CN107250151A

CN107250151A - 扩展的桦木酸类似物

Info

Publication number: CN107250151A
Application number: CN201580070656.3A
Authority: CN
Inventors: 薛成源; 陈洁; 陈燕; J.斯维多尔斯基; A.雷盖罗-任; N.A.米恩维尔
Original assignee: ViiV Healthcare UK No 5 Ltd
Current assignee: ViiV Healthcare UK No 5 Ltd
Priority date: 2014-11-14
Filing date: 2015-11-12
Publication date: 2017-10-13
Also published as: US9914747B2; CA2967601A1; AU2015346314B2; WO2016077572A1; EP3218389A1; JP6620149B2; RU2017118572A3; US20170334945A1; KR20170092580A; AU2015346314A1; BR112017009853A2; RU2017118572A; JP2017537898A

Abstract

阐述了具有药物和生物学影响的性质的化合物、其药物组合物和使用方法。特别地，提供了如式I和II的化合物所代表的作为HIV成熟抑制剂的具有独特抗病毒活性的桦木酸衍生物。这些化合物可用于治疗HIV和艾滋病。

Description

扩展的桦木酸类似物

相关申请的交叉引用

本申请要求2014年11月14日提交的美国临时申请序列号62/079,957的优先权，其通过引用以其整体并入本文中。

发明领域

本发明涉及可用于抗HIV的新化合物，且更具体而言，涉及可用作HIV成熟抑制剂的，衍生自桦木酸的化合物和其它结构相关的化合物，且涉及含有这些化合物的药物组合物以及它们的制备方法。

发明背景

HIV-1(人类免疫缺陷病毒-1)感染仍是主要医学问题，且在2010年底全世界估计会有4500万至5000万人感染。HIV和艾滋病(获得性免疫缺陷综合征)的病例数已迅速上升。2005年，报导了约500万例新感染且310万人死于艾滋病。用于治疗HIV的当前可用药物包括核苷逆转录酶(RT)抑制剂或经核准的单一药丸组合：齐多夫定(或AZT或RETROVIR(立妥威)^®)、去羟肌苷(或Videx^®)、司他夫定(或Zerit^®)、拉米夫定(或3TC或Epivir^®)、扎昔他宾(或DDC或Hivid^®)、琥珀酸阿巴卡韦(或Ziagen^®)、替诺福韦二吡呋酯富马酸盐(或Viread^®)、恩曲他滨(或FTC- Emtriva^®)、Combivir^® (含有-3TC加AZT)、Trizivir^® (含有阿巴卡韦、拉米夫定和齐多夫定)、Epzicom^®(含有阿巴卡韦和拉米夫定)、Truvada^®(含有Viread^®和Emtriva^®)；非核苷逆转录酶抑制剂：奈韦拉平(或Viramune^®)、地拉韦啶(或Rescriptor^®)和依法韦仑(或Sustiva^®)、Atripla^® (Truvada^® + Sustiva^®)和依曲韦林和拟肽蛋白酶抑制剂或经核准制剂：沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、氨普那韦、洛匹那韦、Kaletra^®(洛匹那韦和利托那韦)、达芦那韦、阿扎那韦(Reyataz^®)和替拉那韦(Aptivus^®)和cobicistat，和整合酶抑制剂诸如雷特格韦(Isentress^®)，和进入抑制剂诸如恩夫韦地(T-20) (Fuzeon^®)和马拉维若(Selzentry^®)。

这些药物中的每一个若单独使用仅可短暂性地抑制病毒复制。然而，当组合使用时，这些药物对病毒血症和疾病进展则具有显著的影响。事实上，最近已有文件证明艾滋病患者中死亡率的显著降低是组合疗法广泛应用的结果。然而，尽管有这些印象深刻的结果，但对于30至50%的患者而言，组合药物疗法最终仍可能失败。药物效能不足、不顺从性、受限的组织穿透和某些细胞类型中的药物特异性限制(例如，在静息细胞中大部分核苷类似物不能磷酸化)可解释敏感病毒不完全抑制的原因。此外，HIV-1高复制速率和快速更替与突变作用频繁结合的组合导致当存在次佳药物浓度时会出现耐药性变体和治疗失败。因此，需要展现独特抵抗模式和有利药代动力学以及安全性特征的新抗HIV剂以提供更多治疗选择。经改良的HIV融合抑制剂和HIV进入共同受体拮抗剂是许多研究者正进一步研究的新型抗HIV剂的两个实例。

HIV附着抑制剂是抗病毒化合物的其它子类，这些化合物会结合至HIV表面糖蛋白gp120，且干扰表面蛋白gp120与宿主细胞受体CD4之间的相互作用。因此，其防止HIV附着至人类CD4T细胞，且阻断HIV生命周期的第一阶段中的HIV复制。已努力改良HIV附着抑制剂的特性以获得具有最大化效用和功效的化合物作为抗病毒剂。具体而言，美国专利号7,354,924和US7,745,625说明了HIV附着抑制剂。

用于治疗HIV的另一类新兴化合物称为HIV成熟抑制剂。成熟是在HIV复制或HIV生命周期中的多达10个或更多个步骤中的最后一个，在成熟步骤中由于gag蛋白中的若干HIV蛋白酶介导的裂解事件而使HIV具有传染性，这最终导致衣壳(CA)蛋白的释放。成熟抑制剂会阻碍HIV衣壳正确组装和成熟，阻碍形成保护性外层或阻碍从人类细胞释放出来。取而代之的是产生不具感染性的病毒，从而防止了HIV感染的后续循环。

现已显示桦木酸的某些衍生物展现作为HIV成熟抑制剂的有效抗HIV活性。例如，US7,365,221披露单酰化桦木脑和二氢桦木脑衍生物和其作为抗HIV剂的用途。如于‘221参考文献中所论述，具有某些经取代酰基(例如3',3'-二甲基戊二酰基和3',3'-二甲基琥珀酰基)的桦木酸(1)的酯化产生具有增强活性的衍生物(Kashiwada, Y.等人，J.Med.Chem.39:1016-1017(1996))。为强效抗HIV剂的经酰化的桦木酸和二氢桦木酸衍生物也阐述于美国专利号5,679,828中。桦木脑的3碳中的羟基与琥珀酸的酯化也产生能够抑制HIV-1活性的化合物(Pokrovskii, A. G., 等人, “Synthesis of derivatives ofplant triterpenes and study of their antiviral and immunostimulatingactivity,” Khimiya y Interesakh Ustoichivogo Razvitiya, 第9卷, 第3期, 第485-491页 (2001) (英文摘要)。

用衍生自桦木酸的化合物治疗HIV感染的用途的其它参考文献包括US2005/0239748和US2008/0207573，以及WO2006/053255、WO2009/100532和WO2011/007230。

开发中的一种HIV成熟化合物经鉴定为贝韦立马(Bevirimat)或PA-457，其具有C₃₆H₅₆O₆的化学式和3β-(3-羧基-3-甲基-丁酰氧基)羽扇豆-20(29)-烯-28-酸(3β-(3-carboxy-3-methyl-butanoyloxy)lup-20(29)-en-28-oic acid)的IUPAC名称。

本文也参考以下申请：由Bristol-Myers Squibb于2011年6月2日提交的标题为“MODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS”的申请USSN 13/151,706(现在的US 8,754,068)和2011年6月2日提交的标题为“C-28 AMIDES OFMODIFIED C-3 BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS”的申请USSN 13/151,722(现在的US 8,802,661)。也参考以下申请：于2012年1月27日提交的标题为“C-28 AMINES OF C-3 MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATIONINHIBITORS”的申请USSN 13/359,680 (现在的US 8,748,415)。此外，参考以下申请：于2012年1月27日提交的标题为“C-17 AND C-3 MODIFIED TRITERPENOIDS WITH HIVMATURATION INHIBITORY ACTIVITY”的申请 USSN 13/359,727(现在的US 8,846,647)。也进一步参考于2013年2月6日提交的“C-3 CYCLOALKENYL TRITERPENOIDS WITH HIVMATURATION INHIBITORY ACTIVITY”的申请USSN 13/760,726(现在的US 8,906,889)以及于2015年4月9日提交的标题为“Triterpenoids with HIV Maturation InhibitoryActivity”的申请USSN 14/682,179。

现在本领域需要的是可用作HIV成熟抑制剂的新化合物以及含有这些化合物的新药物组合物。

发明概述

本发明提供以下式I和II的化合物，包括其药学上可接受的盐、其药物制剂和其在遭受病毒(例如HIV)或对病毒敏感的患者中的用途。式I-II的化合物是有效的抗病毒剂，尤其作为HIV的抑制剂。它们可用于治疗HIV和艾滋病。

本发明的一个实施方案涉及化合物，包括其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

式I的化合物

和式II的化合物

其中R₁是异丙烯基或异丙基；

X选自苯基、杂芳基、C_4-8环烷基、C_4-8环烯基、C_4-9螺环烷基、C_4-9螺环烯基、C_4-8氧杂环烷基、C_6-8二氧杂环烯基、 C_6-9氧杂螺环烷基和C_6-9氧杂螺环烯基环；

其中X被A取代，其中A是选自下组的至少一个成员：-H、˗卤素、˗羟基、˗C_1-6烷基、˗C_1-6烷氧基、˗C_1-6卤代烷基、˗CN、˗NR₈R₉、˗COOR₂、˗CONR₂R₂和-C_1-6烷基-Q；

Q选自芳基、杂芳基、取代的杂芳基、˗OR₂、˗COOR₃、˗NR₂R₂、˗SO₂R₇、˗CONHSO₂R₃和-CONHSO₂NR₂R₂；

R₂是-H、˗C_1-6烷基、˗烷基取代的C_1-6烷基或苄基；

Y选自-COOR₂、˗C(O)NR₂SO₂R₃、˗ C(O)NHSO₂NR₂R₂、˗NR₂SO₂R₂、˗SO₂NR₂R₂、˗C_3-6 环烷基-COOR₂、˗C_2-6 烯基-COOR₂、˗C_2-6 炔基-COOR₂、˗C_1-6烷基-COOR₂、˗烷基取代的-C_1-6烷基 -COOR₂、˗CF₂-COOR₂、˗NHC(O)(CH₂)_n-COOR₂、˗SO₂NR₂C(O)R₂、˗四唑和-CONHOH，

其中n=1-6；

W选自-C_2-6 烷基-、˗C_2-6 烷基-CO-、-C_2-6 烯基-、-C_2-6 烯基-CO-、˗杂芳基-和

R₃是–H、˗C_1-6 烷基、˗烷基取代的C_1-6烷基或苄基；

R₄选自-H、˗C_1-6烷基、˗C_1-6烷基-C(OR₃)₂-C_3-6环烷基、˗C_1-6取代的烷基、˗C_1-6烷基-C_3-6环烷基、˗C_1-6烷基-Q₁、˗C_1-6烷基-C_3-6环烷基-Q₁、芳基、杂芳基、取代的杂芳基、˗COR₆、˗COCOR₆、˗SO₂R₇和-SO₂NR₂R₂；

Q₁选自杂芳基、取代的杂芳基、卤素、˗CF₃、˗OR₂、˗COOR₂、˗NR₈R₉、˗CONR₁₀R₁₁和-SO₂R₇；

R₅选自-H、˗C_1-6 烷基、˗C_3-6环烷基、˗C_1-6 烷基取代的烷基、˗C_1-6烷基-NR₈R₉、˗COR₁₀、˗COR₆、˗COCOR₆、˗SO₂R₇ 和-SO₂NR₂R₂；

或R₄和R₅与邻近的N一起形成选自下组的环：

条件是R₄或R₅中只有一个可以选自-COR₆、˗COCOR₆、-SO₂R₇ 和-SO₂NR₂R₂，并且进一步的条件是当W是-C_2-6 烷基-CO-、-C_2-6 烯基-CO-或时R₄或R₅不能是-COR₆或-COCOR₆；

R₆选自-H、˗C_1-6 烷基、˗C_1-6 烷基-取代的烷基、˗C_3-6环烷基、˗C_3-6取代的环烷基-Q₂、˗C_1-6烷基-Q₂、˗C_1-6烷基-取代的烷基-Q₂、-C_3-6 环烷基-Q₂、芳基-Q₂、˗NR₂R₂和–OR₂；

Q₂选自芳基、杂芳基、取代的杂芳基、˗OR₂、˗COOR₂、˗NR₈R₉、SO₂R₇、˗CONHSO₂R₃和-CONHSO₂NR₂R₂；

R₇选自-C_1-6 烷基、˗C_1-6 取代的烷基、˗C_3-6环烷基、˗CF₃、芳基和杂芳基；

R₈和R₉独立地选自-H、˗C_1-6烷基、˗C_1-6取代的烷基、芳基、杂芳基、取代的芳基、取代的杂芳基、˗C_1-6烷基-Q₂和-COOR₃，

或R₈和R₉与邻近的N一起形成选自下组的环：

条件是R₈或R₉中只有一个可以是-COOR₃；

R₁₀选自-H、˗C_1-6 烷基、˗NR₂R₂和-COOR₃；

R₁₁选自-C_1-6 烷基、˗C_1-6 烷基-OH；-C_1-6 烷基、˗C_1-6 取代的烷基、-C_3-6环烷基、˗COR₇、˗COONR₂R₂、˗SOR₇和-SONR₂R₂；和

R₁₂选自-H、˗C_1-6 烷基、˗COOR₃和芳基。

在一个进一步的实施方案中，提供用于治疗感染病毒，尤其其中所述病毒是HIV的哺乳动物的方法，其包括向所述哺乳动物给予抗病毒有效量的选自式I和II的化合物的化合物和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。任选地，可将式I和II的化合物与抗病毒有效量的另一艾滋病治疗剂组合给予，所述治疗剂选自：(a)艾滋病抗病毒剂；(b)抗感染剂；(c)免疫调节剂；和(d)其它HIV进入抑制剂。

本发明的另一个实施方案是药物组合物，其包含一种或多种式I和II的化合物和一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂；并任选地与另一种艾滋病治疗剂组合，所述治疗剂选自：(a)艾滋病抗病毒剂；(b)抗感染剂；(c)免疫调节剂；和(d)其它HIV进入抑制剂。

在本发明的另一个实施方案中提供一种或多种用于制备本文中的式I和II的化合物的方法。

本文也提供可用于制备本文中的式I和II的化合物的中间体化合物。

本发明涉及这些以及下文阐述的其它重要目的。

实施方案的详细描述

如本文所用，单数形式一个/一种（“a”、“an”）和所述/该（“the”）包括对复数的引用，除非语境明显给出了不同的指示。

由于本发明的化合物可具有不对称中心且因此作为非对映异构体的混合物存在，因此，本公开包括式I和II的化合物的单个非对映异构形式还有它们的混合物。

定义

除非在本申请中的其它地方另外明确说明，否则在本文中可使用以下术语中的一个或多个，且应具有以下含义：

“H”是指氢，包括诸如氘等其同位素。

在本文和权利要求中所用的术语“C_1-6烷基”(除非另有说明)意指直链或支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。

“C₁-C₄氟烷基”是指经F取代的C₁-C₄烷基，其中至少一个H原子是经F原子取代，且每一H原子可独立地经F原子取代。

“卤素”或“卤代”是指氯、溴、碘或氟。

“芳基”或“Ar”基团是指具有完全共轭π电子体系的全碳单环状或稠合环多环状(即，共享相邻碳原子对的环)基团。芳基的实例是(但不限于)苯基、萘基和蒽基。芳基可经取代或未经取代。当经取代时，取代基基团优选是选自以下的一个或多个：烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、杂脂环基氧基、巯基、芳基硫基(thioaryloxy)、杂芳基硫基(thioheteroaryloxy)、杂脂环基硫基(thioheteroalicycloxy)、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲基、脲基、氨基和-NR^xR^y，其中R^x和R^y独立地选自：氢、烷基、环烷基、芳基、羰基、C-羧基、磺酰基、三卤代甲基，且若组合，为五或六元杂脂环族环。

“杂芳基”是指在环中具有一个或多个选自氮、氧和硫的原子且此外具有完全共轭π电子体系的单环状或稠合环(即，共享相邻原子对的环)基团。除非另外表明，杂芳基可在杂芳基内的碳或氮原子处连接。应注意，术语杂芳基意欲涵盖母体杂芳基的N-氧化物，如果本领域已知所述N-氧化物化学上是可行的话。杂芳基的实例是(但不限于)呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、噻唑基、咪唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、苯并噻唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡咯基、吡喃基、四氢吡喃基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、咔唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吡嗪基、二嗪基、吡嗪、三嗪基、四嗪基和四唑基。当经取代时，所述取代基团优选是选自以下的一个或多个：烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、杂脂环基氧基、烷硫基、巯基、芳基硫基、杂芳基硫基、杂脂环基硫基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲基、脲基、氨基和-NR^xR^y，其中R^x和R^y如上所定义。

“杂脂环基”基团是指在环中具有一个或多个选自氮、氧和硫的原子的单环状或稠合环基团。这些环选自提供稳定键布置的那些且并不意欲涵盖不存在的体系。这些环也可具有一个或多个双键。然而，这些环不具有完全共轭π电子体系。杂脂环基基团的实例是(但不限于)氮杂环丁基、哌啶基、哌嗪基、咪唑啉基、噻唑烷基、3-吡咯烷-1-基、吗啉基、硫吗啉基及其S氧化物和四氢吡喃基。当经取代时，取代基团优选是选自以下的一个或多个：烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、杂脂环基氧基、巯基、烷硫基、芳基硫基、杂芳基硫基、杂脂环基硫基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲烷磺酰氨基、三卤代甲烷磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基和-NR^xR^y，其中R^x和R^y如上所定义。

“烷基”是指包括直链和支链基团的饱和脂肪族烃。优选地，烷基具有1至20个碳原子(每当在本文中提及数值范围(例如，“1-20”)时，意指基团(在此情形下为烷基)可含有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，最多至且包括20个碳原子)。更优选地，其是具有1至10个碳原子的中等大小的烷基。更优选地，其是具有1至4个碳原子的低级烷基。烷基可经取代或未经取代。当经取代时，取代基团优选是单独地选自以下的一个或多个：三卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、杂脂环基氧基、巯基、烷硫基、芳基硫基、杂芳基硫基、杂脂环基硫基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲烷磺酰氨基、三卤代甲烷磺酰基，且若组合，为五元或六元杂脂环族环。

“环烷基”是指全碳单环状或稠合环(即共享相邻碳原子对的环)基团，其中一个或多个环不具有完全共轭π电子体系。环烷基的实例是(但不限于)环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己烯、环庚烷、环庚烯和金刚烷。环烷基可经取代或未经取代。当经取代时，取代基团优选是单独地选自以下的一个或多个：烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳基氧基、杂芳基氧基、杂脂环基氧基、巯基、烷硫基、芳基硫基、杂芳基硫基、杂脂环基硫基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲烷磺酰氨基、三卤代甲烷磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基和-NR^xR^y，且R^x和R^y如上所定义。

“烯基”是指具有至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键的如本文所定义的烷基。

“炔基”是指具有至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键的如本文所定义的烷基。

“羟基”是指-OH基团。

“烷氧基”是指如本文所定义的-O-烷基与-O-环烷基。

“芳基氧基”是指如本文所定义的-O-芳基与-O-杂芳基。

“杂芳基氧基”是指杂芳基-O-基团，且杂芳基如本文所定义。

“杂脂环基氧基”是指杂脂环基-O-基团，且杂脂环基如本文所定义。

“巯基”是指-SH基团。

“烷硫基”是指如本文所定义的S-烷基与-S-环烷基。

“芳基硫基”是指如本文所定义的-S-芳基与-S-杂芳基。

“杂芳基硫基”是指杂芳基-S-基团，且杂芳基如本文所定义。

“杂脂环基硫基”是指杂脂环基-S-基团，且杂脂环基如本文所定义。

“羰基”是指-C(=O)-R''基团，其中R''选自：氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基(经由环碳键结)和杂脂环基(经由环碳键结)，每一个如本文所定义。

“醛”基团是指羰基，其中R''是氢。

“硫代羰基”是指-C(=S)-R''基团，且R''如本文所定义。

“酮”基团是指-CC(=O)C-基团，其中在C=O的任一侧或两侧的碳可是烷基、环烷基、芳基，或可以是杂芳基或杂脂环基基团的碳。

“三卤代甲烷羰基”是指Z₃CC(=O)-基团且所述Z是卤素。

“C-羧基”是指-C(=O)O-R''基团，且R''如本文所定义。

“O-羧基”是指R''C(-O)O-基团，且R''如本文所定义。

“羧酸”基团是指C-羧基，其中R''是氢。

“三卤代甲基”是指-CZ₃基团，其中Z是如本文所定义的卤素基团。

“三卤代甲烷磺酰基”是指Z₃CS(=O)₂-基团，且Z如上所定义。

“三卤代甲烷磺酰氨基”是指Z₃CS(=O)₂NR^x-基团，其中Z如上所定义且R^x是H或(C_1-6)烷基。

“亚磺酰基”是指-S(=O)-R''基团，其中R''是(C_1-6)烷基。

“磺酰基”是指-S(=O)₂R''基团，其中R''是(C_1-6)烷基。

“S-磺酰氨基”是指-S(=O)₂NR^XR^Y，其中R^X和R^Y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“N-磺酰氨基”是指R''S(=O)₂NR_X-基团，其中R_x是H或(C_1-6)烷基。

“O-氨基甲酰基”是指-OC(=O)NR^xR^y基团，其中R^X和R^Y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“N-氨基甲酰基”是指R^xOC(=O)NR^y基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“O-硫代氨基甲酰基”是指-OC(=S)NR^xR^y基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“N-硫代氨基甲酰基”是指R^xOC(=S)NR^y-基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“氨基”是指-NH₂基团。

“C-酰氨基”是指-OC(=O)NR^xR^y基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“C-硫代酰氨基”是指-C(=S)NR^xR^y基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“N-酰氨基”是指R^xC(=O)NR^y-基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“脲基”是指-NR^xC(=O)NR^yR^y2基团，其中R^x、R^y和R^y2独立地是H或(C_1-6)烷基。

“胍基”是指-R^xNC(=N)NR^yR^y2基团，其中R^x、R^y和R^y2独立地是H或(C_1-6)烷基。

“脒基”是指R^xR^yNC(=N)-基团，其中R^x和R^y独立地是H或(C_1-6)烷基。

“氰基”是指-CN基团。

“甲硅烷基”是指-Si(R'')₃，其中R''是(C_1-6)烷基或苯基。

膦酰基”是指P(=O)(OR^x)₂，其中R^x是(C_1-6)烷基。

“肼基”是指-NR^xNR^yR^y2基团，其中R^x、R^y和R^y2独立地是H或(C_1-6)烷基。

“4、5或6元环环状N-内酰胺”基团是指。

“螺(spiro)”基团是诸环通过仅一个原子相连接的二环有机基团。诸环可以是在性质上不同的或完全相同的。连接的原子也称作螺原子，最通常是一个季碳("螺碳")。

“氧代螺(oxospiro)”或“氧杂螺(oxaspiro)”基团是具有被包含在二环环结构内的氧的螺基团。“二氧代螺(dioxospiro)”或“二氧杂螺(dioxaspiro)”基团在二环环结构内具有两个氧。

任意两个相邻R基团可组合以形成与最初携带那些R基团的环稠合的额外芳基、环烷基、杂芳基或杂环状环。

本领域已知杂芳基体系中的氮原子可“参与杂芳基环双键”，且这是指在包含五元环杂芳基的两个互变异构结构中形成双键。这指示氮是否也可如本领域化学家所理解的那样经取代。本公开的公开内容和权利要求是基于化学键结的已知一般原理。应理解，权利要求不涵盖基于文献已知不稳定或不能存在的结构。

本文所披露化合物的药学上可接受的盐和前药是在本发明的范围中。在本文和权利要求中所用的术语“药学上可接受的盐”意欲包括无毒碱加成盐。适宜盐包括衍生自有机酸和无机酸的那些，例如(但不限于)盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、亚磺酸、柠檬酸、马来酸、富马酸、山梨酸、乌头酸(aconitic acid)、水杨酸、邻苯二甲酸等。本文所用的术语“药学上可接受的盐”也意欲包括酸性基团(例如羧酸根)与诸如铵、碱金属盐(尤其钠或钾)、碱土金属盐(尤其钙或镁)等抗衡离子的盐，和与适宜有机碱(例如低级烷基胺(甲胺、乙胺、环己胺等)，或与经取代低级烷基胺(例如经羟基取代的烷基胺，例如二乙醇胺、三乙醇胺或三(羟基甲基)-氨基甲烷)或与诸如哌啶或吗啉等碱的盐。

如上所述，本发明的化合物也包括“前药”。本文所用的术语“前药”涵盖术语“前药酯”和术语“前药醚”。

如上所述，本发明涉及化合物，包括其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

式I的化合物

和式II的化合物

其中R₁是异丙烯基或异丙基；

R₂是-H、˗C_1-6烷基、˗烷基取代的C_1-6烷基或苄基；

Y选自–COOR₂、˗C(O)NR₂SO₂R₃、˗ C(O)NHSO₂NR₂R₂、˗NR₂SO₂R₂、˗SO₂NR₂R₂、˗C_3-6 环烷基-COOR₂、˗C_2-6 烯基-COOR₂、˗C_2-6 炔基-COOR₂、˗C_1-6烷基-COOR₂、˗烷基取代的-C_1-6烷基 -COOR₂、˗CF₂-COOR₂、˗NHC(O)(CH₂)_n-COOR₂、˗SO₂NR₂C(O)R₂、˗四唑和-CONHOH，

其中n=1-6；

R₃是–H、˗C_1-6 烷基、˗烷基取代的C_1-6烷基或苄基；

或R₄和R₅与邻近的N一起形成选自下组的环：

R₆选自-H、˗C_1-6 烷基、˗C_1-6 烷基-取代的烷基、˗C_3-6环烷基、˗C_3-6取代的环烷基-Q₂、˗C_1-6烷基-Q₂、˗C_1-6 烷基-取代的烷基-Q₂、-C_3-6 环烷基-Q₂、芳基-Q₂、˗NR₂R₂和–OR₂；

或R₈和R₉与邻近的N一起形成选自下组的环：

条件是R₈或R₉中只有一个可以是-COOR₃；

R₁₀选自-H、˗C_1-6 烷基、˗NR₂R₂和-COOR₃；

R₁₂选自-H、˗C_1-6 烷基、˗COOR₃和芳基。

在本发明的一个优选的实施方案中，X选自苯基和C_4-8 环烯基。

还优选Y是–COOH。

在本发明的另一个实施方案中，优选化合物具有式I。

作为本发明的一部分的优选的化合物（包括其药学上可接受的盐）包括以下：

。

上面的化合物代表非对映异构体的混合物和两种单独的非对映异构体。在某些实施方案中，可以特别地优选一种具体的非对映异构体。

根据以上阐述的所有多种实施方案的本发明的化合物可口服、肠胃外(包括皮下注射、静脉内、肌内、经胸骨内注射或输注技术)、通过吸入喷雾或经直肠和通过其它方式以含有对本领域技术人员而言可用的无毒药学上可接受的载体、赋形剂和稀释剂的剂量单位制剂给予。也可包括一种或多种佐剂。

因此，本发明进一步提供用于治疗诸如HIV感染和艾滋病等病毒感染的治疗方法和药物组合物。治疗涉及向需要所述治疗的患者给予药物组合物，所述药物组合物含有抗病毒有效量的一种或多种式I和II的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。本文所用的术语“抗病毒有效量”意指组合物和方法的每一活性组分的总量足以显示有意义的患者益处，即以抑制HIV感染为特征的抑制、减轻或治愈急性病症。当向个体施加单独给予的活性成分时，所述术语是指此单独成分。当组合施加时，术语是指引起治疗效果的活性成分的组合量，不论是组合、连续或同时给予。在本文和权利要求中所用的术语“治疗(treat、treating、treatment)”意指预防、抑制、减轻和/或治愈与HIV感染相关联的疾病和病症。

本发明的药物组合物可以呈可口服给予的混悬剂或片剂以及鼻喷雾剂、无菌可注射制剂(例如作为无菌可注射水性或油性混悬剂)或栓剂的形式。药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂可用于药物组合物，且是药物制剂技术中所用的那些。

当作为混悬剂口服给予时，根据药物配制技术中通常已知的技术制备这些组合物，且这些组合物可含有用于使体积增大的微晶纤维素、作为悬浮剂的海藻酸或海藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素和本领域已知的甜味剂/矫味剂。就立即释放片剂而言，这些组合物可含有微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和乳糖和/或本领域已知的其它赋形剂、粘合剂、膨胀剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂。

可根据已知技术，使用适宜的无毒、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如甘露醇、1,3-丁二醇、水、林格溶液或等渗氯化钠溶液)或适宜的分散或润湿和悬浮剂(例如，包括合成甘油单酯或甘油二酯的无菌、温和、固定油和包括油酸的脂肪酸)配制可注射溶液剂或混悬剂。

本文所述的化合物可以约1mg/kg体重至100mg/kg体重的剂量范围以分开剂量通常经延长时期(例如数天、数周、数月或甚至数年)口服给予人类。一个优选剂量范围是约1mg/kg体重至10mg/kg体重，其呈分开剂量口服给予。另一优选剂量范围是约1mg/kg体重至20mg/kg体重，其呈分开剂量。然而，应理解，对于任一具体患者而言，特定剂量水平和给予频率可变化且将取决于多种因素而定，包括所用特定化合物的活性、此化合物的代谢稳定性和作用时间长度、年龄、体重、整体健康状况、性别、饮食、给予模式和时间、排泄速率、药物组合、具体病症的严重程度和接受治疗的主体。

本文也涵盖本文所述的式I和II的化合物以及一种或多种可用于治疗艾滋病的其它试剂的组合。例如，无论在暴露前和/或暴露后的时期，本公开的化合物可有效地与有效量的艾滋病抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂或疫苗组合给予，例如以下非限制性表中的那些：

此外，本文所述的本公开的化合物可与HIV进入抑制剂组合使用。这些HIV进入抑制剂的实例论述于DRUGS OF THE FUTURE 1999, 24(12)，第1355-1362页；CELL, 第9卷，第243-246页，1999年10月29日和DRUG DISCOVERY TODAY，第5卷，第5期，2000年5月，第183-194页和Inhibitors of the entry of HIV into host cells. Meanwell, NicholasA.；Kadow, John F. Current Opinion in Drug Discovery & Development (2003), 6(4),451-461中。特定地，化合物可与附着抑制剂、融合抑制剂和针对CCR5或CXCR4共同受体的趋化因子受体拮抗剂组合使用。HIV附着抑制剂也阐释于US7,354,924和US7,745,625中。

应了解，本申请的化合物与艾滋病抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂、HIV进入抑制剂或疫苗的组合的范围并不限于上表中的列示，而是原则上包括与任何可用于治疗艾滋病的药物组合物的任何组合。

优选组合是用本公开的化合物和HIV蛋白酶抑制剂和/或非核苷HIV逆转录酶抑制剂同时治疗或交替治疗。组合中任选的第四组分是HIV逆转录酶的核苷抑制剂，例如AZT、3TC、ddC或ddI。优选HIV蛋白酶抑制剂是 REYATAZ^®(活性成分阿扎那韦)。通常每天一次给予300mg至600mg的剂量。这可与低剂量的利托那韦(50mg至500mg)共同给予。另一优选HIV蛋白酶抑制剂是KALETRA^®。另一有用的HIV蛋白酶抑制剂是茚地那韦，其是N-(2(R)-羟基-1-(S)-茚满基)-2(R)-苯基甲基-4-(S)-羟基-5-(1-(4-(3-吡啶基-甲基)-2(S)-N'-(叔丁基甲酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺乙醇合物的硫酸盐，且是根据U.S.5,413,999合成。茚地那韦通常以800mg的剂量一天3次给予。其它优选蛋白酶抑制剂是奈非那韦和利托那韦。另一优选HIV蛋白酶抑制剂是沙奎那韦，其以600mg或1200mg的剂量每日三次(tid)给予。优选非核苷HIV逆转录酶抑制剂包括依法韦仑。这些组合对于限制HIV感染的散布和程度可具有意想不到的效应。优选组合包括具有以下的那些：(1)茚地那韦与依法韦仑，和任选的AZT和/或3TC和/或ddI和/或ddC；(2)茚地那韦，和AZT和/或ddI和/或ddC和/或3TC中的任何药物，具体而言，茚地那韦和AZT和3TC；(3)司他夫定和3TC和/或齐多夫定；(4)替诺福韦二吡呋酯富马酸盐和恩曲他滨。

在这些组合中，本发明的化合物(一种或多种)和其它活性剂可单独给予或组合给予。此外，一种成分的给予可在其它试剂(一种或多种)给予之前、同时或之后。

一般化学(合成方法)

本发明包括式I和II的化合物、其药物制剂和其在患有HIV感染或对HIV感染敏感的患者中的用途。式I和II的化合物也包括其药学上可接受的盐。构造式I和II的化合物和可用于其合成的中间体的操作阐述于缩写之后。

缩写

在本公开和实施例的整个描述中可使用以下缩写中的一个或多个，大部分缩写是本领域技术人员所熟知的常规缩写：

RT = 室温

BHT = 2,6-二叔丁基-4-羟基甲苯

CSA = 樟脑磺酸

LDA = 二异丙基氨基锂

KHMDS = 双(三甲基甲硅烷基)氨基钾

SFC = 超临界流体色谱法

Quant = 定量的

TBDMS = 叔丁基二甲基甲硅烷

PTFE = 聚四氟乙烯

NMO = 4-甲基吗啉-N-氧化物

THF = 四氢呋喃

TLC = 薄层色谱法

DCM = 二氯甲烷

DCE = 二氯乙烷

TFA = 三氟乙酸

LCMS = 液相色谱-质谱

Prep = 制备型

HPLC = 高效液相色谱法

DAST = (二乙基氨基)三氟化硫

TEA = 三乙胺

DIPEA = N,N-二异丙基乙胺

HATU = [O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐]

DCC = N,N'-二环己基碳二亚胺

DMAP = 二甲基氨基吡啶

TMS = 三甲基甲硅烷基

NMR = 核磁共振

DPPA = 二苯基磷酰基叠氮化物

AIBN = 偶氮二异丁腈

TBAF = 四丁基氟化铵

DMF = 二甲基甲酰胺

TBTU = O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸盐

Min(s) = 分钟

h = 小时

sat. = 饱和的

TEA = 三乙胺

EtOAc = 乙酸乙酯

TFA = 三氟乙酸

PCC = 氯铬酸吡啶

TLC = 薄层色谱

Tf₂NPh = (三氟甲基磺酰基)甲烷磺酰胺

二噁烷 = 1,4-二噁烷

PG = 保护基团

atm = 大气压

mol = 摩尔

mmol= 毫摩尔

mg = 毫克

μg = 微克

μl = 微升

μm= 微米

mm= 毫米

Rpm = 每分钟转数

SM = 起始原料

TLC = 薄层色谱法

AP = 面积百分比

Equiv. = 当量

DMP = 戴斯-马丁高碘烷

TMSCl = 三甲基氯化甲硅烷

TBSCl = 叔丁基二甲基氯化甲硅烷

TBSOTf = 三氟甲烷磺酸三甲基甲硅烷酯

PhMe = 甲苯

PhNTf₂= N-苯基-双(三氟甲烷磺酰亚胺)

S-Phos = 2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯

TFDO = 甲基(三氟甲基)二环氧乙烷

TEMPO = 2,2,6,6-四甲基哌啶基氧基

DI = 去离子水。

术语“C-3”和“C-28”是指根据IUPAC规则编号的三萜核心的确定的位置(下面所述的就示例性的三萜: 桦木脑而言的位置)：

。

当提及方法的方案和一般描述中的化合物系列时维持相同的编号。

实施例

以下实施例说明如以上一般地阐述的式I和II的化合物的典型合成。这些实施例仅用于说明的目的，且并不意欲以任何方式限制本公开。本领域普通技术人员可容易地获得试剂和起始原料。

化学

所选实施例的典型操作和表征：

除非另有说明，否则溶剂和试剂如自商业来源所获得直接使用，且在氮气氛下实施反应。在硅胶60(0.040-0.063粒径；EM Science供应)上实施快速色谱。将¹HNMR谱于500MHz下记录于Bruker DRX-500f上(或于Bruker AV 400MHz、Bruker DPX-300B或Varian Gemini300(于300MHz下)上，如所述的那样)。化学位移是相对于δTMS=0的δ标度以ppm报告。使用以下内部参考用于以下溶剂中的残余质子：CDCl₃(δ_H7.26)、CD₃OD(δ_H3.30)、乙酸-d4(乙酸d₄)(δ_H11.6, 2.07)、DMSO混合物或DMSO-D6-CDCl₃(δ_H2.50和8.25)(比率75%:25%)和DMSO-D6(δ_H2.50)。

采用标准首字母缩写词来阐述多重性模式：s(单峰)、br.s(宽单峰)、d(双重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、b(宽峰)、app(表观)。耦合常数(J)是以赫兹(Hertz)表示。所有液相色谱(LC)数据是在ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上使用SPD-10AV UV-Vis检测器记录，且质谱(MS)数据是使用用于LC的Micromass Platform以电喷雾模式测定的。

第1部分

LC/MS方法：

方法 1

起始% B = 30，最终 % B = 100，梯度时间 = 2 min

流速= 0.8 mL/min

波长 = 220

溶剂A = 10% MeOH - 90% H₂O - 0.1% TFA

溶剂B = 90% MeOH - 10% H₂O - 0.1% TFA

柱 = Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5μm

方法 2

起始% B = 40，最终 % B = 100，梯度时间 = 2 min

流速= 1 mL/min

波长 = 220

溶剂A = 5% MeOH - 95% H₂O - 10mM NH₄OAc

溶剂B = 95% MeOH - 5% H₂O - 10mM NH₄OAc

柱 = Phenomenex LUNA C18 30 x 2 mm 3μm

方法 3

起始% B = 30，最终 % B = 100，梯度时间 = 1 min

流速= 0.8 mL/min

波长 = 220

溶剂A = 10% MeOH - 90% H₂O - 0.1% TFA

溶剂B = 90% MeOH - 10% H₂O - 0.1% TFA

柱 = Xbridge Phenyl 2.1 x 50 mm 2.5μm

方法 4

起始% B = 30，最终 % B = 100，梯度时间 = 2 min

流速= 1 mL/min

波长 = 220

溶剂A = 5% MeOH - 95% H₂O - 10mM NH₄OAc

溶剂B = 95% MeOH - 5% H₂O - 10mM NH₄OAc

柱 = Phenomenex LUNA C18 30x2 mm 3μm

方法 5

起始% B = 20，最终%B = 100，经2分钟梯度，在100%B保持

流速= 1 mL / min

波长 = 220 nm

溶剂A = 95%水，5%甲醇，10mM 乙酸铵

溶剂B = 5%水，95%甲醇，10mM 乙酸铵

柱 = Phenomenex Luna C18, 3μm, 2.0 x 30 mm

方法 6

起始% B = 20，最终%B = 100，经2分钟梯度，在100%B保持

流速= 0.8 mL / min

波长 = 220 nm

溶剂A = 90%水，10%甲醇，0.1% TFA

溶剂B = 10%水，90%甲醇，0.1% TFA

柱 = Xbridge Phenyl, 2.5μm, 2.1 x 50 mm。

制备型HPLC方法：

方法 1

起始%B = 10，最终 %B = 100，经10分钟梯度，在100%B保持

流速= 40 mL/min

波长 = 220 nm

溶剂A =10% MeOH - 90% H₂O -0.1% TFA

溶剂B = 90% MeOH - 10% H₂O - 0.1% TFA

柱 = YMC COMBIPREP ODS 30 x 50 mm S5

SFC方法

第一流程

制备型柱： Whelko-RR (5´50cm, 10µm, #786710)

BPR压力： 100巴

温度： 30℃

流速： 350 mL/min

流动相： CO₂/ 2-丙醇(85/15)

检测器波长: 215 nm

分离程序: 叠层式注射

注射: 1.46mL，循环时间：1.9min

样品制备: 180g / 1000mL IPA:DCM (1:1), 180mg/mL

处理量: 7.88g/hr。

中间体 1

制备(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯.

在0℃向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(2.0 g, 3.34 mmol) (如WO2012106188中所述制备)于THF (20 mL)中的混悬液中加入膦酰基乙酸三乙酯(1.34 mL,6.68 mmol)，随后加入NaH (60%于矿物油中) (0.22 g, 5.6 mmol)。将混合物在0℃搅拌30min，然后温热至RT并搅拌3天。将反应用饱和的NH₄Cl (20 mL)淬灭，随后用0.5N HCl (20mL)淬灭。将混合物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗制的混合物通过硅胶柱（用乙酸乙酯和己烷类的混合物洗脱）纯化以提供标题化合物(2.06 g, 88%)，为固体。MS: m/e 611.6 (M-t-Bu-H)^-,2.70 min (方法 2)。

步骤2: 制备(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸

向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(1.0 g,1.50 mmol)于1,4-二噁烷(100 mL)和 MeOH (10 mL)中的溶液中加入10 N NaOH (3 mL,30 mmol)。将所得到的混合物在RT搅拌过夜。将反应混合物用1N HCl中和并在减压下浓缩。将残余物用EtOAc (3 x 50 mL)萃取，用盐水(50 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制的混合物在硅胶中纯化以提供产物(527 mg, 55%)，为固体。MS: m/e 639.7(M-H)^-, 2.89 min (方法 2)。

中间体 2

制备(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸

将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(161 mg,0.241 mmol)溶解于甲醇(5 mL)和二噁烷(15 mL)的混合物中。向该溶液中加入氢氧化锂(1N, 0.72 mL, 0.72 mmol)并将混悬液在RT搅拌40小时。从粗制的反应物中取出一份小的等分试样, 用过量的1N HCl淬灭，并蒸发成干燥的薄膜。将该薄膜溶解于(taken into)1,2-二氯乙烷(4 mL)和2 M草酰氯于DCM(1.362 mL)中的储备溶液（于可重复密封的压力管中）中，并加热至60℃保持24小时。将反应溶液在真空中干燥以提供粗制的酰氯，其未经进一步纯化地立即使用。所选的来自¹H NMR (500MHz, 氯仿-d)的特征信号 δ 7.56 (d, J=15.9 Hz, 1H), 6.18 (d, J=15.9 Hz, 1H)。

中间体 3

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸(100 mg, 0.16 mmol)和硫代吗啉 1,1-二氧化物(25 mg, 0.19 mmol)于CH₂Cl₂ (5 mL)中的溶液中加入DIPEA(0.14 mL, 0.78 mmol)，随后加入HATU (89 mg, 0.23 mmol)。将溶液在RT搅拌1 h。将反应混合物在减压下浓缩。将粗制的混合物在硅胶上纯化以提供标题化合物(115 mg, 97%)，为固体。MS: m/e 758.6 (M+H)⁺, 2.80 min (方法 1)。

中间体 4

制备2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)-2-氧代乙酸

步骤1: 制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲酸

向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(150 mg, 0.25 mmol)于叔丁醇(2 mL)和THF(2 mL)中的溶液中加入2-甲基丁-2-烯(2 mL, 24 mmol)。历经10 min逐滴加入亚氯酸钠(227 mg, 2.5 mmol)和磷酸二氢钠一水合物(450 mg, 3.3 mmol)于H₂O(4 mL)中的溶液。将反应混合物在RT搅拌4 h。将混合物用H₂O (5 mL)稀释并用EtOAc (3 x 10 mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10 mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制的混合物在硅胶上纯化以提供产物(121 mg, 79%)，为固体。

步骤2: 制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向来自步骤1的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲酸(60 mg, 0.1 mmol)于CH₂Cl₂(5 mL)中的溶液中加入草酰氯(2 M于CH₂Cl₂中) (0.075 mL, 0.15 mmol)，随后加入DMF(0.76 µL, 0.01 mmol)。将反应混合物搅拌2 h并且然后在减压下浓缩以提供粗制的产物，为固体。

步骤3: 制备α-酮基-氰基硫叶立德

向来自步骤2 的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(62 mg, 0.098 mmol)、1-(氰基甲基)四氢-1H-噻吩-1-鎓溴化物[Ju, L.；Lippert, A. R.；Bode, J. W. J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 4253 - 4255 (31 mg, 0.15 mmol)和DMAP(0.6 mg, 4.9 µmol)于CH₂Cl₂ (5 mL)中的溶液中加入DIPEA (0.05 mL, 0.29 mmol)。将反应混合物在RT搅拌过夜。加入额外的1-(氰基甲基)四氢-1H-噻吩-1-鎓溴化物(31 mg, 0.15 mmol)并将搅拌持续过夜。将反应用NH₄Cl (5 mL)淬灭并用CH₂Cl₂ (3 x 10 mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制的混合物通过快速色谱法纯化以提供产物(14 mg, 20%)，为固体。MS: m/e 724.5 (M+H)⁺, 3.71 min (方法 1)。

步骤4: 向来自步骤3的产物(14 mg, 0.02 mmol)于DMF (2 mL)和 H₂O (1 mL)中的混悬液中加入臭氧(48 mg, 0.08 mmol)。将反应混合物在RT搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物用H₂O洗涤，通过过滤收集固体，用H₂O洗涤，并在真空下干燥以提供含有2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)-2-氧代乙酸的粗制物，其未经进一步纯化地用于下一步骤中。MS: m/e 643.6 (M+H)⁺, 2.71 min (方法 4)。

实施例1

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-2-羧基乙烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(163 mg,0.244 mmol)于甲醇(5 mL)和二噁烷(4 mL)中的混合物用LiOH (1N, 1.0 mL, 1.0 mmol)处理。将混合物在80℃加热16 hr。在冷却至室温后，将反应用过量的HCl (0.5N)中和。将有机物质用乙酸乙酯萃取。在真空中除去溶剂，得到玻璃状的物质，将其使用制备型HPLC纯化以提供标题化合物，为白色固体(85 mg, 60%)。MS: m/e 585.4 (M+H)⁺, 6.02 min (方法 5)。

实施例2

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸甲酯

向粗制的4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-氯-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸甲酯(40 mg,0.061 mmol)于CH₂Cl₂ (2 mL)中的溶液中加入2-(二甲基氨基)乙亚铵(2-(dimethylamino)ethaniminium)(8 mg, 0.09 mmol)、HATU (35 mg, 0.09 mmol)、DIPEA (0.05 mL, 0.3mmol)和DMAP (0.4 mg, 0.003 mmol)。将混合物在RT搅拌3 h。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供标题化合物(6 mg, 15%)，为固体。MS: m/e 669.6 (M+H)⁺, 1.87 min (方法 3)。

步骤2: 向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸甲酯(6 mg, 0.009 mmol)于1,4-二噁烷(1 mL)和 MeOH (1 mL)中的溶液中加入1 N NaOH (0.5 mL, 0.500 mmol)。将溶液在65℃加热2 h。将粗制的混合物用1NHCl中和，在减压下浓缩，并将残余物在CH₂Cl₂ (5 mL)和 H₂O (5 mL)之间分配。将有机层用H₂O (5 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供产物(4.3 mg, 73%)，为固体。MS: m/e 655.7 (M+H)⁺, 1.77 min (方法 3)。

实施例3

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸甲酯

遵循用于制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸的步骤1中所述的程序，使用硫代吗啉 1,1-二氧化物作为反应物，从中间体2制备标题化合物(固体, 12%收率)。 MS: m/e 716.6 (M+H)⁺, 2.42 min (方法 3)。

步骤2:遵循用于制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸中的步骤2中所述的程序制备标题化合物(固体, 31%收率)。MS: m/e 702.6 (M+H)⁺, 2.12 min (方法 3)。

实施例4

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸甲酯

遵循用于制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸的步骤1中所述的程序，使用 4-(3-氨基丙基)硫代吗啉 1,1-二氧化物作为反应物，从中间体2制备标题化合物(固体, 12%收率)。MS: m/e 773.5 (M+H)⁺, 1.94min (方法 3)。

步骤2:遵循用于制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸的步骤2中所述的程序制备标题化合物(固体, 63%)。MS:m/e 759.7 (M+H)⁺, 1.82 min (方法 3)。

实施例5

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(甲氧基(甲基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(甲氧基(甲基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸(100 mg, 0.16 mmol)和N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(18 mg, 0.18 mmol)于CH₂Cl₂ (2 mL)中的溶液中加入DIPEA(0.14 mL, 0.78 mmol)，随后加入HATU(89 mg, 0.23 mmol)。将溶液在RT搅拌1 h。将反应混合物在减压下浓缩。将粗制的混合物通过快速色谱法纯化以提供标题化合物(101 mg,95%)，为固体。MS: m/e 684.6 (M+H)⁺, 3.12 min (方法 3)。

步骤2: 向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(甲氧基(甲基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(20 mg, 0.03 mmol)于CH₂Cl₂ (2 mL)中的溶液中加入TFA (0.5 mL)。将所得到的溶液在RT搅拌1 h。将反应混合物在减压下浓缩。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(甲氧基(甲基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸(12 mg, 64%)，为固体。MS: m/e 628.5 (M+H)⁺, 2.20 min (方法 3)。

实施例6

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(15 mg, 0.020 mmol)于甲苯(1 mL)中的溶液中加入1,1,3,3-四甲基二硅氧烷(0.02 mL, 0.1 mmol)和氯铂酸(0.04 M于THF中) (0.05 mL, 0.002 mmol)。将所得到的棕色溶液在50℃搅拌24 h。将反应混合物过滤并将滤液用盐水(10 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩以提供粗制的产物（未经进一步纯化）。MS: m/e 744.6 (M+H)⁺, 2.30min (方法 3)。

步骤2: 向来自步骤1的粗制的4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(14 mg, 0.02 mmol)于CH₂Cl₂ (2 mL)中的溶液中加入TFA (0.3 mL)。将所得到的溶液在RT搅拌2 h。将反应混合物在真空中浓缩。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸(2 mg, 13%)，为固体。MS: m/e 688.5 (M+H)⁺, 1.83 min (方法 3)。

实施例7

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(50 mg, 0.066 mmol)于甲苯(5 mL)中的溶液中加入1,1,3,3-四甲基二硅氧烷(0.058 mL, 0.330 mmol)，随后加入氯铂酸(0.04 M于THF中) (0.082 mL, 3.30 µmol)。将所得到的棕色溶液在70℃搅拌24 h。将反应混合物过滤并将滤液用盐水(10 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗制的混合物通过快速色谱法纯化以提供标题化合物(41 mg, 82%)，为固体。MS: m/e 760.7 (M+H)⁺, 2.88 min (方法 1)。

步骤2: 向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(步骤1) (15 mg, 0.020 mmol)于二噁烷(1 mL)和 MeOH (0.5 mL)中的溶液中加入1N NaOH (0.5 mL, 0.500 mmol)。将所得到的混合物在50℃搅拌24 h。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)-3-氧代丙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸(7 mg, 49%)，为固体。MS: m/e 704.5 (M+H)⁺, 1.88 min (方法 1)。

实施例8

制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)-2-氧代乙酸(中间体 4) (13 mg,0.02 mmol)和4-(3-氨基丙基)硫代吗啉 1,1-二氧化物(8 mg, 0.04 mmol)于CH₂Cl₂ (2mL)中的溶液中加入DIPEA(0.02 mL, 0.1 mmol)，随后加入HATU (12 mg, 0.03 mmol)。将所得到的溶液在RT搅拌2天。LC/MS显示反应不完全（具有~50%转化）。加入额外的4-(3-氨基丙基)硫代吗啉 1,1-二氧化物(16 mg, 0.08 mmol)、HATU(24 mg, 0.06 mmol)和DMAP (3mg, 0.025 mmol)。将混合物在RT搅拌2天。将反应混合物用CH₂Cl₂ (5 mL)稀释，用H₂O (5mL)和盐水(5 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以提供标题化合物，为固体(16mg)，其未经进一步纯化地用于下一步骤中。MS: m/e 817.6 (M+H)⁺, 3.46 min (方法 1)。

步骤2: 向来自步骤1的粗制物（含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(16 mg, 0.02 mmol)）于1,4-二噁烷(2mL)和 MeOH (1 mL)中的溶液中加入1 N NaOH (1 mL)。将混合物在80℃搅拌8 h。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((3-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸(6 mg, 38%收率)，为固体。MS: m/e 761.5 (M+H)⁺, 2.91min (方法 1)。

实施例9

制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1: 制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)-2-氧代乙酸(中间体 4) (28 mg,0.044 mmol)、4-(2-氨基乙基)硫代吗啉 1,1-二氧化物(16 mg, 0.087 mmol)和DMAP (3mg, 0.025 mmol)于DCM (2 mL)中的溶液中加入DIPEA (0.08 mL, 0.5 mmol)，随后加入HATU (25 mg, 0.07 mmol)。将所得到的溶液在RT搅拌18小时。将反应混合物用CH₂Cl₂ (5mL)稀释，用H₂O (5 mL)洗涤，随后用盐水(5 mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩以提供粗制的产物，为固体。MS: m/e 803.6 (M+H)⁺, 3.65 min (方法 1)。

步骤2: 向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(35 mg, 0.044 mmol)于1,4-二噁烷(2 mL)和 MeOH (1 mL)中的溶液中加入1N NaOH(1 mL)。将混合物在75℃搅拌4 h。将粗制的混合物通过制备型HPLC纯化以提供4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-2-氧代乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸(5 mg, 15%收率)，为固体。MS: m/e 747.5 (M+H)⁺, 2.99 min (方法 1)。

实施例10

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1. 制备(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸

将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(300 mg,0.448 mmol)溶解于二噁烷(2 mL)中并逐滴加入氢氧化钠(1N, 2 mL)。将所得到的溶液搅拌24小时。加入HCl (1N)将混合物酸化至~pH 4。在真空下除去挥发物并将残余物用CH₂Cl₂萃取。将有机层经硫酸钠干燥并过滤。将滤液蒸发至干。将粗制的物质通过硅胶色谱法（首先使用乙酸乙酯/己烷类(2-8%)，随后使用MeOH/CH₂Cl₂ (1-3%)）纯化以提供标题化合物，为白色固体(200 mg, 69%)。MS: m/e 585.47 (M-56+H)⁺, 3.89 min (方法 6)。

步骤2. 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-叠氮基-3-氧代丙-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

在0℃向(E)-3-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-基)丙烯酸(200 mg, 0.312mmol)于DCM (5 mL)中的溶液中加入DPPA (0.074 mL, 0.343 mmol)，随后加入三乙胺(0.065 mL, 0.468 mmol)。将所得到的溶液搅拌4小时并且然后在减压下浓缩。将粗制的物质使用硅胶（用乙酸乙酯/己烷类的混合物(1% - 4%)洗脱）纯化以提供标题化合物，为白色固体(140 mg, 67.3%)。MS: m/e 610.48 (M-56+H)⁺, 4.86 min (方法 6)。

步骤3. 制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-2-异氰酸根合乙烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-3-叠氮基-3-氧代丙-1-烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(140 mg,0.21 mmol)于甲苯(10 mL)中的溶液温热至80℃保持3小时。在减压下除去溶剂。将所得到的残余物黄色油使用硅胶纯化以提供标题化合物，为白色固体(140 mg, ~100%)。MS: m/e670.56 (M+31+H)⁺, 3.98 min (方法 6)。

步骤4. 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(2-氧代乙基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((E)-2-异氰酸根合乙烯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(160 mg, 0.251mmol)于二噁烷(10 mL)和水(10.00 mL)中的溶液中加入PPTS(31.5 mg, 0.125 mmol)。将所得到的溶液在室温搅拌30 min。观察到漂浮在顶部的白色固体。将混合物在减压下浓缩以除去二噁烷并将含水的残余物用CH₂Cl₂ (2 x 10 mL)萃取。将有机层合并，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩以提供标题化合物，为白色固体(140 mg, 91%)。将粗制的产物未经额外的纯化地用于下一步骤中。MS: m/e 613.66 (M+H)⁺, 4.06 min (方法 6)。

步骤5. 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(2-氧代乙基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(50 mg, 0.082 mmol)于DCE (2mL)中的溶液中加入乙酸(0.014 mL, 0.245 mmol)和硫代吗啉 1,1-二氧化物(25.4 mg,0.188 mmol)。混合物首先变混浊，但在10 min后变成澄清的溶液。将混合物在RT搅拌2小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(86 mg, 0.408 mmol)，并持续搅拌72小时。将所得到的混合物用饱和的NaHCO₃(7 mL)稀释并用二氯甲烷(3 x 7 mL)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥。通过过滤除去干燥剂并将滤液在减压下浓缩。将粗制的产物在硅胶柱（首先用己烷/丙酮的混合物洗脱，随后用MeOH/CH₂Cl₂洗脱）上纯化以提供标题化合物，为白色固体(50 mg, 83%)。MS: m/e 732.73 (M+H)⁺, 3.01 min (方法 6)。

步骤6. 向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(50 mg, 0.068 mmole)于二噁烷(2 mL)中的溶液中加入NaOH (1N, 0.5 mL, 0.500mmol)。将反应混合物加热至70℃保持5 h。将所得到的溶液通过制备型HPLC(方法 1)纯化以提供4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸，为白色固体(16.7mg, 33%)。MS: m/e 676.69 (M+H)⁺, 2.73 min (方法 6)。

实施例11

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

步骤1. 制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯

遵循在上面于制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸的步骤5中所述的程序，使用 4-(2-氨基乙基)硫代吗啉 1,1-二氧化物作为反应物，以79 %收率制备标题化合物。MS: m/e 775.79 (M+H)⁺, 2.99 min (方法 6)。

步骤2: 向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸叔丁酯(16 mg, 0.021 mmol)于CH₂Cl₂ (5 mL)中的溶液中加入TFA (0.016 mL,0.2 mmol)。将混合物在RT搅拌18 h。将混合物在减压下浓缩以提供灰白色泡沫，将其溶解于MeOH (4 mL)中，并通过制备型HPLC (方法 1)纯化。合并含有期望的产物的级分并在减压下浓缩以提供标题化合物，为白色固体(10 mg, ~64%)。MS: m/e 719.74 (M+H)⁺, 2.71min (方法 6)。

实施例12

制备4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)(甲基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸

向4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)苯甲酸(20mg, 0.028 mmol)于MeOH(2 mL)中的溶液中加入甲醛(0.835 mg, 0.028 mmol)和乙酸(1.670 mg, 0.028 mmol)。首先形成混浊的混悬液，其在10 min后变澄清。将溶液在RT搅拌19分钟，然后加入氰基硼氢化钠(1.748 mg, 0.028 mmol)并将混合物搅拌2小时。将所得到的混合物通过制备型HPLC(方法 1)纯化以提供标题化合物，为白色固体(10 mg, 46.6%)。MS: m/e 733.7(M+H)⁺, 2.70 min (方法 6)。

第2部分

LC/MS方法 1A

起始%B = 2，最终%B = 98，经1.5分钟梯度，在98%B保持

流速= 0.8 mL / min

波长 = 220 nm

溶剂A = 100%水，0.05% TFA

溶剂B = 100%乙腈，0.05% TFA

柱 = Waters Aquity BEH C18 2.1 x 50 mm 1.7微米

LC/MS方法 2A

起始%B = 0，最终%B = 100，经2分钟梯度，在100%B保持

流速= 1 mL / min

波长 = 220 nm

溶剂A = 90%水，10%乙腈，0.1% TFA

溶剂B = 10%水，90%乙腈，0.1% TFA

柱 = Phenomenex LUNA C18, 3 μm, 2.0 x 30 mm

制备型HPLC方法 1A

起始%B = 25 最终%B = 100，经20分钟梯度，在100%B保持

溶剂A = 10% ACN - 90% H2O - 0.1% TFA

溶剂B = 90% ACN - 10% H2O - 0.1% TFA

柱 = Waters Sunfire 30x100 mm S5

流速= 40 mL/min

制备型HPLC方法 2A

起始%B = 25 最终%B = 100，经15分钟梯度，在100%B保持

溶剂A = 10% ACN - 90% H2O - 0.1% TFA

溶剂B = 90% ACN - 10% H2O - 0.1% TFA

柱 = Waters-Sunfire 30 x 100mm S5

流速= 40 mL/min。

实施例13和实施例14

制备(S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(异构体 1和异构体 2)。

步骤1: 制备(1S,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(羟基甲基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-醇

向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(羟基甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-醇(10 g, 22.59 mmol)于乙醇(100 mL)和二氯甲烷(100 mL)中的混悬液的烧瓶中加入10%炭载钯(1.202 g,1.129 mmol)。将混合物在1 atm氢气下搅拌18 h，然后抽空氢气并加入西莱特。将混合物经西莱特垫小心地过滤并用乙醇和二氯甲烷混合物(1:1)洗涤。将滤液在减压下浓缩以提供1.53 g产物，为白色固体。剩余的物质仍没有溶解，遂将西莱特垫用氯仿和甲醇的混合物稀释并搅拌几分钟。将混合物再次过滤并将滤液在减压下浓缩。将形成的固体用水稀释并通过过滤收集。然后将它们用水洗涤以提供标题产物(8.6 g, 19.3 mmol, 85%收率)，为灰白色固体。

步骤2: 制备(1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲醛

向(1S,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(羟基甲基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-醇(1.53 g, 3.44 mmol)于二氯甲烷(100 mL)中的混悬液中加入氯铬酸吡啶(1.854 g, 8.60 mmol)。将混合物在rt搅拌16 h，然后通过硅胶和西莱特塞子(plug)过滤。将塞子用二氯甲烷洗涤，然后用1:1 乙酸乙酯于己烷类中的溶液洗涤。将滤液在减压下浓缩以提供标题化合物(1.5 g, 3.4 mmol, 99 %收率)，为灰白色固体。

步骤3: 制备(1S,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-乙烯基十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9(5bH)-酮

将甲基三苯基溴化鏻(1.581 g, 4.42 mmol)于THF (15 mL)中的混悬液冷却至0℃并加入叔丁醇钾(1M于THF中) (4.77 mL, 4.77 mmol)。将混合物从冰浴中取出并搅拌30 分钟。向混合物中加入(1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-3a-甲醛(1.5 g, 3.40 mmol)于THF (15mL)中的溶液。搅拌15 分钟后, TLC显示没有起始原料剩余。将反应用水(20 mL)淬灭并用乙酸乙酯(3 x 20 mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过快速色谱法（使用0-25% 乙酸乙酯(于己烷类中)梯度和80 g硅胶柱）纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩以提供标题产物(1.1 g, 2.507 mmol, 73.7 %收率)，为灰白色固体。

步骤4: 制备(1S,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-三氟甲烷磺酸1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-乙烯基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-酯

将(1S,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-乙烯基十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9(5bH)-酮(1.1 g, 2.507 mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(0.985 g, 2.76 mmol)于THF(20 mL)中的溶液冷却至-78℃并缓慢地加入LiHMDS (1M于THF中) (3.76 mL, 3.76 mmol)。将混合物在-78℃搅拌1h，然后从冰浴中取出并温热至rt。在rt搅拌3 h后，将混合物用水(40 mL)稀释并用乙酸乙酯(3 x 40 mL)萃取。将有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过快速色谱法（使用0-5% 乙酸乙酯(于己烷类中)梯度和80 g硅胶柱）纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩以提供标题化合物(1.36 g, 2.383 mmol, 95 %收率)，为白色固体。

步骤5: 制备 (1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-三氟甲烷磺酸1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(环氧乙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-酯

该反应是从J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 6189-6190中的环氧化程序改良的。向含有(1S,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR)-三氟甲烷磺酸1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-乙烯基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-酯(1.36 g, 2.383 mmol)和甲基三氧化铼(VII)(0.030 g, 0.119mmol)的烧瓶中逐滴加入二氯甲烷(15 mL)，随后加入吡啶(0.023 mL, 0.286 mmol)且最后加入过氧化氢(30%) (0.365 mL, 3.57 mmol)。将混合物在rt搅拌24 h，然后加入额外的365 μL过氧化氢并将混合物在rt进一步搅拌。在rt搅拌额外的7天后，将混合物用水(20mL)稀释并用二氯甲烷(3 x 30 mL)萃取。将合并的有机层用10 mg的MnO₂处理，然后经硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩。粗制的产物通过1H NMR显示出起始原料向期望的环氧化物(非对映异构体的65:35混合物)的完全转化（clean conversion）。将粗制的产物穿过硅胶和西莱特塞子(用DCM洗涤，然后用1:1 EtOAc:己烷类洗涤)并将滤液在减压下浓缩以提供1.36g的预期的产物，为非对映异构体的65:35 混合物。

步骤6: 制备(S)-1-(氟甲基)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(环氧乙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯

向含有(1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-三氟甲烷磺酸1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(环氧乙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-酯(1.06 g, 1.806 mmol)的小瓶中加入(S)-1-(氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯甲酸苄酯(0.845 g, 2.258 mmol)、磷酸,钾盐(1.150 g, 5.42 mmol)、乙酸钯(II)(0.020 g, 0.090mmol)和2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯 (S-phos) (0.056 g, 0.135mmol)。将混合物用氮气吹扫，然后将小瓶密封并加热至75℃。加热16 h后，将混合物冷却至rt并在减压下部分地浓缩。将混合物用水(25 mL)稀释并用二氯甲烷(3 x 25 mL)萃取。将有机层经硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过快速色谱法（使用0-20% EtOAc(在己烷类中)梯度和80g 硅胶柱）纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩以提供产物，为白色泡沫 (0.65:0.35环氧化物异构体比)。将粗制物运用至下一步骤中而不进行额外的纯化。

步骤7: 制备(S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸苄酯(异构体 1和异构体 2)

向含有(S)-1-(氟甲基)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(环氧乙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)环己-3-烯甲酸苄酯(0.1 g,0.146 mmol)的小瓶中加入N,N-二甲基乙二胺(0.5 mL, 4.54 mmol)。将混合物加热至100℃过夜保持87 h，然后冷却至rt并通过制备型HPLC (方法 1)纯化。将被分离的含有两种异构体中的每一种的级分在减压下浓缩以提供异构体 1 (5.7 mg,)和异构体 2 (10.2 mg)，为它们各自的TFA盐。

步骤8:

实施例20: (S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸, 异构体 1的代表性的程序：向来自步骤7的异构体 1(5.7 mg)于1,4-二噁烷(1 mL)和甲醇(0.2 mL)中的溶液中加入氢氧化钠(1.0N) (0.037 mL, 0.037 mmol)。将混合物加热至70℃保持8h，然后冷却至rt并搅拌过夜。将混合物通过制备型HPLC(方法 2A)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩以提供产物，为透明的薄膜。

制备型HPLC保留时间,方法 2A = 8.8 分钟。2.0 mg的异构体 2被分离为标题化合物的TFA盐。该醇的立体化学未指定。LC/MS: m/e 683.9 (M+H)⁺, 1.81 min (方法 2A)。

实施例21: 使用相同的程序制备异构体 2，只不过以10.2 mg的苄酯作为起始并将0.066 mL的1N NaOH用于反应。制备型HPLC保留时间,方法 2A = 9.3 分钟。3.9 mg的异构体2被分离为标题化合物的TFA盐。该醇的立体化学未指定。LC/MS: m/e 683.9 (M+H)⁺,1.83 min (方法 2A)。

实施例15

制备(S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((4-氯苄基)(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸(异构体 1)

向(S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸, 异构体 1 (0.028 g)于甲醇(1.0 mL)和乙酸(0.1 mL)中的混悬液中加入4-氯苯甲醛(6.34 mg, 0.045 mmol)，随后加入甲硼烷-2-甲基吡啶络合物(4.82 mg, 0.045mmol)。将混合物在rt搅拌16 h，然后加入额外的6 mg的4-氯苯甲醛，随后加入5 mg的甲硼烷-2-甲基吡啶络合物。将混合物在rt搅拌额外的5天，然后用甲醇稀释，过滤，并通过制备型HPLC纯化以提供标题化合物，为白色固体(14.3 mg)。

实施例16

制备(S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸, 异构体 2.

使用上面针对其非对映异构体所述的相同的程序制备标题化合物，只不过使用(S)-4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-1-羟基乙基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]䓛-9-基)-1-(氟甲基)环己-3-烯甲酸作为起始原料。在搅拌16 h后，将额外的10 mg的4-氯苯甲醛和7.5 mg的甲硼烷-2-甲基吡啶络合物加入至混合物后。如上面针对其非对映异构体所指示的那样进行后处理和纯化以提供标题化合物，为白色固体(19.2 mg)。

HIV细胞培养分析-自NIH AIDS Research and Reference Reagent Program获得MT-2细胞和293T细胞。使MT-2细胞在补充有10%热灭活胎牛血清、100μg/ml青霉素G和至多100单位/ml链霉素的RPMI1640培养基中繁殖。使293T细胞在补充有10%热灭活胎牛血清(FBS)、100单位/ml青霉素G和100μg/ml链霉素的DMEM培养基中繁殖。自NIH AIDS Researchand Reference Reagent Program获得NL_4-3的前病毒DNA克隆。将重组NL_4-3病毒用作参考病毒，在所述重组NL_4-3病毒中来自NL4-3的nef基因片段经海肾荧光素酶（Renillaluciferase）基因替代。此外，将残基GagP373转化成P373S。简而言之，通过转染NL_4-3的经改变的前病毒克隆制备重组病毒。根据制造商的说明书，使用来自Invitrogen (Carlsbad,CA)的LipofectAMINE PLUS在293T细胞中实施转染。在MT-2细胞中使用荧光素酶酶活性作为标记滴定病毒。使用来自Promega (Madison,WI)的双重荧光素酶试剂盒并对制造商的方案进行修改来量化荧光素酶。将经稀释的被动裂解溶液与重悬浮的荧光素酶分析试剂和重悬浮的Stop&Glo底物(2:1:1比率)预混合。将五十(50)μL混合物添加至分析板上的每一通气孔(aspirated well)且立即在Wallac TriLux(Perkin-Elmer)上量测荧光素酶活性。通过测量在抑制剂的连续稀释液存在下经NLRluc重组体感染4-5天的细胞中的荧光素酶活性来量化抑制剂针对重组病毒的抗病毒活性。化合物的EC₅₀数据显示于表1中。

EC₅₀的生物学数据说明(Key)

。

以上描述仅是说明性的且不应理解为以任何方式限制本发明的范围或基本原理。实际上，除本文所显示和所阐述的那些之外，自以下实施例和上述描述，本发明的多种修改对于本领域技术人员而言将变得显而易见。这些修改也意欲属于所附权利要求的范围内。

Claims

1. 化合物，包括其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

式I的化合物

和式II的化合物

其中R₁是异丙烯基或异丙基；

X选自苯基、杂芳基、C_4-8环烷基、C_4-8环烯基、C_4-9螺环烷基、C_4-9螺环烯基、C_4-8氧杂环烷基、C_6-8二氧杂环烯基、C_6-9氧杂螺环烷基和C_6-9氧杂螺环烯基环；

R₂是-H、˗C_1-6烷基、˗烷基取代的C_1-6烷基或苄基；

其中n=1-6；

R₃是–H、˗C_1-6 烷基、˗烷基取代的C_1-6烷基或苄基；

或R₄和R₅与邻近的N一起形成选自下组的环：

或R₈和R₉与邻近的N一起形成选自下组的环：

条件是R₈或R₉中只有一个可以是-COOR₃；

R₁₀选自-H、˗C_1-6 烷基、˗NR₂R₂和-COOR₃；

R₁₂选自-H、˗C_1-6 烷基、˗COOR₃和芳基。

2. 如权利要求1中要求保护的化合物，其中X是苯基或C_4-8环烯基。

3.如权利要求2中要求保护的化合物，其中Y是–COOH。

4.如权利要求3中要求保护的化合物，其中所述化合物是式I的化合物。

5.化合物，包括其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

。

6.化合物，包括其药学上可接受的盐，所述化合物选自：

。

7.一种组合物，其包含减轻HIV的量的一种或多种如权利要求1中要求保护的化合物，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

8.一种组合物，其包含减轻HIV的量的一种或多种如权利要求5中要求保护的化合物，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

9.用于治疗感染有HIV病毒的哺乳动物的方法，其包括给所述哺乳动物施用减轻HIV的量的如权利要求1中要求保护的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

10.用于治疗感染有HIV病毒的哺乳动物的方法，其包括给所述哺乳动物施用减轻HIV的量的如权利要求5中要求保护的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。