CN106688893A - 一种牛大力组织培养育苗方法 - Google Patents

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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

Abstract

本发明公开一种牛大力组织培养育苗方法，属于中药材栽培技术领域，具体工序包括采种、培养无菌苗、制备诱导培养基、丛生芽诱导、丛生芽继代增殖、诱导生根、炼苗7个步骤，有效解决了现有技术中牛大力育苗存在成苗率低，生长慢，产量低，品质差，难形成产业化的缺陷。其有益效果是：取材方便，丛生芽诱导率达65%～80%，成苗达85%以上，生长整齐，性状优良，根系数量较多，均能膨大成薯，可以满足人工大量栽培的需要，而且移栽后生长快，可大面积进行牛大力人工栽培，形成产业化。

Description

一种牛大力组织培养育苗方法
技术领域
本发明涉及中草药材栽培技术，具体涉及一种牛大力育苗的方法，尤其是牛大力的组织培养育苗方法，属于中药材栽培技术领域。
背景技术
牛大力为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤,学名：Millettia specisoa Champ，牛大力以根入药，主要成份为蛋白质、淀粉质及生物碱等。属于药食同源，既可以入药，也可以食用。牛大力的药用价值有：养肾补虚，强筋活络，有平肝、润肺之功效，主治肾虚，对气虚、腰酸腿痛、风湿病、慢性肝炎、支气管炎、咳嗽、肺结核等有很好的疗效。
牛大力是制药企业加工中成药、保健品的常用原料,又是一种非常好的滋补品，很多人使用牛大力熬汤，味道甘香甜口，口味极佳，随着人们生活水平逐渐提高以及保健意识的不断增强，牛大力的用途越来越多，因此牛大力的需求量越来越大，人们对野生资源的滥采乱挖又使野生牛大力濒临灭绝，为满足需要，人们不得不发展人工种植技术。开展牛大力人工栽培，首先要解决牛大力育苗问题，现有技术中，牛大力育苗有种子和扦插苗。主要存在成苗率低，只有40%～55%，开叉多，生长慢，产量低，品质差，且种植两年以上的植株才会开花结子，难形成产业化的缺陷。
发明内容
发明目的：本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种组织培养育苗方法，提高牛大力育苗成苗率，生长整齐，性状优良，根系数量较多，均能膨大成薯，而且能保持牛大力母本药用成分，移栽后生长快，可大面积进行牛大力人工栽培。
技术方案：本发明所述的一种牛大力组织培养育苗方法，具体包括以下步骤：
1. 采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
2.培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒20～25分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
3.制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为1.5～2.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.6%～0.8%的琼脂，培养基温度保持28℃～30℃，PH值5.5～5.8。
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至7～8厘米后，切取上部2～3厘米长的顶芽茎段，接入步骤3诱导过的培养基培养到有丛生芽形成。
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达5～6厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至45～50个丛生芽。
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，直到基部切口开始分化出根。
7. 炼苗：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗5～6天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%～70%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气30～40分钟，喷水雾保持空气湿度80%以上，10天后，可揭去薄膜，按常规管理。
有益效果：本发明与现有技术相比，其有益效果是：
本发明的牛大力育苗方法，取材方便，丛生芽诱导率达65%～80%，成苗达85%以上，生长整齐，性状优良，根系数量较多，均能膨大成薯，可以满足人工大量栽培的需要，而且经过薄层色谱技术鉴定，本方法培养出的试管苗保持牛大力母本药用成分，移栽后生长快，可大面积进行牛大力人工栽培，形成产业化。
具体实施方式
下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
实施例1：一种牛大力组织培养育苗，具体步骤如下：
1. 采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，霜降节气过后，种子成熟，即采种；
2. 培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒20分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
3.制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为1.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.6%的琼脂，培养基温度保持28℃℃，PH值5.5；
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至7厘米后，切取上部2厘米长的顶芽茎段，接入步骤3诱导过的培养基培养至有丛生芽形成；
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达5厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至45个丛生芽；
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，直到基部切口开始分化出根；
7.炼苗：将发育良好，具有2张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗5天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气30分钟，喷水雾保持空气湿度80%以上，10天后，可揭去薄膜，按常规管理。
实施例2：一种牛大力组织培养育苗，包括如下工序：
1. 采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，霜降节气过后，种子成熟，即采种；
2.培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒22分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
3.制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为2.0mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持29℃，PH值5.6；
4. 诱导丛诱导：当步骤2培养的无菌苗长至7.5厘米后，切取上部2.5厘米长的顶芽茎段，接入步骤3诱导过的培养基培养到有丛生芽形成；
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达5.5厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基培养培养至每簇增殖至48个丛生芽；
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3.5厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，直到基部切口开始分化出根；
7. 炼苗：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗5天半后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有68%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气35分钟，喷水雾保持空气湿度80%以上，10天后，可揭去薄膜，按常规管理。
实施例3：一种牛大力组织培养育苗，包括以下步骤：
1. 采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2. 培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒25分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
3.制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为2.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.8%的琼脂，培养基温度保持30℃，PH值5.8；
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至8厘米后，切取上部3厘米长的顶芽茎段，接入步骤3诱导过的培养基培养至有丛生芽形成；
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达6厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至50个丛生芽；
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，直到基部切口开始分化出根；
7. 炼苗：将发育良好，具有3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗6天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有70%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气40分钟，喷水雾保持空气湿度80%以上，10天后，可揭去薄膜，按常规管理。

Claims (2)

1.一种牛大力组织培养育苗方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）采种：选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
（2）培养无菌苗：将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒20～25分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗10分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
（3）制备诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素苄基嘌呤（BA）进行诱导培养，浓度为1.5～2.5mg/L，同时加入3%的蔗糖和0.6%～0.8%的琼脂，培养基温度保持28℃～30℃，PH值5.5～5.8；
（4）丛生芽诱导：当步骤（2）培养的无菌苗长至7～8厘米后，切取上部2～3厘米长的顶芽茎段，接入步骤（3）诱导过的培养基培养到有丛生芽形成；
（5）丛生芽继代增殖：丛生芽诱导至平均高达5～6厘米时，将丛生芽切成2芽一簇，转至另一步骤3诱导过的培养基，培养至每簇增殖至45～50个丛生芽；
（6）诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，直到基部切口开始分化出根。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于还包括步骤（7）炼苗：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗5～6天后取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有65%～70%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气30～40分钟，喷水雾保持空气湿度80%以上，10天后，可揭去薄膜，按常规管理。
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