CN106383237A - 一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法，属于体外诊断领域。该试剂条所包含的肌酐反应膜、过滤膜、扩散层均以适当重叠关系固定于塑料底板上，其特征在于该反应膜上包括稀释液和反应试剂，其中稀释液包含缓冲液、表面活性剂、稳定剂、粘合剂、辅酶因子以及防腐剂；反应试剂包含肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、过氧化物酶，4‑氨基安替比林和N‑乙基‑N(2‑羟基‑3‑丙磺基)‑3,5‑二甲基苯胺。利用Trinder反应试剂作为指示探针，被测物通过各种酶作用最终产生有色的醌化物，以醌化物显色程度间接检测样品中肌酐含量。本发明将液相反应转移到固相载体上，实现了操作简单、快速方便检测样品中肌酐含量的目的，且灵敏度高、精确度好，便于推广应用。

Description

一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法

技术领域

本发明涉及用于临床检测血清中肌酐含量的检测试剂条，属于临床体外诊断技术领域。配合与干化学试剂条配套的反射光分析仪，提高了肌酐检测的准确性，精密性和分析速度。

背景技术

1、肌酐(creatinine)是肌肉代谢的产物，在肌肉中肌酸主要通过不可逆的非酶脱水反应缓缓形成肌酐，再释放到血液中，在通过肾脏时，会被正常肾小球过滤掉，几乎全部随尿液排出体外。肌酐包含血肌酐和尿肌酐两种，血清肌酐升高更能反映实质性肾小球功能损害，是评价肾小球滤过功能的重要指标，深受临床重视，是一种必须的临床生化检查项目；

2、目前，我国临床实验室测定血清肌酐的方法主要有两种，一种是碱性苦味酸法(属于化学测定法)，在碱性溶液中，苦味酸与肌酐作用，生成黄红色的肌酐-苦味酸复合物，在510nm处有吸光度变化。虽然此法成本较低，但易受多种干扰物质影响，测定血清肌酐的特异性和准确度都很差；另一种是肌氨酸氧化酶法，克服许多干扰物质影响，专一性强，准确度高，但存在耗时较长的缺陷，临床使用不便。

目前已有一种测定肌酐含量的试纸，其原理与苦味酸法测定肌酐类似，存在非肌酐物质对测定造成干扰的问题，且反应需要在强碱条件下进行，强碱组分对于试纸条的长期稳定保存十分不利。

发明内容

1、为克服现有技术中存在的问题，本发明提供了一种制备方法简单、抗干扰性强、反应条件温和、准确度高及稳定性好的肌酐酶法干片式检测试剂条；

2、本发明干片式试剂条利用肌氨酸氧化酶法进行制备，在制备过程中加入特殊粘合剂、稳定剂、交联剂等，使得试剂条反应颜色均一，且方法简单、试剂条件温和、避免多种干扰物质影响，专一性强、准确度高、性能稳定、易长期保存，不同血清肌酐含量对应的色阶明显，易于目视分辨和机读，便于医院检验科及非专业检验人员使用；

3、本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种干片式肌酐检测试剂条的制备方法：将配置好的稀释液与反应试剂按一定比例充分混合，将反应膜充分浸入混合液，于37℃条件下干燥1h，取出后将反应膜、血液过滤膜、扩散层以适当重叠关系置于塑料底板上，用夹具加紧。使用时，将试剂条插入检测仪器中，滴入血液样本进行反应及测定，读取结果，操作方便；

4、本发明可用于干化学试剂条配套的反射光分析仪，一种干片式肌酐检测试剂条，包括稀释液和反应试剂，其中稀释液是由以下成分组成：

反应试剂由以下成分组成：

5、与现有技术比较本发明的优点是：本发明制备的干片式肌酐检测试剂条利用Trinder反应试剂作为指示探针，当血液中被测物通过相关酶作用产生过氧化氢(H2O2)时，过氧化物酶能够催化4-氨基安替比林(4-AAP)及H2O2，产生有色的醌化物和水，以醌化物显色程度来反映H2O2生成量，间接检测样品中肌酐含量。本发明将液相反应转移到固相载体上，制备方法简单、性能稳定、易长期保存、且灵敏度高、精确度好，便于携带，方便医院检验科及非专业检验人员使用。

附图说明

图1是本发明的整体示意图。

图中标号：1为与试剂条配套的塑料夹具底板，2为肌酐反应膜，3和4为血液过滤膜，5为扩散膜，6为加样孔，7为塑料夹具盖子，8为肌酐检测区域。

具体实施方式

1、本发明的干片式血清肌酐检测试剂条，其中扩散层、血液过滤膜和肌酐反应膜是按照适当的重叠关系固定在塑料底板上；

2、其中肌酐反应膜2上包含稀释液和反应试剂，其中稀释液包含缓冲液、表面活性剂、稳定剂、粘合剂、辅酶因子以及防腐剂；反应试剂包含肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、过氧化物酶，4-氨基安替比林和N-乙基-N(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺。利用Trinder反应试剂作为指示探针，当被测物通过酶作用产生过氧化氢时(H2O2)，过氧化物酶能够催化4-氨基安替比林(4-AAP)及H2O2，产生有色的醌化物和水；

3、其中肌酐检测试剂条包括扩散膜、血液过滤膜、反应膜以及配套的塑料夹具；

4、肌酐检测试剂条的检测原理为：将随机尿液滴加入加样孔6，若样品中含有肌酐，则肌酐会通过各种相关酶的作用产生过氧化氢(H2O2)，过氧化物酶能够催化4-氨基安替比林(4-AAP)及H2O2，产生显色反应；若血液样品中不含肌酐，则肌酐检测区域8不会产生显色反应。

Claims (6)

1.一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法，在塑料底板上，扩散层、血液过滤膜、肌酐反应膜按照适当的重叠关系固定，其特征在于该反应膜上包括稀释剂和反应试剂。

2.其中稀释液包含缓冲液、表面活性剂、稳定剂、粘合剂、辅酶因子以及防腐剂。

3.反应试剂包含肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、过氧化物酶，4-氨基安替比林和N-乙基-N(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺。

4.稀释液组成成分：缓冲液(pH6.0-8.5)50-100mmol/L、表面活性剂1％-10％(质量百分比)、稳定剂25-100g/L、粘合剂1％-10％、防腐剂0.1-1g/L、辅酶因子1-5g/L。

5.反应液组成成分：肌酐酶(100-300KU/L)、肌酸酶(1-300KU/L)、肌氨酸氧化酶(1-100KU/L)、过氧化物酶(500-1000KU/L)，4-氨基安替比林(1-10g/L)和N-乙基-N(2-羟基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺(1-10g/L)。

6.所述肌酐反应膜为LP Membranes，血液过滤膜包含CytoSepGrade1660Membrane以及AHLSTROM(奥斯龙Grade144)两种。