CN106604909A - 具有hiv成熟抑制活性的在3位被带有卤代烷基取代基的非芳族环取代的三萜系化合物 - Google Patents

具有hiv成熟抑制活性的在3位被带有卤代烷基取代基的非芳族环取代的三萜系化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN106604909A
CN106604909A CN201580031487.2A CN201580031487A CN106604909A CN 106604909 A CN106604909 A CN 106604909A CN 201580031487 A CN201580031487 A CN 201580031487A CN 106604909 A CN106604909 A CN 106604909A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
substituted
bases
cycloalkyl
coor
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201580031487.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106604909B (zh
Inventor
薛成源
陈燕
陈洁
J.斯维多尔斯基
B.L.维纳布尔斯
N.冼
N.A.米恩威尔
A.雷盖罗-任
R.A.哈茨
L.徐
刘峥
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ViiV Healthcare UK No 4 Ltd
Original Assignee
ViiV Healthcare UK No 4 Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=53002809&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN106604909(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ViiV Healthcare UK No 4 Ltd filed Critical ViiV Healthcare UK No 4 Ltd
Publication of CN106604909A publication Critical patent/CN106604909A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106604909B publication Critical patent/CN106604909B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/63—Esters of sulfonic acids
    • C07C309/64—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/65—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/63—Esters of sulfonic acids
    • C07C309/64—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/65—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C07C309/66—Methanesulfonates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D239/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms directly attached in position 2
    • C07D239/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
    • C07D279/12—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic System
    • C07F5/02—Boron compounds
    • C07F5/025—Boronic and borinic acid compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic System
    • C07F5/02—Boron compounds
    • C07F5/04—Esters of boric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
    • C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/16—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring the ring being unsaturated

Abstract

阐述了具有药物和生物影响性质的化合物、它们的药物组合物和使用方法。特别提供具有独特抗病毒活性的三萜系化合物作为HIV成熟抑制剂，其以式I的化合物为代表：其中X选自C4‑8环烷基、C4‑8环烯基、C4‑9螺环烷基、C4‑9螺环烯基、C4‑8氧杂环烷基、C4‑8二氧杂环烷基、C6‑8氧杂环烯基、C6‑8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6‑9氧杂螺环烷基和C6‑9氧杂螺环烯基环，以使X被A取代，其中A是‑C1‑6烷基‑卤代。这些化合物可用于治疗HIV和AIDS。

Description

具有HIV成熟抑制活性的在3位被带有卤代烷基取代基的非芳 族环取代的三萜系化合物
相关申请的交叉引用
本申请要求2014年4月11日提交的美国临时申请序列号61/978,306的权益，其全文经引用并入本文。
发明领域
本发明涉及可用于对抗HIV的新型化合物，更特别涉及可用作HIV成熟抑制剂的衍生自桦木酸的化合物和其它结构上相关的化合物，和含有其的药物组合物以及其制备方法。
发明背景
HIV-1（人免疫缺陷病毒-1）感染仍然是主要的医学问题，在2010年末全世界有估计4.5-5千万人受到感染。HIV和AIDS（获得性免疫缺陷综合征）的病例数已经迅速增长。在2005年，报道了大约5百万例新感染并且310万人死于AIDS。目前可用的HIV治疗药物包括核苷逆转录酶（RT）抑制剂或经批准的单一药丸组合：齐多夫定（或AZT或RETROVIR®）、地达诺新（或Videx®）、司他夫定（或Zerit®）、拉米夫定（或3TC或Epivir®）、扎西他滨（或DDC或Hivid®）、琥珀酸阿巴卡韦（或Ziagen®）、替诺福韦酯富马酸盐（或Viread®）、恩曲他滨（或FTC-Emtriva®）、Combivir®（含有-3TC加AZT）、Trizivir®（含有阿巴卡韦、拉米夫定和齐多夫定）、Epzicom®（含有阿巴卡韦和拉米夫定）、Truvada®（含有Viread®和Emtriva®）；非核苷逆转录酶抑制剂: 奈韦拉平（或Viramune®）、地拉韦啶（或Rescriptor®）和依法韦仑（或Sustiva®）、Atripla®（Truvada® + Sustiva®）和依曲韦林，和拟肽类蛋白酶抑制剂或经批准的制剂: 沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、安普那韦、洛匹那韦、Kaletra®（洛匹那韦和利托那韦）、地瑞纳韦、阿扎那韦（Reyataz®）和替拉那韦（Aptivus®）和考比西他(cobicistat)，和整合酶抑制剂，如雷特格韦（Isentress®），和进入抑制剂，如恩夫韦地(T-20)（Fuzeon®）和马拉韦罗（Selzentry®）。
这些药物各自在单独使用时只能短暂抑制病毒复制。但是，当组合使用时，这些药物对病毒血症和疾病进程具有深远影响。实际上，由于组合疗法的广泛应用，最近已记录AIDS患者中的死亡率显著降低。但是，尽管有这些引人瞩目的结果，但30至50%的患者可能最终在组合药物疗法中失败。药物效能不足、依从性不佳、受限的组织穿透力和在某些细胞类型内的药物特异性限制（例如大多数核苷类似物无法在静息细胞中磷酸化）可能对敏感病毒的不完全抑制负有责任。此外，HIV-1的高复制速率和快速周转与突变的频繁并入相结合导致出现耐药变异体并在存在次优药物浓度时治疗失败。因此，需要表现出独特抗性模式和有利的药代动力学以及安全特性的新型抗-HIV剂以提供更多治疗选项。改进的HIV融合抑制剂和HIV进入协同受体（entry coreceptor）拮抗剂是许多研究人员进一步研究的新类型抗HIV剂的两个实例。
HIV附着抑制剂是结合到HIV表面糖蛋白gp120上并干扰表面蛋白gp120和宿主细胞受体CD4之间的相互作用的抗病毒化合物的另一亚类。因此，它们在HIV生命周期的第一阶段防止HIV附着到人CD4 T-细胞上并阻断HIV复制。为了努力获得具有作为抗病毒剂的最大化效用和效力的化合物，已经改进HIV附着抑制剂的性质。特别地，US 7,354,924和US 7,745,625是HIV附着抑制剂的举例说明。
用于治疗HIV的另一新兴种类的化合物被称作HIV成熟抑制剂。成熟是HIV复制或HIV生命周期中的多达10个或更多个步骤中的最后一个，在该步骤中HIV因最终导致衣壳(CA)蛋白释放的gag蛋白中的由若干HIV蛋白酶介导的裂解事件而变得具有感染性。成熟抑制剂防止HIV衣壳正确组装及成熟，防止形成保护性外鞘，或防止由人类细胞出现。取而代之地，产生无感染性病毒，从而防止后续的HIV感染周期。
现已显示桦木酸的某些衍生物表现出作为HIV成熟抑制剂的有效抗HIV活性。举例而言，US 7,365,221公开了单酰化桦木醇(betulin)及二氢桦木醇衍生物及其作为抗HIV剂的用途。如'221参考文献中所论述，用某些经取代的酰基(例如3',3'-二甲基戊二酰基及3',3'-二甲基丁二酰基基团)使桦木酸(1)的酯化产生出具有增强活性的衍生物(Kashiwada, Y.等人, J. Med. Chem. 39:1016-1017 (1996))。为有效抗HIV剂的酰化桦木酸及二氢桦木酸衍生物亦描述于美国专利第5,679,828号中。用琥珀酸使桦木醇的3-碳中的羟基酯化也产生出能够抑制HIV-1活性的化合物(Pokrovskii, A. G.等人,“Synthesis of derivatives of plant triterpenes and study of their antiviraland immunostimulating activity,” Khimiya y Interesakh Ustoichivogo Razvitiya,第9卷, 第3期, 第485-491页 (2001))（英文摘要）。
关于用衍生自桦木酸的化合物治疗HIV感染的用途的其它参考文献包括US 2005/0239748和US 2008/0207573，以及WO2006/053255、WO2009/100532和WO2011/007230。
已在开发的一种HIV成熟化合物已被标识为贝韦立马(Bevirimat)或PA-457，其化学式为C36H56O6且IUPAC名为3β-(3-羧基-3-甲基-丁酰基氧基)羽扇-20(29)-烯-28-酸(3β-(3-carboxy-3-methyl-butanoyloxy) lup-20(29)-en-28-oic acid)。
在本文中还参考Bristol-Myers Squibb在2011年6月2日提交的名称为“MODIFIEDC-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS”的申请USSN 13/151,706（现为US 8,754,068）和2011年6月2日提交的名称为“C-28 AMIDES OF MODIFIEDC-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS”的申请USSN 13/151,722（现为US 8,802,661）。还参考2012年1月27日提交的名称为“C-28 AMINES OF C-3MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS”的申请USSN13/359,680（现为US 8,748,415）。此外，参考2012年1月27日提交的名称为“C-17 AND C-3MODIFIED TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY”的申请USSN 13/359,727（现为US 8,846,647）。还进一步参考2013年2月6日提交的申请“C-3 CYCLOALKENYLTRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY” USSN 13/760,726（现为US8,906,889）。
本领域中现需要可用作HIV成熟抑制剂的新型化合物以及含有这些化合物的新型药物组合物。
发明概述
本发明提供下式I的化合物，包括其可药用盐、其药物制剂及其在罹患或易感病毒（例如HIV）的患者中的用途。式I的化合物是有效的抗病毒剂，特别是作为HIV抑制剂。它们可用于治疗HIV和AIDS。
本发明的一个实施方案涉及式I的化合物，包括其可药用盐：
其中R1是异丙烯基或异丙基；
X选自C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环，
其中X被A取代，且其中A是-C1-6卤代烷基；
Y选自-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH，
其中n = 1-6；
R2是-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基或-被芳基取代的C1-6烷基；
W不存在或是-CH2或-CO；
R3是-H、-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基；
R4选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-被C1-6取代的-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-SO2R7、-SO2NR2R2和
、
其中G选自-O-、-SO2-和-NR12；
其中Q1选自-C1-6烷基、-C1-6氟烷基、杂芳基、被取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR8R9和-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR3、-SO2R7和-SO2NR2R2；
条件是当W是-CO时，R4或R5不能是-COR6；
进一步的条件是R4或R5只有一个可选自--COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2；
或当W不存在或是-CH2时，则R4和R5可以与相邻的N一起形成
；
R6选自-H、-C1-6烷基、-被C1-6烷基-取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14和-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2；
R7选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基；
R8和R9独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2和-COOR3，
或R8和R9与相邻的N一起形成选自下列的环：
M选自-R15、-SO2R2、-SO2NR2R2、-OH和-NR2R12；
V选自-CR10R11-、-SO2-、-O-和-NR12-；
条件是R8或R9只有一个可以是-COOR3；
R10和R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基；
R12选自-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-CONR2R2、-SO2R3、-SO2NR2R2；
R13和R14独立地选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、C1-6被取代的烷基-Q3和
，
Q3选自杂芳基、被取代的杂芳基、-NR2R12、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3；
R15选自-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3和-C1-6被取代烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR2；
条件是当V是-NR12-时，R16不能是-NR2R2；且
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基。
在另一实施方案中，提供治疗感染病毒的哺乳动物的方法，尤其其中所述病毒是HIV，其包括给予所述哺乳动物抗病毒有效量的选自式I的化合物的化合物，和一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。任选地，式I的化合物可以与抗病毒有效量的选自：(a) AIDS抗病毒剂；(b) 抗感染剂；(c) 免疫调节剂；和(d) 其它HIV进入抑制剂的另一AIDS治疗剂组合给药。
本发明的另一实施方案是药物组合物，其包含一种或多种式I的化合物和一种或多种可药用载体、赋形剂和/或稀释剂；并任选与选自：(a) AIDS抗病毒剂；(b) 抗感染剂；(c) 免疫调节剂；和(d) 其它HIV进入抑制剂的另一AIDS治疗剂组合。
在本发明的另一实施方案中，提供一种或多种制造本文中的式I的化合物的方法。
本文还提供可用于制造本文中的式I的化合物的中间体化合物。
本发明涉及这些以及下文描述的其它重要的目标。
实施方案详述
除非上下文清楚地另行指明，本文所用的单数形式“一”和“该”包括复数指代对象。
由于本发明的化合物可能具有不对称中心并因此作为非对映异构体的混合物存在，除其混合物外，本公开还包括式I的化合物的个体非对映异构形式。
定义
除非本申请别处明确地另行阐述，在本文中可以使用一个或多个下列术语并应具有下列含义：
“H”是指氢，包括其同位素，如氘。
本文和权利要求书中所用的术语“C1-6烷基”（除非另行规定）是指直链或支链烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。
“C1-C4氟烷基”是指被F取代的C1-C4烷基，其中至少一个H原子被F原子替代，且各H原子可以独立地被F原子替代；
“卤素”或“卤”是指氯、溴、碘或氟。
“芳基”或“Ar”基团是指具有完全共轭π-电子体系的全碳单环或稠环多环（即共享相邻碳原子对的环）基团。芳基的非限制性实例是苯基、萘基和蒽基。该芳基可以是被取代或未被取代的。当被取代时，取代基优选是选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基（heteroalicycloxy）、巯基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤甲基、脲基、氨基和-NRxRy的一个或多个，其中Rx和Ry独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基、羰基、C-羧基、磺酰基、三卤甲基和经组合的五元或六元杂脂环。
本文所用的“杂芳基”是指在一个或多个环中具有一个或多个选自氮、氧和硫的原子并另外具有完全共轭π-电子体系的单环或稠环（即共享相邻原子对的环）基团。除非另行指明，杂芳基可以在该杂芳基内的碳或氮原子处连接。应该指出，术语杂芳基意在包括母体杂芳基的N-氧化物，若这样的N-氧化物如本领域中已知在化学上可行。杂芳基的非限制性实例是呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、噻唑基、咪唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、苯并噻唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡咯基、吡喃基、四氢吡喃基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、咔唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吡嗪基、二嗪基、吡嗪、三嗪基、四嗪基和四唑基。当被取代时，取代基优选是选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、硫代烷氧基、巯基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤甲基、脲基、氨基和-NRxRy的一个或多个，其中Rx和Ry如上定义。
本文所用的“杂脂环”基团是指在一个或多个环中具有一个或多个选自氮、氧和硫的原子的单环或稠环基团。环选自提供稳定的键排列的那些并且无意包括不会存在的体系。该环还可具有一个或多个双键。但是，该环没有完全共轭π-电子体系。杂脂环基团的非限制性实例是吖丁啶基、哌啶基、哌嗪基、咪唑啉基、噻唑烷基、3-吡咯烷-1-基、吗啉基、硫代吗啉基及其S氧化物和四氢吡喃基。当被取代时，取代基优选是选自烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、巯基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基和-NRxRy的一个或多个，其中Rx和Ry如上定义。
“烷基”是指饱和脂族烃，包括直链和支链基团。烷基优选具有1至20个碳原子（每当在本文中陈述数值范围，例如“1-20”，其是指该基团（在这种情况下为烷基）可含有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等等，直至并包括20个碳原子）。其更优选是具有1至10个碳原子的中等大小烷基。其最优选是具有1至4个碳原子的低级烷基。烷基可以是被取代或未被取代的。当被取代时，取代基优选是独立地选自三卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、巯基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基和经组合的五元或六元杂脂环族环的一个或多个。
“环烷基”是指全碳单环或稠环（即共享相邻碳原子对的环）基团，其中一个或多个环没有完全共轭π-电子体系。环烷基的非限制性实例是环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己烯、环庚烷、环庚烯和金刚烷。环烷基可以是被取代或未被取代的。当被取代时，取代基优选是独立地选自烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、巯基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基和-NRxRy的一个或多个，其中Rx和Ry如上定义。
“烯基”是指具有至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键的如本文定义的烃基。
“炔基”是指具有至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键的如本文定义的烃基。
“羟基”是指-OH基团。
“烷氧基”是指如本文定义的-O-烷基和-O-环烷基两者。
“芳氧基”是指如本文定义的-O-芳基和-O-杂芳基两者。
“杂芳氧基”是指杂芳基-O-基团，其中杂芳基如本文定义。
“杂脂环氧基”是指杂脂环基-O-基团，其中杂脂环基如本文定义。
“巯基”是指-SH基团。
“硫代烷氧基”是指如本文定义的-S-烷基和-S-环烷基。
“硫代芳氧基”是指如本文定义的-S-芳基和-S-杂芳基。
“硫代杂芳氧基”是指杂芳基-S-基团，其中杂芳基如本文定义。
“硫代杂脂环氧基”是指杂脂环基-S-基团，其中杂脂环基如本文定义。
“羰基”是指-C(=O)-R”基团，其中R”选自氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基（经环碳键合）和杂脂环基（经环碳键合），各自如本文定义。
“醛”基团是指其中R”是氢的羰基。
“硫代羰基”是指-C(=S)-R”基团，其中R”如本文定义。
“酮基”是指-CC(=O)C-基团，其中C=O的任一侧或两侧上的碳可以是烷基、环烷基、芳基，或杂芳基或杂脂环基的碳。
“三卤代甲烷羰基”是指Z3CC(=O)-基团，其中所述Z是卤素。
“C-羧基”是指-C(=O)O-R”基团，其中R”如本文定义。
“O-羧基”是指R”C(-O)O-基团，其中R”如本文定义。
“羧酸”基团是指其中R”是氢的C-羧基。
“三卤甲基”是指-CZ3基团，其中Z是如本文定义的卤素基团。
“三卤代甲磺酰基”是指Z3CS(=O)2-基团，其中Z如上定义。
“三卤代甲磺酰氨基”是指Z3CS(=O)2NRx-基团，其中Z如上定义且Rx是H或(C1-6)烷基。
“亚磺酰基”是指-S(=O)-R”基团，其中R”是(C1-6)烷基。
“磺酰基”是指-S(=O)2R”基团，其中R”是(C1-6)烷基。
“S-磺酰氨基”是指-S(=O)2NRXRY，其中RX和RY独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-磺酰氨基”是指R”S(=O)2NRX-基团，其中Rx是H或(C1-6)烷基。
“O-氨基甲酰基”是指-OC(=O)NRxRy基团，其中RX和RY独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-氨基甲酰基”是指RxOC(=O)NRy基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“O-硫代氨基甲酰基”是指-OC(=S)NRxRy基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-硫代氨基甲酰基”是指RxOC(=S)NRy-基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“氨基”是指-NH2基团。
“C-酰氨基”是指-C(=O)NRxRy基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“C-硫代酰氨基”是指-C(=S)NRxRy基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-酰氨基”是指RxC(=O)NRy-基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“脲基”是指-NRxC(=O)NRyRy2基团，其中Rx、Ry和Ry2独立地为H或(C1-6)烷基。
“胍基”是指-RxNC(=N)NRyRy2基团，其中Rx、Ry和Ry2独立地为H或(C1-6)烷基。
“脒基”是指RxRyNC(=N)-基团，其中Rx和Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“氰基”是指-CN基团。
“甲硅烷基”是指-Si(R”)3，其中R”是(C1-6)烷基或苯基。
“膦酰基”是指P(=O)(ORx)2，其中Rx是(C1-6)烷基。
“肼基”是指-NRxNRyRy2基团，其中Rx、Ry和Ry2独立地为H或(C1-6)烷基。
“4、5或6元环环状N-内酰胺”基团是指。
“螺环”基团是经仅一个原子连接的环的双环有机基团。这些环在性质上可以不同或相同。连接原子也被称作螺原子，最常被称作季碳（“螺碳”）。
“氧代螺环”或“氧杂螺环”基团是具有包含在该双环环结构内的氧的螺环基团。“二氧代螺环”或“二氧杂螺环”基团在该双环环结构内具有两个氧。
任何两个相邻R基团可以组合形成稠合到最初带有这些R基团的环上的另外的芳基、环烷基、杂芳基或杂环环。
本领域中已知的是，杂芳基体系中的氮原子可“参与杂芳基环双键”，并且这是指在包含五元环杂芳基的两个互变异构结构中的双键形式。这表明氮是否也可如本领域化学家充分理解的那样被取代。本公开的公开内容和权利要求书基于化学键合的已知一般原理。要理解的是，权利要求书不包括基于文献已知不稳定或不能存在的结构。
本文公开的化合物的可药用盐和前药在本发明的范围内。本文和权利要求书中所用的术语“可药用盐”旨在包括无毒碱加成盐。合适的盐包括衍生自有机和无机酸的那些，例如但不限于衍生自有机和无机酸，例如但不限于氢氯酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、亚磺酸、柠檬酸、马来酸、富马酸、山梨酸、乌头酸、水杨酸、邻苯二甲酸等。本文所用的术语“可药用盐”还意在包括酸性基团，如羧酸根与抗衡离子的盐，如铵盐、碱金属（特别是钠或钾）盐、碱土金属（特别是钙或镁）盐，和与合适的有机碱如低级烷基胺（甲胺、乙胺、环己胺等）或与被取代的低级烷基胺（例如被羟基取代的烷基胺，如二乙醇胺、三乙醇胺或三(羟甲基)-氨基甲烷）的盐或与碱，如哌啶或吗啉的盐。
如上所述，本发明的化合物还包括“前药”。本文所用的术语“前药”包括术语“前药酯”和术语“前药醚”两者。
如上所述，本发明涉及式I的化合物，包括其可药用盐：
其中R1是异丙烯基或异丙基；
X选自C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环，
其中X被A取代，且其中A是-C1-6卤代烷基；
Y选自-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH，
其中n = 1-6；
R2是-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基或-被芳基取代的C1-6烷基；
W不存在或是-CH2或-CO；
R3是-H、-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基；
R4选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-被C1-6取代的-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-SO2R7、-SO2NR2R2和
、
其中G选自-O-、-SO2-和-NR12；
其中Q1选自-C1-6烷基、-C1-6氟烷基、杂芳基、被取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR8R9和-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR3、-SO2R7和-SO2NR2R2；
条件是当W是-CO时，R4或R5不能是-COR6；
进一步的条件是R4或R5只有一个可选自--COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2；
或当W不存在或是-CH2时，则R4和R5可以与相邻的N一起形成
；
R6选自-H、-C1-6烷基、-被C1-6烷基-取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14和-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2；
R7选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基；
R8和R9独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2和-COOR3，
或R8和R9与相邻的N一起形成选自下列的环：
M选自-R16、-SO2R2、-SO2NR2R2、-OH和-NR2R12；
V选自-CR10R11-、-SO2-、-O-和-NR12-；
条件是R8或R9只有一个可以是-COOR3；
R10和R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基；
R12选自-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-CONR2R2、-SO2R3、-SO2NR2R2；
R13和R14独立地选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、C1-6被取代的烷基-Q3和
，
Q3选自杂芳基、被取代的杂芳基、-NR2R12、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3；
R15选自-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3和-C1-6被取代的烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR2；
条件是当V是-NR12-时，R16不能是-NR2R2；且
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基。
更优选的化合物包括其中R1是异丙烯基的那些。
还优选其中W不存在的化合物。
其它优选化合物包括其中X是C4-8环烯基，且更优选C6环烯基的那些。
此外，其中A是C1-C3卤代烷基，且更优选卤代甲基，更优选氟代甲基的式I的化合物是优选的。
还优选其中A被对位取代在取代基X上的化合物。
还优选其中Y是-COOR2，且更优选-COOH的式I的化合物。在某些实施方案中，还优选的是，Y是-COOH且A是氟代甲基。
还优选其中Y在对位的式I的化合物。
还优选的是其中取代基A和取代基Y两者共享在取代基X上，更优选在取代基X的对位上的相同连接点的式I的化合物。
在许多实施方案中，还优选的是R4是C1-6烷基-Q1，其中Q1是-NR8R9。
在一些实施方案中，优选的是R4是-C1-6烷基-C3-6环烷基。
在某些实施方案中，还优选的是R5是C1-6烷基-NR8R9。
经常还优选的是-NR8R9形成如上所述的环结构。
作为本发明的一部分的优选化合物，包括其可药用盐，包括下列：
。
作为本发明的一部分的优选化合物，包括其可药用盐，还包括下列：
。
上述化合物代表非对映异构体的混合物和两种个体非对映异构体。在某些实施方案中，特定非对映体之一可能特别优选。
根据上述所有的各种实施方案，本发明的化合物可以口服、肠道外（包括皮下注射、静脉、肌肉内、胸骨内注射或输注技术）、通过吸入喷雾剂或经直肠，和通过其它手段，以含有技术人员可得的无毒可药用载体、赋形剂和稀释剂的剂量单位制剂给药。还可包含一种或多种佐剂。
因此，根据本发明，进一步提供用于治疗病毒感染，如HIV感染和AIDS的治疗方法和药物组合物。该治疗涉及给予需要这种治疗的患者含有抗病毒有效量的一种或多种式I的化合物连同一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。本文所用的术语“抗病毒有效量”是指足以表现出有意义的患者益处，即抑制、改善或治愈急性病况（以HIV感染的抑制为特征）的该组合物和方法的各活性组分的总量。当应用于单独给药的个体活性成分时，该术语指单独的该成分。当应用于组合时，该术语指产生治疗效果的活性成分的组合量，无论连续地还是同时地以组合方式给药。如本文中及权利要求中所使用的术语“治疗”指预防、抑制、改善和/或治愈与HIV感染相关的疾病和病况。
本发明的药物组合物可以是可口服给药的混悬剂或片剂；以及喷鼻剂、无菌注射制剂，例如无菌可注射水性或油质混悬剂或栓剂的形式。在该药物组合物中可以使用可药用载体、赋形剂或稀释剂，并且是药物制剂领域中使用的那些。
当以混悬剂形式口服给药时，这些组合物根据药物制剂领域中通常已知的技术制备并可含有用于赋予体积的微晶纤维素、作为悬浮剂的藻酸或藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素和本领域中已知的甜味剂/调味剂。作为速释片剂，这些组合物可含有微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和乳糖和/或本领域中已知的其它赋形剂、粘合剂、增量剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂。
可注射溶液或混悬剂可以根据已知技术使用合适的无毒、肠道外可接受的稀释剂或溶剂，如甘露醇、1,3-丁二醇、水、林格氏溶液或等渗氯化钠溶液，或合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂，如无菌、温和、不挥发油，包括合成甘油单酯和甘油二酯，和脂肪酸，包括油酸配制。
本文中所述的化合物可以每公斤体重约1至100 mg的剂量范围，以分次剂量向人类口服给药，通常经历较长时段，例如若干天、若干周、若干月或甚至若干年。一个优选的剂量范围为每公斤体重约1至10 mg，以分次剂量口服。另一优选的剂量范围为每公斤体重约1至20 mg，以分次剂量。然而，将理解，用于任何具体患者的特定剂量水平及给药频率可改变，且将视多种因素而定，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性及作用时长、年龄、体重、一般健康情况、性别、饮食、给药模式及时间、排泄速率、药物组合、具体病况的严重性及经受治疗的主体。
本文还涉及本文所述的式I的化合物与一种或多种可用于治疗AIDS的其它药剂的组合。例如，无论是在暴露前和/或暴露后时期，本公开的化合物可以有效地与有效量的AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂或疫苗，如下列非限制性表格中的那些组合给药：
抗病毒剂
免疫调节剂
抗感染剂
另外，本文所述的本公开的化合物可以与HIV进入抑制剂组合使用。在DRUGS OFTHE FUTURE 1999, 24(12), 第1355-1362页；CELL, 第9卷, 第243-246页, 1999年10月29日；和DRUG DISCOVERY TODAY, 第5卷, 第5期, 2000年5月, 第183-194页和Inhibitors of the entry of HIV into host cells. Meanwell, Nicholas A.；Kadow, John F.,Current Opinion in Drug Discovery & Development (2003), 6(4), 451-461中论述了此类HIV进入抑制剂的实例。具体而言，该化合物可以与附着抑制剂、融合抑制剂和针对CCR5或CXCR4辅助受体的趋化因子受体拮抗剂组合使用。在US 7,354,924和US 7,745,625中也阐述了HIV附着抑制剂。
要理解的是，本申请的化合物与AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂、HIV进入抑制剂或疫苗的组合的范围不限于上表中的名单，而是原则上包括与可用于治疗AIDS的任何药物组合物的任何组合。
优选组合是用本公开的化合物和HIV蛋白酶抑制剂和/或HIV逆转录酶的非核苷抑制剂同时或交替治疗。该组合中任选的第四种组分是HIV逆转录酶的核苷抑制剂，如AZT、3TC、ddC或ddI。HIV蛋白酶的优选抑制剂是REYATAZ®（活性成分阿扎那韦）。通常每天一次给药300至600毫克的剂量。这可以与低剂量的利托那韦（50至500mgs）联合给药。另一优选的HIV蛋白酶抑制剂是KALETRA®。另一可用的HIV蛋白酶抑制剂是茚地那韦，其是N-(2(R)-羟基-1-(S)-茚满基)-2(R)-苯基甲基-4-(S)-羟基-5-(1-(4-(3-吡啶基-甲基)-2(S)-N'-(叔丁基甲酰氨基)-哌嗪基))-戊烷酰胺乙醇化物(ethanolate)的硫酸盐并根据U.S. 5,413,999合成。茚地那韦通常以800毫克的剂量每日三次给药。其它优选的蛋白酶抑制剂是奈非那韦和利托那韦。另一优选的HIV蛋白酶抑制剂是沙奎那韦，其以600或1200毫克的剂量每日三次给药。优选的HIV逆转录酶的非核苷抑制剂包括依法韦仑。这些组合可具有限制HIV的传播和感染程度的出乎意料的效果。优选组合包括那些与下列的组合：(1) 茚地那韦与依法韦仑和任选AZT和/或3TC和/或ddI和/或ddC；(2) 茚地那韦，和AZT和/或ddI和/或ddC和/或3TC中的任一种，特别是茚地那韦和AZT和3TC；(3) 司他夫定和3TC和/或齐多夫定；(4) 替诺福韦酯富马酸盐和恩曲他滨。
在这些组合中，本发明的化合物和其它活性剂可以分开或联合给药。此外，一种要素的给药可以在其它药剂的给药之前、同时或之后。
通用化学过程（合成方法）
本发明包含式I的化合物、其药物制剂和其在罹患或易受HIV感染的患者中的用途。式I的化合物还包含其可药用盐。在下列方案（在缩写后）中描述构建式I的化合物和可用于其合成的中间体的通用程序。
缩写
在本公开的说明书和实施例各处可使用一个或多个下列缩写，其中大多是本领域技术人员公知的常规缩写：
RT = 室温
BHT = 2,​6-​二-​叔丁基-​4-​羟基甲苯
CSA = 樟脑磺酸
LDA = 二异丙基氨化锂
KHMDS = 双(三甲基甲硅烷基)氨化钾
SFC = 超临界流体色谱法
Quant = 定量
TBDMS = 叔丁基二甲基硅烷
PTFE = 聚四氟乙烯
NMO = 4-甲基吗啉-N-氧化物
THF = 四氢呋喃
TLC = 薄层色谱法
DCM = 二氯甲烷
DCE = 二氯乙烷
TFA = 三氟乙酸
LCMS = 液相色谱-质谱法
Prep = 制备
HPLC = 高效液相色谱法
DAST = (二乙基氨基)三氟化硫
TEA = 三乙胺
DIPEA = N,N-二异丙基乙基胺
HATU = [六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓][O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate]
DCC = N,N'-二环己基碳二亚胺
DMAP = 二甲基氨基吡啶
TMS = 三甲基甲硅烷基
NMR = 核磁共振
DPPA = 二苯基磷酰基叠氮化物
AIBN = 偶氮二异丁腈
TBAF = 四丁基氟化铵
DMF = 二甲基甲酰胺
TBTU = 四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓
Min(s) = 分钟
h = 小时
sat. = 饱和
TEA = 三乙胺
EtOAc = 乙酸乙酯
TFA = 三氟乙酸
PCC = 氯铬酸吡啶鎓
TLC = 薄层色谱法
Tf2NPh = (三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺
dioxane = 1,4-二氧杂环己烷
PG = 保护基
atm = 大气压
mol = 摩尔
mmol= 毫摩尔
mg = 毫克
μg = 微克
μl = 微升
μm= 微米
mm= 毫米。
术语“C-3”和“C-28”是指如根据IUPAC规则编号的三萜核的特定位置（下文参考说明性的三萜：桦木醇描绘位置）：
。
当在方案和方法的通用描述中提到化合物系列时，保持相同的编号。
式I的化合物的制备
通用化学过程方案:
式I的化合物可以由市售（Aldrich等）桦木酸通过下列方案中描述的化学过程制备。
通用反应方案如下所述：
可以如方案1中所述由桦木酸制备式I的化合物。可以在不保护C-3羟基的情况下实现桦木酸的Curtis重排以提供C-17异氰酸酯，其在酸水解后提供C-17胺。该C-17胺然后用胺保护基（即F-moc, Boc）选择性保护以随后在标准条件（即PCC, Dess-Martin试剂等）下进行将C-3羟基氧化成酮。可以通过本领域技术人员已知的方法实现酮转化成其三氟甲磺酸酯。然后除去氨基中的保护基以产生C-17未取代胺。如上所述，通过该三氟甲磺酸酯与相应有机硼酸（boronic acid）的Suzuki偶联实现C-3部分的安装。或者，可以在C-17胺的脱保护之前进行三氟甲磺酸盐与相应有机硼酸的偶联。一旦脱保护，C-17氨基可随后通过本领域技术人员已知的方法，如烷基化、还原胺化、酰化等进一步衍生化。若干种这些方法描述在下列方案（方案2-7）中。在一些情况下，需要附加步骤暴露出可能用保护基官能化的任何官能团（即当Y是COOH时，始终作为相应的酯COOR受到保护直到最后这个步骤）。
该C-17伯胺可以使用本领域技术人员已知的标准方法进一步改性。一些实例显示在下列方案中。
可通过使羧酸与C-17伯胺在合适的偶联试剂，如HATU、DCC和本领域技术人员已知的其它试剂存在下，在碱，如Hunig’s碱、TEA等存在下，在适当的溶剂（DCM、THF、DMF等）中反应制备C-17酰胺。该羧酸酯的水解提供苯甲酸。或者，一些酰胺可通过用相应的羧酸酰氯（代替酸）处理C-17伯胺制备。类似地，可以由C-17伯胺通过使用磺酰氯作为磺酰化剂制备磺胺（sulfonamine）和磺酰胺。
可通过使相应的氨基甲酰氯或异氰酸酯在碱，如Hunig’s碱、TEA等存在下，在适当的溶剂（DCM、THF、DMF等）中反应制备C-17脲。可以以类似方式使用氯甲酸酯/盐代替氨基甲酰氯制备C-17氨基甲酸酯。
C-17伯胺可以在还原性氨基化条件（例如NaBH(OAc)3，在AcOH/NaOAc或Ti(OPr)4存在下，在溶剂如THF、1,4-二氧杂环己烷、DCE或DCM中）下用醛处理以提供C-17仲胺。
一些C-17胺可通过在碱存在下用烷基化剂（R-LG）烷基化C-17伯胺制备，其中LG是离去基团，例如但不限于Br、Cl、I、甲磺酸根、甲苯磺酸根或三氟甲磺酸根。在一些情况下可能需要加热。羧酸酯的水解产生苯甲酸产物。
在一些情况下，通过延长反应时间和加热反应混合物，也可形成二烷基化产物。
或者，一些C-17胺可通过1,4-加成到迈克尔受体上制备。
取代基R、R’和R”可含有可通过本领域技术人员已知的方法进一步改性的官能团（即COOH、COOR、OH、NHR）。根据官能团的性质，可以在进行羧酸的最终脱保护之前或之后进行改性。
或者，C-17仲胺可以使用一些上述方法或本领域技术人员已知的其它标准方法进一步改性（即烷基化、酰化、磺酰化等）。
实施例
下列实施例例示如上文通用描述的式I的化合物的典型合成。这些实施例仅是示例性的并且无意以任何方式限制本公开。试剂和原材料对本领域普通技术人员而言是易得的。
化学过程
所选实施例的典型程序和表征：
除非另外说明，否则以自商业来源所获得的状态直接使用溶剂及试剂，且在氮气氛围下进行反应。在硅胶60 (0.040-0.063粒径；EM Science供应)上进行快速色谱。在BrukerDRX-500f上于500 MHz下(或Bruker AV 400 MHz、Bruker DPX-300B或Varian Gemini 300，300 MHz，如所指示的)记录1H NMR谱。于δ标度上以ppm报道相对于δTMS=0的化学位移。在下列溶剂中对残余质子使用下列内标（internal references）：CDCl3 (δH 7.26)、CD3OD (δH3.30)、乙酸-d4 (乙酸d 4 ) (δH 11.6, 2.07)、DMSO混合物或DMSO-D6_CDCl3 (δH 2.50及8.25)(比率75%:25%)及DMSO-D6 (δH 2.50)。采用标准首字母缩略词描述多重性模式：s(单峰)、br. s(宽单峰)、d(双重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、b(宽)、app(明显)。偶合常数(J)以赫兹(Hertz)表示。所有液相色谱(LC)数据均在使用SPD-10AV UV-Vis检测器的Shimadzu LC-10AS液相色谱上记录，质谱(MS)数据使用用于LC的Micromass Platform以电喷雾模式测定。
第1节
LC/MS方法
方法1
起始%B = 0，最终%B = 100，经2分钟梯度，保持在100%B
流量 = 1 mL/min
波长 = 220 nm
溶剂A = 90%水、10%甲醇、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%甲醇、0.1% TFA
柱 = Phenomenex Luna C18，3 μm，2.0 x 30 mm。
方法2
起始%B = 0，最终%B = 100，经4分钟梯度，保持在100%B
流量 = 0.8 mL/min
波长 = 220 nm
溶剂A = 90%水、10%甲醇、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%甲醇、0.1% TFA
柱 = Phenomenex Luna C18，3 μm，2.0 x 50 mm。
方法3
起始%B = 0，最终%B = 100，经2分钟梯度，保持在100%B
流量 = 1 mL/min
波长 = 220 nm
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Phenomenex Luna C18，3μm，2.0 x 30 mm。
方法4
起始%B = 20，最终%B = 100，经2分钟梯度，保持在100%B
流量 = 0.8 mL/ min
波长 = 220 nm
溶剂A = 90%水、10%甲醇、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%甲醇、0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl，2.5μm，2.1 x 50 mm。
方法5
起始% B = 20，最终% B = 100，梯度时间 = 1.5 min
流量 = 0.8 mL/min
波长 = 220
溶剂A = 10% MeOH - 90%水 - 0.1% TFA
溶剂B = 90% MeOH - 10%水 - 0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5μm。
方法6
起始%B = 2，最终%B = 98经1.5分钟梯度，保持在98%B
流量 = 0.8 mL / min
波长 = 220 nm
溶剂A = 100%水，0.05%TFA
溶剂B = 100%乙腈，0.05% TFA
柱 = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm，1.7 μm。
方法7
起始% B = 20，最终% B = 100，梯度时间 = 3 min
流量 = 0.6 mL/min
波长 = 220
溶剂A = 10% MeOH - 90%水 - 0.1% TFA
溶剂B = 90% MeOH - 10%水 - 0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5μm。
方法8
起始% B = 20，最终% B = 100，梯度时间 = 2 min
流量 = 0.6 mL/min
波长 = 220
溶剂A = 10% MeOH - 90%水 - 0.1% TFA
溶剂B = 90% MeOH - 10%水 - 0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5μm。
方法9
起始%B = 0，最终%B = 100，经2分钟梯度，保持在100%B
流量 = 0.6 mL / min
波长 = 220 nm
溶剂A = 90%水、10%甲醇、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%甲醇、0.1% TFA
柱 = Xbridge Phenyl, 2.5μm，2.1 x 50 mm。
方法10
起始% B = 30，最终% B = 100，经4分钟梯度，保持在100%B
流量 = .8 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水 -甲醇-0.1% TFA
溶剂A = 90%水 -10%甲醇-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%甲醇-0.1% TFA
柱2 = (2) PHENOMENEX-LUNA 2.0 X 50mm 3μm。
方法11
起始% B = 40，最终% B = 100，经4分钟梯度，保持在100%B
流量 = .8 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 乙腈:水: 10mM乙酸铵
溶剂A = 5% 乙腈:95%水: 10mM乙酸铵
溶剂B = 95% 乙腈:5%水: 10mM乙酸铵
柱2 = 2.) PHENOMENEX-LUNA 2.0 x 50mm 3μm。
方法12
起始% B = 20，最终% B = 100，经4分钟梯度，保持在100%B
流量 = .8 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 乙腈:水: 10mM乙酸铵
溶剂A = 5% 乙腈:95%水: 10mM乙酸铵
溶剂B = 95% 乙腈:5%水: 10mM乙酸铵
柱2 = 2.) PHENOMENEX-LUNA 2.0 x 50mm 3μm。
SFC方法:
方法1
仪器 = SFC Thar 350/A5
流量 = 220 mL/min
波长 = 220 nm
流动相 = CO2/[庚烷/IPA = 4:1 (v:v)] = 80/20等度
柱 = Whelko(rr) 50 x 5 cm, 10 μm
注射体积 = 1.0 mL [溶质浓度 = 100 mg/mL庚烷/IPA 4:1 (v:v)]
注射程序: 叠层式注射（每2分钟1.0毫升）。
制备型HPLC方法:
制备型HPLC方法1
起始%B = 30，最终%B = 67，经16分钟梯度，变到100%B持续 10分钟
流量 = 100 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，50 x 250 mm。
制备型HPLC方法2
起始%B = 0，最终%B = 100，经20分钟梯度，保持100%B 4分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl，5 μm，30 x 100 mm。
制备型HPLC方法3
起始%B = 15，最终%B = 100，经20分钟梯度，保持100%B 4分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl，5 μm，30 x 100 mm。
制备型HPLC方法4
起始%B = 20，最终%B = 100，经20分钟梯度，保持100%B 5分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 150 mm。
制备型HPLC方法5
起始%B = 30，最终%B = 100，经15分钟梯度，保持100%B 5分钟
流量 = 20 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Xbridge Phenyl, 5 μm, 19 x 250 mm。
制备型HPLC方法6
起始%B = 20，最终%B = 65，经20分钟梯度，变到100%B持续 5分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm。
制备型HPLC方法7
起始%B = 20，最终%B = 100，经30分钟梯度，保持100%B 4分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm。
制备型HPLC方法8
起始%B = 30，最终%B = 100，经18分钟梯度，保持100%B 2分钟
流量 = 25 mL / min
通过ELSD收集
溶剂A = 95%水、5%乙腈、10 mM乙酸铵
溶剂B = 5%水、95%乙腈、10 mM乙酸铵
柱 = XBridge OBD Prep Shield RP18 19x100 mm 5μm。
制备型HPLC方法9
起始%B = 10，最终%B = 100，经10分钟梯度，保持100%B 5分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 100 mm。
制备型HPLC方法10
起始%B = 10，最终%B = 100，经10分钟梯度，保持100%B 5分钟
流量 = 50 mL / min
溶剂A = 95%水、5%乙腈、10mM乙酸铵
溶剂B =5%水、95%乙腈、10mM乙酸铵
柱 = Xbridge OBD Prep Shield RP，5μm，19 x 100mm。
制备型HPLC方法11
起始%B = 25，最终%B = 100，经15分钟梯度，保持100%B
流量 = 40 mL / min
溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA
溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 100 mm。
制备型HPLC方法12
起始% B = 20，最终% B = 100，经15分钟梯度，保持在100% B 4分钟
流量 = 50 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水- 乙腈- TFA
溶剂A = 90%水 -10%乙腈-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%乙腈-0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 150 mm。
制备型HPLC方法13
起始% B = 30，最终% B = 100，经15分钟梯度，保持在100% B 15分钟
流量 = 50 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水 - 乙腈- TFA
溶剂A = 90%水 -10%乙腈-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%乙腈-0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 150 mm。
制备型HPLC方法14
起始% B = 30，最终% B = 100，经20分钟梯度，保持在100% B 6分钟
流量 = 50 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水 - 乙腈- TFA
溶剂A = 90%水 -10%乙腈-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%乙腈-0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 150 mm。
制备型HPLC方法15
起始% B = 30，最终% B = 100，经15分钟梯度，保持在100% B 5分钟
流量 = 50 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水 - 乙腈- TFA
溶剂A = 90%水 -10%乙腈-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%乙腈-0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 150 mm。
制备型HPLC方法16
起始% B = 20，最终% B = 100，经10分钟梯度，保持在100% B 4分钟
流量 = 50 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水 - 乙腈- TFA
溶剂A = 90%水 -10%乙腈-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%乙腈-0.1% TFA
柱 = Waters Sunfire C18，5 μm，30 x 150 mm。
制备型HPLC方法17
起始% B = 30，最终% B = 50经30分钟梯度，保持在50% B 5分钟
流量 = 25 ml/min
波长 = 220
溶剂对 = 水 - 乙腈- TFA
溶剂A = 90%水 -10%乙腈-0.1% TFA
溶剂B = 10%水 -90%乙腈-0.1% TFA
柱 = YMC-OBD 20X100 mm S5。
1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸乙酯的制备
步骤1. 1-(羟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯的制备
用氮气吹扫（flush）2-(羟甲基)丙烯酸乙酯（5.21克，40毫摩尔）和(丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷（8.54克，60.0毫摩尔）在甲苯（100毫升）中的溶液，将其密封并在耐压烧瓶中在150℃下加热48小时。将所得浅黄色反应混合物冷却至室温并在真空中浓缩以产生油形式的粗产物，其不经提纯即用于下一步骤。MS: m/e 201.05 (M+H-甲硅烷基)+, 0.839min（方法4）。
步骤2. 1-(羟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯的制备
向1-(羟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯（10.9克，40.0毫摩尔）在THF（5毫升）中的溶液中加入HCl（0.005N）（1毫升，5.00微摩尔）。将所得溶液在室温下搅拌18小时。该反应混合物用EtOAc（2 x 10毫升）萃取，用饱和NaHCO3水溶液（5毫升），接着用盐水（10毫升）洗涤。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。粗产物通过使用乙酸乙酯/己烷的硅胶色谱法提纯以产生无色油形式的标题化合物（3克，37.4%）。MS: m/e200.95 (M+H)+, 0.853 min（方法4）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.28 (q, J=7.3 Hz,2H), 3.75 (s, 2H), 2.57 - 2.45 (m, 2H), 2.45 - 2.33 (m, 4H), 1.86 - 1.71 (m,2H), 1.39 - 1.30 (m, 3H)。
步骤3. 4-氧代-1-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)甲基)环己烷甲酸乙酯的制备
在-10℃下向1-(羟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯（1,170毫克，5.84毫摩尔）和吡啶（0.614毫升，7.60毫摩尔）在DCM（10毫升）中的经搅拌混合物中逐滴加入三氟甲磺酸酐（7.60毫升，7.60毫摩尔）。所得混合物在-10℃下搅拌30分钟并用冰冷1N HCl溶液和盐水洗涤。经分离的有机层经硫酸钠干燥。除去溶剂且残留物不经提纯原样使用。MS: m/e 333.05(M+H)+, 1.969 min（方法4）。
步骤4. 1-(氟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯的制备
在25℃下向4-氧代-1-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)甲基)环己烷甲酸乙酯（1.941克，5.84毫摩尔）在DCM（10毫升）中的经搅拌混合物中逐滴加入四丁基二氟化铵（3.63毫升，7.01毫摩尔）。将所得混合物在25℃下搅拌18小时。反应混合物在真空下浓缩。在50毫升己烷中搅拌所得残留物时形成两层。将顶层滗析到烧瓶中并在真空下干燥以产生无色油。这种残留物通过使用12 g硅胶柱和0-35% EtOAc（在己烷中）梯度的快速色谱法提纯以产生无色油形式的标题化合物（0.20g, 9.0%）。MS: m/e 203.15 (M+H)+, 1.470 min（方法4）。1HNMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.49 - 4.30 (m, 2H), 4.25 - 4.11 (m, 2H), 2.50 - 2.35(m, 4H), 2.33 - 2.20 (m, 2H), 1.80 - 1.64 (m, 2H), 1.30 - 1.20 (m, 3H). 19FNMR (376MHz，氯仿-d) δ -223.02 - -225.00 (m, 1F)。
步骤5. 1-(氟甲基)-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯的制备
在-78℃下将KHMDS（1.27毫升，1.27毫摩尔）添加到1-(氟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯（0.20克，0.98毫摩尔）和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺（0.38克，1.07毫摩尔）在THF（20毫升）中的淡黄色溶液中。将所得黄色溶液在-78℃下搅拌2小时。将该反应混合物用饱和氯化铵水溶液猝灭并用10毫升EtOAc萃取一次。有机层用盐水（10毫升）洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。粗产物通过使用12g硅胶柱和0-10% EtOAc（在己烷中）梯度的快速色谱法提纯以产生无色油形式的标题化合物（179毫克，54.7%）。1HNMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.84 - 5.69 (m, 1H), 4.60 - 4.37 (m, 2H), 4.30 - 4.15(m, 2H), 2.89 - 2.70 (m, 1H), 2.56 - 2.33 (m, 2H), 2.32 - 2.14 (m, 2H), 2.07- 1.81 (m, 1H), 1.34 - 1.22 (m, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.18 - -225.70 (m, 1F)。
步骤6. 向含有1-(氟甲基)-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯（0.179克，0.53毫摩尔）的烧瓶中加入双(频哪醇合)二硼（0.143克，0.56毫摩尔）、乙酸钾（0.156克，1.59毫摩尔）和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁钯(II)二氯化物（0.013克，0.016毫摩尔）。该混合物用二氧杂环己烷（8毫升）稀释，用氮气吹扫，并加热至70℃ 5小时。在冷却至室温后，该混合物用水（25毫升）稀释并用乙酸乙酯（2 x 20毫升）萃取。合并的有机层用盐水洗涤并经硫酸镁干燥。通过过滤除去干燥剂并将滤液减压下浓缩。残留物通过使用12g Isco硅胶柱和0-10% EtOAc（在己烷中）梯度的快速色谱法提纯。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩以产生清澈的无色油形式的标题化合物（91毫克，54%）。MS: m/e 313.20(M+H)+, 2.299 min（方法4）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 6.50 (td, J=3.9, 2.0 Hz,1H), 4.59 - 4.32 (m, 2H), 4.23 - 4.13 (m, 2H), 2.74 - 2.52 (m, 1H), 2.30 -2.08 (m, 3H), 1.98 - 1.69 (m, 2H), 1.32 - 1.20 (m, 15H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.59 - -226.36 (m, 1F) 。
用于制备1-(氟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯的替代性制备方法
步骤1. 2-(氟甲基)丙烯酸乙酯的制备
在-78℃下向2-(羟甲基)丙烯酸乙酯（5克，38.4毫摩尔）在DCM（50毫升）中的溶液中加入DAST（6.60毫升，49.9毫摩尔）。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时。将该混合物温热至25℃并连续搅拌另外3小时。通过添加CH2Cl2（20毫升）和NaHCO3饱和水溶液（20毫升）猝灭该反应混合物。分离有机层，水层用CH2Cl2（20毫升）萃取两次。合并的有机萃取物经硫酸钠干燥并蒸发产生残留油，其不经提纯即用于下一步骤。1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 6.49 -6.33 (m, 1H), 6.03 - 5.87 (m, 1H), 6.45 - 5.84 (m, 2H), 4.27 (q, J=7.1 Hz,2H), 1.33 (t, J=7.1 Hz, 3H). 19F NMR (470MHz，氯仿-d) δ -220.33 - -221.86 (m,1F)。
步骤2. 1-(氟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯的制备
将2-(氟甲基)丙烯酸乙酯（4.7克，35.6毫摩尔）)和(丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷（10.12克，71.1毫摩尔）在甲苯（100毫升）)中的溶液用氮气吹扫，将其密封并在压力容器中在150℃下加热48小时。将所得淡黄色溶液冷却至室温并在减压下浓缩以产生油形式的标题化合物，其不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.83 (t, J=3.3 Hz, 1H), 4.64 - 4.38 (m, 2H), 4.25 - 4.12 (m, 2H), 2.62 - 2.48 (m, 1H),2.19 - 1.99 (m, 4H), 1.93 - 1.78 (m, 1H), 1.34 - 1.22 (m, 3H), 0.24 - 0.15(m, 9H). 19F NMR (470MHz，氯仿-d) δ -224.80 - -225.37 (m, 1F)。
步骤3. 1-(氟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯的制备
向1-(氟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯（9.76克，35.6毫摩尔）在THF（5毫升）中的溶液中加入HCl（0.005N）（1毫升，5.00微摩尔）。所得溶液在室温下搅拌整夜。该反应混合物用EtOAc（2 x 10毫升）萃取，用饱和NaHCO3水溶液（5毫升），接着盐水（10毫升）洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。粗产物通过使用80 g硅胶柱和0-25%EtOAc（在己烷中）梯度的快速色谱法提纯。收集含有预期产物的级分并在减压下浓缩以产生无色油形式的标题化合物（6.5g, 90.2%）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.59 - 4.42(m, 2H), 4.30 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.58 - 2.34 (m, 6H), 1.88 - 1.73 (m, 2H),1.33 (t, J=7.2 Hz, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -223.54 - -223.99 (m, 1F)。
1-(氟甲基)-4-氧代环己烷甲酸苄酯的制备
方法A.
步骤1. 1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯的制备
在3升3颈圆底烧瓶中装入4-氧代环己烷甲酸乙酯（100克，570毫摩尔）、乙-1,2-二醇（0.159升，2849毫摩尔）、((1S,4R)-7,7-二甲基-2-氧代双环[2.2.1]庚-1-基)甲磺酸（1.324克，5.70毫摩尔）和干甲苯（1.2升）。安装Dean-Stark分水器和冷凝器并将该混合物在搅拌下加热至回流。将不混溶馏出物收集在Dean-Stark分水器中并定期取出。在28小时总回流时间后，从Dean-Stark分水器中取出总共82毫升不混溶馏出物。在已将该混合物冷却至大约40℃后，在快速搅拌下将饱和NaHCO3（400毫升）添加到反应混合物中。将该混合物转移到分液漏斗中，摇振且相分离。有机层用水（4 x 500毫升），然后用5% NaHCO3（200毫升），然后用盐水（100毫升）洗涤。该有机材料经无水MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩以产生略微黄色的粘性油（118.50克，97%收率）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.15 (q, J=7.3Hz, 2H), 3.96 (s, 4H), 2.41 - 2.27 (m, 1H), 1.96 (dt, J=8.7, 4.3 Hz, 2H),1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.68 - 1.49 (m, 2H), 1.27 (t, J=7.1 Hz, 3H). 13C NMR(101MHz，氯仿-d) δ 175.2, 108.1, 64.3, 60.3, 41.6, 33.8, 26.3, 14.3。
步骤2: 8-甲酰基-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯的制备
经由套管经5分钟向1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯（32.31克，151毫摩尔）在THF（250毫升）中的-78℃溶液中加入2M二异丙基氨化锂（98毫升，196毫摩尔）在THF中的溶液。将所得棕色溶液在-78℃下搅拌。在1小时后，将该冷浴换成冰浴并将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将该反应混合物再冷却至-78℃并用经45分钟逐滴添加的甲酸乙酯（18.65毫升，226毫摩尔）在THF（40毫升）中的溶液处理。所得浅棕色反应混合物在-78℃下搅拌1小时。移除冷浴并向该混合物中逐滴加入饱和NH4Cl水溶液（250毫升）并将该混合物在环境温度下搅拌30分钟。将所得黄色混合物用EtOAc（3 x 300毫升）萃取。合并的有机相用0.5NHCl（300毫升），然后用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成棕色粘性油。该粗材料通过在硅胶上的快速柱色谱法提纯（750 g二氧化硅，分步洗脱9:1己烷/EtOAc和5:1己烷/EtOAc）以提供回收的原材料1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯（8.6克，40.1毫摩尔，26.6%收率）和所需产物8-甲酰基-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯（20.1克，83毫摩尔，55.0%收率），二者都是粘性黄色油形式。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.50 (s, 1H), 4.17(q, J=7.2 Hz, 2H), 3.94 - 3.86 (m, 4H), 2.24 - 2.09 (m, 2H), 2.01 (ddd, J=13.5, 8.3, 5.1 Hz, 2H), 1.75 - 1.48 (m, 4H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H)。
步骤3: 8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯的制备
向8-甲酰基-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯（28.9克，119毫摩尔）在乙醇（300毫升）中的0℃溶液中加入硼氢化钠（5.30克，137毫摩尔）并在0℃下搅拌所得混合物。在3小时后，该反应混合物用经滴液漏斗逐滴添加的饱和NH4Cl水溶液（200毫升）猝灭。移除冰浴，缓慢地用H2O（150毫升）处理所得料浆。过滤所得混合物以除去少量的白色固体。浓缩该液体滤液以除去大部分有机溶剂，用EtOAc（4 x 250毫升）萃取剩余物。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤，浓缩并在减压下干燥以产生清澈的粘性油形式的8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯（27.7克，113毫摩尔，95%收率）。来自这一实验的材料不经进一步提纯即直接用于下一步骤。在单独的实验中，该粗材料通过快速柱色谱法提纯（SiO2，洗脱3:1己烷:EtOAc），从而以91%收率产生8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.18 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.98 - 3.87(m, 4H), 3.61 (d, J=6.1 Hz, 2H), 2.23 (br. s., 1H), 2.17 - 2.07 (m, 2H), 1.72- 1.51 (m, 6H), 1.32 - 1.20 (m, 3H)。
步骤4. 8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯的制备
向8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯（ 27.6克，113毫摩尔）在THF（150毫升）和MeOH（50毫升）中的溶液中加入3N氢氧化锂水溶液（45.2毫升，136毫摩尔）并将该混合物在搅拌下加热至60℃ 17小时。然后加入另外3N氢氧化锂水溶液（30.1毫升，90毫摩尔）并将该混合物加热至60℃另外14小时。将反应混合物在减压下浓缩并干燥以产生含有相应羧酸酯的残留物（24.5克，107毫摩尔），其不经进一步提纯即使用。
向在DMF（200毫升）中的这种残留物加入苄基溴（12.98毫升，107毫摩尔）并将所得混合物在室温下搅拌17小时。将反应混合物浓缩至原始体积的大约一半，用EtOAc（250毫升）稀释并用1N HCl（200毫升）洗涤。用3 x 250 mL EtOAc萃取水相。合并的有机相用H2O（100毫升）、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成浅黄色粘性油。该粗材料通过快速柱色谱法提纯（SiO2，洗脱分步梯度70:30 hex:EtOAc，然后1:1 hex:EtOAc）并在减压下干燥以产生8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯（23.1克，71.6毫摩尔，经3个步骤63%收率）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.40 - 7.28 (m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.91 (s,4H), 3.64 (s, 2H), 2.34 (br. s., 1H), 2.22 - 2.12 (m, 2H), 1.70 - 1.63 (m,4H), 1.62 - 1.54 (m, 2H). 13C NMR (101MHz，氯仿-d) δ 175.3, 135.8, 128.5 (s,2C), 128.1, 127.8, 108.3, 68.5, 66.4, 64.2, 64.1, 48.1, 31.3, 27.9。
步骤5. 8-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯的制备
在500毫升圆底烧瓶中合并8-(羟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯（14.9克，48.6毫摩尔）与干DCM（250毫升）。该溶液在冰/丙酮浴中冷却至大约-10℃并向其中加入吡啶（5.31毫升，65.7毫摩尔），接着经30分钟逐滴加入Tf2O（11.09毫升，65.7毫摩尔）。将该略微黄色的悬浮液在0℃下（冰水浴）搅拌1.5小时。将含有显著悬浮固体的所得深橙色混合物在减压下浓缩以留下残留物，将其置于真空下以除去过量三氟甲磺酸酐，然后将该残留物再溶解在DCM（150毫升）中。过滤该混合物以除去显著量的白色固体，用DCM对其冲洗。浓缩该深红/橙色滤液并通过快速硅胶柱色谱法提纯（330 g二氧化硅，洗脱100% DCM）。合并产物级分并浓缩成橙色稠油，将其在搅拌下在高真空下放置整夜。颜色变成蓝/绿色。由此获得蓝/绿色粘性油形式的所需产物（20.94克，98%收率）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ7.48 - 7.30 (m, 5H), 5.21 (s, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.04 - 3.87 (m, 4H), 2.30 -2.14 (m, 2H), 1.76 - 1.56 (m, 6H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -74.39 (s, 1F)。
步骤6. 8-(氟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯的制备
在500毫升圆底烧瓶中在氮气气氛下合并8-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯（20.76克，47.4毫摩尔）与经套管引入的无水THF（150毫升）。经加料漏斗向该蓝色溶液中逐滴加入TBAF（1.0M在THF中（71.0毫升，71.0毫摩尔），经15分钟逐滴加入）。在加入TBAF时该混合物立即变成鲜黄色。将该混合物在室温下搅拌1小时。浓缩该粗制混合物以留下稠油，其用乙酸乙酯（700毫升）稀释并用水（2 x 250毫升）和用盐水（100毫升）洗涤。有机相经MgSO4干燥，过滤并浓缩成浓稠的黄色残留物。通过快速硅胶柱色谱法提纯（330 g二氧化硅，洗脱梯度100%己烷至2:1己烷:EtOAc）产生黄色油形式的所需产物（13.73克，94%收率）。LCMS: m/e 309.2 (M+H)+, 1.27 min（方法6）。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 7.44 - 7.31 (m, 5H), 5.21 (s, 2H), 4.45 (d, J=47.2 Hz, 2H),4.01 - 3.89 (m, 4H), 2.28 - 2.16 (m, 2H), 1.75 - 1.55 (m, 6H). 19F NMR(376MHz，氯仿-d) δ -223.25 (t, J=46.8 Hz, 1F)。
步骤7. 在冰浴中冷却的2升圆底烧瓶中合并8-(氟甲基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷-8-甲酸苄酯（13.72克，44.5毫摩尔）与THF（500毫升），然后经2分钟缓慢加入盐酸1.5M水溶液（534毫升，801毫摩尔）。移除冰浴并将该混合物在室温下搅拌15小时。将该混合物在减压下浓缩以除去有机物，并将残余物用乙酸乙酯（300毫升）萃取。将该乙酸乙酯相用水（2x 200毫升）和用盐水（50毫升）洗涤。在减压下浓缩提供黄色油形式的所需产物（12.13克，定量）。LCMS: m/e 265.3 (M+H)+, 1.19 min（方法6）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.47 -7.32 (m, 5H), 5.27 (s, 2H), 4.52 (d, J=47.2 Hz, 2H), 2.57 - 2.42 (m, 4H),2.42 - 2.31 (m, 2H), 1.87 - 1.76 (m, 2H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -223.41(t, J=46.8 Hz, 1F)。
方法B
步骤1. 2-(羟甲基)丙烯酸苄酯的制备
在1升烧瓶中放入丙烯酸苄酯（44.6毫升，292毫摩尔）、二氧杂环己烷（290毫升）、1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷（32.7克，292毫摩尔）和水（270毫升）。该混合物在室温下剧烈搅拌以形成乳液。向搅拌中的混合物中加入甲醛水溶液（37%，23.9毫升，321毫摩尔）并在室温下继续搅拌14小时。用二氯甲烷（3 x 150毫升）萃取该粗反应混合物。分离有机层，合并并用饱和氯化铵水溶液和HCl（0.2 N）的50:50混合物洗涤。蒸发和在45℃下在减压（2 cm Hg）下浓缩产生49.1克自由流动料浆。将粗产物在用EtOAc/己烷的梯度混合物洗脱的硅胶柱上提纯以产生清澈无色料浆形式的标题化合物（27克，141毫摩尔，48%）。LCMS: m/e 193.05 (M+H)+, 1.78 min (方法1). 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.50 - 7.30 (m, 5H), 6.34 (s,1H), 5.89 (s, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.38 (d, J=6.4 Hz, 2H), 2.20 (t, J=6.6 Hz,1H)；13C NMR (126MHz，氯仿-d) δ 166.1, 139.3, 135.7, 128.7, 128.4, 128.2, 126.2,66.6, 62.7。
步骤2. 2-(氟甲基)丙烯酸苄酯的制备
在氮气下将2-(羟甲基)丙烯酸苄酯（13.7克，71.3毫摩尔）溶解在干二氯甲烷（100毫升）中并将该混合物在-78℃下冷却。使用聚乙烯吸移管向该搅拌中溶液中经5分钟时间分4份加入二乙基氨基三氟化硫（DAST, 13.0毫升，98毫摩尔）。形成淡橙色溶液。一旦添加完成，移除干冰浴并使反应温度升至室温。在室温下继续搅拌总共4小时。将反应混合物逐滴转移到饱和碳酸氢钠水溶液和水的冷却(~4℃)的50:50混合物中。一旦转移所有粗制反应混合物，将其用BHT稳定的醚（3 x 150毫升）萃取。合并有机层并用水（50毫升）洗涤一次。在减压下在低于环境温度（~15℃）下从有机相中除去溶剂至恒定重量（14.2克，定量）。该粗材料立即用于下一步骤。1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.44 - 7.34 (m, 5H), 6.49 - 6.43(m, 1H), 5.99 (dt, J=2.8, 1.5 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 5.13 (d, J=46.5 Hz, 2H)；19F NMR (470MHz，氯仿-d) δ -220.91 (t, J=46.2 Hz)。
步骤3 - 1-(氟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向500毫升可再密封的压力容器中加入在甲苯（200毫升）中的粗原材料2-(氟甲基)丙烯酸苄酯（14.2克，73.1毫摩尔）和(丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷（Sigma Aldrich，材料按供应时那样使用，18.73克，132毫摩尔）。在-78℃下将该容器抽空至80微米Hg，接着用氮气吹扫。该方法重复两次。密封该烧瓶并温热至RT，然后将其浸入125℃下的油浴22小时。使该混合物冷却至RT。从粗反应（crude reaction）中取出小等分试样（25微升），在RT下真空干燥以在1H和19F中NMR分析。NMR结果与标题化合物和少量相应的Diels-Alder区域异构体的形成相符。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.43 - 7.29 (m, 5H), 5.18 (s, 2H),4.80 (d, J=3.0 Hz, 1H), 4.52 (dq, J=46.9, 8.4 Hz, 2H), 2.65 - 2.49 (m, 1H),2.21 - 2.00 (m, 4H), 1.92 - 1.78 (m, 1H), 0.24 - 0.12 (m, 9H)；19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -224.76 (t, J=47.7 Hz, 1F)和次要19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.20(t, J=46.8 Hz, 0.06F)。该粗材料在真空（20微米Hg）下在~35℃下蒸发并干燥至恒定重量（24.6克，定量）。这种粗材料不经进一步提纯原样用于下一步骤。
步骤4. 在室温下将来自前一步骤的粗材料（24.6 gm, 73毫摩尔）溶解在THF（200毫升）中以形成清澈溶液。加入1N HCl水溶液（2毫升，2毫摩尔）和水4毫升。将该清澈溶液在室温下搅拌总共16小时。将该粗制反应混合物用150毫升饱和碳酸氢铵钠水溶液和水的50:50混合物猝灭。用EtOAc萃取（3 x 75毫升）有机层。合并有机层并蒸发至干以产生18.8克稠料浆。将该粗残留物使用330 g硅胶柱提纯，用~25柱体积的0至25 % v/v乙酸乙酯（在己烷中）的梯度混合物洗脱以提供标题化合物（15.6克，81.0%）。LCMS: m/e 265.15 (M+H)+,1.60 min（方法3). 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.50 - 7.30 (m, 5H), 5.26 (s, 2H),4.43 (d, J=46.9 Hz, 2H), 2.54 - 2.29 (m, 6H), 1.90 - 1.71 (m, 2H)；19F NMR(376MHz，氯仿-d) δ -223.47 (t, J=46.8 Hz, 1F)。
(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯和(S)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备.
步骤1. 1-(氟甲基)-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在500毫升圆底烧瓶中在无水四氢呋喃（250毫升）中合并1-(氟甲基)-4-氧代环己烷甲酸苄酯（12.65克，47.9毫摩尔）和N,N-双(三氟甲基磺酰基)苯胺（18.81克，52.7毫摩尔）。在干冰/丙酮浴中将该溶液冷却至-78℃。向该冷溶液中经30分钟逐滴加入双(三甲基硅烷基)氨基钾（potassium hexamethyldisilazide）（0.5M在甲苯中（105毫升，52.7毫摩尔））。将该混合物在-78℃下搅拌总共2.5小时，然后从冷浴中抬出并在室温下搅拌另外20分钟。将该混合物放回-78℃浴中并在搅拌下向其加入125毫升饱和氯化铵水溶液。将所得悬浮液从冷浴中取出并在搅拌的同时使其达到室温。将该混合物在减压下浓缩以除去有机溶剂，然后向该混合物中加入乙酸乙酯（600毫升）和水（300毫升）并摇振该混合物和分离相。用水（2 x200毫升）和用盐水（50毫升）洗涤有机层。有机层经MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩以留下黄/橙色油。将该粗残留物通过快速硅胶柱色谱法提纯（800 g二氧化硅，等度洗脱3:2己烷:DCM）。合并产物级分并在减压下浓缩以产生极浅黄色油形式的所需产物（17.43克，92%收率）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.43 - 7.31 (m, 5H), 5.78 (br. s., 1H), 5.26 -5.15 (m, 2H), 4.52 (dm, J=46.7 Hz, 2H), 2.78 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.52 - 2.33(m, 2H), 2.33 - 2.17 (m, 2H), 1.94 (dt, J=13.8, 6.9 Hz, 1H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -73.88 (s, 1F), -225.02 (t, J=46.8 Hz, 1F)。
步骤2. 1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在500毫升圆底烧瓶中合并1-(氟甲基)-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苄酯（17.42克，44.0毫摩尔）、乙酸钾（0.030克，0.307毫摩尔）、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)（11.72克，46.1毫摩尔）、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁钯(II)二氯化物（3.03毫克，3.69微摩尔）和无水二氧杂环己烷（200毫升）。将该烧瓶置于氮气气氛下并加热至70℃。在5小时后，使该混合物冷却至室温并静置整夜。将该反应混合物在减压下浓缩，将该粗制深红色残留物用乙酸乙酯（600毫升）和水（300毫升）稀释。摇振该混合物并分离相。用水（250毫升），然后用盐水（100毫升）洗涤有机物。有机相经无水MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩成深红色粘性油。该粗制混合物通过快速硅胶柱色谱法提纯（800 g二氧化硅；分步洗脱1:3己烷:DCM 4 L，然后100% DCM 5 L）。来自初次提纯的混合级分中的2克材料在80克硅胶上再提纯（洗脱梯度100%己烷至100% DC）以产生无色稠油形式的所需产物（13.06克，79.4%收率）。LCMS: m/e 375.3 (M+H)+, 1.52 min（方法6）。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 7.44 - 7.30 (m, 5H), 6.54 (br. s., 1H), 5.25 - 5.11 (m,2H), 4.51 (dm, J=47.4 Hz, 2H), 2.67 (d, J=19.3 Hz, 1H), 2.29 - 2.10 (m, 3H),2.02 - 1.89 (m, 1H), 1.86 - 1.74 (m, 1H), 1.28 (s, 12H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.62 (t, J=45.1 Hz, 1F)。
步骤3. 外消旋1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（11.15克，0.0298毫摩尔）通过超临界流体色谱法（SFC方法1）提纯以提供分离的单一异构体标题化合物：
(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯。这是从SFC手性分离中洗脱的第一种异构体。将该产物以黄色油形式分离（5.45克，98% SFC回收率，99.2%手性纯度）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.42 - 7.30 (m, 5H),6.54 (br. s., 1H), 5.24 - 5.12 (m, 2H), 4.51 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 2.67 (d, J=19.3 Hz, 1H), 2.27 - 2.10 (m, 3H), 2.00 - 1.90 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H),1.28 (s, 12H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.62 (t, J=46.8 Hz, 1F)。
(S)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯。这是从SFC手性分离中洗脱的第二种异构体。将该产物以黄色油形式分离（4.94克，89% SFC回收率，99.3%手性纯度）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.43 - 7.31 (m, 5H),6.54 (br. s., 1H), 5.24 - 5.13 (m, 2H), 4.52 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 2.68 (d, J=19.3 Hz, 1H), 2.27 - 2.10 (m, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H),1.28 (s, 12H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.61 (t, J=48.6 Hz, 1F)。
4-(2-溴乙基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物的制备
步骤1 2-(二氢-2H-噻喃-4(3H)-亚基)乙酸乙酯的制备
根据Lammek、Derdowska和Rekowski在Polish Journal of Chemistry 64, 351(1990)中的报道制备标题中间体。
步骤2: 2-(四氢-2H-噻喃-4-基)乙酸乙酯的制备
根据PCT WO 00/44713中的公开以两个步骤（1和2）以64%收率制备标题中间体。
步骤3: 2-(四氢-2H-噻喃-4-基)乙醇的制备
在500毫升烧瓶中向2-(四氢-2H-噻喃-4-基)乙酸乙酯（6.4克，34.0毫摩尔）在二乙醚（100毫升）中的经冷却（冰浴，0℃）溶液中逐滴加入氢化锂铝（34.0毫升，34.0毫摩尔）在THF中的储备1M溶液。最初形成浑浊悬浮液并观察到氢气逸出。当加入大约2/3的LiAlH4试剂时，该反应混合物变清澈。移除冰浴并使反应混合物温热至环境温度（~ 19-21℃）4小时。该反应用在0.5N HCl中的半饱和NH4Cl溶液逐滴猝灭直至形成经自由搅拌的白色悬浮液。通过过滤除去固体并用额外的溶剂洗涤。合并滤液和洗液并在真空下浓缩以产生标题中间体（4.9 gm 99%）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 3.71 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.78 - 2.53 (m,4H), 2.03 (d, J=13.3 Hz, 2H), 1.52 (dd, J=6.8, 3.3 Hz, 3H), 1.46 - 1.33 (m,2H)。
步骤4: 4-(2-羟乙基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物的制备
在室温下向2-(四氢-2H-噻喃-4-基)乙醇（182毫克，1.244毫摩尔）在丙酮（3毫升）中的溶液中加入Oxone®（1.53 gm, 2.5毫摩尔）在水（7毫升）中的悬浮液。检测到温和放热并在室温下继续搅拌2小时。用乙酸乙酯（3 x 20毫升）萃取该粗制反应悬浮液。合并有机层并在真空下浓缩以提供含有标题化合物的稠料浆（66毫克29.8%）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ3.74 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.12 - 2.92 (m, 4H), 2.15 (dd, J=13.8, 2.5 Hz, 2H),1.96 - 1.84 (m, 2H), 1.84 - 1.73 (m, 1H), 1.61 (q, J=6.4 Hz, 2H)。
步骤5: 甲磺酸2-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙酯的制备
将4-(2-羟乙基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物（30毫克，0.168毫摩尔）在DCM（1毫升）中的溶液在冰浴中在氮气下冷却。加入DIPEA（0.088毫升，0.505毫摩尔），接着加入甲磺酰氯（0.020毫升，0.252毫摩尔）。将该反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将该反应混合物用水（2毫升）稀释并用DCM（3 x 5毫升）萃取。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经Na2SO4干燥并在减压下浓缩。粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上用50-100% EtOAc/己烷洗脱的快速色谱法提纯以产生油形式的所需化合物（37毫克，86%）。LCMS m/e 257.10 (M+H)+, 1.086min（方法3）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.29 (t, J=5.9 Hz, 2H), 3.03 (s, 3H),3.11 - 2.94 (m, 4H), 2.14 (dt, J=14.2, 1.2 Hz, 2H), 1.98 - 1.73 (m, 5H)。
步骤6: 4-(2-溴乙基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物的制备
向甲磺酸2-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙酯（37毫克，0.144毫摩尔）在THF（2毫升）中的溶液中加入溴化锂（37.6毫克，0.433毫摩尔）。该混合物在室温下搅拌18小时。除去溶剂，将该残留物溶解在DCM（20毫升）中并用盐水（20毫升）洗涤。用DCM（2 X 20毫升）萃取水层。合并的DCM层经Na2SO4干燥并在减压下浓缩。粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上用40-75% EtOAc/己烷洗脱的快速色谱法提纯以产生固体形式的所需产物（30毫克，86%）。LCMS m/e 241.05 (M+H)+, 1.5分钟（方法3）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 3.46 (t, J=6.4Hz, 2H), 3.12 - 2.94 (m, 4H), 2.17 - 2.07 (m, 2H), 1.96 - 1.80 (m, 5H)。
4-(1-氨基-2-甲基丙-2-基)硫代吗啉1,1-二氧化物的制备
步骤1: N-(2-氨基-2-甲基丙基)乙酰胺的制备
根据美国专利4906661中公开的程序以82%制备标题中间体。1H NMR (500MHz，氯仿-d)δ 6.01 (br. s., 1H), 3.15 (d, J=5.8 Hz, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.14 (s, 6H)。
步骤2: N-(2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-甲基丙基)乙酰胺的制备
在可再密封的压力容器中向N-(2-氨基-2-甲基丙基)乙酰胺（2.3克，17.67毫摩尔）在2-丙醇（28毫升）中的溶液中加入(乙烯基磺酰基)乙烯（2.3克，19.47毫摩尔）。用氮气对其吹扫并在100℃下加热4小时。在冷却至室温后，固体开始分离。过滤固体，用异丙醇洗涤并干燥以产生所需产物（2.7 gm, 61.5%）。1H NMR (500MHz，氯仿-d) d 5.73 (br. s., 1H),3.28 (d, J=5.2 Hz, 2H), 3.12 - 3.00 (m, 8H), 2.04 (s, 3H), 1.15 - 1.10 (m,6H)。
步骤3: 4-(1-氨基-2-甲基丙-2-基)硫代吗啉1,1-二氧化物的制备
向N-(2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-甲基丙基)乙酰胺（100毫克，0.403毫摩尔）在MeOH（2毫升）中的溶液中加入1N NaOH（2.013毫升，2.013毫摩尔）并将该混合物在70℃下搅拌18小时。添加另外的NaOH（2.013毫升，2.013毫摩尔）并将该溶液在90℃下搅拌24小时。将该反应混合物在减压下浓缩以除去MeOH，用EtOAc（2 x 20毫升）萃取残留物。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上用5-10% MeOH/CH2Cl2洗脱的快速色谱法提纯，从而以定量收率产生油形式的所需产物。LCMS m/e 207.20(M+H)+, 0.268分钟（方法3）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 3.07 (s, 8H), 2.71 (s, 2H),1.11 (s, 6H)。
实施例1
非对映异构的(1R)-和(1S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯的制备
在氮气下将三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（240毫克，0.321毫摩尔）（如WO2013123019中所述制备）、外消旋1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸乙酯（91毫克，0.291毫摩尔）、水合碳酸钠（108毫克，0.874毫摩尔）和四（三苯基膦）钯（palladium tetrakis）（20.21毫克，0.017毫摩尔）的混合物溶解在二氧杂环己烷（4毫升）中。形成橙色溶液，其在添加水（1毫升）后变成极淡黄色的悬浮液。将该混合物冷却至-78℃并进行抽空/吹扫循环3次。该烧瓶在85℃下加热的油浴中浸泡总共2小时。将所得黑色悬浮液用乙酸乙酯（20毫升）稀释并用水（30毫升）洗涤。收集有机相并经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法提纯以产生白色固体（180毫克，79%）。MS: m/e 783.47 (M+H)+, 2.36 min (方法1) 1HNMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.32 (d, J=3.5 Hz, 1H), 5.18 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.75(d, J=1.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.58 - 4.37 (m, 2H), 4.25 - 4.15 (m, 2H),3.24 - 2.41 (m, 14H), 2.27 - 1.76 (m, 20H), 1.70 (s, 3H), 1.64 - 1.31 (m,13H), 1.10 - 1.04 (m, 5H), 1.00 - 0.88 (m, 8H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.42 (s, 1F)。
步骤2. 将NaOH（1N，2毫升，2.0毫摩尔）添加到1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯（180毫克，0.230毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（4毫升）和MeOH（2毫升）中的溶液中。将该混合物在66℃下搅拌2小时，以形成清澈溶液。将该粗制反应混合物通过制备型HPLC提纯（Xbridge OBD prep shieldRP C18 19 x100 mm）（MeCN / H2O / AcONH4）以产生白色固体形式的1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（29毫克，16.7%）。MS: m/e 755.50 (M+H)+, 2.548 min（方法4）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.34 (br. s.,1H), 5.19 (br. s., 1H), 4.74 (br. s., 1H), 4.61-4.49 (m, 3H), 3.18 (d, J=10.5Hz, 2H), 2.97 - 2.40 (m, 12H), 2.35 - 1.78 (m, 14H), 1.73 - 1.60 (m, 6H),1.58 - 1.17 (m, 11H), 1.13 (br. s., 3H), 1.08 (m, 4H), 1.01 - 0.90 (m, 8H),0.86 (br. s., 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -217.84 - -231.26 (m, 1F)。
实施例1a和1b的制备
将实施例1 HPLC分离成(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（实施例1a）和(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（实施例1b）
使用制备型HPLC（方法17）分离这两种非对映异构体。洗脱的第一种产物被识别为(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（实施例1a）（白色固体，18毫克，29.6%）。MS: m/e 755.55 (M+H)+, 2.620 min（方法4）。1HNMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.85 (s,1H), 4.74 (s, 1H), 4.63 - 4.39 (m, 2H), 3.51 - 3.43 (m, 1H), 3.41 - 3.37 (m,3H), 3.28 (d, J=4.0 Hz, 1H), 3.20 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.10 (br. s., 1H), 3.02- 2.96 (m, 3H), 2.85 - 2.68 (m, 2H), 2.63 - 2.51 (m, 2H), 2.35 - 1.78 (m,16H), 1.77 (s, 3H), 1.74 - 1.28 (m, 15H), 1.21 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 0.99(s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 甲醇-d4) δ -227.00 (s,1F)。
分离出的第二种化合物被识别为：(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（实施例1b）（白色固体，20毫克，32.8%）。MS: m/e 755.55 (M+H)+, 2.626 min（方法4）1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.35(br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.85 (br. s., 1H), 4.75 (s, 1H), 4.61 -4.36 (m, 2H), 3.38 - 3.19 (m, 6H), 3.05 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.89 (d, J=7.8Hz, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 1H), 2.67 - 2.50 (m, 2H), 2.45 - 1.97 (m, 14H), 1.92- 1.80 (m, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.73 - 1.28 (m, 14H), 1.21 (br. s., 3H), 1.14 -1.08 (m, 3H), 1.01 - 0.99 (m, 3H), 0.97 - 0.94 (m, 3H), 0.93 (s, 3H). 19F NMR(376MHz, 甲醇-d4) δ -227.04 (s, 1F)。
实施例1a的替代性制备方法：(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸双盐酸盐
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在带有螺纹塞的350毫升玻璃压力容器中合并三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（9.00克，12.05毫摩尔）、(S)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（4.96克，13.25毫摩尔）和氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯基)]钯(II)（X-Phos氨基联苯基氯化钯预催化剂，XPhos-Pd-G2，0.569克，0.723毫摩尔）。用氮气吹扫该容器，并向反应烧瓶中加入无水THF（180毫升）。用氮气吹扫新鲜制备的0.5 M K3PO4水溶液并将其添加到该容器中（60.2毫升，30.1毫摩尔）。密封该容器并在80℃下搅拌所得黄色溶液。混合物的颜色经30分钟变深成极深绿色。将该混合物加热18小时。将橄榄绿色的反应混合物用EtOAc（700毫升）稀释并用5%碳酸氢钠水溶液（250毫升 x 2），然后用盐水（100毫升）洗涤。用2 x 100毫升的氯仿萃取水相，合并有机相，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成黄色泡沫固体。将粗材料通过快速柱色谱法提纯（800 g二氧化硅，分步洗脱3:1己烷:丙酮8 L，然后1:1己烷:丙酮4 L）。来自初次色谱法的混合级分（1.0克材料）通过快速硅胶色谱法再提纯（80 g二氧化硅，洗脱梯度100%己烷经8个柱体积至3:1己烷:丙酮，保持3:1己烷:丙酮10个柱体积）。由此获得黄色泡沫状固体形式的所需材料（7.18克，70.5%收率）。LCMS: m/e845.6 (M+H)+, 1.57 min（方法6）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.41 - 7.31 (m, 5H),5.32 (s, 2H), 5.23 - 5.15 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.0, 1.6 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.64 - 4.44 (m, 3H), 3.13 (dd, J=15.4, 13.0 Hz, 2H), 2.89 - 2.78(m, 4H), 2.68 - 2.53 (m, 4H), 2.52 - 2.41 (m, 2H), 2.21-1.16 (m, 31H), 1.13 -0.99 (m, 7H), 0.97 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR(376MHz，氯仿-d) δ -225.07 (t, J=46.8 Hz, 1F)。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
在500毫升圆底烧瓶中合并(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（7.17克，8.48毫摩尔）与氢氧化锂1.0M水溶液（42.4毫升，42.4毫摩尔）和四氢呋喃（50毫升）和MeOH（50毫升）。将该混合物加热至75℃ 持续2.5小时。将近黑色的混合物在减压下浓缩以留下固体残留物。将该残留物再溶解在乙腈（50毫升）和氯仿（50毫升）的混合物中并用三氟乙酸（6.54毫升，85毫摩尔）逐滴处理该黑色溶液。将该混合物然后在减压下浓缩以留下两相混合物（黑色油，清澈液体浮在其上）。将这种混合物用乙腈:氯仿（150毫升）稀释并再在减压下浓缩。再一次重复该溶解/再浓缩以产生黑色油，将其在高真空下放置整夜。该黑色油凝固整夜成泡沫。将该粗制黑色固体溶解在氯仿（20毫升）和丙酮（5毫升）的混合物中并加载到由二氧化硅（大约60克）与在顶部的硅藻土（大约25克）构成的短柱上。用1:1丙酮:氯仿（500毫升），接着3:1丙酮:氯仿（1000毫升）洗脱除去黑色，且洗脱的产物为黄色带形式。合并产物级分并在减压下浓缩以留下吸湿的黄色泡沫固体（16克）。将一部分这种固体（大约1.4克）容易地溶解在5毫升80:20乙腈:水中并加载到130 g Isco Redisep Rf Gold C18柱上。溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA。溶剂B= 10%水、90%乙腈、0.1% TFA。洗脱梯度经8个柱体积30-100%B，然后保持在100%B 8个柱体积。含产物的级分在减压下的浓缩提供干净的白色粉末。这种纯材料留作批料1。将剩余粗材料（大约14.5克）容易地溶解在20毫升乙腈:水80:20的混合物中。这种粗材料使用制备型HPLC方法1在9次注射中通过反相制备型HPLC提纯。将由此获得的纯材料与之前获得的批料1纯材料合并以产生6.32克干净的白色粉末（批料2）以及来自混合级分的略微不纯的材料（1.40克）。将混合级分材料（1.40克）在最低量80:20乙腈:水中加载到130 g Isco RedisepRf Gold C18柱上。溶剂A = 90%水、10%乙腈、0.1% TFA。溶剂B = 10%水、90%乙腈、0.1%TFA。洗脱梯度经10个柱体积30-100%B，然后保持在100%B 4个柱体积。含产物的级分在减压下的浓缩提供干净的白色泡沫（1.17克）。将这种材料与干净的批料2合并以提供TFA盐形式的标题化合物（7.41克，89%收率，白色泡沫）。LCMS: m/e 755.6 (M+H)+, 1.29 min（方法6）。1H NMR (400MHz, Acetic) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.85(s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.56 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 3.93 - 3.65 (m, 6H), 3.43(tt, J=11.3, 3.9 Hz, 1H), 3.26 (t, J=12.3 Hz, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.86 - 2.73(m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.43 (d, J=13.0 Hz, 2H), 2.35 - 2.13 (m,7H), 2.13 - 2.09 (m, 1H), 2.01 - 1.78 (m, 4H), 1.78 - 1.70 (m, 4H), 1.69 -1.45 (m, 9H), 1.45 - 1.27 (m, 3H), 1.24 - 1.12 (m, 5H), 1.10 (s, 3H), 1.01(s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, Acetic) δ -76.46 (s,1F), -225.82 (t, J=46.8 Hz, 1F)。
步骤3. 在带有磁搅拌棒的500毫升圆底烧瓶中合并乙腈（150毫升）与盐酸6.0M水溶液（37.1毫升，223毫摩尔）。经滴液漏斗向被快速搅拌的混合物中加入溶解在乙腈（60毫升）中的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸TFA盐（7.30克，7.42毫摩尔）的溶液。白色沉淀物几乎立即形成并随着添加进行而变重。经总共20分钟完成添加。将该乳白色悬浮液在室温下搅拌1.25小时。该悬浮液在冰浴中冷却并通过过滤分离由此制成的极细白色固体，用冰冷乙腈冲洗，使其风干，然后在室温下在高真空下干燥。由此分离白色粉末形式的所需产物（5.857克，95%收率）。LCMS: m/e 755.5 (M+H)+, 1.27 min（方法6）。1H NMR (400MHz, Acetic) δ 5.39 (br.s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.55 (dm, J=47.2Hz, 2H), 4.13 - 3.87 (m, 4H), 3.82 (br. s., 2H), 3.55 - 3.42 (m, 2H), 3.39(br. s., 1H), 3.03 (s, 3H), 3.01 - 2.90 (m, 1H), 2.62 (d, J=17.9 Hz, 1H),2.55 - 2.43 (m, 2H), 2.43 - 2.14 (m, 8H), 1.95 - 1.79 (m, 3H), 1.79 - 1.71(m, 4H), 1.69 - 1.47 (m, 9H), 1.47 - 1.28 (m, 4H), 1.22 (s, 3H), 1.19 - 1.12(m, 2H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H). 19F NMR(376MHz, Acetic) δ -225.81 (t, J=45.1 Hz, 1F)。
实施例1b的替代性制备方法:
(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（3.0克，5.38毫摩尔）、(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（2.013克，5.38毫摩尔）（如WO2013169578中所述制备）和磷酸三钾（3.43克，16.14毫摩尔）的烧瓶中加入第二代Buchwald X-Phos预催化剂（0.042克，0.134毫摩尔）。将该混合物用THF（20毫升）和水（4毫升）稀释，用氮气吹扫并加热至50℃。在将该混合物加热15.5小时后，将其冷却至室温并在减压下部分浓缩。将该混合物用水（75毫升）稀释并用乙酸乙酯（3 x 75毫升）萃取。有机层经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。残留物通过使用0-10%甲醇（在二氯甲烷中）梯度和220 g硅胶柱的快速色谱法提纯以产生米白色泡沫形式的标题产物（3.34克，95%收率）。LCMS: m/e: 656.6 (M+H)+, 2.30 min (方法1)。1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ = 7.39 -7.30 (m, 5H), 5.32 (br. s., 1H), 5.21 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (dd, J=6.1, 1.9Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.61 (dd, J=2.1, 1.3 Hz, 1H), 4.53 (dm, J=47.3 Hz, 2H), 2.64 - 2.51 (m, 2H), 2.23 - 1.93 (m, 7H), 1.70 (s, 3H), 1.07(s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.85 (s, 3H), 1.85 - 0.83(m, 22H)。
步骤2. (R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（3.34克，5.09毫摩尔）的可密封烧瓶中加入磷酸钾盐（5.40克，25.5毫摩尔）、碘化钾（0.930克，5.60毫摩尔）和1-(2-氯乙基)-4-(甲基磺酰基)哌啶.HCl（4.01克，15.28毫摩尔）。将该混合物用乙腈（50毫升）稀释，用氮气吹扫，然后密封该烧瓶并加热至100℃。在加热4小时后，将该混合物冷却至室温并在室温下搅拌整夜。将该混合物用50毫升乙腈稀释并添加另外的1克1-(2-氯乙基)-4-(甲基磺酰基)哌啶.HCl。密封该烧瓶并将该混合物加热至100℃ 持续2小时。将该混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将残留物用水（75毫升）稀释并用二氯甲烷（3 x 75毫升）萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。残留物通过使用0-8% MeOH（在二氯甲烷中）梯度和220 g硅胶柱的快速色谱法提纯。合并含产物的级分并在减压下浓缩。将残留物通过反相色谱法再提纯（150 g C18柱，30-90%乙腈（在水中）梯度，添加0.1% TFA）以产生白色泡沫形式的标题产物的TFA盐（3.17克，3.30毫摩尔，64.9%收率）。LCMS: m/e:845.6 (M+H)+, 2.10 min (方法1).1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ = 7.39 - 7.30 (m, 5H),5.32 (br. s., 1H), 5.21 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.78(s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.53 (dm, J=47.1 Hz, 2H), 3.44 - 3.21 (m, 6H), 3.17 -3.08 (m, 1H), 3.05 - 2.97 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.79 - 2.57 (m, 4H), 1.69(s, 3H), 1.12 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.86 (s,3H), 2.37 - 0.83 (m, 31H)。
步骤3. 向(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（3.17克，3.75毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（30毫升）和甲醇（10毫升）中的溶液中加入NaOH (3N)（7.50毫升，22.50毫摩尔）并将该混合物加热至80℃持续 17小时。将该混合物冷却至室温并在减压下部分浓缩。通过添加1N HCl使该混合物呈酸性，并通过过滤收集形成的固体。向收集的固体材料中加入20毫升水和1N NaOH溶液（9.38毫升，9.38毫摩尔）。将该混合物搅拌10分钟，然后在减压下浓缩。用水（20毫升）和乙腈（30毫升）稀释并用TFA（1.445毫升，18.75毫摩尔）处理该残留物。然后将该混合物在减压下浓缩，吸附到硅胶上并使用20-30%氯仿（在丙酮中）梯度和220 g硅胶柱提纯。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩以产生TFA盐形式的产物。为了转化成HCl盐，将该残留物用200毫升乙腈稀释并加入6N HCl溶液（6.66毫升，40.0毫摩尔）。形成固体，将该混合物用20毫升氯仿稀释。固体不溶解，因此将该混合物在减压下浓缩。将残留物再用乙腈和氯仿稀释并加入6N HCl（6.66毫升，40.0毫摩尔）。将该混合物在减压下浓缩并第三次重复该程序。然后将该固体用乙腈稀释并加热至回流，然后冷却至室温并通过过滤收集以产生预期产物的HCl盐。由于仍存在~1.5%的杂质，通过添加20毫升水和1N NaOH（8.26毫升，8.26毫摩尔）、搅拌几分钟，将该混合物再转化成TFA盐以供提纯，然后在减压下浓缩。然后将该残留物用水（20毫升）和乙腈（30毫升）稀释并用TFA（1.273毫升，16.52毫摩尔）处理。将该混合物在减压下浓缩，吸附到硅胶上并使用20-30%氯仿（在丙酮中）梯度和220 g硅胶柱提纯。合并含有标题化合物的级分并在减压下浓缩以产生TFA盐形式的产物。残留物的HPLC仍显示存在少量杂质。将该混合物再使用150 g C18柱和30-90%乙腈（在水中）梯度（添加0.1% TFA）提纯。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩以产生白色固体形式的产物——标题产物的TFA盐。为了转化成HCl盐，将该残留物溶解在乙腈中并用6N HCl溶液（6.66毫升，40.0毫摩尔）处理，然后在减压下浓缩。将这一过程重复另外两次，然后将该固体用乙腈稀释，加热至回流，冷却并通过过滤收集以产生白色固体形式的(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸双HCl盐（1.6克，1.859毫摩尔，49.6%收率）。LCMS: m/e: 755.5 (M+H)+, 1.69 min (方法1). 1H NMR (400MHz,乙酸-d4) δ = 5.37 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.72 (s,1H), 4.53 (dm, J=47.0 Hz, 2H), 4.09 - 3.72 (m, 6H), 3.51 - 3.27 (m, 3H), 3.01(s, 3H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.59 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.52 - 2.40 (m, 2H),1.74 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 2.39 - 1.04 (m, 29H), 1.00 (s, 3H),0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). C45H71FN2O4S • 2.0 HCl • 1.530 H2O。
实施例2
非对映异构的(1R)-和(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸乙酯的制备
按照上述用于制备1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯的程序，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（如WO2013123019中所述制备）代替三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯作为反应物以82%收率制备标题化合物。MS:m/e 755.55 (M+H)+, 2.706 min（方法4）. 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.32 (d, J=3.5Hz, 1H), 5.18 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.73 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.66 - 4.58 (m, 1H),4.56 - 4.39 (m, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 2H), 3.17 - 2.92 (m, 8H), 2.83 - 2.45(m, 6H), 2.22 - 2.05 (m, 3H), 2.03 - 1.72 (m, 5H), 1.69 (s, 3H), 1.65 - 1.26(m, 16H), 1.23 (br. s., 3H), 1.18 - 1.02 (m, 7H), 1.01 - 0.89 (m, 8H), 0.86(s, 3H), 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.41 (s, 1F)。
步骤2. 按照上文在用于制备1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯的步骤2中描述的程序，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸乙酯代替1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯作为反应物以11.5%收率制备标题化合物。MS: m/e 727.55 (M+H)+, 2.527 min（方法4）。1HNMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (br. s., 1H), 4.76 (br. s.,1H), 4.64 - 4.56 (m, 2H), 4.48 (br. s., 1H), 3.26 - 2.94 (m, 8H), 2.90 - 2.38(m, 6H), 2.32 - 1.77 (m, 10H), 1.70 (m, 6H), 1.61 - 1.17 (m, 12H), 1.15 -1.03 (m, 6H), 1.01 - 0.91 (m, 8H), 0.87 (br. s., 3H), 19F NMR (470MHz，氯仿-d)δ -225.02 (br. s., 1F)。
实施例2a和2b的制备
将实施例2 HPLC分离成(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（实施例2a）和(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（实施例2b）
使用制备型HPLC（方法17）分离这两种非对映异构体。要洗脱的第一种产物被识别为(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（实施例2a）（白色固体，7毫克，33%）。MS: m/e 727.55 (M+H)+, 2.650 min（方法4）. 1HNMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.27 - 5.15 (m, 1H), 4.87 - 4.80(m, 1H), 4.73 (br. s., 1H), 4.62 - 4.37 (m, 2H), 3.29 - 3.17 (m, 8H), 3.16 -3.05 (m, 3H), 3.02 - 2.86 (m, 1H), 2.80 (td, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 2.63 - 2.46(m, 1H), 2.36 - 1.80 (m, 12H), 1.76 (br. s., 3H), 1.75 - 1.29 (m, 15H), 1.20(s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H). 19F NMR(376MHz, 甲醇-d4) δ -227.04 (s, 1F)。
分离出的第二种洗脱化合物被识别为(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（实施例2b）（白色固体，7毫克，33%）。MS: m/e 727.55 (M+H)+, 2.644 min（方法4）。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.36 (br.s., 1H), 5.22 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.88 - 4.81 (m, 1H), 4.78 - 4.68 (m, 1H),4.64 - 4.36 (m, 2H), 3.30 - 3.15 (m, 8H), 3.17 - 3.03 (m, 3H), 2.99 - 2.88(m, 1H), 2.86 - 2.72 (m, 1H), 2.63 - 2.50 (m, 1H), 2.37 - 1.97 (m, 8H), 1.92- 1.80 (m, 4H), 1.78 (s, 3H), 1.74 - 1.28 (m, 15H), 1.22 - 1.19 (m, 3H), 1.15- 1.11 (m, 3H), 0.99 (br. s., 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 - 0.92 (m, 3H). 19F NMR(376MHz, 甲醇-d4) δ -227.05 (br. s., 1F)。
实施例2b的替代性制备方法
方法A：经由手性(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯，(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸
步骤1: (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（1.75克，2.434毫摩尔）、(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（1.00克，2.68毫摩尔）、Na2CO3.H2O（0.91克，7.30毫摩尔）和Pd(Ph3P)4（0.17克，0.15毫摩尔）在二氧杂环己烷（40毫升）和水（10.00毫升）中的混合物在N2下冷却至-78℃。该溶液变成固体。进行抽真空/N2吹扫循环三次。将该混合物在70℃下搅拌1小时。颜色变成深棕色。将该反应混合物在减压下浓缩。将残留物用H2O（100毫升）稀释并用EtOAc（3 x 100毫升）萃取。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物在用0 - 35% EtOAc/己烷洗脱的硅胶柱上提纯以产生固体形式的标题化合物（1.12克，56%）。1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.39 - 7.30 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 5.22 -5.14 (m, 2H), 5.11 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.60 - 4.45(m, 2H), 3.13 - 2.98 (m, 8H), 2.72 - 2.54 (m, 5H), 2.51 - 2.43 (m, 1H), 2.23- 1.00 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87(s, 3H), 0.85 (s, 3H). 13C NMR (126MHz，氯仿-d) δ 174.30, 150.72, 147.90,139.10, 135.94, 128.52, 128.13, 127.97, 121.41, 121.30, 109.41, 87.60, 86.21,66.62, 62.72, 57.21, 52.91, 51.29, 51.00, 49.71, 49.39, 47.38, 45.84, 45.70,41.98, 41.64, 40.64, 38.71, 37.46, 36.80, 36.09, 34.14, 33.61, 30.05, 29.74,29.18, 29.14, 29.06, 28.66, 26.79, 26.43, 26.39, 25.24, 21.52, 21.36, 19.66,19.56, 16.30, 16.04, 14.34. 19F NMR (470MHz，氯仿-d) δ -225.09 (t, J=47.3 Hz,1F). MS m/e 817.50 (M+H)+, 2.32 min（方法5）。
步骤2: 将(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（2.3克，2.81毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（60毫升）和H2O（30毫升）中的溶液在冰浴中冷却并加入1N NaOH（28毫升，28毫摩尔）。将所得浑浊混合物温热至RT，然后在70℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至RT，然后置于冰浴中，然后用0.5N HCl中和。将该混合物搅拌整夜。通过过滤收集沉淀的固体，用MeOH - H2O洗涤并在真空下干燥。将该固体溶解在MeCN（80毫升）和二氧杂环己烷（20毫升）中，并逐滴加入6 N HCl（50毫升）。将该混合物搅拌1小时。通过过滤收集沉淀的固体，用MeCN洗涤并在真空下干燥以产生双HCl盐形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（1.95克，90%）。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.34 (s, 1H), 5.20(dd, J=6.1, 1.6 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.58 - 4.39 (m, 2H),3.45 - 3.11 (m, 12H), 2.87 (td, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 2.55 (d, J=16.6 Hz, 1H),2.34 - 1.08 (m, 27H), 1.77 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 0.99 (s, 3H),0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). 13C NMR (126MHz, 甲醇-d4) δ 178.20, 149.71,149.37, 140.47, 123.31, 122.51, 112.28, 89.36, 87.98, 73.56, 54.52, 51.90,50.64, 50.43, 49.82, 47.03, 46.91, 46.76, 43.44, 42.95, 42.13, 40.78, 38.87,38.77, 37.41, 34.96, 33.19, 30.55, 30.46, 30.42, 30.38, 29.37, 27.91, 27.72,27.67, 27.54, 26.53, 22.26, 20.82, 19.41, 17.33, 17.09, 14.85. 19F NMR(470MHz, 甲醇-d4) δ -227.03 (s, 1F). MS m/e 727.45 (M+H)+, 2.55 min（方法4）。
方法B:
步骤1. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（8.9克，15.96毫摩尔）、(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（6.57克，17.55毫摩尔）和磷酸三钾（10.16克，47.9毫摩尔）的烧瓶中加入Buchwald第二代Xphos预催化剂（0.313克，0.399毫摩尔）。将该混合物用THF（50毫升）和水（10毫升）稀释，用氮气吹扫，然后加热至50℃持续 22小时。将该混合物冷却至室温，部分浓缩并用水（150毫升）稀释，用乙酸乙酯（3x 150毫升）萃取（在第一次萃取时在层之间注意到一些固体，因此添加过量乙酸乙酯以确保产物溶解），经硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩。残留物通过使用0-10%甲醇（在二氯甲烷中）梯度和220 g硅胶柱的快速色谱法提纯。合并含产物的级分并在减压下浓缩以产生黄色固体形式的产物，存在会带入下一步骤的少量杂质。
步骤2. 向含有(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（10.5克，16.0毫摩尔）的可密封烧瓶中加入磷酸三钾（13.59克，64.0毫摩尔）、碘化钾（3.99克，24.01毫摩尔）和4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物HCl（9.37克，40.0毫摩尔）。将该混合物用乙腈（200毫升）稀释，用氮气吹扫，密封并加热至100℃。在将该混合物加热16小时后，将其冷却至室温，使用二氯甲烷转移到rb烧瓶中，然后在减压下浓缩。将该残留物用水（200毫升）稀释并用乙酸乙酯萃取（200毫升，然后2 x 150毫升）。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。残留物通过使用0-6%甲醇（在二氯甲烷中）梯度和330g硅胶柱的快速色谱法提纯。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩以产生红色稠油形式的连同其它杂质的产物。将该残留物溶解在乙腈中并分成三个级分，并使用25-100% A至B梯度（A = 9:1 水:乙腈（添加0.1% TFA），B = 1:9 水: 乙腈（添加0.1% TFA））和275 g C18柱再提纯。合并含产物的级分并在减压下浓缩以产生产物的TFA盐。合并较不纯的级分并浓缩，然后再使用上述相同反相法提纯。将该产物的TFA盐用饱和NaHCO3水溶液（150毫升）稀释并用二氯甲烷萃取（150毫升，然后3x75毫升）。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生白色固体形式的产物（7.52克，9.2毫摩尔，经2个步骤57.5%收率）。
步骤3.向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.6克，0.734毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（10毫升）和甲醇（2毫升）中的溶液中加入NaOH (1N)（2.94毫升，2.94毫摩尔）。将该混合物加热至60℃ 持续2.5小时，然后冷却至室温。
步骤4. 将1N HCl溶液（5毫升，5.00毫摩尔）添加到该混合物中并将其在减压下部分浓缩直至开始形成固体，然后将该混合物在冰箱中放置整夜。
通过过滤收集形成的固体并用水洗涤以产生白色固体形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的HCl盐（0.55克，0.706毫摩尔，96%收率）。标题化合物的新的分析数据与之前获得的使用不同方法制成的相同化合物的数据匹配。
实施例3
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在75毫升玻璃压力容器中合并三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（0.850克，1.524毫摩尔）、(S)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.599克，1.600毫摩尔）和XPhos-Pd-G2（0.036克，0.046毫摩尔）。用橡胶隔片密封该容器。将针插入该隔片，将该容器在真空炉中在室温下经10分钟反复抽空然后用氮气吹扫四次。向该氮气吹扫的反应容器中加入无水THF（20毫升）和新鲜制备的氮气鼓泡的0.5 MK3PO4水溶液（7.62毫升，3.81毫摩尔）。用PTFE塞密封该容器并在80℃下搅拌所得黄色溶液。颜色经30分钟变深成极深绿色。将该混合物加热20小时。将该反应混合物用EtOAc（70毫升）稀释并用5%碳酸氢钠水溶液（25 mL x 2），然后用盐水（10毫升）洗涤。用2 x 10毫升氯仿萃取水层，合并有机相，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成黄色泡沫状固体。将该粗制黄色材料通过快速柱色谱法提纯（40g二氧化硅，洗脱梯度100%DCM至20:1 DCM:MeOH）。合并产物级分并浓缩成黄色稠油，其在置于高真空下时变成泡沫。略微黄色泡沫的总回收量 = 0.493克（49%收率）。LCMS: m/e 656.5 (M+H)+, 1.59 min（方法6）。1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD锁场(lock)) δ 7.38 - 7.26 (m, 5H), 5.31 (br. s., 1H), 5.21 -5.12 (m, 2H), 5.12 - 5.06 (m, 1H), 4.77 - 4.71 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.57(dm, J=47.4 Hz, 2H), 2.59 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.50 (td, J=10.6, 5.3 Hz, 1H),2.16 - 1.93 (m, 6H), 1.78 - 1.65 (m, 7H), 1.60 (dd, J=12.0, 9.0 Hz, 5H), 1.55- 1.39 (m, 8H), 1.38 - 1.22 (m, 4H), 1.11 - 1.03 (m, 4H), 1.03 - 0.93 (m,4H), 0.89 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在15毫升玻璃压力容器中合并(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.091克，0.139毫摩尔）与在无水乙腈（5毫升）中的4-(2-氯乙基)吗啉盐酸盐（0.077克，0.416毫摩尔）、磷酸三钾（0.147克，0.694毫摩尔）和碘化钾（0.046克，0.277毫摩尔）。密封该容器并在油浴中在搅拌下加热至120℃ 持续19小时。将该粗制混合物在氮气物流下浓缩，置于EtOAc（30毫升）中并用水（3 x 10毫升）和盐水（5毫升）洗涤。将合并的水相用氯仿（10毫升）萃取，合并有机相并在减压下浓缩。由此获得的粗制残留物直接带至下一步骤。LCMS: m/e 769.6 (M+H)+, 2.47 min (方法1)。
步骤3. 在具有PTFE螺帽的1打兰管瓶（dram vial）中合并来自步骤2的含有(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的粗制混合物与氢氧化锂1.0M水溶液（0.973毫升，0.973毫摩尔）、MeOH（1毫升）和四氢呋喃（1毫升）。将该管瓶加盖并加热至75℃持续 45分钟。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法2）提纯。由此获得的材料随后通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法3）再提纯以提供白色固体TFA盐形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.0191克，经2个步骤17.3%收率）。LCMS: m/e 679.5 (M+H)+, 4.26 min（方法2）。1H NMR(400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物，CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.15(m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.49 dm, J=47.4 Hz, 2H), 3.84 - 3.68 (m,4H), 3.18 - 3.09 (m, 2H), 2.98 - 2.85 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.71 (dd,J=13.7, 3.4 Hz, 3H), 2.63 - 2.50 (m, 3H), 2.30 - 2.11 (m, 2H), 2.11 - 1.91(m, 7H), 1.83 - 1.75 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.67 - 1.30 (m, 12H), 1.19 (s,3H), 1.17 - 1.09 (m, 2H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s,3H)。
实施例4
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-二氧化-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-二氧化-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在15毫升玻璃压力容器中合并(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.091克，0.139毫摩尔）与在干乙腈（5毫升）中的(1S,4S)-5-(2-氯乙基)-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷2,2-二氧化物（0.075克，0.358毫摩尔）（如WO2013169578中所述制备）、磷酸三钾（0.147克，0.694毫摩尔）和碘化钾（0.046克，0.277毫摩尔）。密封该容器并在油浴中在搅拌下加热至120℃持续 19小时。将该粗制混合物在氮气物流下浓缩，置于EtOAc（30毫升）中并用水（3 x 10毫升），然后用盐水（5毫升）洗涤。将合并的水相用氯仿（10毫升）萃取，合并有机相并在减压下浓缩。由此获得的粗制残留物直接带至下一步骤。LCMS:m/e 829.6 (M+H)+, 2.44 min (方法1)。
步骤2. 在具有PTFE螺帽的1打兰管瓶中合并来自步骤1的含有(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-二氧化-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的粗制混合物（0.115克，0.139毫摩尔）与氢氧化锂1.0M水溶液（0.695毫升，0.695毫摩尔）、MeOH（0.7毫升）和四氢呋喃（0.7毫升）。将该管瓶加盖并加热至75℃持续 45分钟。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法4）提纯，将由此获得的黄色固体随后通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法5）再提纯，接着进行第三次且为最后一次的反相制备型HPLC提纯（制备型HPLC方法6）以提供47.4毫克（经2个步骤39.2%收率）白色粉末TFA盐形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-二氧化-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯。LCMS: m/e739.5 (M+H)+, 4.22 min（方法2）。1H NMR (400MHz，CDCl3和CD3OD的1:1混合物，CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H),4.48 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 4.00 (br. s., 1H), 3.69 - 3.63 (m, 1H), 3.23 - 3.13(m, 2H), 3.13 - 2.95 (m, 4H), 2.79 (td, J=11.1, 5.0 Hz, 1H), 2.63 - 2.55 (m,1H), 2.53 (br. s., 1H), 2.42 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.28 - 2.06 (m, 4H), 2.06 -1.91 (m, 6H), 1.86 - 1.74 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.69 - 1.55 (m, 4H), 1.54 -1.38 (m, 7H), 1.38 - 1.23 (m, 3H), 1.20 - 1.14 (m, 1H), 1.13 - 1.08 (m, 4H),1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H)。
实施例5
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓(thiazepan)-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-(2-氯乙基)-1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物的制备.
向1,4-硫氮杂卓 1,1-二氧化物（200毫克，1.340毫摩尔）和2-氯乙醛50重量%水溶液（0.234毫升，1.877毫摩尔）在甲醇（5毫升）和乙酸（1毫升）中的混合物中加入2-甲基吡啶硼烷-络合物（158毫克，1.474毫摩尔）。将所得混合物在室温下搅拌整夜。该反应混合物在减压下浓缩成残留物，用饱和Na2CO3（10毫升）对其洗涤并用乙酸乙酯萃取（3 x 10毫升）。用氯仿（10毫升）萃取水相。合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供334毫克（定量）粗制红棕色油形式的所需产物，其在静置时部分凝固。这种粗材料直接原样用于下一步骤。LCMS: m/e 212.0 (M+H)+, 0.18 min (方法1)。
步骤2. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在15毫升玻璃压力容器中合并来自步骤1的含有4-(2-氯乙基)-1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物的粗材料（0.065克，0.305毫摩尔）与在干乙腈（5毫升）中的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.100克，0.152毫摩尔）、磷酸三钾（0.162克，0.762毫摩尔）和碘化钾（0.051克，0.305毫摩尔）。密封该容器并在油浴中在搅拌下加热至120℃ 持续17小时。将该反应混合物在减压下浓缩，置于EtOAc（30毫升）中并用水（3 x 10毫升）和用盐水（5毫升）洗涤。用氯仿（10毫升）萃取合并的水相，合并有机相并在减压下浓缩。由此获得的粗制残留物不经进一步提纯原样带至皂化步骤。LCMS: m/e 831.6 (M+H)+, 2.39 min(方法1)。
步骤3. 在具有PTFE螺帽的1打兰管瓶中合并来自步骤2的含有(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的粗制混合物（0.126克，0.152毫摩尔）与氢氧化锂1.0M水溶液（1.064毫升，1.064毫摩尔）、MeOH（1毫升）和四氢呋喃（1毫升）。将该管瓶加盖并将该混合物加热至75℃持续 45分钟。过滤该混合物并通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法7）提纯以提供白色固体TFA盐形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（36.7毫克，经2个步骤28.2%收率）。LCMS: m/e 741.5 (M+H)+, 2.26 min (方法1). 1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s.,1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.49 (dm, J=47.4 Hz,1H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 3.35 (br. s., 1H), 3.28 - 3.17 (m, 2H), 3.15 - 3.02(m, 5H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.79 (td, J=11.0, 4.6 Hz, 1H), 2.55 (d, J=17.1Hz, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 2H), 2.13 - 1.91 (m, 9H), 1.86 - 1.74 (m, 3H), 1.73(s, 4H), 1.68 - 1.55 (m, 4H), 1.55 - 1.42 (m, 6H), 1.41 - 1.24 (m, 3H), 1.19- 1.09 (m, 5H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例6
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 1-(2-氯乙基)-4-(甲基磺酰基)哌嗪的制备
向1-(甲基磺酰基)哌嗪（0.200克，1.218毫摩尔）和2-氯乙醛50重量%水溶液（0.212毫升，1.705毫摩尔）在甲醇（5毫升）和乙酸（1毫升）中的混合物中加入2-甲基吡啶-硼烷络合物（0.143克，1.340毫摩尔）。将所得混合物在室温下搅拌整夜。将该反应混合物在减压下浓缩以留下残留物，用饱和Na2CO3（10毫升）对其洗涤并用乙酸乙酯（3 x 10毫升）萃取。用氯仿（10毫升）萃取水相。合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤并在减压下浓缩以提供394毫克（>100%收率）无色油形式的所需产物，其在静置时凝固成蜡质略微黄色固体。这种粗材料直接原样用于下一步骤。LCMS: m/e 227.0 (M+H)+, 0.19 min (方法1)。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在15毫升玻璃压力容器中合并来自步骤1的含有1-(2-氯乙基)-4-(甲基磺酰基)哌嗪的粗材料（0.069克，0.305毫摩尔）与在干乙腈（5毫升）中的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.100克，0.152毫摩尔）、磷酸三钾（0.162克，0.762毫摩尔）和碘化钾（0.051克，0.305毫摩尔）。密封该容器并在油浴中在搅拌下加热至120℃持续 15小时。将该反应混合物在减压下浓缩，将残留物置于EtOAc（30毫升）中并用水（3 x 10毫升）和用盐水（5毫升）洗涤。用氯仿（10毫升）萃取合并的水相，合并有机相并在减压下浓缩。由此获得的粗制残留物不经进一步提纯即原样带至皂化步骤。LCMS: m/e 846.7 (M+H)+,2.43 min (方法1)。
步骤3. 在具有PTFE螺帽的1打兰管瓶中合并来自步骤2的含有(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的粗制混合物（0.129克，0.152毫摩尔）与1.0M氢氧化锂水溶液（1.064毫升，1.064毫摩尔）、MeOH（1毫升）和四氢呋喃（1毫升）。将该管瓶加盖并将该混合物加热至75℃ 持续45分钟。过滤该混合物并通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法7）提纯以提供白色固体TFA盐形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（47.4毫克，经2个步骤35.8%收率）。LCMS: m/e 756.5 (M+H)+, 4.21 min（方法2）。1H NMR(400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.48 (dm, J=47.2 Hz, 1H), 3.30 -3.22 (m, 2H), 3.19 - 3.09 (m, 2H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.84 -2.64 (m, 6H), 2.55 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 2H), 2.14 - 1.91 (m,7H), 1.86 - 1.75 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.65 - 1.47 (m, 7H), 1.45 - 1.34 (m,4H), 1.29 (dd, J=17.7, 5.0 Hz, 1H), 1.17 (s, 3H), 1.16 - 1.08 (m, 2H), 1.07(s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H)。
实施例7
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1: (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（45毫克，0.069毫摩尔）、4-(2-溴乙基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物（17毫克，0.069毫摩尔）、K3PO4（44毫克，0.206毫摩尔）和NaI（17毫克，0.103毫摩尔）在MeCN（1毫升）中的悬浮液用氮气吹扫，密封并在100℃下搅拌18小时。将反应混合物过滤并将滤液减压浓缩。粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上（0-40% EtOAc/己烷）的快速色谱法提纯以产生固体形式的标题产物（28毫克，50%）。LCMS m/e 816.45 (M+H)+, 3.864分钟（方法7). 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.40 -7.28 (m, 5H), 5.32 (s., 1H), 5.17 (d, J=1.3 Hz, 2H), 5.15 - 5.09 (m, 1H),4.70 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.50 - 4.43 (m, 1H), 3.13 - 2.90(m, 4H), 2.64 - 2.41 (m, 4H), 2.21 - 0.80 (m, 34H), 1.69 (s, 3H), 1.03 (s,3H), 0.95 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.85 (s, 3H)。
步骤2. 向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（28毫克，0.034毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（2毫升）和MeOH（1毫升）中的溶液中加入 1N NaOH（1毫升，1.0毫摩尔）。该混合物在60℃下搅拌3小时。将该反应混合物通过制备型HPLC（方法8）提纯以产生固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（16毫克，64%）。LCMS m/e 726.50 (M+H)+, 3.528分钟（方法7）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.34(s, 1H), 5.18 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.48 (s, 1H),3.10 - 2.89 (m, 4H), 2.66 - 2.48 (m, 4H), 2.27 - 0.91 (m, 34H), 1.68 (s, 3H),1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR(376MHz，氯仿-d) δ -224.87 (s, 1F)。
实施例8
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1: (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）和2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸（13毫克，0.091毫摩尔）在CH2Cl2（1毫升）中的混合物中加入DIPEA（0.05毫升，0.305毫摩尔），接着加入HATU（44毫克，0.114毫摩尔）。将该溶液在室温下搅拌1小时。将该反应混合物在减压下浓缩。粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上（20-45%EtOAc/己烷）的快速色谱法提纯以产生固体形式的所需产物（定量收率）。LCMS m/e 782.55(M+H)+, 4.346分钟（方法8）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.39 - 7.29 (m, 5H), 5.32(s, 1H), 5.21 - 5.14 (m, 2H), 5.12 (d, J=4.5 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.73 (d,J=1.3 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.61- 4.56 (m, 1H), 4.50 - 4.44 (m, 1H), 3.96(dd, J=11.3, 3.5 Hz, 2H), 3.47 - 3.38 (m, 2H), 2.73 - 2.65 (m, 1H), 2.60 (d,J=17.3 Hz, 1H), 2.51 (dd, J=12.4, 8.2 Hz, 1H), 2.42 (td, J=10.5, 5.3 Hz, 1H),2.19 - 0.92 (m, 32H), 1.70 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.90 (s, 3H),0.88 (s, 3H), 0.85 (s, 3H)。
步骤2.向(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（60毫克，0.077毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（3毫升）和MeOH（1.5毫升）中的溶液中加入1N NaOH（1.5毫升，1.5毫摩尔）。将该混合物在60℃下搅拌3小时。将该反应混合物通过制备型HPLC（方法8）提纯以产生固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 （45毫克，85%）。LCMS m/e 692.55(M+H)+, 3.141分钟（方法8）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.33 (s, 1H), 5.18 (d, J=4.5Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.48 (s,1H), 3.97 (d, J=8.5 Hz, 2H), 3.43 (t, J=11.8 Hz, 2H), 2.70 (d, J=12.8 Hz,1H), 2.63 - 2.36 (m, 3H), 2.28 - 0.95 (m, 32H), 1.70 (s, 3H), 1.02 (s, 3H),0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.31 (s, 1F)。
实施例9
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1: (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）、4-(2-溴乙基)四氢-2H-吡喃（15毫克，0.076毫摩尔）、K3PO4（49毫克，0.229毫摩尔）和NaI（19毫克，0.114毫摩尔）在MeCN（1毫升）中的悬浮液用氮气吹扫，密封并在90℃下搅拌18小时。将反应混合物过滤并将滤液在减压下浓缩。将粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上（0-40% EtOAc/己烷）的快速色谱法提纯以产生固体形式的所需产物（30毫克，51%）。LCMSm/e 768.55 (M+H)+, 3.033分钟（方法8）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.39 - 7.29 (m,5H), 5.32 (s, 1H), 5.22 - 5.14 (m, 2H), 5.14 - 5.10 (m, 1H), 4.71 (d, J=2.0Hz, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.51 - 4.43 (m, 1H), 4.01 - 3.93(m, 4H), 2.65 - 2.52 (m, 2H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.18 - 0.87 (m, 34H), 1.69(s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.85 (s,3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.06 (s, 1F)。
步骤2.向(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（30毫克，0.039毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（2毫升）和MeOH（1毫升）中的溶液中加入1N NaOH（1毫升，1.0毫摩尔）。将该混合物在60℃下搅拌2小时。将该反应混合物通过制备型HPLC（方法8）提纯以产生固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（12毫克，45%）。LCMS m/e678.50 (M+H)+, 2.968分钟（方法8）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.34 (s, 1H), 5.18(d, J=4.5 Hz, 1H), 4.72 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 3.97(d, J=11.3 Hz, 2H), 3.39 (tdd, J=11.8, 4.5, 2.1 Hz, 2H), 2.67 - 2.48 (m, 4H),2.19 - 0.89 (m, 34H), 1.69 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 (s, 3H),0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.04 (s, 1F)。
实施例10
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-甲基丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1: (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（2.0克，3.50毫摩尔）、(S)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（1.44克，3.85毫摩尔）、Na2CO3 H2O（1.3克，10.5毫摩尔）和Pd(Ph3P)4（0.24克，0.21毫摩尔）在二氧杂环己烷（40毫升）中的混合物用氮气吹扫，密封并在70℃下搅拌1小时。将该混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将该残留物用H2O（100毫升）稀释并用EtOAc（3 x 100毫升）萃取。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱上洗脱（0-15% EtOAc/己烷）的快速色谱法提纯以产生固体形式的所需产物（1.85克，79%）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.69 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.31 (m, 5H),5.31 (br. s., 1H), 5.21 - 5.14 (m, 2H), 5.12 (dd, J=6.3, 1.8 Hz, 1H), 4.77(d, J=2.0 Hz, 1H), 4.65 - 4.62 (m, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 1H), 4.50 - 4.44 (m,1H), 2.89 (td, J=11.1, 5.9 Hz, 1H), 2.60 (d, J=16.3 Hz, 1H), 2.17 - 1.72 (m,11H), 1.71 (s, 3H), 1.53 - 1.19 (m, 14H), 1.11 - 1.01 (m, 2H), 0.98 (s, 3H),0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.84 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.07 (s, 1F)。
步骤2: (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-甲基丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（70毫克，0.105毫摩尔）和4-(1-氨基-2-甲基丙-2-基)硫代吗啉1,1-二氧化物（32毫克，0.157毫摩尔）在DCE（1毫升）中的悬浮液在室温下搅拌1小时。向所得溶液中加入氰基硼氢化钠（20毫克，0.314毫摩尔）和AcOH（0.012毫升，0.209毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌18小时。将该混合物用饱和NaHCO3（5毫升）稀释并用CH2Cl2（3 x 10毫升）萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过使用ELS检测器在硅胶柱（20-80% EtOAc/己烷）上的快速色谱法提纯以产生固体形式的所需产物（18毫克，20%）。LCMS m/e 859.55 (M+H)+, 3.113分钟（方法8）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.40 - 7.29 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 5.21 -5.14 (m, 2H), 5.12 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.69 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m,1H), 4.59 (s, 1H), 4.51 - 4.44 (m, 1H), 3.07 (m, 8H), 2.73 - 2.55 (m, 3H),2.42 (td, J=11.0, 5.6 Hz, 1H), 2.18 - 0.92 (m, 29H), 1.69 (s, 3H), 1.16 (s,3H), 1.15 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.89 (s, 3H),0.84 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -225.06 (s, 1F)。
步骤3: 向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-甲基丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（18毫克，0.021毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液中加入1N NaOH（0.5毫升，0.5毫摩尔）。将该混合物在60℃下搅拌2小时。将该反应混合物通过制备型HPLC（方法8）提纯以产生固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-甲基丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（6毫克，37%）。LCMS m/e 769.55 (M+H)+, 2.816分钟（方法8）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.33 (s, 1H), 5.17 (d, J=4.3 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.60 (s, 1H),4.56 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.13 - 3.01 (m, 8H), 3.01 - 0.89 (m, 33H), 1.68(s, 3H), 1.15 (s, 6H), 1.03 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s,3H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -224.76 (s, 1F)。
实施例11
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在25毫升压力容器中，将三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（164毫克，0.287毫摩尔）、(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（118毫克，0.316毫摩尔）、Na2CO3·H2O（107毫克，0.862毫摩尔）和Pd(Ph3P)4（19.92毫克，0.017毫摩尔）在二氧杂环己烷（2毫升）和水（0.500毫升）中的混合物在N2下冷却至-78℃。该混合物凝固并进行三次抽真空/N2吹扫循环。将该混合物在70℃下搅拌1小时且颜色变成深棕色。将该反应混合物用H2O（100毫升）稀释并用EtOAc（3 x 100毫升）萃取。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗产物提纯（24g硅胶柱；0 - 25%，25% EtOAc/己烷；ELS检测器）以产生白色固体形式的标题化合物（122毫克，63.5%）。LCMS: m/e 691.45 (M+Na)+, 4.428 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ9.73 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.47 - 7.25 (m, 5H), 5.35 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=1.8 Hz, 2H), 5.16 - 5.09 (m, 1H), 4.79 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.71 - 4.64 (m,1H), 4.61 - 4.53 (m, 1H), 4.51 - 4.41 (m, 1H), 2.89 (td, J=11.1, 5.9 Hz, 1H),2.63 (d, J=18.3 Hz, 1H), 2.31 - 1.85 (m, 8H), 1.85 - 1.76 (m, 3H), 1.73 (s,3H), 1.61 - 1.20 (m, 14H), 1.15 - 1.05 (m, 2H), 1.04 - 1.00 (m, 3H), 0.99(br. s., 3H), 0.96 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.87 (s, 3H)。
步骤2. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（122毫克，0.182毫摩尔）在DCE（2毫升）中的溶液中加入乙酸（0.021毫升，0.365毫摩尔）和4-(3-氨基丙基)硫代吗啉1,1-二氧化物（70.1毫克，0.365毫摩尔）。该溶液首先变浑浊并在10分钟后变清澈。将该混合物在室温下搅拌2小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（193毫克，0.912毫摩尔）并将所得混合物搅拌18小时。加入酸性酸（Acidic acid）（0.2毫升）和三乙酰氧基硼氢化钠（193毫克，0.912毫摩尔）并将混合物搅拌18小时。将该混合物随后用饱和NaHCO3（7毫升）稀释并用二氯甲烷（3 x 7毫升）萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥。通过过滤除去干燥剂并将滤液在减压下浓缩。将粗产物提纯（硅胶）。收集含有预期产物的级分并在减压下浓缩以产生白色固体形式的标题化合物（130毫克，84%）。LCMS: m/e 845.60 (M+H)+, 3.116 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.41 - 7.29 (m, 5H), 5.34 - 5.29 (m, 1H), 5.18(d, J=2.3 Hz, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.63 - 4.53 (m, 2H), 4.47 (d,J=4.5 Hz, 1H), 3.14 - 2.97 (m, 12H), 2.95 - 2.82 (m, 3H), 2.68 - 2.51 (m,4H), 2.48 - 2.33 (m, 2H), 2.24 - 2.07 (m, 3H), 2.03-1.91 (m, 4H), 1.91 - 1.73(m, 6H), 1.71 (br. s., 3H), 1.63 - 1.30 (m, 11H), 1.08 (br. s., 3H), 0.98 (s,3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.84 (s, 3H)。
步骤3 . 向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（130毫克，0.154毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（6毫升）和MeOH（3毫升）中的溶液中加入1N NaOH（3毫升，3.00毫摩尔）。将该混合物在66℃下搅拌2小时并获得清澈溶液。将该反应混合物通过制备型HPLC（方法9）提纯以产生白色固体形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（55毫克，45%）。LCMS: m/e 755.50 (M+H)+, 2.837 min（方法9）。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 5.29 (br. s., 1H), 5.15 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H),4.60 (s, 1H), 4.50 (q, J=8.8 Hz, 1H), 4.39 (q, J=8.6 Hz, 1H), 3.36 (d, J=6.0Hz, 4H), 3.33 - 3.28 (m, 4H), 3.23 - 3.10 (m, 3H), 2.95 (t, J=7.2 Hz, 2H),2.82 (d, J=13.1 Hz, 1H), 2.56 - 2.40 (m, 2H), 2.31 - 2.17 (m, 1H), 2.14 -1.89 (m, 7H), 1.85 - 1.61 (m, 10H), 1.60 - 1.13 (m, 13H), 1.12 - 1.04 (m,4H), 1.01 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -222.66 - -223.63 (m, 1F)。
实施例12
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((N-(3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)乙酰氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（20毫克，0.026毫摩尔）在CH2Cl2（1毫升）中的溶液中加入乙酸酐（0.012毫升，0.132毫摩尔）和DMAP（0.324毫克，2.65微摩尔）。将所得混合物在50℃下加热24小时。将该反应混合物在减压下浓缩。将残留物再溶解在MeOH（4毫升）中并通过prep. HPLC（方法10）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（3毫克，13.5%）。LCMS: m/e 797.55 (M+H)+,3.103 min（方法9）。1H NMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.8Hz, 1H), 4.76 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.82 - 4.72 (m, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.60 -4.52 (m, 1H), 4.50 - 4.36 (m, 1H), 3.64 (d, J=13.8 Hz, 1H), 3.49 (t, J=7.4Hz, 2H), 3.27 (m, 1H), 3.18 - 3.08 (m, 4H), 3.03 (d, J=5.5 Hz, 4H), 2.68 -2.47 (m, 4H), 2.27 (d, J=6.0 Hz, 1H), 2.22 - 1.93 (m, 9H), 1.89 - 1.23 (m,21H), 1.17 (s, 3H), 1.16 - 1.07 (m, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.96 (s,3H), 0.92 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 甲醇-d4) δ -226.56 - -227.82 (m, 1F)。
实施例13
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4,4-双(乙氧基羰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. ((R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（669毫克，1.788毫摩尔）、三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（950毫克，1.703毫摩尔）、水合碳酸钠（634毫克，5.11毫摩尔）和四（三苯基膦）钯（118毫克，0.102毫摩尔）的混合物置于氮气气氛下。加入二氧杂环己烷（16毫升）并形成橙色溶液。加入水（4毫升）并形成极淡黄色的悬浮液。将整个混合物冷却至-78℃并进行抽空/吹扫循环3次，最后进行氮气吹扫。将该烧瓶浸入65 - 85℃的油浴中。该混合物的颜色从淡黄色悬浮液经10分钟变成深棕色。允许在85℃下进行加热总共5小时。将该反应混合物用H2O（100毫升）稀释并用EtOAc（3x 100毫升）萃取。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将该粗材料通过硅胶色谱法提纯以提供白色固体形式的标题化合物（0.78克，69.8%）。LCMS: m/e 656.50 (M+H)+, 3.003 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.46 - 7.29(m, 5H), 5.43 - 5.28 (m, 1H), 5.24 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 2.0 Hz,1H), 4.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.52 - 4.44(m, 1H), 2.68 - 2.51 (m, 2H), 2.26 - 1.94 (m, 6H), 1.84 - 1.72 (m, 4H), 1.72(s, 3H), 1.65 - 1.28 (m, 12H), 1.27 (s, 3H), 1.14 (d, J=13.9 Hz, 2H), 1.09(s, 3H), 1.06 (m, 2H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.87 (s,3H)。
步骤2. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮杂环丙烷-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在火焰干燥的75毫升厚壁可再密封容器中放入(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.78克，1.189毫摩尔）和火焰干燥的磷酸钾（1.262克，5.95毫摩尔），接着放入1,2-二氯乙烷（20毫升）和乙腈（10毫升）。将该反应混合物用氮气吹扫，密封并温热至130℃持续 36小时。将该粗制反应混合物经短硅胶垫过滤并用乙酸乙酯洗涤以获得极淡橙色溶液。将该溶液在减压下浓缩以获得灰白色固体形式的标题化合物。该化合物不经进一步提纯原样使用。LCMS: m/e 682.50 (M+H)+, 700.55 (M+H2O) +, 714.55 (M+MeOH) + , 3.053 min（方法9）。
步骤3. 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯的制备
将(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮杂环丙烷-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（100毫克，0.147毫摩尔）置于15毫升密封管中。加入CH3CN（2毫升），接着加入哌啶-4,4-二甲酸二乙酯（67.2毫克，0.293毫摩尔） 。向该悬浮液中加入碘化钠（24.18毫克，0.161毫摩尔）和磷酸钾（93毫克，0.440毫摩尔）。将所得混合物在125℃下加热15小时。将该反应混合物用乙酸乙酯（50毫升）稀释并用碳酸氢钠和盐水洗涤。收集有机层，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩。将该粗材料在硅胶上提纯（0-25%乙酸乙酯/己烷）以产生白色固体形式的标题化合物（60毫克，48%）。LCMS: m/e 911.65 (M+H)+, 3.213 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d)δ 7.41 - 7.31 (m, 5H), 5.31 (br. s., 1H), 5.22 - 5.14 (m, 2H), 5.10 (d, J=4.5Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.53 (m, 2H), 4.50 - 4.41 (m, 1H),4.28 - 4.20 (m, 4H), 3.01 - 2.79 (m, 2H), 2.69 - 2.55 (m, 2H), 2.54 - 2.29(m, 2H), 2.20 - 2.10 (m, 6H), 2.00 - 1.73 (m, 15H), 1.70 - 1.67 (s, 3H), 1.67- 1.49 (m, 10H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 11H), 1.07 (s, 3H), 0.97 - 0.93 (m, 3H),0.92 (s, 3H), 0.86 (s, 3H), 0.84 (s, 3H)。
步骤4. 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯的制备
向1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯（60毫克，0.066毫摩尔）在DCE（3毫升）中的溶液中加入TEA（0.015毫升，0.105毫摩尔）、叔丁基二甲基硅烷（0.022毫升，0.132毫摩尔）和乙酸钯(II)（3.70毫克，0.016毫摩尔）。将该混合物用N2吹扫并加热至60℃。在加热3小时后，将该混合物冷却至RT并经硅藻土和硅胶垫过滤（用50% EtOAc（在己烷中），然后二氯甲烷洗涤）。将该滤液在减压下浓缩以产生固体形式的标题化合物（61毫克，100%）。粗产物不经另外提纯即用于下一步骤。LCMS: m/e 935.70 (M+H)+, 3.247 min（方法9）。
步骤5. 向1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯（15毫克，0.016毫摩尔）在THF（4毫升）中的溶液中加入TBAF（1M在THF中）（0.024毫升，0.024毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌30分钟。将该混合物通过制备型HPLC（方法9）提纯以产生白色固体形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4,4-双(乙氧基羰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（7毫克，53.2%）。LCMS: m/e 821.60 (M+H)+, 2.901 min（方法9）。1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 5.38 - 5.32 (m, 1H), 5.17 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H),4.72 - 4.40 (m, 3H), 4.32 - 4.21 (m, 4H), 3.54 - 3.24 (m, 4H), 3.10 (br. s.,3H), 2.90 - 2.60 (m, 2H), 2.36 (br. s., 4H), 2.28 - 1.73 (m, 12H), 1.69 (s,3H), 1.66 - 1.50 (m, 6H), 1.44 (br. s., 3H), 1.38-1.33 (m, 3H), 1.32 - 1.24(m, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.08 (d, J=8.3 Hz, 2H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H),0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H)。
实施例14和实施例15
(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(乙氧基羰基)-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（异构体1）的制备和(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(乙氧基羰基)-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（异构体2）的制备
步骤1. 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯的制备
按照上述用于制备1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯的程序，使用硫代吗啉-3-羧酸乙酯盐酸盐代替哌啶-4,4-二甲酸二乙酯作为原材料以26.3%收率制备标题化合物。MS: m/e857.65. (M+H)+, 3.876 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.38 - 7.31 (m, 5H),5.31 (d, J=3.8 Hz, 1H), 5.23 - 5.13 (m, 2H), 5.10 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.70 (d,J=2.0 Hz, 1H), 4.62 - 4.54 (m, 2H), 4.51 - 4.40 (m, 1H), 4.28 - 4.22 (m, 2H),3.81 - 3.67 (m, 1H), 3.63 (ddd, J=12.5, 5.8, 3.5 Hz, 1H), 3.37 (ddd, J=12.4,9.9, 2.9 Hz, 1H), 3.21 (ddd, J=12.4, 8.5, 5.8 Hz, 1H), 3.09 (ddd, J=9.9, 6.0,3.5 Hz, 1H), 3.03 - 2.95 (m, 1H), 2.93 - 2.66 (m, 5H), 2.64 - 2.32 (m, 5H),2.17 - 2.08 (m, 3H), 2.00 - 1.77 (m, 8H), 1.69 (s, 3H), 1.64 - 1.48 (m, 8H),1.18 - 1.01 (m, 8H), 0.99 - 0.80 (m, 16H)。
步骤2. 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯1,1-二氧化物的制备
在0℃下向4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯（32毫克，0.037毫摩尔）在MeOH（2毫升）中的混合物的溶液中加入OXONE®（34.4毫克，0.056毫摩尔）在水（2.00毫升）中的悬浮液，接着加入丙酮（5毫升）。将所得混合物在0℃下搅拌12小时。将该反应混合物用水（10毫升）稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层用连二亚硫酸钠洗涤，然后经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以产生固体形式的标题化合物。将30毫克粗产物不经进一步提纯即用于下一步骤。MS: m/e 889.55.(M+H)+, 3.26 min（方法9）。
步骤3 . 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯1,1-二氧化物的制备
按照上述用于制备1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯的程序，使用4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯1,1-二氧化物代替1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸二乙酯作为原材料，以97%收率制备标题化合物。MS: m/e 913.65. (M+H)+, 3.204 min（方法9）。
步骤4 .向4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯1,1-二氧化物（20毫克，0.022毫摩尔）在THF（4毫升）中的溶液中加入TBAF（1M在THF中）（0.032毫升，0.032毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌30分钟。将该混合物通过制备型HPLC（方法9）提纯以产生两种产物：
实施例14: 白色固体形式的(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(乙氧基羰基)-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（异构体1）（2毫克，11.43%）。LCMS:m/e 799.50 (M+H)+, 2.866 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.40 - 5.29 (m,1H), 5.19 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.64 - 4.55 (m, 1H),4.49 (q, J=8.6 Hz, 1H), 4.37 - 4.25 (m, 2H), 3.74 - 3.62 (m, 1H), 3.46 - 2.85(m, 10H), 2.68 - 2.53 (m, 2H), 2.26 - 2.06 (m, 5H), 2.02 - 1.75 (m, 7H), 1.72(s, 3H), 1.67 - 1.50 (m, 7H), 1.37 - 1.27 (m, 8H), 1.13 (s, 3H), 1.09-1.01(m, 4H), 1.04 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 - 0.91 (m, 3H), 0.88 (s, 3H)和
实施例15: 白色固体形式的(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(乙氧基羰基)-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸异构体2（2毫克，11.43%）作为异构体2。LCMS: m/e 799.55 (M+H)+, 2.778 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.44 -5.31 (m, 1H), 5.20 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.75 - 4.69 (m, 1H), 4.67- 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.43 (m, 1H), 4.37 - 4.29 (m, 2H), 4.28 - 4.22 (m,1H), 3.67 (br. s., 1H), 3.51 - 3.42 (m, 2H), 3.34 - 3.09 (m, 5H), 3.05 - 2.86(m, 3H), 2.61 (d, J=5.8 Hz, 1H), 2.33 - 2.22 (m, 2H), 2.19 - 2.15 (m, 2H),2.14 - 2.09 (m, 1H), 2.05 - 1.76 (m, 14H), 1.73 (s, 3H), 1.64 - 1.01 (m,12H), 1.12 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H).19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -224.87 - -225.57 (m, 1F)。
实施例16
1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-羧基-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸的制备
向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4,4-双(乙氧基羰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（5毫克，6.09微摩尔）)在1,4-二氧杂环己烷（2毫升）和MeOH（1毫升）中的溶液中加入氢氧化钠（1毫升，1.000毫摩尔）。将该混合物在66℃下搅拌2小时，然后冷却至室温。将该反应混合物通过制备型HPLC（方法9）提纯以产生膜形式的标题化合物（0.8毫克，15.46%）。LCMS: m/e 765.60 (M+H)+, 2.928 min（方法9）。
实施例17
1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-羧基-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸的制备
在1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-羧基-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)哌啶-4,4-二甲酸的提纯过程中分离出标题化合物（白色固体，1.2毫克，22.36%）。LCMS: m/e793.60 (M+H)+, 2.992 min（方法9）。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.37 (br. s., 1H),5.18 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.63 - 4.37 (m, 2H), 4.31- 4.18 (m, 2H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.58 - 3.53 (m,1H), 3.52 - 3.47 (m, 2H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.24 - 3.09 (m, 2H), 2.65 -2.60 (m, 1H), 2.56 - 1.17 (m, 40H), 1.10 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H),0.9 (s, 3H), 0.87 (s, 3H)。
实施例18
4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-羧基-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸的制备
向4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙基)硫代吗啉-3-甲酸乙酯（0.030克，0.035毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（2毫升）和MeOH（1毫升）中的溶液中加入氢氧化钠（1毫升，1.000毫摩尔）。将该混合物在66℃下搅拌2小时并形成清澈溶液。将该粗制反应混合物通过制备型HPLC（方法10）提纯以产生白色固体形式的标题化合物（4.5毫克，16.53%）。LCMS: m/e 739.55 (M+H)+, 2.838 min（方法9）。1HNMR (400MHz, 甲醇-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.85 -4.80 (m, 1H), 4.75 - 4.68 (m, 1H), 4.63 - 4.51 (m, 1H), 4.49 - 4.37 (m, 1H),3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.22 - 2.90 (m, 4H), 2.89 - 2.68 (m, 4H), 2.66 - 2.48(m, 3H), 2.44 - 2.23 (m, 2H), 2.18 - 1.98 (m, 8H), 1.85 (d, J=12.5 Hz, 2H),1.77 (d, J=4.0 Hz, 3H), 1.74 - 1.28 (m, 14H), 1.25 - 1.17 (m, 3H), 1.14 (d, J=11.3 Hz, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 - 0.89(m, 3H). 19F NMR (376MHz, 甲醇-d4) δ -226.92 (m, 1F)。
实施例19
(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向在CH3CN（6毫升）中的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮杂环丙烷-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（230毫克，0.337毫摩尔）中加入硫代吗啉-3,5-二基二甲醇（77毫克，0.472毫摩尔）、碘化钠（55.6毫克，0.371毫摩尔）和磷酸钾（215毫克，1.012毫摩尔）。将所得悬浮液在125℃下加热15小时。将该反应混合物用乙酸乙酯稀释，用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层经硫酸钠干燥并浓缩至干。将该粗材料使用硅胶提纯以获得灰白色固体（6毫克，2.5%）。LCMS: m/e 700.55 (M+H)+, 2.925 min（方法9）。
步骤2. 将(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（6毫克，8.57微摩尔）溶解在MeOH（2毫升）和二氧杂环己烷（2毫升）的混合物中。加入氢氧化钠（1毫升，1.000毫摩尔）。将所得混合物在25℃下搅拌15小时并通过制备型HPLC（方法9）提纯以产生白色固体形式的(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（2.0毫克，36.3%）。LCMS: m/e 610.55 (M+H)+, 2.928 min（方法9）。
用于制备实施例20和21的通用方案
。
实施例20
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向含有(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.1克，0.152毫摩尔）和1-(2-氯乙基)吡咯烷-2-酮（0.056克，0.381毫摩尔）的可密封烧瓶中加入磷酸钾盐（0.129克，0.610毫摩尔）和碘化钾（0.038克，0.229毫摩尔）。将该混合物用乙腈（2毫升）稀释，用氮气吹扫，然后将该管瓶密封并加热至100℃ 持续21小时。将该混合物冷却至室温，用水（10毫升）稀释并用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取。有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残留物通过使用0-5%甲醇（在二氯甲烷中）梯度和12g硅胶柱的快速色谱法提纯以产生透明膜形式的标题化合物（0.104克，0.136毫摩尔，89%收率）。LCMS: m/e 767.6 (M+H)+, 2.20 min（方法3）。
步骤2. 向(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.104克，0.136毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（2毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液中加入NaOH (1N)（0.542毫升，0.542毫摩尔）。将该混合物加热至60℃。在加热4.5小时后，将该混合物冷却至室温并通过使用25-100% A至B梯度（A = 9:1水:乙腈（添加0.1% TFA），B = 1:9水:乙腈（添加0.1% TFA））和50 g C18柱的反相色谱法提纯。合并含产物的级分并在减压下浓缩以产生白色固体形式的标题化合物的TFA盐（0.076克，0.096毫摩尔，71%收率）。LCMS: m/e 677.4 (M+H)+, 1.73 min（方法3）。1H NMR (500MHz,乙酸 d4)δ 5.37 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.63- 4.45 (m, 2H), 3.81 - 3.68 (m, 2H), 3.66 - 3.54 (m, 3H), 3.51 - 3.44 (m,1H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.63 - 2.48 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.15 (s, 3H),1.07 (s, 3H), 2.34 - 1.04 (m, 29H), 0.98 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H)。
实施例21
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向含有(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.1克，0.152毫摩尔）和1-(3-氯丙基)吡咯烷-2-酮（0.074克，0.457毫摩尔）的可密封烧瓶中加入磷酸钾盐（0.129克，0.610毫摩尔）和碘化钾（0.038克，0.229毫摩尔）。将该混合物用乙腈（2毫升）稀释，用氮气吹扫，然后密封该管瓶并加热至100℃ 持续16小时。将该混合物冷却至室温，用水（10毫升）稀释并用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取。有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。残留物通过使用0-5% MeOH（在DCM中）梯度和12g硅胶柱的快速色谱法提纯。合并含产物的级分并在减压下浓缩以产生透明膜形式的标题化合物（0.074克，0.095毫摩尔，62%收率）。LCMS: m/e 781 (M+H)+, 2.20 min（方法3）。
步骤2.向(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.074克，0.095毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（2毫升）和甲醇（0.4毫升）中的溶液中加入1N NaOH（0.379毫升，0.379毫摩尔）并将该混合物温热至60℃。在加热4小时后，将该混合物冷却至室温并通过制备型HPLC（方法11）提纯。合并含产物的级分并在减压下浓缩以产生白色固体形式的标题产物的TFA盐（0.042克，0.052毫摩尔，55%收率）。LCMS: m/e 691.5 (M+H)+, 1.73 min（方法3）。1H NMR (500MHz,乙酸d4) δ 5.39 (br. s.,1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.65 - 4.47 (m, 2H),3.56 - 3.41 (m, 4H), 3.28 - 3.16 (m, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.65 - 2.58(m, 1H), 2.52 (t, J=8.1 Hz, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H),2.36 - 1.06 (m, 31H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)。
实施例22
(R)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(R)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯的制备
将(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（180毫克，0.248毫摩尔）和 N,N'-二异丙基氨基甲亚胺酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯（2-(trimethylsilyl)ethyl N,N'-diisopropylcarbamimidate）（91毫克，0.371毫摩尔）在四氢呋喃（10毫升）中的混合物在80℃下回流4小时。将反应混合物在减压下浓缩，用甲醇（3毫升）和四氢呋喃（4毫升）稀释残留物。所得混合物在室温下静置14小时。形成白色固体并通过过滤除去。将滤液在减压下浓缩。用甲醇（2毫升）和水（5毫升）处理该残留物以提供白色沉淀物。通过过滤收集固体并用二乙醚（4毫升）洗涤以提供白色固体形式的标题化合物（130毫克，60%）。LCMS: m/e 827.8 (M+H)+, 2.39 min（方法3）。
步骤2. 4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(R)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(R)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯（50毫克，0.060毫摩尔）和Pd-C（6.43毫克，6.04微摩尔）在四氢呋喃（2毫升）和甲醇（1毫升） 中的混合物在氢气气氛下在20℃下搅拌31小时。该反应混合物经硅藻土垫过滤以除去钯催化剂并用四氢呋喃（10毫升）洗涤。将该滤液在减压下浓缩以提供白色固体形式的标题化合物（40毫克，64%，80%纯）。LCMS: m/e 829.8 (M+H)+, 2.43 min（方法3）。
步骤3. 将4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(R)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯（15毫克，0.014毫摩尔）和氟化四正丁基铵（101毫克，0.289毫摩尔）在二氧杂环己烷（1毫升）中的混合物在20℃下搅拌5小时。将反应混合物过滤并通过制备型HPLC用0-70乙腈/水/TFA提纯以提供无色油形式的所需产物（6毫克，54%）。LCMS: m/e 729.7 (M+H)+, 1.90 min（方法3）。1H NMR (500MHz, 乙酸) δ 5.40 (br.s., 1H), 5.31 - 5.17 (m, 1H), 4.73 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.40 (m, 1H), 3.58- 3.02 (m, 12H), 2.62 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.35 - 2.30 (m, 1H), 2.25 - 1.13(m, 28H), 1.26 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.99 (s,3H), 0.93 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.85 (d, J=6.8 Hz, 3H)。
实施例23
4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己烷甲酸的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(R)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯（18毫克，0.022毫摩尔）和Pd-C（4.63毫克，4.35微摩尔）在四氢呋喃（2毫升）和甲醇（2毫升）中的混合物在20℃下搅拌3天。将该反应混合物经硅藻土垫过滤，然后用四氢呋喃（2毫升）洗涤，将滤液在减压下浓缩以提供固体。将该固体溶解在四氢呋喃（2毫升）中并将氟化四正丁基铵（152毫克，0.435毫摩尔）添加到该反应中。将该混合物在20℃下搅拌2天。将反应混合物过滤并通过制备型HPLC用0-70乙腈/水/TFA提纯以提供白色固体形式的标题化合物（4毫克，24%）。LCMS: m/e 731.8 (M+H)+, 1.87 min（方法3）。1H NMR (500MHz, 乙腈-d3) δ 5.28 (dd, J=6.5, 1.6 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H),4.31 (s, 1H), 3.27 - 2.97 (m, 11H), 2.94 - 2.83 (m, 1H), 2.20 - 1.24 (m,32H), 1.16 (s, 3H), 1.13 - 1.11 (m, 1H), 1.05 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.94 (s,3H), 0.92 (d, J=6.9 Hz, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.84 (d, J=6.6 Hz, 3H)。
实施例24
(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2,6-二甲基-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-(2-氯乙基)-2,6-二甲基硫代吗啉1,1-二氧化物的制备
将2,6-二甲基硫代吗啉1,1-二氧化物（100毫克，0.613毫摩尔）、2-氯乙醛（135毫克，0.858毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（72.1毫克，0.674毫摩尔）在甲醇（2毫升）和乙酸（1毫升）中的混合物在室温下搅拌17小时。将该反应混合物用饱和碳酸钠（10毫升）洗涤并用乙酸乙酯（3 x 10毫升）萃取。合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供无色油形式的标题化合物（90毫克，65%）。LCMS: m/e 226.2 (M+H)+, 0.54 min（方法3）。
步骤2. 将4-(2-氯乙基)-2,6-二甲基硫代吗啉1,1-二氧化物（20.65毫克，0.091毫摩尔）、(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（30毫克，0.046毫摩尔）、碘化钾（8.35毫克，0.050毫摩尔）和磷酸钾（48.5毫克，0.229毫摩尔）在乙腈（1毫升）中的混合物在120℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用蒸馏水（3毫升）猝灭并用二氯甲烷萃取（3 x 3毫升）。将合并的有机相用盐水（3毫升）洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供白色固体。将该固体溶解在乙腈（1毫升）中并加入氢氧化钠（0.457毫升，0.457毫摩尔）。将该混合物在80℃下加热3小时，然后将其过滤并通过制备型HPLC用乙腈/水/TFA提纯以提供白色固体形式的(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2,6-二甲基-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（12毫克，33%）。LCMS: m/e755.8 (M+H)+, 1.96 min（方法3）。1H NMR (500MHz, 甲醇-d4) δ 5.36 (br. s., 1H),5.22 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.62 - 4.51(m, 1H), 4.50 - 4.39 (m, 1H), 3.39-3.11 (m, 7H), 3.01 - 2.73 (m, 4H), 2.57(d, J=17.7 Hz, 1H), 2.38 - 1.15 (m, 27H), 1.79 (s, 3H), 1.30 (dd, J=6.8, 3.3Hz, 6H), 1.17 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s,3H)。
实施例25
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2,6-二甲基-1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（30毫克，0.046毫摩尔）、4-(2-氯乙基)-2,6-二甲基硫代吗啉1,1-二氧化物（20.65毫克，0.091毫摩尔）、碘化钾（8.35毫克，0.050毫摩尔）和磷酸钾（48.5毫克，0.229毫摩尔）在乙腈（1毫升）中的混合物在120℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用蒸馏水（3毫升）猝灭并用二氯甲烷（3 x3毫升）萃取。将合并的有机相用盐水（3毫升）洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供白色固体。将这种白色固体溶解在乙腈（1毫升）中并加入氢氧化钠（0.457毫升，0.457毫摩尔）。将该混合物在80℃下加热3小时，过滤并通过制备型HPLC用乙腈/水/TFA提纯以提供白色固体形式的标题化合物（12毫克，33%）。LCMS: m/e 755.8 (M+H)+, 1.92 min（方法3）。1H NMR (500MHz, 甲醇-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.6 Hz, 1H),4.86 (s, 1H), 4.76 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.61 - 4.51 (m, 1H), 4.50 - 4.38 (m,1H), 3.39- 3.07 (m, 7H), 3.01 - 2.73 (m, 4H), 2.57 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.37 -1.20 (m, 27H), 1.78 (s, 3H), 1.30 (dd, J=6.7, 3.1 Hz, 6H), 1.17 (s, 3H), 1.13(s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)。
实施例26
(1R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(6-甲基-1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-(2-氯乙基)-6-甲基-1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物的制备
将6-甲基-1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物（100毫克，0.613毫摩尔）、2-氯乙醛（0.107毫升，0.858毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（72.1毫克，0.674毫摩尔）在甲醇（1毫升）和乙酸（0.5毫升）中的混合物在室温下搅拌17小时。将该反应混合物用饱和碳酸钠（3毫升）洗涤并用乙酸乙酯（3 x 2毫升）萃取。合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供无色油形式的标题化合物（105毫克，76%）。LCMS: m/e 226.2 (M+H)+, 0.33 min（方法3）。
步骤2. 将(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（20毫克，0.030毫摩尔）、4-(2-氯乙基)-6-甲基-1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物（27.5毫克，0.122毫摩尔）、碘化钾（5.57毫克，0.034毫摩尔）和磷酸钾（32.4毫克，0.152毫摩尔）在乙腈（1毫升）中的混合物在120℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用蒸馏水（3毫升）猝灭并用二氯甲烷（3 x 2毫升）萃取。将合并的有机相用盐水（3毫升）洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供白色固体形式的所需中间体。将该固体溶解在二氧杂环己烷（1毫升）中并加入氢氧化钠（0.305毫升，0.305毫摩尔）。将该混合物在80℃下加热3小时。将反应混合物过滤并通过制备型HPLC用0-70乙腈/水/TFA提纯以提供无色油形式的(1R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(6-甲基-1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（9.8毫克，40%）。LCMS: m/e 755.9 (M+H)+, 1.93 min（方法3）。1H NMR (500MHz, 甲醇-d4) δ 5.36 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H),4.76 (s, 1H), 4.61 - 4.51 (m, 1H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.69 - 3.14 (m, 9H),3.11 - 2.75 (m, 4H), 2.57 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.49 - 2.24 (m, 2H), 2.22 -1.15 (m, 26H), 1.78 (s, 3H), 1.19 (d, J=3.0 Hz, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.09 (dd,J=7.0, 4.8 Hz, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (d, J=2.0 Hz, 3H)。
实施例27
(1S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(6-甲基-1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（20毫克，0.030毫摩尔）、4-(2-氯乙基)-6-甲基-1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物（34.4毫克，0.152毫摩尔）、碘化钾（5.57毫克，0.034毫摩尔）和磷酸钾（32.4毫克，0.152毫摩尔）在乙腈（1毫升）中的混合物在120℃下加热16小时。将反应混合物冷却至室温，用蒸馏水（3毫升）猝灭并用二氯甲烷萃取（3 x 2毫升）。将合并的有机相用盐水（3毫升）洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以提供白色固体。将该固体溶解在二氧杂环己烷（1毫升）中并加入氢氧化钠（0.305毫升，0.305毫摩尔）。该混合物在80℃下加热3小时。将反应混合物过滤并通过制备型HPLC用0-70乙腈/水/TFA提纯以提供无色油形式的标题化合物（6毫克，25%）。LCMS: m/e 755.9 (M+H)+, 1.90 min（方法3）。1H NMR (500MHz, 甲醇-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.62 - 4.51 (m, 1H), 4.51- 4.40 (m, 1H), 3.67 - 3.15 (m, 9H), 3.10 - 2.75 (m, 4H), 2.57 (d, J=18.1 Hz,1H), 2.49 - 2.23 (m, 2H), 2.21 - 1.14 (m, 26H), 1.78 (s, 3H), 1.22 - 1.17 (m,3H), 1.13 (s, 3H), 1.10 - 1.06 (m, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s,3H)。
实施例28
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((羧甲基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙酸的制备
用硼烷2-甲基吡啶络合物（0.061克，0.572毫摩尔）处理(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.250克，0.381毫摩尔）和一水合乙醛酸（0.053克，0.572毫摩尔）在甲醇（1毫升）、THF（1毫升）和乙酸（0.5毫升）中的混合物。该混合物在加料时立即泡腾并在室温下搅拌。在搅拌2.5小时后，用另外的硼烷2-甲基吡啶络合物（0.061克，0.572毫摩尔）和一水合乙醛酸（0.053克，0.572毫摩尔）处理该混合物并将所得溶液在室温下搅拌另外96小时。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法14）提纯以提供无色玻璃质固体TFA盐形式的所需材料（0.213克，78%收率）。LCMS: m/z 714.4 (M+H)+, 2.63 min (方法1)。1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ7.59 (s, 2H), 7.38 - 7.26 (m, 3H), 5.31 (br. s., 1H), 5.21 - 5.12 (m, 2H),5.10 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.61 - 4.38 (dm, J=47.2Hz, 2H), 3.50 (s, 2H), 2.70 - 2.54 (m, 2H), 2.12 (d, J=7.8 Hz, 3H), 2.08 -1.87 (m, 6H), 1.84 - 1.67 (m, 8H), 1.67 - 1.57 (m, 3H), 1.56 - 1.40 (m, 6H),1.40 - 1.28 (m, 3H), 1.28 - 1.21 (m, 1H), 1.17 (s, 3H), 1.11 - 1.00 (m, 4H),0.93 - 0.82 (m, 9H)。
步骤2.
将2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙酸TFA盐（0.050克，0.060毫摩尔）与LiOH 1M水溶液（0.483毫升，0.483毫摩尔）以及THF（0.5毫升）和MeOH（0.5毫升）的混合物合并。将所得混合物在80℃下搅拌30分钟。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法15）提纯以提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0318克，71%收率）。LCMS: m/z 624.4 (M+H)+, 2.43 min (方法1). 1H NMR (400MHz,CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.4 Hz,1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.60 - 4.39 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 3.43 (s,2H), 2.65 (td, J=11.0, 5.1 Hz, 1H), 2.55 (d, J=17.9 Hz, 1H), 2.29 - 2.11 (m,2H), 2.11 - 1.86 (m, 7H), 1.85 - 1.66 (m, 8H), 1.66 - 1.43 (m, 8H), 1.43 -1.24 (m, 4H), 1.18 (s, 4H), 1.14 - 1.01 (m, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H),0.89 (s, 3H)。
实施例29
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在具有PTFE衬里螺帽的1打兰管瓶中合并2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙酸TFA（0.025克，0.030毫摩尔）与在THF（1毫升）中的硫代吗啉1,1-二氧化物（10.20毫克，0.075毫摩尔）和HATU（0.029克，0.075毫摩尔）。向该混合物中加入DIPEA（0.026毫升，0.151毫摩尔）并将所得溶液在室温下搅拌整夜。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法16）提纯以产生白色粉末TFA盐形式的产物（0.0269克，94%收率）。LCMS: m/z 831.5 (M+H)+, 2.50 min (方法1)。
步骤2. 在具有PTFE衬里螺帽的1打兰管瓶中合并(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯TFA（0.0269克，0.028毫摩尔）与LiOH 1M水溶液（0.063毫升，0.063毫摩尔）以及THF（0.5毫升）和MeOH（0.5毫升）的混合物。将所得混合物在70℃下搅拌30分钟，然后加热至80℃持续1小时。添加另外的LiOH 1M水溶液（0.080毫升，0.080毫摩尔）并将该混合物加热至70℃持续 20分钟，然后加热至80℃ 持续30分钟。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法4）提纯以产生白色玻璃质固体TFA盐形式的标题化合物（0.0178克，66%收率）。LCMS: m/z 741.5 (M+H)+, 2.34 min (方法1). 1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.59 -4.40 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 4.33 - 4.21 (m, 2H), 4.13 - 3.86 (m, 4H), 3.25 (t,J=4.9 Hz, 2H), 3.18 (t, J=4.9 Hz, 2H), 2.76 - 2.65 (m, 1H), 2.55 (d, J=16.4Hz, 1H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 2H), 2.07 - 1.91 (m, 5H), 1.91- 1.71 (m, 7H), 1.71 - 1.20 (m, 14H), 1.18 (s, 3H), 1.15 - 1.02 (m, 4H), 0.96(s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例30
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在具有PTFE衬里螺帽的1打兰管瓶中合并2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((苄氧基)羰基)-4-(氟甲基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)氨基)乙酸TFA（0.025克，0.030毫摩尔）与在THF（1毫升）中的4-甲基哌啶-4-醇（8.69毫克，0.075毫摩尔）和HATU（0.029克，0.075毫摩尔）。向该混合物中加入DIPEA（0.026毫升，0.151毫摩尔）并将所得溶液在室温下搅动整夜。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法16）提纯以产生玻璃质固体TFA盐形式的产物（0.0280克，100%收率）。LCMS: m/z 811.6 (M+H)+, 2.54 min (方法1)。
步骤2. 将(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯TFA（0.028克，0.030毫摩尔）溶解在1,2-二氯乙烷（1毫升）中并向所得溶液中加入三乙胺（10.97微升，0.079毫摩尔）、叔丁基二甲基硅烷（0.015毫升，0.091毫摩尔）和乙酸钯(II)（1.699毫克，7.57微摩尔）。将该混合物用氮气吹扫并加热至60℃持续 1小时。然后经氮气物流将该混合物浓缩成残留物，然后再溶解在THF（0.8毫升）中。向该混合物中加入TBAF（1.0M在THF中，0.106毫升，0.106毫摩尔）并将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将该粗制混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法16）提纯以产生白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0204克，79%收率）。LCMS: m/z 721.5 (M+H)+,2.16 min (方法1). 1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33(br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.44 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 4.13 - 3.96 (m, 1H), 3.96 - 3.80 (m, 1H),3.53 - 3.45 (m, 2H), 2.73 - 2.60 (m, 1H), 2.60 - 2.49 (m, 1H), 2.28 - 2.13(m, 2H), 2.13 - 1.92 (m, 7H), 1.90 - 1.71 (m, 7H), 1.71 - 1.45 (m, 13H), 1.45- 1.30 (m, 4H), 1.28 (d, J=4.2 Hz, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.10 (d, J=6.8 Hz, 1H),1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例31
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用4-(甲基磺酰基)哌啶（0.012克，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0205克，经2个步骤70%收率）。LCMS: m/z 769.4 (M+H)+, 2.33 min (方法1). 1H NMR (400MHz,CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H),4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.72 - 4.61 (m, 2H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.22 -4.06 (m, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 2H), 3.29 - 3.13 (m, 1H), 3.00 - 2.87 (m, 4H),2.73 - 2.62 (m, 1H), 2.55 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.28 - 2.19 (m, 3H), 2.19 -2.11 (m, 1H), 2.11 - 1.92 (m, 7H), 1.89 - 1.75 (m, 5H), 1.74 (s, 3H), 1.71 -1.60 (m, 4H), 1.58 (br. s., 1H), 1.55 - 1.41 (m, 5H), 1.40 - 1.25 (m, 3H),1.19 (s, 3H), 1.13 - 1.08 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H),0.90 (s, 3H)。
实施例32
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代-2-氧代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用吗啉（6.58微升，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0185克，经2个步骤74%收率）。LCMS: m/z 693.4 (M+H)+, 2.35 min (方法1). 1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) d 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 4.81 (s,1H), 4.73 (s, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.05 (d, J=15.2 Hz, 1H), 3.88 (d, J=15.9 Hz, 1H), 3.78 - 3.71 (m, 4H), 3.71 - 3.64 (m, 2H), 3.53 - 3.45 (m, 2H),2.72 - 2.61 (m, 1H), 2.55 (d, J=16.4 Hz, 1H), 2.19 (d, J=19.3 Hz, 2H), 2.13 -2.07 (m, 1H), 2.07 - 1.90 (m, 6H), 1.88 - 1.75 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.72 -1.56 (m, 5H), 1.56 - 1.42 (m, 5H), 1.42 - 1.25 (m, 4H), 1.19 (s, 4H), 1.15 -1.08 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例33
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用1-(甲基磺酰基)哌嗪（0.012克，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0210克，经2个步骤77%收率）。LCMS: m/z 770.5 (M+H)+, 2.33 min (方法1). 1H NMR (400MHz,CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H),4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.21 (d, J=16.1 Hz, 1H),3.96 (d, J=15.9 Hz, 1H), 3.92 - 3.83 (m, 1H), 3.73 (ddd, J=13.6, 7.3, 3.3 Hz,1H), 3.67 - 3.52 (m, 2H), 3.31 - 3.20 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.71 (td, J=11.1, 4.9 Hz, 1H), 2.55 (d, J=15.9 Hz, 1H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 1.91(m, 7H), 1.89 - 1.71 (m, 7H), 1.71 - 1.60 (m, 4H), 1.60 - 1.41 (m, 6H), 1.41- 1.21 (m, 4H), 1.19 (s, 4H), 1.13 - 1.08 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s,3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例34
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化-1,4-硫氮杂卓-4-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用1,4-硫氮杂卓1,1-二氧化物（0.011克，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0188克，经2个步骤70%收率）。LCMS: m/z 755.4 (M+H)+, 2.32 min (方法1). 1H NMR(400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 1H), 4.25 - 4.10 (m,1H), 4.04 - 3.91 (m, 2H), 3.91 - 3.81 (m, 1H), 3.81 - 3.66 (m, 3H), 3.66 -3.48 (m, 1H), 3.41 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.30 - 3.23 (m, 1H), 2.77 - 2.64 (m,1H), 2.55 (d, J=17.9 Hz, 1H), 2.32 - 2.13 (m, 3H), 2.13 - 1.91 (m, 8H), 1.90- 1.75 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.71 - 1.60 (m, 4H), 1.59 - 1.44 (m, 5H), 1.44- 1.29 (m, 4H), 1.19 (d, J=2.2 Hz, 4H), 1.10 (d, J=7.1 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H),0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例35
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用噻唑烷1,1-二氧化物（9.15毫克，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0117克，经2个步骤45%收率）。LCMS: m/z 727.4 (M+H)+, 2.31 min (方法1). 1H NMR (400MHz,CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=6.1 Hz,1H), 4.81 (s, 1H), 4.72 (br. s., 1H), 4.64 (br. s., 1H), 4.47 - 4.40 (m, 1H),4.19 - 4.08 (m, 2H), 4.01 - 3.84 (m, 1H), 3.49 (t, J=6.1 Hz, 1H), 3.41 (t, J=7.2 Hz, 1H), 2.74 - 2.63 (m, 1H), 2.55 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.30 - 2.12 (m,2H), 2.09 (br. s., 1H), 2.07 - 1.92 (m, 5H), 1.92 - 1.75 (m, 4H), 1.73 (s,3H), 1.69 - 1.44 (m, 9H), 1.44 - 1.36 (m, 2H), 1.36 - 1.24 (m, 2H), 1.17 (d,J=4.6 Hz, 3H), 1.14 - 1.01 (m, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例36
(1S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(3-(甲基磺酰基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用3-(甲基磺酰基)吡咯烷（0.011克，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0117克，经2个步骤57%收率）。LCMS: m/z 755.4 (M+H)+, 2.31 min (方法1). 1H NMR (400MHz,CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=5.4 Hz,1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (br. s., 1H), 4.47 - 4.39 (m, 1H), 4.19 - 3.97 (m,2H), 3.97 - 3.81 (m, 3H), 3.81 - 3.61 (m, 2H), 3.09 - 3.01 (m, 3H), 2.75 -2.46 (m, 4H), 2.30 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 1.91 (m, 7H), 1.88 - 1.75 (m, 3H),1.74 (s, 3H), 1.71 - 1.61 (m, 4H), 1.59 - 1.42 (m, 6H), 1.41 - 1.29 (m, 3H),1.26 (br. s., 1H), 1.19 (s, 4H), 1.10 (d, J=8.6 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.97(s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H)。
实施例37
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-二氧化-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
通过用于制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的相同程序制备标题化合物，只是在步骤1中使用(1S,4S)-2-硫杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷2,2-二氧化物氢溴化物（0.017克，0.075毫摩尔）代替4-甲基哌啶-4-醇。将粗制步骤2混合物通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法12）提纯提供白色固体TFA盐形式的标题化合物（0.0154克，经2个步骤57%收率）。LCMS: m/z 753.4 (M+H)+, 2.31 min (方法1). 1H NMR (400MHz, CDCl3和CD3OD的1:1混合物, CD3OD 锁场) δ5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 5.11 (d, J=3.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H),4.76 - 4.70 (m, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.99 - 3.84(m, 2H), 3.84 - 3.69 (m, 1H), 3.30 - 3.13 (m, 2H), 2.75 - 2.60 (m, 2H), 2.60- 2.42 (m, 2H), 2.29 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 1.90 (m, 7H), 1.87 - 1.75 (m,3H), 1.74 (s, 3H), 1.72 - 1.59 (m, 4H), 1.59 - 1.41 (m, 6H), 1.41 - 1.21 (m,4H), 1.21 - 1.15 (m, 4H), 1.10 (d, J=7.6 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H),0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H)。
实施例38
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA的制备
步骤1. (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲酸的制备
在N2(g)气氛下向5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-苄酯（1.500克，2.216毫摩尔）在DCE（20毫升）和乙酸（5毫升）中的溶液中加入钯黑（0.047克，0.443毫摩尔）。将该反应容器用H2(g)吹扫并在H2(g)气氛下搅拌5小时，过滤，用DCM（50毫升）洗涤并浓缩成白色固体。粗材料用少量DCM和己烷研制，浓缩成白色浆料，过滤并用己烷洗涤以提供第一批所需产物。将该液体滤液进一步浓缩成白色浆料，过滤并用己烷洗涤以提供第二批。合并这两批并在真空下干燥以产生白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲酸（1.1克，1.875毫摩尔，85%收率）。LCMS: m/e 587.2 (M+H)+, 3.23 min (方法1). 1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 5.57 (d, J=3.9 Hz, 1H), 4.76 (br. s., 1H), 4.63 (br. s.,1H), 3.03 (br. s., 1H), 2.46 - 2.10 (m, 3H), 2.00 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.81 -1.63 (m, 6H), 1.59 - 1.32 (m, 12H), 1.25 (br. s., 3H), 1.13 (br. s., 3H),1.02 (br. s., 3H), 1.00 (br. s., 6H), 0.93 (br. s., 3H). 13C NMR (101MHz，氯仿- d) δ 182.0, 155.4, 150.3, 113.7, 109.8, 56.4, 53.3, 49.2, 48.9, 46.9, 42.5,40.6, 40.3, 38.5, 37.9, 37.1, 36.4, 33.3, 32.1, 30.6, 29.7, 27.5, 25.5, 21.4,19.4, 19.39 - 19.33, 18.9, 16.2, 15.7, 14.6. 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -74.82(br. s., 3F)。
步骤2. 三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲酸（0.500克，0.852毫摩尔）和N,N-二异丙基乙基胺（0.520毫升，2.98毫摩尔）在DCM（10毫升）中的溶液中加入HATU（0.389克，1.023毫摩尔）和 4-(2-氨基乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物（0.182克，1.023毫摩尔）。将该反应在室温下搅拌（10:25 am）。在2小时后，将该反应用DCM稀释并用20毫升5%柠檬酸水溶液洗涤。用DCM（25毫升）萃取水层。将合并的有机物用10% Na2CO3、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成清澈的粘性油。将粗材料通过柱色谱法提纯（SiO2, 24 g Isco cartridge，用97:3 DCM:MeOH洗脱）并在真空下干燥以产生白色固体形式的三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（394毫克，0.527毫摩尔，61.9%收率）。LCMS: m/e747.5 (M+H)+, 2.75 min (方法1). 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.87 (t, J=5.4 Hz,1H), 5.56 (dd, J=6.6, 1.7 Hz, 1H), 4.74 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.37(q, J=6.0 Hz, 2H), 3.15 - 3.07 (m, 1H), 3.05 (s, 7H), 2.66 (t, J=6.2 Hz, 2H),2.56 - 2.46 (m, 1H), 2.16 (dd, J=17.1, 6.8 Hz, 1H), 1.97 - 1.88 (m, 2H), 1.79- 1.71 (m, 3H), 1.69 (s, 3H), 1.66 - 1.54 (m, 3H), 1.52 - 1.30 (m, 10H), 1.25- 1.16 (m, 2H), 1.12 (s, 3H), 1.10 - 1.06 (m, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.98 (s,3H), 0.97 (s, 3H), 0.91 (s, 3H). 13C NMR (101MHz，氯仿-d) δ 176.3, 155.3,150.6, 113.7, 109.6, 55.7, 55.6, 53.3, 51.3, 50.7, 50.0, 49.0, 46.8, 42.5,40.6, 40.2, 38.6, 38.4, 37.9, 37.8, 36.3, 36.3, 33.8, 33.5, 30.8, 29.4, 27.4,25.5, 21.5, 19.5, 19.4, 19.0, 16.2, 15.9, 14.6. 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -74.83 (s, 3F)。
步骤3. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯TFA的制备
合并三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基酯（250毫克，0.335毫摩尔）、(R)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯（150毫克，0.402毫摩尔）和Buchwald预催化剂13（92371-003-01）（10.53毫克，0.013毫摩尔）。将该反应容器在真空炉中抽空15分钟，然后用N2(g)回填。向该反应烧瓶中装入用N2(g)预鼓泡的THF（4毫升）和0.5 M K3PO4水溶液（1.673毫升，0.837毫摩尔）。该反应混合物用N2(g)鼓泡并在72℃下搅拌15小时并使其冷却至室温整夜。将该反应用EtOAc（50毫升）稀释并用1.5N K3PO4洗涤。用EtOAc（50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成棕色粘性油。将粗材料通过快速柱色谱法提纯（硅胶, 12g, 用97:3 DCM:MeOH洗脱）并干燥以产生仍被少数杂质污染的产物。将该材料通过反相制备型HPLC（制备型HPLC方法8）进一步提纯并在真空下干燥以产生白色固体形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯TFA（161毫克，0.166毫摩尔，49.6%收率）。LCMS: m/e 845.7 (M+H)+, 3.25min (方法1). 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.39 - 7.30 (m, 5H), 6.78 (br. s., 1H),5.32 (br. s., 1H), 5.24 - 5.14 (m, 2H), 5.11 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H),4.62 (s, 1H), 4.60 - 4.54 (m, 1H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.82 - 3.57 (m, 6H),3.46 (br. s., 4H), 3.25 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.05 (td, J=11.0, 3.9 Hz, 1H),2.60 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.24 - 2.03 (m, 4H), 2.02 -1.90 (m, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 3H), 1.69 (s, 3H), 1.66 - 1.61 (m, 1H), 1.60 -1.46 (m, 4H), 1.46 - 1.18 (m, 10H), 1.05 (d, J=8.8 Hz, 2H), 0.97 (s, 3H),0.92 (s, 6H), 0.87 (s, 3H), 0.84 (s, 3H)。
步骤4. 向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯TFA（96毫克，0.100毫摩尔）在THF（1.0毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液中加入1N氢氧化锂溶液（0.500毫升，0.500毫摩尔）并在60℃下搅拌（11:25 AM）。在2小时后，LC/MS显示反应完成并使其冷却至室温。将该反应混合物通过反相制备型HPLC (制备型HPLC方法12)提纯并在真空下干燥以产生白色固体形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（66.1毫克，0.075毫摩尔，75%收率）。LCMS: m/e 755.5 (M+H)+, 2.69 min (方法1). 1H NMR (400MHz, 1:1 CDCl 3 :甲醇-d 4 ) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.6 Hz,1H), 4.69 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.45 - 4.36 (m, 1H), 3.09 (s, 6H), 3.06 - 3.01(m, 1H), 2.67 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.57 - 2.45 (m, 2H), 2.30 - 2.19 (m, 1H),2.12 (br. s., 1H), 2.08 - 2.04 (m, 1H), 2.02 (br. s., 1H), 2.00 - 1.92 (m,2H), 1.91 - 1.81 (m, 1H), 1.80 - 1.69 (m, 3H), 1.67 (s, 3H), 1.63 - 1.52 (m,3H), 1.50 - 1.30 (m, 10H), 1.29 - 1.14 (m, 5H), 1.09 - 0.99 (m, 2H), 0.97 (s,3H), 0.95 (s, 3H), 0.94 (br. s., 3H), 0.89 (s, 3H), 0.84 (s, 3H). ). 13C NMR(101MHz, 1:1 CD3Cl 3 :甲醇-d 4 ) δ 178.7, 178.0, 151.6, 148.9, 140.0, 122.3,122.2, 110.0, 78.6, 56.6, 56.2, 53.9, 51.7, 51.5, 50.9, 50.4, 47.6, 46.2,46.1, 43.2, 42.6, 41.4, 39.0, 38.7, 38.3, 37.1, 36.9, 34.57 - 34.44, 33.9,31.6, 30.3, 30.2, 29.9, 29.8, 27.1, 26.6, 22.2, 22.1, 20.45 - 20.36 (m, 1C),19.8, 16.9, 16.5, 15.1. 19F NMR (376MHz, 1:1 CDCl 3 :甲醇-d 4 ) δ -76.79 (s, 3F),-226.23 (t, J=47.7 Hz, 1F)。
实施例39和实施例40: (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（异构体A）和 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸，TFA异构体B)的制备
步骤1. (1S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((1,1,1-三氟-3-硝基丙-2-基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯.
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（190毫克，0.290毫摩尔）在DCM（2毫升）中的溶液中加入(1E)-3,3,3-三氟-1-硝基丙-1-烯（64.5毫克，0.434毫摩尔）并在室温下搅拌。在16小时后，将该反应浓缩成棕色粘性油并通过快速柱色谱法提纯（SiO2, 24 g Isco cartridge，用9:1 Hex:EtOAc洗脱）并在真空下干燥以产生白色固体形式的(1S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((1,1,1-三氟-3-硝基丙-2-基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（171.2毫克，0.215毫摩尔，74.2%收率）。LCMS: m/e 797.5 (M+H)+, 4.55min (方法10)。
步骤2. (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯.
向(1S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((1,1,1-三氟-3-硝基丙-2-基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（26毫克，0.033毫摩尔）在THF（1毫升）中的溶液中加入1N HCl（0.489毫升，0.489毫摩尔）。向所得浆料中加入1.5N Rieke锌在THF中的溶液（0.217毫升，0.326毫摩尔）。向所得灰色浆料中加入MeOH（1毫升）。该反应变成均匀溶液并将其在室温下搅拌整夜。在15小时后，浓缩该反应。将所得残留物用THF（5毫升）溶解，用1.5 K3PO4（5毫升）中和，用2x 25毫升EtOAc萃取该混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩成白色泡沫。该材料以粗制形式用于下一步骤。LCMS: m/e 767.6 (M+H)+, 4.96 min (方法10)。
步骤3. (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（异构体A）和 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸，TFA异构体B）
向来自实验99699-178的粗材料(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（25毫克，0.033毫摩尔）在THF（1毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液中加入1N氢氧化锂溶液（0.114毫升，0.114毫摩尔）。该反应在65℃下搅拌。在4小时后，使该反应冷却至室温并通过反相制备型HPLC（制备型方法13）提纯并在真空下干燥以产生异构体A， (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA和异构体B，(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA；都为白色固体形式。
实施例39: 异构体A: LCMS: m/e 675.8 (M+H)+, 4.29 min (方法11). 1H NMR(400MHz, 1:1氯仿-d :甲醇-d 4 ) δ 5.31 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.9 Hz, 1H),4.72 (br. s., 1H), 4.67 (br. s., 1H), 4.54 - 4.49 (m, 2H), 4.45 - 4.38 (m,2H), 4.25 (br. s., 2H), 3.73 (t, J=6.5 Hz, 2H), 3.59 (br. s., 1H), 3.15 -3.05 (m, 1H), 3.03 - 2.96 (m, 1H), 2.69 (td, J=11.0, 5.6 Hz, 1H), 2.53 (d, J=18.3 Hz, 1H), 2.17 (d, J=18.6 Hz, 2H), 2.05 (d, J=18.1 Hz, 1H), 2.01 - 1.90(m, 2H), 1.89 - 1.84 (m, 2H), 1.82 - 1.71 (m, 4H), 1.68 (s, 3H), 1.66 - 1.61(m, 1H), 1.56 (d, J=16.4 Hz, 1H), 1.44 (d, J=6.4 Hz, 6H), 1.38 - 1.22 (m,5H), 1.20 (s, 1H), 1.07 (br. s., 2H), 1.04 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s,3H), 0.91 (s, 2H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR-1H去耦(376MHz, 1:1氯仿-d :甲醇-d 4 ) δ-73.36 (s, 3F), -76.38 (s, 3F), -226.33 (s, 1F). 19F NMR (376MHz, 1:1氯仿-d : 甲醇-d 4 ) δ -73.37 (d, J=6.9 Hz, 3F), -76.39 (s, 3F), -226.14 - -226.54 (m,1F)。
实施例40: 异构体B: LCMS: m/e 675.7 (M+H)+, 4.63 min (方法11). 1H NMR(400MHz, 1:1氯仿-d :甲醇-d 4 ) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.6 Hz, 1H),4.70 (s, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 3.72 (t, J=6.6 Hz, 1H), 3.64 (dd, J=7.2,3.5 Hz, 1H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 3.14 - 3.04 (m, 1H), 2.62 - 2.46 (m, 2H),2.30 - 2.11 (m, 2H), 2.10 - 2.00 (m, 2H), 1.99 - 1.89 (m, 4H), 1.86 (dt, J=6.7, 3.2 Hz, 1H), 1.80 - 1.70 (m, 3H), 1.68 (s, 3H), 1.66 (br. s., 1H), 1.64- 1.57 (m, 1H), 1.55 - 1.48 (m, 3H), 1.47 - 1.38 (m, 5H), 1.38 - 1.29 (m,2H), 1.28 - 1.18 (m, 2H), 1.12 (br. s., 2H), 1.07 (s, 3H), 1.04 (br. s., 1H),0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 1:1氯 仿-d :甲醇-d 4 ) δ -73.84 (s, 3F), -76.35 (s, 5F), -226.26 (s, 1F)。
实施例41和实施例42
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（异构体A）和(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（异构体B）的制备
步骤1.
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-氨基-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（107毫克，0.139毫摩尔）在2-丙醇（3毫升）中的溶液中加入二乙烯基砜（0.020毫升，0.167毫摩尔）并在85℃下搅拌。在22小时后，将该反应冷却至室温并浓缩以产生粘性棕色油形式的(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯，将其直接用于下一步骤。
步骤2.
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（异构体A）和(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（异构体B）的制备
将(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯溶解在THF（1毫升）和MeOH（1毫升）中并用1N氢氧化锂溶液（0.697毫升，0.697毫摩尔）处理，加热至65℃ 4小时并使其冷却至室温。对反应内容物施以使用下述制备型方法的反相HPLC提纯并在真空下干燥以产生异构体A，(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（32毫克，0.035毫摩尔，24.98%收率）和异构体B，(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1,1,1-三氟丙-2-基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸TFA（24.3毫克，0.026毫摩尔，18.97%收率），都为白色固体形式。
实施例41: 异构体A: LCMS: m/e 795.6 (M+H)+, 4.11 min (方法11). 1H NMR(400MHz, 1:1 CDCl3:甲醇-d 4 ) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.16 (t, J=4.0 Hz, 1H), 5.12(s, 1H), 4.70 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 4.21 - 4.06 (m, 1H),3.23 - 2.94 (m, 10H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.70 - 2.46 (m, 3H), 2.44 - 2.27(m, 1H), 2.26 - 2.12 (m, 3H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 2.00 - 1.85 (m, 4H), 1.81- 1.69 (m, 3H), 1.68 (s, 1H), 1.66 (s, 2H), 1.61 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.58 -1.51 (m, 1H), 1.51 - 1.34 (m, 7H), 1.34 - 1.18 (m, 4H), 1.11 - 1.05 (m, 1H),1.04 (s, 2H), 0.98 (s, 1.5H), 0.96 (s, 1.5H), 0.94 (s, 6H), 0.91 (s, 3H),0.86 (s, 1.5H), 0.85 (br. s., 1.5H)。
实施例42: 异构体B: LCMS: m/e 795.6 (M+H)+, 4.19 min (方法11). 1H NMR(400MHz, 1:1 CDCl3:甲醇-d 4 ) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.20 - 5.14 (m, 1H), 5.12(s, 1H), 4.77 - 4.67 (m, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 3H), 3.86 (d, J=3.4 Hz, 1H),3.21 - 2.99 (m, 9H), 2.96 - 2.71 (m, 2H), 2.70 - 2.57 (m, 2H), 2.52 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.34 - 2.12 (m, 3H), 2.05 (d, J=19.1 Hz, 2H), 2.01 - 1.89 (m,3H), 1.81 - 1.67 (m, 4H), 1.66 (s, 3H), 1.62 - 1.54 (m, 2H), 1.54 - 1.36 (m,7H), 1.35 - 1.12 (m, 5H), 1.07 (br. s., 1H), 1.05 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95(s, 1H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.84 (s, 3H)。
实施例43
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)磺酰基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸, 2 TFA的制备
步骤1.
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)磺酰基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯.
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（0.100克，0.152毫摩尔）在DCE（1毫升）中的溶液中加入二乙烯基砜（0.037毫升，0.305毫摩尔）并在65℃下搅拌15小时并冷却至室温。LCMS: m/e 774.5 (M+H)+, 4.53 min (方法10)。
向上述反应混合物中加入硫代吗啉1,1-二氧化物（0.041克，0.305毫摩尔），在85℃下搅拌8小时并使其冷却回室温。浓缩该反应并在真空下干燥以产生粘性深棕色油形式的粗制(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)磺酰基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯，将其以粗制形式用于下一步骤。LCMS: m/e 909.8 (M+H)+, 4.79 min (方法10)。
步骤2.
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)磺酰基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸, 2 TFA的制备
向粗制(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)磺酰基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（139毫克，0.153毫摩尔）在THF（1毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液中加入1N氢氧化锂溶液（0.535毫升，0.535毫摩尔）。将该反应在65℃下搅拌3小时并冷却至室温。将该反应内容物通过反相制备型HPLC（制备型方法12）提纯并在真空下干燥以产生白色固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-二氧化硫代吗啉代)乙基)磺酰基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸, 2 TFA（66.7毫克，0.061毫摩尔，经3个反应步骤39.6%收率）。LCMS: m/e 819.7 (M+H)+, 3.90 min (方法12). 1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H),4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.35 - 4.24 (m, 1H), 4.07 (br. s.,3H), 3.78 (t, J=6.6 Hz, 1H), 3.67 - 3.47 (m, 4H), 3.32 (dt, J=14.7, 5.6 Hz,1H), 3.20 - 3.00 (m, 10H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 2.56 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.26- 2.16 (m, 3H), 2.15 - 2.05 (m, 3H), 2.03 - 1.92 (m, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.69(br. s., 1H), 1.63 - 1.49 (m, 4H), 1.44 (br. s., 4H), 1.37 (d, J=11.0 Hz,1H), 1.30 (br. s., 2H), 1.10 (s, 3H), 1.06 (d, J=7.6 Hz, 2H), 1.03 (s, 3H),0.95 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.88 (s, 3H). 19F NMR (376MHz，氯仿-d) δ -75.76 (s,6F), -224.87 (s, 1F)。
第2节
LC/MS方法
LC/MS方法2-1
条件: 0% B → 100% B，经2分钟梯度；保持在100% B 1 min
溶剂A: 90%水, 10%甲醇, 0.1% TFA
溶剂B: 10%水, 90%甲醇, 0.1% TFA
柱: Phenomenex Luna C18, 2.0 x 50 mm, 3 μm
流量: 1 mL / min
检测器波长: 220 nm。
LC/MS方法2-2
条件: 0% B → 100% B，经4分钟梯度；保持在100% B 1 min
溶剂A: 90%水, 10%甲醇, 0.1% TFA
溶剂B: 10%水, 90%甲醇, 0.1% TFA
柱: Phenomenex Luna C18, 3 mm, 2.0 x 50 mm
流量: 1 mL / min
检测器波长: 220 nm。
LC/MS方法2-3
条件: 0% B → 100% B，经4分钟梯度；保持在100% B 2 min
溶剂A: 90%水, 10%甲醇, 0.1% TFA
溶剂B: 10%水, 90%甲醇, 0.1% TFA
柱: Phenomenex Luna C18, 3 mm, 2.0 x 50 mm
流量: 0.8 mL / min
检测器波长: 220 nm。
制备型HPLC方法
制备型HPLC方法2-1
条件: 30% B → 100% B，经20分钟梯度；保持在100% B 4分钟
溶剂A: 5%乙腈, 95%水, 0.1% TFA
溶剂B: 95%乙腈, 5%水 0.1% TFA
柱: Waters Xbridge 30 x 100 mm, 5 μm
流量: 40 mL/min
检测器波长: 220 nm。
制备型HPLC方法2-2
条件: 见实验部分
溶剂A: 5:95乙腈: 水，具有10-mM乙酸铵
溶剂B: 95:5乙腈: 水，具有10-mM乙酸铵
柱: Waters Xbridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm
流量: 20 mL/min
检测器波长: 220 nm。
制备型HPLC方法2-3
条件: 50 B → 100% B，经20分钟梯度；保持在100% B 5 min
溶剂A: 5:95乙腈: 水，具有0.1%三氟乙酸
溶剂B: 95:5乙腈: 水，具有含0.1%三氟乙酸
柱: Xbridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm粒子
流量: 20 mL/min
检测器波长: 220 nm。
制备型HPLC方法2-4
条件: 10% B → 100% B，经20分钟梯度；保持在100% B 5 min
溶剂A: 5%乙腈, 95%水, 0.1% TFA
溶剂B: 95%乙腈, 5%水 0.1% TFA
柱: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
流量: 40 mL/min
检测器波长: 220 nm。
制备型HPLC方法2-5
条件: 30% B → 100% B，经20分钟梯度；保持在100% B 5 min
溶剂A: 5%乙腈, 95%水, 0.1% TFA
溶剂B: 95%乙腈, 5%水 0.1% TFA
柱: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
流量: 40 mL/min
检测器波长: 220 nm。
制备型HPLC方法2-6
条件: 10% B → 100% B，经20分钟梯度；保持在100% B 2 min
溶剂A: 10%甲醇, 90%水, 0.1% TFA
溶剂B: 90%甲醇, 10%水 0.1% TFA
柱: Waters Sunfire 30 x 100 mm, 5 μm
流量: 40 mL/min
检测器波长: 220 nm。
分析型HPLC方法
分析型HPLC方法2-1
条件: 10% B → 100% B，经15分钟梯度；保持在100% B 10 min
溶剂A: 10%甲醇, 90%水, 0.1% TFA
溶剂B: 90%甲醇, 10%水, 0.1% TFA
柱: Waters Sunfire C18, 4.6 x 150 mm, 3.5 mm
流量: 1 mL/min
检测器波长: 220 nm。
分析型HPLC方法2-2
条件: 10% B → 100% B，经15分钟梯度；保持在100% B 10 min
溶剂A: 10%甲醇, 90%水, 0.1% TFA
溶剂B: 90%甲醇, 10%水, 0.1% TFA
柱: Waters Xbridge Phenyl, 4.6 x 150 mm, 3.5 mm
流量: 1 mL/min
检测器波长: 220 nm。
分析型HPLC方法2-3
梯度: 0 → 100% B，经3分钟，然后保持在100% B 0.5分钟
溶剂A: 5:95乙腈:水，具有10 mM乙酸铵
溶剂B: 95:5乙腈:水，具有10 mM乙酸铵
柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm粒子
流量: 1 mL/min
检测器波长: 220 nm
温度: 50℃。
分析型HPLC方法2-4
梯度: 0 → 100% B，经3分钟，然后保持在100% B 0.5分钟
溶剂A: 5:95乙腈:水，具有10 mM乙酸铵
溶剂B: 95:5乙腈:水，具有10 mM乙酸铵
柱: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm粒子
流量: 1 mL/min
检测器波长: 220 nm
温度: 50℃。
分析型HPLC方法2-5
条件: 10% B → 100% B，经15分钟梯度；保持在100% B 10 min
溶剂A: 5%乙腈, 95%水, 0.1% TFA
溶剂B: 95%乙腈, 5%水, 0.1% TFA
柱: Waters Sunfire C18, 3.0 x 150 mm, 3.5 um
流量: 0.5 mL / min
检测器波长: 220 nm。
分析型HPLC方法2-6
条件: 10% B → 100% B，经15分钟梯度；保持在100% B 10 min
溶剂A: 5%乙腈, 95%水, 0.1% TFA
溶剂B: 95%乙腈, 5%水, 0.1% TFA
柱: Waters Xbridge Phenyl, 3.0 x 150 mm, 3.5 um
流量: 0.5 mL / min
检测器波长: 220 nm。
实施例2-1
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-甲基苯磺酸3-羟基-3-甲基丁酯的制备
在0℃下向3-甲基丁-1,3-二醇（1.00克，9.60毫摩尔）在吡啶（10毫升）中的溶液中加入对甲苯磺酰氯（2.014克，10.56毫摩尔）。在通过冰-水浴的耗散使反应混合物缓慢温热至室温的同时将反应混合物搅拌16小时。将该混合物转移到含有乙酸乙酯（100毫升）的分液漏斗中。将有机层用1 N HCl（3 x 50毫升）洗涤。随后将有机层用饱和NaHCO3溶液（50毫升）、盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（30% → 50%乙酸乙酯（在己烷中）；220 g柱）以提供无色油形式的4-甲基苯磺酸3-羟基-3-甲基丁酯（2.03克，7.86毫摩尔，82%收率）：1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.85 - 7.78 (m,2H), 7.37 (dd, J=8.5, 0.8 Hz, 2H), 4.23 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.88(t, J=6.9 Hz, 2H), 1.24 (s, 6H)；LC/MS: 该产物不离子化，t R = 1.78 min（方法2-1）。
步骤2. 4-溴-2-甲基丁-2-醇的制备
在室温下向4-甲基苯磺酸3-羟基-3-甲基丁酯（400毫克，1.548毫摩尔）在THF（15毫升）中的溶液中加入溴化锂（403毫克，4.65毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌整夜。将该混合物转移到含有饱和NaHCO3水溶液（10毫升）和水（10毫升）的分液漏斗中。用醚（3 x 20毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（20% → 40%乙酸乙酯（在己烷中）；80 g柱）以提供无色油形式的4-溴-2-甲基丁-2-醇（231毫克，1.383毫摩尔，89%收率）：1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ3.55 - 3.49 (m, 2H), 2.15 - 2.09 (m, 2H), 1.28 (s, 6H)。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在烘干管瓶中向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（70毫克，0.107毫摩尔）、4-溴-2-甲基丁-2-醇（24.96毫克，0.149毫摩尔）、磷酸三钾（68.0毫克，0.320毫摩尔）和碘化钾（24.80毫克，0.149毫摩尔）的混合物中加入乙腈（0.8毫升）。密封瓶盖并将反应混合物在120℃下加热2小时。在此期间溶剂蒸发。添加另外的乙腈（0.8毫升）并将反应混合物在120℃下加热1小时。将该混合物转移到含有水（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 30% 9:1丙酮:甲醇/70%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（56.6毫克，0.076毫摩尔，72%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.42 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23- 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.63 - 4.55 (m,2H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.77 - 2.68 (m, 1H), 2.65 -2.53 (m, 2H), 2.18 - 0.86 (m, 29H), 1.69 (s, 3H), 1.27 (s, 6H), 1.07 (s, 3H),0.98 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 742.6 [(M+H)+, 计算C49H73FNO3 为742.6], t R = 4.86 min（方法2-3）。
步骤4. 用氢氧化钠（2M aq）（0.243毫升，0.485毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（72毫克，0.097毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1.4毫升）和EtOH (0.7毫升)中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（55.4毫克，74%收率）：1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.27 - 5.21(m, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.61 (dt, J=10.8, 9.0 Hz, 1H), 4.51 (dt,J=10.8, 9.2 Hz, 1H), 3.46 - 3.38 (m, 1H), 3.38 - 3.30 (m, 1H), 2.91 - 2.83(m, 1H), 2.61 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.32 - 1.09 (m, 29H), 1.75 (s, 3H), 1.36(s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s,3H), 0.94 (s, 3H)；LC/MS m/e 652.5 [(M+H)+, 计算C42H67FNO3为652.5], t R = 4.40min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.97 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.16 min。
实施例2-2
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-甲基苯磺酸2-羟基-2-甲基丙酯的制备
在0℃下向2-甲基丙-1,2-二醇（415毫克，4.60毫摩尔）在吡啶（5毫升）中的溶液中加入对甲苯磺酰氯（966毫克，5.07毫摩尔）。在通过冰-水浴的耗散使反应混合物缓慢温热至室温的同时将反应混合物搅拌16小时。将该混合物转移到含有乙酸乙酯（50毫升）的分液漏斗中。用1 N HCl（3 x 25毫升）洗涤有机层。随后将有机层用饱和NaHCO3溶液（25毫升）、盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（30% →50%乙酸乙酯（在己烷中）；120 g柱）以提供无色油形式的4-甲基苯磺酸2-羟基-2-甲基丙酯（1.01克，4.13毫摩尔，90%收率）：1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.86 - 7.78 (m, 2H),7.38 (d, J=8.0 Hz, 2H), 3.86 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.24 (s, 6H)；LC/MS: 该产物不离子化，t R = 1.70 min（方法2-1）。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向4-甲基苯磺酸2-羟基-2-甲基丙酯（22.35毫克，0.091毫摩尔）在乙腈（0.7毫升）中的溶液中加入(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）、磷酸三钾（32.4毫克，0.152毫摩尔，2当量）和碘化钾（63.27毫克，0.381毫摩尔）。将反应混合物在100℃下加热6小时。然后添加另外的4-甲基苯磺酸2-羟基-2-甲基丙酯（56毫克，0.229毫摩尔，3当量）和磷酸三钾（16毫克，0.076毫摩尔，1当量）并将反应混合物在120℃下加热22小时。然后添加另外的4-甲基苯磺酸2-羟基-2-甲基丙酯（37毫克，0.153毫摩尔，2当量）、磷酸三钾（32毫克，0.152毫摩尔，2当量）和碘化钾（28毫克，0.168毫摩尔，2.2当量）并将反应混合物在120℃下加热另外18小时。将反应混合物冷却至室温。将该混合物转移到含有水（10毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。该产物不经进一步提纯即直接用于下一步骤: LC/MS m/e 728.6 [(M+H)+, 计算C48H71FNO3为728.5], t R = 4.72 min（方法2-2）。
步骤3. 用氢氧化钠（0.189毫升，0.378毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（55毫克，0.076毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.5毫升）和EtOH（0.25毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（2.7毫克，5%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz,1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H),3.51 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.06 (d, J=12.4 Hz, 1H), 3.03 - 2.95 (m, 1H), 2.61(d, J=16.9 Hz, 1H), 2.32 - 1.07 (m, 27H), 1.75 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.41(s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s,3H)；LC/MS m/e 738.6 [(M+H)+, 计算C41H65FNO3为738.5], t R = 4.29 min（方法2-2）.HPLC（方法2-1）: t R = 18.88 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.24 min。
实施例2-3
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-羟基-4-甲基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 5,5-二甲基四氢呋喃-2-醇的制备
在氮气下在-78℃下将DIBAL（1.314毫升，1.314毫摩尔）添加到5,5-二甲基二氢呋喃-2(3H)-酮（100毫克，0.876毫摩尔）在THF（10毫升）中的溶液中。将反应混合物在-78℃下搅拌3小时。将Rochelle's盐的溶液添加到该反应混合物中，将其在室温下搅拌30分钟。使反应混合物在EtOAc和水之间分相。将有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空下浓缩以提供粗产物（35毫克，0.301毫摩尔，34%收率）。粗产物的1H-NMR表明其在4-羟基-4-甲基戊醛和5,5-二甲基四氢呋喃-2-醇之间平衡，其中5,5-二甲基四氢呋喃-2-醇（35毫克，0.301毫摩尔，34%收率）是主要形式。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.51 (d, J=4.8 Hz, 1H), 2.90(br. s., 1H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.82 - 1.64 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.22(s, 3H)。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-羟基-4-甲基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（25毫克，0.038毫摩尔）和5,5-二甲基四氢呋喃-2-醇（13.28毫克，0.114毫摩尔）在DCE（0.6毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.018毫升，0.061毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（16.15毫克，0.076毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌16小时。使反应混合物在DCM和饱和碳酸氢钠水溶液之间分相。将有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空下浓缩以提供(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-羟基-4-甲基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（28.8毫克，0.038毫摩尔，100 %收率）。粗产物不经进一步提纯即用于下一步骤。LC/MSm/e 756.7 [(M+H)+, 计算C50H74FNO3为756.6] tR = 2.66 min（方法2-1）。
步骤3. 将氢氧化钠（0.048毫升，0.190毫摩尔，4 N aq）添加到粗制(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-羟基-4-甲基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（28.7毫克，.038毫摩尔）在二氧杂环己烷（1毫升）和乙醇（0.500毫升）中的溶液中。将反应混合物在70℃下搅拌2小时。将该混合物冷却至室温，并将该粗材料通过反相制备型HPLC提纯（方法2-2，梯度：经10分钟60-100% B，然后保持在100% 15分钟）以提供(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-羟基-4-甲基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（2.8毫克，4.08微摩尔，11%收率）；LC/MSm/e 666.6 [(M+H)+, 计算C43H68FNO3为666.5] tR = 2.40 min（方法2-1）；HPLC（方法2-3）:t R = 2.76 min；HPLC（方法2-4）: t R = 2.11 min。
实施例2-4
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-乙基-3-羟基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 3-乙基己-5-烯-3-醇的制备
在0℃下向烯丙基溴化镁（13.93毫升，13.93毫摩尔）在THF（10毫升）中的溶液中加入戊-3-酮（400毫克，4.64毫摩尔）。移除冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将该反应混合物在冰-水浴中冷却并通过添加饱和NH4Cl水溶液（20毫升）猝灭。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（4 x 25毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色油形式的3-乙基己-5-烯-3-醇（595毫克，4.64毫摩尔，100%收率）。该产物不经进一步提纯即直接用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ5.86 (ddt, J=16.7, 10.6, 7.5 Hz, 1H), 5.21 - 5.07 (m, 2H), 2.23 (dt, J=7.4,1.2 Hz, 2H), 1.57 - 1.43 (m, 4H), 0.90 (t, J=7.5 Hz, 6H)。
步骤2. 3-乙基-3-羟基戊醛的制备
在0℃下向3-乙基己-5-烯-3-醇（595毫克，4.64毫摩尔）在二氧杂环己烷（30毫升）和水（7.50毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（1.081毫升，9.28毫摩尔）、四氧化锇（2.5%在t-BuOH中）（1.165毫升，0.093毫摩尔）和高碘酸钠（3970毫克，18.56毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌16小时。将该混合物转移到含有水（20毫升）和饱和NaHCO3水溶液（30毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（3 x 30毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（20毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% → 8%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供无色油形式的3-乙基-3-羟基戊醛（217毫克，1.667毫摩尔，36%收率）：1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.85 (t, J=2.4 Hz, 1H), 3.66(s, 2H), 1.65 - 1.41 (m, 4H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 6H)。
步骤3. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-乙基-3-羟基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将异丙醇钛(IV)（0.036毫升，0.122毫摩尔）添加到(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）和3-乙基-3-羟基戊醛（15.88毫克，0.122毫摩尔）在DCE（0.6毫升）中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（32.3毫克，0.152毫摩尔）并将反应混合物搅拌3天。使反应混合物在饱和碳酸氢钠水溶液和CH2Cl2之间分相。用CH2Cl2（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% 9:1丙酮/甲醇/100%己烷 → 40% 9:1丙酮/甲醇/60%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色油形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-乙基-3-羟基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（14毫克，0.018毫摩尔，24%收率）: LC/MS (ESI) m/e 770.6 [(M+H)+, 计算C51H76FNO3为770.6] tR = 2.61 min（方法2-1）。
步骤4. 将氢氧化钠（0.023毫升，0.091毫摩尔）添加到(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-乙基-3-羟基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（14毫克，0.018毫摩尔）在二氧杂环己烷（1毫升）和乙醇（0.500毫升）中的溶液中。将反应混合物在70℃下搅拌2小时。将该混合物冷却至室温。将该粗材料通过反相制备型HPLC提纯（方法2-2，梯度经15分钟60-100%B，然后保持在100% B 6分钟）以提供(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-乙基-3-羟基戊基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（5.9毫克，8.5微摩尔，47%收率）；1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 5.25 (br. s., 1H), 5.12 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.67 (br. s., 1H), 4.55 (br.s., 1H), 4.48 (s, 1H), 4.38 (s, 1H), 2.61 - 2.53 (m, 1H), 2.48 - 2.38 (m,3H), 2.23 - 2.08 (m, 1H), 2.07 - 0.93 (m, 32H), 1.65 (s, 3H), 1.02 (s, 3H),0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.82 (s, 3H), 0.80-0.77 (m, 6H)；LC/MS (ESI) m/e 680.5 [(M+H)+, 计算C44H70FNO3为680.5] tR = 2.38 min（方法2-1）；HPLC（方法2-3）: t R = 2.29 min；HPLC（方法2-4）: t R = 2.40 min。
实施例2-5
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基-3-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 1,1-二环丙基丁-3-烯-1-醇的制备
在0℃下向烯丙基溴化镁（10.89毫升，10.89毫摩尔）在THF（10毫升）中的溶液中加入二环丙基甲酮 (400毫克，3.63毫摩尔)。移除冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将该反应在冰-水浴中冷却并通过添加饱和NH4Cl水溶液（20毫升）猝灭。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（4 x 25毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色油形式的1,1-二环丙基丁-3-烯-1-醇（553毫克，3.63毫摩尔，100%收率）。该产物不经进一步提纯即直接用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d)δ 6.16 - 5.98 (m, 1H), 5.21 - 5.08 (m, 2H), 2.37 (dt, J=7.5, 1.1 Hz, 2H),0.94 - 0.79 (m, 2H), 0.49 - 0.25 (m, 8H)。
步骤2. 3,3-二环丙基-3-羟基丙醛的制备
在0℃下向1,1-二环丙基丁-3-烯-1-醇（553毫克，3.63毫摩尔）在二氧杂环己烷（12毫升）和水（3毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.846毫升，7.26毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.444毫升，0.073毫摩尔）和高碘酸钠（3,106毫克，14.52毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌16小时。将该混合物转移到含有水（20毫升）和饱和NaHCO3水溶液（30毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（3 x 30毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（20毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% → 8%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供无色油形式的3,3-二环丙基-3-羟基丙醛（152毫克，0.986毫摩尔，27%收率）：1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.96 (t, J=2.8 Hz,1H), 2.63 (d, J=2.8 Hz, 2H), 0.94 (tt, J=8.2, 5.8 Hz, 2H), 0.51 - 0.38 (m,8H)。
步骤3. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基-3-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（40毫克，0.061毫摩尔）和3,3-二环丙基-3-羟基丙醛（14.10毫克，0.091毫摩尔）在MeOH（0.5毫升）和乙酸（0.1毫升）中的溶液中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物（9.78毫克，0.091毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 40% 9:1丙酮:甲醇/60%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色油形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基-3-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（11毫克，0.014毫摩尔，23%收率）：LC/MS (ESI) m/e 794.6 [(M+H)+, 计算C53H76FNO3为794.6] tR = 2.66 min（方法2-1）。
步骤4. 将氢氧化钠（0.017毫升，0.069毫摩尔）添加到(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基-3-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（11毫克，0.014毫摩尔）在二氧杂环己烷（1毫升）和乙醇（0.500毫升）中的溶液中。将反应混合物在70℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温。将该粗材料通过反相制备型HPLC提纯（方法2-2，经10分钟70-100% B，然后保持在100% B 15分钟）以提供(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基-3-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（1.0毫克，1.37微摩尔，10%收率）；1H NMR(500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.82 (s,1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.56 - 4.47 (m, 1H), 3.53 - 3.41 (m,2H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.7 Hz, 1H), 2.31 - 2.32 (m, 28H), 1.14– 1.10 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99(s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.87 - 0.76 (m, 2H), 0.65 - 0.35 (m, 8H)；LC/MS (ESI)m/e 704.6 [(M+H)+, 计算C46H70FNO3为704.5] tR = 2.44 min（方法2-1）；HPLC（方法2-3）:t R = 2.43 min；HPLC（方法2-4）: t R = 2.46 min。
实施例2-6
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基烯丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基烯丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯
将异丙醇钛(IV)（0.036毫升，0.122毫摩尔）添加到(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）和3,3-二环丙基-3-羟基丙醛（18.81毫克，0.122毫摩尔）在DCE（0.6毫升）中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（32.3毫克，0.152毫摩尔）并将反应混合物搅拌3天。使反应混合物在饱和碳酸氢钠水溶液（10毫升）和CH2Cl2（10毫升）之间分相。用CH2Cl2（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩。粗产物(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基烯丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（32毫克，0.041毫摩尔，54%收率）不经进一步提纯即用于下一步骤。LC/MS (ESI) m/e 776.6 [(M+H)+, 计算C53H74FNO2为776.6], tR = 2.67 min（方法2-1）。
步骤2. 将氢氧化钠（0.052毫升，0.206毫摩尔）添加到(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基烯丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（32毫克，0.041毫摩尔）在二氧杂环己烷（1毫升）和乙醇（0.500毫升）中的溶液中。将反应混合物在70℃下搅拌2小时。将该混合物冷却至室温。将该粗材料通过反相制备型HPLC提纯（方法2-2，经20分钟90-100%B，然后保持在100% B 25分钟）以提供(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-二环丙基烯丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸（1.0毫克，1.34微摩尔，3.3%收率）；1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 2H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.72 (s, 1H),4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.56 - 4.48 (m, 1H), 4.01 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.89 (br.s., 1H), 2.62 (d, J=16.7 Hz, 1H), 2.30 - 0.85 (m, 31H), 1.75 (s, 3H), 1.18(s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.80 (d, J=8.4 Hz, 2H), 0.66 - 0.60 (m, 2H), 0.47 - 0.36 (m, 2H)；LC/MS (ESI) m/e 686.6[(M+H)+, 计算C46H68FNO2为686.5] tR = 2.44 min（方法2-1）；HPLC（方法2-3）: t R = 2.62min；HPLC（方法2-4）: t R = 1.96 min。
实施例2-7
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(异戊基氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(异戊基氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（35毫克，0.053毫摩尔）和3-甲基丁醛（7.35毫克，0.085毫摩尔）在DCE（0.6毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.025毫升，0.085毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（22.62毫克，0.107毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌整夜。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 30% 9:1丙酮:甲醇/70%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(异戊基氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（20毫克，0.028毫摩尔，52%收率）: LC/MS m/e 726.6 [(M+H)+, 计算C49H73FNO2为726.6], t R = 5.10 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（0.069毫升，0.138毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(异戊基氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（20毫克，0.028毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.5毫升）和EtOH (0.25毫升)中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-3）提纯以提供(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(异戊基氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（9.9毫克，48%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.28 - 5.22 (m, 1H), 4.84(s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.61 (dt, J=10.9, 8.8 Hz, 1H), 4.52 (dt, J=11.0, 8.8Hz, 1H), 3.29 - 3.15 (m, 2H), 2.92 - 2.84 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.6 Hz, 1H),2.30-1.10 (m, 30H), 1.75 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H),0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 6H)；LC/MS m/e 636.3 [(M+H)+, 计算C42H67FNO2为636.5], t R = 4.49 min（方法2-2）；HPLC（方法2-3）: t R = 2.54 min；HPLC（方法2-4）: t R = 2.59 min。
实施例2-8
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-(3-氯-2-羟丙基)硫代吗啉1,1-二氧化物的制备
经注射器向硫代吗啉1,1-二氧化物（2.40克，17.75毫摩尔）在DCE（4.4毫升）中的溶液中缓慢加入2-(氯甲基)环氧乙烷（1.392毫升，17.75毫摩尔）。将反应混合物在50℃下搅拌48小时。通过过滤除去形成的白色固体(4,4'-(2-羟基丙烷-1,3-二基)双(硫代吗啉1,1-二氧化物)。将滤液浓缩并通过在硅胶上的柱色谱法提纯（3% → 5%甲醇/CH2Cl2；120 g柱）以提供无色油形式的4-(3-氯-2-羟丙基)硫代吗啉1,1-二氧化物（2.57克，11.29毫摩尔，64%收率），其在静置时凝固：1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 3.95 (dq, J=8.9, 4.6 Hz, 1H),3.69 - 3.55 (m, 2H), 3.26 - 3.15 (m, 2H), 3.14 - 3.03 (m, 6H), 2.75 (dd, J=13.1, 4.3 Hz, 1H), 2.65 (dd, J=13.1, 8.5 Hz, 1H)；LC/MS m/e 228.1 [(M+H)+, 计算C7H15ClNO3S为228.0], tR = 0.26分钟，(电离峰, 无UV)（方法2-1）。
步骤2.
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在烘干管瓶中合并(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（120毫克，0.183毫摩尔）、4-(3-氯-2-羟丙基)硫代吗啉1,1-二氧化物（146毫克，0.640毫摩尔）、磷酸三钾（175毫克，0.823毫摩尔）和碘化钾（137毫克，0.823毫摩尔）。加入乙腈（2毫升），密封该管瓶并将反应混合物在120℃下加热20小时。添加另外的4-(3-氯-2-羟丙基)硫代吗啉1,1-二氧化物（83毫克，0.366毫摩尔，2当量）、磷酸三钾（78毫克，0.366毫摩尔，2当量）和碘化钾（60.7毫克，0.366毫摩尔，2当量）并将反应混合物加热另外16小时。将该混合物冷却至室温。将该混合物转移到含有水（10毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 30% 9:1丙酮:甲醇/70%己烷；40 g柱,λ = 220 nm）以提供淡蓝色泡沫形式的(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（71.4毫克，0.084毫摩尔，46%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.39 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 -5.15 (m, 2H), 5.15 - 5.10 (m, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.61 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.60- 4.54 (m, 1H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 3.80 - 3.67 (m, 1H), 3.23 - 3.03 (m,8H), 2.73 - 2.53 (m, 5H), 2.37 (dd, J=11.7, 7.2 Hz, 1H, 非对映异构体A), 2.29(dd, J=11.7, 8.1 Hz, 1H, 非对映异构体B), 2.19 - 0.83 (m, 47H) (非对映异构体的混合物)；LC/MS m/e 847.6 [(M+H)+, 计算C51H76FN2O5S为847.5], t R = 4.58 min（方法2-2）。
步骤3.
用氢氧化钠（0.089毫升，0.177毫摩尔）处理(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（30毫克，0.035毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.5毫升）和EtOH（0.2毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-2-羟丙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸 ·TFA（13.6毫克，43%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.85 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.75 (br. s., 1H), 4.73 - 4.67 (m, 1H),4.64 - 4.56 (m, 1H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 3H), 3.65 - 3.51(m, 6H), 3.49 - 3.43 (m, 2H), 3.23 (dd, J=12.4, 8.5 Hz, 1H, 非对映异构体A),3.07 (t, J=11.4 Hz, 1H, 非对映异构体B), 2.94 - 2.79 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.1Hz, 1H), 2.32 - 1.09 (m, 27H), 1.76 (s, 3H, 非对映异构体A), 1.76 (s, 3H, 非对映异构体B), 1.15 (s, 3H), 1.11 (s, 3H, 非对映异构体A), 1.10 (s, 3H, 非对映异构体B), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H) (非对映异构体的混合物；LC/MSm/e 757.6 [(M+H)+, 计算C44H70FN2O5S为757.5], t R = 4.24 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.72 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.02 min。
实施例2-9
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基环丁基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 1-烯丙基环丁醇的制备
在0℃下向烯丙基溴化镁（12.8毫升，12.8毫摩尔）在THF（10毫升）中的溶液中加入环丁酮（300毫克，4.28毫摩尔）在THF（5毫升）中的溶液。移除冷却浴并该反应混合物在室温下搅拌16小时。该反应在冰-水浴中冷却并通过添加饱和NH4Cl溶液（20毫升）猝灭。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（4 x 25毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色油形式的1-烯丙基环丁醇（377毫克，3.36毫摩尔，79%收率）。该产物不经进一步提纯即直接用于下一步骤: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ5.90 (ddt, J=16.4, 10.7, 7.3 Hz, 1H), 5.27 - 5.16 (m, 2H), 2.41 (d, J=7.3 Hz,2H), 2.13 - 2.05 (m, 4H), 1.93 (s, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 1H), 1.65 - 1.51 (m,1H)。
步骤2. 2-(1-羟基环丁基)乙醛的制备
在0℃下向1-烯丙基环丁醇（350毫克，3.12毫摩尔）在二氧杂环己烷（30毫升）和水（7.50毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.727毫升，6.24毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.490毫升，0.062毫摩尔）和高碘酸钠（2670毫克，12.48毫摩尔）。使反应混合物温热至室温并搅拌16小时。使反应混合物在EtOAc（25毫升）和饱和碳酸氢钠水溶液（25毫升）之间分相。用乙酸乙酯（3 x 25毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并在真空下浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% → 8%甲醇（在CH2Cl2中）；40g柱）以提供油形式的2-(1-羟基环丁基)乙醛（187毫克，1.638毫摩尔，53%收率）: 1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 9.86 (t, J=1.8 Hz, 1H), 2.32 - 1.95 (m, 4H), 1.92 - 1.73(m, 2H), 1.69 - 1.43 (m, 2H)。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基环丁基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在管瓶中向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基) 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）和2-(1-羟基环丁基)乙醛（13.92毫克，0.122毫摩尔）在二氯乙烷（0.6毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.036毫升，0.122毫摩尔）。该反应混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（32.3毫克，0.152毫摩尔）并将反应混合物搅拌4天。使反应混合物在饱和碳酸氢钠水溶液（10毫升）和CH2Cl2（10毫升）之间分相。用CH2Cl2（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（100%己烷 → 40%含10%甲醇的丙酮/60%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供油形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基环丁基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（51毫克，0.068毫摩尔，89%收率）: LC/MS (ESI) m/e 754.6 [(M+H)+, 计算C50H72FNO3为754.6], tR = 2.74 min（方法2-1）。
步骤4. 用氢氧化钠（0.085毫升，0.338毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基环丁基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（51毫克，0.068毫摩尔）在二氧杂环己烷（1毫升）和乙醇（0.500毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基环丁基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（12.9毫克，0.016毫摩尔，24%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.29 -5.21 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47(m, 1H), 3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.28 (t, J=9.9 Hz, 1H), 2.94 - 2.84 (m, 1H),2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.31 - 0.83 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.14 (s, 3H),1.08 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H)；LC/MS (ESI) m/e 664.6[(M+H)+, 计算C43H66FNO3为664.5], tR = 2.43 min（方法2-1）. HPLC（方法2-1）: t R =19.00 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.57 min。
实施例2-10
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 3-烯丙基氧杂环丁烷-3-醇的制备
在-78℃下向烯丙基溴化镁（7.29毫升，7.29毫摩尔）在THF（40毫升）中的溶液中加入氧杂环丁烷-3-酮（500毫克，6.94毫摩尔）在THF（10毫升）中的溶液。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟。通过添加饱和NH4Cl溶液（40毫升）猝灭该反应。将该混合物转移到分液漏斗中并分离层。用醚（3 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色油形式的3-烯丙基氧杂环丁烷-3-醇（735毫克，6.44毫摩尔，93%收率）。该产物不经进一步提纯即用于下一步骤: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.97 -5.78 (m, 1H), 5.28 (t, J=1.0 Hz, 1H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 4.64 (d, J=7.3 Hz,2H), 4.55 - 4.50 (m, 2H), 2.65 (d, J=7.0 Hz, 2H)；13C NMR (101MHz，氯仿-d) δ131.8, 120.1, 83.2, 73.3, 42.4。
步骤2. 2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙醛的制备
在100毫升圆底烧瓶中将3-烯丙基氧杂环丁烷-3-醇（508毫克，4.45毫摩尔）溶解在CH2Cl2（35毫升）和MeOH（3.5毫升）中。加入N-甲基吗啉-N-氧化物（NMO）（626毫克，5.34毫摩尔）并将该混合物冷却至-78℃ [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P.H. Org. Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]。将臭氧鼓过反应混合物直至该溶液被臭氧饱和（变成蓝色）和在此后几分钟（总时间10分钟）。然后将氮气鼓过反应混合物直至蓝色消失。然后加入二甲硫醚（3.29毫升，44.5毫摩尔）并将反应混合物在0℃下搅拌14小时。该混合物在真空下浓缩。该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（50%含1%甲醇的乙酸乙酯/50%己烷→ 100%含1%甲醇的乙酸乙酯；80 g柱）以提供无色油形式的2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙醛（287毫克，2.472毫摩尔，56%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.85 (s, 1H),4.71 (d, J=7.5 Hz, 2H), 4.52 - 4.47 (m, 2H), 3.14 (d, J=0.5 Hz, 2H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d) δ 201.1, 83.0, 71.4, 50.7。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在管瓶中，将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（500毫克，0.762毫摩尔）、硼烷-2-甲基吡啶络合物（163毫克，1.524毫摩尔）和2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙醛（177毫克，1.524毫摩尔）在MeOH（8毫升）和乙酸（1.6毫升）中的混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（50毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 40% 9:1丙酮:甲醇/60%己烷；80 g柱, λ = 220 nm）以提供无色油形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（320毫克，0.423毫摩尔，56%收率）: LC/MS (ESI) m/e 756.6 [(M+H)+, 计算C49H70FNO4 7为56.5], tR= 2.59 min（方法2-1）。
步骤4. 用氢氧化钠（0.529毫升，2.116毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（320毫克，0.423毫摩尔）在二氧杂环己烷（4毫升）和乙醇（2毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2.5小时。LC/MS显示形成所需产物。将该混合物经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-5）提纯。在旋转蒸发器上除去有机溶剂，将水性混合物冷冻并置于冻干机中以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（220毫克，0.282毫摩尔，67%收率）: 1H NMR(500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H),4.81 - 4.77 (m, 2H), 4.75 - 4.68 (m, 2H), 4.67 - 4.57 (m, 2H), 4.55 - 4.46(m, 1H), 3.52 - 3.42 (m, 1H), 3.33 - 3.23 (m, 1H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.61(d, J=16.8 Hz, 1H), 2.57 - 2.42 (m, 2H), 2.31 - 1.32 (m, 25H), 1.14 - 1.12(m, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s,3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 666.5 [(M+H)+, 计算出C42H67FNO4 666.5], tR = 2.44min（方法2-1）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.63 min；HPLC（方法2-2）: t R = 19.94 min。
实施例2-11
(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（100毫克，0.152毫摩尔）和2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙醛（31.9毫克，0.274毫摩尔）悬浮在MeOH（1.2毫升）中。加入硼烷-2-甲基吡啶络合物（29.4毫克，0.274毫摩尔），接着加入乙酸（0.24毫升）并将该混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）和饱和碳酸钠水溶液（1毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x 5毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（20%含5%甲醇的乙酸乙酯/80%己烷 → 90%含5%甲醇的乙酸乙酯/10%己烷；24 g柱）以提供无色油形式的(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（110毫克，0.145毫摩尔，95%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ7.42 - 7.31 (m, 5H), 5.34 (br. s., 1H), 5.24 - 5.16 (m, 2H), 5.12 (d, J=5.7Hz, 1H), 4.73 (br. s., 1H), 4.69 (t, J=5.3 Hz, 2H), 4.64 - 4.55 (m, 2H), 4.53- 4.46 (m, 2H), 4.43 (d, J=6.0 Hz, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.72 - 2.48 (m,3H), 2.26 - 1.87 (m, 8H), 1.82 - 0.91 (m, 21H), 1.69 (s, 3H), 1.06 (s, 3H),0.98 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 756.6 [(M+H)+, 计算C49H71FNO4为756.6], tR = 4.59 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（0.347毫升，0.694毫摩尔）处理(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（105毫克，0.139毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1.5毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温并通过添加6 N HCl（70微升）部分中和。随后将该混合物经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-5）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（38.0毫克，0.048毫摩尔，35%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d,J=4.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.80 (d, J=7.3 Hz, 2H), 4.74 - 4.69 (m, 2H),4.66 - 4.57 (m, 2H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.47 (ddd, J=12.7, 6.1, 3.2 Hz,1H), 3.28 (ddd, J=12.5, 9.2, 2.9 Hz, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.56 - 2.44 (m, 2H), 2.37 - 2.28 (m, 1H), 2.22 - 1.32 (m, 24H),1.75 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.14 - 1.12 (m, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (s, 3H),0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 666.5 [(M+H)+, 计算出C42H65FNO4 666.5], tR= 4.31 min（方法2-2）；HPLC（方法2-5）: t R = 10.94 min；HPLC（方法2-6）: t R = 10.82min。
实施例2-12
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-烯丙基四氢-2H-吡喃-4-醇的制备
在0℃下经套管向烯丙基溴化镁（20.98毫升，20.98毫摩尔）在THF（40毫升）中的溶液中加入二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮（700毫克，6.99毫摩尔）在THF（10毫升）中的溶液。移除冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将该反应在冰-水浴中冷却并通过添加饱和NH4Cl溶液（40毫升）猝灭。将该混合物转移到分液漏斗中并分离层。用乙酸乙酯（3 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（20% → 60%乙酸乙酯（在己烷中）；80 g柱）以提供无色油形式的4-烯丙基四氢-2H-吡喃-4-醇（818毫克，5.75毫摩尔，82%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ5.90 (ddt, J=17.2, 9.9, 7.5 Hz, 1H), 5.28 - 5.14 (m, 2H), 3.85 - 3.74 (m,4H), 2.28 (d, J=7.5 Hz, 2H), 1.80 - 1.68 (m, 2H), 1.51 (dq, J=14.0, 2.5 Hz,3H)。
步骤2. 2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙醛的制备
在0℃下向4-烯丙基四氢-2H-吡喃-4-醇（150毫克，1.055毫摩尔）在二氧杂环己烷（12毫升）和水（3毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.246毫升，2.110毫摩尔）、四氧化锇（0.265毫升，0.021毫摩尔）和高碘酸钠（903毫克，4.22毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有水（10毫升）和饱和NaHCO3水溶液（10毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（3 x 20毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（20毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（3% → 6%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供无色油形式的2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙醛（67毫克，0.465毫摩尔，44%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.89 (t, J=1.3 Hz, 1H),3.90 - 3.80 (m, 2H), 3.78 - 3.69 (m, 2H), 3.50 (s, 1H), 2.70 (d, J=1.3 Hz,2H), 1.75 - 1.66 (m, 4H)。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（40毫克，0.061毫摩尔）和2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙醛（13.19毫克，0.091毫摩尔）在DCE（0.5毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.027毫升，0.091毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（25.8毫克，0.122毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌整夜。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。该将产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 40% 9:1丙酮:甲醇/60%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（33.2毫克，0.042毫摩尔，69%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.43 - 7.32 (m, 5H), 5.36 - 5.31 (m, 1H),5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.0, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.8 Hz, 1H),4.64 - 4.57 (m, 2H), 4.53 - 4.45 (m, 1H), 3.94 - 3.82 (m, 2H), 3.80 - 3.70(m, 2H), 2.86 - 2.69 (m, 2H), 2.67 - 2.51 (m, 2H), 2.19 - 0.86 (m, 33H), 1.70(s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s,3H)；LC/MS m/e 784.6 [(M+H)+, 计算C51H75FNO4为784.6], t R = 4.69 min（方法2-2）。
步骤4. 用氢氧化钠（2M aq）（0.179毫升，0.357毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（56毫克，0.071毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.7毫升）和EtOH（0.35毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将该水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 ·TFA（37.1毫克，64%收率）:
1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.28 - 5.21 (m, 1H), 4.83(s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.97 - 3.79(m, 4H), 3.46 - 3.31 (m, 2H), 2.92 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H),2.34 - 1.09 (m, 33H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H),0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H)；LC/MS m/e 694.6 [(M+H)+, 计算C44H69FNO4为694.5], t R= 4.27 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.95 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.14min。
实施例2-13
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-烯丙基-4-羟基四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物的制备
在0℃下经套管向烯丙基溴化镁（10.83毫升，10.83毫摩尔）在THF（15毫升）中的溶液中加入二氢-2H-噻喃-4(3H)-酮1,1-二氧化物（1.07克，7.22毫摩尔）在THF（50毫升）中的溶液（通过在油浴中温热至70℃溶解）。移除冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将该反应在冰-水浴中冷却并通过添加饱和NH4Cl溶液（50毫升）猝灭，将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（4 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色固体形式的4-烯丙基-4-羟基四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物（1.42克，7.46毫摩尔，103%收率）。该产物不经进一步提纯即直接用于下一步骤: 1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 5.85 (ddt, J=17.2, 9.9, 7.6 Hz, 1H), 5.34 - 5.28 (m, 1H),5.23 (dq, J=17.1, 1.4 Hz, 1H), 3.43 (td, J=13.6, 3.8 Hz, 2H), 2.92 - 2.84 (m,2H), 2.32 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.23 (td, J=13.8, 3.3 Hz, 2H), 2.05 - 1.97 (m,2H)。
步骤2. 2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙醛的制备
在0℃下向4-烯丙基-4-羟基四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物（1.52克，7.99毫摩尔）在二氧杂环己烷（80毫升）和水（20毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（1.861毫升，15.98毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（1.254毫升，0.160毫摩尔）和高碘酸钠（6.84克，32.0毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有1 NHCl溶液（50毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（12 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用1N HCl溶液（10毫升）、饱和NaHCO3水溶液（10毫升）、盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（3% → 10%甲醇（在CH2Cl2中）；80 g柱）以提供无色油形式的2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙醛（821毫克，4.27毫摩尔，54%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.86 (s, 1H), 3.54 - 3.43 (m, 3H), 2.91 -2.83 (m, 2H), 2.80 (s, 2H), 2.28 - 2.14 (m, 4H)。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（632毫克，0.963毫摩尔）和2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙醛（296毫克，1.542毫摩尔）在DCE（7.5毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.452毫升，1.542毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（408毫克，1.927毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌整夜。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（25毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 40% 9:1丙酮:甲醇/60%己烷；80 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（591毫克，0.710毫摩尔，74%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.40 - 7.32 (m, 5H), 5.34 (br.s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.5Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.61 - 4.55 (m, 1H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 3.58 - 3.46(m, 2H), 2.91 - 2.81 (m, 3H), 2.78 - 2.70 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.6 Hz, 1H),2.53 (td, J=10.8, 5.6 Hz, 1H), 2.17 - 1.06 (m, 33H), 1.70 (s, 3H), 1.06 (s,3H), 0.99 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.87 (s, 3H)；LC/MS m/e 832.6[(M+H)+, 计算C51H75FNO5S为832.5], t R = 4.64 min（方法2-2）。
步骤4. 用氢氧化钠（2M aq）（1.502毫升，3.00毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（500毫克，0.601毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（6毫升）和EtOH（3毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2.5小时。将该混合物冷却至室温并添加6 N HCl（0.20毫升，2当量）以部分中和该反应混合物。将该混合物经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 ·TFA（435毫克，84%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br.s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m,1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.59 - 3.33 (m, 4H), 3.10 - 2.97 (m, 2H), 2.88 -2.78 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.42 - 1.12 (m, 33H), 1.75 (s, 3H),1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 742.6 [(M+H)+, 计算C44H69FNO5S为742.5], tR = 4.19 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）:t R = 18.71 min；HPLC（方法2-2）: t R = 19.66 min。
实施例2-14
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-烯丙基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-醇的制备
在0℃下经套管向烯丙基溴化镁（5.08毫升，5.08毫摩尔）在THF（15毫升）中的溶液中加入1-(甲基磺酰基)哌啶-4-酮（300毫克，1.693毫摩尔）在THF（5毫升）中的溶液。移除冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将该反应在冰-水浴中冷却并通过添加饱和NH4Cl溶液（20毫升）猝灭。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（4 x 25毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色固体形式的4-烯丙基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-醇（423毫克，1.929毫摩尔，114%收率（不纯）），其不经进一步提纯即直接用于下一步骤。1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 5.87 (ddt, J=17.2, 10.0, 7.6Hz, 1H), 5.28 - 5.24 (m, 1H), 5.23 - 5.17 (m, 1H), 3.61 (dt, J=11.4, 2.4 Hz,2H), 3.05 (td, J=11.9, 3.0 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.27 (d, J=7.5 Hz, 2H),1.80 - 1.71 (m, 2H), 1.70 - 1.61 (m, 2H)。
步骤2. 2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙醛的制备
在0℃下向4-烯丙基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-醇（210毫克，0.958毫摩尔）在二氧杂环己烷（12毫升）和水（3毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.223毫升，1.915毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.150毫升，0.019毫摩尔）和高碘酸钠（819毫克，3.83毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有水（10毫升）和饱和NaHCO3水溶液（10毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（5 x 20毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（20毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（3% → 8%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供无色油形式的2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙醛（101毫克，0.456毫摩尔，48%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ9.87 (s, 1H), 3.64 - 3.55 (m, 2H), 3.15 - 3.05 (m, 3H), 2.81 (s, 3H), 2.73(d, J=0.8 Hz, 2H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.73 (dd, J=12.8, 4.5 Hz, 2H)。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）和2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙醛（25.3毫克，0.114毫摩尔）在DCE（0.6毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.034毫升，0.114毫摩尔）。将该混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（32.3毫克，0.152毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌整夜。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 30% 9:1丙酮:甲醇/70%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（49毫克，0.057毫摩尔，75%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.41 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s.,1H), 5.22 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.5 Hz,1H), 4.62 (s, 1H), 4.61 - 4.55 (m, 1H), 4.49 (td, J=8.9, 5.5 Hz, 1H), 3.67 -3.58 (m, 2H), 3.16 - 3.05 (m, 2H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.82 (s, 3H), 2.77 -2.69 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.55 (td, J=10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.18 -0.86 (m, 33H), 1.70 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91(s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 861.6 [(M+H)+, 计算出C52H78FN2O5S 861.6], t R =4.63 min（方法2-2）。
步骤4. 用氢氧化钠（2M aq）（0.139毫升，0.279毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（48毫克，0.056毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.7毫升）和EtOH（0.35毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（38.6毫克，77%收率）: 1H NMR(500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H),4.73 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.65 - 3.50 (m, 2H),3.47 - 3.34 (m, 2H), 3.25 - 3.12 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.87 - 2.79 (m, 1H),2.61 (d, J=17.5 Hz, 1H), 2.33 - 1.09 (m, 33H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (s, 3H),1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 771.6 [(M+H)+, 计算C45H72FN2O5S为771.5], t R = 4.43 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.97min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.11 min。
实施例2-15
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 1-(4-烯丙基-4-羟基哌啶-1-基)乙酮的制备
在-10℃（丙酮/冰浴）下向1-乙酰基哌啶-4-酮（1.00克，7.08毫摩尔）在THF（50毫升）中的溶液中加入烯丙基溴化镁（1 M在二乙醚中）（7.44毫升，7.44毫摩尔）。将反应混合物在-10℃下搅拌30分钟。通过添加饱和NH4Cl溶液（50毫升）猝灭该反应。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（3 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供棕色油形式的1-(4-烯丙基-4-羟基哌啶-1-基)乙酮（836毫克，4.56毫摩尔，64%收率）。该产物不经进一步提纯即直接用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.88 (ddt, J=17.2, 10.1, 7.6 Hz, 1H), 5.28 - 5.22 (m, 1H), 5.19(ddt, J=17.1, 2.1, 1.2 Hz, 1H), 4.41 - 4.33 (m, 1H), 3.65 - 3.56 (m, 1H),3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.04 (ddd, J=13.4, 9.3, 6.1 Hz, 1H), 2.26 (d, J=7.8 Hz,2H), 2.12 (s, 3H), 1.63 - 1.55 (m, 4H)。
步骤2. 2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙醛的制备
在0℃下向1-(4-烯丙基-4-羟基哌啶-1-基)乙酮（280毫克，1.528毫摩尔）在二氧杂环己烷（12毫升）和水（3毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.356毫升，3.06毫摩尔）、四氧化锇（2.5%在t-BuOH中）（0.384毫升，0.031毫摩尔）和高碘酸钠（1307毫克，6.11毫摩尔）。移除冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌2.5小时。将该混合物转移到含有水（10毫升）和饱和NaHCO3水溶液（10毫升）的分液漏斗中。用5%甲醇（在氯仿中）（8 x 20毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（20毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（4% → 10%甲醇（在CH2Cl2中）；24 g柱）以提供无色油形式的2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙醛（48.6毫克，0.262毫摩尔，17%收率）。1H NMR表明产物不是完全纯的。该产物直接用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.88 (t, J=1.0 Hz, 1H),4.41 - 4.33 (m, 1H), 3.61 - 3.56 (m, 1H), 3.56 - 3.45 (m, 3H), 3.12 - 3.00(m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 2H), 1.54 (tdd, J=12.8, 8.0, 4.9 Hz,2H)。
步骤3. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基) 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（50毫克，0.076毫摩尔）和2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙醛（42.4毫克，0.229毫摩尔）在DCE（0.6毫升）中的溶液中加入异丙醇钛(IV)（0.067毫升，0.229毫摩尔）。该混合物在室温下搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠（48.5毫克，0.229毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌整夜。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 40% 9:1丙酮:甲醇/60%己烷；24 g柱,λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（46毫克，0.056毫摩尔，73%收率）: 1HNMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m,2H), 5.15 - 5.10 (m, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.62 (d, J=1.2 Hz, 1H), 4.60 - 4.55(m, 1H), 4.52 - 4.46 (m, 1H), 4.38 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.64 - 3.49 (m, 2H),3.15 - 3.05 (m, 1H), 2.87 - 2.70 (m, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.19 - 0.87(m, 33H), 2.11 (s, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s,3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 825.6 [(M+H)+, 计算C53H78FN2O4为825.6], tR = 4.74 min（方法2-3）。
步骤4. 用氢氧化钠（2M aq）（0.136毫升，0.273毫摩尔）处理(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（45毫克，0.055毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.7毫升）和EtOH（0.35毫升）中的溶液。将反应混合物在50℃下加热2小时，然后在65℃下加热1小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-乙酰基-4-羟基哌啶-4-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸 · TFA（34毫克，73%收率）: 1H NMR(500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.83 (br. s.,1H), 4.73 (s, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 4.43 - 4.28 (m,1H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.66 - 3.52 (m, 1H), 3.47 - 3.35 (m, 2H), 3.26 -3.10 (m, 1H), 2.92 - 2.77 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.39 - 1.10 (m,33H), 2.18 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H),0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 735.6 [(M+H)+, 计算C46H76FN2O4为739.6], tR= 4.27 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.86 min；HPLC（方法2-2）: t R = 19.90min。
2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛和2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛的制备
步骤1. 8-甲基-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-醇的制备
在圆底烧瓶中在-78℃下在N2下经注射器向THF（100毫升）中加入甲基锂（48.0毫升，77毫摩尔）和甲基溴化镁（12.81毫升，38.4毫摩尔）。在-78℃下搅拌1小时后，经套管加入在THF（50毫升）中的1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-酮（5.00克，32.0毫摩尔）。该反应混合物在-78℃下搅拌1.5小时。通过添加饱和NH4Cl水溶液（100毫升）猝灭该反应。将该混合物转移到含有水（50毫升）的分液漏斗中，用乙酸乙酯（3 x 150毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（100毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供8-甲基-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-醇（5.47克，99%收率）。该产物不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ4.03 - 3.91 (m, 4H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.79 - 1.56 (m, 6H), 1.28 (s, 3H),1.17 (s, 1H)；13C NMR (100MHz，氯仿-d) δ 108.27, 68.52, 63.87, 63.81, 36.33,30.47, 29.39。
步骤2. 4-羟基-4-甲基环己酮的制备
在室温下向8-甲基-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-醇（5.26克，30.5毫摩尔）在丙酮（40毫升）和水（60毫升）中的溶液中加入4 M HCl（22.91毫升，92毫摩尔）。将反应混合物在40℃下加热14小时。将该混合物冷却至室温并通过添加固体碳酸钠中和。在旋转蒸发器上除去丙酮，用乙酸乙酯（7 x 150毫升）萃取水层。将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（70%乙酸乙酯（在己烷中））以提供白色固体形式的4-羟基-4-甲基环己酮（3.27克，25.5毫摩尔，84%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 2.80 -2.68 (m, 2H), 2.30 - 2.20 (m, 2H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.92 - 1.80 (m, 2H),1.56 (s, 1H), 1.39 (s, 3H)；13C NMR (100MHz，氯仿-d) δ 211.55, 68.14, 38.40,36.80, 29.51。
步骤3. (反式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇和(顺式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇的制备
在0℃下向4-羟基-4-甲基环己酮（3.20克，24.97毫摩尔）在THF（200毫升）中的溶液中加入烯丙基溴化镁（1 M在二乙醚中）（62.4毫升，62.4毫摩尔）。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。通过添加饱和NH4Cl溶液（70毫升）猝灭该反应。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（3 x 150毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（30% → 90%乙酸乙酯（在己烷中）；330g柱, 35 min梯度）以提供白色固体形式的(反式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇（1.90克，11.16毫摩尔，45%收率）和无色油形式的(顺式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇（2.35克，13.80毫摩尔，55%收率），其在静置时凝固。
(反式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇:
1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.92 (ddt, J=17.3, 10.1, 7.5 Hz, 1H), 5.23 -5.12 (m, 2H), 2.26 (d, J=7.5 Hz, 2H), 1.85 - 1.71 (m, 4H), 1.55 - 1.43 (m,4H), 1.28 (s, 3H)；13C NMR (100MHz，氯仿-d) δ 133.08, 118.72, 69.66, 68.77,47.59, 33.87, 32.29, 30.80。
通过X-射线晶体学证实(反式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇的结构。
(顺式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇:
1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.90 (ddt, J=17.2, 10.0, 7.5 Hz, 1H), 5.21 -5.10 (m, 2H), 2.25 (dt, J=7.5, 1.0 Hz, 2H), 1.81 - 1.66 (m, 4H), 1.57 - 1.47(m, 4H), 1.24 (s, 3H)；13C NMR (100MHz，氯仿-d) δ 133.12, 118.59, 70.01, 69.34,44.54, 35.55, 33.99, 26.76。
步骤4a. 2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛的制备（方法A）
在0℃下向(反式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇（0.98克，5.76毫摩尔）在二氧杂环己烷（40毫升）和水（10毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（1.341毫升，11.51毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.704毫升，0.115毫摩尔）和高碘酸钠（4.92克，23.03毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有1 NHCl (aq)（25毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（20 x 50毫升）萃取水层。（难以从水层中萃取出产物）。将合并的有机层用饱和NaHCO3溶液（8毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。该碳酸氢盐洗液的TLC表明一些产物进入水层中。浓缩此层。将残留物悬浮在二氯甲烷中并与来自有机萃取物的残留物一起通过在硅胶上的柱色谱法提纯（70%含3%甲醇的乙酸乙酯/30%己烷 → 100%含3%甲醇的乙酸乙酯；120 g柱）以提供白色固体形式的2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（0.78克，4.53毫摩尔，79%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ9.91 (t, J=1.6 Hz, 1H), 2.65 (d, J=1.8 Hz, 2H), 1.91 - 1.73 (m, 4H), 1.69 -1.62 (m, 2H), 1.53 - 1.46 (m, 2H), 1.28 (s, 3H)。
步骤4a. 2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛的替代性制备方法（方法B）
在250毫升圆底烧瓶中将(反式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇（1.00克，5.87毫摩尔）溶解在CH2Cl2（50毫升）和MeOH（10毫升）中。加入N-甲基吗啉-N-氧化物（NMO）（0.826克，7.05毫摩尔）并将该混合物冷却至-78℃ [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K.,Dussault, P. H. Org. Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]。将臭氧鼓过反应混合物直至该溶液被臭氧饱和（变成蓝色）和在此后几分钟（总时间10分钟）。然后将氮气鼓过反应混合物直至蓝色消失。然后加入二甲硫醚（4.34毫升，58.7毫摩尔）并将反应混合物在0℃下搅拌2.5小时。将该混合物在真空下浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（50%含1%甲醇的乙酸乙酯/50%己烷 → 95%含1%甲醇的乙酸乙酯/5%己烷；80 g柱）以提供白色固体形式的2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（937毫克，5.44毫摩尔，93%收率）: 1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 9.90 (s, 1H), 2.65 (s, 2H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.69 -1.62 (m, 2H), 1.52 - 1.46 (m, 2H), 1.28 (s, 3H)；13C NMR (100MHz，氯仿-d) δ203.02, 69.65, 68.45, 55.15, 33.34, 32.46, 30.90。
步骤4b. 2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛的制备
在0℃下向(顺式)-1-烯丙基-4-甲基环己烷-1,4-二醇（185毫克，1.087毫摩尔）在二氧杂环己烷（8毫升）和水（2毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.253毫升，2.173毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.133毫升，0.022毫摩尔）和高碘酸钠（930毫克，4.35毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有1NHCl (aq)（15毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（10毫升）萃取水层。在第一次萃取后，用氯化钠饱和水层，并用乙酸乙酯（17 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液（2毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（8% →12%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供无色油形式的2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（146毫克，0.848毫摩尔，78%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.91 (t, J=1.8Hz, 1H), 2.65 (d, J=2.0 Hz, 2H), 1.91 - 1.76 (m, 4H), 1.63 - 1.46 (m, 4H),1.26 (s, 3H)。
实施例2-16
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（1.00克，1.524毫摩尔）和2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（0.420克，2.439毫摩尔）溶解在MeOH（12.5毫升）和乙酸（2.5毫升）中。加入硼烷-2-甲基吡啶络合物（0.261克，2.439毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌14小时。将另外的2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（0.131克，0.762毫摩尔，0.5当量）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（0.082克，0.762毫摩尔，0.5当量）添加到反应混合物中并继续搅拌1小时。通过添加水（5毫升）和固体碳酸钠中和该反应混合物。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（50毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（7 x50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（15毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（20%含5%甲醇的乙酸乙酯/80%己烷 → 90%含5%甲醇的乙酸乙酯/10%己烷；120 g柱, 25 min梯度）以提供无色泡沫形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（856毫克，1.054毫摩尔，69%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H),5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.74(d, J=1.5 Hz, 1H), 4.62 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 2.85 - 2.78 (m,1H), 2.77 - 2.70 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 2H), 2.18 - 1.02 (m, 37H), 1.69 (s,3H), 1.30 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.91 (s, 3H),0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 812.6 [(M+H)+, 计算C53H79FNO4为812.6], tR = 4.89 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（1.234毫升，2.469毫摩尔）处理(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（401毫克，0.494毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（7.5毫升）和EtOH（2.5毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2.5小时。将该混合物冷却至室温，用甲醇（4毫升）稀释（以溶解沉淀物），经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-4）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸 · TFA（267毫克，0.316毫摩尔，64%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.27 -5.22 (m, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.44(m, 1H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.9 Hz, 1H),2.31 - 1.34 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.15 - 1.11(m, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e722.6 [(M+H)+, 计算C46H73FNO4为722.6], tR = 4.36 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R= 19.03 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.26 min。
实施例2-17
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（120毫克，0.183毫摩尔）和2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（56.7毫克，0.329毫摩尔）溶解在MeOH（1.5毫升）和乙酸（0.3毫升）中。加入硼烷-2-甲基吡啶络合物（35.2毫克，0.329毫摩尔）并将该混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（20毫升）和饱和碳酸钠水溶液（2毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x 25毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（15毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（20%含5%甲醇的乙酸乙酯/80%己烷 → 90%含5%甲醇的乙酸乙酯/10%己烷；80 g柱,20 min梯度）以提供无色泡沫形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（96.7毫克，0.119毫摩尔，65%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.39 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.22- 5.15 (m, 2H), 5.11 (dd, J=6.1, 1.5 Hz, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.62 - 4.55 (m,2H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 2H), 2.65 - 2.53 (m, 2H), 2.21 -0.87 (m, 37H), 1.69 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93(s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 812.6 [(M+H)+, 计算C53H79FNO4 为812.6], tR = 4.58 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（0.292毫升，0.585毫摩尔）处理(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（95毫克，0.117毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1.5毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热4小时。该反应完成。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-4）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸 · TFA（40.8毫克，0.049毫摩尔，42%收率）:1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.83 (s,1H), 4.72 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.43 - 3.36 (m,2H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.38 - 2.28 (m, 1H), 2.26- 1.35 (m, 34H), 1.75 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.14 (d, J=9.5 Hz,2H), 1.10 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 722.6[(M+H)+, 计算出C46H73FNO4 722.6], tR = 4.34 min（方法2-2）；HPLC（方法2-5）: t R =11.74 min；HPLC（方法2-6）: t R = 11.29 min。
实施例2-18
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（100毫克，0.152毫摩尔）、2-((顺式) 1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙醛（52.5毫克，0.305毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（32.6毫克，0.305毫摩尔）在MeOH（1.4毫升）和乙酸（0.35毫升）中的混合物在室温下搅拌18小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 30% 9:1丙酮:甲醇/70%己烷；40 g柱, λ = 220 nm）以提供白色泡沫形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（72.5毫克，0.089毫摩尔，59%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.38 - 7.34 (m, 5H),5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.5 Hz, 1H), 4.73(d, J=1.7 Hz, 1H), 4.62 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m,1H), 2.73 - 2.66 (m, 1H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.18 - 1.00 (m, 37H), 1.69 (s,3H), 1.24 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H),0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 812.7 [(M+H)+, 计算出C53H79FNO4 812.6], tR = 4.78 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（0.200毫升，0.400毫摩尔）处理(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（65毫克，0.080毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1.0毫升）和EtOH（0.5毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。产物（37毫克）含有显著量的杂质（大约10%）。随后将产物通过反相制备型HPLC（方法2-5）再提纯以提供白色非晶固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1,4-二羟基-4-甲基环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸 · TFA（22.1毫克，33%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.64 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m,1H), 3.44 - 3.37 (m, 1H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.61 (d,J=16.6 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 37H), 1.75 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.17 (s,3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 722.6[(M+H)+, 计算C46H73FNO4 为722.6], t R = 4.34 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R =18.87 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.20 min。
4-(甲基磺酰基)环己酮的制备（途径1）
步骤1. 4-甲基苯磺酸1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-基酯的制备
向1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-醇（10克，63.2毫摩尔）、三乙胺（13.22毫升，95.0毫摩尔）和N,N-二甲基吡啶-4-胺（0.772克，6.32毫摩尔）在CH2Cl2（400毫升）中的0℃溶液中逐份加入4-甲基苯-1-磺酰氯（13.26克，69.5毫摩尔）。使反应混合物温热至室温，同时搅拌16小时。将该反应混合物用CH2Cl2（400毫升）稀释并用水（2 x 400毫升）洗涤。将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% → 30%乙酸乙酯（在己烷中）；将粗产物分成两半并在两个330 g柱上提纯）以提供4-甲基苯磺酸1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-基酯（19.6克，62.7毫摩尔，99%收率）: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.82 (d,J=8.3 Hz, 2H), 7.35 (d, J=8.0 Hz, 2H), 4.66 (tt, J=6.0, 3.0 Hz, 1H), 3.98 -3.88 (m, 4H), 2.47 (s, 3H), 1.95 - 1.74 (m, 5H), 1.63 - 1.51 (m, 3H)；LC/MS(ESI) m/e 335.2 [(M+Na)+, 计算C15H20O5SNa为 335.1], tR = 2.06 min（方法2-1）。
步骤2. 8-(甲硫基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷的制备
将在乙醇（26.7毫升）中的4-甲基苯磺酸1,4-二氧杂螺环[4.5]癸-8-基酯（19.6克，62.7毫摩尔）添加到甲硫醇钠（13.19克，188毫摩尔）在MeOH（80毫升）中的溶液中。将反应混合物在密封压力容器中在80℃下加热16小时。LC-MS显示形成所需产物。使反应混合物在乙酸乙酯和水之间分相。用乙酸乙酯（3 x 250毫升）萃取水层，将合并的有机层在真空下浓缩。使残留物在CH2Cl2和饱和碳酸氢钠水溶液之间分相。用另外的CH2Cl2萃取水层。将合并的有机层经硫酸钠干燥，在真空下浓缩并通过在硅胶上的柱色谱法提纯（100%己烷 → 25%含5%甲醇的乙酸乙酯/75%己烷；330 g柱）以提供无色油形式的8-(甲硫基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷（9.6克，51.0毫摩尔，81%收率）: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.93 (s, 4H),2.62 (tt, J=9.9, 3.8 Hz, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.02 - 1.93 (m, 2H), 1.87 - 1.78(m, 2H), 1.72 - 1.52 (m, 4H)；LC/MS (ESI) m/e 189.2 [(M+H)+, 计算出C9H16O2S189.1], tR = 1.91 min（方法2-1）。
步骤3. 8-(甲基磺酰基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷的制备
在0℃下向8-(甲硫基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷（9.6克，51.0毫摩尔）在CH2Cl2（400毫升）中的溶液中加入mCPBA（22.85克，102毫摩尔）。使该溶液温热至室温并搅拌15小时。将反应混合物转移到含有1 N氢氧化钠水溶液（200毫升）的分液漏斗中并用乙酸乙酯（3 x200毫升）萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以提供8-(甲基磺酰基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷（9.42克，42.8毫摩尔，84%收率）。该产物不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.99 - 3.95 (m, 4H), 2.90 - 2.80 (m,1H), 2.85 (s, 3H), 2.29 - 2.19 (m, 2H), 1.98 - 1.83 (m, 4H), 1.67 - 1.56 (m,2H)。
步骤4. 4-(甲基磺酰基)环己酮的制备
在圆底烧瓶中，将HCl（71.1毫升，427毫摩尔）添加到8-(甲基磺酰基)-1,4-二氧杂螺环[4.5]癸烷（9.4克，42.7毫摩尔）的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌整夜16小时。将该反应混合物在真空中部分浓缩并在EtOAc（200毫升）和水（200毫升）之间分相。用EtOAc（3 x200毫升）萃取水层。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。将粗产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（70%含1%甲醇的乙酸乙酯/30%己烷 →100%含1%甲醇的乙酸乙酯；330 g柱）以提供4-(甲基磺酰基)环己酮（4.7克，26.7毫摩尔，63%收率）: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.35 - 3.21 (m, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.65- 2.56 (m, 2H), 2.54 - 2.35 (m, 4H), 2.16 - 2.01 (m, 2H)。
4-(甲基磺酰基)环己酮的替代性制备方法（途径2）
向(甲基磺酰基)乙烯（10.0克，94毫摩尔）在苯（50毫升）中的溶液中加入(丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷（14.07克，99毫摩尔）和氢醌（20毫克，0.182毫摩尔）。该混合物在加热前在-78℃下脱气数次。密封内容物并在105℃下加热48小时。在CDCl3中通过NMR分析该反应，其显示大约10%的乙烯基砜残留。添加另外的(丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷（4毫升）并继续加热另外48小时。反应混合物在真空下在室温（~19℃）下蒸发成稠胶质。将该混合物用丙酮（250毫升）再稀释，以致形成清澈溶液。将该混合物在冰浴中冷却至冷。加入4毫升0.25 N HCl（在相同冰浴中预冷却）以致形成浑浊混合物，其在0℃下搅拌15分钟后变清澈，然后在另外10分钟内恢复成浑浊态，其在剩余搅拌期间保持浑浊。在大约1小时的总反应时间后该丙酮溶液经H型硅胶短床过滤，然后用更多丙酮洗涤。将滤液在旋转蒸发器上在19℃浴温度下浓缩。将粗产物细分成两部分，各7.75 gm，以供提纯。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（30%乙酸乙酯 → 100%乙酸乙酯（在己烷中）；两个330 g柱）以提供白色固体形式的4-(甲基磺酰基)环己酮（16.7克，100%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ3.29 (tt, J=11.0, 3.9 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.73 - 2.62 (m, 2H), 2.58 - 2.37(m, 4H), 2.15 (qd, J=11.9, 4.5 Hz, 2H)。
2-(顺式-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛和2-(反式-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛的制备
步骤1. (顺式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇和(反式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇的制备
在0℃下经套管向4-(甲基磺酰基)环己酮（1.03克，5.84毫摩尔）在THF（40毫升）中的溶液中加入烯丙基溴化镁（7.60毫升，7.60毫摩尔）。该反应混合物在0℃下搅拌30分钟。通过添加饱和NH4Cl溶液（25毫升）猝灭该反应。将该混合物转移到分液漏斗中，用乙酸乙酯（5 x50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（20毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（70%含1%甲醇的乙酸乙酯/30%己烷 → 100%含1%甲醇的乙酸乙酯；40 g柱）以提供白色固体形式的(顺式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇（374毫克，1.713毫摩尔，29%收率）和无色油形式的(反式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇（551毫克，2.52毫摩尔，43%收率）。
(顺式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 5.96 - 5.79 (m, 1H), 5.26 - 5.21 (m, 1H), 5.18(ddt, J=17.1, 2.1, 1.2 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.80 (tt, J=12.5, 3.6 Hz, 1H),2.25 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.15 - 2.07 (m, 2H), 1.97 (qd, J=13.0, 3.8 Hz, 2H),1.88 - 1.81 (m, 2H), 1.52 - 1.42 (m, 2H)；13C NMR (100MHz, CDCl3) δ 132.50,120.02, 69.06, 62.26, 47.86, 36.85, 35.67, 21.13。
通过X-射线晶体学证实(顺式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇的结构。
(反式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 5.88 (ddt, J=17.2, 10.1, 7.4 Hz, 1H), 5.28 -5.16 (m, 2H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.35 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.23- 2.14 (m, 2H), 2.02 - 1.93 (m, 2H), 1.90 - 1.78 (m, 2H), 1.57 - 1.46 (m,2H)；13C NMR (100MHz, CDCl3) δ 132.62, 120.19, 69.20, 62.41, 48.00, 36.98,35.83, 21.29。
步骤2a. 2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛的制备（方法A）
在0℃下向(顺式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇（125毫克，0.573毫摩尔）在二氧杂环己烷（4.4毫升）和水（1.1毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.133毫升，1.145毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.070毫升，0.011毫摩尔）和高碘酸钠（490毫克，2.290毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有1 N HCl (aq)（10毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（20 x 15毫升）萃取水层。（难以从水层中萃取出产物）。将合并的有机层用饱和NaHCO3溶液（8毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。碳酸氢盐洗液的TLC表明一些产物进入水层中。浓缩此层。将残留物悬浮在二氯甲烷中并与来自有机萃取物的残留物一起通过在硅胶上的柱色谱法提纯（80%含3%甲醇的乙酸乙酯/20%己烷 → 100%含3%甲醇的乙酸乙酯；40 g柱）以提供无色油形式的2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（94.4毫克，0.429毫摩尔，75%收率），其在静置时凝固: 1HNMR (400MHz, CDCl3) δ 9.87 (t, J=1.3 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.82 - 2.75 (m,1H), 2.68 (d, J=1.0 Hz, 2H), 2.13 - 1.98 (m, 6H), 1.50 - 1.39 (m, 2H)。
步骤2a. 2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛的制备（方法B）
在500毫升圆底烧瓶中将(反式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇（3.4克，15.57毫摩尔） 溶解在CH2Cl2（160毫升）和MeOH（32.0毫升）中。加入N-甲基吗啉-N-氧化物（NMO）（2.189克，18.69毫摩尔）并将该混合物冷却至-78℃ [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K.,Dussault, P. H. Org. Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]。将臭氧鼓过反应混合物直至该溶液被臭氧饱和（变成蓝色）和在此后几分钟（总时间25分钟）。然后将氮气鼓过反应混合物直至蓝色消失。然后加入二甲硫醚（11.52毫升，156毫摩尔）并将反应混合物在0℃下搅拌16小时。该混合物在真空下浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（50%含1%甲醇的乙酸乙酯/50%己烷 → 95%含1%甲醇的乙酸乙酯/5%己烷；330 g柱）以提供白色固体形式的2-((1s,4s)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（3.31克，15.03毫摩尔，96%收率）: 1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ 9.87 (t, J=1.1 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.82 - 2.76 (m, 1H),2.67 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.13 - 1.98 (m, 6H), 1.50 - 1.38 (m, 2H)；13C NMR(101MHz，氯仿-d) δ 202.5, 68.9, 61.9, 54.9, 36.8, 35.9, 20.8。
步骤2b. 2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛的制备
在0℃下向(反式)-1-烯丙基-4-(甲基磺酰基)环己醇（242毫克，1.108毫摩尔）在二氧杂环己烷（10毫升）和水（2.5毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.258毫升，2.217毫摩尔）、四氧化锇（4%在水中）（0.135毫升，0.022毫摩尔）和高碘酸钠（948毫克，4.43毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将该混合物转移到含有1 NHCl (aq)（10毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（20 x 20毫升）萃取水层。（难以从水层中萃取出产物）。将合并的有机层用饱和NaHCO3溶液（8毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。碳酸氢盐洗液的TLC表明一些产物进入水层中。浓缩此层。将残留物悬浮在二氯甲烷中并与来自有机萃取物的残留物一起通过在硅胶上的柱色谱法提纯（80%含3%甲醇的乙酸乙酯/20%己烷 → 100%含3%甲醇的乙酸乙酯；40 g柱）以提供无色油形式的2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（191毫克，0.867毫摩尔，78%收率）: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ9.89 (t, J=1.3 Hz, 1H), 3.13 (br. s., 1H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.91 (s, 3H),2.79 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.29 - 2.17 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 2H), 1.92 - 1.78(m, 2H), 1.68 - 1.57 (m, 2H)。
实施例2-19
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（550毫克，0.838毫摩尔）、2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（406毫克，1.845毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（197毫克，1.845毫摩尔）在MeOH（8毫升）和乙酸（1.6毫升）中的混合物在室温下搅拌14小时。LC/MS显示具有所需物料以及一些剩余原材料的峰。添加另外的2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（56毫克，0.254毫摩尔，0.3当量）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（27毫克，0.252毫摩尔，0.3当量）并继续搅拌3小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（20毫升）和饱和碳酸钠水溶液（2毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 70% 9:1丙酮:甲醇/30%己烷, 20 min梯度；80 g柱, λ = 220 nm）以提供白色固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（566毫克，0.658毫摩尔，78%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d δ 7.41 - 7.31 (m,5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H),4.75 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.64 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 2.85 (s,3H), 2.83 - 2.69 (m, 3H), 2.64 - 2.51 (m, 2H), 2.19 - 1.02 (m, 36H), 1.70 (s,3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 860.6 [(M+H)+, 计算C53H79FNO5S为860.6], tR = 4.63 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（1.561毫升，3.12毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（537毫克，0.624毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（9毫升）和EtOH（3毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2.5小时。将该混合物冷却至室温，用甲醇（4毫升）稀释（以溶解沉淀物），经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 ·TFA（438毫克，0.495毫摩尔，79%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H),5.27 - 5.21 (m, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 -4.47 (m, 1H), 3.47 - 3.33 (m, 2H), 3.08 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.89 -2.80 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 37H), 1.75 (s, 3H),1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 770.5 [(M+H)+, 计算C46H73FNO5S为770.5], tR = 4.22 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）:t R = 18.75 min；HPLC（方法2-2）: t R = 19.89 min。
实施例2-20
(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（100毫克，0.152毫摩尔）和2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（60.4毫克，0.274毫摩尔）在MeOH（1.2毫升）中的悬浮液中加入硼烷-2-甲基吡啶络合物（29.4毫克，0.274毫摩尔），接着加入乙酸（0.24毫升）并将该混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）和饱和碳酸钠水溶液（1毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x 5毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（20%含5%甲醇的乙酸乙酯/80%己烷 → 90%含5%甲醇的乙酸乙酯/10%己烷；24 g柱）以提供无色泡沫形式的(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（120毫克，0.139毫摩尔，92%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.41 - 7.30 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H),5.23 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (d, J=5.7 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.64 - 4.55 (m,2H), 4.51 - 4.45 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.83 - 2.69 (m, 4H), 2.64 - 2.49 (m,2H), 2.21 - 0.90 (m, 36H), 1.70 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s,3H), 0.88 (s, 3H), 0.85 (s, 3H)；LC/MS m/e 860.6 [(M+H)+, 计算C53H79FNO4 为812.6], tR = 4.62 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（0.334毫升，0.668毫摩尔）处理(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（115毫克，0.134毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1.5毫升）和MeOH（0.5毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热4小时。该反应完成。将该混合物冷却至室温。将该混合物冷却至室温并通过添加6 N HCl（70微升）部分中和。随后将该混合物经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-5）提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(R)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((顺式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（72.6毫克，0.082毫摩尔，61%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.7 Hz, 1H),4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.54 - 4.46 (m, 1H), 3.47 -3.34 (m, 2H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.61(d, J=16.8 Hz, 1H), 2.35 - 1.71 (m, 21H), 1.75 (s, 3H), 1.65 - 1.32 (m, 14H),1.17 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s,3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 770.5 [(M+H)+, 计算出C46H73FNO5S 770.5], tR = 4.33min（方法2-2）；HPLC（方法2-5）: t R = 11.55 min；HPLC（方法2-6）: t R = 11.20 min。
实施例2-21
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（150毫克，0.229毫摩尔）、2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙醛（126毫克，0.572毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（61.1毫克，0.572毫摩尔）在甲醇（2.5毫升）和乙酸（0.5毫升）中的混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（10毫升）和饱和碳酸钠水溶液（2毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x 20毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 50% 9:1丙酮:甲醇/50%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色膜形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（143毫克，0.166毫摩尔，73%收率）: 1H NMR(500MHz，氯仿-d) δ 7.40 - 7.32 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m,2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m,2H), 4.52 - 4.46 (m, 1H), 2.99 - 2.91 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.83 - 2.76 (m,1H), 2.71 - 2.50 (m, 3H), 2.19 - 1.04 (m, 36H), 1.69 (s, 3H), 1.06 (s, 3H),0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 860.6 [(M+H)+, 计算C53H79FNO5S为860.6], tR = 4.61 min（方法2-3）。
步骤2. 用氢氧化钠（2M aq）（0.232毫升，0.465毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（80毫克，0.093毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（1毫升）和EtOH（0.5毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯。该产物（59毫克）含有显著量的杂质（大约5-10%）。随后将该产物通过反相制备型HPLC（方法2-6）再提纯。在旋转蒸发器上蒸发有机溶剂并将水性混合物冻干以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((反式)-1-羟基-4-(甲基磺酰基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（27.2毫克，33%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83(s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 3.42 (dd, J=8.2, 4.7 Hz, 1H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 3.18 - 3.10 (m, 1H), 2.98 (s, 3H),2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 37H), 1.75 (s,3H), 1.14 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H)；LC/MS m/e 770.5 [(M+H)+, 计算C46H73FNO5S为770.5], tR = 4.20 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.74 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.05 min。
实施例2-22
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基-4-((甲基磺酰基)氧基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 甲磺酸4-氧代环己基酯的制备
将甲磺酰氯（0.746毫升，9.64毫摩尔）和三乙胺（1.343毫升，9.64毫摩尔）添加到4-羟基环己酮（1克，8.76毫摩尔）在二氯甲烷（10毫升）中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物浓缩，产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0%己烷 → 60% 9:1丙酮:甲醇/40%己烷, 80 g柱, λ = 220 nm）以提供无色油形式的甲磺酸4-氧代环己基酯（1.65克，8.58毫摩尔，98%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.14 (tt, J=5.5, 2.8 Hz, 1H),3.11 (s, 3H), 2.75 - 2.59 (m, 2H), 2.49 - 2.28 (m, 4H), 2.24 - 2.06 (m, 2H)。
步骤2. 甲磺酸4-烯丙基-4-羟基环己基酯的制备
在-78℃下向烯丙基溴化镁（9.83毫升，9.83毫摩尔）在THF（75毫升）中的溶液中加入甲磺酸4-氧代环己基酯（1.8克，9.36毫摩尔）。将该混合物在-78℃下搅拌2小时。通过添加饱和NH4Cl溶液（60毫升）猝灭该反应。将该混合物转移到分液漏斗中并分离层。用醚（5 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供无色油形式的甲磺酸4-烯丙基-4-羟基环己基酯（1.15克，4.91毫摩尔，52%收率）。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10%己烷:乙酸乙酯:MeOH（4:4:1）/90%己烷 → 50%己烷:乙酸乙酯:MeOH（4:4:1）/50%己烷；120g柱）以提供甲磺酸4-烯丙基-4-羟基环己基酯（1.15克，4.91毫摩尔，52%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 5.83 (ddt, J=17.2, 9.9, 7.5 Hz,1H), 5.20 - 5.04 (m, 2H), 4.68 - 4.53 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.18 (d, J=7.3Hz, 2H), 1.99 - 1.87 (m, 4H), 1.71 (s, 2H), 1.53 - 1.37 (m, 2H)。
步骤3. 甲磺酸4-羟基-4-(2-氧代乙基)环己基酯的制备
在0℃下向甲磺酸4-烯丙基-4-羟基环己基酯 (182毫克，0.777毫摩尔)在二氧杂环己烷（12毫升）和水（3.00毫升）中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶（0.181毫升，1.553毫摩尔）、四氧化锇（2.5%在t-BuOH中）（0.195毫升，0.016毫摩尔）和高碘酸钠（665毫克，3.11毫摩尔）。随着冰-水浴融化使反应混合物温热至室温，同时搅拌14小时。将反应混合物转移到含有水（50毫升）和饱和NaHCO3水溶液（50毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（3 x 50毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（50毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（0% → 8%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供无色油形式的甲磺酸4-羟基-4-(2-氧代乙基)环己基酯（91毫克，0.385毫摩尔，50%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 9.86 (t, J=1.3 Hz, 1H), 4.66 (tt, J=10.5, 4.2 Hz, 1H), 3.03 (s, 3H),2.65 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 2H), 2.00 - 1.89 (m, 4H), 1.54 - 1.43(m, 2H)。
步骤4. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基-4-((甲基磺酰基)氧基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（60毫克，0.091毫摩尔）、甲磺酸4-羟基-4-(2-氧代乙基)环己基酯（32.4毫克，0.137毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（14.68毫克，0.137毫摩尔）在MeOH（1毫升）和乙酸（0.200毫升）中的混合物在室温下搅拌16小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以提供(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基-4-((甲基磺酰基)氧基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（15毫克，17%收率）。粗产物不经进一步提纯即用于下一步骤。LC/MS m/e 876.6 [(M+H)+,计算 C53H78FNO6S为876.6], tR = 2.66 min（方法2-1）。
步骤5. 将氢氧化钠（0.038毫升，0.150毫摩尔）添加到(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基-4-((甲基磺酰基)氧基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（13.14毫克，0.015毫摩尔）在二氧杂环己烷（0.5毫升）和乙醇（0.125毫升）中的溶液中。将反应混合物在70℃下搅拌16小时。将该粗材料经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC提纯（方法2-2，梯度经10分钟50-100% B，然后保持在100% B 15分钟）以提供纯化产物(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-羟基-4-((甲基磺酰基)氧基)环己基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸（3.2毫克，3.87微摩尔，26%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39(br. s., 1H), 5.25 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.76 - 4.67 (m, 2H), 4.65- 4.57 (m, 1H), 4.56 - 4.47 (m, 1H), 3.79 (s, 1H), 3.40 (d, J=12.0 Hz, 1H),3.35 - 3.25 (m, 1H), 3.15 (q, J=7.1 Hz, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.90 (br. s., 1H),2.62 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.35 - 0.91 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.20 (s, 3H),1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 3H)；LC/MS m/e 786.8 [(M+H)+, 计算C46H72FNO6S为786.5], tR = 2.46 min（方法2.1）；HPLC（方法2-3）: t R = 2.54min；HPLC（方法2-4）: t R = 2.29 min。
实施例2-23
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（100毫克，0.152毫摩尔）、2-氯乙醛（0.028毫升，0.229毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（24.46毫克，0.229毫摩尔）在MeOH（1毫升）和乙酸（0.2毫升）中的混合物在室温下搅拌18小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（10毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x 15毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 50% 9:1丙酮:甲醇/50%己烷；40 g柱, λ= 220 nm）以提供白色泡沫形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（57毫克，0.079毫摩尔，52%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.40 -7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.1, 1.7Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H),3.72 - 3.65 (m, 2H), 2.85 - 2.72 (m, 2H), 2.67 - 2.57 (m, 2H), 2.17 - 1.02(m, 27H), 1.71 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s,3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 718.6 [(M+H)+, 计算C46H66ClFNO2 为718.5], tR = 4.82min（方法2-3）。
步骤2. 将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（15毫克，0.021毫摩尔）、4-甲基哌啶-4-醇（7.21毫克，0.063毫摩尔）、Hunig's碱（0.018毫升，0.104毫摩尔）和碘化钾（4.16毫克，0.025毫摩尔）在DMSO（0.4毫升）中的混合物在80℃下加热14小时。然后将反应混合物冷却至室温并加入NaOH（0.052毫升，0.104毫摩尔）。将反应混合物在70℃下加热2小时。将反应混合物过滤并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · 2 TFA（9.5毫克，48%收率）: 1H NMR(500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H),4.74 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 4H),3.56 (br. s., 2H), 3.43 (br. s., 2H), 2.85 - 2.76 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.9Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 32H), 1.75 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10(s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS (ESI) m/e 707.6 [(M+H)+, 计算出C45H72FN2O3 707.6], t R = 4.31 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.63min；HPLC（方法2-2）: t R = 19.58 min。
实施例2-24
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 3-(2-溴乙基)噁唑烷-2-酮的制备
向3-(2-羟乙基)噁唑烷-2-酮（1.0克，7.63毫摩尔）在CH2Cl2（30毫升）中的溶液中加入四溴化碳（3.03克，9.15毫摩尔）。在将该溶液冷却至0℃后，分份加入三苯基膦（2.80克，10.68毫摩尔）。将所得溶液在室温下搅拌18小时。浓缩该混合物。将残留物悬浮在醚（75毫升）中并搅拌30分钟。通过过滤除去固体并浓缩滤液。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（1% → 4%甲醇（在二氯甲烷中）；220 g柱）。从色谱法中分离出的第一种化合物主要是无色油形式的产物（1.01克），其在静置时凝固（由于存在三苯基氧化膦）。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法再提纯（0.5% → 3%甲醇（在CH2Cl2中）；120 g柱）以提供无色油形式的3-(2-溴乙基)噁唑烷-2-酮（785毫克，4.05毫摩尔，53%收率）。1H NMR表明产物被三苯基氧化膦污染。三苯基氧化膦以7:1的产物/三苯基氧化膦摩尔比存在。该产物不经进一步提纯即用于下一步骤。1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 4.46 - 4.35 (m, 2H), 3.82 - 3.67 (m,4H), 3.58 - 3.52 (m, 2H)。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在烘干压力容器中向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（70毫克，0.107毫摩尔）、3-(2-溴乙基)噁唑烷-2-酮（72.5毫克，0.373毫摩尔）、磷酸三钾（91毫克，0.427毫摩尔）和碘化钾（62.0毫克，0.373毫摩尔）的混合物中加入乙腈（1.0毫升）。将盖密封并将反应混合物在120℃下加热14小时。将该混合物转移到含有水（10毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 15毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 30% 9:1丙酮:甲醇/70%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（54.5毫克，0.071毫摩尔，66%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.41 - 7.32 (m,5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H),4.72 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.44 (m, 1H), 4.38 - 4.32(m, 2H), 3.77 - 3.62 (m, 2H), 3.49 - 3.41 (m, 1H), 3.33 (dt, J=14.1, 5.5 Hz,1H), 2.70 (ddd, J=12.0, 7.3, 5.0 Hz, 1H), 2.65 - 2.52 (m, 3H), 2.19 - 1.10(m, 27H), 1.70 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s,3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 769.6 [(M+H)+, 计算C49H70FN2O4为769.5], t R = 4.65min（方法2-2）。
步骤3. 用氢氧化钠（2M aq）（0.172毫升，0.345毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（53毫克，0.069毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.7毫升）和EtOH（0.35毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（31.4毫克，62%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.74 (s,1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.43 (m, 3H), 3.84 (q, J=8.2 Hz, 1H), 3.80 -3.72 (m, 3H), 3.65 - 3.58 (m, 1H), 3.57 - 3.51 (m, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 1H),2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.32 - 1.11 (m, 27H), 1.76 (s, 3H), 1.17 (s, 3H),1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 679.5 [(M+H)+, 计算C42H64FN2O4为679.5], t R = 4.18 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.68min；HPLC（方法2-2）: t R = 19.92 min。
实施例2-25
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-甲基苯磺酸2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯的制备
在0℃下向1-(2-羟乙基)咪唑烷-2-酮（500毫克，3.84毫摩尔）在吡啶（5毫升）中的溶液中加入对甲苯磺酰氯（806毫克，4.23毫摩尔）。在通过冰-水浴的耗散使反应混合物缓慢温热至室温的同时将反应混合物搅拌16小时。将该混合物转移到含有乙酸乙酯（50毫升）的分液漏斗中。用1N HCl（2 x 25毫升）洗涤水层。将合并的有机层用饱和NaHCO3（25毫升）、盐水（25毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（3% →7%甲醇（在二氯甲烷中）；120 g柱）以提供黄色固体形式的4-甲基苯磺酸2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯（356毫克，1.252毫摩尔，33%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.86 -7.77 (m, 2H), 7.38 (d, J=8.0 Hz, 2H), 4.51 (br. s., 1H), 4.17 (t, J=5.0 Hz,2H), 3.59 - 3.52 (m, 2H), 3.47 (t, J=5.0 Hz, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 2.48(s, 3H)；LC/MS m/e 285.1 [(M+H)+, 计算C12H17N2O4S为285.1], t R = 1.58 min（方法2-1）。
步骤2. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在管瓶中合并(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（40毫克，0.061毫摩尔）、4-甲基苯磺酸2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯（69.4毫克，0.244毫摩尔）、磷酸三钾（64.7毫克，0.305毫摩尔）和碘化钾（50.6毫克，0.305毫摩尔）。加入乙腈（1毫升），密封该管瓶并将反应混合物在120℃下加热16小时。将该混合物转移到含有水（10毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 40% 9:1丙酮:甲醇/60%己烷；40 g柱, λ = 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（31毫克，0.040毫摩尔，66%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.38 - 7.33 (m,5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=2.4 Hz, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H),4.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.45 (m, 1H), 4.32 (s,1H), 3.61 - 3.47 (m, 3H), 3.46 - 3.35 (m, 4H), 3.24 (dt, J=13.8, 5.3 Hz, 1H),2.70 - 2.52 (m, 4H), 2.20 - 0.85 (m, 26H), 1.70 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96(s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.85 (s, 3H)；LC/MS m/e 768.6 [(M+H)+, 计算C49H71FN3O3为768.5], t R = 4.61 min（方法2-2）。
步骤3. 用氢氧化钠（0.101毫升，0.202毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（31毫克，0.040毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.5毫升）和EtOH（0.25毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（19.0毫克，58%收率）。
1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H),4.89 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.73 -3.66 (m, 1H), 3.65 - 3.51 (m, 6H), 3.47 - 3.43 (m, 2H), 2.84 - 2.75 (m, 1H),2.61 (d, J=17.5 Hz, 1H), 2.32 - 1.08 (m, 26H), 1.76 (s, 3H), 1.15 (s, 3H),1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H)；LC/MS m/e 678.5 [(M+H)+, 计算C42H65FN3O3为678.5], t R = 4.30 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.88min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.30 min。
实施例2-26
(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-甲基苯磺酸2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯的制备
在0℃下向4-甲基苯磺酸2-(2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯（135毫克，0.475毫摩尔）在THF（4毫升）中的溶液中加入双(三甲基甲硅烷基)氨化钠（0.522毫升，0.522毫摩尔）。在搅拌5分钟后，经注射器加入碘甲烷（0.119毫升，1.899毫摩尔）。移除冷却浴，使该混合物温热至室温并搅拌2小时。将该混合物转移到含有饱和NaHCO3水溶液（10毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（4 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（1% → 5%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供淡绿色油形式的4-甲基苯磺酸2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯（91.3毫克，0.306毫摩尔，65%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 7.83 - 7.77 (m, 2H), 7.37 (d,J=8.0 Hz, 2H), 4.15 (t, J=5.1 Hz, 2H), 3.45 (t, J=5.0 Hz, 2H), 3.43 - 3.37(m, 2H), 3.29 - 3.23 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.47 (s, 3H)；LC/MS (ESI) m/e299.2 [(M+H)+, 计算C13H19N2O4S为 299.1], t R = 1.61 min（方法2-1）。
步骤2. 1-(2-溴乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮的制备
在室温下向4-甲基苯磺酸2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基酯（158毫克，0.530毫摩尔）在THF（5毫升）中的溶液中加入溴化锂（138毫克，1.589毫摩尔）。将反应混合物在室温下搅拌整夜。然后将反应混合物在60℃下加热3小时。将该混合物转移到含有饱和NaHCO3水溶液（5毫升）和水（5毫升）的分液漏斗中。用乙酸乙酯（4 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（2% → 5%甲醇（在CH2Cl2中）；40 g柱）以提供黄色油形式的1-(2-溴乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮（92.3毫克，0.446毫摩尔，84%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 3.65 - 3.60(m, 2H), 3.52 - 3.44 (m, 4H), 3.38 - 3.32 (m, 2H), 2.82 (s, 3H)；LC/MS (ESI)m/e 207.2 [(M+H)+, 计算C6H12BrN2O为207.0], t R = 1.70 min（方法2-1）。
步骤3. (S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
在烘干压力容器中向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（60毫克，0.091毫摩尔）、1-(2-溴乙基)-3-甲基咪唑烷-2-酮（56.8毫克，0.274毫摩尔）、磷酸三钾（78毫克，0.366毫摩尔）和碘化钾（45.6毫克，0.274毫摩尔）的混合物中加入乙腈（1.0毫升）。将盖密封并将反应混合物在120℃下加热14小时。将该混合物转移到含有水（5毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（3 x 10毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（5毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 50% 9:1丙酮:甲醇/50%己烷；24 g柱, λ = 220 nm）以提供白色泡沫形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（47.7毫克，0.061毫摩尔，66%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.40 -7.33 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.2, 1.6Hz, 1H), 4.72 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.47 (m, 1H),3.45 - 3.20 (m, 6H), 2.82 (s, 3H), 2.68 - 2.51 (m, 4H), 2.19 - 0.87 (m 27H),1.70 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.85(s, 3H)；LC/MS m/e 782.6 [(M+H)+, 计算C50H73FN3O3 为782.6], t R = 4.56 min（方法2-3）。
步骤4. 用氢氧化钠（2M aq）（0.147毫升，0.294毫摩尔）处理(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯（46毫克，0.059毫摩尔）在1,4-二氧杂环己烷（0.7毫升）和EtOH（0.35毫升）中的溶液。将反应混合物在70℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经注射器式过滤器过滤，并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯以提供白色非晶固体形式的(S)-1-(氟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(3-甲基-2-氧代咪唑烷-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸 · TFA（35.6毫克，74%收率）:
1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.88(s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.63 - 3.40(m, 8H), 2.84 (s, 3H), 2.85 - 2.81 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.5 Hz, 1H), 2.31 -1.12 (m, 27H), 1.76 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99(s, 3H), 0.95 (s, 3H)；LC/MS m/e 692.6 [(M+H)+, 计算C43H67FN3O3为692.5], tR =4.19 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 18.80 min；HPLC（方法2-2）: t R = 20.44 min。
实施例2-27
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-乙酰基-3,3-二甲基-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1. 4-乙酰基-3,3-二甲基哌嗪-2-酮的制备
在0℃下向3,3-二甲基哌嗪-2-酮（50毫克，0.390毫摩尔）在CH2Cl2（1.2毫升）中的溶液中加入N,N-二异丙基乙基胺（0.204毫升，1.170毫摩尔），接着缓慢添加乙酰氯（0.031毫升，0.429毫摩尔）。将反应混合物在0℃下搅拌4小时。然后将该混合物浓缩。该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（25% 4:1 CH2Cl2: MeOH（含0.2% NH4OH）/75% CH2Cl2 → 100% 4:1CH2Cl2:MeOH（含0.2% NH4OH）；40 g柱, λ = 220 nm）以提供无色固体形式的4-乙酰基-3,3-二甲基哌嗪-2-酮（59.6毫克，0.350毫摩尔，90%收率）: 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ 3.64- 3.57 (m, 2H), 3.46 - 3.39 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.77 (s, 6H)；LC/MS (ESI)m/e 171.3 [(M+H)+, 计算C8H15N2O2为171.2], t R = 0.43 min（方法2-1）。
步骤2. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯的制备
将(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（100毫克，0.152毫摩尔）、2-氯乙醛（0.028毫升，0.229毫摩尔）和硼烷-2-甲基吡啶络合物（24.46毫克，0.229毫摩尔）在MeOH（1毫升）和乙酸（0.2毫升）中的混合物在室温下搅拌18小时。将该混合物转移到含有饱和碳酸氢钠水溶液（10毫升）的分液漏斗中。用二氯甲烷（4 x 15毫升）萃取水层。将合并的有机层用盐水（10毫升）洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。将该产物通过在硅胶上的柱色谱法提纯（10% 9:1丙酮:甲醇/90%己烷 → 50% 9:1丙酮:甲醇/50%己烷；40 g柱, λ= 220 nm）以提供无色泡沫形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（57毫克，0.079毫摩尔，52%收率）: 1H NMR (500MHz，氯仿-d) δ 7.40 -7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.1, 1.7Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H),3.72 - 3.65 (m, 2H), 2.85 - 2.72 (m, 2H), 2.67 - 2.57 (m, 2H), 2.17 - 1.02(m, 27H), 1.71 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s,3H), 0.86 (s, 3H)；LC/MS m/e 718.6 [(M+H)+, 计算C46H66ClFNO2为718.5], tR = 4.82min（方法2-3）。
步骤3. 在0℃下在氮气下向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯（22毫克，0.031毫摩尔）、4-乙酰基-3,3-二甲基哌嗪-2-酮（15.64毫克，0.092毫摩尔）和溴化四丁基铵（9.87毫克，0.031毫摩尔）在THF（0.6毫升）中的混合物中加入双(三甲基甲硅烷基)氨化钠（0.092毫升，0.092毫摩尔）。将该混合物在0℃下搅拌5分钟。移除冷却浴，然后将反应混合物在75℃下加热14小时。将该混合物浓缩并将该残留物溶解在二氧杂环己烷/甲醇/水中并通过添加2 N HCl（0.10毫升）中和。将该溶液过滤并通过反相制备型HPLC（方法2-1）提纯以提供白色非晶固体形式的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-乙酰基-3,3-二甲基-2-氧代哌嗪-1-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸 ·TFA（9.6毫克，34%收率）: 1H NMR (500MHz,乙酸-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m,1H), 3.96 - 3.76 (m, 3H), 3.73 - 3.64 (m, 3H), 3.53 (t, J=4.1 Hz, 2H), 2.82(t, J=11.1 Hz, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.31 - 1.12 (s, 27H), 2.22 (s,3H), 1.79 (s, 3H), 1.77 (s, 6H), 1.22 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H),0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H)；LC/MS (ESI) m/e 762.6 [(M+H)+, 计算C47H73FN3O4为762.6], t R = 4.29 min（方法2-2）；HPLC（方法2-1）: t R = 19.04 min；HPLC（方法2-2）: t R= 20.23 min。
HIV细胞培养分析-MT-2细胞和293T细胞获自NIH AIDS Research和ReferenceReagent Program。使MT-2细胞在补充有10%热灭活胎牛血清、100 μg/mL 青霉素G和多至100单位/毫升链霉素的RPMI 1640培养基中繁殖。使293T细胞在补充有10%热灭活胎牛血清（FBS）、100单位/毫升青霉素G和100 μg/mL链霉素的DMEM培养基中繁殖。NL4-3的前病毒DNA克隆获自NIH AIDS Research和Reference Reagent Program。使用重组NL4-3病毒（其中来自NL4-3的nef基因的一个片段被Renilla荧光素酶基因替代）作为对比病毒。此外，将残基Gag P373转化成P373S。简言之，通过转染经改变的NL4-3的前病毒克隆制备重组病毒。使用来自Invitrogen (Carlsbad, CA)的LipofectAMINE PLUS根据制造商的说明书在293T细胞中进行转染。在MT-2细胞中使用荧光素酶酶活性作为标记物滴定病毒。使用来自Promega(Madison, WI)的双重荧光素酶试剂盒并对制造商的方案进行改进来量化荧光素酶。将经稀释的被动裂解溶液与重悬浮荧光素酶分析试剂和重悬浮的Stop & Glo基质(2:1:1比率)预混合。将五十(50) μL混合物添加至分析板上的每一通气孔(aspirated well)且立即在Wallac TriLux (Perkin-Elmer)上测定荧光素酶活性。在抑制剂的连续稀释液存在下通过测定经NLRluc重组体感染4-5天的细胞的荧光素酶活性来定量抑制剂对重组病毒的抗病毒活性。化合物的EC50数据显示于表1中。
对WT的EC50、对A364V的EC50和对92UG029病毒的EC50的测定:
WT是指野生型HIV病毒。
通过定点诱变将表达Renilla荧光素酶基因的HIV-1 NL4-3转化成gag A364V病毒。A364V是定点突变体（site directed mutant）。
HIV-1 92UG029获自NIH (产品编号: 1650)。这是来自Uganda. Reference: WHONetwork for HIV Isolation and Characterization. AIDS Res Hum Retroviruses 10:1359, 1994的亚型A Gag和亚型A Env, X4 (SI)病毒。使用来自92UG029的Gag/Pr区替代表达Renilla荧光素酶基因的HIV-1 NL4-3病毒中的该区域。
如上文在HIV细胞培养分析针对NL4-3病毒所述使用这两种重组病毒。该化合物的EC50 WT、EC50 A364V 和EC50 92UG029数据显示在表1和表2中。
用对表1中报道的常规筛选数据生成的数据的3倍高的病毒输入生成表2数据。
EC50的生物数据要点
EC50 >0.05 μM的化合物 EC50 <0.0.5 μM的化合物
“B”组 “A”组
对比数据 –
对于这一方面，以1-(R)和1-(S)-非对映体的混合物的形式制备对比化合物A和B（已阐述和描述在US 20130210787 - WO 2013/123019中）和作为本文中的本发明的一部分的化合物2并评估其对WT、A364V抵抗病毒（resistant virus）和分化体（clade）A病毒92UG029的效力。化合物A表现出对WT的良好效力，但对A364V和92UC029分别是化合物2效力的大约1/7和小于1/100。化合物B与化合物2相比对WT具有相当的效力。但是，化合物B对其它两种病毒（A364V和92UC029）是化合物2的效力的1/6。还评估所选化合物在大鼠中的药代动力学性质（在所示处）。结果显示在下表2中。化合物2与化合物A和B相比具有更好的综合特性（EC50 WT+ EC50 A364V+ EC5092UC029）。因此，分离出和/或分开合成单一非对映体化合物2a和2b以供进一步评估。单一非对映体（化合物2a和2b）效力/PK也与用非对映异构体的混合物（化合物2）观察到的相当。因此，2a和2b也是可行的化合物。由于病毒对任何抗逆转录病毒药物的抵抗性的发展是HIV-1感染的治疗中的重要问题，对HIV-1病毒的野生型和突变形式都具有最佳效力特性的化合物通常是用于药物开发的优秀候选物。
表2
大鼠药代动力学研究:
对于该化合物在大鼠中的PO药代动力学研究，将化合物各自溶解在PEG-400/乙醇（90/10）中作为溶液。
大鼠. 使用在颈静脉中植入插管的雄性Sprague-Dawley大鼠（300－350克，Hilltop Lab Animals, Inc., Scottsdale, PA）。大鼠在PO药代动力学研究中禁食整夜。从颈静脉采集0.3 ml血样，置于包含EDTA的微量采血管试管(Becton Dickinson，FranklinLakes，NJ)中，并离心以分离血浆。
在受试化合物的PO研究中，大鼠（n = 3）接受所指示化合物的一个5 mg/kg的口服剂量。在给药前和在给药后15、30、45、60、120、240、360、480和1440分钟采集系列血样。
血浆中的化合物的定量. 通过用含有类似化合物的内标的2体积乙腈沉淀血浆蛋白，制备来自研究的大鼠的血浆样品的等分试样准备用于分析。通过离心10分钟将所得上清液与沉淀的蛋白质分离并转移到自动采样瓶中。手动或使用Tomtec自动化液体处理器制备样品。注入5微升等分试样以供分析。
HPLC系统由两个Shimadzu LC10AD泵（Columbia, MD）、Shimadzu SIL-HTC自动采样器（Columbia, MD）和Hewlett Packard Series 1100柱室（Palo Alto, CA）构成。该柱是YMC Pro C18（2.0 x 50 mm, 3 μm粒子, Waters Co., Milford, MA），保持在60℃和0.3ml/min的流量下。流动相由10 mM甲酸铵和0.1%甲酸（在水中）（A）和100% 10 mM甲酸铵和0.1%甲酸（在甲醇中）（B）构成。初始流动相组成为95% A。在样品注入后，使流动相经2分钟变为15% A/85% B并在此组成下保持另外1分钟。流动相随后回到初始条件并将柱再平衡1分钟。总分析时间为4分钟。
将HPLC接合到Micromass Quattro LC上。使用超高纯氮气作为雾化和脱溶剂气体，用于雾化的流量为100 L/hr且用于脱溶剂的流量为1100 L/hr。脱溶剂温度为300℃且源温度为150℃。使用选择的反应监测（SRM）进行数据采集。在MS1中选择代表该化合物和内标的(M+H)+种类的离子并在2 x 10-3 torr的压力下用氩气碰撞解离以形成特定产物离子，随后通过MS2对其监测。
上文的描述仅是说明性的并且不应被理解为以任何方式限制本发明的范围或基本原理。实际上，除本文中显示和描述的那些外，通过下列实施例和上文的描述，对本发明的各种修改对本领域技术人员将得以明确。这样的修改也旨在落在所附权利要求书的范围内。

Claims (22)

1.式I的化合物，包括其可药用盐：
其中R1是异丙烯基或异丙基；
X选自C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环，
其中X被A取代，且其中A是-C1-6卤代烷基；
Y选自-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH，
其中n = 1-6；
R2是-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基或-被芳基取代的C1-6烷基；
W不存在或是-CH2或-CO；
R3是-H、-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基；
R4选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-被C1-6取代的-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-SO2R7、-SO2NR2R2和
,
其中G选自-O-、-SO2-和-NR12；
其中Q1选自-C1-6烷基、-C1-6氟烷基、杂芳基、被取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR8R9和-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR3、-SO2R7和-SO2NR2R2；
条件是当W是-CO时，R4或R5不能是-COR6；
进一步的条件是R4或R5只有一个可选自-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2；
或当W不存在或是-CH2时，则R4和R5可以与相邻的N一起形成
；
R6选自-H、-C1-6烷基、-被C1-6烷基-取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14和-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2；
R7选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基；
R8和R9独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2和-COOR3，
或R8和R9与相邻的N一起形成选自下列的环：
M选自-R15、-SO2R2、-SO2NR2R2、-OH和-NR2R12；
V选自-CR10R11-、-SO2-、-O-和-NR12-；
条件是R8或R9只有一个可以是-COOR3；
R10和R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基；
R12选自-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-CONR2R2、-SO2R3、-SO2NR2R2；
R13和R14独立地选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、C1-6被取代的烷基-Q3和
Q3选自杂芳基、被取代的杂芳基、-NR2R12、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3；
R15选自-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3和-C1-6被取代的烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR2；
条件是当V是-NR12-时，R16不能是-NR2R2；且
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基。
2.如权利要求1中所述的化合物，其中R1是异丙烯基。
3.如权利要求2中所述的化合物，其中W不存在。
4.如权利要求1中所述的化合物，其中X是C4-8环烯基。
5.如权利要求4中所述的化合物，其中X是C6环烯基。
6.如权利要求5中所述的化合物，其中A是C1-C3卤代烷基。
7.如权利要求6中所述的化合物，其中A是氟代甲基。
8.如权利要求1中所述的化合物，其中A是卤代甲基。
9.如权利要求8中所述的化合物，其中A是氟代甲基。
10.如权利要求1中所述的化合物，其中Y是-COOR2。
11.如权利要求10中所述的化合物，其中Y是-COOH。
12.化合物，包括其可药用盐，其选自：
。
13.药物组合物，其包含一种或多种如权利要求1中所述的化合物连同一种或多种可药用载体、赋形剂和/或稀释剂。
14.药物组合物，其包含一种或多种如权利要求12中所述的化合物连同一种或多种可药用载体、赋形剂和/或稀释剂。
15.药物组合物，其包含化合物
连同一种或多种可药用载体、赋形剂和/或稀释剂。
16.权利要求14的药物组合物，其可用于治疗HIV感染，其另外包含选自: (a) AIDS抗病毒剂；(b) 抗感染剂；(c) 免疫调节剂；和(d) HIV进入抑制剂的AIDS治疗剂。
17.治疗感染HIV病毒的哺乳动物的方法，其包括给予所述哺乳动物抗病毒有效量的如权利要求1中所述的化合物和一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
18.中间体化合物，其选自：
。
19.化合物，包括其可药用盐，其选自：
。
20.药物组合物，其包含一种或多种如权利要求19中所述的化合物连同一种或多种可药用载体、赋形剂和/或稀释剂。
21.如权利要求9中所述的化合物，其中Y是-COOH。
22.式I的化合物，包括其可药用盐：
其中R1是异丙烯基或异丙基；
X选自C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环，
其中X被A取代，且其中A是-C1-6卤代烷基；
Y选自-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH，
其中n=1-6；
R2是-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基或-被芳基取代的C1-6烷基；
W不存在、是CH2或CO；
R3是-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基；
R4选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
和，
条件是当W是CO时，R4或R5不能是COR6或COCOR6；
其中Q1选自杂芳基、被取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11和-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR10、-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2；
条件是R4或R5只有一个可选自-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2；
或当W不存在或是CH2时，则R4和R5可以与相邻的N一起形成
；
R6选自-H、-C1-6烷基、-被C1-6烷基-取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14和-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2；
R7选自-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基；
R8和R9独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2和-COOR3，
且R8和R9也可独立地选自
或R8和R9与相邻的N一起形成选自下列的环：
条件是R8或R9只有一个可以是-COOR3；
R10和R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基，
或R10和R11与相邻的N一起形成环，如
R12选自-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH；-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR22R23、-S(O)mR7和-SONR24R25，其中m = 1或2；
R13和R14独立地选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、C1-6被取代的烷基-Q3和
Q3选自杂芳基、被取代的杂芳基、-NR20R21、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3；
R15选自-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3和-C1-6被取代的烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR3；
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基；
R18选自-COOR2和-C1-6烷基-COOR2；
R19选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q4、-COR3、-COOR3，
其中Q4选自-NR2R2和-OR2；
R20和R21独立地选自-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6被取代的烷基-OR2和-COR3，
或R20和R21与相邻的N一起形成环，其选自
条件是R20或R21只有一个可以是-COR3；
R22和R23独立地选自H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6环烷基，
或R22和R23与相邻的N一起形成环，其选自
、；
R24和R25独立地选自H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、被取代的芳基、杂芳基和被取代的杂芳基；且
Q5选自卤素和SO2R3。
CN201580031487.2A 2014-04-11 2015-04-09 具有hiv成熟抑制活性的在3位被带有卤代烷基取代基的非芳族环取代的三萜系化合物 Active CN106604909B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461978306P 2014-04-11 2014-04-11
US61/978306 2014-04-11
PCT/US2015/025029 WO2015157483A1 (en) 2014-04-11 2015-04-09 Triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity, substituted in position 3 by a non-aromatic ring carrying a haloalkyl substituent

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106604909A true CN106604909A (zh) 2017-04-26
CN106604909B CN106604909B (zh) 2019-02-15

Family

ID=53002809

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201580031487.2A Active CN106604909B (zh) 2014-04-11 2015-04-09 具有hiv成熟抑制活性的在3位被带有卤代烷基取代基的非芳族环取代的三萜系化合物

Country Status (35)

Country Link
US (5) US9527882B2 (zh)
EP (2) EP3750910A1 (zh)
JP (1) JP6568202B2 (zh)
KR (1) KR102411082B1 (zh)
CN (1) CN106604909B (zh)
AR (1) AR101077A1 (zh)
AU (1) AU2015243500B2 (zh)
BR (1) BR112016023414B1 (zh)
CA (1) CA2944778C (zh)
CL (1) CL2016002528A1 (zh)
CR (1) CR20160472A (zh)
CY (1) CY1123742T1 (zh)
DK (1) DK3129392T3 (zh)
DO (1) DOP2016000277A (zh)
EA (1) EA030178B1 (zh)
ES (1) ES2828705T3 (zh)
HR (1) HRP20201645T1 (zh)
HU (1) HUE051719T2 (zh)
IL (1) IL248053B (zh)
LT (1) LT3129392T (zh)
MA (1) MA39374A1 (zh)
MX (1) MX2016013425A (zh)
NZ (1) NZ724644A (zh)
PE (1) PE20161391A1 (zh)
PH (1) PH12016501951A1 (zh)
PL (1) PL3129392T3 (zh)
PT (1) PT3129392T (zh)
RS (1) RS60959B1 (zh)
SG (2) SG11201608041QA (zh)
SI (1) SI3129392T1 (zh)
TW (1) TWI659964B (zh)
UA (1) UA120927C2 (zh)
UY (1) UY36070A (zh)
WO (1) WO2015157483A1 (zh)
ZA (1) ZA201606748B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109705189A (zh) * 2018-12-29 2019-05-03 中国医学科学院药用植物研究所 具有式i所示结构的三萜衍生物及其制备方法和应用
CN110981765A (zh) * 2019-11-07 2020-04-10 肇庆巨元生化有限公司 一种25-羟基维生素d3中间体的制备方法

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA39374A1 (fr) 2014-04-11 2018-06-29 Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd Triterpénoïdes présentant une activité d'inhibition de la maturation du vih, substitués en 3ème position par un cycle non aromatique portant un substituant halogénoalkyle
CA3004856A1 (en) * 2015-11-20 2017-05-26 Albert J. Delmonte Hiv maturation inhibitor formulations
AR107512A1 (es) 2016-02-04 2018-05-09 VIIV HEALTHCARE UK Nº 5 LTD Triterpenoides modificados en c-3 y c-17 como inhibidores del vih-1
EP3506902A4 (en) * 2016-08-31 2020-04-22 VIIV Healthcare Company COMBINATIONS AND USES AND TREATMENTS THEREOF
JP7436385B2 (ja) * 2018-04-24 2024-02-21 ヴィーブ ヘルスケア ユーケー（ナンバー５）リミテッド Ｈｉｖ成熟阻害活性を有する化合物
SI3894424T1 (sl) * 2018-12-10 2023-04-28 Viiv Healthcare Uk (No. 4) Limited Mezilatna sol amino-lupanske spojine z zaviralno aktivnostjo dozorevanja HIV-a
CA3164528A1 (en) * 2019-12-09 2021-06-17 Viiv Healthcare Company Pharmaceutical compositions comprising cabotegravir

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009020732A1 (en) * 2007-08-03 2009-02-12 Advanced Life Sciences, Inc. Lupane-type triterpenoids modified at 30-position and analogues thereof
CN103038245A (zh) * 2010-06-04 2013-04-10 百时美施贵宝公司 作为hiv成熟抑制剂的c-3经修饰的桦木酸衍生物
WO2013123019A1 (en) * 2012-02-15 2013-08-22 Bristol-Myers Squibb Company C-3 cycloalkenyl triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4906661A (en) 1981-11-12 1990-03-06 E. I. Du Pont De Nemours And Company Esters of aryloxypropanolamine derivatives
US5413999A (en) 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
US5679828A (en) 1995-06-05 1997-10-21 Biotech Research Labs, Inc. Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives and uses therefor
AR035311A1 (es) 1999-01-27 2004-05-12 Wyeth Corp Derivados de acido hidroxamico que contienen alquinilo, como inhibidores de las metalloproteinasas de matriz y de la tace, composicion farmaceutica y el uso de los mismos para la manufactura de un medicamento
US20040110785A1 (en) 2001-02-02 2004-06-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US7365221B2 (en) 2002-09-26 2008-04-29 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
US20050239748A1 (en) 2004-03-17 2005-10-27 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical salts of 3-O-(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid
TW200628161A (en) 2004-11-12 2006-08-16 Panacos Pharmaceuticals Inc Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof
US20110144069A1 (en) 2006-10-16 2011-06-16 Myriad Genetics, Incorporated Compounds for treating viral infections
CA2714049A1 (en) 2008-02-14 2009-08-20 Virochem Pharma Inc. Novel 17.beta. lupane derivatives
US9067966B2 (en) 2009-07-14 2015-06-30 Hetero Research Foundation, Hetero Drugs Ltd. Lupeol-type triterpene derivatives as antivirals
EP2576586B1 (en) 2010-06-04 2015-08-12 Bristol-Myers Squibb Company C-28 amides of modified c-3 betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors
BR112013019419A2 (pt) 2011-01-31 2019-12-03 Bristol-Myers Squibb Company triterpenoides modificados por c-17 e c-3 com atividade inibitória de maturação de hiv
DK2670764T3 (en) 2011-01-31 2015-12-07 Bristol Myers Squibb Co C-28 AMINES OF MODIFIED C-3-BETULIN ACID DERIVATIVES AS ANTI-HUMIDITY INHIBITORS
US8889854B2 (en) * 2012-05-07 2014-11-18 Bristol-Myers Squibb Company C-17 bicyclic amines of triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
MA39374A1 (fr) 2014-04-11 2018-06-29 Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd Triterpénoïdes présentant une activité d'inhibition de la maturation du vih, substitués en 3ème position par un cycle non aromatique portant un substituant halogénoalkyle

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009020732A1 (en) * 2007-08-03 2009-02-12 Advanced Life Sciences, Inc. Lupane-type triterpenoids modified at 30-position and analogues thereof
CN103038245A (zh) * 2010-06-04 2013-04-10 百时美施贵宝公司 作为hiv成熟抑制剂的c-3经修饰的桦木酸衍生物
WO2013123019A1 (en) * 2012-02-15 2013-08-22 Bristol-Myers Squibb Company C-3 cycloalkenyl triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109705189A (zh) * 2018-12-29 2019-05-03 中国医学科学院药用植物研究所 具有式i所示结构的三萜衍生物及其制备方法和应用
CN109705189B (zh) * 2018-12-29 2020-06-05 中国医学科学院药用植物研究所 具有式i所示结构的三萜衍生物及其制备方法和应用
CN110981765A (zh) * 2019-11-07 2020-04-10 肇庆巨元生化有限公司 一种25-羟基维生素d3中间体的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
KR102411082B1 (ko) 2022-06-17
UA120927C2 (uk) 2020-03-10
US11464790B2 (en) 2022-10-11
MA39374A1 (fr) 2018-06-29
CR20160472A (es) 2017-03-10
ES2828705T3 (es) 2021-05-27
EA201691760A1 (ru) 2017-02-28
US10245275B2 (en) 2019-04-02
NZ724644A (en) 2023-07-28
PH12016501951B1 (en) 2017-01-09
SI3129392T1 (sl) 2020-11-30
CA2944778A1 (en) 2015-10-15
EP3129392A1 (en) 2017-02-15
US10780102B2 (en) 2020-09-22
AR101077A1 (es) 2016-11-23
US20150291655A1 (en) 2015-10-15
DK3129392T3 (da) 2020-10-19
ZA201606748B (en) 2018-05-30
MX2016013425A (es) 2017-05-02
RS60959B1 (sr) 2020-11-30
US20190151336A1 (en) 2019-05-23
WO2015157483A1 (en) 2015-10-15
EP3750910A1 (en) 2020-12-16
CL2016002528A1 (es) 2017-06-23
BR112016023414A2 (zh) 2017-08-15
IL248053B (en) 2020-04-30
UY36070A (es) 2015-10-30
TWI659964B (zh) 2019-05-21
EA030178B1 (ru) 2018-06-29
JP2017510659A (ja) 2017-04-13
SG11201608041QA (en) 2016-10-28
AU2015243500B2 (en) 2017-03-30
US20200360404A1 (en) 2020-11-19
LT3129392T (lt) 2020-11-10
KR20160147809A (ko) 2016-12-23
HRP20201645T1 (hr) 2020-12-25
AU2015243500A1 (en) 2016-10-27
SG10201709017PA (en) 2017-11-29
JP6568202B2 (ja) 2019-08-28
EP3129392B1 (en) 2020-08-05
BR112016023414B1 (pt) 2022-09-13
US20170056420A1 (en) 2017-03-02
CA2944778C (en) 2022-06-14
PE20161391A1 (es) 2017-01-10
PL3129392T3 (pl) 2021-04-06
HUE051719T2 (hu) 2021-03-29
US9527882B2 (en) 2016-12-27
PT3129392T (pt) 2020-10-30
DOP2016000277A (es) 2017-02-28
PH12016501951A1 (en) 2017-01-09
CN106604909B (zh) 2019-02-15
TW201623324A (zh) 2016-07-01
US20170340650A1 (en) 2017-11-30
CY1123742T1 (el) 2022-03-24
IL248053A0 (en) 2016-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106604909B (zh) 具有hiv成熟抑制活性的在3位被带有卤代烷基取代基的非芳族环取代的三萜系化合物
CN103339141B (zh) 作为hiv成熟抑制剂的c-3修饰的桦木酸衍生物的c-28胺
JP6155285B2 (ja) Ｈｉｖ成熟阻害活性のあるｃ−３シクロアルケニルトリテルペノイド
CN104540844B (zh) 具有hiv成熟抑制活性的三萜系化合物的c-17双环胺
JP6186012B2 (ja) Ｃ−３アルキルおよびアルケニル修飾ベツリン酸誘導体
CN103429607A (zh) 具有hiv成熟抑制活性的c-17和c-3经修饰的三萜系化合物
JP6186010B2 (ja) Ｈｉｖ成熟阻害活性を有するｃ−１９修飾トリテルペノイド類
CN102985438A (zh) 作为hiv成熟抑制剂的经修饰c-3桦木酸衍生物的c-28酰胺
TWI719126B (zh) 作為hiv-1抑制劑之c-3及c-17改質三萜系化合物
CN107250153A (zh) 氧代羽扇豆烯衍生物
CN107250151A (zh) 扩展的桦木酸类似物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant