CN111103342A - 一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法 - Google Patents

一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111103342A
CN111103342A CN201911320949.9A CN201911320949A CN111103342A CN 111103342 A CN111103342 A CN 111103342A CN 201911320949 A CN201911320949 A CN 201911320949A CN 111103342 A CN111103342 A CN 111103342A
Authority
CN
China
Prior art keywords
creatinine
screen printing
preparation
printing electrode
interference performance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201911320949.9A
Other languages
English (en)
Inventor
梁波
叶学松
丁浩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Honghe Innovation Technology Research Institute
Shandong Xianyi Medical Technology Co ltd
Shandong Industrial Technology Research Institute of ZJU
Original Assignee
Honghe Innovation Technology Research Institute
Shandong Xianyi Medical Technology Co ltd
Shandong Industrial Technology Research Institute of ZJU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Honghe Innovation Technology Research Institute, Shandong Xianyi Medical Technology Co ltd, Shandong Industrial Technology Research Institute of ZJU filed Critical Honghe Innovation Technology Research Institute
Priority to CN201911320949.9A priority Critical patent/CN111103342A/zh
Publication of CN111103342A publication Critical patent/CN111103342A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28—Electrolytic cell components
    • G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/327—Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
    • G01N27/3271—Amperometric enzyme electrodes for analytes in body fluids, e.g. glucose in blood
    • G01N27/3272—Test elements therefor, i.e. disposable laminated substrates with electrodes, reagent and channels

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，包括肌酐基液配制、混合酶液配制、血液分离层的制备以及肌酐丝网印刷电极制备等步骤。通过把含有肌酐基液的酶固定在电极上以制备肌酐丝网印刷电极，能对全血样本直接进行检测大大降低了操作难度，减少了样本需求量，同时通过增加过滤层大大增强检测的准确度和精密度。

Description

一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法
技术领域
本发明涉及电化学领域，更具体的说，它涉及一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法。
背景技术
肌酐(creatinine，Cre)是肌肉在人体内代谢的产物，每20g肌肉代谢可产生1mg肌酐。肌酐主要由肾小球滤过排出体外。血中肌酐来自外源性和内源性两种，外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物；内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。在肉类食物摄入量稳定时．身体的肌肉代谢又没有大的变化，肌酐的生成就会比较恒定。血液中肌酐的浓度变化主要由肾小球的滤过能力(肾小球滤过率)来决定。滤过能力下降，则肌酐浓度升高。血肌酐值高出正常值多数意味肾脏受损，血肌酐能较准确反应肾实质受损的情况。血肌酐常用的检测方法有碱性苦味酸动力法、毛细管电泳法和高效液相色谱法等，这些方法往往成本高，操作复杂设备昂贵，且样本需求量大。电化学法检测肌酐具有成本低、操作简单、灵敏度高、时间段等优点。
丝网印刷电极是通过电化学法检测酶与底物反应的电流或者阻抗，该方法特异性灵敏度高，检测速度快，且成本低，但血液中物质复杂对该方法有很大的干扰。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，通过把含有肌酐基液的酶固定在电极上以制备肌酐丝网印刷电极，能对全血样本直接进行检测大大降低了操作难度，减少了样本需求量，同时通过增加过滤层大大增强检测的准确度和精密度。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，包括以下步骤：
步骤1：配制肌酐基液；
步骤2：量取200ml去离子水，加入表面活性剂 3g、肌酐基液532g、分散剂25g、酶保护剂3g、无水氯化钙0.1g、硫酸镁1.29g溶解，再加入肌酐酶50KU、肌酸酶30KU、肌氨酸氧化酶30KU、过氧化氢酶50KU，用0.1M氢氧化钠调节pH至8，用去离子水定容至1L，获得混合酶液；
步骤3：量取200ml去离子水，加入酶保护剂75g、氯化钠10g溶解，用容量瓶定容至1L，用分离层载体浸泡10min，50℃10min烘干，获得血液分离层；
步骤4：向丝网印刷电极反应区滴加2μl混合酶液，40℃ 下20min烘干，再把血液分离层固定在电极上。
优选的，步骤1中，肌酐基液的配制方法为：量取800ml离子水，加入柠檬酸钠二水合物30g、BSA标准粉末4.00g、乙二胺四乙酸二钠1.47g、防腐剂 1mL溶解混匀，用0.1M氢氧化钠调节pH至8，用去离子水定容至1L。
优选的，步骤1中，防腐剂为质量分数为0.5%的苯甲酸钠溶液或者Proclin-300。
优选的，步骤2中，表面活性剂为聚乙二醇、triton X-100、十二烷基苯磺酸钠、吐温20中的一种。
优选的，步骤2中，分散剂为羧甲基纤维素或者羟乙基纤维素。
优选的，步骤2和3中，酶保护剂为蔗糖或者海藻糖。
优选的，步骤3中，分离层载体为Ahlstrom Grade 141。
本发明的有益效果：1、通过制备肌酐基液、含有肌酐基液的酶液，再将酶固定在丝网电极上，获得能检测肌酐的丝网印刷电极，对全血样本能直接进行肌酐检测，可以大大降低操作难度，减少样本需求量。
2、通过在电极反应区设置血液分离层，对检测样本进行过滤，以提高检测的准确度和精密度。
3、本方法成本低，且实用性强易于推广。
附图说明
图1为本发明的结构示意图。
具体实施方式
下面对本发明涉及的结构或这些所使用的技术术语做进一步的说明。这些说明仅仅是采用举例的方式进行说明本发明的方式是如何实现的，并不能对本发明构成任何的限制。
一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，包括以下步骤：
（1）肌酐基液的配制：量取800ml去离子水，加入柠檬酸钠二水合物30g、BSA标准粉末4.00g、乙二胺四乙酸二钠1.47g、Proclin-300 1mL溶解混匀，用0.1M氢氧化钠调节pH至8，用去离子水定容至1L。
（2）混合酶液的配制：量取200ml去离子水，加入吐温-20 3g、肌酐基液532g、羟乙基纤维素25g、蔗糖3g、无水氯化钙0.1g、硫酸镁1.29g溶解，再加入肌酐酶50KU、肌酸酶30KU、肌氨酸氧化酶30KU、过氧化氢酶50KU，用0.1M氢氧化钠调节pH至8，用去离子水定容至1L。
（3）血液分离层的制备：量取200ml去离子水，加入海藻糖75g、氯化钠10g溶解，用容量瓶定容至1L，用Ahlstrom Grade 141浸泡10min，50℃10min烘干。
（4）肌酐丝网印刷电极制备：向丝网印刷电极反应区滴加2μl混合酶液，40℃20min烘干，再把血液分离层固定在电极上。
表1为本方法与传统方法高效液相色谱法回收率的对比。
肌酐浓度（μM） 高效液相色谱法回收率（%） 本方法回收率（%）
25 77.1 91.8
50 75.3 90.5
75 74.5 92.1
由表1可知，在添加肌酐浓度相同的情况下，本方法的回收率要远远高于高效液相色谱法回收率。
在缺少本文中所具体公开的任何元件、限制的情况下，可以实现本文所示和所述的发明。所采用的术语和表达法被用作说明的术语而非限制，并且不希望在这些术语和表达法的使用中排除所示和所述的特征或其部分的任何等同物，而且应该认识到各种改型在本发明的范围内都是可行的。因此应该理解，尽管通过各种实施例和可选的特征具体公开了本发明，但是本文所述的概念的修改和变型可以被本领域普通技术人员所采用，并且认为这些修改和变型落入所附权利要求书限定的本发明的范围之内。
本文中所述或记载的文章、专利、专利申请以及所有其他文献和以电子方式可得的信息的内容在某种程度上全文包括在此以作参考，就如同每个单独的出版物被具体和单独指出以作参考一样。申请人保留把来自任何这种文章、专利、专利申请或其他文献的任何及所有材料和信息结合入本申请中的权利。

Claims (7)

1.一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，包括以下步骤：
步骤1：配制肌酐基液；
步骤2：量取200ml去离子水，加入表面活性剂 3g、肌酐基液532g、分散剂25g、酶保护剂3g、无水氯化钙0.1g、硫酸镁1.29g溶解，再加入肌酐酶50KU、肌酸酶30KU、肌氨酸氧化酶30KU、过氧化氢酶50KU，用0.1M氢氧化钠调节pH至8，用去离子水定容至1L，获得混合酶液；
步骤3：量取200ml去离子水，加入酶保护剂75g、氯化钠10g溶解，用容量瓶定容至1L，用分离层载体浸泡10min，50℃10min烘干，获得血液分离层；
步骤4：向丝网印刷电极反应区滴加2μl混合酶液，40℃ 下20min烘干，再把血液分离层固定在电极上。
2.根据权利要求1所述的一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，其特征在于，步骤1中，肌酐基液的配制方法为：量取800ml离子水，加入柠檬酸钠二水合物30g、BSA标准粉末4.00g、乙二胺四乙酸二钠1.47g、防腐剂 1mL溶解混匀，用0.1M氢氧化钠调节pH至8，用去离子水定容至1L。
3.根据权利要求2所述的一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，其特征在于，步骤1中，防腐剂为质量分数为0.5%的苯甲酸钠溶液或者Proclin-300。
4.根据权利要求1所述的一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，其特征在于，步骤2中，表面活性剂为聚乙二醇、triton X-100、十二烷基苯磺酸钠、吐温20中的一种。
5.根据权利要求1所述的一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，其特征在于，步骤2中，分散剂为羧甲基纤维素或者羟乙基纤维素。
6.根据权利要求1所述的一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，其特征在于，步骤2和3中，酶保护剂为蔗糖或者海藻糖。
7.根据权利要求1所述的一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法，其特征在于，步骤3中，分离层载体为Ahlstrom Grade 141。
CN201911320949.9A 2019-12-19 2019-12-19 一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法 Pending CN111103342A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911320949.9A CN111103342A (zh) 2019-12-19 2019-12-19 一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911320949.9A CN111103342A (zh) 2019-12-19 2019-12-19 一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111103342A true CN111103342A (zh) 2020-05-05

Family

ID=70423107

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911320949.9A Pending CN111103342A (zh) 2019-12-19 2019-12-19 一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111103342A (zh)

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5635980A (en) * 1979-08-30 1981-04-08 Hitachi Ltd Creatinine analyzer
US20030027239A1 (en) * 2000-05-16 2003-02-06 Schaffar Berhard Peter Harald Creatinine biosensor
JP2006349412A (ja) * 2005-06-14 2006-12-28 National Institute Of Advanced Industrial & Technology クレアチニンバイオセンサ
CN101223284A (zh) * 2005-05-17 2008-07-16 雷迪奥米特医学公司 包括含水间隔层的酶传感器
US20090045056A1 (en) * 2004-10-05 2009-02-19 Jason Berberich Stable three enzyme creatinine biosensor
CN105334211A (zh) * 2015-10-20 2016-02-17 北京中生金域诊断技术股份有限公司 一种同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒
CN106124779A (zh) * 2016-06-15 2016-11-16 四川迈克生物科技股份有限公司 一种用于测定肌酐的试剂盒和方法
CN106290813A (zh) * 2016-07-22 2017-01-04 北京怡成生物电子技术股份有限公司 滤血膜及其制备方法与包括滤血膜的液体样品检测装置
CN106383237A (zh) * 2016-08-19 2017-02-08 基蛋生物科技股份有限公司 一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法
CN109916895A (zh) * 2019-04-12 2019-06-21 吉林省汇酉生物技术股份有限公司 一种定量测定肌酐浓度的干化学试剂片及其制备方法
CN110044881A (zh) * 2019-04-04 2019-07-23 大连大学 一种酶法测定肌酐的检测试剂盒及其使用方法

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5635980A (en) * 1979-08-30 1981-04-08 Hitachi Ltd Creatinine analyzer
US20030027239A1 (en) * 2000-05-16 2003-02-06 Schaffar Berhard Peter Harald Creatinine biosensor
US20090045056A1 (en) * 2004-10-05 2009-02-19 Jason Berberich Stable three enzyme creatinine biosensor
CN101223284A (zh) * 2005-05-17 2008-07-16 雷迪奥米特医学公司 包括含水间隔层的酶传感器
JP2006349412A (ja) * 2005-06-14 2006-12-28 National Institute Of Advanced Industrial & Technology クレアチニンバイオセンサ
CN105334211A (zh) * 2015-10-20 2016-02-17 北京中生金域诊断技术股份有限公司 一种同时检测尿液中钠和肌酐的试剂盒
CN106124779A (zh) * 2016-06-15 2016-11-16 四川迈克生物科技股份有限公司 一种用于测定肌酐的试剂盒和方法
CN106290813A (zh) * 2016-07-22 2017-01-04 北京怡成生物电子技术股份有限公司 滤血膜及其制备方法与包括滤血膜的液体样品检测装置
CN106383237A (zh) * 2016-08-19 2017-02-08 基蛋生物科技股份有限公司 一种干片式血清肌酐检测试剂条及其制备方法
CN110044881A (zh) * 2019-04-04 2019-07-23 大连大学 一种酶法测定肌酐的检测试剂盒及其使用方法
CN109916895A (zh) * 2019-04-12 2019-06-21 吉林省汇酉生物技术股份有限公司 一种定量测定肌酐浓度的干化学试剂片及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PING CHEN 等: "Sensitive Electrochemical Detection of Creatinine at Disposable Screen-Printed Carbon Electrode Mixed with Ferrocenemethanol", 《INT. J. ELECTROCHEM. SCI.》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sun et al. Simultaneous determination of dopamine and ascorbic acid at poly (neutral red) modified electrodes
Brovkovych et al. Nitric oxide release from normal and dysfunctional endothelium
Banica et al. Application of catalytic stripping voltammetry for the determination of organic sulfur compounds at a hanging mercury drop electrode: behaviour of cysteine, cystine and N-acetylcysteine in the presence of nickel ion
CN105954453A (zh) 一种同时定量检测烟酸、烟酰胺和泛酸的试剂盒
CN105067598B (zh) 一种氯霉素分子印迹电化学发光传感器及其检测氯霉素的方法
CN105420345A (zh) 一种稳定、抗干扰能力强的血清5’-核糖核苷酸水解酶检测试剂及检测方法
CN105424934A (zh) 一种N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶试剂及检测方法
Aboul-Kasim Anodic adsorptive voltammetric determination of the vitamin B1 (thiamine)
Delincée et al. Detection of peroxidase by the print technique in thin-layer isoelectric focusing
CN111103342A (zh) 一种高精度抗干扰性能强的肌酐丝网印刷电极制备方法
CN113607792A (zh) 一种血脂快速检测仪及检测方法
Atkinson et al. A Polarographic Examination of Diazotized Amines1
Fei et al. Amperometric determination of ascorbic acid at an electrodeposited redox polymer film modified gold electrode
CN103884753B (zh) 一种罗丹明6g/8-羟基喹啉薄膜修饰电极的制备方法及应用
Niu et al. Characterization of poly (safranine T)-modified electrode and application for simultaneous determination of epinephrine and uric acid coexisting with ascorbic acid
CN102323225B (zh) 一种检测低密度脂蛋白胆固醇的方法和试剂盒
CN110231389A (zh) 基于羧甲基纤维素钠/铋膜修饰电极检测镉离子的方法
Brunet et al. Electrochemical sensing of nitric oxide for biological systems: methodological approach and new insights in examining interfering compounds
CN102010890A (zh) 线粒体天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒
CN102507691A (zh) 一种抗坏血酸氧化酶电化学生物传感复合修饰电极的制备方法
CN106885905A (zh) 一种具有优越检测线和分析灵敏度的尿素检测试剂及检测方法
CN102590320A (zh) 巯基乙胺修饰电极用于检测痕量三价无机砷的电化学方法
CN109725036A (zh) 一种同时检测磺胺嘧啶和对乙酰氨基酚的电化学传感器及其检测方法
Omar et al. Assay of amlodipine besylate in tablets and human biological fluids by square wave adsorptive cathodic stripping voltammetry
Xu et al. Study on Rapid Electrochemiluminescence Detection of Allura Red

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB02 Change of applicant information

Address after: 277800 Room 401, building 15, Internet Town, high tech Zone, Zaozhuang City, Shandong Province

Applicant after: SHANDONG INDUSTRIAL TECHNOLOGY RESEARCH INSTITUTE OF ZHEJIANG University

Applicant after: SHANDONG XIANYI MEDICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd.

Applicant after: Honghe innovation and Technology Research Institute Co.,Ltd.

Address before: 277000 No. 15 Building, Internet Town, Zaozhuang High-tech Zone, Shandong Province

Applicant before: SHANDONG INDUSTRIAL TECHNOLOGY RESEARCH INSTITUTE OF ZHEJIANG University

Applicant before: SHANDONG XIANYI MEDICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd.

Applicant before: HONGHE INNOVATION TECHNOLOGY Research Institute

CB02 Change of applicant information
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200505

RJ01 Rejection of invention patent application after publication