KR20160147809A - 할로알킬 치환기를 지니는 비­방향족 고리에 의해 위치 3에서 치환된，ｈｉｖ 성숙화 억제 활성을 갖는 트리테르페노이드 - Google Patents

할로알킬 치환기를 지니는 비­방향족 고리에 의해 위치 3에서 치환된，ｈｉｖ 성숙화 억제 활성을 갖는 트리테르페노이드 Download PDF

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Abstract

약물 및 생물-영향성을 갖는 화합물, 이들의 약학적 조성물 및 이용 방법이 개시된다. 특히, 하기 화학식 I의 화합물에 의해 표시되는, 고유의 항바이러스 활성을 지닌 트리테르페노이드가 HIV 성숙화 억제제로서 제공된다:
Figure pct00315

X는 C4-8 사이클로알킬, C4-8 사이클로알케닐, C4-9 스피로사이클로알킬, C4-9 스피로사이클로알케닐, C4-8 옥사사이클로알킬, C4-8 디옥사사이클로알킬, C6-8 옥사사이클로알케닐, C6-8 디옥사사이클로알케닐, C6 사이클로디알케닐, C6 옥사사이클로디알케닐, C6-9 옥사스피로사이클로알킬 및 C6-9 옥사스피로사이클로알케닐 고리로부터 선택되고, 이 때 X는 A로 치환되며, A는 -C1-6 알킬-할로이다. 이러한 화합물은 HIV 및 AIDS의 치료에 유용하다.

Description

할로알킬 치환기를 지니는 비­방향족 고리에 의해 위치 3에서 치환된，ＨＩＶ 성숙화 억제 활성을 갖는 트리테르페노이드{TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY, SUBSTITUTED IN POSITION 3 BY A NON-AROMATIC RING CARRYING A HALOALKYL SUBSTITUENT}
관련 출원의 전후 참조
본 출원은 전문이 본원에 참조로서 포함되는, 2014년 4월 11일 출원된 미국 가특허출원 제61/978,306의 이익을 주장한다.
발명의 분야
본 발명은 HIV에 대해 유용한 신규한 화합물에 관한 것이고, 보다 특히, HIV 성숙화 억제제로서 유용한 베툴린산으로부터 유래된 화합물 및 다른 구조적으로-관련된 화합물, 및 이를 함유하는 약학적 조성물, 뿐만 아니라 이들의 제조 방법에 관한 것이다.
발명의 배경
HIV-1 (인간 면역결핍 바이러스 -1) 감염은, 2010년 말에 세계적으로 4500-5000만명의 인구가 감염된 것으로 추정되는, 주요 의료 문제로 남아 있다. HIV 및 AIDS (후천성 면역결핍 증후군)의 병증 수는 빠르게 상승하였다. 2005년에, 대략 500만의 새로운 감염이 보고되었고, 310만명의 인구가 AIDS로 인해 사망하였다. HIV의 치료에 현재 이용가능한 약물은 뉴클레오시드 역전사효소 (RT) 억제제 또는 승인된 단일 알약 조합물: 지도부딘(zidovudine)(또는 AZT 또는 RETROVIR®), 디다노신(didanosine)(또는 VIDEX®), 스타부딘(stavudine)(또는 ZERIT®), 라미부딘(lamivudine)(또는 3TC 또는 EPIVIR®), 잘시타빈(zalcitabine)(또는 DDC 또는 HIVID®), 아바카버 석시네이트(abacavir succinate)(또는 ZIAGEN®), 테노포버 디소프록실 푸마레이트 염 (또는 VIREAD®), 엠트리시타빈(emtricitabine)(또는 FTC EMTRIVA®), COMBIVIR® (-3TC + AZT 함유), TRIZIVIR® (아바카버, 라미부딘, 및 지도부딘 함유), EPZICOM® (아바카버 및 라미부딘 함유), TRUVADA® (VIREAD® 및 EMTRIVA® 함유); 비-뉴클레오시드 역전사효소 억제제: 네비라핀(nevirapine)(또는 VIRAMUNE®), 델라비르딘(delavirdine)(또는 RESCRIPTOR®) 및 에파비렌즈(efavirenz)(또는 SUSTIVA®), ATRIPLA® (TRUVADA® + SUSTIVA®), 및 에트라비린(etravirine), 및 펩티도미메틱 프로테아제 억제제 또는 승인된 제형: 사퀴나버(saquinavir), 인디나버(indinavir), 리토나버(ritonavir), 넬피나버(nelfinavir), 암프레나버(amprenavir), 로피나버(lopinavir), KALETRA®(로피나버 및 리토나버), 다루나버(darunavir), 아타자나버(atazanavir)(REYATAZ®) 및 티프라나버(tipranavir)(APTIVUS®) 및 코비시스타트(cobicistat), 및 인테그라제 억제제, 예컨대 랄테그라버(raltegravir)(ISENTRESS®), 및 진입 억제제, 예컨대 엔푸비르타이드(enfuvirtide)(T-20)(FUZEON®) 및 마라비록(maraviroc)(SELZENTRY®)을 포함한다.
각각의 이들 약물은 단독으로 이용되는 경우에만 일시적으로 바이러스 복제를 억제할 수 있다. 그러나, 조합하여 사용시, 이들 약물은 바이러스혈증 및 질병 진행에 깊은 영향을 갖는다. 실제로, AIDS 환자의 사망률에서의 현저한 감소가 조합 요법의 광범위한 적용 결과로서 최근에 기록되었다. 그러나, 이러한 인상적인 결과에도 불구하고, 환자의 30 내지 50%는 궁극적으로 조합 약물 요법에 실패할 수 있다. 불충분한 약물 효능, 비-순응, 제한된 조직 침투 및 특정 세포 유형 내에서 약물-특이적 한계 (예컨대, 대부분의 뉴클레오시드 유사체는 휴지 세포에서 인산화될 수 없다)는 민감한 바이러스의 불완전 억제를 설명할 수 있다. 더욱이, 높은 복제율 및 돌연변이의 빈번한 혼입과 함께 HIV-1의 빠른 턴오버는 차선의 약물 농도가 존재할 때 약물-내성 변이체의 출현 및 치료 실패를 발생시킨다. 따라서, 더 많은 치료 옵션을 제공하기 위해 별개의 내성 패턴 및 유리한 약동학 뿐만 아니라 안전성 프로파일을 나타내는 신규한 항-HIV 작용제가 요구된다. 개선된 HIV 융합 억제제 및 HIV 진입 공수용체 길항제는 많은 연구자들에 의해 추가로 연구되고 있는 항-HIV 작용제의 새로운 부류의 두 가지 예이다.
HIV 부착 억제제는 HIV 표면 당단백질 gp120과 결합하여, 표면 단백질 gp120과 숙주 세포 수용체 CD4 사이의 상호작용을 방해하는 항바이러스 화합물의 추가 하위부류이다. 따라서, 이들은 HIV가 인간 CD4 T-세포에 부착하는 것을 막고, HIV 생활 주기의 제1 단계에서 HIV 복제를 차단한다. HIV 부착 억제제의 특성은 극대화된 유용성 및 항바이러스 작용제로서의 효능을 지닌 화합물을 얻기 위한 노력으로 개선되어 왔다. 특히, US 7,354,924 및 US 7,745,625는 HIV 부착 억제제를 예시한다.
HIV의 치료를 위한 또 다른 새로운 부류의 화합물은 HIV 성숙화 억제제라고 불린다. 성숙화는 HIV 복제 또는 HIV 생활 주기에서 10개 이상만큼 많은 단계의 마지막이며, 여기에서 HIV는 궁극적으로 캡시드 (CA) 단백질의 방출을 초래하는 gag 단백질의 여러 HIV 프로테아제-매개된 절단 사건의 결과로서 감염성이 된다. 성숙화 억제제는 HIV 캡시드가 적절하게 어셈블링되어 성숙화되는 것을 막거나, 보호용 외피를 형성하는 것을 막거나, 인간 세포로부터 나타나는 것을 막는다. 대신, 비-감염성 바이러스가 생성되어, HIV 감염의 후속 사이클을 억제한다.
베툴린산의 특정 유도체는 현재 HIV 성숙화 억제제로서 강력한 항-HIV 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 예를 들어, US 7,365,221은 모노아실화된 베툴린 및 디하이드로베툴린 유도체, 및 항-HIV 작용제로서 이들의 용도를 기재한다. US 7,365,221 참고문헌에서 논의된 대로, 특정 치환된 아실기, 예컨대 3',3'-디메틸글루타릴 및 3',3'-디메틸석시닐기에 의한 베툴린산 (1)의 에스테르화는 향상된 활성을 갖는 유도체를 생성하였다 (Kashiwada, Y., et al., J. Med. Chem. 39:1016-1017 (1996)). 강력한 항-HIV 작용제인 아실화된 베툴린산 및 디하이드로베툴린산 유도체가 또한 미국특허 5,679,828에 기재된다. 베툴린의 3 탄소에서 석신산에 의한 하이드록실의 에스테르화는 또한 HIV-1 활성을 억제할 수 있는 화합물을 생성하였다 (Pokrovskii, A. G., et al., "Synthesis of derivatives of plant triterpenes and study of their antiviral and immunostimulating activity," Khimiya y Interesakh Ustoichivogo Razvitiya, Vol. 9, No. 3, pp. 485-491 (2001) (English abstract).
베툴린산으로부터 유래된 화합물에 의해 HIV 감염을 치료하는 용도에 대한 다른 참고문헌은 US 2005/0239748 및 US 2008/0207573, 뿐만 아니라 WO2006/053255, WO2009/100532 및 WO2011/007230을 포함한다.
개발 중인 한 HIV 성숙화 화합물은 베비리마트(Bevirimat) 또는 PA-457로서 확인되며, 이는 C36H56O6의 화학식 및 3β-(3-카르복시-3-메틸-부타노일옥시) 루프-20(29)-엔-28-오산의 IUPAC 명칭을 갖는다.
Bristol-Myers Squibb에 의해 2011년 6월 2일 출원된 "MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS" 명칭의 USSN 13/151,706 (현재 US 8,754,068) 및 2011년 6월 2일 출원된 "C-28 AMIDES OF MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS" 명칭의 USSN 13/151,722 (현재 US 8,802,661)의 출원이 또한 본원에서 참조된다. 또한 2012년 1월 27일 출원된 명칭이 "C-28 AMINE OF C-3 MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS"인 USSN 13/359,680 (현재 US 8,748,415)의 출원을 참조한다. 또한, 2012년 1월 27일 출원된 명칭이 "C-17 AND C-3 MODIFIED TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY"인 USSN 13/359,727 (현재 US 8,846,647)의 출원을 참조한다. 2013년 2월 6일에 USSN 13/760,726 출원된 "C-3 CYCLOALKENYL TRITERPENOIDS WITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY"의 출원 (현재 US 8,906,889)이 또한 추가로 참조된다.
당 분야에서 새롭게 요구되는 것은 HIV 성숙화 억제제로서 유용한 신규한 화합물, 뿐만 아니라 이러한 화합물을 함유하는 신규한 약학적 조성물이다.
발명의 개요
본 발명은 하기 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 화학식 I의 화합물, 이의 약학적 제형, 및 HIV와 같은 바이러스로 고통받거나 만감한 환자에서의 이의 용도를 제공한다. 화학식 I의 화합물은 효과적인 항바이러스 작용제이고, 특히 HIV의 억제제로서 유효하다. 이들은 HIV 및 AIDS의 치료에 유용하다.
본 발명의 한 구체예는 하기 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00001
상기 식에서, R1은 이소프로페닐 또는 이소프로필이고;
X는 C4-8 사이클로알킬, C4-8 사이클로알케닐, C4-9 스피로사이클로알킬, C4-9 스피로사이클로알케닐, C4-8 옥사사이클로알킬, C4-8 디옥사사이클로알킬, C6-8 옥사사이클로알케닐, C6-8 디옥사사이클로알케닐, C6 사이클로디알케닐, C6 옥사사이클로디알케닐, C6-9 옥사스피로사이클로알킬 및 C6-9 옥사스피로사이클로알케닐 고리의 군으로부터 선택되고,
이 때 X는 A로 치환되고, A는 -C1-6 알킬-할로이며;
Y는 -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -NR2SO2R2, -SO2NR2R2, -C3-6 사이클로알킬-COOR2, -C2-6 알케닐-COOR2, -C2-6 알키닐-COOR2, -C1-6 알킬-COOR2, -알킬치환된 C1-6 알킬, -CF2-COOR2, -NHC(O)(CH2)n-COOR2, -SO2NR2C(O)R2, -테트라졸, 및 -CONHOH의 군으로부터 선택되고,
이 때 n = 1-6이며;
R2는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬 또는 -아릴치환된 C1-6 알킬이고;
W는 부재하거나, -CH2 또는 -CO이고;
R3는 -H, -C1-6 알킬 또는 -알킬치환된 C1-6 알킬이고;
R4는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-Q1, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q1, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, 및
Figure pct00002
의 군으로부터 선택되고,
이 때 G는 -O-, -SO2- 및 -NR12의 군으로부터 선택되고;
Q1은 -C1-6 알킬, -C1-6 플루오로알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 할로겐, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9 및 -SO2R7의 군으로부터 선택되며;
R5는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 알킬치환된 알킬, -C1-6 알킬-NR8R9, -COR3, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
단, W가 -CO일 때, R4 또는 R5는 -COR6일 수 없고;
추가로, R4 또는 R5 중 하나만이 -COR6, -COCOR6, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택될 수 있거나;
W가 부재하거나 -CH2인 경우, R4 및 R5는 인접한 N과 함께 취해져
Figure pct00003
을 형성할 수 있으며;
R6은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-치환된알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C3-6 치환된사이클로알킬-Q2, -C1-6 알킬-Q2, -C1-6 알킬-치환된알킬-Q2, C3-6 사이클로알킬-Q2, 아릴-Q2, -NR13R14, 및 -OR15의 군으로부터 선택되고;
이 때 Q2는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3, 및 -CONHSO2NR2R2의 군으로부터 선택되며;
R7은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -CF3, 아릴, 및 헤테로아릴의 군으로부터 선택되고;
R8 및 R9는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, -C1-6 알킬-Q2, 및 -COOR3의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
R8 및 R9는 인접한 N과 함께 취해져
Figure pct00004
의 군으로부터 선택되는 고리를 형성하고;
M은 -R15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH 및 -NR2R12의 군으로부터 선택되고;
V는 -CR10R11-, -SO2-, -O- 및 -NR12-의 군으로부터 선택되고;
단, R8 또는 R9 중 하나만이 -COOR3일 수 있으며;
R10 및 R11은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬 및 -C3-6 사이클로알킬의 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R12는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬, -CONR2R2, -SO2R3, -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
R13 및 R14는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3, C1-6 치환된 알킬-Q3 및
Figure pct00005
의 군으로부터 독립적으로 선택되고,
Q3은 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, 및 -SO2R3의 군으로부터 선택되고;
R15는 -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3 및 -C1-6 치환된 알킬-Q3의 군으로부터 선택되고;
R16은 -H, -C1-6 알킬, -NR2R2, 및 -COOR2의 군으로부터 선택되고;
단, V가 -NR12-일 때, R16은 -NR2R2일 수 없고;
R17은 -H, -C1-6 알킬, -COOR3, 및 아릴의 군으로부터 선택된다.
추가 구체예에서, 항바이러스 유효량의 화학식 I의 화합물의 군으로부터 선택되는 화합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포유동물에 투여하는 것을 포함하는, 바이러스에 감염된 포유동물을 치료하는 방법으로서, 특히 상기 바이러스가 HIV인 방법이 제공된다. 임의로, 화학식 I의 화합물은 항바이러스 유효량의 (a) AIDS 항바이러스 작용제; (b) 항감염성 작용제; (c) 면역조절제; 및 (d) 다른 HIV 진입 억제제로 구성된 군으로부터 선택되는 또 다른 ADIS 치료제와 함께 투여될 수 있다.
본 발명의 또 다른 구체예는 하나 이상의 화학식 I의 화합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제, 및/또는 희석제를 임의로 (a) AIDS 항바이러스 작용제; (b) 항감염성 작용제; (c) 면역조절제; 및 (d) 다른 HIV 진입 억제제로 구성된 군으로부터 선택되는 또 다른 ADIS 치료제와 함께 포함하는 약학적 조성물이다.
본 발명의 또 다른 구체예에서, 본원의 화학식 I의 화합물을 제조하기 위한 하나 이상의 방법이 제공된다.
또한 본원의 화학식 I의 화합물을 제조하는데 유용한 중간체 화합물이 제공된다.
본 발명은 상기 목적, 뿐만 아니라 이하에 기재된 다른 중요한 목적에 관한 것이다.
구체예의 상세한 설명
본원에서 사용되는 단수 형태는 문맥에서 달리 명백하게 지시하지 않는 한 복수 대상물을 포함한다.
본 발명의 화합물이 비대칭 중심을 가져서 부분입체이성질체의 혼합물로서 발생할 수 있으므로, 본 발명은 화학식 I의 화합물의 개개의 부분입체이성질체 형태를, 이의 혼합물에 추가하여 포함한다.
정의
본 출원의 다른 곳에 달리 구체적으로 개시되지 않는 한, 하기 용어 중 하나 이상이 본원에 사용될 수 있고, 다음 의미를 지닐 것이다:
"H"는 중수소와 같은 이의 동위원소를 포함하는 수소를 지칭한다.
본원 및 청구항에서 사용되는 용어 "C1-6 알킬"은 (달리 명시되지 않는 한) 직쇄 또는 분지쇄 알킬기, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸, 아밀, 헥실 등을 의미한다.
"C1-C4 플루오로알킬"은 F-치환된 C1-C4 알킬을 나타내고, 여기서 적어도 하나의 H 원자는 F 원자로 치환되고, 각각의 H 원자는 F 원자로 독립적으로 치환될 수 있다.
"할로겐" 또는 "할로"는 클로린, 브로민, 아이오딘 또는 플루오린을 나타낸다.
"아릴" 또는 "Ar" 기는 완전히 컨쥬게이션된 pi-전자 시스템을 지니는 모든 탄소 모노사이클릭 또는 융합된-고리 폴리사이클릭 (즉, 탄소 원자의 인접 쌍을 공유하는 고리) 기를 나타낸다. 아릴기의 예는 비제한적으로 페닐, 나프탈레닐 및 안트라세닐이다. 아릴기는 치환되거나 비치환될 수 있다. 치환되는 경우, 치환기(들)는 바람직하게는 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로알리사이클릭, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로알리사이클록시, 티오하이드록시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로알리사이클록시, 시아노, 할로겐, 니트로, 카르보닐, O-카르바밀, N-카르바밀, C-아미도, N-아미도, C-카르복시, O-카르복시, 설피닐, 설포닐, 설폰아미도, 트리할로메틸, 우레이도, 아미노 및 -NRxRy로부터 선택되는 하나 이상이고, 여기서 Rx 및 Ry는 수소, 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 카르보닐, C-카르복시, 설포닐, 트리할로메틸, 및, 조합된 5- 또는 6-원 헤테로알리사이클릭 고리로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된다.
본원에서 사용되는 "헤테로아릴" 기는 질소, 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 원자를 고리(들)에 지니고, 추가로, 완전히 컨쥬게이션된 pi-전자 시스템을 지니는 모노사이클릭 또는 융합된 고리 (즉, 원자의 인접 쌍을 공유하는 고리) 기를 나타낸다. 달리 지시되지 않는 한, 헤테로아릴 기는 헤테로아릴 기 내의 탄소 또는 질소 원자에서 부착될 수 있다. 용어 헤테로아릴은 부모 헤테로아릴의 N-옥사이드를 포함하고자 하며, 단, 그러한 N-옥사이드는 당 분야에 공지된 대로 화학적으로 실현될 수 있음에 유의한다. 헤테로아릴 기의 예는 비제한적으로 푸릴, 티에닐, 벤조티에닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 벤조티아졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 피라닐, 테트라하이드로피라닐, 피라졸릴, 피리딜, 피리미디닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퓨리닐, 카르바졸릴, 벤즈옥사졸릴, 벤즈이미다졸릴, 인돌릴, 이소인돌릴, 피라지닐, 디아지닐, 피라진, 트리아지닐, 테트라지닐, 및 테트라졸릴이다. 치환되는 경우, 치환기(들)는 바람직하게는 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로알리사이클릭, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로알리사이클록시, 티오알콕시, 티오하이드록시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로알리사이클록시, 시아노, 할로겐, 니트로, 카르보닐, O-카르바밀, N-카르바밀, C-아미도, N-아미도, C-카르복시, O-카르복시, 설피닐, 설포닐, 설폰아미도, 트리할로메틸, 우레이도, 아미노 및 -NRxRy로부터 선택되는 하나 이상이고, 여기서 Rx 및 Ry는 상기 정의된 바와 같다.
본원에서 사용되는 "헤테로알리사이클릭" 기는 질소, 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 원자를 고리(들)에 지니는 모노사이클릭 또는 융합된 고리 기를 나타낸다. 고리는 안정한 결합 배열을 제공하는 것들로부터 선택되고 존재하지 않을 시스템을 포함하고자 하는 것이 아니다. 고리는 또한 하나 이상의 이중 결합을 지닐 수 있다. 그러나, 고리는 완전히 컨쥬게이션된 pi-전자 시스템을 갖지 않는다. 헤테로알리사이클릭 기의 예는 비제한적으로 아제티디닐, 피페리딜, 피페라지닐, 이미다졸리닐, 티아졸리디닐, 3-피롤리딘-1-일, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐 및 이의 S 옥사이드 및 테트라하이드로피라닐이다. 치환되는 경우, 치환기(들)는 바람직하게는 알킬, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로알리사이클릭, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로알리사이클록시, 티오하이드록시, 티오알콕시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로알리사이클록시, 시아노, 할로겐, 니트로, 카르보닐, 티오카르보닐, O-카르바밀, N-카르바밀, O-티오카르바밀, N-티오카르바밀, C-아미도, C-티오아미도, N-아미도, C-카르복시, O-카르복시, 설피닐, 설포닐, 설폰아미도, 트리할로메탄설폰아미도, 트리할로메탄설포닐, 실릴, 구아닐, 구아니디노, 우레이도, 포스포닐, 아미노 및 -NRxRy로부터 선택되는 하나 이상이고, 여기서 Rx 및 Ry는 상기 정의된 바와 같다.
"알킬" 기는 직쇄 및 분지쇄 기를 포함하는 포화된 지방족 탄화수소를 나타낸다. 바람직하게는, 알킬기는 1 내지 20개 탄소 원자를 지닌다 (수치 범위; 예컨대 "1-20"이 본원에서 언급될 때마다, 이는 상기 기, 이 경우에 알킬기가 1개의 탄소 원자, 2개의 탄소 원자, 3개의 탄소 원자 등 내지 20개 이하 및 20개를 포함하는 탄소 원자를 함유할 수 있음을 의미한다). 보다 바람직하게는, 이는 1 내지 10개 탄소 원자를 갖는 중간 크기 알킬이다. 가장 바람직하게는, 이는 1 내지 4개 탄소 원자를 갖는 저급 알킬이다. 알킬기는 치환되거나 비치환될 수 있다. 치환되는 경우, 치환기(들)는 바람직하게는 트리할로알킬, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로알리사이클릭, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로알리사이클록시, 티오하이드록시, 티오알콕시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로알리사이클록시, 시아노, 할로, 니트로, 카르보닐, 티오카르보닐, O-카르바밀, N-카르바밀, O-티오카르바밀, N-티오카르바밀, C-아미도, C-티오아미도, N-아미도, C-카르복시, O-카르복시, 설피닐, 설포닐, 설폰아미도, 트리할로메탄설폰아미도, 트리할로메탄설포닐, 및 조합된 5- 또는 6-원 헤테로알리사이클릭 고리로부터 개별적으로 선택되는 하나 이상이다.
"사이클로알킬" 기는 하나 이상의 고리가 완전히 컨쥬게이션된 pi-전자 시스템을 갖지 않는 모두-탄소 모노사이클릭 또는 융합된 고리 (즉, 탄소 원자의 인접 쌍을 공유하는 고리) 기를 나타낸다. 사이클로알킬기의 예는 비제한적으로 사이클로프로판, 사이클로부탄, 사이클로펜탄, 사이클로펜텐, 사이클로헥산, 사이클로헥센, 사이클로헵탄, 사이클로헵텐 및 아다만탄이다. 사이클로알킬기는 치환되거나 비치환될 수 있다. 치환되는 경우, 치환기(들)는 바람직하게는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로알리사이클릭, 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로알리사이클록시, 티오하이드록시, 티오알콕시, 티오아릴옥시, 티오헤테로아릴옥시, 티오헤테로알리사이클록시, 시아노, 할로, 니트로, 카르보닐, 티오카르보닐, O-카르바밀, N-카르바밀, O-티오카르바밀, N-티오카르바밀, C-아미도, C-티오아미도, N-아미도, C-카르복시, O-카르복시, 설피닐, 설포닐, 설폰아미도, 트리할로메탄설폰아미도, 트리할로메탄설포닐, 실릴, 아미디노, 구아니디노, 우레이도, 포스포닐, 아미노 및 -NRxRy로부터 개별적으로 선택되는 하나 이상이고, Rx 및 Ry는 상기 정의된 바와 같다.
"알케닐" 기는 적어도 2개의 탄소 원자 및 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 나타낸다.
"알키닐" 기는 적어도 2개의 탄소 원자 및 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 나타낸다.
"하이드록시" 기는 -OH 기를 나타낸다.
"알콕시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 -O-알킬 및 -O-사이클로알킬기 둘 모두를 나타낸다.
"아릴옥시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 -O-아릴 및 -O-헤테로아릴기 둘 모두를 나타낸다.
"헤테로아릴옥시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 헤테로아릴을 지닌 헤테로아릴-O- 기를 나타낸다.
"헤테로알리사이클록시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 헤테로알리사이클릭을 지닌 헤테로알리사이클릭-O- 기를 나타낸다.
"티오하이드록시" 기는 -SH 기를 나타낸다.
"티오알콕시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 S-알킬 및 -S-사이클로알킬기 둘 모두를 나타낸다.
"티오아릴옥시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 -S-아릴 및 -S-헤테로아릴기 둘 모두를 나타낸다.
"티오헤테로아릴옥시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 헤테로아릴을 지닌 헤테로아릴-S- 기를 나타낸다.
"티오헤테로알리사이클록시" 기는 본원에 정의된 바와 같은 헤테로알리사이클릭을 지닌 헤테로알리사이클릭-S- 기를 나타낸다.
"카르보닐" 기는 -C(=O)-R" 기를 나타내고, 여기서 R"은 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로아릴 (고리 탄소를 통해 결합됨) 및 헤테로알리사이클릭 (고리 탄소를 통해 결합됨)으로 구성된 군으로부터 선택되며, 각각은 본원에 정의된 바와 같다.
"알데하이드" 기는 R"이 수소인 카르보닐기를 나타낸다.
"티오카르보닐" 기는 R"가 본원에 정의된 바와 같은 -C(=S)-R" 기를 나타낸다.
"케토" 기는 -CC(=O)C- 기를 나타내고, 여기서 C=O의 어느 한측 또는 양측의 탄소는 알킬, 사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴 또는 헤테로알리사이클릭 기의 탄소일 수 있다.
"트리할로메탄카르보닐" 기는 Z3CC(=O)- 기를 나타내고, 상기 Z는 할로겐이다.
"C-카르복시" 기는 -C(=O)O-R" 기를 나타내고, R"은 상기 정의된 바와 같다.
"O-카르복시" 기는 R"C(-O)O-기를 나타내고, R"은 상기 정의된 바와 같다.
"카르복실산" 기는 R"이 수소인 C-카르복시기를 나타낸다.
"트리할로메틸" 기는 -CZ3 기를 나타내고, 여기서 Z는 본원에 정의된 바와 같은 할로겐 기이다.
"트리할로메탄설포닐" 기는 Z3CS(=O)2- 기를 나타내고, Z는 상기 정의된 바와 같다.
"트리할로메탄설폰아미도" 기는 Z3CS(=O)2NRx- 기를 나타내고, Z는 상기 정의된 바와 같고 Rx는 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"설피닐" 기는 -S(=O)-R" 기를 나타내고, R"는 (C1-6)알킬이다.
"설포닐" 기는 -S(=O)2R" 기를 나타내고, R"는 (C1-6)알킬이다.
"S-설폰아미도" 기는 -S(=O)2NRxRy를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"N-설폰아미도" 기는 R"S(=O)2NRx- 기를 나타내고, Rx는 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"O-카르바밀" 기는 -OC(=O)NRxRy 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"N-카르바밀" 기는 RxOC(=O)NRy 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"O-티오카르바밀" 기는 -OC(=S)NRxRy 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"N-티오카르바밀" 기는 RxOC(=S)NRy- 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"아미노" 기는 -NH2 기를 나타낸다.
"C-아미도" 기는 -C(=O)NRxRy 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"C-티오아미도" 기는 -C(=S)NRxRy 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"N-아미도" 기는 RxC(=O)NRy- 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"우레이도" 기는 -NRxC(=O)NRyRy2 기를 나타내고, Rx, Ry, 및 Ry2는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"구아니디노" 기는 -RxNC(=N)NRyRy2 기를 나타내고, Rx, Ry, 및 Ry2는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"아미디노" 기는 RxRyNC(=N)- 기를 나타내고, Rx 및 Ry는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"시아노" 기는 -CN 기를 나타낸다.
"실릴" 기는 -Si(R")3을 나타내고, R"는 (C1-6)알킬 또는 페닐이다.
"포스포닐" 기는 P(=O)(ORx)2를 나타내고, Rx는 (C1-6)알킬이다.
"하이드라지노" 기는 -NRxNRyRy2 기를 나타내고, Rx, Ry, 및 Ry2는 독립적으로 H 또는 (C1-6)알킬이다.
"4, 5, 또는 6원 고리 사이클릭 N-락탐" 기는
Figure pct00006
을 나타낸다.
"스피로" 기는 단 하나의 원자를 통해 연결된 고리를 지닌 바이사이클릭 유기 기이다. 고리는 사실상 상이하거나 동일할 수 있다. 연결 원자는 또한 스피로원자, 가장 빈번하게 사차 탄소 ("스피로 탄소")라고 불린다.
"옥소스피로" 또는 "옥사스피로" 기는 바이사이클릭 고리 구조 내에 함유된 산소를 지닌 스피로 기이다. "디옥소스피로" 또는 "디옥사스피로" 기는 바이사이클릭 고리 구조 내에 2개의 산소를 지닌다.
임의의 두 인접한 R 기는 조합하여 그러한 R 기를 처음에 지니는 고리에 융합된 추가의 아릴, 사이클로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클릭 고리를 형성할 수 있다.
헤테로아릴 시스템의 질소 원자는 "헤테로아릴 고리 이중 결합에 참여"할 수 있고, 이는 5-원 고리 헤테로아릴기를 포함하는 2개의 호변이성질체 구조에 이중 결합의 형태를 나타냄이 당 분야에 공지되어 있다. 이는 당 분야의 화학자가 이해하는 대로 질소도 치환될 수 있는지 여부를 지시한다. 본 발명 및 청구항의 설명은 화학 결합의 공지된 일반 원리에 기반한다. 청구항은 문헌에 기반하여 불안정하거나 존재할 수 없는 것으로 알려진 구조를 포함하지 않는 것으로 이해된다.
본원에 기재된 화합물의 약학적으로 허용되는 염 및 프로드럭은 본 발명의 범위 내에 있다. 본원 및 청구항에서 이용되는 용어 "약학적으로 허용되는 염"은 무독성 염기 부가염을 포함하고자 한다. 적합한 염은, 비제한적으로, 염산, 브롬화수소산, 인산, 황산, 메탄설폰산, 아세트산, 타르타르산, 락트산, 설핀산, 시트르산, 말레산, 푸마르산, 소르브산, 아코니트산, 살리실산, 프탈산 등과 같은 유기 및 무기산으로부터 유래된 것들을 포함한다. 본원에서 이용되는 용어 "약학적으로 허용되는 염"은 또한 카르복실레이트와 같은 산성 기와 암모늄과 같은 반대이온의 염, 알칼리 금속 염, 특히 소듐 또는 포타슘, 알칼리 토금속 염, 특히 칼슘 또는 마그네슘, 및 저급 알킬아민 (메틸아민, 에틸아민, 사이클로헥실아민 등) 또는 치환된 저급 알킬아민 (예컨대, 하이드록실-치환된 알킬아민, 예컨대 디에탄올아민, 트리에탄올아민 또는 트리스(하이드록시메틸)- 아미노메탄)과 같은 적합한 유기 염기, 또는 피페리딘 또는 모르폴린과 같은 염기와의 염을 포함하고자 한다.
상기 언급된 대로, 본 발명의 화합물을 또한 "프로드럭"을 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "프로드럭"은 용어 "프로드럭 에스테르" 및 용어 "프로드럭 에테르" 둘 모두를 포함한다.
상기 개시된 대로, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 화학식 I의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00007
상기 식에서, R1은 이소프로페닐 또는 이소프로필이고;
X는 C4-8 사이클로알킬, C4-8 사이클로알케닐, C4-9 스피로사이클로알킬, C4-9 스피로사이클로알케닐, C4-8 옥사사이클로알킬, C4-8 디옥사사이클로알킬, C6-8 옥사사이클로알케닐, C6-8 디옥사사이클로알케닐, C6 사이클로디알케닐, C6 옥사사이클로디알케닐, C6-9 옥사스피로사이클로알킬 및 C6-9 옥사스피로사이클로알케닐 고리의 군으로부터 선택되고,
이 때 X는 A로 치환되고, A는 -C1-6 알킬-할로이며;
Y는 -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -NR2SO2R2, -SO2NR2R2, -C3-6 사이클로알킬-COOR2, -C2-6 알케닐-COOR2, -C2-6 알키닐-COOR2, -C1-6 알킬-COOR2, -알킬치환된 C1-6 알킬, -CF2-COOR2, -NHC(O)(CH2)n-COOR2, -SO2NR2C(O)R2, -테트라졸, 및 -CONHOH의 군으로부터 선택되고,
이 때 n = 1-6이며;
R2는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬 또는 -아릴치환된 C1-6 알킬이고;
W는 부재하거나, -CH2 또는 -CO이고;
R3는 -H, -C1-6 알킬 또는 -알킬치환된 C1-6 알킬이고;
R4는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-Q1, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q1, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, 및
Figure pct00008
의 군으로부터 선택되고,
이 때 G는 -O-, -SO2- 및 -NR12의 군으로부터 선택되고;
Q1은 -C1-6 알킬, -C1-6 플루오로알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 할로겐, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9 및 -SO2R7의 군으로부터 선택되며;
R5는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 알킬치환된 알킬, -C1-6 알킬-NR8R9, -COR3, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
단, W가 -CO일 때, R4 또는 R5는 -COR6일 수 없고;
추가로, R4 또는 R5 중 하나만이 -COR6, -COCOR6, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택될 수 있거나;
W가 부재하거나 -CH2인 경우, R4 및 R5는 인접한 N과 함께 취해져
Figure pct00009
을 형성할 수 있으며;
R6은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-치환된알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C3-6 치환된사이클로알킬-Q2, -C1-6 알킬-Q2, -C1-6 알킬-치환된알킬-Q2, C3-6 사이클로알킬-Q2, 아릴-Q2, -NR13R14, 및 -OR15의 군으로부터 선택되고;
이 때 Q2는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3, 및 -CONHSO2NR2R2의 군으로부터 선택되며;
R7은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -CF3, 아릴, 및 헤테로아릴의 군으로부터 선택되고;
R8 및 R9는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, -C1-6 알킬-Q2, 및 -COOR3의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
R8 및 R9는 인접한 N과 함께 취해져
Figure pct00010
의 군으로부터 선택되는 고리를 형성하고;
M은 -R16, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH 및 -NR2R12의 군으로부터 선택되고;
V는 -CR10R11-, -SO2-, -O- 및 -NR12-의 군으로부터 선택되고;
단, R8 또는 R9 중 하나만이 -COOR3일 수 있으며;
R10 및 R11은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬 및 -C3-6 사이클로알킬의 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R12는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬, -CONR2R2, -SO2R3, -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
R13 및 R14는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3, C1-6 치환된 알킬-Q3 및
Figure pct00011
의 군으로부터 독립적으로 선택되고,
Q3은 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, 및 -SO2R3의 군으로부터 선택되고;
R15는 -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3 및 -C1-6 치환된 알킬-Q3의 군으로부터 선택되고;
R16은 -H, -C1-6 알킬, -NR2R2, 및 -COOR2의 군으로부터 선택되고;
단, V가 -NR12-일 때, R16은 -NR2R2일 수 없고;
R17은 -H, -C1-6 알킬, -COOR3, 및 아릴의 군으로부터 선택된다.
보다 바람직한 화합물은 R1이 이소프로페닐인 것들을 포함한다.
W가 부재하는 화합물이 또한 바람직하다.
다른 바람직한 화합물은 X가 C4-8 사이클로알케닐, 및 보다 바람직하게는, C6 사이클로알케닐인 것들을 포함한다.
또한, 화학식 I의 화합물은 A가 C1-C3 알킬-할로, 및 보다 바람직하게는 메틸-할로, 및 보다 바람직하게는 메틸-플루오로인 것이 바람직하다.
A가 치환기 X 상에서 파라-치환된 화합물이 또한 바람직하다.
Y가 -COOR2, 및 보다 바람직하게는 -COOH인 화학식 I의 화합물의 또한 바람직하다. 특정 구체예에서, Y가 -COOH이고 A가 메틸-플루오로인 것이 또한 바람직하다.
Y가 파라 위치에 있는 화학식 I의 화합물이 또한 바람직하다.
추가로 치환기 A 및 치환기 Y 둘 모두가 치환기 X; 보다 바람직하게는, 치환기 X의 -파라 위치 상에 동일한 부착 위치를 공유하는 화학식 I의 화합물이 바람직하다.
많은 구체예에서, R4가 C1-6알킬-Q1이고, Q1이 -NR8R9인 것이 또한 바람직하다.
일부 구체예에서, R4가 -C1-6알킬-C3-6사이클로알킬인 것이 바람직하다.
특정 구체예에서, R5가 C1-6알킬-NR8R9인 것이 또한 바람직하다.
여러 번 상기 개시된 바와 같이 -NR8R9가 고리 구조를 형성하는 것이 또한 바람직하다.
약학적으로 허용되는 염을 포함하는 바람직한 화합물은, 본 발명의 일부로서 하기를 포함한다:
Figure pct00012
Figure pct00013
Figure pct00014
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Figure pct00023
Figure pct00024
Figure pct00025
Figure pct00026
약학적으로 허용되는 염을 포함하는 바람직한 화합물은, 본 발명의 일부로서 하기를 포함한다:
Figure pct00027
상기 화합물은 부분입체이성질체의 혼합물, 및 두 개별적인 부분입체이성질체를 나타낸다. 특정 구체예에서, 특수한 부분입체이성질체 중 하나가 특히 바람직할 수 있다.
상기 기재된 모든 다양한 구체예에 따른 본 발명의 화합물은 당업자에게 이용가능한 무독성의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제를 함유하는 투여 단위 제형으로, 경구, 비경구 (피하 주입, 정맥내, 근내, 흉골내 주사 또는 주입 기법 포함), 흡입 분무에 의해, 또는 직장으로, 및 다른 수단에 의해 투여될 수 있다. 하나 이상의 애쥬번트가 또한 포함될 수 있다.
따라서, 본 발명에 따르면, HIV 감염과 같은 바이러스 감염 및 AIDS를 치료하기 위한, 치료 방법 및 약학적 조성물이 추가로 제공된다. 치료는 항바이러스 유효량의 하나 이상의 화학식 I의 화합물을, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제와 함께 함유하는 약학적 조성물을 그러한 치료를 필요로 하는 환자에 투여하는 것을 포함한다. 본원에서 사용되는 용어 "항바이러스 유효량"은 의미있는 환자 혜택을 나타내는, 즉 HIV 감염의 억제를 특징으로 하는 급성 질환의 억제, 완화 또는 치유를 나타내기에 충분한 조성물 및 방법의 각각의 활성 성분의 총 양을 의미한다. 상기 용어는 단독으로 투여되는 개개 활성 성분에 적용되는 경우, 그 단독 성분을 나타낸다. 조합물에 적용되는 경우, 상기 용어는, 함께, 순차적으로 또는 동시에 투여되든지 간에, 치료 효과를 발생시키는 활성 성분의 조합된 양을 나타낸다. 본원 및 청구항에서 사용되는 용어 "치료하다, 치료하는, 치료"는 HIV 감염과 관련된 질병 및 질환을 예방, 억제, 완화 및/또는 치유하는 것을 의미한다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여가능한 현탁액 또는 정제; 뿐만 아니라 비내 스프레이, 멸균 주사가능한 제조물, 예를 들어, 멸균 주사가능한 수성 또는 유성 현탁액 또는 좌제의 형태일 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제는 약학적 조성물에 활용될 수 있고, 약학적 제조물의 분야에서 활용되는 것들이다.
현탁액으로서 경구 투여될 때, 이러한 조성물은 약학적 제형의 분야에 전형적으로 공지된 기법에 따라 제조되고, 현탁제로서 벌크 부여용 미세결정질 셀룰로스, 알긴산 또는 소듐 알기네이트, 점도 향상제로서 메틸셀룰로스, 및 당 분야에 공지된 감미제/풍미제를 함유할 수 있다. 이러한 조성물은, 즉방출 정제로서, 당 분야에 공지된 미세결정질 셀룰로스, 디칼슘 포스페이트, 전분, 마그네슘 스테아레이트 및 락토스 및/또는 다른 부형제, 결합제, 증량제, 붕해제, 희석제, 및 윤활제를 함유할 수 있다.
주사가능한 용액 및 현탁액은 적합한 무독성의, 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매, 예컨대, 만니톨, 1,3-부탄디올, 물, 링거액 또는 등장성 소듐 클로라이드 용액, 또는 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제, 예컨대 멸균, 순한(bland), 고정 오일, 예를 들어 합성 모노- 또는 디글리세라이드, 및 지방산, 예를 들어 올레산을 이용하여, 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다.
본원에 개시된 화합물은, 일반적으로 수 일, 수 주, 수 개월, 또는 심지어 수 년과 같은 연장된 기간에 걸쳐, 분할된 용량으로 약 1 내지 100 mg/체중 kg의 투여량 범위로 인간에 경구 투여될 수 있다. 한 바람직한 투여량 범위는 경구에 의한 분할된 용량으로 약 1 내지 10 mg/체중 kg이다. 또 다른 바람직한 투여량 범위는 분할된 용량으로 약 1 내지 20 mg/체중 kg이다. 그러나, 임의의 특정 환자에 대한 특이적인 용량 수준 및 투여 빈도는 달라질 수 있고 적용된 특수한 화합물의 활성, 대사 안정성 및 그 화합물의 작용 길이, 연령, 체중, 일반적인 건강상태, 성별, 식이, 투여 방식 및 시간, 배출 속도, 약물 조합물, 특정 질환의 중증도, 및 숙주가 받고 있는 치료를 포함하는 다양한 인자에 의존적임이 이해될 것이다.
AIDS의 치료에 유용한 하나 이상의 다른 작용제와 함께, 본원에 개시된 화학식 I의 화합물의 조합물이 또한 본원에서 고려된다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은, 노출-전 및/또는 노출-후 기간이든지 간에, 유효량의 AIDS 항바이러스제, 면역조절제, 항감염제, 또는 백신, 예컨대 하기 비제한적인 표의 것들과 함께 효과적으로 투여될 수 있다:
Figure pct00028
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Figure pct00039
Figure pct00040
추가로, 본원에 개시된 발명의 화합물은 HIV 진입 억제제와 함께 이용될 수 있다. 그러한 HIV 진입 억제제의 예는 문헌[DRUGS OF THE FUTURE 1999, 24(12), pp. 1355-1362; CELL, Vol. 9, pp. 243-246, Oct. 29, 1999; and DRUG DISCOVERY TODAY, Vol. 5, No. 5, May 2000, pp. 183-194 and Inhibitors of the entry of HIV into host cells. Meanwell, Nicholas A.; Kadow, John F., Current Opinion in Drug Discovery & Development (2003), 6(4), 451-461]에서 논의된다. 구체적으로 화합물은 부착 억제제, 융합 억제제, 및 CCR5 또는 CXCR4 공동수용체 중 어느 하나를 목표로 한 케모카인 수용체 길항제와 함께 이용될 수 있다. HIV 부착 억제제는 또한 US 7,354,924 및 US 7,745,625에 개시되어 있다.
본 출원의 화합물과 AIDS 항바이러스제, 면역조절제, 항감염제, HIV 진입 억제제 또는 백신의 조합물의 범위는 상기 표의 목록으로 제한되지 않으며, 원칙적으로, AIDS의 치료에 유용한 임의의 약학적 조성물과의 임의의 조합물을 포함함이 이해될 것이다.
바람직한 조합물은 본 발명의 화합물 및 HIV 프로테아제의 억제제 및/또는 HIV 역전사효소의 비-뉴클레오시드 억제제에 의한 동시적 또는 교대적 치료이다. 조합물에서의 선택적 네 번째 성분은 HIV 역전사효소의 뉴클레오시드 억제제, 예컨대 AZT, 3TC, ddC 또는 ddI이다. HIV 프로테아제의 바람직한 억제제는 REYATAZ® (활성 성분 아타자나버)이다. 전형적으로, 300 내지 600 mg의 용량이 하루에 한 번 투여된다. 이는 저 용량의 리토나버 (50 내지 500mg)와 함께 공동-투여될 수 있다. 또 다른 바람직한 HIV 프로테아제의 억제제는 KALETRA®이다. 또 다른 유용항 HIV 프로테아제의 억제제는 인디나버이고, 이는 N-(2(R)-하이드록시-1-(S)-인다닐)-2(R)-페닐메틸-4-(S)-하이드록시-5-(1-(4-(3-피리딜-메틸)-2(S)-N'-(t-부틸카르복사미도)-피페라지닐))-펜탄아미드 에탄올레이트의 설페이트 염이며, U.S. 5,413,999에 따라 합성된다. 인디나버는 일반적으로 800 mg의 투여량으로 하루에 3번 투여된다. 다른 바람직한 프로테아제 억제제는 넬피나버 및 리토나버이다. 또 다른 바람직한 HIV 프로테아제의 억제제는 600 또는 1200 mg tid의 투여량으로 투여되는 사퀴나버이다. 바람직한 HIV 역젼사효소의 비-뉴클레오시드 억제제는 에파비렌즈를 포함한다. 이러한 조합물은 HIV 감염의 확산 및 정도를 제한하는데 예상치 못한 효과를 지닐 수 있다. 바람직한 조합물은 다음 (1) 에파비렌즈, 및 임의로, AZT 및/또는 3TC 및/또는 ddI 및/또는 ddC와 함께 인디나버; (2) 인디나버, 및 임의의 AZT 및/또는 ddI 및/또는 ddC 및/또는 3TC, 특히 인디나버 및 AZT 및 3TC; (3) 스타부딘 및 3TC 및/또는 지도부딘; (4) 테노포버 디소프록실 푸마레이트 염 및 엠트리시타빈을 지닌 것들을 포함한다.
그러한 조합물에서, 본 발명의 화합물 및 다른 활성 작용제는 별도로 또는 함께 투여될 수 있다. 또한, 한 엘리먼트의 투여는 다른 작용제(들)의 투여 전, 동시, 또는 후에 올 수 있다.
일반 화학 (합성 방법)
본 발명은 화학식 I의 화합물, 이들의 약학적 제형, 및 HIV 감염으로 고통받거나 만감한 환자에서의 이들의 용도를 포함한다. 화학식 I의 화합물은 또한 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함한다. 화학식 I의 화합물 및 이들의 합성에 유용한 중간체를 구성하기 위한 일반적 절차는 하기 반응식 (약어 이후)에 개시된다.
약어
대부분이 당업자에게 널리 공지된 통상적인 약어인 하기 약어들 중 하나 이상은 명세어 및 실시예의 설명을 통틀어 이용될 수 있다:
RT = 실온
BHT = 2,6-디-3차-부틸-4-하이드록시톨루엔
CSA = 캄포르설폰산
LDA = 리튬 디이소프로필아미드
KHMDS = 포타슘 비스(트리메틸실릴)아미드
SFC = 초임계 유체 크로마토그래피
Quant = 정량적
TBDMS = 3차-부틸디메틸실란
PTFE = 폴리테트라플루오로에틸렌
NMO = 4-메틸모르폴린-N-옥사이드
THF = 테트라하이드로푸란
TLC = 박막 크로마토그래피
DCM = 디클로로메탄
DCE = 디클로로에탄
TFA = 트리플루오로아세트산
LCMS = 액체 크로마토그래피 질량 분광학
Prep = 예비
HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피
DAST = (디에틸아미노)설퍼 트리플루오라이드
TEA = 트리에틸아민
DIPEA = N,N-디이소프로필에틸아민
HATU = [O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트]
DCC = N,N'-디사이클로헥실카르보디이미드
DMAP = 디메틸아미노피리딘
TMS = 트리메틸실릴
NMR = 핵 자기 공명
DPPA = 디페닐 포스포릴 아지드
AIBN = 아조비스이소부티로니트릴
TBAF = 테트라부틸암모늄 플루오라이드
DMF = 디메틸포름아미드
TBTU = O-(벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트
Min(s) = 분(들)
h = 시간(들)
sat. = 포화
TEA = 트리에틸아민
EtOAc = 에틸 아세테이트
TFA = 트리플루오로아세트산
PCC = 피리디늄 클로로크로메이트
TLC = 박막 크로마토그래피
Tf2NPh = (트리플루오로메틸설포닐)메탄설폰아미드
디옥산 = 1,4-디옥산
PG = 보호기
atm = 기압(들)
mol = 몰(들)
mmol= 밀리몰(들)
mg = 밀리그램(들)
μg = 마이크로그램(들)
μl = 마이크로리터(들)
μm= 마이크로미터(들)
mm= 밀리미터(들)
용어 "C-3" 및 "C-28"은 IUPAC 규칙에 따라 넘버링된 트리테르펜 중심의 특정 위치를 나타낸다 (예시적인 트리테르펜: 베툴린과 관련하여 하기 묘사된 위치):
Figure pct00041
반응식 및 방법의 일반적 설명에서 화합물 시리즈를 언급할 때 동일한 넘버링이 유지된다.
Figure pct00042
화학식 I의 화합물의 제조 일반적 화학 반응식:
화학식 I의 화합물은 하기 반응식에 기재된 화학에 의해 시판되는 (Aldrich, 기타) 베툴린산으로부터 제조될 수 있다.
일반적 반응식은 다음과 같이 개시된다:
Figure pct00043
화학식 I의 화합물은 반응식 1에 기재된 대로 베툴린산으로부터 제조될 수 있다. 베툴린산의 커티스(Curtis) 재배열을 C-3 하이드록실기의 보호 없이 수행하여 산 가수분해시 C-17 아민을 제공하는 C-17 이소시아네이트가 되게 한다. 그 후 C-17 아민을 아민 보호기 (즉, F-moc, Boc)로 선택적으로 보호한 다음 표준 조건 (즉, PCC, Dess-Martin 시약 등) 하에 C-3 하이드록시기에서 케톤으로의 산화를 수행한다. 케톤의 이의 트리플레이트로의 전환은 당업자에게 공지된 방법에 의해 달성될 수 있다. 그 후 아미노기의 보호기를 제거하여 C-17 비치환된 아민을 생성한다. C-3 모이어티의 설치는 상기 기재된 대로 트리플레이트와 상응하는 보론산의 Suzuki 커플링을 통해 달성된다. 대안적으로, 상응하는 보론산과의 트리플레이트 커플링은 C-17 아민의 탈보호 전에 수행될 수 있다. 일단 탈보호되면, C-17 아미노기는 이어서 알킬화, 환원성 아민화, 아실화 등과 같은 당업자에게 공지된 방법에 의해 추가로 유도체화될 수 있다. 이러한 방법 중 일부가 하기 반응식에 기재되어 있다 (반응식 2-7). 일부 경우에, 보호기로 작용기화될 수 있는 임의의 작용기를 드러내기 위한 추가 단계가 요구된다 (즉, Y가 COOH일 때, 이는 이 마지막 단계까지 상응하는 에스테르 COOR로서 항상 차폐된다).
C-17 일차 아민은 당업자에게 공지된 표준 방법을 이용하여 추가로 변형될 수 있다. 일부 실시예는 하기 반응식에 도시된다.
Figure pct00044
카르복실산을 HATU, DCC, 및 당업자에게 공지된 다른 것들과 같은 적당한 커플링 시약의 존재하에, Hunig's 염기, TEA 등과 같은 염기의 존재하에, 적절한 용매 (DCM, THF, DMF 등)에서 C-17 일차 아민과 반응시켜 C-17 아미드를 제조할 수 있다. 카르복실산 에스테르의 가수분해로 벤조산을 수득한다. 대안적으로, 일부 아미드는 C-17 일차 아민을 산 대신 상응하는 카르복실산 클로라이드 시약으로 처리함에 의해 제조될 수 있다. 유사하게, 설폰아민 및 설폰아미드는 설포닐화제로서 설포닐 클로라이드를 이용함에 의해 C-17 일차 아민으로부터 제조될 수 있다.
Figure pct00045
C-17 우레아는 상응하는 카르바모일 클로라이드 또는 이소시아네이트를 Hunig's 염기, TEA 등과 같은 염기의 존재하에, 적절한 용매 (DCM, THF, DMF 등)에서 반응시킴에 의해 제조될 수 있다. C-17 카르바메이트는 카르바모일 클로라이드 대신 클로로포르메이트를 이용하여 유사한 방식으로 제조될 수 있다.
Figure pct00046
C-17 일차 아민은 환원성 아민화 조건 (예컨대, AcOH/NaOAc 또는 Ti(OPr)4의 존재 하에 THF, 1,4-디옥산, DCE 또는 DCM과 같은 용매에서 NaBH(OAc)3) 하에 알데하이드로 처리되어 C-17 이차 아민을 제공할 수 있다.
Figure pct00047
일부 C-17 아민은 염기의 존재 하에 알킬화제 (R-LG)에 의한 C-17 일차 아민의 알킬화에 의해 제조될 수 있고, 여기서 LG는 비제한적으로 Br, Cl, I, 메실레이트, 토실레이트 또는 트리플레이트와 같은 이탈기이다. 일부 경우에 가열이 요구될 수 있다. 카르복실산 에스테르의 가수분해는 벤조산 생성물을 제공한다.
Figure pct00048
일부 경우에, 반응 시간을 연장하고 반응 혼합물을 가열시킴에 의해, 디알킬화 생성물이 또한 형성될 수 있다.
Figure pct00049
대안적으로, 일부 C-17 아민은 Michael 수용체에 1,4-첨가에 의해 제조될 수 있다.
치환기 R, R' 및 R"은 당업자에게 공지된 방법에 의해 추가로 변형될 수 있는 작용기 (즉, COOH, COOR, OH, NHR)를 함유할 수 있다. 변형은 작용기의 특성에 따라 카르복실산의 최종 탈보호가 수행되기 전 또는 후에 수행될 수 있다.
대안적으로, C-17 이차 아민은 상기 기재된 일부 방법 또는 당업자에게 공지된 다른 표준 방법을 이용하여 추가로 변형될 수 있다 (즉, 알킬화, 아실화, 설포닐화 등).
실시예
하기 실시예는 상기에 일반적으로 기재된 화학식 I의 화합물의 전형적인 합성을 예시한다. 이러한 실시예는 단지 예시적인 것이며, 어떠한 방식으로든 기재를 제한하려는 것이 아니다. 시약 및 출발 물질은 당업자에게 용이하게 이용가능하다.
화학
전형적인 절차 및 선택된 실시예의 특성규명:
달리 언급되지 않는 한, 용매 및 시약은 상업적 공급원에서 획득한 대로 직접 이용하였고, 반응은 질소 대기 하에 수행되었다. 플래쉬 크로마토그래피는 실리카겔 60 (0.040-0.063 입자 크기; EM Science supply) 상에서 수행되었다. 1H NMR 스펙트럼은 500 MHz에서 Bruker DRX-500f 상에 기록되었다 (또는 언급된 대로 Bruker AV 400 MHz, Bruker DPX-300B 또는 300 MHz에서 Varian Gemini 300). 화학적 이동은 dTMS = 0에 비해 d 규모로 ppm으로 보고되었다. 하기 내부 참조는 다음 용매에 잔류하는 양성자에 대해 사용되었다: CDCl3 (dH 7.26), CD3OD (dH 3.30), acetic-d4 (아세트산 d 4 ) (dH 11.6, 2.07), DMSO mix 또는 DMSO-D6-CDCl3 (dH 2.50 및 8.25) (비 75%:25%), 및 DMSO-D6 (dH 2.50). 다중도 패턴을 기재하기 위해 표준 두문자어가 이용되었다: s (singlet), br. s (broad singlet), d (doublet), t (triplet), q (quartet), m (multiplet), b (broad), app (apparent). 커플링 상수 (J)는 헤르츠이다. 모든 액체 크로마토그래피 (LC) 데이터는 전기분무 모드에서 LC에 대한 Micromass Platform을 이용하여 측정된 질량 분광학 (MS) 데이터로 SPD-10AV UV-Vis 검출기를 이용하여 Shimadzu LC-10AS 액체 크로마토그래피 상에 기록되었다.
섹션 1
LC/MS 방법
방법 1
2분 동안 출발%B = 0, 최종%B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = 1 mL/min
파장 = 220 nm
용매 A = 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼 = Phenomenex Luna C18, 3 μm, 2.0 x 30 mm
방법 2
4분 동안 출발%B = 0, 최종%B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = 0.8 mL/min
파장 = 220 nm
용매 A = 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼 = Phenomenex Luna C18, 3 μm, 2.0 x 50 mm
방법 3
2분 동안 출발%B = 0, 최종%B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = 1 mL/min
파장 = 220 nm
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Phenomenex Luna C18, 3 μm, 2.0 x 30 mm
방법 4
2분 동안 출발%B = 20, 최종%B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = 0.8 mL/min
파장 = 220 nm
용매 A = 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl, 2.5 μm, 2.1 x 50 mm
방법 5
출발% B = 20, 최종% B = 100, 구배 시간 = 1.5 min
유량 = 0.8 mL/min
파장 = 220
용매 A = 10% MeOH - 90% 물 - 0.1% TFA
용매 B = 90% MeOH - 10% 물 - 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5μm
방법 6
1.5분 동안 출발%B = 2, 최종%B = 98 구배, 98%B에서 유지
유량 = 0.8 mL/min
파장 = 220 nm
용매 A = 100% 물, 0.05%TFA
용매 B = 100% 아세토니트릴, 0.05% TFA
컬럼 = Waters Aquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm
방법 7
출발% B = 20, 최종% B = 100, 구배 시간 = 3 min
유량 = 0.6 mL/min
파장 = 220
용매 A = 10% MeOH - 90% 물 - 0.1% TFA
용매 B = 90% MeOH - 10% 물 - 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5 μm
방법 8
출발% B = 20, 최종% B = 100, 구배 시간 = 2 min
유량 = 0.6 mL/min
파장 = 220
용매 A = 10% MeOH - 90% 물 - 0.1% TFA
용매 B = 90% MeOH - 10% 물 - 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5 μm
방법 9
2분 동안 출발%B = 0, 최종%B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = 0.6 mL/min
파장 = 220 nm
용매 A = 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼 = Xbridge Phenyl, 2.5 μm, 2.1 x 50 mm
방법 10
4분 동안 출발% B = 30, 최종% B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = .8 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 -메탄올-0.1% TFA
용매 A = 90% 물 -10% 메탄올-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 메탄올-0.1% TFA
컬럼 2 = (2) PHENOMENEX-LUNA 2.0 X 50mm 3 μm
방법 11
4분 동안 출발% B = 40, 최종% B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = .8 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 아세토니트릴:물: 10mM 암모늄 아세테이트
용매 A = 5% 아세토니트릴:95% 물: 10mM 암모늄 아세테이트
용매 B = 95% 아세토니트릴:5% 물: 10mM 암모늄 아세테이트
컬럼 2 = 2.) PHENOMENEX-LUNA 2.0 x 50mm 3 μm
방법 12
4분 동안 출발% B = 20, 최종% B = 100 구배, 100%B에서 유지
유량 = .8 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 아세토니트릴:물: 10mM 암모늄 아세테이트
용매 A = 5% 아세토니트릴:95% 물: 10mM 암모늄 아세테이트
용매 B = 95% 아세토니트릴:5% 물: 10mM 암모늄 아세테이트
컬럼 2 = 2.) PHENOMENEX-LUNA 2.0 x 50mm 3 μm
SFC 방법:
방법 1
기계 = SFC Thar 350/A5
유량 = 220 mL/min
파장 = 220 nm
이동상 = CO2/[헵탄/IPA = 4:1 (v:v)] = 80/20 동용매
컬럼 = Whelko(rr) 50 x 5 cm, 10 μm
주입 부피 = 1.0 mL [용질 농도 = 100 mg/mL의 헵탄/IPA 4:1 (v:v)]
주입 프로그램: 누적 주입(Stacked injections)(2분마다 1.0 mL)
Prep HPLC 방법:
Prep HPLC 방법 1
16분 동안 출발%B = 30, 최종%B = 67 구배, 10분 동안 단계적으로 100%B
유량 = 100 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 50 x 250 mm
Prep HPLC 방법 2
20분 동안 출발%B = 0, 최종%B = 100 구배, 4분 동안 100%B 유지
유량 = 50 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl, 5 μm, 30 x 100 mm
Prep HPLC 방법 3
20분 동안 출발%B = 15, 최종%B = 100 구배, 4분 동안 100%B 유지
유량 = 50 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl, 5 μm, 30 x 100 mm
Prep HPLC 방법 4
20분 동안 출발%B = 20, 최종%B = 100 구배, 5분 동안 100%B 유지
유량 = 50 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 5
15분 동안 출발%B = 30, 최종%B = 100 구배, 5분 동안 100%B 유지
유량 = 20 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Xbridge Phenyl, 5 μm, 19 x 250 mm
Prep HPLC 방법 6
20분 동안 출발%B = 20, 최종%B = 65 구배, 5분 동안 단계적으로 100%B
유량 = 50 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 7
30분 동안 출발%B = 20, 최종%B = 100 구배, 4분 동안 100%B 유지
유량 = 50 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 8
18분 동안 출발%B = 30, 최종%B = 100 구배, 2분 동안 100%B 유지
유량 = 25 mL/min
ELSD에 의한 수집
용매 A = 95% 물, 5% 아세토니트릴, 10 mM 암모늄 아세테이트
용매 B = 5% 물, 95% 아세토니트릴, 10 mM 암모늄 아세테이트
컬럼 = XBridge OBD Prep 실드 RP18 19x100 mm 5 μm
Prep HPLC 방법 9
10분 동안 출발%B = 10, 최종%B = 100 구배, 5분 동안 100%B 유지
유량 = 50 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 100 mm
Prep HPLC 방법 10
10분 동안 출발%B = 10, 최종%B = 100 구배, 5분 동안 100%B 유지
유량 = 50 mL/min
용매 A = 95% 물, 5% 아세토니트릴, 10mM 암모늄 아세테이트
용매 B =5% 물, 95% 아세토니트릴, 10mM 암모늄 아세테이트
컬럼 = Xbridge OBD Prep 실드 RP, 5 μm, 19 x 100mm
Prep HPLC 방법 11
15분 동안 출발%B = 25, 최종%B = 100 구배, 100%B 유지
유량 = 40 mL/min
용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA
용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 100 mm
Prep HPLC 방법 12
15분 동안 출발% B = 20, 최종% B = 100 구배, 4분 동안 100% B에서 유지
유량 = 50 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 - 아세토니트릴- TFA
용매 A = 90% 물 -10% 아세토니트릴-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 아세토니트릴-0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 13
15분 동안 출발% B = 30, 최종% B = 100 구배, 15분 동안 100% B에서 유지
유량 = 50 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 - 아세토니트릴- TFA
용매 A = 90% 물 -10% 아세토니트릴-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 아세토니트릴-0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 14
20분 동안 출발% B = 30, 최종% B = 100 구배, 6분 동안 100% B에서 유지
유량 = 50 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 - 아세토니트릴- TFA
용매 A = 90% 물 -10% 아세토니트릴-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 아세토니트릴-0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 15
15분 동안 출발% B = 30, 최종% B = 100 구배, 5분 동안 100% B에서 유지
유량 = 50 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 - 아세토니트릴- TFA
용매 A = 90% 물 -10% 아세토니트릴-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 아세토니트릴-0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 16
10분 동안 출발% B = 20, 최종% B = 100 구배, 4분 동안 100% B에서 유지
유량 = 50 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 - 아세토니트릴- TFA
용매 A = 90% 물 -10% 아세토니트릴-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 아세토니트릴-0.1% TFA
컬럼 = Waters Sunfire C18, 5 μm, 30 x 150 mm
Prep HPLC 방법 17
30분 동안 출발% B = 30, 최종% B = 50 구배, 5분 동안 50% B에서 유지
유량 = 25 ml/min
파장 = 220
용매 쌍 = 물 - 아세토니트릴- TFA
용매 A = 90% 물 -10% 아세토니트릴-0.1% TFA
용매 B = 10% 물 -90% 아세토니트릴-0.1% TFA
컬럼 = YMC-OBD 20X100 mm S5
에틸 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00050
단계 1. 에틸 1-(하이드록시메틸)-4-((트리메틸실릴)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00051
톨루엔 (100 mL) 중 에틸 2-(하이드록시메틸)아크릴레이트 (5.21 g, 40 mmol) 및 (부타-1,3-디엔-2-일옥시)트리메틸실란 (8.54 g, 60.0 mmol)의 용액을 질소로 플러싱하고, 밀봉하고, 압력 플라스크에서 150℃로 48 h 동안 가열시켰다. 생성된 밝은 황색 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 오일로서 수득하였고, 이것을 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. MS: m/e 201.05 (M+H-실릴)+, 0.839 min (빙밥 4).
단계 2. 에틸 1-(하이드록시메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트의 제조
Figure pct00052
THF (5 mL) 중 에틸 1-(하이드록시메틸)-4-((트리메틸실릴)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (10.9 g, 40.0 mmol)의 용액애 HCl (0.005N) (1 mL, 5.00 μmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 18 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고 (2 x 10 mL), 포화된 수성 NaHCO3 (5 mL)에 이어 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 에틸 아세테이트/헥산을 이용하여 정제시켜 표제 화합물을 무색 오일 (3 g, 37.4%)로서 수득하였다. MS: m/e 200.95 (M+H)+, 0.853 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.28 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.75 (s, 2H), 2.57 - 2.45 (m, 2H), 2.45 - 2.33 (m, 4H), 1.86 - 1.71 (m, 2H), 1.39 - 1.30 (m, 3H).
단계 3. 에틸 4-옥소-1-((((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)메틸)사이클로헥산카르복실레이트의 제조
Figure pct00053
DCM (10 mL) 중 에틸 1-(하이드록시메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트 (1,170 mg, 5.84 mmol) 및 피리딘 (0.614 mL, 7.60 mmol)의 교반된 혼합물에 -10℃에서 트리플루오로메탄설폰산 무수물 (7.60 mL, 7.60 mmol)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반시키고 얼음 냉각된 1N HCl 용액 및 염수로 세척하였다. 분리된 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시켰다. 용매를 제거하고 잔류물을 정제 없이 그대로 이용하였다. MS: m/e 333.05 (M+H)+, 1.969 min (방법 4).
단계 4. 에틸 1-(플루오로메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트의 제조
Figure pct00054
DCM (10 mL) 중 에틸 4-옥소-1-((((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)메틸)사이클로헥산카르복실레이트 (1.941 g, 5.84 mmol)의 교반된 혼합물에 25℃에서 테트라부틸암모늄 바이플루오라이드 (3.63 mL, 7.01 mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 50 mL의 헥산에서 수득된 잔류물 교반시 2개 층이 형성되었다. 상부층을 플라스크에 디캔팅하고 진공 하에 건조시켜 무색 오일을 수득하였다. 이 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 12 g 실리카겔 컬럼 및 헥산 중 0-35% EtOAc 구배를 이용하여 정제시켜 표제 화합물을 무색 오일 (0.20g, 9.0%)로서 수득하였다. MS: m/e 203.15 (M+H)+, 1.470 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.49 - 4.30 (m, 2H), 4.25 - 4.11 (m, 2H), 2.50 - 2.35 (m, 4H), 2.33 - 2.20 (m, 2H), 1.80 - 1.64 (m, 2H), 1.30 - 1.20 (m, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -223.02 - -225.00 (m, 1F).
단계 5. 에틸 1-(플루오로메틸)-4-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00055
KHMDS (1.27 ml, 1.27 mmol)를 THF (20 mL) 중 에틸 1-(플루오로메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트 (0.20 g, 0.98 mmol) 및 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)설포닐)메탄설폰아미드 (0.38 g, 1.07 mmol)의 담황색 용액에 -78℃에서 첨가하였다. 생성된 황색 용액을 -78℃에서 2 hr 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화된 수성 암모늄 클로라이드로 켄칭시키고 10 mL의 EtOAc로 1회 추출하였다. 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 12g 실리카겔 컬럼 및 헥산 중 0-10% EtOAc 구배를 이용하여 정제시켜 표제 화합물을 무색 오일 (179 mg, 54.7%)로서 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.84 - 5.69 (m, 1H), 4.60 - 4.37 (m, 2H), 4.30 - 4.15 (m, 2H), 2.89 - 2.70 (m, 1H), 2.56 - 2.33 (m, 2H), 2.32 - 2.14 (m, 2H), 2.07 - 1.81 (m, 1H), 1.34 - 1.22 (m, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.18 - -225.70 (m, 1F).
단계 6. 에틸 1-(플루오로메틸)-4-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.179 g, 0.53 mmol)를 함유하는 플라스크에 비스(피나콜라토)디보론 (0.143 g, 0.56 mmol), 포타슘 아세테이트 (0.156 g, 1.59 mmol), 및 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센팔라듐(II) 디클로라이드 (0.013 g, 0.016 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 디옥산 (8 mL)으로 희석시키고, 질소로 플러싱하고, 70℃로 5 h 동안 가열시켰다. rt으로 냉각시, 혼합물을 물 (25 mL)로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다 (2 x 20 mL). 합친 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 12 g Isco 실리카겔 컬럼 및 헥산 중 0-10% EtOAc 구배를 이용하여 정제시켰다. 예상 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 투명한 무색 오일 (91 mg, 54%)로서 수득하였다. MS: m/e 313.20 (M+H)+, 2.299 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 6.50 (td, J=3.9, 2.0 Hz, 1H), 4.59 - 4.32 (m, 2H), 4.23 - 4.13 (m, 2H), 2.74 - 2.52 (m, 1H), 2.30 - 2.08 (m, 3H), 1.98 - 1.69 (m, 2H), 1.32 - 1.20 (m, 15H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.59 - -226.36 (m, 1F) .
에틸 1-(플루오로메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트의 제조를 위한 대안적인 제조 방법
Figure pct00056
단계 1. 에틸 2-(플루오로메틸)아크릴레이트의 제조
Figure pct00057
DCM (50 mL) 중 에틸 2-(하이드록시메틸)아크릴레이트 (5 g, 38.4 mmol)의 용액에 -78℃에서 DAST (6.60 mL, 49.9 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 25℃로 가온시키고 추가 3시간 동안 연속하여 교반시켰다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (20 mL) 및 NaHCO3 포화 수용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 유기층을 분리시키고, 수성층을 CH2Cl2 (20 mL)로 2회 추출하였다. 합친 유기 추출물을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 증발시켜 잔류 오일을 수득하였고, 이를 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 6.49 - 6.33 (m, 1H), 6.03 - 5.87 (m, 1H), 6.45 - 5.84 (m, 2H), 4.27 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.33 (t, J=7.1 Hz, 3H). 19F NMR (470MHz, 클로로포름-d) δ -220.33 - -221.86 (m, 1F).
단계 2. 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((트리메틸실릴)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00058
톨루엔 (100 mL) 중 에틸 2-(플루오로메틸)아크릴레이트 (4.7 g, 35.6 mmol)) 및 (부타-1,3-디엔-2-일옥시)트리메틸실란 (10.12 g, 71.1 mmol)의 용액을 질소로 플러싱하고, 밀봉하고, 압력 용기에서 150℃로 48 h 동안 가열시켰다. 생성된 담황색 용액을 실온으로 냉각시키고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 오일로서 수득하였고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.83 (t, J=3.3 Hz, 1H), 4.64 - 4.38 (m, 2H), 4.25 - 4.12 (m, 2H), 2.62 - 2.48 (m, 1H), 2.19 - 1.99 (m, 4H), 1.93 - 1.78 (m, 1H), 1.34 - 1.22 (m, 3H), 0.24 - 0.15 (m, 9H). 19F NMR (470MHz, 클로로포름-d) δ -224.80 - -225.37 (m, 1F).
단계 3. 에틸 1-(플루오로메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트의 제조
Figure pct00059
THF (5 ml) 중 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((트리메틸실릴)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (9.76 g, 35.6 mmol)의 용액에 HCl (0.005N) (1 mL, 5.00 μmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고 (2 x 10 mL), 수성 포화 NaHCO3 (5 mL)에 이어 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 80 g 실리카겔 컬럼 및 헥산 중 0-25% EtOAc 구배를 이용하여 정제시켰다. 예상 생성물을 함유하는 분획을 수집하고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일 (6.5g, 90.2%)로서 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.59 - 4.42 (m, 2H), 4.30 (q, J=7.0 Hz, 2H), 2.58 - 2.34 (m, 6H), 1.88 - 1.73 (m, 2H), 1.33 (t, J=7.2 Hz, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -223.54 - -223.99 (m, 1F).
벤질 1-(플루오로메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트의 제조
방법 A.
Figure pct00060
단계 1. 에틸 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00061
3L, 3목 둥근 바닥 플라스크에 에틸 4-옥소사이클로헥산카르복실레이트 (100 g, 570 mmol), 에탄-1,2-디올 (0.159 L, 2849 mmol), ((1S,4R)-7,7-디메틸-2-옥소바이사이클로[2.2.1]헵탄-1-일)메탄설폰산 (1.324 g, 5.70 mmol) 및 건조 톨루엔 (1.2 L)을 담았다. Dean-Stark 워터 트랩 및 응축기를 설치하고, 혼합물을 교반시키며 환류로 가열시켰다. 비혼합성 증류액을 Dean-Stark 트랩에 수집하고, 주기적으로 제거하였다. 28 h의 전체 환류 시간 후, 총 82 mL의 비혼합성 증류액을 Dean-Stark 트랩으로부터 제거하였다. 혼합물을 약 40℃로 냉각시킨 후, 포화 NaHCO3 (400 mL)를 신속한 교반과 함께 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 진탕시키고, 상을 분리하였다. 유기층을 물 (4 x 500 mL)로 세척한 다음, 5% NaHCO3 (200 mL)에 이어 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기 물질을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 약간 황색의 점성 오일 (118.50 g, 97% 수율)을 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.15 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.96 (s, 4H), 2.41 - 2.27 (m, 1H), 1.96 (dt, J=8.7, 4.3 Hz, 2H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.68 - 1.49 (m, 2H), 1.27 (t, J=7.1 Hz, 3H). 13C NMR (101MHz, 클로로포름-d) δ 175.2, 108.1, 64.3, 60.3, 41.6, 33.8, 26.3, 14.3.
단계 2: 에틸 8-포르밀-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00062
THF (250 mL) 중 에틸 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (32.31 g, 151 mmol)의 -78℃ 용액에 THF 중 2M 리튬 디이소프로필아미드 (98 mL, 196 mmol)의 용액을 캐뉼라를 통해 5분 동안 첨가하였다. 생성된 갈색 용액을 -78℃에서 교반시켰다. 1h 후, 냉각조를 얼음조로 대신하고, 반응 혼합물을 0℃에서 1h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 다시 -78℃로 냉각시키고 45분 동안 적가되는 THF (40 mL) 중 에틸 포르메이트 (18.65 mL, 226 mmol)의 용액으로 처리하였다. 생성된 연갈색 반응 혼합물을 -78℃에서 1h 동안 교반시켰다. 냉각조를 제거하고, 혼합물에 포화 수성 NH4Cl (250 mL)을 적가하고, 혼합물을 주위 온도에서 30분 동안 교반시켰다. 생성된 황색 혼합물을 EtOAc (3 x 300 mL)로 추출하였다. 합친 유기상을 0.5N HCl (300 mL)에 이어 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 갈색 점성 오일로 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피에 의해 실리카겔 (750 g 실리카, 단계 용리 9:1 헥산/EtOAc 및 5:1 헥산/EtOAc) 상에서 정제시켜 회수된 출발 물질인 에틸 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (8.6 g, 40.1 mmol, 26.6% 수율) 및 요망되는 생성물인 에틸 8-포르밀-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20.1 g, 83 mmol, 55.0% 수율)를 제공하였고, 둘 모두는 점성 황색 오일이었다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.50 (s, 1H), 4.17 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.94 - 3.86 (m, 4H), 2.24 - 2.09 (m, 2H), 2.01 (ddd, J=13.5, 8.3, 5.1 Hz, 2H), 1.75 - 1.48 (m, 4H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H).
단계 3: 에틸 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00063
에탄올 (300 mL) 중 에틸 8-포르밀-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (28.9 g, 119 mmol)의 0℃ 용액에 소듐 보로하이드라이드 (5.30 g, 137 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 0℃에서 교반시켰다. 3h 후, 반응 혼합물을 적하 깔때기를 통해 적가된 포화 수성 NH4Cl (200 mL)로 켄칭시켰다. 얼음조를 제거하고, 생성된 슬러리를 H2O (150 mL)로 천천히 처리하였다. 생성된 혼합물을 여과시켜 소량의 백색 고형물을 제거하였다. 액체 여과액을 농축시켜 대부분의 유기 용매를 제거하고, 나머지를 EtOAc (4 x 250 mL)로 추출하였다. 합친 유기상을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 감압하에 건조시켜 에틸 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (27.7 g, 113 mmol, 95% 수율)를 투명한 점성 오일로서 수득하였다. 이 실험으로부터의 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 이용하였다. 별도 실험으로 미정제 물질을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리 3:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제시켜 에틸 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트를 91% 수율로 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.18 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.98 - 3.87 (m, 4H), 3.61 (d, J=6.1 Hz, 2H), 2.23 (br. s., 1H), 2.17 - 2.07 (m, 2H), 1.72 - 1.51 (m, 6H), 1.32 - 1.20 (m, 3H).
단계 4. 벤질 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00064
THF (150 mL) 및 MeOH (50 mL) 중 에틸 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (27.6 g, 113 mmol)의 용액에 3N 리튬 하이드록사이드 수용액 (45.2 mL, 136 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 교반시키며 17 h 동안 60℃로 가열시켰다. 그 후 추가적인 3N 수성 리튬 하이드록사이드 (30.1 mL, 90 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 추가 14h 동안 60℃로 가열시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 감압하에 농축시켜 상응하는 카르복실레이트를 함유하는 잔류물 (24.5 g, 107 mmol)을 수득하였고, 이를 추가 정제 없이 이용하였다.
DMF (200 mL) 중 상기 잔류물에 벤질 브로마이드 (12.98 mL, 107 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 17h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 원래 부피의 대략 절반으로 농축시키고, EtOAc (250 mL)로 희석하고, 1N HCl (200 mL)로 세척하였다. 수성상을 3 x 250 mL EtOAc로 추출하였다. 합친 유기상을 H2O (100 mL), 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 밝은 황색 점성 오일로 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리 단계 구배 70:30 hex:EtOAc 이후 1:1 hex:EtOAc)에 의해 정제시키고, 감압하에 건조시켜 벤질 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (23.1 g, 71.6 mmol, 3단계에 걸쳐 63% 수율)를 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.28 (m, 5H), 5.16 (s, 2H), 3.91 (s, 4H), 3.64 (s, 2H), 2.34 (br. s., 1H), 2.22 - 2.12 (m, 2H), 1.70 - 1.63 (m, 4H), 1.62 - 1.54 (m, 2H). 13C NMR (101MHz, 클로로포름-d) δ 175.3, 135.8, 128.5 (s, 2C), 128.1, 127.8, 108.3, 68.5, 66.4, 64.2, 64.1, 48.1, 31.3, 27.9.
단계 5. 벤질 8-((((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00065
500 mL의 둥근 바닥 플라스크에서 벤질 8-(하이드록시메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (14.9 g, 48.6 mmol)를 건조 DCM (250 mL)과 합쳤다. 용액을 얼음/아세톤 조에서 약 -10℃로 냉각시키고, 여기에 피리딘 (5.31 mL, 65.7 mmol)을 첨가한 다음 30분에 걸쳐 Tf2O (11.09 mL, 65.7 mmol)를 적가하였다. 약간 황색의 현탁액을 0℃ (얼음물 조)에서 1.5 h 동안 교반시켰다. 상당한 현탁된 고형물을 지닌 생성된 짙은 오렌지색 혼합물을 감압하에 농축시켜 잔류물을 남겼고, 이를 진공하에 두어 과량의 트리플릭 무수물을 제거한 다음, 잔류물을 DCM (150 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 여과시키고 DCM으로 세정함에 의해 상당량의 백색 고형물을 제거하였다. 짙은 붉은색/오렌지색 여과액을 농축시키고 플래쉬 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (330 g 실리카, 용리 100% DCM)에 의해 정제시켰다. 생성물 분획을 합치고 걸쭉한 오렌지색 오일로 농축시켰고 이를 밤새 교반시키며 고진공 하에 두었다. 컬러는 청/녹색으로 변했다. 따라서 요망되는 생성물 (20.94 g, 98% 수율)이 청/녹색 점성 오일로서 수득되었다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.48 - 7.30 (m, 5H), 5.21 (s, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.04 - 3.87 (m, 4H), 2.30 - 2.14 (m, 2H), 1.76 - 1.56 (m, 6H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -74.39 (s, 1F).
단계 6. 벤질 8-(플루오로메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트의 제조.
Figure pct00066
500 mL 둥근 바닥 플라스크에서 질소 대기 하에 벤질 8-((((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (20.76 g, 47.4 mmol)를 캐뉼라를 통해 도입된 무수 THF (150 mL)와 합쳤다. 첨가 깔때기를 통해 적가된 청색 용액에 THF 중 TBAF, 1.0M (71.0 mL, 71.0 mmol)을 15분 동안 적가하였다. 혼합물은 TBAF를 첨가한 즉시 선황색으로 변했다. 혼합물을 rt에서 1h 동안 교반시켰다. 미정제 혼합물을 농축시켜 걸쭉한 오일을 얻고, 이를 에틸 아세테이트 (700 mL)로 희석시키고 물 (2 x 250 mL) 및 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기상을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 걸쭉한 황색 잔류물로 농축시켰다. 플래쉬 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (330 g 실리카, 용리 구배 100% 헥산 내지 2:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 황색 오일 (13.73 g, 94% 수율)로서 수득하였다. LCMS: m/e 309.2 (M+H)+, 1.27 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.44 - 7.31 (m, 5H), 5.21 (s, 2H), 4.45 (d, J=47.2 Hz, 2H), 4.01 - 3.89 (m, 4H), 2.28 - 2.16 (m, 2H), 1.75 - 1.55 (m, 6H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -223.25 (t, J=46.8 Hz, 1F).
단계 7. 얼음조에서 냉각된 2 L 둥근 바닥 플라스크에서 벤질 8-(플루오로메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (13.72 g, 44.5 mmol)를 THF (500 mL)와 합친 다음 염산, 1.5M 수성 (534 mL, 801 mmol)을 2분에 걸쳐 천천히 첨가하였다. 얼음조를 제거하고, 혼합물을 rt에서 15 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 감압하에 농축시켜 유기물을 제거하였고 나머지를 에틸 아세테이트 (300 mL)로 추출하였다. 에틸 아세테이트 상을 물 (2 x 200 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하였다. 감압하에 농축시켜 요망되는 생성물 (12.13 g, 정량적)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: m/e 265.3 (M+H)+, 1.19 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.47 - 7.32 (m, 5H), 5.27 (s, 2H), 4.52 (d, J=47.2 Hz, 2H), 2.57 - 2.42 (m, 4H), 2.42 - 2.31 (m, 2H), 1.87 - 1.76 (m, 2H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -223.41 (t, J=46.8 Hz, 1F).
방법 B
Figure pct00067
단계 1. 벤질 2-(하이드록시메틸)아크릴레이트의 제조
Figure pct00068
1-L 플라스크에 벤질 아크릴레이트 (44.6 mL, 292 mmol), 디옥산 (290 mL), 1,4-디아자바이사이클로[2.2.2]옥탄 (32.7 g, 292 mmol) 및 물 (270 mL)을 담았다. 혼합물을 RT에서 강하게 교반시켜 에멀젼을 형성하였다. 교반 혼합물에 포름알데하이드 (37%, 23.9 mL, 321 mmol)의 수용액을 첨가하고 14시간 동안 RT에서 계속 교반하였다. 미정제 반응 혼합물을 메틸렌 클로라이드 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리시키고, 합치고, 포화 수성 암모늄 클로라이드 및 HCl (0.2 N)의 50:50 혼합물로 세척하였다. 증발 및 감압하에 (2 cm Hg) 45℃에서 농축시켜 49.1 g의 자유 유동 시럽을 수득하였다. 미정제 생성물을 EtOAc/헥산의 구배 혼합물로 용리되는 실리카겔 컬럼 상에서 정제시켜 표제 화합물을 투명한 무색 시럽 (27 g, 141 mmol, 48%)으로서 수득하였다. LCMS: m/e 193.05 (M+H)+, 1.78 min (방법 1). 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.50 - 7.30 (m, 5H), 6.34 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.38 (d, J=6.4 Hz, 2H), 2.20 (t, J=6.6 Hz, 1H); 13C NMR (126MHz, 클로로포름-d) δ 166.1, 139.3, 135.7, 128.7, 128.4, 128.2, 126.2, 66.6, 62.7.
단계 2. 벤질 2-(플루오로메틸)아크릴레이트의 제조
Figure pct00069
벤질 2-(하이드록시메틸)아크릴레이트 (13.7 g, 71.3 mmol)를 질소 하에 건조 메틸렌 클로라이드 (100 mL)에 용해시키고, 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다. 이러한 교반된 용액에 폴리에틸렌 피펫을 이용하여 디에틸아미노설퍼 트리플루오라이드 (DAST, 13.0 mL, 98 mmol)를 5분의 기간에 걸쳐 4부분으로 첨가하였다. 옅은 오렌지색 용액이 형성되었다. 첨가가 완료되면, 건조-얼음조를 제거하고, 반응 온도가 RT로 상승하게 하였다. RT에서 총 4시간 동안 계속 교반시켰다. 반응 혼합물을 적하식으로(dropwise) 포화 수성 소듐 바이카르보네이트 및 물의 냉각된 (약 4℃) 50:50 혼합물로 옮겼다. 모든 미정제 반응 혼합물이 옮겨지면, 이것을 BHT-안정화된 에테르 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 물 (50 mL)로 1회 세척하였다. 유기상으로부터의 용매를 감압하에 주위 온도 이하에서 (약 15℃) 일정한 중량 (14.2 g, quant.)으로 제거하였다. 미정제 물질을 바로 다음 단계에 이용하였다. 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.44 - 7.34 (m, 5H), 6.49 - 6.43 (m, 1H), 5.99 (dt, J=2.8, 1.5 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 5.13 (d, J=46.5 Hz, 2H); 19F NMR (470MHz, 클로로포름-d) δ -220.91 (t, J=46.2 Hz).
단계 3 - 벤질 1-(플루오로메틸)-4-((트리메틸실릴)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00070
500 mL의 재밀봉가능한 압력 용기에 톨루엔 (200 mL) 중 미정제 출발 물질 벤질 2-(플루오로메틸)아크릴레이트 (14.2 g, 73.1 mmol) 및 (부타-1,3-디엔-2-일옥시)트리메틸실란 (Sigma Aldrich material 공급된 대로 사용됨, 18.73 g, 132 mmol)을 첨가하였다. 용기를 80 마이크론 Hg로 -78℃에서 비운 다음, 질소로 퍼징시켰다. 공정을 2회 반복하였다. 플라스크를 밀봉시키고, RT로 가온시킨 다음 125℃에서 22시간 동안 오일조로 침지시켰다. 혼합물이 RT로 냉각되게 하였다. 소 분취량 (25 μL)을 1H 및 19F에서의 NMR 분석을 위해 RT에서 진공-겅조된 미정제 반응물로부터 제거하였다. NMR 결과는 표제 화합물 및 소량의 상응하는 Diels-Alder 구조이성질체의 형성과 일치하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 - 7.29 (m, 5H), 5.18 (s, 2H), 4.80 (d, J=3.0 Hz, 1H), 4.52 (dq, J=46.9, 8.4 Hz, 2H), 2.65 - 2.49 (m, 1H), 2.21 - 2.00 (m, 4H), 1.92 - 1.78 (m, 1H), 0.24 - 0.12 (m, 9H); 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -224.76 (t, J=47.7 Hz, 1F) 및 약간의 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.20 (t, J=46.8 Hz, 0.06F). 미정제 물질을 증발시키고 진공 하에 (20 마이크론 Hg) 약 35℃에서 일정한 중량 (24.6 g, quant.)에 도달할 때까지 건조시켰다. 이러한 미정제 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다.
단계 4. 이전 단계로부터의 미정제 물질 (24.6 gm, 73 mmol)을 RT에서 THF (200 mL)에 용해시켜 투명한 용액을 형성하였다. 수성 1N HCl (2 mL, 2 mmol) 및 물 4 mL를 첨가하였다. 투명한 용액을 RT에서 총 16시간 동안 교반시켰다. 미정제 반응 혼합물을 150 mL의 포화 수성 암모늄 소듐 바이카르보네이트 및 물의 50:50 혼합물로 켄칭시켰다. 유기층을 EtOAc (3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 증발 건조시켜 18.8 g의 걸쭉한 시럽을 수득하였다. 미정제 잔류물을 약 25 컬럼 부피의, 헥산 중 0 내지 25% v/v의 에틸 아세테이트의 구배 혼합물로 용리되는 330 g의 실리카겔 컬럼을 이용하여 정제시켜 표제 화합물이 되게 하였다 (15.6 g, 81.0%). LCMS: m/e 265.15 (M+H)+, 1.60 min (방법 3). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.50 - 7.30 (m, 5H), 5.26 (s, 2H), 4.43 (d, J=46.9 Hz, 2H), 2.54 - 2.29 (m, 6H), 1.90 - 1.71 (m, 2H); 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -223.47 (t, J=46.8 Hz, 1F).
(R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 및 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00071
단계 1. 벤질 1-(플루오로메틸)-4-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00072
500 mL 둥근 바닥 플라스크에서 벤질 1-(플루오로메틸)-4-옥소사이클로헥산카르복실레이트 (12.65 g, 47.9 mmol) 및 N,N-비스(트리플루오로메틸설포닐)아닐린 (18.81 g, 52.7 mmol)을 무수 테트라하이드로푸란 (250 mL)에서 합쳤다. 용액을 건조 얼음/아세톤조에서 -78℃로 냉각시켰다. 냉각된 용액에 톨루엔 중 포타슘 헥사메틸디실라지드, 0.5M (105 mL, 52.7 mmol)을 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 총 2.5 h 동안 교반시킨 다음 냉각조에서 꺼내어 추가 20분 동안 rt에서 교반시켰다. 혼합물을 -78℃ 조에 다시 두고 여기에 교반된 125 mL의 포화 수성 암모늄 클로라이드를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 냉각조로부터 제거하고 교반하면서 rt이 되게 하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켜 유기 용매를 제거한 다음, 이 혼합물에 에틸 아세테이트 (600 mL) 및 물 (300 mL)을 첨가하고, 혼합물을 진탕시키고, 상들을 분리시켰다. 유기층을 물 (2 x 200 mL) 및 염수 (50mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 황색/오렌지색 오일을 남겼다. 미정제 잔류물을 플래쉬 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (800 g 실리카, 동용매 용리 3:2 헥산:DCM)에 의해 정제시켰다. 생성물 분획을 합치고 감압하에 농축시켜 요망되는 생성물 (17.43 g, 92% 수율)을 매우 약한 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 - 7.31 (m, 5H), 5.78 (br. s., 1H), 5.26 - 5.15 (m, 2H), 4.52 (dm, J=46.7 Hz, 2H), 2.78 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.52 - 2.33 (m, 2H), 2.33 - 2.17 (m, 2H), 1.94 (dt, J=13.8, 6.9 Hz, 1H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -73.88 (s, 1F), -225.02 (t, J=46.8 Hz, 1F).
단계 2. 벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00073
500 mL 둥근 바닥 플라스크에서 벤질 1-(플루오로메틸)-4-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (17.42 g, 44.0 mmol), 포타슘 아세테이트 (0.030 g, 0.307 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-디옥사보롤란) (11.72 g, 46.1 mmol), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센팔라듐(II) 디클로라이드 (3.03 mg, 3.69 μmol) 및 무수 디옥산 (200 mL)을 합쳤다. 플라스크를 질소 대기 하에 두고 70℃로 가열시켰다. 5 h 후에, 혼합물이 rt으로 냉각되게 하고 밤새 정치시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시키고 미정제 진홍색 잔류물을 에틸 아세테이트 (600 mL) 및 물 (300 mL)로 희석시켰다. 혼합물을 진탕시키고 상들을 분리시켰다. 유기물을 물 (250 mL)에 이어 염수 (100 mL)로 세척하였다. 유기상을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 진홍색 점성 오일을 수득하였다. 미정제 혼합물을 플래쉬 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 (800 g 실리카; 단계 용리 4 L에 대해 1:3 헥산:DCM , 이어서 5 L에 대해 100% DCM. 첫 번째 정제로부터 혼합된 분획으로부터의 2 g의 물질을 80 g의 실리카겔 상에서 재정제시켰다, 용리 구배 100% 헥산 내지 100% DC,)에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 무색의 걸쭉한 오일 (13.06 g, 79.4% 수율)로서 수득하였다. LCMS: m/e 375.3 (M+H)+, 1.52 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.44 - 7.30 (m, 5H), 6.54 (br. s., 1H), 5.25 - 5.11 (m, 2H), 4.51 (dm, J=47.4 Hz, 2H), 2.67 (d, J=19.3 Hz, 1H), 2.29 - 2.10 (m, 3H), 2.02 - 1.89 (m, 1H), 1.86 - 1.74 (m, 1H), 1.28 (s, 12H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.62 (t, J=45.1 Hz, 1F).
단계 3. 라세미 벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (11.15 g, 0.0298 mmol)를 초임계 유체 크로마토그래피 (SFC 방법 1)에 의해 정제시켜 분리된 단일 이성질체 표제 화합물을 제공하였다:
(R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트. 이것은 SFC 키랄 분리로부터 용리되는 첫 번째 이성질체였다. 생성물을 황색 오일로서 분리하였다 (5.45 g, 98% SFC 회수, 99.2% 키랄 순도). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.42 - 7.30 (m, 5H), 6.54 (br. s., 1H), 5.24 - 5.12 (m, 2H), 4.51 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 2.67 (d, J=19.3 Hz, 1H), 2.27 - 2.10 (m, 3H), 2.00 - 1.90 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.28 (s, 12H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.62 (t, J=46.8 Hz, 1F).
(S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트. 이것은 SFC 키랄 분리로부터 용리되는 두 번째 이성질체였다. 생성물은 황색 오일로서 분리되었다 (4.94 g, 89% SFC 회수, 99.3% 키랄 순도). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 - 7.31 (m, 5H), 6.54 (br. s., 1H), 5.24 - 5.13 (m, 2H), 4.52 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 2.68 (d, J=19.3 Hz, 1H), 2.27 - 2.10 (m, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.28 (s, 12H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.61 (t, J=48.6 Hz, 1F).
4-(2-브로모에틸)테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00074
단계 1: 에틸 2-(디하이드로-2H-티오피란-4(3H)-일리덴)아세테이트의 제조
Figure pct00075
표제 중간체를 문헌[Lammek, Derdowska and Rekowski in Polish Journal of Chemistry 64, 351 (1990)]에 보고된 바에 따라 제조하였다.
단계 2: 에틸 2-(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아세테이트의 제조
Figure pct00076
표제 중간체를 PCT WO 00/44713에서 공개된 바에 따라 2단계(1 및 2)의 64% 수율로 제조하였다.
단계 3: 2-(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에탄올의 제조
Figure pct00077
500 mL 플라스크에서 디에틸 에테르 (100 mL) 중 에틸 2-(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아세테이트 (6.4 g, 34.0 mmol)의 냉각된 (얼음조, 0℃) 용액에 THF 중 리튬 알루미늄 하이드라이드 (34.0 mL, 34.0 mmol)의 원액, 1M 용액을 적가하였다. 탁한 현탁액이 초기에 형성되었고 수소 가스 발생이 관찰되었다. LiAlH4 시약의 약 2/3가 첨가되었을 때 반응 혼합물은 투명해졌다. 얼음조를 제거하고, 반응 혼합물이 4시간 동안 주위 온도 (약 19-21℃)로 가온되게 하였다. 자유롭게 교반된, 백색 현탁액이 형성될 때까지 반응물에 0.5N HCl 중 반-포화된 NH4Cl 용액을 적가시켜 켄칭시켰다. 고형물을 여과에 의해 제거하고, 추가 용매로 세척하였다. 여과액 및 세척액을 합치고 진공 하에 농축시켜 표제 중간체를 제공하였다 (4.9 gm 99%). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.71 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.78 - 2.53 (m, 4H), 2.03 (d, J=13.3 Hz, 2H), 1.52 (dd, J=6.8, 3.3 Hz, 3H), 1.46 - 1.33 (m, 2H).
단계 4: 4-(2-하이드록시에틸)테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00078
아세톤 (3 mL) 중 2-(테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에탄올 (182 mg, 1.244 mmol)의 용액에 실온에서 물 (7 mL) 중 Oxone® (1.53 gm, 2.5 mmol)의 현탁액을 첨가하였다. 약한 발열이 검출되었고, 실온에서 2시간 동안 계속 교반시켰다. 미정제 반응 현탁액을 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 유기층을 합치고 진공 하에 농축시켜 표제 화합물 (66 mg 29.8%)을 함유하는 걸쭉한 시럽이 되게 하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.74 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.12 - 2.92 (m, 4H), 2.15 (dd, J=13.8, 2.5 Hz, 2H), 1.96 - 1.84 (m, 2H), 1.84 - 1.73 (m, 1H), 1.61 (q, J=6.4 Hz, 2H).
단계 5: 2-(1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸 메탄설포네이트의 제조
Figure pct00079
DCM (1 mL) 중 4-(2-하이드록시에틸)테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드 (30 mg, 0.168 mmol)의 용액을 질소 하에 얼음조에서 냉각시켰다. DIPEA (0.088 ml, 0.505 mmol)를 첨가한 다음, 메탄설포닐 클로라이드 (0.020 ml, 0.252 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (2 mL)로 희석시키고, DCM (3 x 5 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 50-100% EtOAc/헥산으로 용리되는 실리카겔 컬럼 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 화합물을 오일로서 수득하였다 (37 mg, 86%). LCMS m/e 257.10 (M+H)+, 1.086 min (방법 3). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.29 (t, J=5.9 Hz, 2H), 3.03 (s, 3H), 3.11 - 2.94 (m, 4H), 2.14 (dt, J=14.2, 1.2 Hz, 2H), 1.98 - 1.73 (m, 5H).
단계 6: 4-(2-브로모에틸)테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00080
THF (2 mL) 중 2-(1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸 메탄설포네이트 (37 mg, 0.144 mmol)의 용액에 리튬 브로마이드 (37.6 mg, 0.433 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18 h 동안 교반시켰다. 용매를 제거하고, 잔류물을 DCM (20 mL)에 용해시키고, 염수 (20 mL)로 세척하였다. 수성층을 DCM (2 X 20 mL)으로 추출하였다. 합친 DCM 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 40-75% EtOAc/헥산으로 용리되는 실리카겔 컬럼 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 고형물 (30 mg, 86%)로서 수득하였다. LCMS m/e 241.05 (M+H)+, 1.5분 (방법 3). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.46 (t, J=6.4 Hz, 2H), 3.12 - 2.94 (m, 4H), 2.17 - 2.07 (m, 2H), 1.96 - 1.80 (m, 5H).
4-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)티오모르폴린 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00081
단계 1: N-(2-아미노-2-메틸프로필)아세트아미드의 제조
Figure pct00082
표제 중간체를 US 특허: 4906661에 공개된 절차에 따라 82%로 제조하였다. 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 6.01 (br. s., 1H), 3.15 (d, J=5.8 Hz, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.14 (s, 6H).
단계 2: N-(2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-메틸프로필)아세트아미드의 제조
Figure pct00083
재밀봉가능한 압력 용기에서 2-프로판올 (28 mL) 중 N-(2-아미노-2-메틸프로필)아세트아미드 (2.3 g, 17.67 mmol)의 용액에 (비닐설포닐)에텐 (2.3 g, 19.47 mmol)을 첨가하였다. 이것을 질소로 플러싱하고 100℃에서 4시간 동안 가열시켰다. 실온으로 냉각시킨 후, 고형물이 분리되기 시작했다. 고형물을 여과하고, 이소프로판올로 세척하고, 건조시켜 요망되는 생성물 (2.7 gm, 61.5%)을 수득하였다. 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 5.73 (br. s., 1H), 3.28 (d, J=5.2 Hz, 2H), 3.12 - 3.00 (m, 8H), 2.04 (s, 3H), 1.15 - 1.10 (m, 6H).
단계 3: 4-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)티오모르폴린 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00084
MeOH (2 mL) 중 N-(2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-메틸프로필)아세트아미드 (100 mg, 0.403 mmol)의 용액을 1N NaOH (2.013 ml, 2.013 mmol)에 첨가하고 혼합물을 70℃에서 18 h 동안 교반시켰다. 추가의 NaOH (2.013 ml, 2.013 mmol)를 첨가하고, 용액을 90℃에서 24 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켜 MeOH을 제거하고, 잔류물을 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 5-10% MeOH/CH2Cl2로 용리되는 실리카겔 컬럼 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 정량적 수율의 오일로서 수득하였다. LCMS m/e 207.20 (M+H)+, 0.268분 (방법 3). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.07 (s, 8H), 2.71 (s, 2H), 1.11 (s, 6H).
실시예 1
부분입체이성질체 (1R)- 및 (1S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00085
단계 1. 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (240 mg, 0.321 mmol) (WO2013123019에 기재된 대로 제조됨), 라세미 에틸 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (91 mg, 0.291 mmol), 소듐 카르보네이트 하이드레이트 (108 mg, 0.874 mmol) 및 팔라듐 테트라키스 (20.21 mg, 0.017 mmol)의 혼합물을 질소 하에 디옥산 (4 mL)에 용해시켰다. 오렌지색 용액이 형성되었고, 물 (1 mL) 첨가시에 이것은 매우 담황색 현탁액으로 변했다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 배출/퍼징 사이클을 3회 수행하였다. 플라스크를 85℃에서 가열된 오일조에 총 2시간 동안 침지시켰다. 생성된 검정색 현탁액을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석시키고 물 (30 mL)로 세척하였다. 유기상을 수집하고 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 백색 고형물을 수득하였다 (180 mg, 79%). MS: m/e 783.47 (M+H)+, 2.36 min (방법 1) 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.32 (d, J=3.5 Hz, 1H), 5.18 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.58 - 4.37 (m, 2H), 4.25 - 4.15 (m, 2H), 3.24 - 2.41 (m, 14H), 2.27 - 1.76 (m, 20H), 1.70 (s, 3H), 1.64 - 1.31 (m, 13H), 1.10 - 1.04 (m, 5H), 1.00 - 0.88 (m, 8H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.42 (s, 1F).
단계 2. NaOH (1N, 2 mL, 2.0 mmol)를 1,4-디옥산 (4 mL) 및 MeOH (2 mL) 중 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (180 mg, 0.230 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 66℃에서 2 h 동안 교반시켜, 투명한 용액을 형성하였다. 미정제 반응 혼합물을 예비 HPLC (Xbridge OBD prep 실드(shield) RP C18 19 x100 mm)(MeCN/H2O/AcONH4)에 의해 정제시켜 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물로서 수득하였다 (29 mg, 16.7%). MS: m/e 755.50 (M+H)+, 2.548 min (방법 4) 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.19 (br. s., 1H), 4.74 (br. s., 1H), 4.61-4.49 (m, 3H), 3.18 (d, J=10.5 Hz, 2H), 2.97 - 2.40 (m, 12H), 2.35 - 1.78 (m, 14H), 1.73 - 1.60 (m, 6H), 1.58 - 1.17 (m, 11H), 1.13 (br. s., 3H), 1.08 (m, 4H), 1.01 - 0.90 (m, 8H), 0.86 (br. s., 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -217.84 - -231.26 (m, 1F).
실시예 1a 및 1b의 제조
실시예 1의 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (실시예 1a) 및 (R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (실시예 1b)으로의 HPLC 분리
Figure pct00086
2개의 부분입체이성질체를 예비 HPLC를 이용하여 분리시켰다 (방법 17). 용리된 첫 번째 생성물은 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (실시예 1a)(백색 고형물, 18 mg, 29.6%)으로 확인되었다. MS: m/e 755.55 (M+H)+, 2.620 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.63 - 4.39 (m, 2H), 3.51 - 3.43 (m, 1H), 3.41 - 3.37 (m, 3H), 3.28 (d, J=4.0 Hz, 1H), 3.20 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.10 (br. s., 1H), 3.02 - 2.96 (m, 3H), 2.85 - 2.68 (m, 2H), 2.63 - 2.51 (m, 2H), 2.35 - 1.78 (m, 16H), 1.77 (s, 3H), 1.74 - 1.28 (m, 15H), 1.21 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 메탄올-d4) δ -227.00 (s, 1F).
분리된 두 번째 화합물은 (R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산, (실시예 1b), (백색 고형물, 20 mg, 32.8%)로 확인되었다. MS: m/e 755.55 (M+H)+, 2.626 min (방법 4) 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.85 (br. s., 1H), 4.75 (s, 1H), 4.61 - 4.36 (m, 2H), 3.38 - 3.19 (m, 6H), 3.05 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.89 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.82 - 2.70 (m, 1H), 2.67 - 2.50 (m, 2H), 2.45 - 1.97 (m, 14H), 1.92 - 1.80 (m, 3H), 1.78 (s, 3H), 1.73 - 1.28 (m, 14H), 1.21 (br. s., 3H), 1.14 - 1.08 (m, 3H), 1.01 - 0.99 (m, 3H), 0.97 - 0.94 (m, 3H), 0.93 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 메탄올-d4) δ -227.04 (s, 1F).
실시예 1a에 대한 대안적인 제조 방법: (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산 비스 하이드로클로라이드 염
Figure pct00087
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00088
나사 마개를 지닌 350 mL 유리 압력 용기에서 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (9.00 g, 12.05 mmol), (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (4.96 g, 13.25 mmol) 및 클로로(2-디사이클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필-1,1'-바이페닐)[2-(2'-아미노-1,1'-바이페닐)]팔라듐(II)(X-Phos 아미노바이페닐 팔라듐 클로라이드 예비촉매, XPhos-Pd-G2, 0.569 g, 0.723 mmol)을 합쳤다. 용기를 질소로 퍼징시키고, 반응 플라스크에 무수 THF (180 mL)를 첨가하였다. 새로 제조된 0.5 M K3PO4 수용액을 질소로 퍼징시키고 용기에 첨가하였다 (60.2 mL, 30.1 mmol). 용기를 밀봉시키고, 생성된 황색 용액을 80℃에서 교반시켰다. 혼합물의 컬러는 30분에 걸쳐 매우 진녹색으로 어두워졌다. 혼합물을 18 h 동안 가열시켰다. 올리브 그린색의 반응 혼합물을 EtOAc (700 mL)로 희석시키고, 5% 수성 소듐 바이카르보네이트 (250 mL x 2)에 이어 염수 (100 mL)로 세척하였다. 수성상을 2 x 100 mL의 클로로포름으로 추출하고, 유기상을 합치고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 황색 포움 고형물로 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (800 g 실리카, 단계 용리 8 L에 대해 3:1 헥산:아세톤, 이어서 4 L에 대해 1:1 헥산:아세톤)에 의해 정제시켰다. 첫 번째 크로마토그래피로부터의 혼합된 분획 (1.0 g의 물질)을 플래쉬 실리카 크로마토그래피 (80 g 실리카, 용리 구배 8 컬럼 부피에 대해 100% 헥산 내지 3:1 헥산:아세톤, 10 컬럼 부피에 대해 3:1 헥산:아세톤)에 의해 재정제시켰다. 이에 따라 요망되는 물질 (7.18 g, 70.5% 수율)이 황색 포움 고형물로서 수득되었다. LCMS: m/e 845.6 (M+H)+, 1.57 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 - 7.31 (m, 5H), 5.32 (s, 2H), 5.23 - 5.15 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.0, 1.6 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.2 Hz, 1H), 4.64 - 4.44 (m, 3H), 3.13 (dd, J=15.4, 13.0 Hz, 2H), 2.89 - 2.78 (m, 4H), 2.68 - 2.53 (m, 4H), 2.52 - 2.41 (m, 2H), 2.21-1.16 (m, 31H), 1.13 - 0.99 (m, 7H), 0.97 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.07 (t, J=46.8 Hz, 1F).
단계 2. (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00089
500 mL 둥근 바닥 플라스크에서 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (7.17 g, 8.48 mmol)를 리튬 하이드록사이드, 1.0 M 수성 (42.4 mL, 42.4 mmol) 및 테트라하이드로푸란 (50 mL) 및 MeOH (50 mL)와 합쳤다. 혼합물을 2.5h 동안 75℃로 가열시켰다. 검정색에 가까운 혼합물을 감압하에 농축시켜 고형 잔류물을 남겼다. 잔류물을 아세토니트릴 (50 mL) 및 클로로포름 (50 mL)의 혼합물에 재용해시키고, 검정색 용액에 트리플루오로아세트산 (6.54 mL, 85 mmol)을 적가 처리하였다. 그 후 혼합물을 감압하에 농축시켜 2상 혼합물을 남겼다 (위에 투명한 액체가 떠 있는 검정색 오일). 이 혼합물을 아세토니트릴:클로로포름 (150 mL)으로 희석시키고 감압하에 재농축시켰다. 상기 용해/재농축을 한번 더 반복하여 검정색 오일을 수득하였고, 이것을 밤새 고 진공 하에 두었다. 검정색 오일을 밤새 포움으로 응고시켰다. 검정색 미정제 고형물을 클로로포름 (20 mL) 및 아세톤 (5 mL)의 혼합물에 용해시키고, 상부에 셀라이트 (약 25 g)를 지닌 실리카 (약 60 g)로 구성된 짧은 컬럼 상에 로딩시켰다. 1:1 아세톤:클로로포름 (500 mL)에 이어 3:1 아세톤:클로로포름 (1000 mL)으로 용리시켜 검정색을 제거하였고, 생성물이 황색 밴드로서 용리되었다. 생성물 분획을 합치고 감압하에 농축시켜 흡습성 황색 포움 고형물을 남겼다 (16 g). 이 고형물의 일부 (약 1.4 g)는 5 mL의 80:20 아세토니트릴:물에 쉽게 용해되어 130 g Isco Redisep Rf Gold C18 카트리지 상에 로딩되었다. 용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA. 용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA. 8 컬럼 부피에 대해 용리 구배 30-100%B, 이어서 8 컬럼 부피에 대해 100%B 유지됨. 생성물-함유 분획을 감압하에 농축시켜 깨끗한 백색 분말을 얻었다. 이 순수 물질을 배치 1로서 따로 두었다. 나머지 미정제 물질 (약 14.5 g)은 20 mL의 아세토니트릴:물의 80:20 혼합물에 쉽게 용해되었다. 이 미정제 물질을 역상 예비 HPLC에 의해 9회 주입으로 prep HPLC 방법 1을 이용하여 정제시켰다. 이러한 방식으로 수득된 순수 물질을 앞서 수득된 배치 1 순수 물질과 합쳐서 혼합된 분획으로부터의 약간 불순한 물질 (1.40 g)과 함께 6.32 g의 깨끗한 백색 분말 (배치 2)을 수득하였다. 혼합된 분획 물질 (1.40 g)을 130 g Isco Redisep Rf Gold C18 카트리지 상에서 최소의 80:20 아세토니트릴:물 상에 로딩시켰다. 용매 A = 90% 물, 10% 아세토니트릴, 0.1% TFA. 용매 B = 10% 물, 90% 아세토니트릴, 0.1% TFA. 용리 구배 10 컬럼 부피에 대해 30-100%B, 이어서 4 컬럼 부피에 대해 100%B 유지됨. 생성물-함유 분획을 감압하에 농축시켜 깨끗한 백색 포움을 수득하였다 (1.17 g). 이 물질을 깨끗한 배치 2 물질과 합쳐서 표제 화합물을 TFA 염으로서 수득하였다 (7.41 g, 89% 수율, 백색 포움). LCMS: m/e 755.6 (M+H)+, 1.29 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, Acetic) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.56 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 3.93 - 3.65 (m, 6H), 3.43 (tt, J=11.3, 3.9 Hz, 1H), 3.26 (t, J=12.3 Hz, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.86 - 2.73 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.43 (d, J=13.0 Hz, 2H), 2.35 - 2.13 (m, 7H), 2.13 - 2.09 (m, 1H), 2.01 - 1.78 (m, 4H), 1.78 - 1.70 (m, 4H), 1.69 - 1.45 (m, 9H), 1.45 - 1.27 (m, 3H), 1.24 - 1.12 (m, 5H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, Acetic) δ -76.46 (s, 1F), -225.82 (t, J=46.8 Hz, 1F).
단계 3. 자기 교반 바를 지닌 500 mL 둥근 바닥 플라스크에서 아세토니트릴 (150 mL)과 염산, 6.0M 수성 (37.1 mL, 223 mmol)을 합쳤다. 신속하게 교반된 혼합물에 적하 깔때기를 통해 아세토니트릴 (60 mL)에 용해된 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA 염의 용액 (7.30 g, 7.42 mmol)을 첨가하였다. 거의 즉시 백색 침전물이 형성되었고 첨가가 진행되면서 더 많아졌다. 총 20분에 걸쳐 첨가가 완료되었다. 유백색 현탁액을 rt에서 1.25 h 동안 교반시켰다. 현탁액을 얼음조에서 냉각시키고 이렇게 생성된 매우 미세한 백색 고형물을 여과에 의해 분리하고, 얼음 냉각된 아세토니트릴로 제어하고, 공기 건조되게 한 다음, 고 진공 하에 rt에서 건조시켰다. 이에 따라 요망되는 생성물이 백색 분말로서 분리되었다 (5.857 g, 95% 수율). LCMS: m/e 755.5 (M+H)+, 1.27 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, Acetic) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.55 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 4.13 - 3.87 (m, 4H), 3.82 (br. s., 2H), 3.55 - 3.42 (m, 2H), 3.39 (br. s., 1H), 3.03 (s, 3H), 3.01 - 2.90 (m, 1H), 2.62 (d, J=17.9 Hz, 1H), 2.55 - 2.43 (m, 2H), 2.43 - 2.14 (m, 8H), 1.95 - 1.79 (m, 3H), 1.79 - 1.71 (m, 4H), 1.69 - 1.47 (m, 9H), 1.47 - 1.28 (m, 4H), 1.22 (s, 3H), 1.19 - 1.12 (m, 2H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, Acetic) δ -225.81 (t, J=45.1 Hz, 1F).
실시예 1b에 대한 대안적인 제조 방법:
(R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00090
단계 1. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00091
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (3.0 g, 5.38 mmol), (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (2.013 g, 5.38 mmol)(WO2013169578에 기재된 대로 제조됨), 및 삼염기성 포타슘 포스페이트 (3.43 g, 16.14 mmol)를 함유하는 플라스크에 2세대 Buchwald X-Phos 예비촉매 (0.042 g, 0.134 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 THF (20 mL) 및 물 (4 mL)로 희석시키고, 질소로 플러싱하고, 50℃로 가열시켰다. 혼합물을 15.5 h 동안 가열시킨 후에, 이것을 rt로 냉각시키고 부분적으로 감압하에 농축시켰다. 혼합물을 물 (75 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (3 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중 0-10% 메탄올 구배 및 220 g 실리카겔 컬럼을 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 생성물 (3.34 g, 95% 수율)을 회백색 포움으로서 수득하였다. LCMS: m/e: 656.6 (M+H)+, 2.30 min (방법 1). 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ = 7.39 - 7.30 (m, 5H), 5.32 (br. s., 1H), 5.21 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (dd, J=6.1, 1.9 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.61 (dd, J=2.1, 1.3 Hz, 1H), 4.53 (dm, J=47.3 Hz, 2H), 2.64 - 2.51 (m, 2H), 2.23 - 1.93 (m, 7H), 1.70 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.85 (s, 3H), 1.85 - 0.83 (m, 22H).
단계 2. (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00092
벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (3.34 g, 5.09 mmol)를 함유하는 밀봉가능한 플라스크에 인산, 포타슘 염 (5.40 g, 25.5 mmol), 포타슘 아이오다이드 (0.930 g, 5.60 mmol), 및 1-(2-클로로에틸)-4-(메틸설포닐)피페리딘.HCl (4.01 g, 15.28 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아세토니트릴 (50 mL)로 희석하고, 질소로 플러싱한 다음, 플라스크를 밀봉하고 100℃로 가열시켰다. 4 h의 가열 후에, 혼합물을 rt로 냉각시키고, rt에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 50 mL의 아세토니트릴로 희석시키고, 추가 1g의 1-(2-클로로에틸)-4-(메틸설포닐)피페리딘.HCl을 첨가하였다. 플라스크를 밀봉하고, 혼합물을 2 h 동안 100℃로 가열시켰다. 혼합물을 rt로 냉각시키고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 물 (75 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3 x 75 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중 0-8% MeOH 구배 및 220 g 실리카겔 컬럼을 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 역상 크로마토그래피 (150 g C18 컬럼, 0.1% TFA가 첨가된 물 중 30-90% 아세토니트릴 구배)에 의해 재정제시켜 표제 생성물의 TFA 염 (3.17 g, 3.30 mmol, 64.9% 수율)을 백색 포움으로서 수득하였다. LCMS: m/e: 845.6 (M+H)+, 2.10 min (방법 1). 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ = 7.39 - 7.30 (m, 5H), 5.32 (br. s., 1H), 5.21 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.53 (dm, J=47.1 Hz, 2H), 3.44 - 3.21 (m, 6H), 3.17 - 3.08 (m, 1H), 3.05 - 2.97 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.79 - 2.57 (m, 4H), 1.69 (s, 3H), 1.12 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.86 (s, 3H), 2.37 - 0.83 (m, 31H).
단계 3. 1,4-디옥산 (30 mL) 및 메탄올 (10 mL) 중 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (3.17 g, 3.75 mmol)의 용액에 NaOH (3N) (7.50 mL, 22.50 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 17 h 동안 80℃로 가열시켰다. 혼합물을 rt로 냉각시키고 부분적으로 감압하에 농축시켰다. 1N HCl을 첨가함에 의해 혼합물을 산성으로 만들고, 형성된 고형물을 여과에 의해 수집하였다. 수집된 고형 물질에 20 mL의 물 및 1N NaOH 용액 (9.38 mL, 9.38 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반시킨 다음, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 물 (20 mL) 및 아세토니트릴 (30 mL)로 희석하고 TFA (1.445 mL, 18.75 mmol)로 처리하였다. 그 후 혼합물을 감압하에 농축시키고 실리카겔 상에 흡착시키고, 아세톤 중 20-30% 클로로포름 구배 및 220 g 실리카겔 컬럼을 이용하여 정제시켰다. 예상되는 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 생성물을 TFA 염으로서 수득하였다. HCl 염으로 전환시키기 위해, 잔류물을 200 mL 아세토니트릴로 희석시키고, 6N HCl 용액 (6.66 mL, 40.0 mmol)을 첨가하였다. 고형물이 형성되었고, 혼합물을 20 mL의 클로로포름으로 희석시켰다. 고형물은 용해되지 않았고, 따라서 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 다시 아세토니트릴로 희석하고 클로로포름 및 6N HCl (6.66 mL, 40.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 감압하에 농축시키고, 상기 절차를 3회 반복하였다. 그 후 고형물을 아세토니트릴로 희석시키고, 환류로 가열시킨 다음, rt로 냉각시키고, 여과에 의해 수집하여 예상되는 생성물의 HCl 염을 수득하였다. 약 1.5%의 불순도가 여전히 존재했기 때문에, 20 mL의 물 및 1N NaOH (8.26 mL, 8.26 mmol)를 첨가하고, 수 분 동안 교반시킨 다음 감압하에 농축시킴에 의해 정제를 위해 TFA 염으로 재전환시켰다. 그 후 잔류물을 물 (20 mL) 및 아세토니트릴 (30 mL)로 희석시키고 TFA (1.273 mL, 16.52 mmol)로 처리하였다. 물을 감압하에 농축시키고, 실리카겔에 흡착시키고, 아세톤 중 20-30% 클로로포름 구배 및 220 g 실리카겔 컬럼을 이용하여 정제시켰다. 표제 화합물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 생성물을 TFA 염으로서 수득하였다. 잔류물의 HPLC는 여전히 미량의 불순물이 존재함을 나타내었다. 혼합물을 150 g C18 컬럼 및 0.1% TFA 첨가된 물 중 30-90% 아세토니트릴 구배를 이용하여 다시 정제시켰다. 예상되는 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 생성물을 표제 생성물의 TFA 염, 백색 고형물로서 수득하였다. HCl 염으로 전환시키기 위해, 잔류물을 아세토니트릴에 용해시키고, 6N HCl 용액 (6.66 mL, 40.0 mmol)으로 처리한 다음 감압하에 농축시켰다. 이 공정을 추가 2회 반복한 다음, 고형물을 아세토니트릴로 희석시키고, 환류로 가열하고, 냉각시키고, 여과에 의해 수집하여 (R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산, 비스 HCl 염 (1.6 g, 1.859 mmol, 49.6% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e: 755.5 (M+H)+, 1.69 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, 아세트산-d4) δ = 5.37 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.53 (dm, J=47.0 Hz, 2H), 4.09 - 3.72 (m, 6H), 3.51 - 3.27 (m, 3H), 3.01 (s, 3H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 2.59 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.52 - 2.40 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 2.39 - 1.04 (m, 29H), 1.00 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). C45H71FN2O4S·2.0 HCl·1.530 H2O.
실시예 2
부분입체이성질체 (1R)- 및 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00093
단계 1. 에틸 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
표제 화합물을 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조를 위해 상기 기재된 절차에 따라, 시약으로서 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 대신 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (WO2013123019에 기재된 대로 제조됨)를 이용하여 82% 수율로 제조하였다. MS: m/e 755.55 (M+H)+, 2.706 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.32 (d, J=3.5 Hz, 1H), 5.18 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.73 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.66 - 4.58 (m, 1H), 4.56 - 4.39 (m, 2H), 4.26 - 4.15 (m, 2H), 3.17 - 2.92 (m, 8H), 2.83 - 2.45 (m, 6H), 2.22 - 2.05 (m, 3H), 2.03 - 1.72 (m, 5H), 1.69 (s, 3H), 1.65 - 1.26 (m, 16H), 1.23 (br. s., 3H), 1.18 - 1.02 (m, 7H), 1.01 - 0.89 (m, 8H), 0.86 (s, 3H), 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.41 (s, 1F).
단계 2. 표제 화합물을 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조를 위해 단계 2에서 상기 기재된 절차에 따라, 시약으로서 에틸 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 대신 에틸 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 이용하여 11.5% 수율로 제조하였다. MS: m/e 727.55 (M+H)+, 2.527 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.18 (br. s., 1H), 4.76 (br. s., 1H), 4.64 - 4.56 (m, 2H), 4.48 (br. s., 1H), 3.26 - 2.94 (m, 8H), 2.90 - 2.38 (m, 6H), 2.32 - 1.77 (m, 10H), 1.70 (m, 6H), 1.61 - 1.17 (m, 12H), 1.15 - 1.03 (m, 6H), 1.01 - 0.91 (m, 8H), 0.87 (br. s., 3H), 19F NMR (470MHz, 클로로포름-d) δ -225.02 (br. s., 1F).
실시예 2a 및 2b의 제조
실시예 2의 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (실시예 2a) 및 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (실시예 2b)으로의 HPLC 분리
Figure pct00094
2개의 부분입체이성질체를 예비 HPLC (방법 17)을 이용하여 분리하였다. 용리된 첫 번째 생성물은 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, (실시예 2a) (백색 고형물, 7 mg, 33%)으로 확인되었다. MS: m/e 727.55 (M+H)+, 2.650 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.27 - 5.15 (m, 1H), 4.87 - 4.80 (m, 1H), 4.73 (br. s., 1H), 4.62 - 4.37 (m, 2H), 3.29 - 3.17 (m, 8H), 3.16 - 3.05 (m, 3H), 3.02 - 2.86 (m, 1H), 2.80 (td, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 2.63 - 2.46 (m, 1H), 2.36 - 1.80 (m, 12H), 1.76 (br. s., 3H), 1.75 - 1.29 (m, 15H), 1.20 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 메탄올-d4) δ -227.04 (s, 1F).
두 번째 용리되는 화합물은 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, (실시예 2b) (백색 고형물, 7 mg, 33%)으로 확인되었다. MS: m/e 727.55 (M+H)+, 2.644 min (방법 4). 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.36 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.88 - 4.81 (m, 1H), 4.78 - 4.68 (m, 1H), 4.64 - 4.36 (m, 2H), 3.30 - 3.15 (m, 8H), 3.17 - 3.03 (m, 3H), 2.99 - 2.88 (m, 1H), 2.86 - 2.72 (m, 1H), 2.63 - 2.50 (m, 1H), 2.37 - 1.97 (m, 8H), 1.92 - 1.80 (m, 4H), 1.78 (s, 3H), 1.74 - 1.28 (m, 15H), 1.22 - 1.19 (m, 3H), 1.15 - 1.11 (m, 3H), 0.99 (br. s., 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 - 0.92 (m, 3H). 19F NMR (376MHz, 메탄올-d4) δ -227.05 (br. s., 1F).
실시예 2b에 대한 대안적인 제조 방법
방법 A: 키랄 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 통한 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산
Figure pct00095
단계 1: (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
디옥산 (40 mL) 및 물 (10.00 mL) 중 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (1.75 g, 2.434 mmol), (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (1.00 g, 2.68 mmol), Na2CO3.H2O (0.91 g, 7.30 mmol) 및 Pd(Ph3P)4 (0.17 g, 0.15 mmol)의 혼합물을 N2 하에 -78℃로 냉각시켰다. 용액은 고형물로 변했다. 진공/N2에 의한 퍼징 사이클을 3회 수행하였다. 혼합물을 70℃에서 1 h 동안 교반시켰다. 컬러는 짙은 갈색으로 바뀌었다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 H2O (100 mL)로 희석시키고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 0 - 35% EtOAc/헥산으로 용리되는 실리카겔 컬럼 상에서 정제시켜 표제 화합물을 고형물로서 수득하였다 (1.12 g, 56%). 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 - 7.30 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 5.22 - 5.14 (m, 2H), 5.11 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.60 - 4.45 (m, 2H), 3.13 - 2.98 (m, 8H), 2.72 - 2.54 (m, 5H), 2.51 - 2.43 (m, 1H), 2.23 - 1.00 (m, 27H), 1.69 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.85 (s, 3H). 13C NMR (126MHz, 클로로포름-d) δ 174.30, 150.72, 147.90, 139.10, 135.94, 128.52, 128.13, 127.97, 121.41, 121.30, 109.41, 87.60, 86.21, 66.62, 62.72, 57.21, 52.91, 51.29, 51.00, 49.71, 49.39, 47.38, 45.84, 45.70, 41.98, 41.64, 40.64, 38.71, 37.46, 36.80, 36.09, 34.14, 33.61, 30.05, 29.74, 29.18, 29.14, 29.06, 28.66, 26.79, 26.43, 26.39, 25.24, 21.52, 21.36, 19.66, 19.56, 16.30, 16.04, 14.34. 19F NMR (470MHz, 클로로포름-d) δ -225.09 (t, J=47.3 Hz, 1F). MS m/e 817.50 (M+H)+, 2.32 min (방법 5).
단계 2: 1,4-디옥산 (60 mL) 및 H2O (30 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (2.3 g, 2.81 mmol)의 용액을 얼음조에서 냉각시키고, 1N NaOH (28 mL, 28 mmol)를 첨가하였다. 생성된 탁한 혼합물을 RT로 가온시킨 다음 70℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 RT로 냉각시킨 다음 얼음조에 두고, 그 후 0.5N HCl로 중화시켰다. 혼합물을 밤새 교반시켰다. 침전된 고형물을 여과에 의해 수집하고, MeOH - H2O로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다. 고형물을 MeCN (80 mL) 및 디옥산 (20 mL)에 용해시키고, 6 N HCl (50 mL)을 적가하였다. 혼합물을 1 h 동안 교반시켰다. 침전된 고형물을 여과에 의해 수집하고, MeCN으로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 비스-HCl 염으로서 수득하였다 (1.95 g, 90%). 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.34 (s, 1H), 5.20 (dd, J=6.1, 1.6 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.58 - 4.39 (m, 2H), 3.45 - 3.11 (m, 12H), 2.87 (td, J=11.0, 5.5 Hz, 1H), 2.55 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.34 - 1.08 (m, 27H), 1.77 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H). 13C NMR (126MHz, 메탄올-d4) δ 178.20, 149.71, 149.37, 140.47, 123.31, 122.51, 112.28, 89.36, 87.98, 73.56, 54.52, 51.90, 50.64, 50.43, 49.82, 47.03, 46.91, 46.76, 43.44, 42.95, 42.13, 40.78, 38.87, 38.77, 37.41, 34.96, 33.19, 30.55, 30.46, 30.42, 30.38, 29.37, 27.91, 27.72, 27.67, 27.54, 26.53, 22.26, 20.82, 19.41, 17.33, 17.09, 14.85. 19F NMR (470MHz, 메탄올-d4) δ -227.03 (s, 1F). MS m/e 727.45 (M+H)+, 2.55 min (방법 4).
방법 B:
Figure pct00096
단계 1. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (8.9 g, 15.96 mmol), (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (6.57 g, 17.55 mmol), 및 삼염기성 포타슘 포스페이트 (10.16 g, 47.9 mmol)를 함유하는 플라스크에 Buchwald 2세대 Xphos 예비촉매 (0.313 g, 0.399 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 THF (50 mL) 및 물 (10 mL)로 희석하고, 질소로 플러싱한 다음, 22 h 동안 50℃로 가열시켰다. 혼합물을 rt로 냉각시키고, 부분적으로 농축시키고, 물 (150 mL)로 희석시키고, 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하고 (일부 고형물은 첫 번째 추출시에 층 사이에서 관찰되었으므로 과량의 에틸 아세테이트를 첨가하여 생성물을 확실히 용해시켰다), 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중 0-10% 메탄올 구배 및 220 g 실리카겔 컬럼을 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 다음 단계로 진행될 미량의 불순물이 존재하는 황색 고형물로서 생성물을 수득하였다.
단계 2. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (10.5 g, 16.0 mmol)를 함유하는 밀봉가능한 플라스크에 삼염기성 포타슘 포스페이트 (13.59 g, 64.0 mmol), 포타슘 아이오다이드 (3.99 g, 24.01 mmol), 및 4-(2-클로로에틸)티오모르폴린 1,1-디옥사이드, HCl (9.37 g, 40.0 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 아세토니트릴 (200 mL)로 희석하고, 질소로 플러싱하고, 밀봉시키고, 100℃로 가열시켰다. 혼합물을 16 h 동안 가열시킨 후, 이것을 rt으로 냉각시키고, 디클로로메탄을 이용하여 rb 플라스크로 옮긴 다음, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 물 (200 mL)로 희석시키고, 에틸 아세테이트 (200 mL 이어서 2 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄 중 0-6% 메탄올 구배 및 330g 실리카겔 컬럼을 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켰다. 예상되는 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 걸쭉한 적색 오일로서 다른 불순물과 함께 생성물을 수득하였다. 잔류물을 아세토니트릴에 용해시키고, 3개의 분획으로 분할하고, 25-100% A 내지 B 구배 (A = 0.1% TFA 첨가된 9:1 물:아세토니트릴, B = 0.1% TFA 첨가된 1:9 물:아세토니트릴) 및 275 g C18 컬럼을 이용하여 재정제시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 생성물의 TFA 염을 수득하였다. 덜 순수한 분획을 합치고, 농축시킨 다음 상기와 동일한 역상 방법을 이용하여 다시 정제시켰다. 생성물의 TFA 염을 포화 수성 NaHCO3 (150 mL)로 희석시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다 (150 mL 이어서 3x75 mL). 합친 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 생성물 (7.52g , 9.2 mmol, 2단계에 걸쳐 57.5% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다.
단계 3. 1,4-디옥산 (10 mL) 및 메탄올 (2 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.6 g, 0.734 mmol)의 용액에 NaOH (1N) (2.94 mL, 2.94 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5 h 동안 60℃로 가열시킨 다음 rt로 냉각시켰다.
단계 4. 1N HCl 용액 (5 mL, 5.00 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 이것을 고형물이 형성되기 시작할 때까지 부분적으로 감압하에 농축시킨 다음, 혼합물을 밤새 냉장고에 두었다.
형성된 고형물을 여과에 의해 수집하고, 물로 세척하여 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 HCl 염 (0.55g, 0.706 mmol, 96% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다. 표제 화합물에 대한 새로운 분석 데이터는 상이한 방법을 이용하여 제조된 동일한 화합물에 대한 이전에 획득한 데이터와 일치하였다.
실시예 3
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-모르폴리노에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00097
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00098
75 mL 유리 압력 용기에서 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (0.850 g, 1.524 mmol), (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.599 g, 1.600 mmol) 및 XPhos-Pd-G2 (0.036 g, 0.046 mmol)를 합쳤다. 용기를 고무 격막으로 밀봉시켰다. 바늘을 격막에 삽입하고, 용기를 반복적으로 비운 다음 진공 오븐에서 rt에서 10분 기간 동안 질소로 4회 퍼징시켰다. 질소-플러싱된 반응 용기에 무수 THF (20 mL) 및 새로 제조된, 질소 살포된 수성 0.5 M K3PO4 (7.62 mL, 3.81 mmol)를 첨가하였다. 용기를 PTFE 마개로 밀봉하고, 생성된 황색 용액을 80℃에서 교반시켰다. 컬러는 30분 동안 매우 진녹색으로 어두워졌다. 혼합물을 20 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (70 mL)로 희석시키고, 5% 수성 소듐 바이카르보네이트 (25 mL x 2)에 이어 염수 (10 mL)로 세척하였다. 수성층을 2 x 10 mL의 클로로포름으로 추출하고, 유기상을 합치고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 황색 포움 고형물로 농축시켰다. 미정제 황색 물질을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (40g 실리카, 용리 구배 100%DCM 내지 20:1 DCM:MeOH)에 의해 정제시켰다. 생성물 분획을 합치고, 황색의 걸쭉한 오일로 농축시켰고, 이것은 고 진공 하에 두었을 때 포움이 되었다. 약간 황색 포움의 총 회수 = 0.493 g (49% 수율). LCMS: m/e 656.5 (M+H)+, 1.59 min (방법 6). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 7.38 - 7.26 (m, 5H), 5.31 (br. s., 1H), 5.21 - 5.12 (m, 2H), 5.12 - 5.06 (m, 1H), 4.77 - 4.71 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.57 (dm, J=47.4 Hz, 2H), 2.59 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.50 (td, J=10.6, 5.3 Hz, 1H), 2.16 - 1.93 (m, 6H), 1.78 - 1.65 (m, 7H), 1.60 (dd, J=12.0, 9.0 Hz, 5H), 1.55 - 1.39 (m, 8H), 1.38 - 1.22 (m, 4H), 1.11 - 1.03 (m, 4H), 1.03 - 0.93 (m, 4H), 0.89 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.86 (s, 3H).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-모르폴리노에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00099
15 mL 유리 압력 용기에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.091 g, 0.139 mmol)를 건조 아세토니트릴 (5 mL) 중 4-(2-클로로에틸)모르폴린 하이드로클로라이드 (0.077 g, 0.416 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (0.147 g, 0.694 mmol) 및 포타슘 아이오다이드 (0.046 g, 0.277 mmol)와 합쳤다. 용기를 밀봉시키고, 오일조에서 교반시키며 19 h 동안 120℃로 가열시켰다. 미정제 혼합물을 질소 스트림 하에 농축시키고, EtOAc (30 mL)에 취하고, 물 (3 x 10 mL) 및 염수 (5 mL)로 세척하였다. 합친 수성상을 클로로포름 (10 mL)으로 추출하고, 유기상을 합치고, 감압하에 농축시켰다. 이렇게 수득된 미정제 잔류물은 다음 단계로 바로 진행되었다. LCMS: m/e 769.6 (M+H)+, 2.47 min (방법 1).
단계 3. PTFE 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-모르폴리노에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 함유하는 단계 2로부터의 미정제 혼합물을 리튬 하이드록사이드, 1.0M 수성 (0.973 mL, 0.973 mmol), MeOH (1 mL) 및 테트라하이드로푸란 (1 mL)과 합쳤다. 바이알을 캡핑하고, 45분 동안 75℃로 가열시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (prep HPLC 방법 2)에 의해 정제하였다. 이렇게 수득된 물질을 역상 예비 HPLC (prep HPLC 방법 3)에 의해 재정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 백색 고형물 TFA 염 (0.0191 g, 2단계에 걸쳐 17.3% 수율)으로서 제공하였다. LCMS: m/e 679.5 (M+H)+, 4.26 min (방법 2). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.15 (m, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.49 dm, J=47.4 Hz, 2H), 3.84 - 3.68 (m, 4H), 3.18 - 3.09 (m, 2H), 2.98 - 2.85 (m, 1H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.71 (dd, J=13.7, 3.4 Hz, 3H), 2.63 - 2.50 (m, 3H), 2.30 - 2.11 (m, 2H), 2.11 - 1.91 (m, 7H), 1.83 - 1.75 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.67 - 1.30 (m, 12H), 1.19 (s, 3H), 1.17 - 1.09 (m, 2H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 4
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-디옥시도-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00100
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-디옥시도-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00101
15 mL 유리 압력 용기에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.091 g, 0.139 mmol)를 건조 아세토니트릴 (5 mL) 중 (1S,4S)-5-(2-클로로에틸)-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄 2,2-디옥사이드 (0.075 g, 0.358 mmol)(WO2013169578에 기재된 대로 제조됨), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (0.147 g, 0.694 mmol) 및 포타슘 아이오다이드 (0.046 g, 0.277 mmol)와 합쳤다. 용기를 밀봉시키고, 오일조에서 교반시키며 19 h 동안 120℃로 가열시켰다. 미정제 혼합물을 질소 스트림 하에 농축시키고, EtOAc (30 mL)에 취하고, 물 (3 x 10 mL)에 이어 염수 (5 mL)로 세척하였다. 합친 유기상을 클로로포름 (10 mL)으로 추출하고, 유기상을 합치고, 감압하에 농축시켰다. 이렇게 수득된 미정제 잔류물은 다음 단계로 바로 진행되었다. LCMS: m/e 829.6 (M+H)+, 2.44 min (방법 1).
단계 2. 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-디옥시도-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.115 g, 0.139 mmol)를 함유하는 단계 1로부터의 미정제 혼합물을 리튬 하이드록사이드, 1.0M 수성 (0.695 mL, 0.695 mmol), MeOH (0.7 mL) 및 테트라하이드로푸란 (0.7 mL)과 합쳤다. 바이알을 캡핑하고, 45분 동안 75℃로 가열시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 4)에 의해 정제시키고, 이렇게 수득된 황색 고형물을 그 후 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 5)에 의해 재정제시킨 다음, 세 번째 마지막 역상 예비 HPLC 정제 (Prep HPLC 방법 6)에 의해 47.4 mg (2단계에 걸쳐 39.2% 수율)의 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-디옥시도-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 백색 분말 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/e 739.5 (M+H)+, 4.22 min (방법 2). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.48 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 4.00 (br. s., 1H), 3.69 - 3.63 (m, 1H), 3.23 - 3.13 (m, 2H), 3.13 - 2.95 (m, 4H), 2.79 (td, J=11.1, 5.0 Hz, 1H), 2.63 - 2.55 (m, 1H), 2.53 (br. s., 1H), 2.42 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.28 - 2.06 (m, 4H), 2.06 - 1.91 (m, 6H), 1.86 - 1.74 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.69 - 1.55 (m, 4H), 1.54 - 1.38 (m, 7H), 1.38 - 1.23 (m, 3H), 1.20 - 1.14 (m, 1H), 1.13 - 1.08 (m, 4H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
실시예 5
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00102
단계 1. 4-(2-클로로에틸)-1,4-티아제판 1,1-디옥사이드의 제조.
Figure pct00103
메탄올 (5 mL) 및 아세트산 (1 mL) 중 1,4-티아제판 1,1-디옥사이드 (200 mg, 1.340 mmol) 및 물 중 2-클로로아세트알데하이드, 50 wt% 용액 (0.234 mL, 1.877 mmol)의 혼합물에 2-피콜린 보란-복합체 (158 mg, 1.474 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 rt에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 잔류물로 농축시키고, 이것을 포화된 Na2CO3 (10mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 수성상을 클로로포름 (10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기상을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 334 mg (quant.)의 요망되는 생성물을 미정제 적갈색 오일로서 제공하였고, 이것은 정치시에 부분적으로 응고되었다. 이 미정제 물질을 그대로 다음 단계에 직접 이용하였다. LCMS: m/e 212.0 (M+H)+, 0.18 min (방법 1).
단계 2. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00104
15 mL 유리 압력 용기에서 4-(2-클로로에틸)-1,4-티아제판 1,1-디옥사이드 (0.065 g, 0.305 mmol)를 함유하는 단계 1로부터의 미정제 물질을 건조 아세토니트릴 (5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.100 g, 0.152 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (0.162 g, 0.762 mmol) 및 포타슘 아이오다이드 (0.051 g, 0.305 mmol)와 합쳤다. 용기를 밀봉시키고, 오일조에서 교반시키며 17 h 동안 120℃로 가열시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시키고, EtOAc (30 mL)에 취하고, 물 (3 x 10 mL) 및 염수 (5 mL)로 세척하였다. 합친 수성상을 클로로포름 (10 mL)으로 추출하고, 유기상을 합치고, 감압하에 농축시켰다. 이렇게 수득된 미정제 잔류물을 추가 정제 없이 그대로 비누화 단계로 진행시켰다. LCMS: m/e 831.6 (M+H)+, 2.39 min (방법 1).
단계 3. PTFE 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.126 g, 0.152 mmol)를 함유하는 단계 2로부터의 미정제 혼합물을 리튬 하이드록사이드, 1.0M 수성 (1.064 mL, 1.064 mmol), MeOH (1 mL) 및 테트라하이드로푸란 (1 mL)과 합쳤다. 바이알을 캡핑하고, 혼합물을 45분 동안 75℃로 가열시켰다. 혼합물을 여과하고, 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 7)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물 TFA 염 (36.7 mg, 2단계에 걸쳐 28.2% 수율)으로서 제공하였다. LCMS: m/e 741.5 (M+H)+, 2.26 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.49 (dm, J=47.4 Hz, 1H), 3.47 - 3.37 (m, 1H), 3.35 (br. s., 1H), 3.28 - 3.17 (m, 2H), 3.15 - 3.02 (m, 5H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.79 (td, J=11.0, 4.6 Hz, 1H), 2.55 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 2H), 2.13 - 1.91 (m, 9H), 1.86 - 1.74 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.68 - 1.55 (m, 4H), 1.55 - 1.42 (m, 6H), 1.41 - 1.24 (m, 3H), 1.19 - 1.09 (m, 5H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 6
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페라진-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00105
단계 1. 1-(2-클로로에틸)-4-(메틸설포닐)피페라진의 제조.
Figure pct00106
메탄올 (5 mL) 및 아세트산 (1 mL) 중 1-(메틸설포닐)피페라진 (0.200 g, 1.218 mmol) 및 물 중 2-클로로아세트알데하이드, 50 wt% 용액 (0.212 mL, 1.705 mmol)의 혼합물에 2-피콜린-보란-복합체 (0.143 g, 1.340 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 rt에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켜 잔류물을 남겼고, 이것을 포화된 Na2CO3 (10mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10mL)로 추출하였다. 수성상을 클로로포름 (10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기상을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 394 mg (>100% 수율)의 요망되는 생성물을 무색 오일로서 제공하였고, 이것은 정치시에 왁스 같은 약간 황색 고형물로 응고되었다. 이 미정제 물질을 그대로 다음 단계에 직접 이용하였다. LCMS: m/e 227.0 (M+H)+, 0.19 min (방법 1).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페라진-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
Figure pct00107
15 mL 유리 압력 용기에서 1-(2-클로로에틸)-4-(메틸설포닐)피페라진 (0.069 g, 0.305 mmol)을 함유하는 단계 1로부터의 미정제 물질을 건조 아세토니트릴 (5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.100 g, 0.152 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (0.162 g, 0.762 mmol) 및 포타슘 아이오다이드 (0.051 g, 0.305 mmol)와 합쳤다. 용기를 밀봉하고, 오일조에서 교반시키며 15 h 동안 120℃로 가열시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (30 mL)에 취하고, 물 (3 x 10 mL) 및 염수 (5 mL)로 세척하였다. 합친 수성상을 클로로포름 (10 mL)으로 추출하고, 유기상을 합치고, 감압하에 농축시켰다. 이렇게 수득된 미정제 잔류물을 추가 정제 없이 그대로 비누화 단계로 진행시켰다. LCMS: m/e 846.7 (M+H)+, 2.43 min (방법 1).
단계 3. PTFE 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페라진-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.129 g, 0.152 mmol)를 함유하는 단계 2로부터의 미정제 혼합물을 1.0M 수성 리튬 하이드록사이드 (1.064 mL, 1.064 mmol), MeOH (1 mL) 및 테트라하이드로푸란 (1 mL)과 합쳤다. 바이알을 캡핑하고, 혼합물을 45분 동안 75℃로 가열시켰다. 혼합물을 여과하고, 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 7)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페라진-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물 TFA 염 (47.4 mg, 2단계에 걸쳐 35.8% 수율)으로서 제공하였다. LCMS: m/e 756.5 (M+H)+, 4.21 min (방법 2). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.48 (dm, J=47.2 Hz, 1H), 3.30 - 3.22 (m, 2H), 3.19 - 3.09 (m, 2H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.84 - 2.64 (m, 6H), 2.55 (d, J=17.6 Hz, 1H), 2.29 - 2.14 (m, 2H), 2.14 - 1.91 (m, 7H), 1.86 - 1.75 (m, 3H), 1.73 (s, 4H), 1.65 - 1.47 (m, 7H), 1.45 - 1.34 (m, 4H), 1.29 (dd, J=17.7, 5.0 Hz, 1H), 1.17 (s, 3H), 1.16 - 1.08 (m, 2H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
실시예 7
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00108
단계 1: (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
MeCN (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (45 mg, 0.069 mmol), 4-(2-브로모에틸)테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드 (17 mg, 0.069 mmol), K3PO4 (44 mg, 0.206 mmol) 및 NaI (17 mg, 0.103 mmol)의 현탁액을 질소로 플러싱하고, 밀봉하고, 100℃에서 18 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 컬럼 (0-40% EtOAc/헥산) 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 생성물을 고형물 (28 mg, 50%)로서 수득하였다. LCMS m/e 816.45 (M+H)+, 3.864분 (방법 7). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.28 (m, 5H), 5.32 (s., 1H), 5.17 (d, J=1.3 Hz, 2H), 5.15 - 5.09 (m, 1H), 4.70 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.50 - 4.43 (m, 1H), 3.13 - 2.90 (m, 4H), 2.64 - 2.41 (m, 4H), 2.21 - 0.80 (m, 34H), 1.69 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.85 (s, 3H).
단계 2. 1,4-디옥산 (2 mL) 및 MeOH (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (28 mg, 0.034 mmol)의 용액에 1N NaOH (1 mL, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 3 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 Prep HPLC (방법 8)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 고형물 (16 mg, 64%)로서 수득하였다. LCMS m/e 726.50 (M+H)+, 3.528분 (방법 7). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.34 (s, 1H), 5.18 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 3.10 - 2.89 (m, 4H), 2.66 - 2.48 (m, 4H), 2.27 - 0.91 (m, 34H), 1.68 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -224.87 (s, 1F).
실시예 8
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-(2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00109
단계 1: (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-(2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
CH2Cl2 (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol) 및 2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트산 (13 mg, 0.091 mmol)의 혼합물에 DIPEA (0.05 ml, 0.305 mmol)에 이어 HATU (44 mg, 0.114 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 컬럼 (20-45% EtOAc/헥산) 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 고형물 (정량적 수율)로서 수득하였다. LCMS m/e 782.55 (M+H)+, 4.346분 (방법 8). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 - 7.29 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 5.21 - 5.14 (m, 2H), 5.12 (d, J=4.5 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.73 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.61- 4.56 (m, 1H), 4.50 - 4.44 (m, 1H), 3.96 (dd, J=11.3, 3.5 Hz, 2H), 3.47 - 3.38 (m, 2H), 2.73 - 2.65 (m, 1H), 2.60 (d, J=17.3 Hz, 1H), 2.51 (dd, J=12.4, 8.2 Hz, 1H), 2.42 (td, J=10.5, 5.3 Hz, 1H), 2.19 - 0.92 (m, 32H), 1.70 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.85 (s, 3H).
단계 2. 1,4-디옥산 (3 mL) 및 MeOH (1.5 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-(2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (60 mg, 0.077 mmol)의 용액에 1N NaOH (1.5 mL, 1.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 3 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 Prep HPLC (방법 8)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-(2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트아미도)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 고형물 (45 mg, 85%)로서 수득하였다. LCMS m/e 692.55 (M+H)+, 3.141분 (방법 8). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.33 (s, 1H), 5.18 (d, J=4.5 Hz, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 3.97 (d, J=8.5 Hz, 2H), 3.43 (t, J=11.8 Hz, 2H), 2.70 (d, J=12.8 Hz, 1H), 2.63 - 2.36 (m, 3H), 2.28 - 0.95 (m, 32H), 1.70 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.31 (s, 1F).
실시예 9
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00110
단계 1: (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
MeCN (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol), 4-(2-브로모에틸)테트라하이드로-2H-피란 (15 mg, 0.076 mmol), K3PO4 (49 mg, 0.229 mmol) 및 NaI (19 mg, 0.114 mmol)의 현탁액을 질소로 플러싱하고, 밀봉시키고, 90℃에서 18 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 컬럼 (0-40% EtOAc/헥산) 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 고형물 (30 mg, 51%)로서 수득하였다. LCMS m/e 768.55 (M+H)+, 3.033분 (방법 8). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 - 7.29 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 5.22 - 5.14 (m, 2H), 5.14 - 5.10 (m, 1H), 4.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 4.51 - 4.43 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 4H), 2.65 - 2.52 (m, 2H), 2.50 - 2.36 (m, 2H), 2.18 - 0.87 (m, 34H), 1.69 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.06 (s, 1F).
단계 2. 1,4-디옥산 (2 mL) 및 MeOH (1 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (30 mg, 0.039 mmol)의 용액에 1N NaOH (1 mL, 1.0 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 Prep HPLC (방법 8)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((2-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 고형물 (12 mg, 45%)로서 수득하였다. LCMS m/e 678.50 (M+H)+, 2.968분 (방법 8). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.34 (s, 1H), 5.18 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.72 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.48 (s, 1H), 3.97 (d, J=11.3 Hz, 2H), 3.39 (tdd, J=11.8, 4.5, 2.1 Hz, 2H), 2.67 - 2.48 (m, 4H), 2.19 - 0.89 (m, 34H), 1.69 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.04 (s, 1F).
실시예 10
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-메틸프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00111
단계 1: (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-포르밀-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
디옥산 (40 mL) 중 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-포르밀-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (2.0 g, 3.50 mmol), (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (1.44 g, 3.85 mmol), Na2CO3 H2O (1.3 g, 10.5 mmol) 및 Pd(Ph3P)4 (0.24 g, 0.21 mmol)의 혼합물을 질소로 플러싱하고, 밀봉시키고, 70℃에서 1 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 H2O (100 mL)로 희석시키고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리되는 (0-15% EtOAc/헥산) 실리카겔 컬럼 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 고형물 (1.85 g, 79%)로서 수득하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.69 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.31 (m, 5H), 5.31 (br. s., 1H), 5.21 - 5.14 (m, 2H), 5.12 (dd, J=6.3, 1.8 Hz, 1H), 4.77 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.65 - 4.62 (m, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 1H), 4.50 - 4.44 (m, 1H), 2.89 (td, J=11.1, 5.9 Hz, 1H), 2.60 (d, J=16.3 Hz, 1H), 2.17 - 1.72 (m, 11H), 1.71 (s, 3H), 1.53 - 1.19 (m, 14H), 1.11 - 1.01 (m, 2H), 0.98 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.84 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.07 (s, 1F).
단계 2: (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-메틸프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
DCE (1 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-포르밀-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (70 mg, 0.105 mmol) 및 4-(1-아미노-2-메틸프로판-2-일)티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (32 mg, 0.157 mmol)의 현탁액을 rt에서 1 h 동안 교반시켰다. 생성된 용액에 소듐 시아노보로하이드라이드 (20 mg, 0.314 mmol) 및 AcOH (0.012 mL, 0.209 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 rt에서 18 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화된 NaHCO3 (5 mL)로 희석시키고, CH2Cl2 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 컬럼 (20-80% EtOAc/헥산) 상에서 ELS 검출기를 이용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 고형물 (18 mg, 20%)로서 수득하였다. LCMS m/e 859.55 (M+H)+, 3.113분 (방법 8). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.29 (m, 5H), 5.32 (s, 1H), 5.21 - 5.14 (m, 2H), 5.12 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.69 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.51 - 4.44 (m, 1H), 3.07 (m, 8H), 2.73 - 2.55 (m, 3H), 2.42 (td, J=11.0, 5.6 Hz, 1H), 2.18 - 0.92 (m, 29H), 1.69 (s, 3H), 1.16 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.04 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.84 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -225.06 (s, 1F).
단계 3: 1,4-디옥산 (1 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-메틸프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (18 mg, 0.021 mmol)의 용액에 1N NaOH (0.5 mL, 0.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 Prep HPLC (방법 8)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-메틸프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 고형물 (6 mg, 37%)로서 수득하였다. LCMS m/e 769.55 (M+H)+, 2.816분 (방법 8). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.33 (s, 1H), 5.17 (d, J=4.3 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.13 - 3.01 (m, 8H), 3.01 - 0.89 (m, 33H), 1.68 (s, 3H), 1.15 (s, 6H), 1.03 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -224.76 (s, 1F).
실시예 11
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00112
단계 1. (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-포르밀-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
25 mL 압력 용기에서, 디옥산 (2 mL) 및 물 (0.500 mL) 중 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-포르밀-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (164 mg, 0.287 mmol), (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (118 mg, 0.316 mmol), Na2CO3·H2O (107 mg, 0.862 mmol) 및 Pd(Ph3P)4 (19.92 mg, 0.017 mmol)의 혼합물을 N2 하에 -78℃로 냉각시켰다. 혼합물을 응고시키고 진공/N2에 의한 퍼징 사이클을 3회 수행하였다. 혼합물을 70℃에서 1 h 동안 교반시켰고, 컬러는 어두운 갈색으로 변했다. 반응 혼합물을 H2O (100 mL)로 희석시키고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 정제시켜 (24g 실리카겔 컬럼; 0 - 25%, 25% EtOAc/헥산; ELS 검출기) 표제 화합물을 백색 고형물 (122 mg, 63.5%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 691.45 (M+Na)+, 4.428 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.73 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.47 - 7.25 (m, 5H), 5.35 (br. s., 1H), 5.20 (d, J=1.8 Hz, 2H), 5.16 - 5.09 (m, 1H), 4.79 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.71 - 4.64 (m, 1H), 4.61 - 4.53 (m, 1H), 4.51 - 4.41 (m, 1H), 2.89 (td, J=11.1, 5.9 Hz, 1H), 2.63 (d, J=18.3 Hz, 1H), 2.31 - 1.85 (m, 8H), 1.85 - 1.76 (m, 3H), 1.73 (s, 3H), 1.61 - 1.20 (m, 14H), 1.15 - 1.05 (m, 2H), 1.04 - 1.00 (m, 3H), 0.99 (br. s., 3H), 0.96 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
단계 2. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
DCE (2 mL) 중 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-포르밀-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (122 mg, 0.182 mmol)의 용액에 아세트산 (0.021 mL, 0.365 mmol) 및 4-(3-아미노프로필)티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (70.1 mg, 0.365 mmol)를 첨가하였다. 용액은 처음에 탁해졌고 10분 후에 투명해졌다. 혼합물을 RT에서 2 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (193 mg, 0.912 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 18 h 동안 교반시켰다. 산성 산 (0.2 mL) 및 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (193 mg, 0.912 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18 h 동안 교반시켰다. 그 후 혼합물을 포화 NaHCO3 (7 mL)로 희석시키고, 디클로로메탄 (3 x 7 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 Na2SO4로 건조시켰다. 건조제를 여과에 의해 제거하고, 여과액을 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 정제시켰다 (실리카겔). 예상되는 생성물을 함유하는 분획을 수집하고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (130 mg, 84%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 845.60 (M+H)+, 3.116 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 - 7.29 (m, 5H), 5.34 - 5.29 (m, 1H), 5.18 (d, J=2.3 Hz, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.63 - 4.53 (m, 2H), 4.47 (d, J=4.5 Hz, 1H), 3.14 - 2.97 (m, 12H), 2.95 - 2.82 (m, 3H), 2.68 - 2.51 (m, 4H), 2.48 - 2.33 (m, 2H), 2.24 - 2.07 (m, 3H), 2.03-1.91 (m, 4H), 1.91 - 1.73 (m, 6H), 1.71 (br. s., 3H), 1.63 - 1.30 (m, 11H), 1.08 (br. s., 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H), 0.84 (s, 3H).
단계 3. 1,4-디옥산 (6 mL) 및 MeOH (3 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (130 mg, 0.154 mmol)의 용액에 1N NaOH (3 mL, 3.00 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 66℃에서 2 h 동안 교반시키고, 투명한 용액을 수득하였다. 반응 혼합물을 prep HPLC (방법 9)에 의해 정제시켜 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물 (55 mg, 45%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 755.50 (M+H)+, 2.837 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.29 (br. s., 1H), 5.15 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.50 (q, J=8.8 Hz, 1H), 4.39 (q, J=8.6 Hz, 1H), 3.36 (d, J=6.0 Hz, 4H), 3.33 - 3.28 (m, 4H), 3.23 - 3.10 (m, 3H), 2.95 (t, J=7.2 Hz, 2H), 2.82 (d, J=13.1 Hz, 1H), 2.56 - 2.40 (m, 2H), 2.31 - 2.17 (m, 1H), 2.14 - 1.89 (m, 7H), 1.85 - 1.61 (m, 10H), 1.60 - 1.13 (m, 13H), 1.12 - 1.04 (m, 4H), 1.01 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.87 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -222.66 - -223.63 (m, 1F).
실시예 12
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((N-(3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)프로필)아세트아미도)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00113
CH2Cl2 (1 mL) 중 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)프로필)아미노)메틸)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (20 mg, 0.026 mmol)의 용액에 아세트산 무수물 (0.012 mL, 0.132 mmol) 및 DMAP (0.324 mg, 2.65 μmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 50℃에서 24 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 MeOH (4 mL)에 재용해시키고, prep HPLC (방법 10)에 의해 정제시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (3 mg, 13.5%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 797.55 (M+H)+, 3.103 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.76 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.82 - 4.72 (m, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.60 - 4.52 (m, 1H), 4.50 - 4.36 (m, 1H), 3.64 (d, J=13.8 Hz, 1H), 3.49 (t, J=7.4 Hz, 2H), 3.27 (m, 1H), 3.18 - 3.08 (m, 4H), 3.03 (d, J=5.5 Hz, 4H), 2.68 - 2.47 (m, 4H), 2.27 (d, J=6.0 Hz, 1H), 2.22 - 1.93 (m, 9H), 1.89 - 1.23 (m, 21H), 1.17 (s, 3H), 1.16 - 1.07 (m, 3H), 1.05 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.92 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 메탄올-d4) δ -226.56 - -227.82 (m, 1F).
실시예 13
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4,4-비스(에톡시카르보닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00114
단계 1. ((R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
(R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (669 mg, 1.788 mmol), (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (950 mg, 1.703 mmol), 소듐 카르보네이트 하이드레이트 (634 mg, 5.11 mmol) 및 팔라듐 테트라키스 (118 mg, 0.102 mmol)의 혼합물을 질소 대기 하에 두었다. 디옥산 (16 mL)을 첨가하였고, 오렌지색 용액이 형성되었다. 물 (4 mL)을 첨가하였고, 매우 담황색 현탁액이 형성되었다. 전체 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, 배출/퍼징 사이클을 3회 수행하고, 마지막으로 질소 퍼지를 수행하였다. 플라스크를 65 - 85℃의 오일조에 침지시켰다. 혼합물의 컬러는 10분의 기간에 걸쳐 담황색 현탁액에서 어두운 갈색으로 변했다. 가열이 총 5시간 동안 85℃에서 진행되게 하였다. 반응 혼합물을 H2O (100 mL)로 희석시키고, EtOAc (3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카겔 크로마토그래피에 의해 정제시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (0.78 g, 69.8%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 656.50 (M+H)+, 3.003 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.46 - 7.29 (m, 5H), 5.43 - 5.28 (m, 1H), 5.24 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 2.0 Hz, 1H), 4.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 2.68 - 2.51 (m, 2H), 2.26 - 1.94 (m, 6H), 1.84 - 1.72 (m, 4H), 1.72 (s, 3H), 1.65 - 1.28 (m, 12H), 1.27 (s, 3H), 1.14 (d, J=13.9 Hz, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.06 (m, 2H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
단계 2. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이지리딘-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
화염 건조된 75 mL 두꺼운-벽의 재밀봉가능한 용기에 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.78 g, 1.189 mmol) 및 화염 건조된 포타슘 포스페이트 (1.262 g, 5.95 mmol)에 이어, 1,2-디클로로에탄 (20 mL) 및 아세토니트릴 (10 mL)을 담았다. 반응 혼합물을 질소로 플러싱하고, 밀봉하고, 36 h 동안 130℃로 가온시켰다. 미정제 반응 혼합물을 짧은 패드의 실리카겔을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하여 매우 옅은 오렌지색 용액을 수득하였다. 용액을 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 회백색 고형물로서 수득하였다. 화합물을 추가 정제 없이 그대로 이용하였다. LCMS: m/e 682.50 (M+H)+, 700.55 (M+H2O)+, 714.55 (M+MeOH)+, 3.053 min (방법 9).
단계 3. 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트의 제조
(R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이지리딘-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (100 mg, 0.147 mmol)를 15 mL 밀봉 튜브에 담았다. CH3CN (2 mL)을 첨가한 다음 디에틸 피페리딘-4,4-디카르복실레이트 (67.2 mg, 0.293 mmol)를 첨가하였다. 이 현탁액에 소듐 아이오다이드 (24.18 mg, 0.161 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (93 mg, 0.440 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 15 h 동안 125℃에서 가열시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL)로 희석하고, 소듐 바이카르보네이트 및 염수에 의해 세척하였다. 유기층을 수집하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카겔 (0-25% 에틸 아세테이트/헥산) 상에서 정제시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (60 mg, 48%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 911.65 (M+H)+, 3.213 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 - 7.31 (m, 5H), 5.31 (br. s., 1H), 5.22 - 5.14 (m, 2H), 5.10 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.71 (d, J=2.5 Hz, 1H), 4.63 - 4.53 (m, 2H), 4.50 - 4.41 (m, 1H), 4.28 - 4.20 (m, 4H), 3.01 - 2.79 (m, 2H), 2.69 - 2.55 (m, 2H), 2.54 - 2.29 (m, 2H), 2.20 - 2.10 (m, 6H), 2.00 - 1.73 (m, 15H), 1.70 - 1.67 (s, 3H), 1.67 - 1.49 (m, 10H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 11H), 1.07 (s, 3H), 0.97 - 0.93 (m, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.86 (s, 3H), 0.84 (s, 3H).
단계 4. 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((3차-부틸디메틸실릴)옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트의 제조
DCE (3 mL) 중 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트 (60 mg, 0.066 mmol)의 용액에 TEA (0.015 mL, 0.105 mmol), t-부틸디메틸실란 (0.022 mL, 0.132 mmol), 및 팔라듐(II) 아세테이트 (3.70 mg, 0.016 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 N2로 플러싱하고, 60℃로 가열시켰다. 가열 3 h 후에 혼합물을 RT로 냉각시키고, 셀라이트의 패드 및 실리카겔 (헥산 중 50% EtOAc, 이어서 디클로로메탄으로 세척)을 통해 여과시켰다. 여과액을 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 고형물 (61 mg. 100%)로서 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. LCMS: m/e 935.70 (M+H)+, 3.247 min (방법 9).
단계 5. THF (4 mL) 중 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((3차-부틸디메틸실릴)옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트 (15 mg, 0.016 mmol)의 용액에 TBAF (THF 중 1M)(0.024 mL, 0.024 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 rt에서 30분 동안 교반시켰다. 혼합물을 Prep HPLC (방법 9)에 의해 정제시켜 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4,4-비스(에톡시카르보닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물 (7 mg, 53.2%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 821.60 (M+H)+, 2.901 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.38 - 5.32 (m, 1H), 5.17 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.72 - 4.40 (m, 3H), 4.32 - 4.21 (m, 4H), 3.54 - 3.24 (m, 4H), 3.10 (br. s., 3H), 2.90 - 2.60 (m, 2H), 2.36 (br. s., 4H), 2.28 - 1.73 (m, 12H), 1.69 (s, 3H), 1.66 - 1.50 (m, 6H), 1.44 (br. s., 3H), 1.38-1.33 (m, 3H), 1.32 - 1.24 (m, 9H), 1.12 (s, 3H), 1.08 (d, J=8.3 Hz, 2H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
실시예 14 및 실시예 15
(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(에톡시카르보닐)-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (이성질체 1)의 제조 및 (1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(에톡시카르보닐)-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (이성질체 2)의 제조
Figure pct00115
단계 1. 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트의 제조
표제 화합물을 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트의 제조를 위해 상기 기재된 절차에 따라서, 출발 물질로서 디에틸 피페리딘-4,4-디카르복실레이트 대신 티오모르폴린-3-카르복실산 에틸 에스테르 하이드로클로라이드를 이용하여 26.3% 수율로 제조하였다. MS: m/e 857.65. (M+H)+, 3.876 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 - 7.31 (m, 5H), 5.31 (d, J=3.8 Hz, 1H), 5.23 - 5.13 (m, 2H), 5.10 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.62 - 4.54 (m, 2H), 4.51 - 4.40 (m, 1H), 4.28 - 4.22 (m, 2H), 3.81 - 3.67 (m, 1H), 3.63 (ddd, J=12.5, 5.8, 3.5 Hz, 1H), 3.37 (ddd, J=12.4, 9.9, 2.9 Hz, 1H), 3.21 (ddd, J=12.4, 8.5, 5.8 Hz, 1H), 3.09 (ddd, J=9.9, 6.0, 3.5 Hz, 1H), 3.03 - 2.95 (m, 1H), 2.93 - 2.66 (m, 5H), 2.64 - 2.32 (m, 5H), 2.17 - 2.08 (m, 3H), 2.00 - 1.77 (m, 8H), 1.69 (s, 3H), 1.64 - 1.48 (m, 8H), 1.18 - 1.01 (m, 8H), 0.99 - 0.80 (m, 16H).
단계 2. 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트 1,1-디옥사이드의 제조
MeOH (2 mL) 중 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트 (32 mg, 0.037 mmol)의 혼합물의 용액에 물 (2.00 mL) 중 OXONE® (34.4 mg, 0.056 mmol)의 현탁액을 0℃에서 첨가한 다음, 아세톤 (5 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 12 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 소듐 하이드로설파이트로 세척한 다음, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 고형물로서 수득하였다. 30 mg의 미정제 생성물이 추가 정제 없이 다음 단계에 이용되었다. MS: m/e 889.55. (M+H)+, 3.26 min (방법 9).
단계 3. 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((3차-부틸디메틸실릴)옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트 1,1-디옥사이드의 제조
표제 화합물을 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((3차-부틸디메틸실릴)옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트의 제조를 위해 상기 기재된 절차에 따라서, 출발 물질로서 디에틸 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실레이트 대신 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트 1,1-디옥사이드를 이용하여 97% 수율로 제조하였다. MS: m/e 913.65. (M+H)+, 3.204 min (방법 9).
단계 4. THF (4 mL) 중 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-(((3차-부틸디메틸실릴)옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트 1,1-디옥사이드 (20 mg, 0.022 mmol)의 용액에 TBAF (THF 중 1M)(0.032 mL, 0.032 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 RT에서 30분 동안 교반시켰다. 혼합물을 Prep HPLC (방법 9)에 의해 정제시켜 하기 2개의 생성물을 수득하였다:
실시예 14: 백색 고형물로서 (1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(에톡시카르보닐)-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (이성질체 1)(2 mg, 11.43%). LCMS: m/e 799.50 (M+H)+, 2.866 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.40 - 5.29 (m, 1H), 5.19 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.64 - 4.55 (m, 1H), 4.49 (q, J=8.6 Hz, 1H), 4.37 - 4.25 (m, 2H), 3.74 - 3.62 (m, 1H), 3.46 - 2.85 (m, 10H), 2.68 - 2.53 (m, 2H), 2.26 - 2.06 (m, 5H), 2.02 - 1.75 (m, 7H), 1.72 (s, 3H), 1.67 - 1.50 (m, 7H), 1.37 - 1.27 (m, 8H), 1.13 (s, 3H), 1.09-1.01 (m, 4H), 1.04 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 - 0.91 (m, 3H), 0.88 (s, 3H) 및
실시예 15: 백색 고형물로서 이성질체 2로서 (1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-(에톡시카르보닐)-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 이성질체 2 (2 mg, 11.43%). LCMS: m/e 799.55 (M+H)+, 2.778 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.44 - 5.31 (m, 1H), 5.20 (d, J=4.5 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.75 - 4.69 (m, 1H), 4.67 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.43 (m, 1H), 4.37 - 4.29 (m, 2H), 4.28 - 4.22 (m, 1H), 3.67 (br. s., 1H), 3.51 - 3.42 (m, 2H), 3.34 - 3.09 (m, 5H), 3.05 - 2.86 (m, 3H), 2.61 (d, J=5.8 Hz, 1H), 2.33 - 2.22 (m, 2H), 2.19 - 2.15 (m, 2H), 2.14 - 2.09 (m, 1H), 2.05 - 1.76 (m, 14H), 1.73 (s, 3H), 1.64 - 1.01 (m, 12H), 1.12 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -224.87 - -225.57 (m, 1F).
실시예 16
1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-카르복시-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실산의 제조
Figure pct00116
1,4-디옥산 (2 mL) 및 MeOH (1 mL) 중 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4,4-비스(에톡시카르보닐)피페리딘-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (5 mg, 6.09 μmol))의 용액에 소듐 하이드록사이드 (1 mL, 1.000 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 66℃에서 2 h 동안 교반시킨 다음, 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 Prep HPLC (방법 9)에 의해 정제시켜 표제 화합물을 필름 (0.8 mg, 15.46%)으로서 수득하였다. LCMS: m/e 765.60 (M+H)+, 2.928 min (방법 9).
실시예 17
1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-카르복시-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실산의 제조
Figure pct00117
표제 화합물을 1-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-카르복시-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)피페리딘-4,4-디카르복실산의 정제 동안 분리시켰다 (백색 고형물, 1.2 mg, 22.36%). LCMS: m/e 793.60 (M+H)+, 2.992 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.37 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.69 (s, 1H), 4.63 - 4.37 (m, 2H), 4.31 - 4.18 (m, 2H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 3.69 - 3.61 (m, 1H), 3.58 - 3.53 (m, 1H), 3.52 - 3.47 (m, 2H), 3.46 - 3.41 (m, 1H), 3.24 - 3.09 (m, 2H), 2.65 - 2.60 (m, 1H), 2.56 - 1.17 (m, 40H), 1.10 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.9 (s, 3H), 0.87 (s, 3H).
실시예 18
4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-카르복시-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실산의 제조
Figure pct00118
1,4-디옥산 (2 mL) 및 MeOH (1 mL) 중 에틸 4-(2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((R)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)에틸)티오모르폴린-3-카르복실레이트 (0.030 g, 0.035 mmol)의 용액에 소듐 하이드록사이드 (1 ml, 1.000 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 66℃에서 2 h 동안 교반시킨 후에, 투명한 용액이 형성되었다. 미정제 반응 혼합물을 Prep HPLC (방법 10)에 의해 정제시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (4.5 mg, 16.53%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 739.55 (M+H)+, 2.838 min (방법 9). 1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.21 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.85 - 4.80 (m, 1H), 4.75 - 4.68 (m, 1H), 4.63 - 4.51 (m, 1H), 4.49 - 4.37 (m, 1H), 3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.22 - 2.90 (m, 4H), 2.89 - 2.68 (m, 4H), 2.66 - 2.48 (m, 3H), 2.44 - 2.23 (m, 2H), 2.18 - 1.98 (m, 8H), 1.85 (d, J=12.5 Hz, 2H), 1.77 (d, J=4.0 Hz, 3H), 1.74 - 1.28 (m, 14H), 1.25 - 1.17 (m, 3H), 1.14 (d, J=11.3 Hz, 2H), 1.11 - 1.08 (m, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 - 0.89 (m, 3H). 19F NMR (376MHz, 메탄올-d4) δ -226.92 (m, 1F).
실시예 19
(R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00119
단계 1. (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
CH3CN (6 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이지리딘-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (230 mg, 0.337 mmol)에 티오모르폴린-3,5-디일디메탄올 (77 mg, 0.472 mmol), 소듐 아이오다이드 (55.6 mg, 0.371 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (215 mg, 1.012 mmol)를 첨가하였다. 생성된 현탁액을 15 h 동안 125℃에서 가열시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 소듐 바이카르보네이트의 수용액 및 염수로 세척하였다. 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 농축 건조시켰다. 미정제 물질을 실리카겔을 이용하여 정제시켜 회백색 고형물 (6 mg, 2.5%)을 수득하였다. LCMS: m/e 700.55 (M+H)+, 2.925 min (방법 9).
단계 2. (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (6 mg, 8.57 μmol)를 MeOH (2 mL) 및 디옥산 (2 mL)의 혼합물에 용해시켰다. 소듐 하이드록사이드 (1 ml, 1.000 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 15 h 동안 교반시키고, Prep HPLC (방법 9)에 의해 정제시켜 (R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물 (2.0 mg, 36.3%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 610.55 (M+H)+, 2.928 min (방법 9).
실시예 20 및 21을 제조하기 위한 일반적인 반응식
Figure pct00120
실시예 20
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소피롤리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00121
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소피롤리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
(S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.1 g, 0.152 mmol) 및 1-(2-클로로에틸)피롤리딘-2-온 (0.056 g, 0.381 mmol)을 함유하는 밀봉가능한 플라스크에 인산, 포타슘 염 (0.129 g, 0.610 mmol) 및 포타슘 아이오다이드 (0.038 g, 0.229 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 아세토니트릴 (2 mL)로 희석하고, 질소로 플러싱한 다음, 바이알을 밀봉시키고, 100℃로 21 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 rt로 냉각시키고, 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 디클로로메탄 중 0-5% 메탄올 구배 및 12g 실리카겔 컬럼을 이용하여 정제시켜 표제 화합물 (0.104 g, 0.136 mmol, 89% 수율)을 투명한 필름으로서 수득하였다. LCMS: m/e 767.6 (M+H)+, 2.20 min (방법 3).
단계 2. 1,4-디옥산 (2 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소피롤리딘-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.104 g, 0.136 mmol)의 용액에 NaOH (1N)(0.542 mL, 0.542 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃로 가열시켰다. 4.5 h의 가열 후, 혼합물을 rt로 냉각시키고, 역상 크로마토그래피에 의해 25-100% A 내지 B 구배 (A = 0.1% TFA 첨가된 9:1 물:아세토니트릴, B = 0.1% TFA 첨가된 1:9 물:아세토니트릴) 및 50 g C18 컬럼을 이용하여 정제시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물의 TFA 염 (0.076 g, 0.096 mmol, 71% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 677.4 (M+H)+, 1.73 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 아세트산 d4) δ 5.37 (br. s., 1H), 5.22 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.63 - 4.45 (m, 2H), 3.81 - 3.68 (m, 2H), 3.66 - 3.54 (m, 3H), 3.51 - 3.44 (m, 1H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.63 - 2.48 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 2.34 - 1.04 (m, 29H), 0.98 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H).
실시예 21
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((3-(2-옥소피롤리딘-1-일)프로필)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00122
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((3-(2-옥소피롤리딘-1-일)프로필)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
(S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.1 g, 0.152 mmol) 및 1-(3-클로로프로필)피롤리딘-2-온 (0.074 g, 0.457 mmol)을 함유하는 밀봉가능한 플라스크에 인산, 포타슘 염 (0.129 g, 0.610 mmol) 및 포타슘 아이오다이드 (0.038 g, 0.229 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 아세토니트릴 (2 mL)로 희석시키고, 질소로 플러싱한 다음, 바이알을 밀봉하고, 16 h 동안 100℃로 가열시켰다. 혼합물을 rt로 냉각시키고, 물 (10 mL)로 희석하고, 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-5% MeOH 구배 및 12g 실리카겔 컬럼을 이용하여 정제시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물 (0.074g, 0.095 mmol, 62% 수율)을 투명한 필름으로서 수득하였다. LCMS: m/e 781 (M+H)+, 2.20 min (방법 3).
단계 2. 1,4-디옥산 (2 mL) 및 메탄올 (0.4 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((3-(2-옥소피롤리딘-1-일)프로필)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.074 g, 0.095 mmol)의 용액에 1N NaOH (0.379 mL, 0.379 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃로 가온시켰다. 4h의 가열 후에, 혼합물을 rt로 냉각시키고, prep HPLC (방법 11)에 의해 정제시켰다. 생성물을 함유하는 분획을 합치고, 감압하에 농축시켜 표제 생성물의 TFA 염 (0.042g, 0.052 mmol, 55% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 691.5 (M+H)+, 1.73 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 아세트산 d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.65 - 4.47 (m, 2H), 3.56 - 3.41 (m, 4H), 3.28 - 3.16 (m, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.65 - 2.58 (m, 1H), 2.52 (t, J=8.1 Hz, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 2.36 - 1.06 (m, 31H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
실시예 22
(R)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-1-이소프로필-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00123
단계 1. (R)-2-(트리메틸실릴)에틸 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
테트라하이드로푸란 (10 mL) 중 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (180 mg, 0.248 mmol) 및 2-(트리메틸실릴)에틸 N,N'-디이소프로필카르브아미미데이트 (91 mg, 0.371 mmol)의 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 감압하에 농축시키고, 잔류물을 메탄올 (3 mL) 및 테트라하이드로푸란 (4 mL)으로 희석시켰다. 생성된 혼합물을 14 h 동안 실온에 두었다. 백색 고형물이 형성되었고, 여과에 의해 제거하였다. 여과액을 감압하에 농축시켰다. 이 잔류물을 메탄올 (2 mL) 및 물 (5 mL)로 처리하여 백색 침전물을 수득하였다. 고형물을 여과에 의해 수집하고, 디에틸 에테르 (4 mL)로 세척하여 표제 화합물을 백색 고형물 (130 mg, 60%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 827.8 (M+H)+, 2.39 min (방법 3).
단계 2. (R)-2-(트리메틸실릴)에틸 4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-1-이소프로필-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
테트라하이드로푸란 (2 mL) 및 메탄올 (1 mL) 중 (R)-2-(트리메틸실릴)에틸 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.060 mmol) 및 Pd-C (6.43 mg, 6.04 μmol)의 혼합물을 수소 대기 하에 20℃에서 31시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과시켜 팔라듐 촉매를 제거하고, 테트라하이드로푸란 (10 mL)으로 세척하였다. 여과액을 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (40 mg, 64%, 80% 순수)로서 수득하였다. LCMS: m/e 829.8 (M+H)+, 2.43 min (방법 3).
단계 3. 디옥산 (1mL) 중 (R)-2-(트리메틸실릴)에틸 4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-1-이소프로필-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (15 mg, 0.014 mmol) 및 테트라-N-부틸암모늄 플루오라이드 (101 mg, 0.289 mmol)의 혼합물을 20℃에서 5시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 0-70 아세토니트릴물/TFA에 의해 prep HPLC에 의해 정제시켜 요망되는 생성물을 무색 오일 (6 mg, 54%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 729.7 (M+H)+, 1.90 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, Acetic) δ 5.40 (br. s., 1H), 5.31 - 5.17 (m, 1H), 4.73 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.40 (m, 1H), 3.58 - 3.02 (m, 12H), 2.62 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.35 - 2.30 (m, 1H), 2.25 - 1.13 (m, 28H), 1.26 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.93 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.85 (d, J=6.8 Hz, 3H).
실시예 23
4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-1-이소프로필-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥산카르복실산의 제조
Figure pct00124
테트라하이드로푸란 (2 mL) 및 메탄올 (2 mL) 중 (R)-2-(트리메틸실릴)에틸 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (18 mg, 0.022 mmol) 및 Pd-C (4.63 mg, 4.35 μmol)의 혼합물을 20℃에서 3일 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트의 패드를 통해 여과한 다음 테트라하이드로푸란 (2 mL)으로 세척하고, 여과액을 감압하에 농축시켜 고형물을 제공하였다. 고형물을 테트라하이드로푸란 (2 mL)에 용해시키고, 테트라-N-부틸암모늄 플루오라이드 (152 mg, 0.435 mmol)를 반응물에 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2일 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 0-70 아세토니트릴/물/TFA에 의해 prep HPLC에 의해 정제시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (4 mg, 24%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 731.8 (M+H)+, 1.87 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 아세토니트릴-d3) δ 5.28 (dd, J=6.5, 1.6 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.31 (s, 1H), 3.27 - 2.97 (m, 11H), 2.94 - 2.83 (m, 1H), 2.20 - 1.24 (m, 32H), 1.16 (s, 3H), 1.13 - 1.11 (m, 1H), 1.05 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.92 (d, J=6.9 Hz, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.84 (d, J=6.6 Hz, 3H).
실시예 24
(1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2,6-디메틸-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00125
단계 1. 4-(2-클로로에틸)-2,6-디메틸티오모르폴린 1,1-디옥사이드의 제조
메탄올 (2 mL) 및 아세트산 (1 mL) 중 2,6-디메틸티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (100 mg, 0.613 mmol), 2-클로로아세트알데하이드 (135 mg, 0.858 mmol) 및 보란-2-피콜린 복합체 (72.1 mg, 0.674 mmol)의 혼합물을 rt에서 17시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 소듐 카르보네이트 (10 mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기상을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일 (90 mg, 65%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 226.2 (M+H)+, 0.54 min (방법 3).
단계 2. 아세토니트릴 (1 mL) 중 4-(2-클로로에틸)-2,6-디메틸티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (20.65 mg, 0.091 mmol), (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (30 mg, 0.046 mmol), 포타슘 아이오다이드 (8.35 mg, 0.050 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (48.5 mg, 0.229 mmol)의 혼합물을 120℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 rt로 냉각시키고, 증류수 (3 mL)로 켄칭시키고, 디클로로메탄 (3 x 3 mL)으로 추출하였다. 합친 유기상을 염수 (3 mL)로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 백색 고형물을 제공하였다. 이 고형물을 아세토니트릴 (1 mL)에 용해시키고, 소듐 하이드록사이드 (0.457 mL, 0.457 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열시킨 다음, 이것을 여과하고, 아세토니트릴/물/TFA에 의해 prep HPLC에 의해 정제시켜 (1R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2,6-디메틸-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 백색 고형물 (12 mg, 33%)로서 제공하였다. LCMS: m/e 755.8 (M+H)+, 1.96 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 메탄올-d4) δ 5.36 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.62 - 4.51 (m, 1H), 4.50 - 4.39 (m, 1H), 3.39-3.11 (m, 7H), 3.01 - 2.73 (m, 4H), 2.57 (d, J=17.7 Hz, 1H), 2.38 - 1.15 (m, 27H), 1.79 (s, 3H), 1.30 (dd, J=6.8, 3.3 Hz, 6H), 1.17 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
실시예 25
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2,6-디메틸-1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00126
아세토니트릴 (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (30 mg, 0.046 mmol), 4-(2-클로로에틸)-2,6-디메틸티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (20.65 mg, 0.091 mmol), 포타슘 아이오다이드 (8.35 mg, 0.050 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (48.5 mg, 0.229 mmol)의 혼합물을 120℃에서 16 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 rt로 냉각하고, 증류수 (3 mL)로 켄칭시키고, 디클로로메탄 (3 x 3 mL)으로 추출하였다. 합친 유기상을 염수 (3 mL)로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 백색 고형물을 제공하였다. 이 백색 고형물을 아세토니트릴 (1 mL)에 용해시키고, 소듐 하이드록사이드 (0.457 mL, 0.457 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 3 h 동안 가열시키고, 여과하고, 아세토니트릴/물/TFA에 의해 prep HPLC에 의해 정제시켜 표제 화합물을 백색 고형물 (12 mg, 33%)로서 제공하였다. LCMS: m/e 755.8 (M+H)+, 1.92 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.6 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.76 (d, J=1.3 Hz, 1H), 4.61 - 4.51 (m, 1H), 4.50 - 4.38 (m, 1H), 3.39- 3.07 (m, 7H), 3.01 - 2.73 (m, 4H), 2.57 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.37 - 1.20 (m, 27H), 1.78 (s, 3H), 1.30 (dd, J=6.7, 3.1 Hz, 6H), 1.17 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H).
실시예 26
(1R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(6-메틸-1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00127
단계 1. 4-(2-클로로에틸)-6-메틸-1,4-티아제판 1,1-디옥사이드의 제조
메탄올 (1 mL) 및 아세트산 (0.5 mL) 중 6-메틸-1,4-티아제판 1,1-디옥사이드 (100 mg, 0.613 mmol), 2-클로로아세트알데하이드 (0.107 mL, 0.858 mmol) 및 보란-2-피콜린 복합체 (72.1 mg, 0.674 mmol)의 혼합물을 rt에서 17시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 소듐 카르보네이트 (3 mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (3 x 2 mL)로 추출하였다. 합친 유기상을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일 (105 mg, 76%)로서 수득하였다. LCMS: m/e 226.2 (M+H)+, 0.33 min (방법 3).
단계 2. 아세토니트릴 (1 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (20 mg, 0.030 mmol), 4-(2-클로로에틸)-6-메틸-1,4-티아제판 1,1-디옥사이드 (27.5 mg, 0.122 mmol), 포타슘 아이오다이드 (5.57 mg, 0.034 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (32.4 mg, 0.152 mmol)의 혼합물을 120℃에서 16 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 rt로 냉각시키고, 증류수 (3 mL)로 켄칭시키고, 디클로로메탄 (3 x 2 mL)으로 추출하였다. 합친 유기상을 염수 (3 mL)로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 요망되는 중간체 백색 고형물을 제공하였다. 이 고형물을 디옥산 (1 mL)에 용해시키고, 소듐 하이드록사이드 (0.305 mL, 0.305 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 3 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 0-70 아세토니트릴/물/TFA에 의해 prep HPLC에 의해 정제시켜 (1R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(6-메틸-1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산을 무색 오일 (9.8 mg, 40%)로서 제공하였다. LCMS: m/e 755.9 (M+H)+, 1.93 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 메탄올-d4) δ 5.36 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.61 - 4.51 (m, 1H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.69 - 3.14 (m, 9H), 3.11 - 2.75 (m, 4H), 2.57 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.49 - 2.24 (m, 2H), 2.22 - 1.15 (m, 26H), 1.78 (s, 3H), 1.19 (d, J=3.0 Hz, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.09 (dd, J=7.0, 4.8 Hz, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (d, J=2.0 Hz, 3H).
실시예 27
(1S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(6-메틸-1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00128
아세토니트릴 (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (20 mg, 0.030 mmol), 4-(2-클로로에틸)-6-메틸-1,4-티아제판 1,1-디옥사이드 (34.4 mg, 0.152 mmol), 포타슘 아이오다이드 (5.57 mg, 0.034 mmol) 및 포타슘 포스페이트 (32.4 mg, 0.152 mmol)의 혼합물을 120℃에서 16 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 rt로 냉각시키고, 증류수 (3 mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄 (3 x 2 mL)으로 추출하였다. 합친 유기상을 염수 (3 mL)로 세척하고, 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 백색 고형물을 제공하였다. 이 고형물을 디옥산 (1 mL)에 용해시키고, 소듐 하이드록사이드 (0.305 mL, 0.305 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 3 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 0-70 아세토니트릴/물/TFA에 의해 prep HPLC에 의해 정제시켜 표제 화합물을 무색 오일 (6 mg, 25%)로서 제공하였다. LCMS: m/e 755.9 (M+H)+, 1.90 min (방법 3). 1H NMR (500MHz, 메탄올-d4) δ 5.35 (br. s., 1H), 5.22 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 4.76 (s, 1H), 4.62 - 4.51 (m, 1H), 4.51 - 4.40 (m, 1H), 3.67 - 3.15 (m, 9H), 3.10 - 2.75 (m, 4H), 2.57 (d, J=18.1 Hz, 1H), 2.49 - 2.23 (m, 2H), 2.21 - 1.14 (m, 26H), 1.78 (s, 3H), 1.22 - 1.17 (m, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.10 - 1.06 (m, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s, 3H).
실시예 28
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((카르복시메틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00129
단계 1. 2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)아세트산의 제조.
메탄올 (1 mL), THF (1 mL) 및 아세트산 (0.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.250 g, 0.381 mmol) 및 2-옥소아세트산 모노하이드레이트 (0.053 g, 0.572 mmol)의 혼합물을 보란 2-피콜린 복합체 (0.061 g, 0.572 mmol)로 처리하였다. 첨가시에 혼합물에 즉시 거품이 일었고 이를 rt에서 교반시켰다. 2.5h 교반 후에, 혼합물을 추가의 보란 2-피콜린 복합체 (0.061 g, 0.572 mmol) 및 2-옥소아세트산 모노하이드레이트 (0.053 g, 0.572 mmol)로 처리하고, 생성된 용액을 추가 96 h 동안 rt에서 교반시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 14)에 의해 정제시켜 요망되는 물질 (0.213 g, 78% 수율)을 무색 유리질 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 714.4 (M+H)+, 2.63 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 7.59 (s, 2H), 7.38 - 7.26 (m, 3H), 5.31 (br. s., 1H), 5.21 - 5.12 (m, 2H), 5.10 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.61 - 4.38 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 3.50 (s, 2H), 2.70 - 2.54 (m, 2H), 2.12 (d, J=7.8 Hz, 3H), 2.08 - 1.87 (m, 6H), 1.84 - 1.67 (m, 8H), 1.67 - 1.57 (m, 3H), 1.56 - 1.40 (m, 6H), 1.40 - 1.28 (m, 3H), 1.28 - 1.21 (m, 1H), 1.17 (s, 3H), 1.11 - 1.00 (m, 4H), 0.93 - 0.82 (m, 9H).
단계 2. 2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)아세트산 TFA 염 (0.050 g, 0.060 mmol)을 LiOH, 1M 수성 (0.483 mL, 0.483 mmol) 및 THF (0.5 mL) 및 MeOH (0.5 mL)의 혼합물과 합쳤다. 생성된 혼합물을 80℃에서 30분 동안 교반시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 15)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0318 g, 71% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 624.4 (M+H)+, 2.43 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.18 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.60 - 4.39 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 3.43 (s, 2H), 2.65 (td, J=11.0, 5.1 Hz, 1H), 2.55 (d, J=17.9 Hz, 1H), 2.29 - 2.11 (m, 2H), 2.11 - 1.86 (m, 7H), 1.85 - 1.66 (m, 8H), 1.66 - 1.43 (m, 8H), 1.43 - 1.24 (m, 4H), 1.18 (s, 4H), 1.14 - 1.01 (m, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
실시예 29
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00130
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
PTFE 라인드 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)아세트산, TFA (0.025 g, 0.030 mmol)를 THF (1 mL) 중 티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (10.20 mg, 0.075 mmol) 및 HATU (0.029 g, 0.075 mmol)와 합쳤다. 혼합물에 DIPEA (0.026 mL, 0.151 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 밤새 rt에서 교반시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 16)에 의해 정제시켜 생성물 (0.0269 g, 94% 수율)을 백색 분말 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 831.5 (M+H)+, 2.50 min (방법 1).
단계 2. PTFE 라인드 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트, TFA (0.0269 g, 0.028 mmol)를 LiOH, 1M 수성 (0.063 mL, 0.063 mmol) 및 THF (0.5 mL) 및 MeOH (0.5 mL)의 혼합물과 합쳤다. 생성된 혼합물을 70℃에서 30분, 이어서 80 ℃로 1h 동안 교반시켰다. 추가의 LiOH, 1M 수성 (0.080 mL, 0.080 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70℃로 20분, 이어서 80℃로 30분 동안 가열시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 4)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0178 g, 66% 수율)을 백색 유리질 고형물 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS: m/z 741.5 (M+H)+, 2.34 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.59 - 4.40 (dm, J=47.2 Hz, 2H), 4.33 - 4.21 (m, 2H), 4.13 - 3.86 (m, 4H), 3.25 (t, J=4.9 Hz, 2H), 3.18 (t, J=4.9 Hz, 2H), 2.76 - 2.65 (m, 1H), 2.55 (d, J=16.4 Hz, 1H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 2H), 2.07 - 1.91 (m, 5H), 1.91 - 1.71 (m, 7H), 1.71 - 1.20 (m, 14H), 1.18 (s, 3H), 1.15 - 1.02 (m, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 30
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00131
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
PTFE 라인드 스크류 캡을 지닌 1 드램 바이알에서 2-(((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-((S)-4-((벤질옥시)카르보닐)-4-(플루오로메틸)사이클로헥스-1-엔-1-일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-일)아미노)아세트산, TFA (0.025 g, 0.030 mmol)를 THF (1 mL) 중 4-메틸피페리딘-4-올 (8.69 mg, 0.075 mmol) 및 HATU (0.029 g, 0.075 mmol)와 합쳤다. 혼합물에 DIPEA (0.026 mL, 0.151 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 밤새 rt에서 교반시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 16)에 의해 정제시켜 생성물 (0.0280 g, 100% 수율)을 유리질 고형물 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS: m/z 811.6 (M+H)+, 2.54 min (방법 1).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트, TFA (0.028 g, 0.030 mmol)를 1,2-디클로로에탄 (1 mL)에 용해시키고, 생성된 용액에 트리에틸아민 (10.97 μl, 0.079 mmol), 3차-부틸디메틸실란 (0.015 mL, 0.091 mmol) 및 팔라듐(II) 아세테이트 (1.699 mg, 7.57 μmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 플러싱하고, 60℃로 1h 동안 가열시켰다. 그 후 혼합물을 질소 스트림을 통해 잔류물로 농축시킨 다음 THF (0.8 mL)에 재용해시켰다. 혼합물에 THF 중 TBAF, 1.0M (0.106 mL, 0.106 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 rt에서 30분 동안 교반시켰다. 미정제 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 16)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0204 g, 79% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS: m/z 721.5 (M+H)+, 2.16 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.44 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 4.13 - 3.96 (m, 1H), 3.96 - 3.80 (m, 1H), 3.53 - 3.45 (m, 2H), 2.73 - 2.60 (m, 1H), 2.60 - 2.49 (m, 1H), 2.28 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 1.92 (m, 7H), 1.90 - 1.71 (m, 7H), 1.71 - 1.45 (m, 13H), 1.45 - 1.30 (m, 4H), 1.28 (d, J=4.2 Hz, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.10 (d, J=6.8 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 31
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00132
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 4-(메틸설포닐)피페리딘 (0.012 g, 0.075 mmol)을 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0205 g, 2단계에 걸쳐 70% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 769.4 (M+H)+, 2.33 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.72 - 4.61 (m, 2H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.22 - 4.06 (m, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 2H), 3.29 - 3.13 (m, 1H), 3.00 - 2.87 (m, 4H), 2.73 - 2.62 (m, 1H), 2.55 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.28 - 2.19 (m, 3H), 2.19 - 2.11 (m, 1H), 2.11 - 1.92 (m, 7H), 1.89 - 1.75 (m, 5H), 1.74 (s, 3H), 1.71 - 1.60 (m, 4H), 1.58 (br. s., 1H), 1.55 - 1.41 (m, 5H), 1.40 - 1.25 (m, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.13 - 1.08 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 32
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-모르폴리노-2-옥소에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00133
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 모르폴린 (6.58 μl, 0.075 mmol)을 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0185 g, 2단계에 걸쳐 74% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 693.4 (M+H)+, 2.35 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1;1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.05 (d, J=15.2 Hz, 1H), 3.88 (d, J=15.9 Hz, 1H), 3.78 - 3.71 (m, 4H), 3.71 - 3.64 (m, 2H), 3.53 - 3.45 (m, 2H), 2.72 - 2.61 (m, 1H), 2.55 (d, J=16.4 Hz, 1H), 2.19 (d, J=19.3 Hz, 2H), 2.13 - 2.07 (m, 1H), 2.07 - 1.90 (m, 6H), 1.88 - 1.75 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.72 - 1.56 (m, 5H), 1.56 - 1.42 (m, 5H), 1.42 - 1.25 (m, 4H), 1.19 (s, 4H), 1.15 - 1.08 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 33
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(4-(메틸설포닐)피페라진-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00134
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 1-(메틸설포닐)피페라진 (0.012 g, 0.075 mmol)을 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0210 g, 2단계에 걸쳐 77% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 770.5 (M+H)+, 2.33 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.48 - 4.40 (m, 1H), 4.21 (d, J=16.1 Hz, 1H), 3.96 (d, J=15.9 Hz, 1H), 3.92 - 3.83 (m, 1H), 3.73 (ddd, J=13.6, 7.3, 3.3 Hz, 1H), 3.67 - 3.52 (m, 2H), 3.31 - 3.20 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.71 (td, J=11.1, 4.9 Hz, 1H), 2.55 (d, J=15.9 Hz, 1H), 2.29 - 2.13 (m, 2H), 2.13 - 1.91 (m, 7H), 1.89 - 1.71 (m, 7H), 1.71 - 1.60 (m, 4H), 1.60 - 1.41 (m, 6H), 1.41 - 1.21 (m, 4H), 1.19 (s, 4H), 1.13 - 1.08 (m, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 34
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도-1,4-티아제판-4-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00135
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 1,4-티아제판 1,1-디옥사이드 (0.011 g, 0.075 mmol)를 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0188 g, 2단계에 걸쳐 70% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 755.4 (M+H)+, 2.32 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 1H), 4.25 - 4.10 (m, 1H), 4.04 - 3.91 (m, 2H), 3.91 - 3.81 (m, 1H), 3.81 - 3.66 (m, 3H), 3.66 - 3.48 (m, 1H), 3.41 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.30 - 3.23 (m, 1H), 2.77 - 2.64 (m, 1H), 2.55 (d, J=17.9 Hz, 1H), 2.32 - 2.13 (m, 3H), 2.13 - 1.91 (m, 8H), 1.90 - 1.75 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.71 - 1.60 (m, 4H), 1.59 - 1.44 (m, 5H), 1.44 - 1.29 (m, 4H), 1.19 (d, J=2.2 Hz, 4H), 1.10 (d, J=7.1 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 35
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티아졸리딘-3-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00136
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 티아졸리딘 1,1-디옥사이드 (9.15 mg, 0.075 mmol)를 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0117 g, 2단계에 걸쳐 45% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 727.4 (M+H)+, 2.31 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=6.1 Hz, 1H), 4.81 (s, 1H), 4.72 (br. s., 1H), 4.64 (br. s., 1H), 4.47 - 4.40 (m, 1H), 4.19 - 4.08 (m, 2H), 4.01 - 3.84 (m, 1H), 3.49 (t, J=6.1 Hz, 1H), 3.41 (t, J=7.2 Hz, 1H), 2.74 - 2.63 (m, 1H), 2.55 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.30 - 2.12 (m, 2H), 2.09 (br. s., 1H), 2.07 - 1.92 (m, 5H), 1.92 - 1.75 (m, 4H), 1.73 (s, 3H), 1.69 - 1.44 (m, 9H), 1.44 - 1.36 (m, 2H), 1.36 - 1.24 (m, 2H), 1.17 (d, J=4.6 Hz, 3H), 1.14 - 1.01 (m, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 36
(1S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(3-(메틸설포닐)피롤리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00137
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 3-(메틸설포닐)피롤리딘 (0.011 g, 0.075 mmol)을 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0117 g, 2단계에 걸쳐 57% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 755.4 (M+H)+, 2.31 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.74 (br. s., 1H), 4.47 - 4.39 (m, 1H), 4.19 - 3.97 (m, 2H), 3.97 - 3.81 (m, 3H), 3.81 - 3.61 (m, 2H), 3.09 - 3.01 (m, 3H), 2.75 - 2.46 (m, 4H), 2.30 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 1.91 (m, 7H), 1.88 - 1.75 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.71 - 1.61 (m, 4H), 1.59 - 1.42 (m, 6H), 1.41 - 1.29 (m, 3H), 1.26 (br. s., 1H), 1.19 (s, 4H), 1.10 (d, J=8.6 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.90 (s, 3H).
실시예 37
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1S,4S)-2,2-디옥시도-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-5-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조.
Figure pct00138
표제 화합물을 단계 1에서 4-메틸피페리딘-4-올 대신 (1S,4S)-2-티아-5-아자바이사이클로[2.2.1]헵탄 2,2-디옥사이드, 하이드로브로마이드 (0.017 g, 0.075 mmol)를 이용한 것을 제외하고, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)-2-옥소에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조를 위해 이용된 것과 동일한 절차에 의해 제조하였다. 미정제 단계 2 혼합물을 역상 예비 HPLC (Prep HPLC 방법 12)에 의해 정제시켜 표제 화합물 (0.0154 g, 2단계에 걸쳐 57% 수율)을 백색 고형물 TFA 염으로서 제공하였다. LCMS: m/z 753.4 (M+H)+, 2.31 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, CDCl3 및 CD3OD의 1:1 혼합물, CD3OD lock) δ 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 1H), 5.11 (d, J=3.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.76 - 4.70 (m, 1H), 4.48 - 4.39 (m, 1H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.99 - 3.84 (m, 2H), 3.84 - 3.69 (m, 1H), 3.30 - 3.13 (m, 2H), 2.75 - 2.60 (m, 2H), 2.60 - 2.42 (m, 2H), 2.29 - 2.12 (m, 2H), 2.12 - 1.90 (m, 7H), 1.87 - 1.75 (m, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.72 - 1.59 (m, 4H), 1.59 - 1.41 (m, 6H), 1.41 - 1.21 (m, 4H), 1.21 - 1.15 (m, 4H), 1.10 (d, J=7.6 Hz, 1H), 1.07 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.89 (s, 3H).
실시예 38
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA의 제조.
Figure pct00139
단계 1. (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-9-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-카르복실산의 제조.
DCE (20 mL) 및 아세트산 (5 mL) 중 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-벤질 5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-9-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-카르복실레이트 (1.500 g, 2.216 mmol)의 용액에 N2(g) 대기 하에 팔라듐 블랙 (0.047 g, 0.443 mmol)을 첨가하였다. 반응 용기를 H2(g)로 퍼징하고, H2(g) 대기 하에 5h 동안 교반시키고, 여과하고, DCM (50 mL)으로 세척하고, 백색 고형물로 농축시켰다. 미정제 물질을 최소 DCM 및 헥산으로 분쇄하고, 백색 슬러리로 농축시키고, 여과하고, 헥산으로 세척하여 요망되는 생성물의 첫 번째 수확물을 수득하였다. 액체 여과물을 백색 슬러리로 추가로 농축시키고, 여과하고, 헥산으로 세척하여 두 번째 수확물을 수득하였다. 둘 모두의 수확물을 합치고, 진공 하에 건조시켜 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-9-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-카르복실산 (1.1 g, 1.875 mmol, 85% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 587.2 (M+H)+, 3.23 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.57 (d, J=3.9 Hz, 1H), 4.76 (br. s., 1H), 4.63 (br. s., 1H), 3.03 (br. s., 1H), 2.46 - 2.10 (m, 3H), 2.00 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.81 - 1.63 (m, 6H), 1.59 - 1.32 (m, 12H), 1.25 (br. s., 3H), 1.13 (br. s., 3H), 1.02 (br. s., 3H), 1.00 (br. s., 6H), 0.93 (br. s., 3H). 13C NMR (101MHz, 클로로포름-d) δ 182.0, 155.4, 150.3, 113.7, 109.8, 56.4, 53.3, 49.2, 48.9, 46.9, 42.5, 40.6, 40.3, 38.5, 37.9, 37.1, 36.4, 33.3, 32.1, 30.6, 29.7, 27.5, 25.5, 21.4, 19.4, 19.39 - 19.33, 18.9, 16.2, 15.7, 14.6. 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -74.82 (br. s., 3F).
단계 2. (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트의 제조.
DCM (10 mL) 중 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-9-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-3a-카르복실산 (0.500 g, 0.852 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.520 mL, 2.98 mmol)의 용액에 HATU (0.389 g, 1.023 mmol) 및 4-(2-아미노에틸)티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (0.182 g, 1.023 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 rt (10:25 am)에서 교반시켰다. 2h 후, 반응물을 DCM으로 희석하고, 20 mL 5% 수성 시트르산으로 세척하였다. 수성층을 DCM (25 mL)으로 추출하였다. 합친 유기물을 10% Na2CO3, 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 투명한 점성 오일로 농축시켰다. 미정제 물질을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 24 g Isco 카트리지, 97:3 DCM:MeOH로 용리됨)에 의해 정제시키고, 진공 하에 건조시켜 (1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (394 mg, 0.527 mmol, 61.9% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 747.5 (M+H)+, 2.75 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.87 (t, J=5.4 Hz, 1H), 5.56 (dd, J=6.6, 1.7 Hz, 1H), 4.74 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.61 (s, 1H), 3.37 (q, J=6.0 Hz, 2H), 3.15 - 3.07 (m, 1H), 3.05 (s, 7H), 2.66 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.56 - 2.46 (m, 1H), 2.16 (dd, J=17.1, 6.8 Hz, 1H), 1.97 - 1.88 (m, 2H), 1.79 - 1.71 (m, 3H), 1.69 (s, 3H), 1.66 - 1.54 (m, 3H), 1.52 - 1.30 (m, 10H), 1.25 - 1.16 (m, 2H), 1.12 (s, 3H), 1.10 - 1.06 (m, 1H), 1.01 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.91 (s, 3H). 13C NMR (101MHz, 클로로포름-d) δ 176.3, 155.3, 150.6, 113.7, 109.6, 55.7, 55.6, 53.3, 51.3, 50.7, 50.0, 49.0, 46.8, 42.5, 40.6, 40.2, 38.6, 38.4, 37.9, 37.8, 36.3, 36.3, 33.8, 33.5, 30.8, 29.4, 27.4, 25.5, 21.5, 19.5, 19.4, 19.0, 16.2, 15.9, 14.6. 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -74.83 (s, 3F).
단계 3. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트, TFA의 제조.
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일 트리플루오로메탄설포네이트 (250 mg, 0.335 mmol), (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (150 mg, 0.402 mmol) 및 Buchwald 예비촉매 13 (92371-003-01) (10.53 mg, 0.013 mmol)을 합쳤다. 반응 용기를 15분 동안 진공 오븐에서 비운 다음 다시 N2(g)로 재충전시켰다. 반응 플라스크에 N2(g)로 미리-살포된 THF (4 mL) 및 수성 0.5 M K3PO4 (1.673 mL, 0.837 mmol)를 담았다. 반응 혼합물을 N2(g)로 살포하고, 72℃에서 15h 동안 교반시키고, 밤새 rt으로 냉각되게 하였다. 반응물을 EtOAc (50 mL)로 희석시키고, 1.5N K3PO4로 세척하였다. 수성층을 EtOAc (50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 갈색 점성 오일로 농축시켰다. 미정제 물질을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (실리카겔, 12g, 97:3 DCM:MeOH로 용리됨)에 의해 정제하고, 건조시켜 여전히 몇몇 불순물로 오염된 생성물을 수득하였다. 이 물질을 역상 prep-HPLC (prep-HPLC 방법 8)에 의해 추가로 정제시키고, 진공 하에 건조시켜 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트, TFA (161 mg, 0.166 mmol, 49.6% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 845.7 (M+H)+, 3.25 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 - 7.30 (m, 5H), 6.78 (br. s., 1H), 5.32 (br. s., 1H), 5.24 - 5.14 (m, 2H), 5.11 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.60 - 4.54 (m, 1H), 4.50 - 4.40 (m, 1H), 3.82 - 3.57 (m, 6H), 3.46 (br. s., 4H), 3.25 (t, J=5.6 Hz, 2H), 3.05 (td, J=11.0, 3.9 Hz, 1H), 2.60 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.41 - 2.31 (m, 1H), 2.24 - 2.03 (m, 4H), 2.02 - 1.90 (m, 3H), 1.88 - 1.72 (m, 3H), 1.69 (s, 3H), 1.66 - 1.61 (m, 1H), 1.60 - 1.46 (m, 4H), 1.46 - 1.18 (m, 10H), 1.05 (d, J=8.8 Hz, 2H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 6H), 0.87 (s, 3H), 0.84 (s, 3H).
단계 4. THF (1.0 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트, TFA (96 mg, 0.100 mmol)의 용액에 1N 리튬 하이드록사이드 (0.500 mL, 0.500 mmol)의 용액을 첨가하고, 60℃ (11:25 AM)에서 교반시켰다. 2h 후에, LC/MS는 완료된 반응을 나타내었고, 이것이 rt으로 냉각되게 하였다. 반응 혼합물을 역상 prep-HPLC (prep-HPLC 방법 12)에 의해 정제시키고, 진공 하에 건조시켜 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)카르바모일)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (66.1 mg, 0.075 mmol, 75% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 755.5 (M+H)+, 2.69 min (방법 1). 1H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:메탄올-d4) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.69 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.45 - 4.36 (m, 1H), 3.09 (s, 6H), 3.06 - 3.01 (m, 1H), 2.67 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.57 - 2.45 (m, 2H), 2.30 - 2.19 (m, 1H), 2.12 (br. s., 1H), 2.08 - 2.04 (m, 1H), 2.02 (br. s., 1H), 2.00 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.81 (m, 1H), 1.80 - 1.69 (m, 3H), 1.67 (s, 3H), 1.63 - 1.52 (m, 3H), 1.50 - 1.30 (m, 10H), 1.29 - 1.14 (m, 5H), 1.09 - 0.99 (m, 2H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.94 (br. s., 3H), 0.89 (s, 3H), 0.84 (s, 3H).). 13C NMR (101MHz, 1:1 CD3Cl3:메탄올-d4) δ 178.7, 178.0, 151.6, 148.9, 140.0, 122.3, 122.2, 110.0, 78.6, 56.6, 56.2, 53.9, 51.7, 51.5, 50.9, 50.4, 47.6, 46.2, 46.1, 43.2, 42.6, 41.4, 39.0, 38.7, 38.3, 37.1, 36.9, 34.57 - 34.44, 33.9, 31.6, 30.3, 30.2, 29.9, 29.8, 27.1, 26.6, 22.2, 22.1, 20.45 - 20.36 (m, 1C), 19.8, 16.9, 16.5, 15.1. 19F NMR (376MHz, 1:1 CDCl3:메탄올-d4) δ -76.79 (s, 3F), -226.23 (t, J=47.7 Hz, 1F).
실시예 39 및 실시예 40: (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (이성질체 A) 및 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA 이성질체 B)의 제조.
Figure pct00140
단계 1. (1S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((1,1,1-트리플루오로-3-니트로프로판-2-일)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트.
DCM (2 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (190 mg, 0.290 mmol)의 용액에 (1E)-3,3,3-트리플루오로-1-니트로프로-렌 (64.5 mg, 0.434 mmol)을 첨가하고, rt에서 교반시켰다. 16h 후, 반응물을 갈색 점성 오일로 농축시키고, 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 24 g Isco 카트리지, 9:1 Hex:EtOAc로 용리됨)에 의해 정제시키고, 진공 하에 건조시켜 (1S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((1,1,1-트리플루오로-3-니트로프로판-2-일)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (171.2 mg, 0.215 mmol, 74.2% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 797.5 (M+H)+, 4.55 min (방법 10).
단계 2. (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트.
THF (1 mL) 중 (1S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-3a-((1,1,1-트리플루오로-3-니트로프로판-2-일)아미노)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (26 mg, 0.033 mmol)의 용액에 1N HCl (0.489 mL, 0.489 mmol)을 첨가하였다. 생성된 슬러리에 THF 중 1.5N Rieke 아연 용액 (0.217 mL, 0.326 mmol)을 첨가하였다. 생성된 회색 슬러리에 MeOH (1 mL)을 첨가하였다. 반응물은 균질한 용액이 되었고, 이를 rt에서 밤새 교반시켰다. 15h 후에, 반응물을 농축시켰다. 생성된 잔류물을 THF (5 mL)로 용해시키고, 1.5 K3PO4 (5 mL)로 중화시키고, 혼합물을 2 x 25 mL EtOAc로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 백색 포움으로 농축시켰다. 물질은 미정제로서 다음 단계에 이용되었다. LCMS: m/e 767.6 (M+H)+, 4.96 min (방법 10).
단계 3. (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (이성질체 A) 및 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA 이성질체 B).
THF (1 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 실험 99699-178로부터의 미정제 물질, (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (25 mg, 0.033 mmol)의 용액에 1N 리튬 하이드록사이드 (0.114 mL, 0.114 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응물을 65℃에서 교반시켰다. 4h 후에, 반응물이 rt으로 냉각되게 하고, 역상 prep-HPLC (prep-방법 13)에 의해 정제시키고, 진공 하에 건조시켜 이성질체 A, (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA 및 이성질체 B, (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA를, 둘 모두 백색 고형물로서 수득하였다.
실시예 39: 이성질체 A: LCMS: m/e 675.8 (M+H)+, 4.29 min (방법 11). 1H NMR (400MHz, 1:1 클로로포름-d :메탄올-d4) δ 5.31 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.72 (br. s., 1H), 4.67 (br. s., 1H), 4.54 - 4.49 (m, 2H), 4.45 - 4.38 (m, 2H), 4.25 (br. s., 2H), 3.73 (t, J=6.5 Hz, 2H), 3.59 (br. s., 1H), 3.15 - 3.05 (m, 1H), 3.03 - 2.96 (m, 1H), 2.69 (td, J=11.0, 5.6 Hz, 1H), 2.53 (d, J=18.3 Hz, 1H), 2.17 (d, J=18.6 Hz, 2H), 2.05 (d, J=18.1 Hz, 1H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.89 - 1.84 (m, 2H), 1.82 - 1.71 (m, 4H), 1.68 (s, 3H), 1.66 - 1.61 (m, 1H), 1.56 (d, J=16.4 Hz, 1H), 1.44 (d, J=6.4 Hz, 6H), 1.38 - 1.22 (m, 5H), 1.20 (s, 1H), 1.07 (br. s., 2H), 1.04 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.91 (s, 2H), 0.85 (s, 3H). 19F NMR-1H 비커플링됨 (376MHz, 1:1 클로로포름-d :메탄올-d4) δ -73.36 (s, 3F), -76.38 (s, 3F), -226.33 (s, 1F). 19F NMR (376MHz, 1:1 클로로포름-d :메탄올-d4) δ -73.37 (d, J=6.9 Hz, 3F), -76.39 (s, 3F), -226.14 - -226.54 (m, 1F).
실시예 40: 이성질체 B: LCMS: m/e 675.7 (M+H)+, 4.63 min (방법 11). 1H NMR (400MHz, 1:1 클로로포름-d :메탄올-d4) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.16 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 3.72 (t, J=6.6 Hz, 1H), 3.64 (dd, J=7.2, 3.5 Hz, 1H), 3.24 - 3.15 (m, 1H), 3.14 - 3.04 (m, 1H), 2.62 - 2.46 (m, 2H), 2.30 - 2.11 (m, 2H), 2.10 - 2.00 (m, 2H), 1.99 - 1.89 (m, 4H), 1.86 (dt, J=6.7, 3.2 Hz, 1H), 1.80 - 1.70 (m, 3H), 1.68 (s, 3H), 1.66 (br. s., 1H), 1.64 - 1.57 (m, 1H), 1.55 - 1.48 (m, 3H), 1.47 - 1.38 (m, 5H), 1.38 - 1.29 (m, 2H), 1.28 - 1.18 (m, 2H), 1.12 (br. s., 2H), 1.07 (s, 3H), 1.04 (br. s., 1H), 0.97 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 1:1 클로로포름-d :메탄올-d4) δ -73.84 (s, 3F), -76.35 (s, 5F), -226.26 (s, 1F).
실시예 41 및 실시예 42
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (이성질체 A) 및 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (이성질체 B)의 제조.
Figure pct00141
단계 1. (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조.
2-프로판올 (3 mL) 중 (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-아미노-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (107 mg, 0.139 mmol)의 용액에 디비닐 설폰 (0.020 mL, 0.167 mmol)을 첨가하고, 85℃에서 교반시켰다. 22h 후에, 반응물을 rt로 냉각시키고, 농축시켜 (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 점성 갈색 오일로서 수득하였고, 이것을 다음 단계에 바로 이용하였다.
단계 2. (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (이성질체 A) 및 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (이성질체 B)의 제조.
(1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 THF (1 mL) 및 MeOH (1 mL)에 용해시키고, 1N 리튬 하이드록사이드 (0.697 mL, 0.697 mmol)의 용액으로 처리하고, 65℃로 4h 동안 가열시키고, rt으로 냉각되게 하였다. 반응 내용물을 하기 prep-방법을 이용하여 역상 HPLC 정제로 처리하고, 진공 하에 건조시켜, 이성질체 A를 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (32 mg, 0.035 mmol, 24.98% 수율)로서 그리고 이성질체 B를 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-1,1,1-트리플루오로프로판-2-일)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, TFA (24.3 mg, 0.026 mmol, 18.97% 수율)로서 수득하였고, 둘 모두는 백색 고형물이었다.
실시예 41: 이성질체 A: LCMS: m/e 795.6 (M+H)+, 4.11 min (방법 11). 1H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:메탄올-d4) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.16 (t, J=4.0 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.70 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 4.21 - 4.06 (m, 1H), 3.23 - 2.94 (m, 10H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.70 - 2.46 (m, 3H), 2.44 - 2.27 (m, 1H), 2.26 - 2.12 (m, 3H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 2.00 - 1.85 (m, 4H), 1.81 - 1.69 (m, 3H), 1.68 (s, 1H), 1.66 (s, 2H), 1.61 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.58 - 1.51 (m, 1H), 1.51 - 1.34 (m, 7H), 1.34 - 1.18 (m, 4H), 1.11 - 1.05 (m, 1H), 1.04 (s, 2H), 0.98 (s, 1.5H), 0.96 (s, 1.5H), 0.94 (s, 6H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 1.5H), 0.85 (br. s., 1.5H).
실시예 42: 이성질체 B: LCMS: m/e 795.6 (M+H)+, 4.19 min (방법 11). 1H NMR (400MHz, 1:1 CDCl3:메탄올-d4) δ 5.30 (br. s., 1H), 5.20 - 5.14 (m, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.77 - 4.67 (m, 1H), 4.60 - 4.48 (m, 3H), 3.86 (d, J=3.4 Hz, 1H), 3.21 - 2.99 (m, 9H), 2.96 - 2.71 (m, 2H), 2.70 - 2.57 (m, 2H), 2.52 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.34 - 2.12 (m, 3H), 2.05 (d, J=19.1 Hz, 2H), 2.01 - 1.89 (m, 3H), 1.81 - 1.67 (m, 4H), 1.66 (s, 3H), 1.62 - 1.54 (m, 2H), 1.54 - 1.36 (m, 7H), 1.35 - 1.12 (m, 5H), 1.07 (br. s., 1H), 1.05 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 1H), 0.93 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.84 (s, 3H).
실시예 43
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)설포닐)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, 2 TFA의 제조.
Figure pct00142
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)설포닐)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트.
DCE (1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (0.100 g, 0.152 mmol)의 용액에 디비닐 설폰 (0.037 mL, 0.305 mmol)을 첨가하고, 65℃에서 15h 동안 교반시키고, rt으로 냉각시켰다. LCMS: m/e 774.5 (M+H)+, 4.53 min (방법 10).
상기 반응 혼합물에 85℃에서 8h 동안 교반된 티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (0.041 g, 0.305 mmol)를 첨가하고, 다시 rt으로 냉각되게 하였다. 반응물을 농축시키고, 진공 하에 건조시켜 미정제 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)설포닐)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트를 어두운 갈색 점성 오일로서 수득하였고, 이를 미정제로서 다음 단계에 이용하였다. LCMS: m/e 909.8 (M+H)+, 4.79 min (방법 10).
단계 2. (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)설포닐)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, 2 TFA의 제조.
THF (1 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 미정제 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)설포닐)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (139 mg, 0.153 mmol)의 용액에 1N 리튬 하이드록사이드 (0.535 mL, 0.535 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응물을 65℃에서 3h 동안 교반시키고, rt으로 냉각시켰다. 반응 내용물을 역상 prep-HPLC (prep-방법 12)에 의해 정제시키고, 진공 하에 건조시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((2-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)에틸)설포닐)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산, 2 TFA (66.7 mg, 0.061 mmol, 3개의 반응 단계 동안 39.6% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다. LCMS: m/e 819.7 (M+H)+, 3.90 min (방법 12). 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.34 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.35 - 4.24 (m, 1H), 4.07 (br. s., 3H), 3.78 (t, J=6.6 Hz, 1H), 3.67 - 3.47 (m, 4H), 3.32 (dt, J=14.7, 5.6 Hz, 1H), 3.20 - 3.00 (m, 10H), 2.86 - 2.76 (m, 1H), 2.56 (d, J=17.4 Hz, 1H), 2.26 - 2.16 (m, 3H), 2.15 - 2.05 (m, 3H), 2.03 - 1.92 (m, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.69 (br. s., 1H), 1.63 - 1.49 (m, 4H), 1.44 (br. s., 4H), 1.37 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.30 (br. s., 2H), 1.10 (s, 3H), 1.06 (d, J=7.6 Hz, 2H), 1.03 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.88 (s, 3H). 19F NMR (376MHz, 클로로포름-d) δ -75.76 (s, 6F), -224.87 (s, 1F).
섹션 2
LC/MS 방법
LC/MS 방법 2-1
조건: 2분 동안 0% B → 100% B 구배; 100% B에서 1분 동안 유지
용매 A: 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B: 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼: Phenomenex Luna C18, 2.0 x 50 mm, 3 μm
유량: 1 mL/min
검출기 파장: 220 nm
LC/MS 방법 2-2
조건: 4분 동안 0% B → 100% B 구배; 100% B에서 1분 동안 유지
용매 A: 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B: 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼: Phenomenex Luna C18, 3 mm, 2.0 x 50 mm
유량: 1 mL/min
검출기 파장: 220 nm
LC/MS 방법 2-3
조건: 4분 동안 0% B → 100% B 구배; 100% B에서 2분 동안 유지
용매 A: 90% 물, 10% 메탄올, 0.1% TFA
용매 B: 10% 물, 90% 메탄올, 0.1% TFA
컬럼: Phenomenex Luna C18, 3 mm, 2.0 x 50 mm
유량: 0.8 mL/min
검출기 파장: 220 nm
Prep HPLC 방법
Prep HPLC 방법 2-1
조건: 20분 동안 30% B → 100% B 구배; 100% B에서 4분 동안 유지
용매 A: 5% 아세토니트릴, 95% 물, 0.1% TFA
용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물 0.1% TFA
컬럼: Waters Xbridge 30 x 100 mm, 5 μm
유량: 40 mL/min
검출기 파장: 220 nm
Prep HPLC 방법 2-2
조건: 실험 섹션을 참조하라
용매 A: 10-mM 암모늄 아세테이트와 함께 5:95 아세토니트릴: 물
용매 B: 10-mM 암모늄 아세테이트와 함께 95:5 아세토니트릴: 물
컬럼: Waters Xbridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm
유량: 20 mL/min
검출기 파장: 220 nm
Prep HPLC 방법 2-3
조건: 20분 동안 50 B → 100% B 구배; 100% B에서 5분 동안 유지
용매 A: 0.1% 트리플루오로아세트산과 함께 5:95 아세토니트릴: 물
용매 B: 0.1% 트리플루오로아세트산과 함께 95:5 아세토니트릴: 물
컬럼: Xbridge C18, 19 x 200 mm, 5-μm 입자
유량: 20 mL/min
검출기 파장: 220 nm
Prep HPLC 방법 2-4
조건: 20분 동안 10% B → 100% B 구배; 100% B에서 5분 동안 유지
용매 A: 5% 아세토니트릴, 95% 물, 0.1% TFA
용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물 0.1% TFA
컬럼: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
유량: 40 mL/min
검출기 파장: 220 nm
Prep HPLC 방법 2-5
조건: 20분 동안 30% B → 100% B 구배; 100% B에서 5분 동안 유지
용매 A: 5% 아세토니트릴, 95% 물, 0.1% TFA
용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물 0.1% TFA
컬럼: Waters Sunfire 30 x 150 mm, 5 um
유량: 40 mL/min
검출기 파장: 220 nm
Prep HPLC 방법 2-6
조건: 20분 동안 10% B → 100% B 구배; 100% B에서 2분 동안 유지
용매 A: 10% 메탄올, 90% 물, 0.1% TFA
용매 B: 90% 메탄올, 10% 물 0.1% TFA
컬럼: Waters Sunfire 30 x 100 mm, 5 μm
유량: 40 mL/min
검출기 파장: 220 nm
분석적 HPLC 방법
분석적 HPLC 방법 2-1
조건: 15분 동안 10% B → 100% B 구배; 100% B에서 10분 동안 유지
용매 A: 10% 메탄올, 90% 물, 0.1% TFA
용매 B: 90% 메탄올, 10% 물, 0.1% TFA
컬럼: Waters Sunfire C18, 4.6 x 150 mm, 3.5 mm
유량: 1 mL/min
검출기 파장: 220 nm
분석적 HPLC 방법 2-2
조건: 15분 동안 10% B → 100% B 구배; 100% B에서 10분 동안 유지
용매 A: 10% 메탄올, 90% 물, 0.1% TFA
용매 B: 90% 메탄올, 10% 물, 0.1% TFA
컬럼: Waters Xbridge Phenyl, 4.6 x 150 mm, 3.5 mm
유량: 1 mL/min
검출기 파장: 220 nm
분석적 HPLC 방법 2-3
구배: 3분 동안 0 → 100% B, 이어서 100% B에서 0.5분 유지
용매 A: 10 mM 암모늄 아세테이트와 함께 5:95 아세토니트릴:물
용매 B: 10 mM 암모늄 아세테이트와 함께 95:5 아세토니트릴:물
컬럼: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm 입자
유량: 1 mL/min
검출기 파장: 220 nm
온도: 50℃
분석적 HPLC 방법 2-4
구배: 0 → 100% B over 3분, 이어서 100% B에서 0.5분 유지
용매 A: 10 mM 암모늄 아세테이트와 함께 5:95 아세토니트릴:물
용매 B: 10 mM 암모늄 아세테이트와 함께 95:5 아세토니트릴:물
컬럼: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-μm 입자
유량: 1 mL/min
검출기 파장: 220 nm
온도: 50℃
분석적 HPLC 방법 2-5
조건: 15분 동안 10% B → 100% B 구배; 100% B에서 10분 동안 유지
용매 A: 5% 아세토니트릴, 95% 물, 0.1% TFA
용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물, 0.1% TFA
컬럼: Waters Sunfire C18, 3.0 x 150 mm, 3.5 um
유량: 0.5 mL/min
검출기 파장: 220 nm
분석적 HPLC 방법 2-6
조건: 15분 동안 10% B → 100% B 구배; 100% B에서 10분 동안 유지
용매 A: 5% 아세토니트릴, 95% 물, 0.1% TFA
용매 B: 95% 아세토니트릴, 5% 물, 0.1% TFA
컬럼: Waters Xbridge Phenyl, 3.0 x 150 mm, 3.5 um
유량: 0.5 mL/min
검출기 파장: 220 nm
실시예 2-1
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-하이드록시-3-메틸부틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00143
단계 1. 3-하이드록시-3-메틸부틸 4-메틸벤젠설포네이트의 제조
Figure pct00144
피리딘 (10 mL) 중 3-메틸부탄-1,3-디올 (1.00 g, 9.60 mmol)의 용액에 0℃에서 p-톨루엔설포닐 클로라이드 (2.014 g, 10.56 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16 h 동안 교반하면서, 얼음물 조의 제거에 의해 반응 혼합물이 실온으로 천천히 가온되게 하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 mL)를 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 유기층을 1 N HCl (3 x 50 mL)로 세척하였다. 그 후 유기층을 포화된 NaHCO3 용액 (50 mL), 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 30% → 50% 에틸 아세테이트; 220 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 3-하이드록시-3-메틸부틸 4-메틸벤젠설포네이트 (2.03 g, 7.86 mmol, 82% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.85 - 7.78 (m, 2H), 7.37 (dd, J=8.5, 0.8 Hz, 2H), 4.23 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.88 (t, J=6.9 Hz, 2H), 1.24 (s, 6H); LC/MS: 생성물은 이온화되지 않았다, tR = 1.78 min (방법 2-1).
단계 2. 4-브로모-2-메틸부탄-2-올의 제조
Figure pct00145
THF (15 mL) 중 3-하이드록시-3-메틸부틸 4-메틸벤젠설포네이트 (400 mg, 1.548 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 브로마이드 (403 mg, 4.65 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액 (10 mL) 및 물 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에테르 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 20% → 40% 에틸 아세테이트; 80 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-브로모-2-메틸부탄-2-올 (231 mg, 1.383 mmol, 89% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 3.55 - 3.49 (m, 2H), 2.15 - 2.09 (m, 2H), 1.28 (s, 6H).
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-하이드록시-3-메틸부틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00146
오븐-건조된 바이알에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (70 mg, 0.107 mmol), 4-브로모-2-메틸부탄-2-올 (24.96 mg, 0.149 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (68.0 mg, 0.320 mmol), 및 포타슘 아이오다이드 (24.80 mg, 0.149 mmol)의 혼합물에 아세토니트릴 (0.8 mL)을 첨가하였다. 캡을 밀봉하고, 반응 혼합물을 120℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 이 시간 동안 용매가 증발하였다. 추가의 아세토니트릴 (0.8 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1 h 동안 120℃에서 가열시켰다. 혼합물을 물 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 30% 9:1 아세톤:메탄올/70% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-하이드록시-3-메틸부틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (56.6 mg, 0.076 mmol, 72% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.42 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 2.86 - 2.78 (m, 1H), 2.77 - 2.68 (m, 1H), 2.65 - 2.53 (m, 2H), 2.18 - 0.86 (m, 29H), 1.69 (s, 3H), 1.27 (s, 6H), 1.07 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 742.6 [(M+H)+, C49H73FNO3에 대한 계산치 742.6], tR = 4.86 min (방법 2-3).
단계 4. 1,4-디옥산 (1.4 mL) 및 EtOH (0.7 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-하이드록시-3-메틸부틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (72 mg, 0.097 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.243 mL, 0.485 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물으로 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과시키고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-하이드록시-3-메틸부틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (55.4 mg, 74% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.27 - 5.21 (m, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.61 (dt, J=10.8, 9.0 Hz, 1H), 4.51 (dt, J=10.8, 9.2 Hz, 1H), 3.46 - 3.38 (m, 1H), 3.38 - 3.30 (m, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.32 - 1.09 (m, 29H), 1.75 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H); LC/MS m/e 652.5 [(M+H)+, C42H67FNO3에 대한 계산치 652.5], tR = 4.40 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.97 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.16 min.
실시예 2-2
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시-2-메틸프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00147
단계 1. 2-하이드록시-2-메틸프로필 4-메틸벤젠설포네이트의 제조
Figure pct00148
피리딘 (5 mL) 중 2-메틸프로판-1,2-디올 (415 mg, 4.60 mmol)의 용액에 0℃에서 p-톨루엔설포닐 클로라이드 (966 mg, 5.07 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16 h 동안 교반시켰고, 그 동안 얼음물 조의 제거에 의해 반응 혼합물이 실온으로 천천히 가온되게 하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 mL)를 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 유기층을 1 N HCl (3 x 25 mL)로 세척하였다. 그 후 유기층을 포화된 NaHCO3 용액 (25 mL), 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 30% → 50% 에틸 아세테이트; 120 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-하이드록시-2-메틸프로필 4-메틸벤젠설포네이트 (1.01 g, 4.13 mmol, 90% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.86 - 7.78 (m, 2H), 7.38 (d, J=8.0 Hz, 2H), 3.86 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.24 (s, 6H); LC/MS: 생성물은 이온화되지 않았다, tR = 1.70 min (방법 2-1).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시-2-메틸프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00149
아세토니트릴 (0.7 mL) 중 2-하이드록시-2-메틸프로필 4-메틸벤젠설포네이트 (22.35 mg, 0.091 mmol)의 용액에 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (32.4 mg, 0.152 mmol, 2 eq), 및 포타슘 아이오다이드 (63.27 mg, 0.381 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 6 h 동안 가열시켰다. 그 후 추가의 2-하이드록시-2-메틸프로필 4-메틸벤젠설포네이트 (56 mg, 0.229 mmol, 3 eq) 및 삼염기성 포타슘 포스페이트 (16 mg, 0.076 mmol, 1 eq) 를 첨가하고, 반응 혼합물을 120℃에서 22 h 동안 가열시켰다. 그 후 추가의 2-하이드록시-2-메틸프로필 4-메틸벤젠설포네이트 (37 mg, 0.153 mmol, 2 eq), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (32 mg, 0.152 mmol, 2 eq), 및 포타슘 아이오다이드 (28 mg, 0.168 mmol, 2.2 eq)를 첨가하고, 반응 혼합물을 120℃에서 추가 18 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다: LC/MS m/e 728.6 [(M+H)+, C48H71FNO3에 대한 계산치 728.5], tR = 4.72 min (방법 2-2).
단계 3. 1,4-디옥산 (0.5 mL) 및 EtOH (0.25 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시-2-메틸프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (55 mg, 0.076 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (0.189 mL, 0.378 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-하이드록시-2-메틸프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (2.7 mg, 5% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.51 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.06 (d, J=12.4 Hz, 1H), 3.03 - 2.95 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.32 - 1.07 (m, 27H), 1.75 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 738.6 [(M+H)+, C41H65FNO3에 대한 계산치 738.5], tR = 4.29 min (방법 2-2). HPLC (방법 2-1): tR = 18.88 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.24 min.
실시예 2-3
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-하이드록시-4-메틸펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00150
단계 1. 5,5-디메틸테트라하이드로푸란-2-올의 제조
Figure pct00151
DIBAL (1.314 mL, 1.314 mmol)를 THF (10 mL) 중 5,5-디메틸디하이드로푸란-2(3H)-온 (100 mg, 0.876 mmol)의 용액에 질소 하에 -78℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 3 h 동안 교반시켰다. Rochelle's 염의 용액을 반응 혼합물에 첨가하고, 이것을 rt에서 30분 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc 및 물 사이에서 분배시켰다. 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물 (35 mg, 0.301 mmol, 34% 수율)을 수득하였다. 미정제 생성물의 1H-NMR은 이것이 4-하이드록시-4-메틸펜타날 및 5,5-디메틸테트라하이드로푸란-2-올 사이에서 평형을 이루었고, 5,5-디메틸테트라하이드로푸란-2-올 (35 mg, 0.301 mmol, 34% 수율)이 주된 형태임을 나타내었다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.51 (d, J=4.8 Hz, 1H), 2.90 (br. s., 1H), 2.03 - 1.94 (m, 2H), 1.82 - 1.64 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.22 (s, 3H).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-하이드록시-4-메틸펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00152
DCE (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (25 mg, 0.038 mmol) 및 5,5-디메틸테트라하이드로푸란-2-올 (13.28 mg, 0.114 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.018 mL, 0.061 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (16.15 mg, 0.076 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 rt에서 16 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM 및 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 사이에서 분배시켰다. 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-하이드록시-4-메틸펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (28.8 mg, 0.038 mmol, 100% 수율)를 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. LC/MS m/e 756.7 [(M+H)+, C50H74FNO3에 대한 계산치 756.6] tR = 2.66 min (방법 2-1).
단계 3. 소듐 하이드록사이드 (0.048 mL, 0.190 mmol, 4 N aq)를 디옥산 (1 mL) 및 에탄올 (0.500 mL) 중 미정제 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-하이드록시-4-메틸펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (28.7 mg, .038 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 미정제 물질을 역상 예비 HPLC (방법 2-2, 구배: 10분 동안 60-100% B, 이어서 100%에서 15분 유지)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((4-하이드록시-4-메틸펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (2.8 mg, 4.08 μmol, 11% 수율)을 수득하였다; LC/MS m/e 666.6 [(M+H)+, C43H68FNO3에 대한 계산치 666.5] tR = 2.40 min (방법 2-1); HPLC (방법 2-3): tR = 2.76 min; HPLC (방법 2-4): tR = 2.11 min.
실시예 2-4
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-에틸-3-하이드록시펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00153
단계 1. 3-에틸헥스-5-엔-3-올의 제조
Figure pct00154
THF (10 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (13.93 mL, 13.93 mmol)의 용액에 0℃에서 펜탄-3-온 (400 mg, 4.64 mmol)을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 얼음물 조에서 냉각시키고, 포화 NH4Cl 수용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-에틸헥스-5-엔-3-올 (595 mg, 4.64 mmol, 100% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.86 (ddt, J=16.7, 10.6, 7.5 Hz, 1H), 5.21 - 5.07 (m, 2H), 2.23 (dt, J=7.4, 1.2 Hz, 2H), 1.57 - 1.43 (m, 4H), 0.90 (t, J=7.5 Hz, 6H)
단계 2. 3-에틸-3-하이드록시펜타날의 제조
Figure pct00155
디옥산 (30 mL) 및 물 (7.50 mL) 중 3-에틸헥스-5-엔-3-올 (595 mg, 4.64 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (1.081 mL, 9.28 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (t-BuOH 중 2.5%) (1.165 mL, 0.093 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (3970 mg, 18.56 mmol)를 첨가하였다. 16 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 물 (20 mL) 및 포화 NaHCO3 수용액 (30 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 0% → 8% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 3-에틸-3-하이드록시펜타날 (217 mg, 1.667 mmol, 36% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.85 (t, J=2.4 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 1.65 - 1.41 (m, 4H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 6H).
단계 3. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-에틸-3-하이드록시펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00156
티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.036 mL, 0.122 mmol)를 DCE (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol) 및 3-에틸-3-하이드록시펜타날 (15.88 mg, 0.122 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (32.3 mg, 0.152 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 소듐 바이카르보네이트 및 CH2Cl2 사이에서 분배시켰다. 수성층을 CH2Cl2 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (0% 9:1 아세톤/메탄올/100% 헥산 → 40% 9:1 아세톤/메탄올/60% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-에틸-3-하이드록시펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (14 mg, 0.018 mmol, 24% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: LC/MS (ESI) m/e 770.6 [(M+H)+, C51H76FNO3에 대한 계산치 770.6] tR = 2.61 min (방법 2-1).
단계 4. 소듐 하이드록사이드 (0.023 mL, 0.091 mmol)를 디옥산 (1 mL) 및 에탄올 (0.500 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-에틸-3-하이드록시펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (14 mg, 0.018 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 미정제 물질을 역상 예비 HPLC (방법 2-2, 15분 동안 구배 60-100% B, 이어서 100% B에서 6분 유지)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-에틸-3-하이드록시펜틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (5.9 mg, 8.5 μmol, 47% 수율)을 수득하였다; 1H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 5.25 (br. s., 1H), 5.12 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.67 (br. s., 1H), 4.55 (br. s., 1H), 4.48 (s, 1H), 4.38 (s, 1H), 2.61 - 2.53 (m, 1H), 2.48 - 2.38 (m, 3H), 2.23 - 2.08 (m, 1H), 2.07 - 0.93 (m, 32H), 1.65 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.82 (s, 3H), 0.80-0.77 (m, 6H); LC/MS (ESI) m/e 680.5 [(M+H)+, C44H70FNO3에 대한 계산치 680.5] tR = 2.38 min (방법 2-1); HPLC (방법 2-3): tR = 2.29 min; HPLC (방법 2-4): tR = 2.40 min.
실시예 2-5
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00157
단계 1. 1,1-디사이클로프로필부트-3-엔-1-올의 제조
Figure pct00158
THF (10 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (10.89 mL, 10.89 mmol)의 용액에 0℃에서 디사이클로프로필메타논 (400 mg, 3.63 mmol)을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 반응물을 얼음물 조에서 냉각시키고, 포화 NH4Cl 수용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 1,1-디사이클로프로필부트-3-엔-1-올 (553 mg, 3.63 mmol, 100% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 6.16 - 5.98 (m, 1H), 5.21 - 5.08 (m, 2H), 2.37 (dt, J=7.5, 1.1 Hz, 2H), 0.94 - 0.79 (m, 2H), 0.49 - 0.25 (m, 8H).
단계 2. 3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로파날의 제조
Figure pct00159
디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) 중 1,1-디사이클로프로필부트-3-엔-1-올 (553 mg, 3.63 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.846 mL, 7.26 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.444 mL, 0.073 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (3,106 mg, 14.52 mmol)를 첨가하였다. 16 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 물 (20 mL) 및 포화 NaHCO3 수용액 (30 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 0% → 8% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로파날 (152 mg, 0.986 mmol, 27% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.96 (t, J=2.8 Hz, 1H), 2.63 (d, J=2.8 Hz, 2H), 0.94 (tt, J=8.2, 5.8 Hz, 2H), 0.51 - 0.38 (m, 8H).
단계 3. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트
Figure pct00160
MeOH (0.5 mL) 및 아세트산 (0.1 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (40 mg, 0.061 mmol) 및 3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로파날 (14.10 mg, 0.091 mmol)의 용액에 보란-2-피콜린 복합체 (9.78 mg, 0.091 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16 h 동안 rt에서 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (0% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 40% 9:1 아세톤:메탄올/60% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (11 mg, 0.014 mmol, 23% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: LC/MS (ESI) m/e 794.6 [(M+H)+, C53H76FNO3에 대한 계산치 794.6] tR = 2.66 min (방법 2-1).
단계 4. 소듐 하이드록사이드 (0.017 mL, 0.069 mmol)를 디옥산 (1 mL) 및 에탄올 (0.500 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (11 mg, 0.014 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 미정제 물질을 역상 예비 HPLC (방법 2-2, 10분 동안 70-100% B, 100% B에서 15분 유지)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (1.0 mg, 1.37 μmol, 10% 수율)을 수득하였다; 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.56 - 4.47 (m, 1H), 3.53 - 3.41 (m, 2H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.7 Hz, 1H), 2.31 - 2.32 (m, 28H), 1.14 - 1.10 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.11 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.87 - 0.76 (m, 2H), 0.65 - 0.35 (m, 8H); LC/MS (ESI) m/e 704.6 [(M+H)+, C46H70FNO3에 대한 계산치 704.5] tR =2.44 min (방법 2-1); HPLC (방법 2-3): tR = 2.43 min; HPLC (방법 2-4): tR = 2.46 min.
실시예 2-6
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필알릴)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00161
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필알릴)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트
Figure pct00162
티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.036 mL, 0.122 mmol)를 DCE (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol) 및 3,3-디사이클로프로필-3-하이드록시프로파날 (18.81 mg, 0.122 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (32.3 mg, 0.152 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3일 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 소듐 바이카르보네이트 (10 mL) 및 CH2Cl2 (10 mL) 사이에서 분배시켰다. 수성층을 CH2Cl2 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 미정제 생성물, (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필알릴)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (32 mg, 0.041 mmol, 54% 수율)를 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. LC/MS (ESI) m/e 776.6 [(M+H)+, C53H74FNO2에 대한 계산치 776.6], tR = 2.67 min (방법 2-1).
단계 2. 소듐 하이드록사이드 (0.052 mL, 0.206 mmol)를 디옥산 (1 mL) 및 에탄올 (0.500 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필알릴)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (32 mg, 0.041 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 미정제 물질을 역상 예비 HPLC (방법 2-2, 20분 동안 90-100% B, 이어서 100% B에서 25분 유지)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3,3-디사이클로프로필알릴)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (1.0 mg, 1.34 μmol, 3.3% 수율)을 수득하였다; 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 2H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.56 - 4.48 (m, 1H), 4.01 (t, J=6.9 Hz, 2H), 2.89 (br. s., 1H), 2.62 (d, J=16.7 Hz, 1H), 2.30 - 0.85 (m, 31H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.80 (d, J=8.4 Hz, 2H), 0.66 - 0.60 (m, 2H), 0.47 - 0.36 (m, 2H); LC/MS (ESI) m/e 686.6 [(M+H)+, C46H68FNO2에 대한 계산치 686.5] tR = 2.44 min (방법 2-1); HPLC (방법 2-3): tR = 2.62 min; HPLC (방법 2-4): tR = 1.96 min.
실시예 2-7
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이소펜틸아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00163
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이소펜틸아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00164
DCE (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (35 mg, 0.053 mmol) 및 3-메틸부타날 (7.35 mg, 0.085 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.025 mL, 0.085 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (22.62 mg, 0.107 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 30% 9:1 아세톤:메탄올/70% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이소펜틸아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (20 mg, 0.028 mmol, 52% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: LC/MS m/e 726.6 [(M+H)+, C49H73FNO2에 대한 계산치 726.6], tR = 5.10 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (0.5 mL) 및 EtOH (0.25 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이소펜틸아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (20 mg, 0.028 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.069 mL, 0.138 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-3)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(이소펜틸아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (9.9 mg, 48% 수율)를 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.28 - 5.22 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.61 (dt, J=10.9, 8.8 Hz, 1H), 4.52 (dt, J=11.0, 8.8 Hz, 1H), 3.29 - 3.15 (m, 2H), 2.92 - 2.84 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.30-1.10 (m, 30H), 1.75 (s, 3H), 1.19 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 6H); LC/MS m/e 636.3 [(M+H)+, C42H67FNO2에 대한 계산치 636.5], tR = 4.49 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-3): tR = 2.54 min; HPLC (방법 2-4): tR = 2.59 min.
실시예 2-8
(1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00165
단계 1. 4-(3-클로로-2-하이드록시프로필)티오모르폴린 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00166
DCE (4.4 mL) 중 티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (2.40 g, 17.75 mmol)의 용액에 주사기를 통해 2-(클로로메틸)옥시란 (1.392 mL, 17.75 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 48 h 동안 교반시켰다. 형성된 백색 고형물 (4,4'-(2-하이드록시프로판-1,3-디일)비스(티오모르폴린 1,1-디옥사이드)을 여과에 의해 제거하였다. 여과액을 농축시키고, 실리카겔 (CH2Cl2 중 3% → 5% 메탄올; 120 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-(3-클로로-2-하이드록시프로필)티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (2.57 g, 11.29 mmol, 64% 수율)를 무색 오일로서 수득하였고, 이는 정치시에 응고되었다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.95 (dq, J=8.9, 4.6 Hz, 1H), 3.69 - 3.55 (m, 2H), 3.26 - 3.15 (m, 2H), 3.14 - 3.03 (m, 6H), 2.75 (dd, J=13.1, 4.3 Hz, 1H), 2.65 (dd, J=13.1, 8.5 Hz, 1H); LC/MS m/e 228.1 [(M+H)+, C7H15ClNO3S에 대한 계산치 228.0], tR = 0.26 min, (이온화 피크, UV 없음) (방법 2-1).
단계 2. (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
(S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (120 mg, 0.183 mmol), 4-(3-클로로-2-하이드록시프로필)티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (146 mg, 0.640 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (175 mg, 0.823 mmol), 및 포타슘 아이오다이드 (137 mg, 0.823 mmol)를 오븐-건조된 바이알에서 합쳤다. 아세토니트릴 (2 mL)을 첨가하고, 바이알을 밀봉시키고, 반응 혼합물을 120℃에서 20 h 동안 가열시켰다. 추가의 4-(3-클로로-2-하이드록시프로필)티오모르폴린 1,1-디옥사이드 (83 mg, 0.366 mmol, 2 eq), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (78 mg, 0.366 mmol, 2 eq), 및 포타슘 아이오다이드 (60.7 mg, 0.366 mmol, 2 eq)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가 16 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)를 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 30% 9:1 아세톤:메탄올/70% 헥산; 40 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (71.4 mg, 0.084 mmol, 46% 수율)를 연청색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.15 (m, 2H), 5.15 - 5.10 (m, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.61 (d, J=1.4 Hz, 1H), 4.60 - 4.54 (m, 1H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 3.80 - 3.67 (m, 1H), 3.23 - 3.03 (m, 8H), 2.73 - 2.53 (m, 5H), 2.37 (dd, J=11.7, 7.2 Hz, 1H, 부분입체이성질체 A), 2.29 (dd, J=11.7, 8.1 Hz, 1H, 부분입체이성질체 B), 2.19 - 0.83 (m, 47H) (부분입체이성질체의 혼합물); LC/MS m/e 847.6 [(M+H)+, C51H76FN2O5S에 대한 계산치 847.5], tR = 4.58 min (방법 2-2).
단계 3. 1,4-디옥산 (0.5 mL) 및 EtOH (0.2 mL) 중 (1S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (30 mg, 0.035 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (0.089 mL, 0.177 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (1S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-디옥시도티오모르폴리노)-2-하이드록시프로필)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (13.6 mg, 43% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.85 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.75 (br. s., 1H), 4.73 - 4.67 (m, 1H), 4.64 - 4.56 (m, 1H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 3.98 - 3.89 (m, 3H), 3.65 - 3.51 (m, 6H), 3.49 - 3.43 (m, 2H), 3.23 (dd, J=12.4, 8.5 Hz, 1H, 부분입체이성질체 A), 3.07 (t, J=11.4 Hz, 1H, 부분입체이성질체 B), 2.94 - 2.79 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.1 Hz, 1H), 2.32 - 1.09 (m, 27H), 1.76 (s, 3H, 부분입체이성질체 er A), 1.76 (s, 3H, 부분입체이성질체 B), 1.15 (s, 3H), 1.11 (s, 3H, 부분입체이성질체 A), 1.10 (s, 3H, 부분입체이성질체 B), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H) (부분입체이성질체의 혼합물; LC/MS m/e 757.6 [(M+H)+, C44H70FN2O5S에 대한 계산치 757.5], tR = 4.24 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.72 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.02 min.
실시예 2-9
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시사이클로부틸)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00167
단계 1. 1-알릴사이클로부탄올의 제조
Figure pct00168
THF (10 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (12.8 mL, 12.8 mmol)의 용액에 0℃에서 THF (5 mL) 중 사이클로부타논 (300 mg, 4.28 mmol)의 용액을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반시켰다. 반응물을 얼음물 조에서 냉각시키고, 포화된 NH4Cl 용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 1-알릴사이클로부탄올 (377 mg, 3.36 mmol, 79% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.90 (ddt, J=16.4, 10.7, 7.3 Hz, 1H), 5.27 - 5.16 (m, 2H), 2.41 (d, J=7.3 Hz, 2H), 2.13 - 2.05 (m, 4H), 1.93 (s, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 1H), 1.65 - 1.51 (m, 1H).
단계 2. 2-(1-하이드록시사이클로부틸)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00169
디옥산 (30 mL) 및 물 (7.50 mL) 중 1-알릴사이클로부탄올 (350 mg, 3.12 mmol)의 용액에 2,6-루티딘 (0.727 mL, 6.24 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.490 mL, 0.062 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (2670 mg, 12.48 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물이 rt으로 가온되게 하고, 16 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc (25 mL) 및 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (25 mL) 사이에서 분배시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 0% → 8% 메탄올; 40g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(1-하이드록시사이클로부틸)아세트알데하이드 (187 mg, 1.638 mmol, 53% 수율)를 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.86 (t, J=1.8 Hz, 1H), 2.32 - 1.95 (m, 4H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.69 - 1.43 (m, 2H).
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시사이클로부틸)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00170
바이알에서 디클로로에탄 (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일) 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol) 및 2-(1-하이드록시사이클로부틸)아세트알데하이드 (13.92 mg, 0.122 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.036 mL, 0.122 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (32.3 mg, 0.152 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4일 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 수성 소듐 바이카르보네이트 (10 mL) 및 CH2Cl2 (10 mL) 사이에서 분배시켰다. 수성층을 CH2Cl2 (3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (100% 헥산 → 10% 메탄올/60% 헥산을 함유하는 40% 아세톤; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시사이클로부틸)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (51 mg, 0.068 mmol, 89% 수율)를 오일로서 수득하였다: LC/MS (ESI) m/e 754.6 [(M+H)+, C50H72FNO3에 대한 계산치 754.6], tR = 2.74 min (방법 2-1).
단계 4. 디옥산 (1 mL) 및 에탄올 (0.500 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시사이클로부틸)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (51 mg, 0.068 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (0.085 mL, 0.338 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시사이클로부틸)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (12.9 mg, 0.016 mmol, 24% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.29 - 5.21 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.28 (t, J=9.9 Hz, 1H), 2.94 - 2.84 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.31 - 0.83 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 664.6 [(M+H)+, C43H66FNO3에 대한 계산치 664.5], tR = 2.43 min (방법 2-1). HPLC (방법 2-1): tR = 19.00 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.57 min.
실시예 2-10
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00171
단계 1. 3-알릴옥세탄-3-올의 제조
Figure pct00172
THF (40 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (7.29 mL, 7.29 mmol)의 용액에 -78℃에서 THF (10 mL) 중 옥세탄-3-온 (500 mg, 6.94 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 포화된 NH4Cl 용액 (40 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 층을 분리시켰다. 수성층을 에테르 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-알릴옥세탄-3-올 (735 mg, 6.44 mmol, 93% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.97 - 5.78 (m, 1H), 5.28 (t, J=1.0 Hz, 1H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 4.64 (d, J=7.3 Hz, 2H), 4.55 - 4.50 (m, 2H), 2.65 (d, J=7.0 Hz, 2H); 13C NMR (101MHz, 클로로포름-d) δ 131.8, 120.1, 83.2, 73.3, 42.4.
단계 2. 2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00173
3-알릴옥세탄-3-올 (508 mg, 4.45 mmol)을 100 mL 둥근 바닥 플라스크에서 CH2Cl2 (35 mL) 및 MeOH (3.5 mL)에 용해시켰다. N-메틸모르폴린-N-옥사이드 (NMO) (626 mg, 5.34 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다 [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Org . Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]. 용액이 오존으로 포화된 지 (청색으로 변함) 수 분 후까지 (총 시간 10분) 오존을 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 그 후 청색이 사라질 때까지 질소를 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 그 후 디메틸 설파이드 (3.29 mL, 44.5 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 14 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (1% 메탄올/50% 헥산과 함께 50% 에틸 아세테이트 → 1% 메탄올과 함께 100% 에틸 아세테이트; 80 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)아세트알데하이드 (287 mg, 2.472 mmol, 56% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.85 (s, 1H), 4.71 (d, J=7.5 Hz, 2H), 4.52 - 4.47 (m, 2H), 3.14 (d, J=0.5 Hz, 2H); 13C NMR (100MHz, 클로로포름-d) δ 201.1, 83.0, 71.4, 50.7.
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00174
바이알에서, MeOH (8 mL) 및 아세트산 (1.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (500 mg, 0.762 mmol), 보란-2-피콜린 복합체 (163 mg, 1.524 mmol) 및 2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)아세트알데하이드 (177 mg, 1.524 mmol)의 혼합물을 rt에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (50 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 40% 9:1 아세톤:메탄올/60% 헥산; 80 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (320 mg, 0.423 mmol, 56% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: LC/MS (ESI) m/e 756.6 [(M+H)+, C49H70FNO4에 대한 계산치 756.5], tR = 2.59 min (방법 2-1).
단계 4. 디옥산 (4 mL) 및 에탄올 (2 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (320 mg, 0.423 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (0.529 mL, 2.116 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2.5 h 동안 가열시켰다. LC/MS는 요망되는 생성물의 형성을 나타내었다. 혼합물을 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-5)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 제거하고, 수성 혼합물을 동결시키고, 동결건조기에 두어 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (220 mg, 0.282 mmol, 67% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.81 - 4.77 (m, 2H), 4.75 - 4.68 (m, 2H), 4.67 - 4.57 (m, 2H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.52 - 3.42 (m, 1H), 3.33 - 3.23 (m, 1H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.57 - 2.42 (m, 2H), 2.31 - 1.32 (m, 25H), 1.14 - 1.12 (m, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 666.5 [(M+H)+, C42H67FNO4에 대한 계산치 666.5], tR = 2.44 min (방법 2-1); HPLC (방법 2-1): tR = 18.63 min; HPLC (방법 2-2): tR = 19.94 min.
실시예 2-11
(R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00175
단계 1. (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00176
(R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (100 mg, 0.152 mmol) 및 2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)아세트알데하이드 (31.9 mg, 0.274 mmol)를 MeOH (1.2 mL)에 현탁시켰다. 보란-2-피콜린 복합체 (29.4 mg, 0.274 mmol)에 이어 아세트산 (0.24 mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL) 및 포화 소듐 카르보네이트 수용액 (1 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 5 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (5% 메탄올/80% 헥산과 함께 20% 에틸 아세테이트 → 5% 메탄올/10% 헥산과 함께 90% 에틸 아세테이트; 24 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (110 mg, 0.145 mmol, 95% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.42 - 7.31 (m, 5H), 5.34 (br. s., 1H), 5.24 - 5.16 (m, 2H), 5.12 (d, J=5.7 Hz, 1H), 4.73 (br. s., 1H), 4.69 (t, J=5.3 Hz, 2H), 4.64 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 2H), 4.43 (d, J=6.0 Hz, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.72 - 2.48 (m, 3H), 2.26 - 1.87 (m, 8H), 1.82 - 0.91 (m, 21H), 1.69 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.89 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 756.6 [(M+H)+, C49H71FNO4에 대한 계산치 756.6], tR = 4.59 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (1.5 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (105 mg, 0.139 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.347 mL, 0.694 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 4 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 6 N HCl (70 μL)의 첨가에 의해 부분적으로 중화시켰다. 그 후 혼합물을 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-5)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(3-하이드록시옥세탄-3-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (38.0 mg, 0.048 mmol, 35% 수율) 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.80 (d, J=7.3 Hz, 2H), 4.74 - 4.69 (m, 2H), 4.66 - 4.57 (m, 2H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.47 (ddd, J=12.7, 6.1, 3.2 Hz, 1H), 3.28 (ddd, J=12.5, 9.2, 2.9 Hz, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.56 - 2.44 (m, 2H), 2.37 - 2.28 (m, 1H), 2.22 - 1.32 (m, 24H), 1.75 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.14 - 1.12 (m, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 666.5 [(M+H)+, C42H65FNO4에 대한 666.5], tR = 4.31 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-5): tR = 10.94 min; HPLC (방법 2-6): tR = 10.82 min.
실시예 2-12
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00177
단계 1. 4-알릴테트라하이드로-2H-피란-4-올의 제조
Figure pct00178
THF (40 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (20.98 mL, 20.98 mmol)의 용액에 0℃에서 캐뉼라를 통해 THF (10 mL) 중 디하이드로-2H-피란-4(3H)-온 (700 mg, 6.99 mmol)의 용액을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 2 h 동안 교반시켰다. 반응물을 얼음물 조에서 냉각시키고, 포화된 NH4Cl 용액 (40 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 층을 분리시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 20% → 60% 에틸 아세테이트; 80 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-알릴테트라하이드로-2H-피란-4-올 (818 mg, 5.75 mmol, 82% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.90 (ddt, J=17.2, 9.9, 7.5 Hz, 1H), 5.28 - 5.14 (m, 2H), 3.85 - 3.74 (m, 4H), 2.28 (d, J=7.5 Hz, 2H), 1.80 - 1.68 (m, 2H), 1.51 (dq, J=14.0, 2.5 Hz, 3H).
단계 2. 2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00179
디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) 중 4-알릴테트라하이드로-2H-피란-4-올 (150 mg, 1.055 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.246 mL, 2.110 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (0.265 mL, 0.021 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (903 mg, 4.22 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반시키며 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 물 (10 mL) 및 포화 NaHCO3 수용액 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 3% → 6% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트알데하이드 (67 mg, 0.465 mmol, 44% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.89 (t, J=1.3 Hz, 1H), 3.90 - 3.80 (m, 2H), 3.78 - 3.69 (m, 2H), 3.50 (s, 1H), 2.70 (d, J=1.3 Hz, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 4H).
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00180
DCE (0.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (40 mg, 0.061 mmol) 및 2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)아세트알데하이드 (13.19 mg, 0.091 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.027 mL, 0.091 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (25.8 mg, 0.122 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 40% 9:1 아세톤:메탄올/60% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (33.2 mg, 0.042 mmol, 69% 수율)를 무색 포움을 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.43 - 7.32 (m, 5H), 5.36 - 5.31 (m, 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.0, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 2H), 4.53 - 4.45 (m, 1H), 3.94 - 3.82 (m, 2H), 3.80 - 3.70 (m, 2H), 2.86 - 2.69 (m, 2H), 2.67 - 2.51 (m, 2H), 2.19 - 0.86 (m, 33H), 1.70 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 784.6 [(M+H)+, C51H75FNO4에 대한 계산치 784.6], tR = 4.69 min (방법 2-2).
단계 4. 1,4-디옥산 (0.7 mL) 및 EtOH (0.35 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (56 mg, 0.071 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.179 mL, 0.357 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시테트라하이드로-2H-피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (37.1 mg, 64% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.28 - 5.21 (m, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.97 - 3.79 (m, 4H), 3.46 - 3.31 (m, 2H), 2.92 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.34 - 1.09 (m, 33H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H); LC/MS m/e 694.6 [(M+H)+, C44H69FNO4에 대한 계산치 694.5], tR = 4.27 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.95 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.14 min.
실시예 2-13
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00181
단계 1. 4-알릴-4-하이드록시테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드의 제조
Figure pct00182
THF (15 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (10.83 mL, 10.83 mmol)의 용액에 0℃에서 캐뉼라를 통해 THF (50 mL) 중 디하이드로-2H-티오피란-4(3H)-온 1,1-디옥사이드 (1.07 g, 7.22 mmol)의 용액 (오일조에서 70℃로 가온시킴에 의해 용해됨)을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 얼음물 조에서 냉각시키고, 포화된 NH4Cl 용액 (50 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 4-알릴-4-하이드록시테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드 (1.42 g, 7.46 mmol, 103% 수율)를 무색 고형물로서 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.85 (ddt, J=17.2, 9.9, 7.6 Hz, 1H), 5.34 - 5.28 (m, 1H), 5.23 (dq, J=17.1, 1.4 Hz, 1H), 3.43 (td, J=13.6, 3.8 Hz, 2H), 2.92 - 2.84 (m, 2H), 2.32 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.23 (td, J=13.8, 3.3 Hz, 2H), 2.05 - 1.97 (m, 2H).
단계 2. 2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00183
디옥산 (80 mL) 및 물 (20 mL) 중 4-알릴-4-하이드록시테트라하이드로-2H-티오피란 1,1-디옥사이드 (1.52 g, 7.99 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (1.861 mL, 15.98 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (1.254 mL, 0.160 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (6.84 g, 32.0 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 1 N HCl 용액 (50 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (12 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 1 N HCl 용액 (10 mL), 포화 NaHCO3 수용액 (10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 3% → 10% 메탄올; 80 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아세트알데하이드 (821 mg, 4.27 mmol, 54% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.86 (s, 1H), 3.54 - 3.43 (m, 3H), 2.91 - 2.83 (m, 2H), 2.80 (s, 2H), 2.28 - 2.14 (m, 4H).
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00184
DCE (7.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (632 mg, 0.963 mmol) 및 2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)아세트알데하이드 (296 mg, 1.542 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.452 mL, 1.542 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (408 mg, 1.927 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (25 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 40% 9:1 아세톤:메탄올/60% 헥산; 80 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (591 mg, 0.710 mmol, 74% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.32 (m, 5H), 5.34 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.61 - 4.55 (m, 1H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 3.58 - 3.46 (m, 2H), 2.91 - 2.81 (m, 3H), 2.78 - 2.70 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.53 (td, J=10.8, 5.6 Hz, 1H), 2.17 - 1.06 (m, 33H), 1.70 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.87 (s, 3H); LC/MS m/e 832.6 [(M+H)+, C51H75FNO5S에 대한 계산치 832.5], tR = 4.64 min (방법 2-2).
단계 4. 1,4-디옥산 (6 mL) 및 EtOH (3 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (500 mg, 0.601 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (1.502 mL, 3.00 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2.5 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 6 N HCl (0.20 mL, 2 eq)을 첨가하여 반응 혼합물을 부분적으로 중화시켰다. 혼합물을 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1,1-디옥시도테트라하이드로-2H-티오피란-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (435 mg, 84% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.59 - 3.33 (m, 4H), 3.10 - 2.97 (m, 2H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.42 - 1.12 (m, 33H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 742.6 [(M+H)+, C44H69FNO5S에 대한 계산치 742.5], tR = 4.19 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.71 min; HPLC (방법 2-2): tR = 19.66 min.
실시예 2-14
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00185
단계 1. 4-알릴-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-올의 제조
Figure pct00186
THF (15 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (5.08 mL, 5.08 mmol)의 용액에 0 ℃에서 캐뉼라를 통해 THF (5 mL) 중 1-(메틸설포닐)피페리딘-4-온 (300 mg, 1.693 mmol)의 용액을 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 얼음물 조에서 냉각시키고, 포화된 NH4Cl 용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 4-알릴-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-올 (423 mg, 1.929 mmol, 114% 수율 (불순))을 무색 고형물로서 수득하였고, 이것을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다. 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 5.87 (ddt, J=17.2, 10.0, 7.6 Hz, 1H), 5.28 - 5.24 (m, 1H), 5.23 - 5.17 (m, 1H), 3.61 (dt, J=11.4, 2.4 Hz, 2H), 3.05 (td, J=11.9, 3.0 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 2.27 (d, J=7.5 Hz, 2H), 1.80 - 1.71 (m, 2H), 1.70 - 1.61 (m, 2H).
단계 2. 2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00187
디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) 중 4-알릴-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-올 (210 mg, 0.958 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.223 mL, 1.915 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.150 mL, 0.019 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (819 mg, 3.83 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 물 (10 mL) 및 포화 NaHCO3 수용액 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (5 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 3% → 8% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드 (101 mg, 0.456 mmol, 48% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.87 (s, 1H), 3.64 - 3.55 (m, 2H), 3.15 - 3.05 (m, 3H), 2.81 (s, 3H), 2.73 (d, J=0.8 Hz, 2H), 1.93 - 1.85 (m, 2H), 1.73 (dd, J=12.8, 4.5 Hz, 2H).
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00188
DCE (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol) 및 2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)아세트알데하이드 (25.3 mg, 0.114 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.034 mL, 0.114 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (32.3 mg, 0.152 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 30% 9:1 아세톤:메탄올/70% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (49 mg, 0.057 mmol, 75% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.61 - 4.55 (m, 1H), 4.49 (td, J=8.9, 5.5 Hz, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 2H), 3.16 - 3.05 (m, 2H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.82 (s, 3H), 2.77 - 2.69 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.55 (td, J=10.9, 5.6 Hz, 1H), 2.18 - 0.86 (m, 33H), 1.70 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 861.6 [(M+H)+, C52H78FN2O5S에 대한 계산치 861.6], tR = 4.63 min (방법 2-2).
단계 4. 1,4-디옥산 (0.7 mL) 및 EtOH (0.35 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (48 mg, 0.056 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.139 mL, 0.279 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-1-(메틸설포닐)피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (38.6 mg, 77% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.65 - 3.50 (m, 2H), 3.47 - 3.34 (m, 2H), 3.25 - 3.12 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.5 Hz, 1H), 2.33 - 1.09 (m, 33H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 771.6 [(M+H)+, C45H72FN2O5S에 대한 계산치 771.5], tR = 4.43 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.97 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.11 min.
실시예 2-15
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00189
단계 1. 1-(4-알릴-4-하이드록시피페리딘-1-일)에타논의 제조
Figure pct00190
THF (50 mL) 중 1-아세틸피페리딘-4-온 (1.00 g, 7.08 mmol)의 용액에 -10 ℃ (아세톤/얼음조)에서 알릴마그네슘 브로마이드 (디에틸 에테르 중 1 M) (7.44 mL, 7.44 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 포화된 NH4Cl 용액 (50 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 1-(4-알릴-4-하이드록시피페리딘-1-일)에타논 (836 mg, 4.56 mmol, 64% 수율)을 갈색 오일로서 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.88 (ddt, J=17.2, 10.1, 7.6 Hz, 1H), 5.28 - 5.22 (m, 1H), 5.19 (ddt, J=17.1, 2.1, 1.2 Hz, 1H), 4.41 - 4.33 (m, 1H), 3.65 - 3.56 (m, 1H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.04 (ddd, J=13.4, 9.3, 6.1 Hz, 1H), 2.26 (d, J=7.8 Hz, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.63 - 1.55 (m, 4H).
단계 2. 2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00191
디옥산 (12 mL) 및 물 (3 mL) 중 1-(4-알릴-4-하이드록시피페리딘-1-일)에타논 (280 mg, 1.528 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.356 mL, 3.06 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (t-BuOH 중 2.5%) (0.384 mL, 0.031 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (1307 mg, 6.11 mmol)를 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 2.5 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 물 (10 mL) 및 포화 NaHCO3 수용액 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 클로로포름 중 5% 메탄올로 추출하였다 (8 x 20 mL). 합친 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 4% → 10% 메탄올; 24 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)아세트알데하이드 (48.6 mg, 0.262 mmol, 17% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR은 생성물이 완전히 순수한 것은 아님을 나타내었다. 생성물을 다음 단계에 바로 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.88 (t, J=1.0 Hz, 1H), 4.41 - 4.33 (m, 1H), 3.61 - 3.56 (m, 1H), 3.56 - 3.45 (m, 3H), 3.12 - 3.00 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.87 - 1.76 (m, 2H), 1.54 (tdd, J=12.8, 8.0, 4.9 Hz, 2H).
단계 3. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00192
DCE (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일) 2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (50 mg, 0.076 mmol) 및 2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)아세트알데하이드 (42.4 mg, 0.229 mmol)의 용액에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드 (0.067 mL, 0.229 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반시켰다. 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (48.5 mg, 0.229 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 40% 9:1 아세톤:메탄올/60% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (46 mg, 0.056 mmol, 73% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.16 (m, 2H), 5.15 - 5.10 (m, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.62 (d, J=1.2 Hz, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 1H), 4.52 - 4.46 (m, 1H), 4.38 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.64 - 3.49 (m, 2H), 3.15 - 3.05 (m, 1H), 2.87 - 2.70 (m, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.19 - 0.87 (m, 33H), 2.11 (s, 3H), 1.70 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 825.6 [(M+H)+, C53H78FN2O4에 대한 계산치 825.6], tR = 4.74 min (방법 2-3).
단계 4. 1,4-디옥산 (0.7 mL) 및 EtOH (0.35 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (45 mg, 0.055 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.136 mL, 0.273 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 2 h, 이어서 65℃에서 1 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-아세틸-4-하이드록시피페리딘-4-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (34 mg, 73% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.83 (br. s., 1H), 4.73 (s, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 4.43 - 4.28 (m, 1H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.66 - 3.52 (m, 1H), 3.47 - 3.35 (m, 2H), 3.26 - 3.10 (m, 1H), 2.92 - 2.77 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.39 - 1.10 (m, 33H), 2.18 (s, 3H), 1.75 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 735.6 [(M+H)+, C46H76FN2O4에 대한 계산치 739.6], tR = 4.27 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.86 min; HPLC (방법 2-2): tR = 19.90 min.
2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 및 2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00193
단계 1. 8-메틸-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올의 제조
Figure pct00194
둥근 바닥 플라스크에서 THF (100 mL)에 -78℃에서 N2 하에 메틸리튬 (48.0 mL, 77 mmol) 및 메틸마그네슘 브로마이드 (12.81 mL, 38.4 mmol)를 주사기를 통해 첨가하였다. -78℃에서 1 h 동안 교반시킨 후, THF (50 mL) 중 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-온 (5.00 g, 32.0 mmol)을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1.5 h 동안 교반시켰다. 반응물을 포화 NH4Cl 수용액 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 물 (50 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (100 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-메틸-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올 (5.47 g, 99% 수율)을 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.03 - 3.91 (m, 4H), 1.97 - 1.84 (m, 2H), 1.79 - 1.56 (m, 6H), 1.28 (s, 3H), 1.17 (s, 1H); 13C NMR (100MHz, 클로로포름-d) δ 108.27, 68.52, 63.87, 63.81, 36.33, 30.47, 29.39.
단계 2. 4-하이드록시-4-메틸사이클로헥사논의 제조
Figure pct00195
아세톤 (40 mL) 및 물 (60 mL) 중 8-메틸-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올 (5.26 g, 30.5 mmol)의 용액에 실온에서 4 M HCl (22.91 mL, 92 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 14 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고형물 소듐 카르보네이트의 첨가에 의해 중화시켰다. 아세톤을 rotovapor 상에서 제거하고, 수성층을 에틸 아세테이트 (7 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 MgSO4 상에서 제거하고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 70% 에틸 아세테이트) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-하이드록시-4-메틸사이클로헥사논 (3.27 g, 25.5 mmol, 84% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 2.80 - 2.68 (m, 2H), 2.30 - 2.20 (m, 2H), 2.04 - 1.94 (m, 2H), 1.92 - 1.80 (m, 2H), 1.56 (s, 1H), 1.39 (s, 3H); 13C NMR (100MHz, 클로로포름-d) δ 211.55, 68.14, 38.40, 36.80, 29.51.
단계 3. (트랜스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올 및 (시스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올의 제조
Figure pct00196
THF (200 mL) 중 4-하이드록시-4-메틸사이클로헥사논 (3.20 g, 24.97 mmol)의 용액에 0℃에서 알릴마그네슘 브로마이드 (디에틸 에테르 중 1 M) (62.4 mL, 62.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 포화된 NH4Cl 용액 (70 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 30% → 90% 에틸 아세테이트; 330 g 컬럼, 35분 구배) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (트랜스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올 (1.90 g, 11.16 mmol, 45% 수율)을 백색 고형물로서 그리고 (시스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올 (2.35 g, 13.80 mmol, 55% 수율)을 무색 오일로서 수득하였고, 이들은 정치시에 응고되었다.
(트랜스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.92 (ddt, J=17.3, 10.1, 7.5 Hz, 1H), 5.23 - 5.12 (m, 2H), 2.26 (d, J=7.5 Hz, 2H), 1.85 - 1.71 (m, 4H), 1.55 - 1.43 (m, 4H), 1.28 (s, 3H); 13C NMR (100MHz, 클로로포름-d) δ 133.08, 118.72, 69.66, 68.77, 47.59, 33.87, 32.29, 30.80.
(트랜스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올의 구조는 X-선 결정학에 의해 확인되었다.
(시스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.90 (ddt, J=17.2, 10.0, 7.5 Hz, 1H), 5.21 - 5.10 (m, 2H), 2.25 (dt, J=7.5, 1.0 Hz, 2H), 1.81 - 1.66 (m, 4H), 1.57 - 1.47 (m, 4H), 1.24 (s, 3H); 13C NMR (100MHz, 클로로포름-d) δ 133.12, 118.59, 70.01, 69.34, 44.54, 35.55, 33.99, 26.76.
단계 4a. 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조 (방법 A)
Figure pct00197
디옥산 (40 mL) 및 물 (10 mL) 중 (트랜스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올 (0.98 g, 5.76 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (1.341 mL, 11.51 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.704 mL, 0.115 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (4.92 g, 23.03 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 1 N HCl (aq) (25mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하였다 (20 x 50 mL). (수성층으로부터 생성물을 추출하는 것은 어려웠다.) 합친 유기층을 포화된 NaHCO3 용액 (8 mL)으로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 바이카르보네이트 세척액의 TLC는 일부 생성물이 수성층으로 갔음을 나타내었다. 이 층을 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄에 현탁시키고, 유기 추출물로부터의 잔류물과 함께, 실리카겔 (3% 메탄올/30% 헥산과 함께 70% 에틸 아세테이트 → 3% 메탄올과 함께 100% 에틸 아세테이트; 120 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (0.78 g, 4.53 mmol, 79% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.91 (t, J=1.6 Hz, 1H), 2.65 (d, J=1.8 Hz, 2H), 1.91 - 1.73 (m, 4H), 1.69 - 1.62 (m, 2H), 1.53 - 1.46 (m, 2H), 1.28 (s, 3H).
단계 4a. 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드를 제조하기 위한 대안적인 방법 (방법 B)
Figure pct00198
(트랜스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올 (1.00 g, 5.87 mmol)을 250 mL 둥근 바닥 플라스크에서 CH2Cl2 (50 mL) 및 MeOH (10 mL)에 용해시켰다. N-메틸모르폴린-N-옥사이드 (NMO) (0.826 g, 7.05 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다 [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Org . Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]. 용액이 오존으로 포화된 지 (청색으로 변함) 수 분 후까지 (총 시간 10분) 오존을 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 그 후 청색이 사라질 때까지 질소를 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 그 후 디메틸 설파이드 (4.34 mL, 58.7 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 2.5 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (1% 메탄올/50% 헥산과 함께 50% 에틸 아세테이트 → 1% 메탄올/5% 헥산과 함께 95% 에틸 아세테이트; 80 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (937 mg, 5.44 mmol, 93% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.90 (s, 1H), 2.65 (s, 2H), 1.89 - 1.74 (m, 4H), 1.69 - 1.62 (m, 2H), 1.52 - 1.46 (m, 2H), 1.28 (s, 3H); 13C NMR (100MHz, 클로로포름-d) δ 203.02, 69.65, 68.45, 55.15, 33.34, 32.46, 30.90.
단계 4b. 2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00199
디옥산 (8 mL) 및 물 (2 mL) 중 (시스)-1-알릴-4-메틸사이클로헥산-1,4-디올 (185 mg, 1.087 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.253 mL, 2.173 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.133 mL, 0.022 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (930 mg, 4.35 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반시키며 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 1N HCl (aq) (15 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (10 mL)로 추출하였다. 첫 번째 추출 후에, 수성층을 소듐 클로라이드로 포화시키고, 수성층을 에틸 아세테이트 (17 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 수성 NaHCO3 (2 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 8% → 12% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (146 mg, 0.848 mmol, 78% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.91 (t, J=1.8 Hz, 1H), 2.65 (d, J=2.0 Hz, 2H), 1.91 - 1.76 (m, 4H), 1.63 - 1.46 (m, 4H), 1.26 (s, 3H).
실시예 2-16
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00200
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00201
(S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (1.00 g, 1.524 mmol) 및 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (0.420 g, 2.439 mmol)를 MeOH (12.5 mL) 및 아세트산 (2.5 mL)에 용해시켰다. 보란-2-피콜린 복합체 (0.261 g, 2.439 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 14 h 동안 교반시켰다. 추가의 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (0.131 g, 0.762 mmol, 0.5 eq) 및 보란-2-피콜린 복합체 (0.082 g, 0.762 mmol, 0.5 eq)를 반응 혼합물에 첨가하고, 1 h 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 물 (5 mL) 및 고형물 소듐 카르보네이트의 첨가에 의해 중화시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (50 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (7 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (15 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (5% 메탄올/80% 헥산과 함께 20% 에틸 아세테이트 → 5% 메탄올/10% 헥산과 함께 90% 에틸 아세테이트; 120 g 컬럼, 25분 구배) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (856 mg, 1.054 mmol, 69% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.74 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.62 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 2.85 - 2.78 (m, 1H), 2.77 - 2.70 (m, 1H), 2.66 - 2.55 (m, 2H), 2.18 - 1.02 (m, 37H), 1.69 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 812.6 [(M+H)+, C53H79FNO4에 대한 계산치 812.6], tR = 4.89 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (7.5 mL) 및 EtOH (2.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (401 mg, 0.494 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (1.234 mL, 2.469 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2.5 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올 (4 mL)로 희석시키고 (침전물을 용해시키기 위해), 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-4)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (267 mg, 0.316 mmol, 64% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.27 - 5.22 (m, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.44 (m, 1H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.31 - 1.34 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.15 - 1.11 (m, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 722.6 [(M+H)+, C46H73FNO4에 대한 계산치 722.6], tR = 4.36 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 19.03 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.26 min.
실시예 2-17
(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00202
단계 1. (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00203
(R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (120 mg, 0.183 mmol) 및 2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (56.7 mg, 0.329 mmol)를 MeOH (1.5 mL) 및 아세트산 (0.3 mL)에 용해시켰다. 보란-2-피콜린 복합체 (35.2 mg, 0.329 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (20 mL) 및 포화 소듐 카르보네이트 수용액 (2 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 25 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (15 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (5% 메탄올/80% 헥산과 함께 20% 에틸 아세테이트 → 5% 메탄올/10% 헥산과 함께 90% 에틸 아세테이트; 80 g 컬럼, 20분 구배) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (96.7 mg, 0.119 mmol, 65% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.39 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.22 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (dd, J=6.1, 1.5 Hz, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 2H), 4.52 - 4.45 (m, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 2H), 2.65 - 2.53 (m, 2H), 2.21 - 0.87 (m, 37H), 1.69 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 812.6 [(M+H)+, C53H79FNO4에 대한 계산치 812.6], tR = 4.58 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (1.5 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (95 mg, 0.117 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.292 mL, 0.585 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 4 h 동안 가열시켰다. 반응이 완료되었다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-4)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (40.8 mg, 0.049 mmol, 42% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.62 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.38 - 2.28 (m, 1H), 2.26 - 1.35 (m, 34H), 1.75 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.14 (d, J=9.5 Hz, 2H), 1.10 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 722.6 [(M+H)+, C46H73FNO4에 대한 계산치 722.6], tR = 4.34 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-5): tR = 11.74 min; HPLC (방법 2-6): tR = 11.29 min.
실시예 2-18
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00204
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00205
MeOH (1.4 mL) 및 아세트산 (0.35 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (100 mg, 0.152 mmol), 2-((시스) 1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)아세트알데하이드 (52.5 mg, 0.305 mmol), 및 보란-2-피콜린 복합체 (32.6 mg, 0.305 mmol)의 혼합물을 실온에서 18 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 30% 9:1 아세톤:메탄올/70% 헥산; 40 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (72.5 mg, 0.089 mmol, 59% 수율)를 백색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 - 7.34 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.5 Hz, 1H), 4.73 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.62 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.73 - 2.66 (m, 1H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.18 - 1.00 (m, 37H), 1.69 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.07 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 812.7 [(M+H)+, C53H79FNO4에 대한 계산치 812.6], tR = 4.78 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (1.0 mL) 및 EtOH (0.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (65 mg, 0.080 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.200 mL, 0.400 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 생성물 (37 mg)은 상당한 양의 불순물 (약 10%)을 함유하였다. 그 후 생성물을 역상 예비 HPLC (방법 2-5)에 의해 재정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1,4-디하이드록시-4-메틸사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (22.1 mg, 33% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.64 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.44 - 3.37 (m, 1H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 2.91 - 2.82 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 37H), 1.75 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 722.6 [(M+H)+, C46H73FNO4에 대한 계산치 722.6], tR = 4.34 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.87 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.20 min.
4-(메틸설포닐)사이클로헥사논의 제조 (경로 1)
Figure pct00206
단계 1. 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일 4-메틸벤젠설포네이트의 제조
Figure pct00207
CH2Cl2 (400 mL) 중 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-올 (10 g, 63.2 mmol), 트리에틸아민 (13.22 mL, 95.0 mmol), 및 N,N-디메틸피리딘-4-아민 (0.772 g, 6.32 mmol)의 0℃ 용액에 4-메틸벤젠-1-설포닐 클로라이드 (13.26 g, 69.5 mmol)를 부분씩 첨가하였다. 16시간 동안 교반하면서 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (400 mL)로 희석하고, 물 (2 x 400 mL)로 세척하였다. 합친 유기층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 0% → 30% 에틸 아세테이트; 미정제 생성물을 반으로 나누고 2개의 330 g 컬럼 상에서 정제시켰다) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일 4-메틸벤젠설포네이트 (19.6 g, 62.7 mmol, 99% 수율)를 수득하였다: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.82 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.35 (d, J=8.0 Hz, 2H), 4.66 (tt, J=6.0, 3.0 Hz, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 4H), 2.47 (s, 3H), 1.95 - 1.74 (m, 5H), 1.63 - 1.51 (m, 3H); LC/MS (ESI) m/e 335.2 [(M+Na)+, C15H20O5SNa에 대한 계산치 335.1], tR = 2.06 min (방법 2-1).
단계 2. 8-(메틸티오)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸의 제조
Figure pct00208
에탄올 (26.7 mL) 중 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일 4-메틸벤젠설포네이트 (19.6 g, 62.7 mmol)를 MeOH (80 mL) 중 소듐 티오메톡사이드 (13.19 g, 188 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 압력 용기에서 80℃에서 16 h 동안 가열시켰다. LC-MS는 요망되는 생성물의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 및 물 사이에서 분배시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 250 mL)로 추출하고, 합친 유기층을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 CH2Cl2 및 포화된 소듐 바이카르보네이트 수용액 사이에서 분배시켰다. 수성층을 추가의 CH2Cl2로 추출하였다. 합친 유기층을 소듐 설페이트 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시키고, 실리카겔 (100% 헥산 → 5% 메탄올/75% 헥산과 함께 25% 에틸 아세테이트; 330 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 8-(메틸티오)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸 (9.6 g, 51.0 mmol, 81% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.93 (s, 4H), 2.62 (tt, J=9.9, 3.8 Hz, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.02 - 1.93 (m, 2H), 1.87 - 1.78 (m, 2H), 1.72 - 1.52 (m, 4H); LC/MS (ESI) m/e 189.2 [(M+H)+, C9H16O2S에 대한 계산치 189.1], tR = 1.91 min (방법 2-1).
단계 3. 8-(메틸설포닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸의 제조
Figure pct00209
CH2Cl2 (400 mL) 중 8-(메틸티오)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸 (9.6 g, 51.0 mmol)의 용액에 mCPBA (22.85 g, 102 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 용액을 실온으로 가온시키고, 15 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 1 N 수성 소듐 하이드록사이드 (200 mL)를 함유하는 분리 깔때기로 옮기고, 에틸 아세테이트 (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 8-(메틸설포닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸 (9.42 g, 42.8 mmol, 84% 수율)을 수득하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.99 - 3.95 (m, 4H), 2.90 - 2.80 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.29 - 2.19 (m, 2H), 1.98 - 1.83 (m, 4H), 1.67 - 1.56 (m, 2H).
단계 4. 4-(메틸설포닐)사이클로헥사논의 제조
Figure pct00210
둥근 바닥 플라스크에서, HCl (71.1 mL, 427 mmol)에 8-(메틸설포닐)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸 (9.4 g, 42.7 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 rt에서 16 h 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 진공에서 부분적으로 농축시키고, EtOAc (200 mL) 및 물 (200 mL) 사이에서 분배시켰다. 수성층을 EtOAc (3 x 200 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액, 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카겔 (1% 메탄올/30% 헥산과 함께 70% 에틸 아세테이트 → 1% 메탄올과 함께 100% 에틸 아세테이트; 330 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-(메틸설포닐)사이클로헥사논 (4.7 g, 26.7 mmol, 63% 수율)을 수득하였다: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 3.35 - 3.21 (m, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.65 - 2.56 (m, 2H), 2.54 - 2.35 (m, 4H), 2.16 - 2.01 (m, 2H).
4-(메틸설포닐)사이클로헥사논을 제조하기 위한 대안적인 방법 (경로 2)
Figure pct00211
벤젠 (50 mL) 중 (메틸설포닐)에텐 (10.0 g, 94 mmol)의 용액에 (부타-1,3-디엔-2-일옥시)트리메틸실란 (14.07 g, 99 mmol) 및 하이드로퀴논 (20 mg, 0.182 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 가열 전에 -78℃에서 여러 번 탈기시켰다. 내용물을 밀봉시키고, 105℃에서 48시간 동안 가열시켰다. 반응물을 CDCl3 중 NMR에 의해 분석하였고, 이는 약 10%의 비닐 설폰 잔류물을 나타내었다. 추가의 (부타-1,3-디엔-2-일옥시)트리메틸실란 (4 mL)을 첨가하고, 추가 48시간 동안 가열을 재개하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 실온에서 (약 19℃) 걸쭉한 검으로 증발시켰다. 혼합물을 아세톤 (250 mL)으로 재희석시켜 투명한 용액을 형성하였다. 차가워질 때까지 혼합물을 얼음조에서 냉각시켰다. 4 mL의 0.25 N HCl (동일한 얼음조에서 미리-냉각됨)을 첨가하여 탁한 혼합물을 형성하였고, 이는 0℃에서 15분의 교반 후에 투명해졌고, 이어서 추가 10분 후에 탁한 상태로 돌아왔으며, 나머지 교반 기간 동안 탁한 상태로 유지되었다. 약 1시간의 총 반응 시간 후에 아세톤 용액을 실리카겔 타입-H의 짧은 베드를 통해 여과시킨 다음, 더 많은 아세톤으로 세척하였다. 여과액을 rotovapor 상에서 19℃ 조 온도에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 정제를 위해 각각 7.75 gm의 두 부분으로 나누었다. 생성물을 실리카겔 (헥산 중 30% 에틸 아세테이트 → 100% 에틸 아세테이트; 2개의 330 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-(메틸설포닐)사이클로헥사논 (16.7 g, 100% 수율)을 백색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.29 (tt, J=11.0, 3.9 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H), 2.73 - 2.62 (m, 2H), 2.58 - 2.37 (m, 4H), 2.15 (qd, J=11.9, 4.5 Hz, 2H).
2-(시스-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 및 2-(트랜스-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00212
단계 1. (시스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올 및 (트랜스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올의 제조
Figure pct00213
THF (40 mL) 중 4-(메틸설포닐)사이클로헥사논 (1.03 g, 5.84 mmol)의 용액에 0℃에서 캐뉼라를 통해 알릴마그네슘 브로마이드 (7.60 mL, 7.60 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반시켰다. 반응물을 포화된 NH4Cl 용액 (25 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 수성층을 에틸 아세테이트 (5 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (1% 메탄올/30% 헥산과 함께 70% 에틸 아세테이트 → 1% 메탄올과 함께 100% 에틸 아세테이트; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (시스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올 (374 mg, 1.713 mmol, 29% 수율)을 백색 고형물로서 그리고 (트랜스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올 (551 mg, 2.52 mmol, 43% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
(시스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 5.96 - 5.79 (m, 1H), 5.26 - 5.21 (m, 1H), 5.18 (ddt, J=17.1, 2.1, 1.2 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.80 (tt, J=12.5, 3.6 Hz, 1H), 2.25 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.15 - 2.07 (m, 2H), 1.97 (qd, J=13.0, 3.8 Hz, 2H), 1.88 - 1.81 (m, 2H), 1.52 - 1.42 (m, 2H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ 132.50, 120.02, 69.06, 62.26, 47.86, 36.85, 35.67, 21.13.
(시스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올의 구조를 X-선 결정학에 의해 확인하였다.
(트랜스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올:
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 5.88 (ddt, J=17.2, 10.1, 7.4 Hz, 1H), 5.28 - 5.16 (m, 2H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.35 (d, J=7.5 Hz, 2H), 2.23 - 2.14 (m, 2H), 2.02 - 1.93 (m, 2H), 1.90 - 1.78 (m, 2H), 1.57 - 1.46 (m, 2H); 13C NMR (100MHz, CDCl3) δ 132.62, 120.19, 69.20, 62.41, 48.00, 36.98, 35.83, 21.29.
단계 2a. 2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조 (방법 A)
Figure pct00214
디옥산 (4.4 mL) 및 물 (1.1 mL) 중 (시스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올 (125 mg, 0.573 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.133 mL, 1.145 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.070 mL, 0.011 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (490 mg, 2.290 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반시키며 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 1 N HCl (aq) (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (20 x 15 mL)로 추출하였다. (생성물을 수성층으로부터 추출하는 것은 어려웠다.) 합친 유기층을 포화된 NaHCO3 용액 (8 mL)으로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 바이카르보네이트 세척액의 TLC는 일부 생성물이 수성층으로 갔음을 나타내었다. 이 층을 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄에 현탁시키고, 유기 추출물로부터의 잔류물과 함께, 실리카겔 (3% 메탄올/20% 헥산과 함께 80% 에틸 아세테이트 → 3% 메탄올과 함께 100% 에틸 아세테이트; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (94.4 mg, 0.429 mmol, 75% 수율)를 무색 오일로서 수득하였고, 이는 정치시에 응고되었다: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.87 (t, J=1.3 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.82 - 2.75 (m, 1H), 2.68 (d, J=1.0 Hz, 2H), 2.13 - 1.98 (m, 6H), 1.50 - 1.39 (m, 2H).
단계 2a. 2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조 (방법 B)
(트랜스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올 (3.4 g, 15.57 mmol)을 500 mL 둥근 바닥 플라스크에서 CH2Cl2 (160 mL) 및 MeOH (32.0 mL)에 용해시켰다. N-메틸모르폴린-N-옥사이드 (NMO) (2.189 g, 18.69 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다 [Schwartz, C., Raible, J., Mott, K., Dussault, P. H. Org. Lett. 2006, 8, 3199 - 3201]. 용액이 오존으로 포화된 지 (청색으로 변함) 수 분 후까지 (총 시간 25분) 오존을 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 그 후 청색이 사라질 때까지 질소를 반응 혼합물을 통해 버블링시켰다. 그 후 디메틸 설파이드 (11.52 mL, 156 mmol) 를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (1% 메탄올/50% 헥산과 함께 50% 에틸 아세테이트 → 1% 메탄올/5% 헥산과 함께 95% 에틸 아세테이트; 330 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-((1s,4s)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (3.31 g, 15.03 mmol, 96% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.87 (t, J=1.1 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.82 - 2.76 (m, 1H), 2.67 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.13 - 1.98 (m, 6H), 1.50 - 1.38 (m, 2H); 13C NMR (101MHz, 클로로포름-d) δ 202.5, 68.9, 61.9, 54.9, 36.8, 35.9, 20.8.
단계 2b. 2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드의 제조
Figure pct00215
디옥산 (10 mL) 및 물 (2.5 mL) 중 (트랜스)-1-알릴-4-(메틸설포닐)사이클로헥산올 (242 mg, 1.108 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.258 mL, 2.217 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (물 중 4%) (0.135 mL, 0.022 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (948 mg, 4.43 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 혼합물을 1 N HCl (aq) (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (20 x 20 mL)로 추출하였다. (생성물을 수성층으로부터 추출하는 것은 어려웠다.) 합친 유기층을 포화된 NaHCO3 용액 (8 mL)으로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 바이카르보네이트 세척액의 TLC는 일부 생성물이 수성층으로 갔음을 나타내었다. 이 층을 농축시켰다. 잔류물을 디클로로메탄에 현탁시키고, 유기 추출물로부터의 잔류물과 함께, 실리카겔 (3% 메탄올/20% 헥산과 함께 80% 에틸 아세테이트 → 3% 메탄올과 함께 100% 에틸 아세테이트; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (191 mg, 0.867 mmol, 78% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.89 (t, J=1.3 Hz, 1H), 3.13 (br. s., 1H), 3.02 - 2.93 (m, 1H), 2.91 (s, 3H), 2.79 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.29 - 2.17 (m, 2H), 2.13 - 2.04 (m, 2H), 1.92 - 1.78 (m, 2H), 1.68 - 1.57 (m, 2H).
실시예 2-19
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00216
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00217
MeOH (8 mL) 및 아세트산 (1.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (550 mg, 0.838 mmol), 2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (406 mg, 1.845 mmol), 및 보란-2-피콜린 복합체 (197 mg, 1.845 mmol)의 혼합물을 14 h 동안 실온에서 교반시켰다. LC/MS는 일부 남아 있는 출발 물질과 함께 요망되는 질량 피크를 나타내었다. 추가의 2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (56 mg, 0.254 mmol, 0.3 eq) 및 보란-2-피콜린 복합체 (27 mg, 0.252 mmol, 0.3 eq)를 첨가하고, 3 h 동안 계속 교반하였다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (20 mL) 및 포화 소듐 카르보네이트 수용액 (2 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 70% 9:1 아세톤:메탄올/30% 헥산, 20분 구배; 80 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (566 mg, 0.658 mmol, 78% 수율)를 백색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-dδ 7.41 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.2, 1.8 Hz, 1H), 4.75 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.64 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.83 - 2.69 (m, 3H), 2.64 - 2.51 (m, 2H), 2.19 - 1.02 (m, 36H), 1.70 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 860.6 [(M+H)+, C53H79FNO5S에 대한 계산치 860.6], tR = 4.63 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (9 mL) 및 EtOH (3 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (537 mg, 0.624 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (1.561 mL, 3.12 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2.5 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 메탄올 (4 mL)로 희석하고 (침전물을 용해시키기 위해), 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (438 mg, 0.495 mmol, 79% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.27 - 5.21 (m, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.73 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.47 - 3.33 (m, 2H), 3.08 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.89 - 2.80 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 37H), 1.75 (s, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 770.5 [(M+H)+, C46H73FNO5S에 대한 계산치 770.5], tR = 4.22 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.75 min; HPLC (방법 2-2): tR = 19.89 min.
실시예 2-20
(R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00218
단계 1. (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00219
MeOH (1.2 mL) 중 (R)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (100 mg, 0.152 mmol) 및 2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (60.4 mg, 0.274 mmol)의 현탁액에 보란-2-피콜린 복합체 (29.4 mg, 0.274 mmol)에 이어 아세트산 (0.24 mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL) 및 포화 소듐 카르보네이트 수용액 (1 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 5 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (5% 메탄올/80% 헥산과 함께 20% 에틸 아세테이트 → 5% 메탄올/10% 헥산과 함께 90% 에틸 아세테이트; 24 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (120 mg, 0.139 mmol, 92% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 - 7.30 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.15 (m, 2H), 5.11 (d, J=5.7 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.64 - 4.55 (m, 2H), 4.51 - 4.45 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.83 - 2.69 (m, 4H), 2.64 - 2.49 (m, 2H), 2.21 - 0.90 (m, 36H), 1.70 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.85 (s, 3H); LC/MS m/e 860.6 [(M+H)+, C53H79FNO4에 대한 계산치 812.6], tR = 4.62 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (1.5 mL) 및 MeOH (0.5 mL) 중 (R)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (115 mg, 0.134 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.334 mL, 0.668 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 4 h 동안 가열시켰다. 반응이 완료되었다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 6 N HCl (70 μL)의 첨가에 의해 부분적으로 중화시켰다. 그 후 혼합물을 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-5)에 의해 정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (R)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((시스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (72.6 mg, 0.082 mmol, 61% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.54 - 4.46 (m, 1H), 3.47 - 3.34 (m, 2H), 3.09 - 2.99 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.8 Hz, 1H), 2.35 - 1.71 (m, 21H), 1.75 (s, 3H), 1.65 - 1.32 (m, 14H), 1.17 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 770.5 [(M+H)+, C46H73FNO5S에 대한 계산치 770.5], tR = 4.33 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-5): tR = 11.55 min; HPLC (방법 2-6): tR = 11.20 min.
실시예 2-21
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00220
단계 1. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00221
메탄올 (2.5 mL) 및 아세트산 (0.5 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (150 mg, 0.229 mmol), 2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)아세트알데하이드 (126 mg, 0.572 mmol), 및 보란-2-피콜린 복합체 (61.1 mg, 0.572 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (10 mL) 및 포화 소듐 카르보네이트 수용액 (2 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 50% 9:1 아세톤:메탄올/50% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((1r,4S)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (143 mg, 0.166 mmol, 73% 수율)를 무색 필름으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.32 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J=1.7 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.52 - 4.46 (m, 1H), 2.99 - 2.91 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.83 - 2.76 (m, 1H), 2.71 - 2.50 (m, 3H), 2.19 - 1.04 (m, 36H), 1.69 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.98 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 860.6 [(M+H)+, C53H79FNO5S에 대한 계산치 860.6], tR = 4.61 min (방법 2-3).
단계 2. 1,4-디옥산 (1 mL) 및 EtOH (0.5 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (80 mg, 0.093 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.232 mL, 0.465 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켰다. 생성물 (59 mg)은 상당한 양의 불순물 (약 5-10%)을 함유하였다. 그 후 생성물을 역상 예비 HPLC (방법 2-6)에 의해 재정제시켰다. 유기 용매를 rotovapor 상에서 증발시키고, 수성 혼합물을 동결건조시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-((트랜스)-1-하이드록시-4-(메틸설포닐)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (27.2 mg, 33% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.66 - 4.57 (m, 1H), 4.54 - 4.47 (m, 1H), 3.42 (dd, J=8.2, 4.7 Hz, 1H), 3.36 - 3.28 (m, 1H), 3.18 - 3.10 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 37H), 1.75 (s, 3H), 1.14 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H); LC/MS m/e 770.5 [(M+H)+, C46H73FNO5S에 대한 계산치 770.5], tR = 4.20 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.74 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.05 min.
실시예 2-22
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시-4-((메틸설포닐)옥시)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00222
단계 1. 4-옥소사이클로헥실 메탄설포네이트의 제조
Figure pct00223
메탄설포닐 클로라이드 (0.746 mL, 9.64 mmol) 및 트리에틸아민 (1.343 mL, 9.64 mmol)을 디클로로메탄 (10 mL) 중 4-하이드록시사이클로헥사논 (1 g, 8.76 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 농축시키고, 생성물을 실리카겔 (0% 헥산 → 60% 9:1 아세톤:메탄올/40% 헥산, 80 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-옥소사이클로헥실 메탄설포네이트 (1.65 g, 8.58 mmol, 98% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.14 (tt, J=5.5, 2.8 Hz, 1H), 3.11 (s, 3H), 2.75 - 2.59 (m, 2H), 2.49 - 2.28 (m, 4H), 2.24 - 2.06 (m, 2H).
단계 2. 4-알릴-4-하이드록시사이클로헥실 메탄설포네이트의 제조
Figure pct00224
THF (75 mL) 중 알릴마그네슘 브로마이드 (9.83 mL, 9.83 mmol)의 용액에 -78℃에서 4-옥소사이클로헥실 메탄설포네이트 (1.8 g, 9.36 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 2 h 동안 교반시켰다. 반응물을 포화된 NH4Cl 용액 (60 mL)의 첨가에 의해 켄칭시켰다. 혼합물을 분리 깔때기로 옮기고, 층을 분리시켰다. 수성층을 에테르 (5 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 4-알릴-4-하이드록시사이클로헥실 메탄설포네이트 (1.15 g, 4.91 mmol, 52% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 생성물을 실리카겔 (10% 헥산:에틸 아세테이트:MeOH (4:4:1)/90% 헥산 → 50% 헥산:에틸 아세테이트:MeOH (4:4:1)/50% 헥산; 120g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-알릴-4-하이드록시사이클로헥실 메탄설포네이트 (1.15 g, 4.91 mmol, 52% 수율)를 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 5.83 (ddt, J=17.2, 9.9, 7.5 Hz, 1H), 5.20 - 5.04 (m, 2H), 4.68 - 4.53 (m, 1H), 2.99 (s, 3H), 2.18 (d, J=7.3 Hz, 2H), 1.99 - 1.87 (m, 4H), 1.71 (s, 2H), 1.53 - 1.37 (m, 2H).
단계 3. 4-하이드록시-4-(2-옥소에틸)사이클로헥실 메탄설포네이트의 제조
Figure pct00225
디옥산 (12 mL) 및 물 (3.00 mL) 중 4-알릴-4-하이드록시사이클로헥실 메탄설포네이트 (182 mg, 0.777 mmol)의 용액에 0℃에서 2,6-루티딘 (0.181 mL, 1.553 mmol), 오스뮴 테트록사이드 (t-BuOH 중 2.5%) (0.195 mL, 0.016 mmol), 및 소듐 퍼아이오데이트 (665 mg, 3.11 mmol)를 첨가하였다. 14 h 동안 교반하면서 얼음물 조가 녹음에 따라 반응 혼합물이 실온으로 가온되게 하였다. 반응 혼합물을 물 (50 mL) 및 포화 NaHCO3 수용액 (50 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 0% → 8% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-하이드록시-4-(2-옥소에틸)사이클로헥실 메탄설포네이트 (91 mg, 0.385 mmol, 50% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 9.86 (t, J=1.3 Hz, 1H), 4.66 (tt, J=10.5, 4.2 Hz, 1H), 3.03 (s, 3H), 2.65 (d, J=1.3 Hz, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 2H), 2.00 - 1.89 (m, 4H), 1.54 - 1.43 (m, 2H).
단계 4. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시-4-((메틸설포닐)옥시)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00226
MeOH (1 mL) 및 아세트산 (0.200 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (60 mg, 0.091 mmol), 4-하이드록시-4-(2-옥소에틸)사이클로헥실 메탄설포네이트 (32.4 mg, 0.137 mmol), 및 보란-2-피콜린 복합체 (14.68 mg, 0.137 mmol)의 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시-4-((메틸설포닐)옥시)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (15 mg, 17% 수율)를 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. LC/MS m/e 876.6 [(M+H)+, C53H78FNO6S에 대한 계산치 876.6], tR = 2.66 min (방법 2-1).
단계 5. 소듐 하이드록사이드 (0.038 mL, 0.150 mmol)를 디옥산 (0.5 mL) 및 에탄올 (0.125 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시-4-((메틸설포닐)옥시)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (13.14 mg, 0.015 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 16 h 동안 교반시켰다. 미정제 물질을 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-2, 구배 10분 동안 50-100% B, 이어서 100% B에서 15분 유지)에 의해 정제시켜 정제된 생성물, (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1-하이드록시-4-((메틸설포닐)옥시)사이클로헥실)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산 (3.2 mg, 3.87 μmol, 26% 수율)을 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.76 - 4.67 (m, 2H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.56 - 4.47 (m, 1H), 3.79 (s, 1H), 3.40 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.35 - 3.25 (m, 1H), 3.15 (q, J=7.1 Hz, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.90 (br. s., 1H), 2.62 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.35 - 0.91 (m, 35H), 1.75 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 3H); LC/MS m/e 786.8 [(M+H)+, C46H72FNO6S에 대한 계산치 786.5], tR = 2.46 min (방법 2.1); HPLC (방법 2-3): tR = 2.54 min; HPLC (방법 2-4): tR = 2.29 min.
실시예 2-23
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00227
단계 1. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-클로로에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00228
MeOH (1 mL) 및 아세트산 (0.2 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (100 mg, 0.152 mmol), 2-클로로아세트알데하이드 (0.028 mL, 0.229 mmol), 및 보란-2-피콜린 복합체 (24.46 mg, 0.229 mmol)의 혼합물을 실온에서 18 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 50% 9:1 아세톤:메탄올/50% 헥산; 40 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-클로로에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (57 mg, 0.079 mmol, 52% 수율)를 백색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 3.72 - 3.65 (m, 2H), 2.85 - 2.72 (m, 2H), 2.67 - 2.57 (m, 2H), 2.17 - 1.02 (m, 27H), 1.71 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 718.6 [(M+H)+, C46H66ClFNO2에 대한 계산치 718.5], tR = 4.82 min (방법 2-3).
단계 2. DMSO (0.4 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-클로로에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (15 mg, 0.021 mmol), 4-메틸피페리딘-4-올 (7.21 mg, 0.063 mmol), Hunig's 염기 (0.018 mL, 0.104 mmol), 및 포타슘 아이오다이드 (4.16 mg, 0.025 mmol)의 혼합물을 80℃에서 14시간 동안 가열시켰다. 그 후 반응 혼합물을 rt로 냉각시키고, NaOH (0.052 mL, 0.104 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 여과시키고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-하이드록시-4-메틸피페리딘-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·2 TFA (9.5 mg, 48% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 4H), 3.56 (br. s., 2H), 3.43 (br. s., 2H), 2.85 - 2.76 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.9 Hz, 1H), 2.31 - 1.11 (m, 32H), 1.75 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 707.6 [(M+H)+, C45H72FN2O3에 대한 계산치 707.6], tR = 4.31 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.63 min; HPLC (방법 2-2): tR = 19.58 min.
실시예 2-24
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00229
단계 1. 3-(2-브로모에틸)옥사졸리딘-2-온의 제조
Figure pct00230
CH2Cl2 (30 mL) 중 3-(2-하이드록시에틸)옥사졸리딘-2-온 (1.0 g, 7.63 mmol)의 용액에 카본 테트라브로마이드 (3.03 g, 9.15 mmol)를 첨가하였다. 용액을 0℃로 냉각시킨 후에, 트리페닐포스핀 (2.80 g, 10.68 mmol)을 부분으로 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 18 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 농축시켰다. 잔류물을 에테르 (75 mL)에 현탁시키고, 30분 동안 교반시켰다. 고형물을 여과에 의해 제거하고, 여과액을 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (디클로로메탄 중 1% → 4% 메탄올; 220 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켰다. 크로마토그래피로부터 분리된 첫 번째 화합물은 주로 무색 오일의 생성물 (1.01 g)이었고, 정치시에 응고되었다 (트리페닐포스핀 옥사이드의 존재로 인해). 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 0.5% → 3% 메탄올; 120 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 재정제시켜 3-(2-브로모에틸)옥사졸리딘-2-온 (785 mg, 4.05 mmol, 53% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR은 생성물이 트리페닐포스핀 옥사이드로 오염되었음을 나타내었다. 트리페닐포스핀 옥사이드는 7:1 몰 비의 생성물 대 트리페닐포스핀 옥사이드로서 존재하였다. 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 이용하였다. 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 4.46 - 4.35 (m, 2H), 3.82 - 3.67 (m, 4H), 3.58 - 3.52 (m, 2H).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00231
오븐-건조된 압력 용기에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (70 mg, 0.107 mmol), 3-(2-브로모에틸)옥사졸리딘-2-온 (72.5 mg, 0.373 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (91 mg, 0.427 mmol), 및 포타슘 아이오다이드 (62.0 mg, 0.373 mmol)의 혼합물에 아세토니트릴 (1.0 mL)을 첨가하였다. 캡을 밀봉하고, 반응 혼합물을 120℃에서 14 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 물 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 30% 9:1 아세톤:메탄올/70% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (54.5 mg, 0.071 mmol, 66% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.41 - 7.32 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.72 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.44 (m, 1H), 4.38 - 4.32 (m, 2H), 3.77 - 3.62 (m, 2H), 3.49 - 3.41 (m, 1H), 3.33 (dt, J=14.1, 5.5 Hz, 1H), 2.70 (ddd, J=12.0, 7.3, 5.0 Hz, 1H), 2.65 - 2.52 (m, 3H), 2.19 - 1.10 (m, 27H), 1.70 (s, 3H), 1.06 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 769.6 [(M+H)+, C49H70FN2O4에 대한 계산치 769.5], tR = 4.65 min (방법 2-2).
단계 3. 1,4-디옥산 (0.7 mL) 및 EtOH (0.35 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (53 mg, 0.069 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.172 mL, 0.345 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소옥사졸리딘-3-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (31.4 mg, 62% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.43 (m, 3H), 3.84 (q, J=8.2 Hz, 1H), 3.80 - 3.72 (m, 3H), 3.65 - 3.58 (m, 1H), 3.57 - 3.51 (m, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.32 - 1.11 (m, 27H), 1.76 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 679.5 [(M+H)+, C42H64FN2O4에 대한 계산치 679.5], tR = 4.18 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.68 min; HPLC (방법 2-2): tR = 19.92 min.
실시예 2-25
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00232
단계 1. 2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트의 제조
Figure pct00233
피리딘 (5 mL) 중 1-(2-하이드록시에틸)이미다졸린-2-온 (500 mg, 3.84 mmol)의 용액에 0℃에서 p-톨루엔설포닐 클로라이드 (806 mg, 4.23 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16 h 동안 교반하면서, 그 동안 얼음물 조의 제거에 의해 반응 혼합물이 실온으로 천천히 가온되게 하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (50 mL)를 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 1N HCl (2 x 25 mL)로 세척하였다. 합친 유기층을 포화된 NaHCO3 (25 mL), 염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (디클로로메탄 중 3% → 7% 메탄올; 120 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트 (356 mg, 1.252 mmol, 33% 수율)를 황색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.86 - 7.77 (m, 2H), 7.38 (d, J=8.0 Hz, 2H), 4.51 (br. s., 1H), 4.17 (t, J=5.0 Hz, 2H), 3.59 - 3.52 (m, 2H), 3.47 (t, J=5.0 Hz, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 2.48 (s, 3H); LC/MS m/e 285.1 [(M+H)+, C12H17N2O4S에 대한 계산치 285.1], tR =1.58 min (방법 2-1).
단계 2. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00234
(S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (40 mg, 0.061 mmol), 2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트 (69.4 mg, 0.244 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (64.7 mg, 0.305 mmol), 및 포타슘 아이오다이드 (50.6 mg, 0.305 mmol)를 바이알에서 합쳤다. 아세토니트릴 (1 mL)을 첨가하고, 바이알을 밀봉시키고, 반응 혼합물을 120℃에서 16 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 물 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 40% 9:1 아세톤:메탄올/60% 헥산; 40 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (31 mg, 0.040 mmol, 66% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.38 - 7.33 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.19 (d, J=2.4 Hz, 2H), 5.13 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.55 (m, 2H), 4.53 - 4.45 (m, 1H), 4.32 (s, 1H), 3.61 - 3.47 (m, 3H), 3.46 - 3.35 (m, 4H), 3.24 (dt, J=13.8, 5.3 Hz, 1H), 2.70 - 2.52 (m, 4H), 2.20 - 0.85 (m, 26H), 1.70 (s, 3H), 1.05 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.85 (s, 3H); LC/MS m/e 768.6 [(M+H)+, C49H71FN3O3에 대한 계산치 768.5], tR = 4.61 min (방법 2-2).
단계 3. 1,4-디옥산 (0.5 mL) 및 EtOH (0.25 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (31 mg, 0.040 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (0.101 mL, 0.202 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (19.0 mg, 58% 수율)를 백색 무정형 고형물로서 수득하였다.
1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.24 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.65 - 4.56 (m, 1H), 4.55 - 4.46 (m, 1H), 3.73 - 3.66 (m, 1H), 3.65 - 3.51 (m, 6H), 3.47 - 3.43 (m, 2H), 2.84 - 2.75 (m, 1H), 2.61 (d, J=17.5 Hz, 1H), 2.32 - 1.08 (m, 26H), 1.76 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.00 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.94 (s, 3H); LC/MS m/e 678.5 [(M+H)+, C42H65FN3O3에 대한 계산치 678.5], tR = 4.30 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.88 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.30 min.
실시예 2-26
(S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00235
단계 1. 2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트의 제조
Figure pct00236
THF (4 mL) 중 2-(2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트 (135 mg, 0.475 mmol)의 용액에 0℃에서 소듐 비스(트리메틸실릴)아미드 (0.522 mL, 0.522 mmol)를 첨가하였다. 5분 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄 (0.119 mL, 1.899 mmol)을 주사기를 통해 첨가하였다. 냉각조를 제거하고, 혼합물이 실온으로 가온되게 하고, 2 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 1% → 5% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트 (91.3 mg, 0.306 mmol, 65% 수율)를 연녹색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 7.83 - 7.77 (m, 2H), 7.37 (d, J=8.0 Hz, 2H), 4.15 (t, J=5.1 Hz, 2H), 3.45 (t, J=5.0 Hz, 2H), 3.43 - 3.37 (m, 2H), 3.29 - 3.23 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.47 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 299.2 [(M+H)+, C13H19N2O4S에 대한 계산치 299.1], tR = 1.61 min (방법 2-1).
단계 2. 1-(2-브로모에틸)-3-메틸이미다졸린-2-온의 제조
Figure pct00237
THF (5 mL) 중 2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸 4-메틸벤젠설포네이트 (158 mg, 0.530 mmol)의 용액에 실온에서 리튬 브로마이드 (138 mg, 1.589 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 그 후 반응 혼합물을 60℃에서 3 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액 (5 mL) 및 물 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 에틸 아세테이트 (4 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (CH2Cl2 중 2% → 5% 메탄올; 40 g 컬럼) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 1-(2-브로모에틸)-3-메틸이미다졸린-2-온 (92.3 mg, 0.446 mmol, 84% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.65 - 3.60 (m, 2H), 3.52 - 3.44 (m, 4H), 3.38 - 3.32 (m, 2H), 2.82 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 207.2 [(M+H)+, C6H12BrN2O에 대한 계산치 207.0], tR =1.70 min (방법 2-1).
단계 3. (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00238
오븐-건조된 압력 용기에서 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (60 mg, 0.091 mmol), 1-(2-브로모에틸)-3-메틸이미다졸린-2-온 (56.8 mg, 0.274 mmol), 삼염기성 포타슘 포스페이트 (78 mg, 0.366 mmol), 및 포타슘 아이오다이드 (45.6 mg, 0.274 mmol)의 혼합물에 아세토니트릴 (1.0 mL)을 첨가하였다. 캡을 밀봉하고, 반응 혼합물을 120℃에서 14 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 물 (5 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 50% 9:1 아세톤:메탄올/50% 헥산; 24 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (47.7 mg, 0.061 mmol, 66% 수율)를 백색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.33 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.2, 1.6 Hz, 1H), 4.72 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.47 (m, 1H), 3.45 - 3.20 (m, 6H), 2.82 (s, 3H), 2.68 - 2.51 (m, 4H), 2.19 - 0.87 (m 27H), 1.70 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.85 (s, 3H); LC/MS m/e 782.6 [(M+H)+, C50H73FN3O3에 대한 계산치 782.6], tR = 4.56 min (방법 2-3).
단계 4. 1,4-디옥산 (0.7 mL) 및 EtOH (0.35 mL) 중 (S)-벤질 1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (46 mg, 0.059 mmol)의 용액을 소듐 하이드록사이드 (2M aq) (0.147 mL, 0.294 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 2 h 동안 가열시켰다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 주사기 필터를 통해 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켜 (S)-1-(플루오로메틸)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-3a-((2-(3-메틸-2-옥소이미다졸린-1-일)에틸)아미노)-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)사이클로헥스-3-엔카르복실산·TFA (35.6 mg, 74% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다:
1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.64 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.63 - 3.40 (m, 8H), 2.84 (s, 3H), 2.85 - 2.81 (m, 1H), 2.61 (d, J=16.5 Hz, 1H), 2.31 - 1.12 (m, 27H), 1.76 (s, 3H), 1.15 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.95 (s, 3H); LC/MS m/e 692.6 [(M+H)+, C43H67FN3O3에 대한 계산치 692.5], tR = 4.19 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 18.80 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.44 min.
실시예 2-27
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-아세틸-3,3-디메틸-2-옥소피페라진-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산의 제조
Figure pct00239
단계 1. 4-아세틸-3,3-디메틸피페라진-2-온의 제조
Figure pct00240
CH2Cl2 (1.2 mL) 중 3,3-디메틸피페라진-2-온 (50 mg, 0.390 mmol)의 용액에 0℃에서 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.204 mL, 1.170 mmol)을 첨가한 다음 아세틸 클로라이드 (0.031 mL, 0.429 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 4 h 동안 교반시켰다. 그 후 혼합물을 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (0.2% NH4OH/75% CH2Cl2와 함께 25% 4:1 CH2Cl2:MeOH → 0.2% NH4OH와 함께 100% 4:1 CH2Cl2:MeOH; 40 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 4-아세틸-3,3-디메틸피페라진-2-온 (59.6 mg, 0.350 mmol, 90% 수율)을 무색 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ 3.64 - 3.57 (m, 2H), 3.46 - 3.39 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.77 (s, 6H); LC/MS (ESI) m/e 171.3 [(M+H)+, C8H15N2O2에 대한 계산치 171.2], tR = 0.43 min (방법 2-1).
단계 2. (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-클로로에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트의 제조
Figure pct00241
MeOH (1 mL) 및 아세트산 (0.2 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-아미노-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (100 mg, 0.152 mmol), 2-클로로아세트알데하이드 (0.028 mL, 0.229 mmol), 및 보란-2-피콜린 복합체 (24.46 mg, 0.229 mmol)의 혼합물을 실온에서 18 h 동안 교반시켰다. 혼합물을 포화 소듐 바이카르보네이트 수용액 (10 mL)을 함유하는 분리 깔때기로 옮겼다. 수성층을 디클로로메탄 (4 x 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층을 염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성물을 실리카겔 (10% 9:1 아세톤:메탄올/90% 헥산 → 50% 9:1 아세톤:메탄올/50% 헥산; 40 g 컬럼, λ = 220 nm) 상에서 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제시켜 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-클로로에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (57 mg, 0.079 mmol, 52% 수율)를 무색 포움으로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 클로로포름-d) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.33 (br. s., 1H), 5.23 - 5.16 (m, 2H), 5.14 (dd, J=6.1, 1.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.63 - 4.56 (m, 2H), 4.53 - 4.46 (m, 1H), 3.72 - 3.65 (m, 2H), 2.85 - 2.72 (m, 2H), 2.67 - 2.57 (m, 2H), 2.17 - 1.02 (m, 27H), 1.71 (s, 3H), 1.08 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 0.92 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.86 (s, 3H); LC/MS m/e 718.6 [(M+H)+, C46H66ClFNO2에 대한 계산치 718.5], tR = 4.82 min (방법 2-3).
단계 3. THF (0.6 mL) 중 (S)-벤질 4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-클로로에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실레이트 (22 mg, 0.031 mmol), 4-아세틸-3,3-디메틸피페라진-2-온 (15.64 mg, 0.092 mmol), 및 테트라부틸암모늄 브로마이드 (9.87 mg, 0.031 mmol)의 혼합물에 0℃에서 질소 하에 소듐 비스(트리메틸실릴)아미드 (0.092 mL, 0.092 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반시켰다. 냉각조를 제거한 다음, 반응 혼합물을 75℃에서 14시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 디옥산/메탄올/물에 용해시키고, 2 N HCl (0.10 mL)의 첨가에 의해 중화시켰다. 용액을 여과하고, 역상 예비 HPLC (방법 2-1)에 의해 정제시켜 (S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(4-아세틸-3,3-디메틸-2-옥소피페라진-1-일)에틸)아미노)-5a,5b,8,8,11a-펜타메틸-1-(프로프-1-엔-2-일)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-옥타데카하이드로-1H-사이클로펜타[a]크리센-9-일)-1-(플루오로메틸)사이클로헥스-3-엔카르복실산 · TFA (9.6 mg, 34% 수율)을 백색 무정형 고형물로서 수득하였다: 1H NMR (500MHz, 아세트산-d4) δ 5.39 (br. s., 1H), 5.25 (d, J=4.7 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.65 - 4.57 (m, 1H), 4.55 - 4.47 (m, 1H), 3.96 - 3.76 (m, 3H), 3.73 - 3.64 (m, 3H), 3.53 (t, J=4.1 Hz, 2H), 2.82 (t, J=11.1 Hz, 1H), 2.61 (d, J=16.6 Hz, 1H), 2.31 - 1.12 (s, 27H), 2.22 (s, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.77 (s, 6H), 1.22 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.99 (s, 3H), 0.96 (s, 3H); LC/MS (ESI) m/e 762.6 [(M+H)+, C47H73FN3O4에 대한 계산치 762.6], tR = 4.29 min (방법 2-2); HPLC (방법 2-1): tR = 19.04 min; HPLC (방법 2-2): tR = 20.23 min.
HIV 세포 배양 검정 - MT-2 세포 및 293T 세포를 NIH AIDS Research and Reference Reagent Program으로부터 획득하였다. MT-2 세포를 10% 열-불활성화 우태아 혈청, 100 μg/mL 페니실린 G 및 최대 100 단위/mL의 스트렙토마이신이 보충된 RPMI 1640 배지에서 증식시켰다. 293T 세포를 10% 열-불활성화 우태아 혈청 (FBS), 100 단위/mL 페니실린 G 및 100 μg/mL 스트렙토마이신이 보충된 DMEM 배지에서 증식시켰다. NL4-3의 프로바이러스 DNA 클론을 NIH AIDS Research and Reference Reagent Program으로부터 획득하였다. NL4-3으로부터의 nef 유전자의 섹션이 Renilla 루시퍼라제 유전자로 대체된 재조합 NL4-3 바이러스를 참조 바이러스로서 이용하였다. 또한, 잔기 Gag P373을 P373S로 전환시켰다. 간단히 말해, 재조합 바이러스는 NL4-3의 변경된 프로바이러스 클론의 트랜스펙션에 의해 제조되었다. 트랜스펙션은 Invitrogen (Carlsbad, CA)으로부터의 LipofectAMINE PLUS를 이용하여 제조업체의 지시에 따라 293T 세포에서 수행되었다. 바이러스를 MT-2 세포에서 루시퍼라제 효소 활성을 마커로서 이용하여 적정하였다. Promega (Madison, WI)로부터의 이중 루시퍼라제 키트를 이용하여, 제조업체의 프로토콜을 변형시켜 루시퍼라제를 정량하였다. 희석된 수동 용해 용액을 재현탁된 루시퍼라제 검정 시약 및 재현탁된 Stop & Glo Substrate (2:1:1 비)과 미리 혼합시켰다. 오십 (50) μL의 혼합물을 검정 플레이트 상에서 각각의 흡인된 웰에 첨가하고, 즉시 루시퍼라제 활성을 Wallac TriLux (Perkin-Elmer) 상에서 측정하였다. 재조합 바이러스를 향한 억제제의 항바이러스 활성을 억제제의 연속 희석액의 존재 하에 NLRluc 재조합체로 4-5일 동안 감염된 세포에서 루시퍼라제 활성을 측정함에 의해 정량하였다. 화합물에 대한 EC50 데이터를 하기 표 1에 도시한다.
WT에 대한 EC50, A364V에 대한 EC50, 및 92UG029 바이러스에 대한 EC50의 측정:
WT는 야생형 HIV 바이러스를 나타낸다.
Renilla 루시퍼라제 유전자를 발현시키는 HIV-1 NL4-3은 부위 지정 돌연변이발생에 의해 gag A364V 바이러스로 전환되었다. A364V는 부위 지정 돌연변이체이다.
HIV-1 92UG029를 NIH로부터 획득하였다 (카탈로그 번호: 1650). 이것은 Uganda로부터의 아형 A Gag 및 아형 A Env, X4 (SI) 바이러스이다. 참고문헌: WHO Network for HIV Isolation and Characterization. AIDS Res Hum Retroviruses 10:1359, 1994. 92UG029로부터의 Gag/Pr 부위를 이용하여 Renilla 루시퍼라제 유전자를 발현시키는 HIV-1 NL4-3 바이러스에서의 부위를 대체하였다.
둘 모두의 재조합 바이러스를 NL4-3 바이러스에 대한 HIV 세포 배양 검정에서 상기 기재된 대로 이용하였다. 화합물에 대한 EC50 WT, EC50 A364V 및 EC50 92UG029 데이터는 표 1 및 표 2에 도시된다.
표 2 데이터는 표 1에 보고된 정규 스크린 데이터에 대해 생성된 데이터보다 3x 높은 바이러스 투입으로 생성되었다.
EC50에 대한 생물학적 데이터 기호
Figure pct00242
표 1
Figure pct00243
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Figure pct00250
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Figure pct00278
Figure pct00279
비교 데이터
이러한 양태를 위해, 비교 화합물 A 및 B (개시되어 있고 US 20130210787 - WO 2013/123019에 기재됨), 뿐만 아니라 본 발명의 일부인 화합물 2를 1-(R) 및 1-(S)-부분입체이성질체의 혼합물로서 제조하고, 효능 대 WT, A364V 내성 바이러스, 및 클레이드 A 바이러스 92UG029에 대해 평가하였다. 화합물 A는 WT에 대해 우수한 효능을 나타내었으나, A364V 및 92UC029에 대해서는 화합물 2보다 각각 약 7배 및 >100배 낮은 효능을 나타내었다, 화합물 B는 화합물 2와 비교하여 WT에 대해 유사한 효능을 지녔다. 그러나, 화합물 B는 다른 2개의 바이러스 (A364V 및 92UC029)에 대해 화합물 2보다 6배 낮은 효능을 나타내었다. 선택된 화합물은 또한 랫트에서 이들의 약동학 특성에 대해 평가되었다 (제시되는 경우). 결과는 하기 표 2에 개시된다. 화합물 2는 화합물 A 및 B에 비해 양호한 조합 프로파일 (EC50 WT + EC50 A364V+ EC5092UC029)을 지녔다. 따라서, 단일 부분입체이성질체 화합물 2a 및 2b는 분리되고/거나 추가 평가를 위해 별도로 합성되었다. 단일 부분입체이성질체 (화합물 2a 및 2b) 효능/PK는 또한 부분입체이성질체의 혼합물 (화합물 2)에 의해 관찰된 것과 유사하였다. 따라서, 2a 및 2b 역시 실행가능한 화합물이었다. 임의의 항레트로바이러스 약물에 대한 바이러스 내성의 발생은 HIV-1 감염의 치료에 중요한 문제가 될 수 있으므로, HIV-1 바이러스의 야생형 및 돌연변이 형태 둘 모두에 대해 최고의 효능 프로파일을 갖는 화합물이 종종 약물 개발을 위해 양호한 후보이다.
Figure pct00280
Figure pct00281
표 2
Figure pct00282
랫트 약동학 연구:
랫트에서 화합물의 PO 약동학 연구를 위해, 화합물을 각각 용액으로서 PEG-400/에탄올 (90/10)에 용해시켰다.
랫트. 경정맥에 캐뉼라 이식된 수컷 Sprague-Dawley 랫트 (300-350 g, Hilltop Lab Animals, Inc., Scottsdale, PA)를 이용하였다. 랫트를 PO 약동학 연구에서 밤새 금식시켰다. 경정맥으로부터 0.3 mL의 혈액 샘플을 EDTA-함유 마이크로테이너 튜브 (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ)에 수집하고, 원심분리시켜 혈장을 분리하였다.
시험된 화합물의 PO 연구에서, 랫트 (n = 3)는 5 mg/kg의 경구 용량의 지시 화합물을 수용하였다. 투여 전 및 투여한 지 15, 30, 45, 60, 120, 240, 360, 480, 및 1440분 후에 일련의 혈액 샘플을 수집하였다.
혈장에서 화합물의 정량. 유사 화합물의 내부 표준을 함유하는 2 부피의 아세토니트릴로 혈장 단백질을 침전시킴에 의해 연구 랫트로부터 혈장 샘플의 분취량을 분석을 위해 제조하였다. 10분 동안 원심분리시킴에 의해 생성된 상청액을 침전된 단백질로부터 분리하고, 오토샘플러 바이알로 옮겼다. 샘플을 수동으로 또는 Tomtec 자동화 액체 핸들러를 사용하여 제조하였다. 5 μL의 분취량을 분석을 위해 주입하였다.
HPLC 시스템은 2개의 Shimadzu LC10AD 펌프 (Columbia, MD), Shimadzu SIL-HTC 오토샘플러 (Columbia, MD), 및 Hewlett Packard Series 1100 컬럼 구획 (Palo Alto, CA)으로 구성되었다. 컬럼은 60℃ 및 0.3 ml/min의 유량으로 유지된 YMC Pro C18 (2.0 x 50 mm, 3 μm 입자, Waters Co., Milford, MA)이었다. 이동상은 물 중 10 mM 암모늄 포르메이트 및 0.1% 포름산 (A) 및 메탄올 중 100% 10 mM 암모늄 포르메이트 및 0.1% 포름산 (B)으로 구성되었다. 초기 이동상 조성물은 95% A였다. 샘플 주입 후에, 이동상을 2분에 걸쳐 15% A/85% B로 바꾸고 추가 1분 동안 그 조성으로 유지시켰다. 그 후 이동상은 초기 조건으로 돌아왔고 컬럼을 1분 동안 재평형화시켰다. 총 분석 시간은 4분이었다.
HPLC를 Micromass Quattro LC와 접속시켰다. 초고순도 질소를 분무를 위해서는 100 L/hr 및 탈용매화를 위해서는 1100 L/hr의 유량으로 분무 및 탈용매화 가스로서 이용하였다. 탈용매화 온도는 300℃였고 소스 온도는 150℃였다. 데이터 수집은 선택된 반응 모니터링 (SRM)을 활용하였다. 화합물 및 내부 표준에 대해 (M+H)+ 종을 나타내는 이온이 MS1에서 선택되었고 MS2에 의해 후속하여 모니터되는 특정 생성물 이온을 형성하기 위해 2 x 10-3 torr 압력에서 아르곤과의 충돌에 의해 해리되었다.
상기 설명은 단지 예시적인 것이고, 어떠한 방식으로든 본 발명의 범위 또는 기본 원칙을 제한하는 것으로 이해되어선 안 된다. 실제로, 본원에 제시되고 기재된 것들 외에 본 발명의 다양한 변형이 실시예 및 상기 설명으로부터 당업자에게 자명해질 것이다. 그러한 변형이 또한 첨부된 청구항의 범위 내에 있는 것으로 의도된다.

Claims (22)

  1. 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는, 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00283

    상기 식에서, R1은 이소프로페닐 또는 이소프로필이고;
    X는 C4-8 사이클로알킬, C4-8 사이클로알케닐, C4-9 스피로사이클로알킬, C4-9 스피로사이클로알케닐, C4-8 옥사사이클로알킬, C4-8 디옥사사이클로알킬, C6-8 옥사사이클로알케닐, C6-8 디옥사사이클로알케닐, C6 사이클로디알케닐, C6 옥사사이클로디알케닐, C6-9 옥사스피로사이클로알킬 및 C6-9 옥사스피로사이클로알케닐 고리의 군으로부터 선택되고,
    이 때 X는 A로 치환되고, A는 -C1-6 알킬-할로이며;
    Y는 -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -NR2SO2R2, -SO2NR2R2, -C3-6 사이클로알킬-COOR2, -C2-6 알케닐-COOR2, -C2-6 알키닐-COOR2, -C1-6 알킬-COOR2, -알킬치환된 C1-6 알킬, -CF2-COOR2, -NHC(O)(CH2)n-COOR2, -SO2NR2C(O)R2, -테트라졸, 및 -CONHOH의 군으로부터 선택되고,
    이 때 n = 1-6이며;
    R2는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬 또는 -아릴치환된 C1-6 알킬이고;
    W는 부재하거나, -CH2 또는 -CO이고;
    R3는 -H, -C1-6 알킬 또는 -알킬치환된 C1-6 알킬이고;
    R4는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된-C1-6 알킬, -C1-6 알킬-Q1, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q1, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -COR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, 및
    Figure pct00284
    의 군으로부터 선택되고,
    이 때 G는 -O-, -SO2- 및 -NR12의 군으로부터 선택되고;
    Q1은 -C1-6 알킬, -C1-6 플루오로알킬, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 할로겐, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR8R9 및 -SO2R7의 군으로부터 선택되며;
    R5는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 알킬치환된 알킬, -C1-6 알킬-NR8R9, -COR3, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
    단, W가 -CO일 때, R4 또는 R5는 -COR6일 수 없고;
    추가로, R4 또는 R5 중 하나만이 -COR6 -COCOR6, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택될 수 있거나;
    W가 부재하거나 -CH2인 경우, R4 및 R5는 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00285
    을 형성할 수 있으며;
    R6은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-치환된알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C3-6 치환된사이클로알킬-Q2, -C1-6 알킬-Q2, -C1-6 알킬-치환된알킬-Q2, -C3-6 사이클로알킬-Q2, 아릴-Q2, -NR13R14, 및 -OR15의 군으로부터 선택되고;
    이 때 Q2는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -OR2, -COOR2, -NR8R9, SO2R7, -CONHSO2R3, 및 -CONHSO2NR2R2의 군으로부터 선택되며;
    R7은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -CF3, 아릴, 및 헤테로아릴의 군으로부터 선택되고;
    R8 및 R9는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, -C1-6 알킬-Q2, 및 -COOR3의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
    R8 및 R9는 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00286
    의 군으로부터 선택되는 고리를 형성하고;
    M은 -R15, -SO2R2, -SO2NR2R2, -OH 및 -NR2R12의 군으로부터 선택되고;
    V는 -CR10R11-, -SO2-, -O- 및 -NR12-의 군으로부터 선택되고;
    단, R8 또는 R9 중 하나만이 -COOR3일 수 있으며;
    R10 및 R11은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬 및 -C3-6 사이클로알킬의 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    R12는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬, -CONR2R2, -SO2R3, -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
    R13 및 R14는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3, C1-6 치환된 알킬-Q3 및
    Figure pct00287
    의 군으로부터 독립적으로 선택되고,
    Q3은 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -NR2R12, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, 및 -SO2R3의 군으로부터 선택되고;
    R15는 -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3 및 -C1-6 치환된 알킬-Q3의 군으로부터 선택되고;
    R16은 -H, -C1-6 알킬, -NR2R2, 및 -COOR2의 군으로부터 선택되고;
    단, V가 -NR12-일 때, R16은 -NR2R2일 수 없고;
    R17은 -H, -C1-6 알킬, -COOR3, 및 아릴의 군으로부터 선택된다.
  2. 제 1항에 있어서, R1이 이소프로페닐인 화합물.
  3. 제 2항에 있어서, W가 부재하는 화합물.
  4. 제 1항에 있어서, X가 C4-8 사이클로알케닐인 화합물.
  5. 제 4항에 있어서, X가 C6 사이클로알케닐인 화합물.
  6. 제 5항에 있어서, A가 C1-C3 알킬-할로인 화합물.
  7. 제 6항에 있어서, A가 메틸-플루오로인 화합물.
  8. 제 1항에 있어서, A가 메틸-할로인 화합물.
  9. 제 8항에 있어서, A가 메틸-플루오로인 화합물.
  10. 제 1항에 있어서, Y가 -COOR2인 화합물.
  11. 제 10항에 있어서, Y가 -COOH인 화합물.
  12. 하기의 군으로부터 선택되는, 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 화합물:
    Figure pct00288
    .
  13. 제 1항에 청구된 바와 같은 하나 이상의 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 희석제와 함께 포함하는 약학적 조성물.
  14. 제 12항에 청구된 바와 같은 하나 이상의 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 희석제와 함께 포함하는 약학적 조성물.
  15. 하기 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 희석제와 함께 포함하는 약학적 조성물:
    Figure pct00289
    .
  16. 제 14항에 있어서, (a) AIDS 항바이러스 작용제; (b) 항감염성 작용제; (c) 면역조절제; 및 (d) HIV 진입 억제제로 구성된 군으로부터 선택되는 AIDS 치료제를 추가로 포함하는, HIV에 의한 감염을 치료하는데 유용한 약학적 조성물.
  17. 항바이러스 유효량의 제 1항에 청구된 바와 같은 화합물, 및 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포유동물에 투여하는 것을 포함하는, HIV 바이러스에 감염된 포유동물을 치료하는 방법.
  18. 하기의 군으로부터 선택되는 중간체 화합물:
    Figure pct00290
  19. 하기의 군으로부터 선택되는, 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 화합물:
    Figure pct00291

    Figure pct00292

    Figure pct00293

    Figure pct00294

    Figure pct00295

    Figure pct00296

    Figure pct00297

    Figure pct00298

    Figure pct00299

    Figure pct00300

    Figure pct00301

    Figure pct00302

    Figure pct00303

    Figure pct00304

    Figure pct00305
  20. 제 19항에 청구된 바와 같은 하나 이상의 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 및/또는 희석제와 함께 포함하는 약학적 조성물.
  21. 제 9항에 있어서, Y가 -COOH인 화합물.
  22. 화학식 I의 화합물의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는, 화학식 I의 화합물:
    Figure pct00306

    상기 식에서, R1은 이소프로페닐 또는 이소프로필이고;
    X는 C4-8 사이클로알킬, C4-8 사이클로알케닐, C4-9 스피로사이클로알킬, C4-9 스피로사이클로알케닐, C4-8 옥사사이클로알킬, C4-8 디옥사사이클로알킬, C6-8 옥사사이클로알케닐, C6-8 디옥사사이클로알케닐, C6 사이클로디알케닐, C6 옥사사이클로디알케닐, C6-9 옥사스피로사이클로알킬 및 C6-9 옥사스피로사이클로알케닐 고리의 군으로부터 선택되고,
    이 때 X는 A로 치환되고, A는 -C1-6 알킬-할로이며;
    Y는 -COOR2, -C(O)NR2SO2R3, -C(O)NHSO2NR2R2, -NR2SO2R2, -SO2NR2R2, -C3-6 사이클로알킬-COOR2, -C2-6 알케닐-COOR2, -C2-6 알키닐-COOR2, -C1-6 알킬-COOR2, -알킬치환된 C1-6 알킬, -COOR2, CF2-COOR2, -NHC(O)(CH2)n-COOR2, -SO2NR2C(O)R2, -테트라졸, 및 -CONHOH의 군으로부터 선택되고,
    이 때 n = 1-6이며;
    R2는 -H, -C1-6 알킬, -알킬치환된 C1-6 알킬 또는 -아릴치환된 C1-6 알킬이고;
    W는 부재하거나, CH2 또는 CO이고;
    R3는 -C1-6 알킬 또는 -알킬치환된 C1-6 알킬이고;
    R4는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-C(OR3)2-C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬, -C1-6 알킬-Q1, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q1, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -COR6, -COCOR6, -SO2R7, -SO2NR2R2, 및
    Figure pct00307
    의 군으로부터 선택되고,
    단, W가 CO일 때, R4 또는 R5는 COR6 또는 COCOR6일 수 없고;
    Q1은 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 할로겐, -CF3, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -CONR10R11 및 -SO2R의 군으로부터 선택되며;
    R5는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 알킬치환된 알킬, -C1-6 알킬-NR8R9, -COR10, -COR6, -COCOR6, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택되고;
    단, R4 또는 R5 중 하나만이 -COR6, -COCOR6, -SO2R7 및 -SO2NR2R2의 군으로부터 선택될 수 있거나;
    W가 부재하거나 CH2인 경우, R4 및 R5는 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00308
    을 형성할 수 있으며;
    R6은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-치환된알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C3-6 치환된사이클로알킬-Q2, -C1-6 알킬-Q2, -C1-6 알킬-치환된알킬-Q2, -C3-6 사이클로알킬-Q2, 아릴-Q2, -NR13R14, 및 -OR15의 군으로부터 선택되고;
    이 때 Q2는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -OR2, -COOR2, -NR8R9, -SO2R7, -CONHSO2R3, 및 -CONHSO2NR2R2의 군으로부터 선택되며;
    R7은 -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -CF3, 아릴, 및 헤테로아릴의 군으로부터 선택되고;
    R8 및 R9는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, -C1-6 알킬-Q2, 및 -COOR3의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
    R8 및 R9는 또한
    Figure pct00309
    의 군으로부터 독립적으로 선택될 수 있거나,
    R8 및 R9는 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00310
    의 군으로부터 선택되는 고리를 형성하고;
    단, R8 또는 R9 중 하나만이 -COOR3일 수 있으며;
    R10 및 R11은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬 및 -C3-6 사이클로알킬의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
    R10 및 R11은 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00311
    과 같은 고리를 형성하고;
    R12는 -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-OH; -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -COR7, -COONR22R23, -S(O)mR7, 및 -SONR24R25의 군으로부터 선택되고, 여기서 m = 1 또는 2이며;
    R13 및 R14는 -H, -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3, C1-6 치환된 알킬-Q3 및
    Figure pct00312
    의 군으로부터 독립적으로 선택되고,
    Q3은 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, -NR20R21, -CONR2R2, -COOR2, -OR2, 및 -SO2R3의 군으로부터 선택되고;
    R15는 -C1-6 알킬, -C3-6 사이클로알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q3, -C1-6 알킬-C3-6 사이클로알킬-Q3 및 -C1-6 치환된 알킬-Q3의 군으로부터 선택되고;
    R16은 -H, -C1-6 알킬, -NR2R2, 및 -COOR3의 군으로부터 선택되고;
    R17은 -H, -C1-6 알킬, -COOR3, 및 아릴의 군으로부터 선택되고;
    R18은 -COOR2 및 -C1-6 알킬-COOR2의 군으로부터 선택되고;
    R19는 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 알킬-Q4, -COR3, -COOR3의 군으로부터 선택되고,
    여기서 Q4는 -NR2R2 및 -OR2의 군으로부터 선택되며;
    R20 및 R21은 -H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 치환된 알킬-OR2, 및 -COR3의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
    R20 및 R21은 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00313
    의 군으로부터 선택되는 고리를 형성하고,
    단, R20 또는 R21 중 하나만이 -COR3일 수 있으며;
    R22 및 R23은 H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, 및 -C1-6 사이클로알킬의 군으로부터 독립적으로 선택되거나,
    R22 및 R23은 인접한 N과 함께 취해져
    Figure pct00314
    의 군으로부터 선택되는 고리를 형성하고;
    R24 및 R25는 H, -C1-6 알킬, -C1-6 치환된 알킬, -C1-6 알킬-Q5, -C1-6 사이클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 치환된 헤테로아릴의 군으로부터 독립적으로 선택되고;
    Q5는 할로겐 및 SO2R3의 군으로부터 선택된다.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015157483A1 (en) 2014-04-11 2015-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity, substituted in position 3 by a non-aromatic ring carrying a haloalkyl substituent
EP3377177A2 (en) * 2015-11-20 2018-09-26 VIIV Healthcare UK(No.4) Limited Hiv maturation inhibitor formulations
AR107512A1 (es) * 2016-02-04 2018-05-09 VIIV HEALTHCARE UK Nº 5 LTD Triterpenoides modificados en c-3 y c-17 como inhibidores del vih-1
US20190183901A1 (en) * 2016-08-31 2019-06-20 Viiv Healthcare Company Combinations and uses and treatments thereof
US20210347813A1 (en) * 2018-04-24 2021-11-11 Viiv Healthcare Uk (No. 5) Limited Compounds with hiv maturation inhibitory activity
PT3894424T (pt) * 2018-12-10 2023-02-28 Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd Sal mesilato de um composto de amino-lupano com atividade inibidora da maturação do vih
CN109705189B (zh) * 2018-12-29 2020-06-05 中国医学科学院药用植物研究所 具有式i所示结构的三萜衍生物及其制备方法和应用
CN110981765A (zh) * 2019-11-07 2020-04-10 肇庆巨元生化有限公司 一种25-羟基维生素d3中间体的制备方法
UY38982A (es) * 2019-12-09 2021-06-30 Viiv Healthcare Co Composiciones farmacéuticas

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013123019A1 (en) * 2012-02-15 2013-08-22 Bristol-Myers Squibb Company C-3 cycloalkenyl triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4906661A (en) 1981-11-12 1990-03-06 E. I. Du Pont De Nemours And Company Esters of aryloxypropanolamine derivatives
US5413999A (en) 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
US5679828A (en) 1995-06-05 1997-10-21 Biotech Research Labs, Inc. Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives and uses therefor
AR035311A1 (es) 1999-01-27 2004-05-12 Wyeth Corp Derivados de acido hidroxamico que contienen alquinilo, como inhibidores de las metalloproteinasas de matriz y de la tace, composicion farmaceutica y el uso de los mismos para la manufactura de un medicamento
US20040110785A1 (en) 2001-02-02 2004-06-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US7365221B2 (en) 2002-09-26 2008-04-29 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
RU2387665C2 (ru) 2004-03-17 2010-04-27 Панакос Фармасьютикалз, Инк. Фармацевтические соли 3-о-(3', 3'-диметилсукцинил)бетулиновой кислоты
TW200628161A (en) 2004-11-12 2006-08-16 Panacos Pharmaceuticals Inc Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof
WO2008115281A2 (en) 2006-10-16 2008-09-25 Myriad Genetics, Inc. Compounds for treating viral infections
EP2178376A4 (en) * 2007-08-03 2011-12-14 Advanced Life Sciences Inc LUPANIC TRITERPENOIDS MODIFIED IN 30-POSITION AND ITS ANALOG
AU2009214779A1 (en) 2008-02-14 2009-08-20 Virochem Pharma Inc. Novel 17beta lupane derivatives
US9067966B2 (en) 2009-07-14 2015-06-30 Hetero Research Foundation, Hetero Drugs Ltd. Lupeol-type triterpene derivatives as antivirals
ES2548905T3 (es) 2010-06-04 2015-10-21 Bristol-Myers Squibb Company Amidas C-28 de derivados del ácido betulínico C-3 modificados como inhibidores de la maduración del VIH
WO2011153315A1 (en) * 2010-06-04 2011-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Modified c-3 betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors
EP2670764B1 (en) 2011-01-31 2015-09-02 Bristol-Myers Squibb Company C-28 amines of c-3 modified betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors
JP6001560B2 (ja) 2011-01-31 2016-10-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｈｉｖ成熟阻害活性を有するｃ−１７およびｃ−３修飾トリテルペノイド
US8889854B2 (en) * 2012-05-07 2014-11-18 Bristol-Myers Squibb Company C-17 bicyclic amines of triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
WO2015157483A1 (en) 2014-04-11 2015-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity, substituted in position 3 by a non-aromatic ring carrying a haloalkyl substituent

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013123019A1 (en) * 2012-02-15 2013-08-22 Bristol-Myers Squibb Company C-3 cycloalkenyl triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity

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Publication number Publication date
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