CN103592379A

CN103592379A - 一种奥美拉唑有关物质的分析方法

Info

Publication number: CN103592379A
Application number: CN201310451932.3A
Authority: CN
Inventors: 郭文建; 王金虎; 孙玲
Original assignee: MEDICINE INDUSTRY INST SHANDONG PROV
Current assignee: Shijiazhuang Pharmaceutical Group Ouyi Pharma Co Ltd; Shandong Academy of Pharmaceutical Sciences
Priority date: 2013-09-29
Filing date: 2013-09-29
Publication date: 2014-02-19
Anticipated expiration: 2033-09-29
Also published as: CN103592379B

Abstract

一种奥美拉唑有关物质的分析方法，其特征是采用高效液相色谱法，用有机溶剂和盐的混合相溶解样品，以乙腈和pH=7.6的磷酸盐为流动相，在辛烷基键和硅胶色谱柱上进行梯度洗脱。本方法简单有效地解决了有关物质和溶剂峰分不开、杂质检出数量少等缺点，更高效的分离并鉴别出奥美拉唑的相关杂质。

Description

一种奥美拉唑有关物质的分析方法

技术领域

本发明涉及一种奥美拉唑有关物质的分析方法，特别是用高效液相色谱法对奥美拉唑有关物质进行分离和定量测定的方法。

背景技术

在药物分析中所称的“有关物质(relatedSubstances)”是指特定药物中不是主要组成物，但与成份相关的物质。由于一种药品从合成原料药到制备有关的制剂，再经贮藏、运输、使用,要经历一段较为复杂和漫长的过程，在此期间,每一过程都有可能产生有关的物质,如生产中可能带入起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等；在贮藏和运输过程中，可能产生降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效，同时也要考虑到生产实际情况。因此，国内外对药物的研究，可允许含有一定限量的无害或低毒性的有关物质，但对毒性较大，能危害人体健康的、无效的或能影响药物稳定性的有关物质则必须严格控制。因此有关物质检测是控制药品质量的重要指标。

至今，英国药典、中国药典收录的标准存在溶剂峰和杂质峰重叠、灵敏度低、检出杂质少等不足；而美国药典的色谱条件较为苛刻，所以寻求一种简单、快捷、灵敏度高的色谱方法显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种奥美拉唑有关物质更好的一种高效液相色谱分析方法，使溶剂峰和有关物质达到简便、有效分析的目的，并同时提高了有关物质的定量分析的灵敏度。

奥美拉唑及其有关物质见下表：A、C、D、E、F、I

发明人通过对高效液相色谱分析中色谱柱、流动相等条件反复筛选，探索出了合适的分析条件。为兼顾多种杂质分离的要求，选择了合适的缓冲溶液体系及流动相的比例等关键检测条件，最终确立的方法达到了上述发明目的。

本发明的技术方案如下：

奥美拉唑有关物质的分析方法，采用高效液相色谱法，其特征是用有机溶剂和盐溶解样品，以乙腈和pH 7.6的磷酸盐为流动相，在辛烷基键和硅胶色谱柱上进行梯度洗脱。

溶解样品所用的稀释液，乙腈与盐的比例是25：75；流动相中乙腈与盐的比例是20：80。

所述磷酸盐缓冲液的pH为7.5-7.7。

所述盐为磷酸氢二钠。

检测条件为：检测波长280 nm；流动相洗脱速率0.8~1.2 ml/min：色谱柱温度30 ℃~ 40 ℃：样品进样量：20 ul。

上述方法中梯度洗脱的梯度优选为：

本方法的效果和优点是：

1、可有效分离出奥美拉唑中的有关物质，杂质峰与主峰完全分离，方法有效、可靠；

2、能对奥美拉唑有关物质进行定量，且有较高的灵敏度，在60min内能将多种已知杂质与主峰分离；

3、操作简单

本发明的有益效果是可同时检测的潜在杂质种类多、简单快捷、灵敏度高，可用于奥美拉唑及含有奥美拉唑的药物的质量控制。

具体实施方式

实施例一奥美拉唑和几个杂质的高效液相色谱分析

几个有关物质为：A、D、E、C、I、F。

仪器与分析条件- Agilent 1100，色谱工作站、自动进样器、柱温箱。色谱柱为Agilent XDB-C18(4.6mm*150mm，5um)，检测波长为280 nm，流速为1.0 ml/min，柱温为30 ℃，有机相是乙腈，水相为pH 7.6的磷酸盐缓冲液，梯度洗脱方式为：

实验步骤：

精密称取奥美拉唑和几个杂质（A、C、D、E、I）适量，用稀释液溶解并定容，配成含奥美拉唑和有关杂质的混合溶液作为供试品溶液。按上述条件进行高效液相分析，进样20 ul，色谱图详见说明书附图1。

结果显示，保留时间为21min的色谱峰为奥美拉唑，奥美拉唑和几个有关物质可以再同一色谱条件下达到良好的分离，分离度Rs>2.0。

实施例二本发明分析方法的方法学考察

专属性考察：配置不加奥美拉唑的其他辅料进行破坏，辅料不干扰奥美拉唑有关物质的测定，证明其专属性良好。

实施例分析方法稳定性试验

为了更好的考察本方法的专属性和稳定性，设计了酸、碱、氧化、水破坏试验。

仪器与分析条件- Water 2695色谱工作站、自动进样器、柱温箱。色谱柱为Agilent XDB-C18(4.6mm*150mm，5um),检测波长为280nm,流速为1.0ml/min,柱温为30 ℃，有机相是乙腈，水相为pH7.6的磷酸盐缓冲液，梯度洗脱方式为：

酸破坏实验：称取奥美拉唑样品20mg 于100ml 容量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液5ml，放置破坏2min，加0.1mol/L NaOH溶液中和，用稀释液定容，摇匀，离心后注入液相色谱仪，进样20ul，记录色谱图，详见说明书附图2。

碱破坏实验：称取奥美拉唑样品20mg 于100ml 容量瓶中，加0.1mol/L NaOH溶液 5ml， 60℃加热2h，冷却后用0.1mol/LHCL中和，用稀释液定容，摇匀，离心后注入液相色谱仪，进样20 ul，记录色谱图，详见说明书附图3。

氧化破坏实验：称取奥美拉唑样品20mg 于100ml 容量瓶中，加入30%的双氧水1ml进行破坏，用稀释液定容，摇匀，离心后注入液相色谱仪，进样20 ul，记录色谱图，详见说明书附图4。

水破坏实验：称取奥美拉唑20mg 于100ml 容量瓶中，加蒸馏水 5ml, 60℃加热2h，冷却后用稀释液定容，摇匀，离心后注入液相色谱仪，进样20 ul，记录色谱图，详见说明书附图5。

结果表明，奥美拉唑在酸、碱、氧化、水破坏条件下的降解产物能与奥美拉唑较好地分离，表明该色谱系统的灵敏度，专属性良好。

线性关系考察：精密称取奥美拉唑、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E及杂质I对照品各约10mg分别置50ml量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取5ml置同一100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为混合杂质贮备液，分别精密量取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ml置10ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，分别进样，记录色谱图。

各成分浓度与峰面积线性关系结果汇总表

以峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，进行线性回归，分别得回归方程，奥美拉唑对照品溶液：A=19.023C+2.9461，相关系数r=0.9954；杂质A对照品溶液：A=21.737C+1.6203，相关系数r=0.9963；杂质C对照品溶液：A=27.222C-0.5826，相关系数r=0.9996；杂质D对照品溶液：A=24.438C+0.7691，相关系数r=0.9980；杂质E对照品溶液：A=46.169C-0.6386，相关系数r=0.9994；杂质I对照品溶液：A=46.868C-0.4798，相关系数r=0.9993。线性试验结果表明，奥美拉唑在0.1765μg/ml~1.547μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系；杂质A在0.1028μg/ml~1.6844μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系；杂质C在0.1196μg/ml~1.4272μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系；杂质D在0.1348μg/ml~1.3942μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系；杂质E在0.0689μg/ml~1.1986μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系；杂质I在0.062μg/ml~1.062μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系。各成分线性关系图详见说明书附图6。

色谱系统精密度考察：取上述线性关系试验项下混合杂质贮备液0.2ml六份分别置六个不同10ml量瓶中，再分别称入样品适量（约相当于奥美拉唑2mg），加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，离心，取离心液作为供试品溶液，另取混合杂质贮备液1.0ml置10ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，按外标法以峰面积计算各供试品溶液中已知杂质的含量，结果见表。

表各已知杂质重复性试验结果

注：表中含量数据经四舍五入保留小数点后两位，而RSD（%）则由未经取舍的真实值计算得出

分析方法中间精密度考察：

中间精密度采用同样操作方法，由不同人员在不同色谱系统下重复上述试验，结果见下表。

各已知杂质中间精密度试验结果

由数据可知本方法精密度良好。

准确度：取上述线性关系试验项下混合杂质贮备液0.2、0.6、1.2ml分别置不同的10ml量瓶中，再分别称入奥美拉唑样品适量（约相当于奥美拉唑2mg），加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，另取混合杂质贮备液1.0ml置10ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，分别计算各杂质的回收率。结果见下表。

综上所述，本发明方法能够有效的分离奥美拉唑有关杂质，能够准确、快速测定奥美拉唑的各个杂质，该方法简单、快速、准确、有效，精密度高，是测定奥美拉唑几种杂质的理想方法。

[附图说明]

图1是奥美拉唑及各杂质高效液相色谱图。

图2是奥美拉唑样品酸破坏高效液相色谱图。

图3是奥美拉唑样品碱破坏高效液相色谱图。

图4是奥美拉唑样品氧化破坏高效液相色谱图。

图5是奥美拉唑样品水破坏高效液相色谱图。

图6是奥美拉唑及各杂质线性图。

Claims

1.一种奥美拉唑有关物质的分析方法，其特征是采用高效液相色谱法，用有机溶剂和盐的混合相溶解样品，以乙腈和pH 7.6的磷酸盐为流动相，在辛烷基键和硅胶色谱柱上进行梯度洗脱。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征是溶解样品所用的稀释液，乙腈与盐的体积比是25：75；流动相中乙腈与盐的体积比是20：80。

3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征是所述磷酸盐缓冲液的pH范围为pH 7.5~pH 7.7。

4.根据权利要求1中所述的分析方法，其特征是所述盐为磷酸氢二钠。

5.一种奥美拉唑有关物质的分析方法，其特征是采用高效液相色谱法，用体积比为25:75的乙腈和磷酸氢二钠混合溶液溶解样品，以体积比为20:80的乙腈和pH 7.5~pH 7.7磷酸盐缓冲液的混合溶液为流动相，在辛烷基键和硅胶色谱柱上进行梯度洗脱。

6.根据权利要求1~5中任一所述的分析方法，其特征是检测条件为：检测波长280 nm；流动相洗脱速率：0.8~1.2ml/min；色谱柱温度：30 ℃~40 ℃；样品进样量：20 μl；梯度洗脱程序为：

时间（min）流动相A（%）流动相B（%） 0 80 20 15 75 25 20 75 25 30 65 35 45 65 35 45.1 80 20 55 80 20

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