CN104041417A - 一种巴戟天组织培养育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明针对巴戟天人工繁育难度大，成苗率低的问题，提供一种组织培养育苗方法，具体包括采种、培养无菌苗、诱导培养基、诱导丛生芽、丛生芽继代增殖、诱导生根、试管苗的移栽等具体步骤，具有取材方便，丛生芽诱导率达50%～80%，成苗达85%以上，能保持巴戟天药用成分，移栽后生长快，可以满足人工大面积栽培对巴戟天苗的需要的有益效果。
Description
技术领域
[0001] 本发明涉及中草药材栽培技术，具体涉及一种巴戟天育苗的方法，尤其是巴戟天 的组织培养育苗方法，属于中药材栽培技术领域。
背景技术
[0002] 巴戟天(学名：Morinda officinalis How),为双子叶植物茜草科（Rubiaceae)，缠绕 藤本，叶对生，膜质，长圆形，长3〜13cm，宽1. 5〜5cm，前端短渐尖，基部钝形或圆形，主要 分布于广东、广西，属药用植物。
[0003] 巴戟天的药用部位是根，根呈扁圆柱形，略弯曲，主治阳痿遗精、宫冷不孕、月经不 调、少腹冷痛、风湿痹痛、筋骨痿软。
[0004] 除了作为传统的中药材使用外，医药工业还以巴戟天作为原料，大量研制开发用 于补肾壮阳，强筋骨的中成药产品：如人参鹿茸丸、全鹿大补丸、杜仲地黄丸、还少丸、龟鹿 滋肾丸、参茸丸、安肾丸、固本丸等，因此巴戟天的需求量越来越大，年需求量超过60万公 斤，并以每年10% -15%的速率增长，但巴戟天的地域分布范围相当有限，在自然条件下，巴 戟天开花结荚期的病虫害严重、种子成熟时容易自然脱落，因此自然繁殖系数极低，且为了 满足市场需求，获得经济利益，人们大量采挖野生巴戟天资源，致使野生巴戟天资源濒临灭 绝。
[0005] 为满足需要，人们不得不发展人工栽培技术，而开展巴戟天人工栽培，首先要解决 巴戟天育苗问题。而巴戟天不仅自然繁殖系数低，通过采收种子进行人工繁殖难度也很大， 成苗率不到20%，几乎失败。
发明内容
[0006] 发明目的：本发明的目的是针对现有技术中巴戟天人工繁育难度大，成苗率低的 问题，提供一种组织培养育苗方法，提高巴戟天育苗成苗率，而且能保持巴戟天药用成分， 移栽后生长快，可大面积进行巴戟天人工栽培。
[0007] 技术方案：本发明所述的一种巴戟天组织培养育苗方法，具体包括以下步骤： 1.采种，选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成 熟，即可采种。
[0008] 2.无菌苗的培养，将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作 台上用无菌水浸洗5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照 下培养。
[0009] 3.诱导培养基，以MS为基本培养基，加入不同浓度的植物激素进行诱导培养， 植物激素用苄基嘌呤（BA)和奈乙酸（NAA)，苄基嘌呤（BA)浓度为1. 0〜2. 5mg/L，优选为 2. Omg/L，奈乙酸（NAA)浓度为0· 1〜0· 3mg/L，优选为0· 2mg/L，同时加入2. 5%的鹿糖和 〇. 7%的琼脂，培养基温度保持24°C〜26°C，PH值5. 9〜6. 2。
[0010] 4.丛生芽诱导，当步骤2培养的无菌苗长至5〜6厘米后，切取上部2. 6〜2. 9厘 米长的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成。
[0011] 5.丛生芽继代增殖，丛生芽诱导50天后，平均高达3. 5〜4. 5厘米时，将丛生芽切 成3芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天〜30天后，每簇增殖至45〜50个丛生芽。
[0012] 6.诱导生根，当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时，将健壮的芽单切，并 转到新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根。
[0013] 7.试管苗的移栽，将发育良好，具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室 温下炼苗3〜4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%〜80%遮荫度的大棚内， 移栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保 持空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
[0014] 有益效果：本发明与现有技术相比，其有益效果是： 本发明的巴戟天育苗方法，取材方便，丛生芽诱导率达50%〜80%，成苗达85%以上，可 以满足人工大量栽培的需要，而且经过薄层色谱技术鉴定，本方法培养出的试管苗具有生 物合成药用有效成分甲基异茜草素、大黄素甲醚、水晶兰甙和四乙酰车叶草甙的能力。
[0015]
具体实施方式 下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
[0016] 实施例1 : 一种巴戟天组织培养育苗，其具体步骤如下： 1. 采种，选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成 熟，即可采种； 2. 无菌苗的培养，将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上 用无菌水浸洗5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培 养； 3. 诱导培养基，以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基嘌 呤（BA)和奈乙酸（NAA)，苄基嘌呤（BA)浓度为1.0/L，奈乙酸（NAA)浓度为0. lmg/L，同时加 入2. 5%的蔗糖和0. 7%的琼脂，培养基温度保持24°C〜26°C，PH值5. 9〜6. 2 ; 4. 丛生芽诱导，当步骤2培养的无菌苗长至5〜6厘米后，切取上部2. 6〜2. 9厘米长 的顶芽茎段，接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成，丛生芽诱导率为50% ; 5. 丛生芽继代增殖，丛生芽诱导50天后，平均高达3. 5〜4. 5厘米时，将丛生芽切成3 芽一簇，转至另一诱导过的培养基，25天〜30天后，每簇增殖至45〜50个丛生芽； 6. 诱导生根，当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时，将健壮的芽单切，并转到 新的诱导过的培养基上诱导生根，18天后基部切口开始分化出根； 7. 试管苗的移栽，将发育良好，具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下 炼苗3〜4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%〜80%遮荫度的大棚内，移 栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持 空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
[0017] 实施例2 :-种巴戟天组织培养育苗，其具体步骤如下： 1. 采种，选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成 熟，即可采种； 2. 无菌苗的培养，将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分钟，在超净工作台上 用无菌水浸洗5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培
Claims (3)
1. 一种巴戟天组织培养育苗方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 采种，选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株，每年霜降节气过后，种子成 熟，即可采种； (2) 无菌苗的培养，将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒，后在超净工作台上用 无菌水浸洗5次，每次浸洗3分钟，然后将种子播种于培养基，在室内自然散射光照下培 养； (3) 诱导培养基，以MS为基本培养基，加入植物激素进行诱导培养，植物激素用苄基 嘌呤（BA)和奈乙酸（NAA)，同时加入2. 5%的蔗糖和0. 7%的琼脂，培养基温度保持24°C〜 26°C，PH 值 5. 9 〜6. 2 ; (4) 丛生芽诱导，当无菌苗长至5〜6厘米后，切取上部2. 6〜2. 9厘米长的顶芽茎段， 接入诱导过的培养基培养丛生芽； (5) 丛生芽继代增殖，丛生芽诱导后，平均高达3. 5〜4. 5厘米时，将丛生芽切成3芽一 簇，转至另一诱导过的培养基进行继代增殖； (6) 诱导生根，当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时，将健壮的芽单切，并转到 新的诱导过的培养基上诱导生根； (7) 试管苗的移栽，将发育良好，具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下 炼苗3〜4天后取出小苗，用清水洗去根部了培养基，在有75%〜80%遮荫度的大棚内，移 栽到苗床或营养杯中，浇透水，并用塑料薄膜覆盖，每天揭开薄膜换气45分钟，喷水雾保持 空气湿度85%以上，8天后，可揭去薄膜，按常规管理。
2. 根据权利要求1所述的巴戟天组织培养育苗方法，其特征在于所述的步骤（2)巴戟 天种子置于〇. 2%升汞溶液浸泡消毒的时间为15分钟。
3. 根据权利要求1所述的巴戟天组织培养育苗方法，其特征在于所述的步骤（3)的植 物激素苄基嘌呤（BA)浓度为1. 0〜2. 5mg/L，奈乙酸（NAA)浓度为0. 1〜0. 3mg/L。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20140917 |