CN106511330A - 半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用，属于医药技术领域。具体涉及半齿泽兰素在制备治疗原发性痛风药物中的应用，半齿泽兰素在制备治疗继发性痛风药物中的应用。本发明将半齿泽兰素用于制备抗痛风药物，可以为痛风病人提供了新的治疗药物，能降低目前使用抗痛风药物出现的各种副作用。本发明具有剂量低、疗效好的特点。

Description

半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体的涉及半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用。

背景技术

高尿酸血症和痛风已成为现代生活的文明病之一，是一种由于体内嘌呤合成代谢增多，尿酸产生超量或因尿酸排泄不良而导致血中尿酸升高，高尿酸血症只是痛风疾病的一个生化标志。痛风的临床表现常分为急性期、间歇期、慢性期和肾脏病变等，主要表现为痛风性关节炎和痛风性肾病。肾脏病变的发生是长期高尿酸血症发展的结果，高尿酸血症患者肾脏病理检查几乎均有不同程度的损害，大约1/3患者在病程中出现肾脏症状。关于高尿酸血症的治疗，继发性高尿酸血症主要针对其基础疾病进行治疗，而原发性高尿酸血症的治疗，一般采用饮食、运动控制加以药物治疗。抑制尿酸生成药物主要机制为抑制黄嘌呤氧化酶（XO）的活性。别嘌醇是这类药的代表，一直以来都是抗痛风的临床一线药物，该药可抑制黄嘌呤氧化酶，影响尿酸生成，使血中尿酸减少，防止通风发作。但是，该药的副作用较大，虽然降尿酸效果显著，但对肾脏的保护功能甚弱，甚至会引起肝功能障碍、肾衰竭等。

本发明涉及的化合物半齿泽兰素，3,5-二羟基-4,6,7-三甲氧基黄酮，其CAS号:855-96-9，可从板蓝根、荔枝草中提取得到，具有祛痰，抗肝损伤，抑菌，止咳平喘的作用。本发明将其用作制备抗通风药物为首次公开。

发明内容

本发明的目的在于提供半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用，为了实现本发明的目的，采用如下技术方案：

半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用，所述半齿泽兰素的结构式为：

上述技术方案中，作为优选，所述的药物中包括或者不包括其它活性成分。

上述技术方案中，作为优选，所述的药物不含有其它活性成分，还含有药学上可接受的辅料。

上述技术方案中，作为优选，所述半齿泽兰素在制备治疗原发性痛风药物中的应用。

上述技术方案中，作为优选，所述半齿泽兰素在制备治疗继发性痛风药物中的应用。

上技术方案中，所述药物的剂型为液体制剂。

上述技术方案中，作为优选，所述药物中半齿泽兰素的浓度为2.5~250微克/毫升。

上述技术方案中，作为优选，所述药物中半齿泽兰素的浓度为20~50微克/毫升。

上述技术方案中，作为优选，所述药物中半齿泽兰素的浓度为25微克/毫升。

有益效果：本发明中的半齿泽兰素可从板蓝根、荔枝草中提取得到，原材料易于获取，对由先天性嘌呤代谢紊乱和（或）尿酸排泄障碍所引起原发性痛风和继发于肾脏疾病或某些药物所致尿酸排泄减少、骨髓增生性疾病及肿瘤化疗所致尿酸生成增多等的继发性痛风具有显著的治疗作用。因此，将半齿泽兰素用于制备抗痛风药物，可以为痛风病人提供了新的治疗药物，能降低目前使用抗痛风药物出现的各种副作用。本发明具有剂量低、疗效好的特点。

具体实施方式

若未特别说明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。

实施例1

半齿泽兰素抗痛风炎症实验 ：

具体方法如下：

①溶液配制

将5g 尿酸加 1000ml 蒸馏水煮沸，加 5％ NaOH 溶液调 pH7.4，搅拌，冷却析晶制成尿酸钠结晶 (MSU)。将制好的 MSU10mg 高压灭菌，加不含血清的 DMEM 培养液 10ml，研磨配成 1mg/ml 的 DMEM 溶液。实验时，此溶液再加 DMEM 培养液配成不同浓度 DMEM 的MSU 溶液。

半齿泽兰素 2.5mg，用乙醇溶解，终浓度 <0.02％，再加无血清的 DMEM 培养液，配制成浓度 2.5ug/ml、25ug/ml、250ug/ml。

阳性药吲哚美辛 2.0mg，方法同 半齿泽兰素，配制浓度 20ug/ml。

②血管内皮细胞的体外培养

人脐静脉血管内皮细胞HUVEC株，由广西某医学院提供，细胞经支原体检测，无支原体污染，细胞经0.25％胰蛋白酶消化，含10％小牛血清的DMEM培养液中和，离心(1000r/ min×6min)，去上清液，加含10％小牛血清的DMEM培养液，移入细胞培养瓶中，放37℃、5％ CO2培养箱中传代培养。

③对 MSU 刺激 HUVEC 活力的影响

HUVEC在培养瓶中培养，待生长至70％～80％融合时，以0.25％胰蛋白酶消化、离心，10％小牛血清 DMEM 培养液洗涤 3 次，用 10％小牛血清 DMEM 培养液调成 4×104/ml细胞悬液，植入 96 孔板(每孔 200ul)，培养 24 小时后轻吸出原培养液，进行以下实验，每组各 8 孔，具体分组及加液如下 ：对照组(200ulDMEM培养液)、模型组(100ug/ml MSU溶液)、干预 A 组 (100ug/ml MSU 溶液 +2.5ug/ml 半齿泽兰素)、干预 B 组 (100ug/mlMSU 溶液 +25ug/ ml 半齿泽兰素)、干预 C 组 (100ug/ml MSU 溶液 +250ug/ml 半齿泽兰素)，加液后继续放 37℃、5％ CO2 培养箱中培养 24 小时，收集上清液，剩余的 HUVEC用于测定细胞活性，每孔再加 5mg/ml MTT 液 20ul，继续放 37℃、5％ CO2培养箱中培养4 小时后，弃 MTT 液，加入二甲 基亚砜 200ul 溶解，震荡，于酶标仪读取吸光度值，波长490nm。

阳性药组加液 (100ug/ml MSU 溶液 +20ug/ml 吲哚美辛 )，其他方法同上。

数据统计学处理，细胞活力 (％ ) ＝实验组吸光度值 / 对照组吸光度值 ×100％， 结果见表 1。

表 1 半齿泽兰素 对 MSU 刺激的血管内皮细胞活力的影响 (X±s).

表1

组别	药物浓度（微克/毫升）	n/孔	细胞活力（%）
				对照组	0	8	100
模型组	0	8	86
				阳性药物	20	8	106
干预A组	2.5	8	173
				干预B组	25	8	202
干预C组	250	8	198

与对照组相比，模型组细胞活力显著减小 (P<0.01，P<0.05)，阳性药吲哚美辛及半齿泽兰素干预后细胞活力显著提高 (P<0.01，P<0.05)，并强于对照组，其中， 半齿泽兰素各浓度组的细胞活力强于阳性药吲哚美辛。

④对 ICAM-1 表达影响

将处于对数生长期的 HUVEC 用 0.25％的胰蛋白酶消化，轻轻吹打，制成细胞悬液，调整细胞密度为 5×109/L，接种于细胞培养瓶中。待细胞长满后 (约24h)，弃去上清液，分为下列组：对照组、模型组 (100ug/ml MSU 溶液 )、半齿泽兰素组 (100ug/ml MSU 溶液+25ug/ml 半齿泽兰素)，继续培养 24 小时，PBS 收集细胞，离心去上清，加入 CD54 单克隆抗体，30min 后，PBS 洗涤，重悬细胞，应用流式细胞仪检测其阳性细胞百分率 (n＝10000)， 重复 3 次，结果见表 2。

表 2 为半齿泽兰素 对 MSU 刺激的血管内皮细胞 ICAM-1 表达的影响 (X±s)。

表2

组别	药物浓度	ICAM表达
			对照组	0	13±4
模型组	0	233±65
			半齿泽兰素组	25	158±37

与模型组比较，**P<0.01*P<0.05，与对照组比较，##P<0.01#P<0.05 。

2、结果

结果显示，空白组 HUVEC 几乎无 ICAM-1 表达，模型组 ICAM-1 的表达最高，与模型组相比，半齿泽兰素对 ICAM-1 的表达有较强的抑制作用。

结论：用 MSU 致 HUVEC 损伤的痛风模型评价显示，半齿泽兰素可保护 MSU 致HUVEC 损伤，减少细胞凋亡，提高细胞活性，抑制 ICAM-1 表达，具有抗痛风活性，半齿泽兰素可用于制备治疗痛风炎症药物。

以上所述是本发明的优选实施例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.半齿泽兰素在制备治疗痛风药物中的应用，其特征在于，所述半齿泽兰素的结构式为：

。

2.根据权利要求 1 所述的应用，其特征在于：所述的药物中包括或者不包括其它活性成分。

3. 根据权利要求 2所述的应用，其特征在于：所述的药物不含有其它活性成分，还含有药学上可接受的辅料。

4.根据权利要求 1 所述的应用，其特征在于：所述半齿泽兰素在制备治疗原发性痛风药物中的应用。

5.根据权利要求 1 所述的应用，其特征在于：所述半齿泽兰素在制备治疗继发性痛风药物中的应用。

6.根据权利要求1至5任一项所述的应用，其特征在于：所述药物的剂型为液体制剂。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述药物中半齿泽兰素的浓度为2.5~250微克/毫升。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述药物中半齿泽兰素的浓度为20~50微克/毫升。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述药物中半齿泽兰素的浓度为25微克/毫升。