CN106918671A - 测定原料药中n,n-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了测定原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法，包括：(1)色谱柱为中等极性毛细管色谱柱；温度控制方式为第一次程序升温和第二次程序升温；检测器为氢火焰离子化检测器；(2)加稀释剂将原料药配制成待测样品溶液；(3)加稀释剂将N,N-二甲基乙酰胺配制成待测对照品溶液；(4)分别将所述待测样品溶液和所述待测对照品溶液直接注入气相色谱仪，完成N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的测定。本发明通过采用程序升温直接进样的方式检测，由此可以避免空白峰对目标峰的干扰，提高检测准确度。实现原料药中的N,N-二甲基乙酰胺的残留进行快速高效的分离和含量测定，且该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、操作方便，从而有效控制药品的质量。

Description

测定原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法

技术领域

本发明涉及化学分析领域，具体而言，本发明涉及一种测定原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法。

背景技术

N,N-二甲基乙酰胺(N,N-Dimethylacetamide，DMAc)为无色透明液体，能与水﹑醇﹑醚、苯和三氯甲烷等有机溶剂任意混溶，在无水﹑酸﹑碱的条件下有很好的稳定性，沸点为165～166℃。用作合成纤维的原料及有机合成的优良极性溶剂。

药物合成中，常将N,N-二甲基乙酰胺作为优良极性溶剂，可用于富马酸沃诺拉赞等多种原料药(API，Active Pharmaceutical Ingredient)合成的常用溶剂，但由于其存在的一定毒性，ICH指导原则Q3C和《中国药典》2010年版二部附录中均将其归为二类溶剂，并规定在原料药中必须进行溶剂残留的严格控制，限度为0.109％。

N,N-二甲基乙酰胺的结构式如下：

目前，尚未见有关测定成盐类碱性化合物等原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法。而实现富马酸沃诺拉赞等原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂的残留量，对于合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种快速分析N,N-二甲基乙酰胺的气相色谱法，从而实现了富马酸沃诺拉赞等原料药中N,N-二甲基乙酰胺的溶剂残留检测。

本发明提供了一种测定原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：

(1)色谱条件：

色谱柱为中等极性毛细管色谱柱；

温度控制方式为第一次程序升温和第二次程序升温；

检测器为氢火焰离子化检测器；

(2)样品溶液配制：

加稀释剂将所述原料药配制成待测样品溶液；

(3)对照品溶液配制：

加稀释剂将N,N-二甲基乙酰胺配制成待测对照品溶液；

(4)测定：

分别将所述待测样品溶液和所述待测对照品溶液直接注入气相色谱仪的进样口，完成N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的测定。

本发明通过采用程序升温直接进样的方式检测，由此可以避免空白峰对目标峰的干扰，提高检测准确度。可以实现原料药中的N,N-二甲基乙酰胺的残留进行快速高效的分离和含量测定，且该检测方法专属性强、精密度高、准确性强、操作方便，从而有效控制药品的质量。

根据本发明的一些实施例的测定原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法，还可以具有以下附加技术特征：

根据本发明的一些实施例，所述原料药为成盐类碱性化合物富马酸沃诺拉赞。

根据本发明的一些实施例，所述色谱柱为6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管色谱柱，或为同等极性毛细管色谱柱。由此得到的分离效果最佳。

根据本发明的一些实施例，所述第一次程序升温的起始温度为75℃～85℃，优选为80℃。由此，可以进一步提高N,N-二甲基乙酰胺残留测定的准确度。

根据本发明的具体实施例，所述第一次程序升温的起始温度维持2～4分钟，优选为3分钟。由此，可以进一步提高N,N-二甲基乙酰胺峰与空白干扰峰的分离度。

根据本发明的一些实施例，所述第一次程序升温的升温速率为4～6℃/分钟，优选为5℃/分钟。由此，可以进一步提高提高N,N-二甲基乙酰胺残留测定的准确度。

根据本发明的一些实施例，所述第一次程序升温是从所述起始温度升温至第一温度，所述第一温度为135～145℃，优选为140℃。由此，可以进一步提高分离度。

根据本发明的一些实施例，所述第一温度维持4～6分钟，优选为5分钟。由此，可以进一步提高检测灵敏度。

根据本发明的一些实施例，所述第二次程序升温的升温速率为35～45℃/分钟，优选为40℃/分钟。由此，可以显著缩短检测时间，节能环保。

根据本发明的一些实施例，所述第二次程序升温是从第一温度升温至第二温度，所述第二温度为215～225℃，优选为220℃。由此，可以高效活化色谱柱。

根据本发明的一些实施例，所述第二温度维持4～6分钟，优选为5分钟。由此，可以使色谱柱得到充分活化，对后续试验无干扰。

根据本发明的一些实施例，所述气相色谱仪的进样口温度为240～250℃，优选为250℃。由此，可以使样品中N,N-二甲基乙酰胺完全气化，提高检测准确度。

根据本发明的一些实施例，所述检测器温度为270～280℃，优选为280℃。由此，可以防止色谱系统中的水汽冷凝及杂质附着残留与检测器中，对检测器造成损伤。

根据本发明的一些实施例，采用分流模式进样，分流比为5：1-20：1，优选为10：1。

根据本发明的实施例，所述稀释液为N-甲基吡咯烷酮或二甲基亚砜中的至少一种，优选为N-甲基吡咯烷酮。由此，可以使样品充分溶解，便于N,N-二甲基乙酰胺气化完全，且可避免空白峰对目标峰的干扰，提高检测准确度。

根据本发明的一些实施例，所述待测样品溶液中原料药的浓度为0.1克/毫升。

根据本发明的一些实施例，所述待测对照品溶液中N,N-二甲基乙酰胺的浓度为0.109克/毫升。

根据本发明的一个实施例，色谱柱采用30m×0.53mm，3.0μm的DB-624色谱柱，温度控制方式为：

升温速率(℃/min)	温度(℃)	保持时间(min)
			/	80	3
5	140	5
			40	220	5

其中，所述气相色谱仪的进样口温度为250摄氏度，所述检测器的温度为280摄氏度，分流比10:1。

发明人通过对比试验发现，本发明所述的测定方法，可以依照以下方法实现：

(1)色谱条件：以(6％)氰丙基苯基-(94％)二甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱；起始温度为80℃，维持3分钟，以每分钟5℃的速率升温至140℃，维持5分钟，以每分钟40℃的速率升温至220℃，维持5分钟；进样口温度250℃，检测器温度280℃；以N-甲基吡咯烷酮为稀释液；

(2)样品溶液的配制：取原料药适量，精密称定，加稀释液(N-甲基吡咯烷酮)溶解并稀释制成每1ml约含原料药0.1g的溶液，作为待测样品品溶液；

(3)对照品溶液的配制：取N,N-二甲基乙酰胺适量，精密称量，加稀释液(N-甲基吡咯烷酮)溶解并稀释制成每1ml约含N,N-二甲基乙酰胺0.109mg的溶液，作为待测对照品溶液；

(4)分析：分别将待测样品溶液和待测对照品溶液注入气相色谱仪的进样口，完成N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的测定。

本发明方法可以快速、准确、可靠的检测成盐类碱性化合物中N,N-二甲基乙酰胺的残留量。本发明的技术效果：通过利用气相色谱法，对成盐类碱性化合物中N,N-二甲基乙酰胺的残留进行检测分析，限度可达13ppm。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

图1：按照实施例1条件检测的痕量N,N-二甲基乙酰胺的气相色谱图；

图2：按照实施例1条件检测的N,N-二甲基乙酰胺的气相色谱图；

图3：按照实施例1条件检测的自制原料富马酸沃诺拉赞100％加样回收溶液的气相色谱图；

图4：按照实施例1条件检测的自制原料药富马酸沃诺拉赞中N,N-二甲基乙酰胺残留量的气相色谱图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

本发明实施例中所用的富马酸沃诺拉赞原料药为自制。

实施例1

稀释剂：N-甲级吡咯烷酮

实验步骤：

供试品溶液：取富马酸沃诺拉赞原料药1g，精密称定，置于10ml量瓶中，振摇使富马酸沃诺拉赞原料药完全溶解后稀释至刻度，摇匀，即得。

N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：取N,N-二甲基乙酰胺约109mg，精密称定，置100ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。(109μg/ml)

痕量N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：精密量取对照品溶液1ml，置25ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液3ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。(1.3μg/ml)

100％加样回收溶液：取样品约1g，精密称定，置10ml量瓶中，加对照品溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

分别精密量取上述溶液，在上述色谱条件下进行气相色谱分析，记录色谱图。

结论：图1表明13ppm的N,N-二甲基乙酰胺在此色谱条件下可检测；图2表明1090ppm的N,N-二甲基乙酰胺在此色谱条件下检测无干扰；图3表明N,N-二甲基乙酰胺在此色谱条件下检测准确度好；图4表明自制原料富马酸沃诺拉赞中N,N-二甲基乙酰胺残留量在13ppm以下。

实施例2

稀释剂：N-甲级吡咯烷酮

实验步骤：

供试品溶液：取富马酸沃诺拉赞原料药1g，精密称定，置于10ml量瓶中，振摇使富马酸沃诺拉赞原料药完全溶解后稀释至刻度，摇匀，即得。

N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：取N,N-二甲基乙酰胺约109mg，精密称定，置100ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。(109μg/ml)

100％加样回收溶液：取样品约1g，精密称定，置10ml量瓶中，加对照品溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

结论：N,N-二甲基乙酰胺峰与空白干扰峰、样品分解峰均分离较好，且N,N-二甲基乙酰胺的回收率与实施例1测得的回收率基本一致。

实施例3

稀释剂：N-甲级吡咯烷酮

实验步骤：

供试品溶液：取富马酸沃诺拉赞原料药1g，精密称定，置于10ml量瓶中，振摇使富马酸沃诺拉赞原料药完全溶解后稀释至刻度，摇匀，即得。

N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：取N,N-二甲基乙酰胺约109mg，精密称定，置100ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。(109μg/ml)

痕量N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：精密量取对照品溶液1ml，置25ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液3ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。(1.3μg/ml)

100％加样回收溶液：取样品约1g，精密称定，置10ml量瓶中，加对照品溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

分别精密量取上述溶液，在上述色谱条件下进行气相色谱分析，记录色谱图。

结论：N,N-二甲基乙酰胺峰与空白干扰峰、样品分解峰均分离较好，且N,N-二甲基乙酰胺的回收率与实施例1测得的回收率基本一致。

对比实施例1

稀释剂：二甲基亚砜

实验步骤：

供试品溶液：取富马酸沃诺拉赞原料药1g，精密称定，置于10ml量瓶中，振摇使富马酸沃诺拉赞原料药完全溶解后稀释至刻度，摇匀，即得。

N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：取N,N-二甲基乙酰胺约109mg，精密称定，置100ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。(109μg/ml)

痕量N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：精密量取对照品溶液1ml，置25ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液3ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。(1.3μg/ml)

100％加样回收溶液：取样品约1g，精密称定，置10ml量瓶中，加对照品溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

分别精密量取上述溶液，在上述色谱条件下进行气相色谱分析，记录色谱图。

结论：上述色谱条件较实施例1色谱柱条件更改了升温程序，按此色谱条件检测，空白溶剂及样品高温分解的杂质对N,N-二甲基乙酰胺峰有干扰，导致检测结果不准确。

对比实施例2

稀释剂：二甲基亚砜

实验步骤：

供试品溶液：取富马酸沃诺拉赞原料药1g，精密称定，置于10ml量瓶中，振摇使富马酸沃诺拉赞原料药完全溶解后稀释至刻度，摇匀，即得。

N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：取N,N-二甲基乙酰胺约109mg，精密称定，置100ml量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。(109μg/ml)

痕量N,N-二甲基乙酰胺对照品溶液：精密量取对照品溶液1ml，置25ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液3ml，置10ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。(1.3μg/ml)

100％加样回收溶液：取样品约1g，精密称定，置10ml量瓶中，加对照品溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

分别精密量取上述溶液，在上述色谱条件下进行气相色谱分析，记录色谱图。

结论：上述色谱条件较实施例1色谱条件更改了升温程序及进样方式(直接进样改为顶空进样)，按此方法检测，空白溶剂峰与N,N-二甲基乙酰胺峰重合，导致检测无法进行。

在本发明的描述中，需要理解的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种测定原料药中N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)色谱条件：

色谱柱为中等极性毛细管色谱柱；

温度控制方式为第一次程序升温和第二次程序升温；

检测器为氢火焰离子化检测器；

(2)样品溶液配制：

加稀释剂将所述原料药配制成待测样品溶液；

(3)对照品溶液配制：

加稀释剂将N,N-二甲基乙酰胺配制成待测对照品溶液；

(4)测定：

分别将所述待测样品溶液和所述待测对照品溶液直接注入气相色谱仪，完成N,N-二甲基乙酰胺溶剂残留的测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管色谱柱，或同等极性毛细管色谱柱。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述第一次程序升温的起始温度为75摄氏度～85摄氏度，优选为80摄氏度；

任选地，所述第一次程序升温的起始温度维持2～4分钟，优选为3分钟。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述第一次程序升温的升温速率为4～6摄氏度/分钟，优选为5摄氏度/分钟；

任选地，所述第一次程序升温是从所述起始温度升温至第一温度，所述第一温度为135～145摄氏度，优选为140摄氏度；

任选地，所述第一温度维持4～6分钟，优选为5分钟。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述第二次程序升温的升温速率为35～45摄氏度/分钟，优选为40摄氏度/分钟；

任选地，所述第二次程序升温是从第一温度升温至第二温度，所述第二温度为215～225摄氏度，优选为220摄氏度；

任选地，所述第二温度维持4～6分钟，优选为5分钟。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述气相色谱仪的进样口温度为240～250摄氏度，优选为250摄氏度；

任选地，所述检测器温度为270～280摄氏度，优选为280摄氏度。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，采用分流模式进样，分流比为5：1-20：1，优选为10：1。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述稀释剂为选自N-甲基吡咯烷酮和二甲基亚砜中的至少一种，优选为N-甲基吡咯烷酮；

任选地，所述待测样品溶液中原料药的浓度为0.1克/毫升；

任选地，所述待测对照品溶液中N,N-二甲基乙酰胺的浓度为0.109毫克/毫升。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，所述原料药为成盐类碱性化合物，优选为富马酸沃诺拉赞。

10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，所述色谱柱采用30m×0.53mm，3.0μm的DB-624色谱柱，温度控制方式为：

升温速率/℃/min 温度/℃ 保持时间/min / 80 3 5 140 5 40 220 5

其中，所述气相色谱仪的进样口温度为250摄氏度，所述检测器的温度为280摄氏度，分流比10:1。