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Abstract

本发明公开了一种快速培育牛樟芝的方法，其先在栎树段上接种蜜环菌，依靠蜜环菌生长分解、获取树段中的营养，然后再接种牛樟芝菌，使牛樟芝菌通过蜜环菌获得营养，快速生长。该方法既保护了资源稀缺的牛樟树，又可解决牛樟芝因营养不足，导致的菌丝生长、繁殖慢，培养周期长等生产瓶颈问题，可短期内获得具有较高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子实体，有效缓解市场供求矛盾及药企原料不足问题，具有良好的社会与经济效益。

Description

一种快速培育牛樟芝的方法
技术领域
本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种快速培育牛樟芝的方法。
背景技术
牛樟芝（Antrodia camphorata）又名牛樟菇，属于非褶菌目、多孔菌科、薄孔菌属多年生蕈菌类，具有护肝、抗癌、调节免疫、抗过敏、解毒和抗炎等功效，因而受到保健人群、疾病患者的青睐及市场的热捧。牛樟芝的人工栽培方法有牛樟树椴木栽培法、固态栽培法和液体发酵法。但椴木栽培法培养时间长，培养成本高，得到的牛樟芝产量低，而固态栽培法和液体发酵法虽然培养时间短，但无法获得野生牛樟芝某些特有的化学组分，得不到市场的认可。
发明内容
本发明的目的在于提供一种快速培育牛樟芝的方法，其利用栎树段栽培牛樟芝，既保护了资源稀缺的牛樟树，又可解决牛樟芝因营养不足，导致的菌丝生长、繁殖慢，培养周期长等生产瓶颈问题，可短期内获得具有较高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子实体，有效缓解市场供求矛盾及药企原料不足问题，具有良好的社会与经济效益。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种快速培育牛樟芝的方法，包括以下步骤：
1）蜜环菌菌液的制备：选择幼嫩、健壮的野生蜜环菌菌索，取其尖端，用体积浓度为70％的酒精表面消毒5-7min，然后在无菌条件下去掉外部皮鞘，将白色菌髓部分切成长1-1.5cm的小段，接种于斜面培养基上，在20-25℃条件下培养15-20d，至菌丝布满斜面；再将所得菌丝剪成1.0-1.5cm的小段，按重量体积比1:2-3（g/mL）加入质量浓度为1.0%-1.5%的葡萄糖溶液，1000r/min匀浆10min，得蜜环菌菌液；
2）蜜环菌接种：于每年10月-11月，选取直径10cm以上的栎树，将其锯成长30cm的木段，堆积15-20d后，在木段上每隔3-4cm砍一个鱼鳞口，深度至木质部为度，将步骤1）制备的蜜环菌菌液接至切口处，于20-25℃、相对湿度55-65%条件下进行培养；
3）牛樟芝菌的接种：待步骤2）接种蜜环菌的栎树木段培养30-40d后，在木段原切口交互处再砍一个鱼鳞口，在所有切口处均接种健康牛樟芝菌，于20-25℃、相对湿度70-85%条件下进行培养；
4）牛樟芝菌的培养：待切口出现白色的牛樟芝气生菌丝时，将菌材移入培养床继续培养40-50d，即收获牛樟芝子实体。
步骤1）中斜面培养基的原料配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、麦麸提取物5g、根系提取物5g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 10mg，水100mL，调节pH至5~6.5。
其中，所述麦麸提取物是将麦麸用体积浓度为50%的酒精反复浸提2-3次后，将浸提液合并，真空浓缩至原体积1/5-1/6，再加入其体积1.5-2.0倍的水混匀即得；
所述根系提取物是将葫芦科植物的根系用体积浓度为90%的甲醇浸泡12h，然后将浸泡液真空浓缩至干，加入其重量2.0-3.0倍的水溶解即得。
本发明的显著效果在于：本发明利用资源丰富的栎树为基材，先在栎树段上接种蜜环菌，依靠蜜环菌生长分解、获取树段中的营养，然后再接种牛樟芝菌，使牛樟芝菌通过蜜环菌获得营养，快速生长。该方法既保护了资源稀缺的牛樟树，又可解决牛樟芝因营养不足，导致的菌丝生长、繁殖慢，培养周期长等生产瓶颈问题，其生产周期可较常规牛樟树椴木栽培法缩短20-35天，能在短期内获得具有较高生物量及近野生牛樟芝有效成分的牛樟芝子实体，有效缓解市场供求矛盾及药企原料不足问题，具有良好的社会与经济效益。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
一种快速培育牛樟芝的方法，包括以下步骤：
1）蜜环菌菌液的制备：选择幼嫩、健壮的野生蜜环菌菌索，取其尖端，用体积浓度为70％的酒精表面消毒5min，然后在无菌条件下去掉外部皮鞘，将白色菌髓部分切成长1cm的小段，接种于斜面培养基上，每管放置一段，在20℃条件下培养20d，至菌丝布满斜面；再将所得菌丝剪成1.0cm的小段，按重量体积比1:3（g/mL）加入质量浓度为1.0%的葡萄糖溶液，1000r/min匀浆10min，得蜜环菌菌液；
2）蜜环菌接种：于每年10月-11月，将直径10cm的栎树锯成长30cm的木段，堆积15d后，在木段上每隔3cm砍一个鱼鳞口，深度至木质部为度，将步骤1）制备的蜜环菌菌液接至切口处，于20℃、相对湿度55%条件下进行培养；
3）牛樟芝菌的接种：待步骤2）接种蜜环菌的栎树木段培养30d后，在木段原切口交互处再砍一个鱼鳞口，在所有切口处均接种健康牛樟芝菌，于20℃、相对湿度70%条件下进行培养；
4）牛樟芝菌的培养：待切口出现白色的牛樟芝气生菌丝时，将菌材移入培养床继续培养40d，即收获牛樟芝子实体。
所用斜面培养基的配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、麦麸提取物5g、根系提取物5g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 10mg，水100mL，调节pH至6.5。
其中，所述麦麸提取物是将麦麸用体积浓度为50%的酒精反复浸提2次后，将浸提液合并，真空浓缩至原体积1/5，再加入其体积2.0倍的水混匀即得；
所述根系提取物是将葫芦科植物的根系用体积浓度为90%的甲醇浸泡12h，然后将浸泡液真空浓缩至干，加入其重量2.0倍的水溶解即得。
实施例2
一种快速培育牛樟芝的方法，包括以下步骤：
1）蜜环菌菌液的制备：选择幼嫩、健壮的野生蜜环菌菌索，取其尖端，用体积浓度为70％的酒精表面消毒6min，然后在无菌条件下去掉外部皮鞘，将白色菌髓部分切成长1.2cm的小段，接种于斜面培养基上，每管放置一段，在22℃条件下培养18d，至菌丝布满斜面；再将所得菌丝剪成1.3cm的小段，按重量体积比1:2（g/mL）加入质量浓度为1.2%的葡萄糖溶液，1000r/min匀浆10min，得蜜环菌菌液；
2）蜜环菌接种：于每年10月-11月，将直径12cm的栎树锯成长30cm的木段，堆积16d后，在木段上每隔3cm砍一个鱼鳞口，深度至木质部为度，将步骤1）制备的蜜环菌菌液接至切口处，于22℃、相对湿度60%条件下进行培养；
3）牛樟芝菌的接种：待步骤2）接种蜜环菌的栎树木段培养35d后，在木段原切口交互处再砍一个鱼鳞口，在所有切口处均接种健康牛樟芝菌，于23℃、相对湿度80%条件下进行培养；
4）牛樟芝菌的培养：待切口出现白色的牛樟芝气生菌丝时，将菌材移入培养床继续培养45d，即收获牛樟芝子实体。
所用斜面培养基的配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、麦麸提取物5g、根系提取物5g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 10mg，水100mL，调节pH至6.0；
其中，所述麦麸提取物是将麦麸用体积浓度为50%的酒精反复浸提2次后，将浸提液合并，真空浓缩至原体积1/5，再加入其体积1.8倍的水混匀即得；
所述根系提取物是将葫芦科植物的根系用体积浓度为90%的甲醇浸泡12h，然后将浸泡液真空浓缩至干，加入其重量2.5倍的水溶解即得。
实施例3
一种快速培育牛樟芝的方法，包括以下步骤：
1）蜜环菌菌液的制备：选择幼嫩、健壮的野生蜜环菌菌索，取其尖端，用体积浓度为70％的酒精表面消毒7min，然后在无菌条件下去掉外部皮鞘，将白色菌髓部分切成长1.5cm的小段，接种于斜面培养基上，每管放置一段，在25℃条件下培养15d，至菌丝布满斜面；再将所得菌丝剪成1.5cm的小段，按重量体积比1:2（g/mL）加入质量浓度为1.5%的葡萄糖溶液，1000r/min匀浆10min，得蜜环菌菌液；
2）蜜环菌接种：于每年10月-11月，将直径15cm的栎树锯成长30cm的木段，堆积20d后，在木段上每隔4cm砍一个鱼鳞口，深度至木质部为度，将步骤1）制备的蜜环菌菌液接至切口处，于25℃、相对湿度65%条件下进行培养；
3）牛樟芝菌的接种：待步骤2）接种蜜环菌的栎树木段培养40d后，在木段原切口交互处再砍一个鱼鳞口，在所有切口处均接种健康牛樟芝菌，于25℃、相对湿度85%条件下进行培养；
4）牛樟芝菌的培养：待切口出现白色的牛樟芝气生菌丝时，将菌材移入培养床继续培养50d，即收获牛樟芝子实体。
所用斜面培养基的配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、麦麸提取物5g、根系提取物5g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 10mg，水100mL，调节pH至5；
其中，所述麦麸提取物是将麦麸用体积浓度为50%的酒精反复浸提3次后，将浸提液合并，真空浓缩至原体积1/6，再加入其体积1.5倍的水混匀即得；
所述根系提取物是将葫芦科植物的根系用体积浓度为90%的甲醇浸泡12h，然后将浸泡液真空浓缩至干，加入其重量3.0倍的水溶解即得。
将实施例1-3收获的牛樟芝子实体与野生牛樟芝子实体进行品质比较，结果见表1。
表1 不同来源牛樟芝子实体的品质比较
Figure DEST_PATH_IMAGE001
由表1可见，采用本发明方法栽培获得的牛樟芝子实体与野生牛樟芝子实体品质相近。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (3)

1.一种快速培育牛樟芝的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1）蜜环菌菌液的制备：选择幼嫩、健壮的野生蜜环菌菌索，取其尖端，用体积浓度为70％的酒精表面消毒5-7min，然后在无菌条件下去掉外部皮鞘，将白色菌髓部分切成长1-1 .5cm的小段，接种于斜面培养基上，在20-25℃条件下培养15-20d，至菌丝布满斜面；再将所得菌丝剪成1 .0-1 .5cm的小段，按重量体积比1:2-3加入质量浓度为1 .0%-1 .5%的葡萄糖溶液，1000r/min匀浆10min，得蜜环菌菌液；所述重量体积比单位为g/mL；
2）蜜环菌接种：于每年10月-11月，选取直径10cm以上的栎树，将其锯成长30cm的木段，堆积15-20d后，在木段上每隔3-4cm砍一个鱼鳞口，深度至木质部为度，将步骤1）制备的蜜环菌菌液接至切口处，于20-25℃、相对湿度55-65%条件下进行培养；
3）牛樟芝菌的接种：待步骤2）接种蜜环菌的栎树木段培养30-40d后，在木段原切口交互处再砍一个鱼鳞口，在所有切口处均接种健康牛樟芝菌，于20-25℃、相对湿度70-85%条件下进行培养；
4）牛樟芝菌的培养：待切口出现白色的牛樟芝气生菌丝时，将菌材移入培养床继续培养40-50d，即收获牛樟芝子实体。
2.根据权利要求1所述快速培育牛樟芝的方法，其特征在于：步骤1）中斜面培养基的原料配方为：去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、麦麸提取物5g、根系提取物5g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1 .5g、维生素B1 10mg，水100mL，调节pH至5 ~ 6 .5。
3.根据权利要求2所述快速培育牛樟芝的方法，其特征在于：所述麦麸提取物是将麦麸用体积浓度为50%的酒精反复浸提2-3次后，将浸提液合并，真空浓缩至原体积1/5-1/6，再加入其体积1 .5-2 .0倍的水混匀即得； 所述根系提取物是将葫芦科植物的根系用体积浓度为90%的甲醇浸泡12h，然后将浸泡 液真空浓缩至干，加入其重量2 .0-3 .0倍的水溶解即得。
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