CN104041417A - 一种巴戟天组织培养育苗方法 - Google Patents

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Abstract

本发明针对巴戟天人工繁育难度大,成苗率低的问题,提供一种组织培养育苗方法,具体包括采种、培养无菌苗、诱导培养基、诱导丛生芽、丛生芽继代增殖、诱导生根、试管苗的移栽等具体步骤,具有取材方便,丛生芽诱导率达50%~80%,成苗达85%以上,能保持巴戟天药用成分,移栽后生长快,可以满足人工大面积栽培对巴戟天苗的需要的有益效果。

Description

一种巴戟天组织培养育苗方法
技术领域
[0001] 本发明涉及中草药材栽培技术,具体涉及一种巴戟天育苗的方法,尤其是巴戟天 的组织培养育苗方法,属于中药材栽培技术领域。
背景技术
[0002] 巴戟天(学名:Morinda officinalis How),为双子叶植物茜草科(Rubiaceae),缠绕 藤本,叶对生,膜质,长圆形,长3〜13cm,宽1. 5〜5cm,前端短渐尖,基部钝形或圆形,主要 分布于广东、广西,属药用植物。
[0003] 巴戟天的药用部位是根,根呈扁圆柱形,略弯曲,主治阳痿遗精、宫冷不孕、月经不 调、少腹冷痛、风湿痹痛、筋骨痿软。
[0004] 除了作为传统的中药材使用外,医药工业还以巴戟天作为原料,大量研制开发用 于补肾壮阳,强筋骨的中成药产品:如人参鹿茸丸、全鹿大补丸、杜仲地黄丸、还少丸、龟鹿 滋肾丸、参茸丸、安肾丸、固本丸等,因此巴戟天的需求量越来越大,年需求量超过60万公 斤,并以每年10% -15%的速率增长,但巴戟天的地域分布范围相当有限,在自然条件下,巴 戟天开花结荚期的病虫害严重、种子成熟时容易自然脱落,因此自然繁殖系数极低,且为了 满足市场需求,获得经济利益,人们大量采挖野生巴戟天资源,致使野生巴戟天资源濒临灭 绝。
[0005] 为满足需要,人们不得不发展人工栽培技术,而开展巴戟天人工栽培,首先要解决 巴戟天育苗问题。而巴戟天不仅自然繁殖系数低,通过采收种子进行人工繁殖难度也很大, 成苗率不到20%,几乎失败。
发明内容
[0006] 发明目的:本发明的目的是针对现有技术中巴戟天人工繁育难度大,成苗率低的 问题,提供一种组织培养育苗方法,提高巴戟天育苗成苗率,而且能保持巴戟天药用成分, 移栽后生长快,可大面积进行巴戟天人工栽培。
[0007] 技术方案:本发明所述的一种巴戟天组织培养育苗方法,具体包括以下步骤: 1.采种,选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株,每年霜降节气过后,种子成 熟,即可采种。
[0008] 2.无菌苗的培养,将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分钟,在超净工作 台上用无菌水浸洗5次,每次浸洗3分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照 下培养。
[0009] 3.诱导培养基,以MS为基本培养基,加入不同浓度的植物激素进行诱导培养, 植物激素用苄基嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA),苄基嘌呤(BA)浓度为1. 0〜2. 5mg/L,优选为 2. Omg/L,奈乙酸(NAA)浓度为0· 1〜0· 3mg/L,优选为0· 2mg/L,同时加入2. 5%的鹿糖和 〇. 7%的琼脂,培养基温度保持24°C〜26°C,PH值5. 9〜6. 2。
[0010] 4.丛生芽诱导,当步骤2培养的无菌苗长至5〜6厘米后,切取上部2. 6〜2. 9厘 米长的顶芽茎段,接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成。
[0011] 5.丛生芽继代增殖,丛生芽诱导50天后,平均高达3. 5〜4. 5厘米时,将丛生芽切 成3芽一簇,转至另一诱导过的培养基,25天〜30天后,每簇增殖至45〜50个丛生芽。
[0012] 6.诱导生根,当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时,将健壮的芽单切,并 转到新的诱导过的培养基上诱导生根,18天后基部切口开始分化出根。
[0013] 7.试管苗的移栽,将发育良好,具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室 温下炼苗3〜4天后取出小苗,用清水洗去根部了培养基,在有75%〜80%遮荫度的大棚内, 移栽到苗床或营养杯中,浇透水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气45分钟,喷水雾保 持空气湿度85%以上,8天后,可揭去薄膜,按常规管理。
[0014] 有益效果:本发明与现有技术相比,其有益效果是: 本发明的巴戟天育苗方法,取材方便,丛生芽诱导率达50%〜80%,成苗达85%以上,可 以满足人工大量栽培的需要,而且经过薄层色谱技术鉴定,本方法培养出的试管苗具有生 物合成药用有效成分甲基异茜草素、大黄素甲醚、水晶兰甙和四乙酰车叶草甙的能力。
[0015]
具体实施方式 下面结合具体实施事例对本发明技术方案进行详细说明。
[0016] 实施例1 : 一种巴戟天组织培养育苗,其具体步骤如下: 1. 采种,选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株,每年霜降节气过后,种子成 熟,即可采种; 2. 无菌苗的培养,将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分钟,在超净工作台上 用无菌水浸洗5次,每次浸洗3分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下培 养; 3. 诱导培养基,以MS为基本培养基,加入植物激素进行诱导培养,植物激素用苄基嘌 呤(BA)和奈乙酸(NAA),苄基嘌呤(BA)浓度为1.0/L,奈乙酸(NAA)浓度为0. lmg/L,同时加 入2. 5%的蔗糖和0. 7%的琼脂,培养基温度保持24°C〜26°C,PH值5. 9〜6. 2 ; 4. 丛生芽诱导,当步骤2培养的无菌苗长至5〜6厘米后,切取上部2. 6〜2. 9厘米长 的顶芽茎段,接入诱导过的培养基培养28天后即有丛生芽形成,丛生芽诱导率为50% ; 5. 丛生芽继代增殖,丛生芽诱导50天后,平均高达3. 5〜4. 5厘米时,将丛生芽切成3 芽一簇,转至另一诱导过的培养基,25天〜30天后,每簇增殖至45〜50个丛生芽; 6. 诱导生根,当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时,将健壮的芽单切,并转到 新的诱导过的培养基上诱导生根,18天后基部切口开始分化出根; 7. 试管苗的移栽,将发育良好,具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下 炼苗3〜4天后取出小苗,用清水洗去根部了培养基,在有75%〜80%遮荫度的大棚内,移 栽到苗床或营养杯中,浇透水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气45分钟,喷水雾保持 空气湿度85%以上,8天后,可揭去薄膜,按常规管理。
[0017] 实施例2 :-种巴戟天组织培养育苗,其具体步骤如下: 1. 采种,选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株,每年霜降节气过后,种子成 熟,即可采种; 2. 无菌苗的培养,将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒15分钟,在超净工作台上 用无菌水浸洗5次,每次浸洗3分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下培

Claims (3)

1. 一种巴戟天组织培养育苗方法,其特征在于包括以下步骤: (1) 采种,选健壮、无病虫害的野生巴戟天植株作采种母株,每年霜降节气过后,种子成 熟,即可采种; (2) 无菌苗的培养,将巴戟天种子置于0. 2%升汞溶液浸泡消毒,后在超净工作台上用 无菌水浸洗5次,每次浸洗3分钟,然后将种子播种于培养基,在室内自然散射光照下培 养; (3) 诱导培养基,以MS为基本培养基,加入植物激素进行诱导培养,植物激素用苄基 嘌呤(BA)和奈乙酸(NAA),同时加入2. 5%的蔗糖和0. 7%的琼脂,培养基温度保持24°C〜 26°C,PH 值 5. 9 〜6. 2 ; (4) 丛生芽诱导,当无菌苗长至5〜6厘米后,切取上部2. 6〜2. 9厘米长的顶芽茎段, 接入诱导过的培养基培养丛生芽; (5) 丛生芽继代增殖,丛生芽诱导后,平均高达3. 5〜4. 5厘米时,将丛生芽切成3芽一 簇,转至另一诱导过的培养基进行继代增殖; (6) 诱导生根,当继代增殖的丛生芽有70%长至3〜4厘米时,将健壮的芽单切,并转到 新的诱导过的培养基上诱导生根; (7) 试管苗的移栽,将发育良好,具有2〜3张展开叶片的试管苗瓶盖打开,置于室温下 炼苗3〜4天后取出小苗,用清水洗去根部了培养基,在有75%〜80%遮荫度的大棚内,移 栽到苗床或营养杯中,浇透水,并用塑料薄膜覆盖,每天揭开薄膜换气45分钟,喷水雾保持 空气湿度85%以上,8天后,可揭去薄膜,按常规管理。
2. 根据权利要求1所述的巴戟天组织培养育苗方法,其特征在于所述的步骤(2)巴戟 天种子置于〇. 2%升汞溶液浸泡消毒的时间为15分钟。
3. 根据权利要求1所述的巴戟天组织培养育苗方法,其特征在于所述的步骤(3)的植 物激素苄基嘌呤(BA)浓度为1. 0〜2. 5mg/L,奈乙酸(NAA)浓度为0. 1〜0. 3mg/L。
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