CN106688893A - 一种牛大力组织培养育苗方法 - Google Patents

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    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008Methods for regeneration to complete plants

Abstract

本发明公开一种牛大力组织培养育苗方法,属于中药材栽培技术领域,具体工序包括采种、培养无菌苗、制备诱导培养基、丛生芽诱导、丛生芽继代增殖、诱导生根、炼苗7个步骤,有效解决了现有技术中牛大力育苗存在成苗率低,生长慢,产量低,品质差,难形成产业化的缺陷。其有益效果是:取材方便,丛生芽诱导率达65%~80%,成苗达85%以上,生长整齐,性状优良,根系数量较多,均能膨大成薯,可以满足人工大量栽培的需要,而且移栽后生长快,可大面积进行牛大力人工栽培,形成产业化。

Description

一种牛大力组织培养育苗方法
技术领域
[0001]本发明涉及中草药材栽培技术,具体涉及一种牛大力育苗的方法,尤其是牛大力 的组织培养育苗方法,属于中药材栽培技术领域。
背景技术
[0002] 牛大力为豆科崖豆藤属植物美丽崖豆藤,学名:Millettia specisoa Champ,牛大 力以根入药,主要成份为蛋白质、淀粉质及生物碱等。属于药食同源,既可以入药,也可以食 用。牛大力的药用价值有:养肾补虚,强筋活络,有平肝、润肺之功效,主治肾虚,对气虚、腰 酸腿痛、风湿病、慢性肝炎、支气管炎、咳嗽、肺结核等有很好的疗效。
[0003]牛大力是制药企业加工中成药、保健品的常用原料,又是一种非常好的滋补品,很 多人使用牛大力熬汤,味道甘香甜口,口味极佳,随着人们生活水平逐渐提高以及保健意识 的不断增强,牛大力的用途越来越多,因此牛大力的需求量越来越大,人们对野生资源的滥 采乱挖又使野生牛大力濒临灭绝,为满足需要,人们不得不发展人工种植技术。开展牛大力 人工栽培,首先要解决牛大力育苗问题,现有技术中,牛大力育苗有种子和扦插苗。主要存 在成苗率低,只有40%〜55%,开叉多,生长慢,产量低,品质差,且种植两年以上的植株才会 开花结子,难形成产业化的缺陷。
发明内容
[0004] 发明目的:本发明的目的是针对现有技术的缺陷,提供一种组织培养育苗方法,提 高牛大力育苗成苗率,生长整齐,性状优良,根系数量较多,均能膨大成薯,而且能保持牛大 力母本药用成分,移栽后生长快,可大面积进行牛大力人工栽培。
[0005] 技术方案:本发明所述的一种牛大力组织培养育苗方法,具体包括以下步骤: 1 •采种:选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株,每年霜降节气过后,种子成 熟,即可采种。
[0006] 2 •培养无菌苗:将牛大力种子置于0 • 3%升汞溶液浸泡消毒20〜25分钟,在超净工 作台上用无菌水浸洗3次,每次浸洗10分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光 照下培养。
[0007] 3.制备诱导培养基:以MS为基本培养基,加入植物激素苄基嘌呤(BA)进行诱导培 养,浓度为1 •5〜2 • 5mg/L,同时加入3%的蔗糖和0 •6%〜0 • 8%的琼脂,培养基温度保持28。(:〜 30口唯5.5〜5_8。
[0008] 4•丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至7〜8厘米后,切取上部2〜3厘米长的顶 芽茎段,接入步骤3诱导过的培养基培养到有丛生芽形成。
[0009] 5 •丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达5〜6厘米时,将丛生芽切成2芽一簇, 转至另一步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至4f5〜50个丛生芽。
[0010] 6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时,将健壮的芽单切,并转 到新的诱导过的培养基上诱导生根,直到基部切口开始分化出根。
[0011] 7•炼苗:将发育良好,具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下炼苗5 〜6天后取出小苗,用清水洗去根部的培养基,在有65%〜70%遮荫度的大棚内,移栽到苗床 或营养杯中,浇透水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气3〇〜40分钟,喷水雾保持空气 湿度80%以上,10天后,可揭去薄膜,按常规管理。
[0012] 有益效果:本发明与现有技术相比,其有益效果是: 本发明的牛大力育苗方法,取材方便,丛生芽诱导率达65%〜80%,成苗达85%以上,生长 整齐,性状优良,根系数量较多,均能膨大成薯,可以满足人工大量栽培的需要,而且经过薄 层色谱技术鉴定,本方法培养出的试管苗保持牛大力母本药用成分,移栽后生长快,可大面 积进行牛大力人工栽培,形成产业化。
具体实施方式
[0013] 下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
[00M]实施例1: 一种牛大力组织培养育苗,具体步骤如下: 1 •采种:选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株,霜降节气过后,种子成熟, 即采种; 2 •培养无菌苗:将牛大力种子置于0.3%升汞溶液浸泡消毒20分钟,在超净工作台上用 无菌水浸洗3次,每次浸洗10分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下培养; 3 •制备诱导培养基:以MS为基本培养基,加入植物激素苄基嘌呤(BA)进行诱导培养,浓 度为1.5mg/L,同时加入3%的蔗糖和0 • 6%的琼脂,培养基温度保持28°C °C,PH值5.5; 4 •丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至7厘米后,切取上部2厘米长的顶芽茎段,接 入步骤3诱导过的培养基培养至有丛生芽形成; 5 •丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达5厘米时,将丛生芽切成2芽一簇,转至另一 步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至45个丛生芽; 6.诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3厘米时,将健壮的芽单切,并转到新的诱 导过的培养基上诱导生根,直到基部切口开始分化出根; 炼苗:将发育良好,具有2张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下炼苗5天后取出 小苗,用清水洗去根部的培养基,在有65%遮荫度的大棚内,移栽到苗床或营养杯中,浇透 水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气30分钟,喷水雾保持空气湿度80%以上,10天后, 可揭去薄膜,按常规管理。
[0015]实施例2:—种牛大力组织培养育苗,包括如下工序: 1 •采种:选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株,霜降节气过后,种子成熟, 即米种; 2 •培养无菌苗:将牛大力种子置于0.3%升萊溶液浸泡消毒22分钟,在超净工作台上用 无菌水浸洗3次,每次浸洗1 〇分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下培养; 3. 制备诱导培养基:以MS为基本培养基,加入植物激素苄基嘌呤(BA)进行诱导培养,浓 度为2 • Omg/L,同时加入3%的蔗糖和0 •7%的琼脂,培养基温度保持29°C,PH值5 • 6; 4. 诱导丛诱导:当步骤2培养的无菌苗长至7 • 5厘米后,切取上部2.5厘米长的顶芽茎 段,接入步骤3诱导过的培养基培养到有丛生芽形成; 5.丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达5.5厘米时,将丛生芽切成2芽一簇,转至另 一步骤3诱导过的培养基培养培养至每簇增殖至48个丛生芽; 6 •诱导生根:当继代增殖的丛生芽有7〇%长至3 • 5厘米时,将健壮的芽单切,并转到新的 诱导过的培养基上诱导生根,直到基部切口开始分化出根; 7 •炼苗:将发育良好,具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下炼苗5天半 后取出小苗,用清水洗去根部的培养基,在有68%遮荫度的大棚内,移栽到苗床或营养杯中, 浇透水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气35分钟,喷水雾保持空气湿度80%以上,10天 后,可揭去薄膜,按常规管理。
[G016]实施例3:—种牛大力组织培养育苗,包括以下步骤: 1. 采种:选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株,霜降节气过后,种子成熟, 即可采种; 2. 培养无菌苗:将牛大力种子置于0•3%升汞溶液浸泡消毒25分钟,在超净工作台上用 无菌水浸洗3次,每次浸洗10分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下培养; 3 •制备诱导培养基:以MS为基本培养基,加入植物激素苄基嘌呤(BA)进行诱导培养,浓 度为2 • 5mg/L,同时加入3%的蔗糖和0 • S%的琼脂,培养基温度保持30。(:,PH值5 • 8; 4 •丛生芽诱导:当步骤2培养的无菌苗长至8厘米后,切取上部3厘米长的顶芽茎段,接 入步骤3诱导过的培养基培养至有丛生芽形成; 5. 丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达6厘米时,将丛生芽切成2芽一簇,转至另一 步骤3诱导过的培养基培养至每簇增殖至50个丛生芽; 6. 诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至4厘米时,将健壮的芽单切,并转到新的诱 导过的培养基上诱导生根,直到基部切口开始分化出根; 7•炼苗:将发育良好,具有3张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下炼苗6天后取 出小苗,用清水洗去根部的培养基,在有7〇%遮荫度的大棚内,移栽到苗床或营养杯中,浇透 水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气40分钟,喷水雾保持空气湿度80%以上,10天后, 可揭去薄膜,按常规管理。

Claims (2)

1. 一种牛大力组织培养育苗方法,其特征在于包括以下步骤: (1) 采种:选健壮、无病虫害的野生牛大力植株作采种母株,每年霜降节气过后,种子成 熟,即可采种; (2) 培养无菌苗:将牛大力种子置于0 • 3%升汞溶液浸泡消毒20〜25分钟,在超净工作台 上用无菌水浸洗3次,每次浸洗10分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下 培养; (3) 制备诱导培养基:以MS为基本培养基,加入植物激素苄基嘌呤(BA)进行诱导培养, 浓度为1 • 5〜2 • 5mg/L,同时加入3%的蔗糖和0 • 6%〜0 • 8%的琼脂,培养基温度保持28。(:〜30 °C,PH 值 5.5 〜5.8; (4) 丛生芽诱导:当步骤(2)培养的无菌苗长至7〜8厘米后,切取上部2〜3厘米长的顶 芽茎段,接入步骤(3)诱导过的培养基培养到有丛生芽形成; (5) 丛生芽继代增殖:丛生芽诱导至平均高达5〜6厘米时,将丛生芽切成2芽一簇,转至 另一步骤3诱导过的培养基,培养至每簇增殖至45〜50个丛生芽; (6) 诱导生根:当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时,将健壮的芽单切,并转到新 的诱导过的培养基上诱导生根,直到基部切口开始分化出根。
2. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于还包括步骤(7)炼苗:将发育良好,具有2〜3 张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下炼苗5〜6天后取出小苗,用清水洗去根部的培 养基,在有65%〜7〇%遮荫度的大棚内,移栽到苗床或营养杯中,浇透水,并用塑料薄膜覆盖, 每天揭开薄膜换气30〜40分钟,喷水雾保持空气湿度80%以上,10天后,可揭去薄膜,按常规 管理。
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