵，离心处理后取上清液，即得到原液；
步骤二、将复合菌接种到步骤一获得的原液中，发酵；即得到养生降脂复合酵素。
5.根据权利要求4所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于步骤一所述的底物为草莓、菠萝和火龙果的组合，其中草莓、菠萝和火龙果的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者步骤一所述的底物为草莓、苦瓜和胡萝卜的组合，其中草莓、苦瓜和胡萝卜的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者步骤一所述的底物为胡萝卜、火龙果、菠萝和柠檬的组合，其中胡萝卜、火龙果、菠萝和柠檬的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者步骤一所述的底物为火龙果、苦瓜、胡萝卜和草莓的组合，其中火龙果、苦瓜、胡萝卜和草莓的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)：(1～2)；
或者步骤一所述的底物为柠檬、火龙果和苦瓜的组合，其中柠檬、火龙果和苦瓜的质量为(1～2)：(1～2)：(1～2)。
6.根据权利要求4所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于步骤一中底物与冰糖按(2～5)_：(1～2)的质量比混合得到混合料。
7.根据权利要求4所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于步骤一中底物的质量与冰糖的总质量之比为(3～6)：(1～2)。
8.根据权利要求4所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于步骤一中以3000～5000r/min速率离心10～15min。
9.根据权利要求4所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于步骤二中枯草芽孢杆菌的接种量为1×107个/mL～10×107个/mL，乳酸菌的接种量为2×107个/mL～10×107个/mL，酿酒酵母菌的接种量为2×107个/mL～10×107个/mL。
10.根据权利要求4所述的一种养生降脂复合酵素的制作方法，其特征在于步骤二中发酵温度恒定在30℃～40℃，发酵时间16h～36h。
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