CN104813938A - 一种三七组织培养育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种三七组织培养育苗方法，属于中药材繁殖栽培技术领域，有效解决了三七育苗遗传性状不稳定，成苗率低，移栽后的三七生长缓慢，易染病，产量不高的问题，具体包括采种、培养无菌苗、诱导培养基、诱导丛生芽、丛生芽继代增殖、诱导生根、试管苗的移栽等具体步骤，其有益效果是：具有取材方便，丛生芽诱导率达60%～85%，成苗达90%以上，可以满足人工大量栽培的需要，而且培育出的三七苗能保持母体优良性状，移栽后生长快，产量高，移栽后2～3年可收获，比传统栽培时间缩短1年左右，每亩产田七干品650千克，在同等管理条件下比传统栽培产量提高30%。
Description
技术领域
本发明涉及中草药材栽培技术，具体涉及一种三七育苗的方法，尤其是三七的组织培养育苗方法，属于中药材繁殖栽培技术领域。
背景技术
三七，拉丁名为：Panax notoginseng (Burk.)F.H.Chen ex G.Y.WuetK.M.Feng，也称田七，为五加科多年生草本植物。以根、根状茎入药，生品能散瘀止血，消肿镇痛，治咯血、吐血、衄血、便血、子宫脱垂、胸腹刺痛、外伤出血、跌打肿痛；熟品能补血活血，治失血、贫血。花、叶也能作药用，花有清热、平肝、降压的作用。据现代临床新用，三七亦能治疗重症肝炎、高血脂病、冠心病、上消化道出血、颅脑外伤、眼前房出血，并有防癌抗癌作用。
三七是名贵中药材，也是我国传统常用中药材，除供国内药用外，还是我国大宗出口创汇产品之一，广泛应用于医药工业、日用化工、食品工业和美容化妆品工业，现全国年需要量约420万千克，还出口180万千克，随着医药卫生事业的发展和人们生活水平的提高，三七的需要量还要增加，可大力发展三七种植。而开展三七人工种植，首先要解决三七育苗问题，现在人们种植三七主要用种子繁殖，用实生苗栽培，它的缺陷是遗传性状不稳定，成苗率低，移栽后的三七生长缓慢，易染病，产量不高。
发明内容
发明目的：本发明的目的是针对现有技术中三七栽培出现生长缓慢，易染病，产量不高的问题，提供一种组织培养育苗方法，提高三七育苗成苗率，而且能保持母体优良性状，移栽后生长快，产量高，可大面积进行三七人工栽培。
技术方案：本发明所述的一种三七组织培养育苗方法，具体包括以下步骤：
1. 采种：选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种。
2.无菌苗的培养：将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3～5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养。
3.诱导培养基：以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤（BA）和奈乙酸（NAA），苄基嘌呤（BA）浓度为1.0～2.5mg/L，优选为2.0mg/L，奈乙酸（NAA）浓度为0.1～0.3mg/L，优选为0.2mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24℃～26℃，PH值5.9～6.2。
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至5～6厘米后，切取上部2.6～2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成。
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导50天后，平均高达3.5～4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天～30天后，每簇增殖至45～50个丛生芽。
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根。
7.试管苗的移栽：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3～4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%～80%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
有益效果：本发明与现有技术相比，其有益效果是：
本发明的三七育苗方法，取材方便，丛生芽诱导率达60%～85%，成苗达90%以上，可以满足人工大量栽培的需要，而且培育出的三七苗能保持母体优良性状，移栽后生长快，产量高，移栽后2～3年可收获，比传统栽培时间缩短1年左右，每亩产田七干品650千克，在同等管理条件下比传统栽培产量提高30%。
具体实施方式
下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
实施例1：一种三七组织培养育苗，其具体步骤如下：
1. 采种：选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2.无菌苗的培养：将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗3次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
3.诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤（BA）和奈乙酸（NAA），苄基嘌呤（BA）浓度为1.0/L，奈乙酸（NAA）浓度为0.1mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24℃～26℃，PH值5.9～6.2；
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至5～6厘米后，切取上部2.6～2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为50%；
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导50天后，平均高达3.5～4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天～30天后，每簇增殖至45～50个丛生芽；
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根；
7.试管苗的移栽：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3～4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
实施例2：一种三七组织培养育苗，其具体步骤如下：
1. 采种：选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2.无菌苗的培养：将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗4次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
3.诱导培养基：以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤（BA）和奈乙酸（NAA），苄基嘌呤（BA）浓度为2.0mg/L，奈乙酸（NAA）浓度为0.2mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24℃～26℃，PH值5.9～6.2；
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至5～6厘米后，切取上部2.6～2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为85%；
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导50天后，平均高达3.5～4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天～30天后，每簇增殖至45～50个丛生芽；
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根；
7.试管苗的移栽：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3～4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有77%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
实施例3：一种三七组织培养育苗，其具体步骤如下：
1. 采种：选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
2.无菌苗的培养：将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上用无菌水浸洗5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
3.诱导培养基：以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤（BA）和奈乙酸（NAA），苄基嘌呤（BA）浓度为2.5mg/L，奈乙酸（NAA）浓度为0.3mg/L，同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24℃～26℃，PH值5.9～6.2；
4.丛生芽诱导：当步骤2培养的无菌苗长至5～6厘米后，切取上部2.6～2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为67%；
5.丛生芽继代增殖：丛生芽诱导50天后，平均高达3.5～4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天～30天后，每簇增殖至45～50个丛生芽；
6.诱导生根：当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根；
7.试管苗的移栽：将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3～4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有80%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
Claims (3)
1.一种三七组织培养育苗方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）采种：选3年生、健壮、无病虫害的三七植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成熟，即可采种；
（2）无菌苗的培养：将三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒，后在超净工作台上用无菌水浸洗3～5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培养；
（3）诱导培养基：以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌呤（BA）和奈乙酸（NAA），同时加入2.5%的蔗糖和0.7%的琼脂，培养基温度保持24℃～26℃，PH值5.9～6.2；
（4）丛生芽诱导，当无菌苗长至5～6厘米后，切取上部2.6～2.9厘米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养丛生芽；
（5）丛生芽继代增殖，丛生芽诱导后，平均高达3.5～4.5厘米时，将丛生芽切成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基进行继代增殖；
（6）诱导生根，当继代增殖的丛生芽有70%长至3～4厘米时，将健壮的芽单切，并转到新的诱导过的培养基上诱导生根；
（7）试管苗的移栽，将发育良好，具有2～3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗3～4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%～80%遮荫度的大棚内，移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
2.根据权利要求1所述的三七组织培养育苗方法，其特征在于所述的步骤（2）三七种子置于0.2%升汞溶液浸泡消毒的时间为15分钟。
3.根据权利要求1所述的三七组织培养育苗方法，其特征在于所述的步骤（3）的植物激素苄基嘌呤（BA）浓度为1.0～2.5mg/L，奈乙酸（NAA）浓度为0.1～0.3mg/L。
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