CN104472353B - 一种建立黄精快繁殖体系的方法 - Google Patents

一种建立黄精快繁殖体系的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104472353B
CN104472353B CN201410674728.2A CN201410674728A CN104472353B CN 104472353 B CN104472353 B CN 104472353B CN 201410674728 A CN201410674728 A CN 201410674728A CN 104472353 B CN104472353 B CN 104472353B
Authority
CN
China
Prior art keywords
rhizoma polygonati
root
seedling
medium
sucrose
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410674728.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104472353A (zh
Inventor
霍丽妮
陈睿
苏钛
李培源
苏炜
王杰鹏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Luxi Pharmaceutical Wang Gu Biotechnology Co., Ltd.
Original Assignee
Guangxi University of Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi University of Chinese Medicine filed Critical Guangxi University of Chinese Medicine
Priority to CN201410674728.2A priority Critical patent/CN104472353B/zh
Publication of CN104472353A publication Critical patent/CN104472353A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104472353B publication Critical patent/CN104472353B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种建立黄精快繁系统的方法,将黄精的顶芽或块茎播种于诱导培养基中诱导发芽,然后将黄精小芽转先后移至继代培养基、生根培养基中继续培养,得到黄精生根组培苗,即可移栽至苗床中进行炼苗。本发明的组织培养方法简便,步骤简单,操作方便,所得黄精种苗植株健壮,生长能力强,适于规模化生产,同时还有效缩短了培养时间,降低了生产成本。

Description

一种建立黄精快繁殖体系的方法
技术领域
本发明涉及植物快速繁殖方法,特别是一种建立黄精快速繁殖体系的方法。
背景技术
滇黄精(Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.)是百合科黄金属植物滇黄精的地下根状茎茎,是药典收载品种,又收载在国家药监局制定的药食两用的名单之中。性甘,平。补气养阴,健脾,润肺,益肾。用于脾胃虚弱,体倦乏力,口干食少,肺虚燥咳,精血不足,内热消渴。历代医书多推崇,【蒙药】功用同多花黄精《蒙药》。【佤药】西格拿:根茎治肺结核,干咳无痰,久病津干口干,倦怠乏力,糖尿病,高血压《滇药录》。【白药】大咳比洗:功用同佤族《滇药录》。【壮药】棵很亚,那闹:根茎治久病身体虚弱,腰痛,干咳,虚汗,目赤《桂药编》。
黄精性味甘甜,食用爽口。其肉质根状茎肥厚,含有大量淀粉、糖分、脂肪、蛋白质、胡萝卜素、维生素和多种其他营养成分,生食、炖服既能充饥,又有健身之用,可令人气力倍增、肌肉充盈、骨髓坚强,对身体十分有益。黄精根状茎形状有如山芋,山区老百姓常把它当作蔬菜食用。由于有良好的药效,加之现在用黄精做原料的中成药以及保健品日益众多,随着生活水平的提高,人民保健意识与日俱增,造成野生滇黄精的量急剧减少,现在野生的较大的黄精已经较少能找到,价格随之水涨床高,现在干片价格已经从两年前的不足20元/kg,上涨到现在的60元/kg,这又刺激了药农采挖的积极性,更加严重的影响到黄精的生存环境。因此对黄精进行育苗研究,势在必行,也是对资源的一种保护。植物组织培养技术,有其不可比拟的优势,其不受外界自然因素的影响,可以不间断的工厂化生产组培苗,可以大规模的扩大种苗繁殖,获得大量的优质的黄精种苗,满足种植的需要。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种建立黄精快繁的方法,有效促进了黄精的生长速度,并大大提高了黄精苗种的质量,获得大量优质的黄精组培苗,本发明有效避免了因不断重复继代造成的组培苗变异,提高了组培苗在后期炼苗过程中的成活率。
本发明提供的技术方案是:
一种建立黄精快繁体系的方法,包括以下步骤:
步骤一、将黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎播种于诱导培养基中,所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,加入2.0-4.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-1.0mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L赤霉素、0.2-2.0mg/L噻苯隆、1.0-4.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、25-40g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂,调整诱导培养基的pH为5.8-6.2;在培养温度为25-32℃,光照强度为2500-3000lux,光照时间为13-15h/d的条件下培养7-15天后,得到黄精小芽;
步骤二、将黄精小芽至于继代培养基中,所述继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入3.0-5.0mg/L玉米素、2.0-4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、0.5-2.0mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L噻苯隆3.0-5.0g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为5.8-6.3;在培养温度为25-32℃,光照强度为2500-3000lux,培养时间为13-15h/d,25-30天获得黄精组培分化苗;
步骤三、将黄精组培分化苗移栽至生根培养基中,所述生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入5-20%香蕉、0.1-2.0g/L吲哚丁酸、0.5-2.0mg/L萘乙酸、2-5%蔗糖及0.2-0.5%活性炭,并调整生根培养基的pH为5.8-6.3;在培养温度为25-32℃,光照强度2500-30001ux,光照时间为13-15h/d的条件下培养30-40天后,把组培苗移到自然光下培养,20-30天后得到黄精生根组培苗;
步骤四、将黄精生根组培苗移栽至苗床,待黄精小苗生长稳定后即可移栽至大田。
优选的是,所述建立黄精快繁体系的方法中,步骤一所述的将黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎播种于诱导培养基之前,先将黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎清洗干净,并用80-85%的乙醇溶液浸泡40-60秒,升汞消毒30-45分钟,最后用无菌水反复清洗。
优选的是,所述建立黄精快繁体系的方法中,步骤四所述的苗床基质包含以下重量份的组分:20-30树皮、10-20杂木、20-30蛭石及10-15珍珠岩。
本发明的有益效果是:本发明中建立黄精快繁体系的方法,黄精小芽的发芽率达95%,经过继代培养后的成苗率96%,转移至生根培养基中,黄精生根组培苗的生根率为95%,最后移入大棚炼苗的成活率为99%,大大提高了黄精的组织培养效率;同时本发明中经过试验成功配制出去适合用于黄精组培的培养基,有效缩短了种苗的培育时间和成本,提高了快繁的速度。每种植物都需要根据特性来定外植体的不同,黄精属于百合科植物,种子量小,而且不易灭菌,相反取根状茎上的顶芽或在节间分开获得带芽的块茎作为外植体来说,可以从每个植株上获得多个外植体,灭菌后容易获得继代苗,快速扩大生产,降低了原料成本,建立黄精快繁体系的方法具有很到的经济效益。
具体实施方式
下面结合对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
一种建立黄精快繁体系的方法,包括以下步骤:
步骤一、将多年生的黄精根状茎上的顶芽或在节间分开获得带芽的块茎清洗干净,用80-85%的乙醇溶液浸泡40-60秒,升汞消毒30-45分钟,最后用无菌水反复清洗,接着切去黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎的边缘,然后播种于诱导培养基中,所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,加入2.0-4.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-1.0mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L赤霉素、0.2-2.0mg/L噻苯隆、1.0-4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、25-40g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂,调整诱导培养基的pH为5.8-6.2;在培养温度为25-32℃,光照强度为2500-3000lux,光照时间为13-15h/d的条件下培养7-15天后,得到黄精小芽;培养基中6-苄氨基嘌呤有效加快植物细胞生长,促进植物生长发育,诱导黄精小芽的分化,促进侧芽萌发生长;萘乙酸为广谱型植物生长调节剂,能有效促进细胞分裂与扩大,诱导形成不定根;赤霉素为一种广泛存在的植物激素,有效刺激叶和芽的生长;噻苯隆是一种新型高效的细胞分裂素,能很好的促进黄精的芽组织分化;2,4-二氯苯氧乙酸是一种具有代表性的合成植物生长素;蔗糖为能源物质,为植物组织培养提供碳源和能源,还能很好的维持培养基内的低渗环境,同时在一定程度上还能减少微生物的污染,提高黄精的无菌环境质量;采用的诱导培养基大大提高了黄精的愈伤组织分化能力。黄精的发芽率为95%。
步骤二、将黄精小芽至于继代培养基中,所述继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入3.0-5.0mg/L玉米素、2.0-4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、0.5-2.0mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L噻苯隆、3.0-5.0g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为5.8-6.3;在培养温度为25-32℃,光照强度为2500-3000lux,培养时间为13-15h/d,25-30天获得2-4cm高度的黄精组培分化苗;培养基中玉米素为天然的细胞分裂素,能有效促进愈伤组织发芽,促进黄精小芽生长;2,4-二氯苯氧乙酸是一种苯氧类植物生长调节剂,具有与生长素类似的生理效应,有效促进黄精小芽繁殖和生长;萘乙酸为广谱型植物生长调节剂,能有效促进细胞分裂与扩大,诱导形成不定根;噻苯隆是一种新型高效的细胞分裂素,能很好的促进黄精的芽组织分化;蔗糖为能源物质,为植物组织培养提供碳源和能源,还能很好的维持培养基内的低渗环境,同时在一定程度上还能减少微生物的污染,提高黄精的无菌环境质量;继代培养基中添加多种有效促进黄精小芽生长的营养物质,为黄精小芽提供充足的营养成分,有效减少或避免多次重复继代,大大降低了黄精小芽变异的发生。本方法所得黄精组培分化苗的成苗率为96%。
步骤三、将黄精组培分化苗移栽至生根培养基中,所述生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入5-20%打碎的香蕉、0.1-2.0g/L吲哚丁酸、0.5-2.0mg/L萘乙酸、2-5%蔗糖及0.2-0.5%活性炭,并调整生根培养基的pH为5.8-6.3;在培养温度为25-32℃,光照强度2500-30001ux,光照时间为13-15h/d的条件下培养30-40天后,把组培苗移到自然光下培养,20-30天后得到3-4条根的黄精生根组培苗;其中生根培养基中,加入打碎的香蕉,有利于促进黄精组培分化苗的生根,同时为其提供营养物质;吲哚丁酸主要用于插条生根,可以诱导根原体的形成,促进细胞分化和分裂,有利于新根生成和维管束系统的分化,促进不定根的形成;萘乙酸为广谱型植物生长调节剂,能有效促进细胞分裂与扩大,诱导形成不定根;活性炭的加入有助于吸附一些有害的代谢物质,同时活性炭的加入使得生根培养基变黑,可模仿黑暗条件,有利于组培分化苗的生根;黄精组培分化苗生根后放在自然光下照射,为组培分化苗提供与户外环境相似的培养环境,提高了黄精组培分化苗在后期炼苗过程中的成活率,其成活率达95%。
步骤四、将完整带根的黄精生根组培苗植株根部上的培养基清洗干净,晾干水汽,然后再移栽至苗床上,所述的苗床基质包含以下重量份的组分:20-30树皮、10-20杂木、20-30蛭石及10-15珍珠岩;待黄精小苗生长稳定,长出新的根和芽即可移栽至大田,在大田栽培期间要适当遮阴,控制遮阴度为75%,间隔浇水,温度为28℃,超过28℃要水帘降温,防止根腐病发生。
实施例1
一种建立黄精快繁体系的方法,包括以下步骤:
步骤一、将多年生的黄精根状茎上的顶芽或在节间分开获得带芽的块茎清洗干净,用85%的乙醇溶液浸泡40秒,升汞消毒35分钟,最后用无菌水反复清洗5遍,接着切去黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎的边缘,然后播种于诱导培养基中,所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,加入2.0mg/L6-苄基腺嘌呤、0.1mg/L萘乙酸、3.0mg/L赤霉素、2.0mg/L噻苯隆、1.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及3.0g/L琼脂,调整诱导培养基的pH为5.9;在培养温度为29℃,光照强度为2600lux,光照时间为14h/d的条件下培养10天后,得到黄精小芽;
步骤二、将黄精小芽至于继代培养基中,所述继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入4.0mg/L玉米素、4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、2.0mg/L萘乙酸、2.0mg/L噻苯隆、5.0g/L蔗糖及3.0g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为6.0;在培养温度为30℃,光照强度为2600lux,培养时间为14h/d,28天获得2-4cm高度的黄精组培分化苗;
步骤三、将黄精组培分化苗移栽至生根培养基中,所述生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入15%香蕉、1.5g/L吲哚丁酸、0.5mg/L萘乙酸、5%蔗糖及0.3%活性炭,并调整生根培养基的pH为6.0;在培养温度为30℃,光照强度2600lux,光照时间为14h/d的条件下培养30天后,把组培苗移到自然光下培养,20天后得到3-4条根的黄精生根组培苗;
步骤四、将完整带根的黄精生根组培苗植株根部上的培养基清洗干净,晾干水汽,然后再移栽至苗床上,所述的苗床基质包含以下重量份的组分:20g树皮、20g杂木、30g蛭石及10g珍珠岩;待黄精小苗生长稳定,长出新的根和芽即可移栽至大田,在大田栽培期间要适当遮阴,控制遮阴度为75%,间隔浇水,温度为28℃,超过28℃要水帘降温,防止根腐病发生。
实施例2
一种建立黄精快繁体系的方法,包括以下步骤:
步骤一、将多年生的黄精根状茎上的顶芽或在节间分开获得带芽的块茎清洗干净,用80%的乙醇溶液浸泡60秒,升汞消毒45分钟,最后用无菌水反复清洗6遍,接着切去黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎的边缘,然后播种于诱导培养基中,所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,加入3.0mg/L6-苄基腺嘌呤、0.5mg/L萘乙酸、2.0mg/L赤霉素、0.5mg/L噻苯隆、3.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及4.0g/L琼脂,调整诱导培养基的pH为6.3;在培养温度为28℃,光照强度为2800lux,光照时间为15h/d的条件下培养14天后,得到黄精小芽;
步骤二、将黄精小芽至于继代培养基中,所述继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入4.0mg/L玉米素、4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、1.0mg/L萘乙酸、1.0mg/L噻苯隆、3.0g/L蔗糖及5.0g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为6.2;在培养温度为30℃,光照强度为2800lux,培养时间为15h/d,25天获得2-4cm高度的黄精组培分化苗;
步骤三、将黄精组培分化苗移栽至生根培养基中,所述生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入15%香蕉、0.8g/L吲哚丁酸、1.0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0.4%活性炭,并调整生根培养基的pH为5.9;在培养温度为30℃,光照强度2800lux,光照时间为15h/d的条件下培养30天后,把组培苗移到自然光下培养,30天后得到3-4条根的黄精生根组培苗;
步骤四、将完整带根的黄精生根组培苗植株根部上的培养基清洗干净,晾干水汽,然后再移栽至苗床上,所述的苗床基质包含以下重量份的组分:20g树皮、15g杂木、25g蛭石及10g珍珠岩;待黄精小苗生长稳定,长出新的根和芽即可移栽至大田,在大田栽培期间要适当遮阴,控制遮阴度为75%,间隔浇水,温度为28℃,超过28℃要水帘降温,防止根腐病发生。
实施例3
一种建立黄精快繁体系的方法,包括以下步骤:
步骤一、将多年生的黄精根状茎上的顶芽或在节间分开获得带芽的块茎清洗干净,用85%的乙醇溶液浸泡60秒,升汞消毒45分钟,最后用无菌水反复清洗7遍,接着切去黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎的边缘,然后播种于诱导培养基中,所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,加入4.0mg/L6-苄基腺嘌呤、0.1mg/L萘乙酸、3.0mg/L赤霉素、1.0mg/L噻苯隆、1.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、30g/L蔗糖及5.0g/L琼脂,调整诱导培养基的pH为6.0;在培养温度为30℃,光照强度为3000lux,光照时间为13h/d的条件下培养7-15天后,得到黄精小芽;
步骤二、将黄精小芽至于继代培养基中,所述继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入5.0mg/L玉米素、3.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、1.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L噻苯隆、5.0g/L蔗糖及5.0g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为6.2;在培养温度为32℃,光照强度为3000lux,培养时间为14h/d,25天获得2-4cm高度的黄精组培分化苗;
步骤三、将黄精组培分化苗移栽至生根培养基中,所述生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入20%打碎的香蕉、2.0g/L吲哚丁酸、2.0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0.5%活性炭,并调整生根培养基的pH为6.3;在培养温度为32℃,光照强度3000lux,光照时间为13h/d的条件下培养30天后,把组培苗移到自然光下培养,20天后得到3-4条根的黄精生根组培苗;
步骤四、将完整带根的黄精生根组培苗植株根部上的培养基清洗干净,晾干水汽,然后再移栽至苗床上,所述的苗床基质包含以下重量份的组分:30g树皮、15g杂木、25g蛭石及15g珍珠岩;待黄精小苗生长稳定,长出新的根和芽即可移栽至大田,在大田栽培期间要适当遮阴,控制遮阴度为75%,间隔浇水,温度为28℃,超过28℃要水帘降温,防止根腐病发生。
试验比较
采用黄精根状茎上的顶芽或在节间分开获得带芽的块茎作为组培材料,均是在培养条件为:在培养温度为30℃,光照强度为2800lux,光照时间为14h/d,pH为6.2的条件下进行培养,其中,
(1)组1为本发明所述建立黄精快繁体系的方法,培养基分别为:
诱导培养基:以MS-H为基本培养基,加入4.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、1.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L赤霉素、2.0mg/L噻苯隆、3.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入5.0mg/L玉米素、4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、2.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L噻苯隆、5.0g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入20%香蕉、2.0g/L吲哚丁酸、1.0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0.5%活性炭;
(2)组2的培养基分别为:
诱导培养基:以MS-H为基本培养基,加入4.0mg/L 6.苄基腺嘌呤、1.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L赤霉素、3.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及6.0g/L琼旨;
继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入5.0mg/L玉米素、4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、2.0mg/L萘乙酸、5.0g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入20%香蕉、2.0g/L吲哚丁酸、1.0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0.5%活性炭;
(3)组3的培养基分别为:
诱导培养基:以MS-H为基本培养基,加入4.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、1.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L赤霉素、2.0mg/L噻苯隆、40g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入5.0mg/L玉米素、、2.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L噻苯隆、5.0g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,20%香蕉、2.0g/L吲哚丁酸、1.0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0.5%活性炭;
(4)组4的培养基分别为:
诱导培养基:以MS-H为基本培养基,加入4.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、3.0mg/L赤霉素、2.0mg/L噻苯隆、3.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入5.0mg/L玉米素、4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、3.0mg/L噻苯隆、5.0g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入20%香蕉、2.0g/L吲哚丁酸、3%蔗糖及0.5%活性炭;
(5)组5的培养基分别为:
以MS-H为基本培养基,加入1.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L赤霉素、2.0mg/L噻苯隆、3.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、40g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、2.0mg/L萘乙酸、3.0mg/L噻苯隆、5.0g/L蔗糖及6.0g/L琼脂;
生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入2.0g/L吲哚丁酸、1.0mg/L萘乙酸、3%蔗糖及0.5%活性炭;
(6)组6的培养基分别为:
诱导培养基:以MS-H为基本培养基,25-40g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂;
继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入3.0-5.0g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂;
生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入2-5%蔗糖;
得到结果如表1所示:
表1
从表1中可以看出,组1的每一个阶段的培育效果均优于其他组,组1的培养基产生的效果最好,生产周期短最短,其他组的培养基均分别缺少了某一些原料组分,得到的组培苗质量明显低于组1,组1至组6的培养周期逐渐递增,说明培养基中每缺少一种组分原料,都会影响黄精组培苗的生长时间以及特性,由此可以得出,组1的培养基能在保持原植物的优良特性、不变异情况下,增值率高,生长快的优良培养基。
本发明建立黄精快繁体系的方法大大满足了黄精种苗的市场需求,同时方法繁殖出大量优质的组培苗,避免因为不断的重复继代造成组培苗变异,后期通过自然光培养后,组培苗生长健壮,玻璃化变异降低。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节。

Claims (3)

1.一种建立黄精快繁体系的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、将黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎播种于诱导培养基中,所述诱导培养基为:以MS-H为基本培养基,加入2.0-4.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-1.0mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L赤霉素、0.2-2.0mg/L噻苯隆、1.0-4.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸、25-40g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂,调整诱导培养基的pH为5.8-6.2;在培养温度为25-32℃,光照强度为2500-3000lux,光照时间为13-15h/d的条件下培养7-15天后,得到黄精小芽;
步骤二、将黄精小芽置于继代培养基中,所述继代培养基为:以white培养基为基本培养基,加入3.0-5.0mg/L玉米素、2.0-4.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、0.5-2.0mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L噻苯隆、3.0-5.0g/L蔗糖及3.0-6.0g/L琼脂,并调整继代培养基的pH值为5.8-6.3;在培养温度为25-32℃,光照强度为2500-3000lux,培养时间为13-15h/d,25-30天获得黄精组培分化苗;
步骤三、将黄精组培分化苗移栽至生根培养基中,所述生根培养基为:以1/2MS为基本培养基,加入5-20%香蕉、0.1-2.0g/L吲哚丁酸、0.5-2.0mg/L萘乙酸、2-5%蔗糖及0.2-0.5%活性炭,并调整生根培养基的pH为5.8-6.3;在培养温度为25-32℃,光照强度2500-3000lux,光照时间为13-15h/d的条件下培养30-40天后,把组培苗移到自然光下培养,20-30天后得到黄精生根组培苗;
步骤四、将黄精生根组培苗移栽至苗床,待黄精小苗生长稳定后即可移栽至大田。
2.如权利要求1所述的建立黄精快繁体系的方法,其特征在于,步骤一所述的将黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎播种于诱导培养基之前,先将黄精根状茎上的顶芽或带芽的块茎清洗干净,并用80-85%的乙醇溶液浸泡 40-60秒,升汞消毒30-45分钟,最后用无菌水反复清洗。
3.如权利要求1所述的建立黄精快繁体系的方法,其特征在于,步骤四所述的苗床基质包含以下重量份的组分:20-30树皮、10-20杂木、20-30蛭石及10-15珍珠岩。
CN201410674728.2A 2014-11-21 2014-11-21 一种建立黄精快繁殖体系的方法 Active CN104472353B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410674728.2A CN104472353B (zh) 2014-11-21 2014-11-21 一种建立黄精快繁殖体系的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410674728.2A CN104472353B (zh) 2014-11-21 2014-11-21 一种建立黄精快繁殖体系的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104472353A CN104472353A (zh) 2015-04-01
CN104472353B true CN104472353B (zh) 2016-08-17

Family

ID=52747079

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410674728.2A Active CN104472353B (zh) 2014-11-21 2014-11-21 一种建立黄精快繁殖体系的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104472353B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109463238A (zh) * 2018-12-19 2019-03-15 湖南新汇制药股份有限公司 一种黄精块茎的培育方法

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105557513A (zh) * 2015-12-11 2016-05-11 广西壮族自治区药用植物园 一种姜黄组织培养快速繁殖方法
CN105580734B (zh) * 2016-01-14 2017-09-15 遵义市龙驰生物科技有限公司 一种黄精离体根茎的高效诱导方法
CN109302983B (zh) * 2017-07-26 2021-09-07 湖南省林业科学院 一种以顶芽为外植体的多花黄精快速繁殖方法
CN109566371B (zh) * 2018-12-05 2021-05-11 湖南新汇制药股份有限公司 一种黄精种子的培育方法
CN111837953A (zh) * 2020-07-22 2020-10-30 国药种业有限公司 一种黄精种苗的快速繁育方法
CN112806259A (zh) * 2021-01-20 2021-05-18 云南帅豪农牧科技有限公司 一种高抗病性黄精组培育苗方法
CN112998015A (zh) * 2021-03-04 2021-06-22 广东丰绿源生物医药科技有限公司 一种提高菊叶薯蓣块茎中皂素含量的生长调节剂复配制剂及其应用
CN115918544B (zh) * 2023-01-10 2023-09-15 中南林业科技大学 一种多花黄精组织培养方法
CN116530415B (zh) * 2023-05-30 2024-04-02 贵州省植物园 一种可循环操作的多花黄精组培繁育方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102550409A (zh) * 2011-12-29 2012-07-11 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 黄精组培繁殖方法
CN102771395A (zh) * 2012-08-13 2012-11-14 安徽农业大学 一种黄精的组织培养方法
CN103535281A (zh) * 2013-11-01 2014-01-29 重庆文理学院 黄精根茎的组织培养基及离体再生方法
CN103858769A (zh) * 2014-04-03 2014-06-18 张旺凡 一种黄精的快速繁殖技术方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010003876A (ko) * 1999-06-25 2001-01-15 김순택 액정 반도체 마이크로 디스플레이

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102550409A (zh) * 2011-12-29 2012-07-11 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 黄精组培繁殖方法
CN102771395A (zh) * 2012-08-13 2012-11-14 安徽农业大学 一种黄精的组织培养方法
CN103535281A (zh) * 2013-11-01 2014-01-29 重庆文理学院 黄精根茎的组织培养基及离体再生方法
CN103858769A (zh) * 2014-04-03 2014-06-18 张旺凡 一种黄精的快速繁殖技术方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
In vitro micropropagation in Polygonatum verticillatum (L.) All. an important threatened medicinal herb of Northern India;Shivani Bisht,et al.;《Physiol Mol Biol Plants》;20121231;第18卷(第1期);第89-93页 *
多花黄精组培快繁技术研究;周建金灯;《福建农业科技》;20121231(第9期);第59-61页,尤其是摘要,第59页右栏第3段,第60页左栏第2-5段,第61页右栏第3段 *
泰山野生黄精的组培快繁技术研究;牟小翎等;《山东农业科学》;20101231;第1卷;第12-13,17页 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109463238A (zh) * 2018-12-19 2019-03-15 湖南新汇制药股份有限公司 一种黄精块茎的培育方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN104472353A (zh) 2015-04-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104472353B (zh) 一种建立黄精快繁殖体系的方法
CN103141260B (zh) 一种毛竹林下生态套种草珊瑚的方法
CN104206137B (zh) 茭白的高产早熟移栽种植管理方法
CN102499080B (zh) 一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法
CN102499088B (zh) 一种利用广西金线莲蒴果快速繁育其种苗的方法
CN110786227B (zh) 仿野生附树种植铁皮石斛的方法
CN105284314A (zh) 一种百香果脱毒苗的培育方法
CN106688893A (zh) 一种牛大力组织培养育苗方法
CN105191659A (zh) 一种苦瓜的种植方法
CN102187813A (zh) 蓝莓组织培养的方法及其专用培养基
CN106550753A (zh) 一种丝瓜高产种植方法
CN106172016A (zh) 一种五加皮组培快繁方法
CN103004595A (zh) 一种人参果的嫩枝扦插繁育方法
CN105638465B (zh) 一种草莓的组培快繁方法
CN106386507A (zh) 一种霍山石斛种苗的快速组培繁殖方法
CN105706872A (zh) 白芨种子直播自然繁殖育苗方法
Anburaj et al. In vitro regeneration of Cleome viscosa–an important medicinal herb
CN112119913A (zh) 一种甘薯的脱毒扩繁方法
CN107242134A (zh) 无土栽培白豌豆芽苗菜的方法
CN104604680B (zh) 能够促进白芨种子萌发和幼苗生长的培养基及其配方和制备方法
CN106665364B (zh) 龙牙百合杂交后代鳞茎膨大发育及生根的方法
CN106359090A (zh) 一种有机铁皮石斛的培育种植方法
CN113317205B (zh) 一种阳春砂利用基茎丛生芽和“节繁殖”培养的高效人工育苗方法
CN105850745A (zh) 一种枸杞花药诱导培养基及花培育种方法
CN107155881B (zh) 一种适于多种类型植物快速繁殖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20200420

Address after: 661400 Xiaojiang Shangzhai, Yongning Township, Luxi County, Honghe Hani and Yi Autonomous Prefecture, Yunnan Province

Patentee after: Luxi Pharmaceutical Wang Gu Biotechnology Co., Ltd.

Address before: 13 No. 530213 the Guangxi Zhuang Autonomous Region Nanning Qingxiu District five Avenue

Patentee before: Guangxi University of Chinese Medicine