CN106310253A - 一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品 - Google Patents

一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，将制得灵芝多糖液与卵黄抗体，按照3:1比例复配，即得。本发明采用适合大批量生产的现代卵黄抗体提取技术及优化的灵芝多糖提取工艺，将新城疫卵黄抗体与灵芝多糖作用相结合，对新城疫既能起到治疗作用，又有良好的预防效果；本发明的复配工艺简单，成熟，所用原料易购，成本低廉，既能保证抗体的活性，同时二者复合后作用效果增强，服用安全，无副作用，具有较大的市场推广价值。

Description

一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品
技术领域
本发明涉及一种抗体复合制剂，特别是涉及一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品。
背景技术
灵芝，是我国中医药宝库中的珍品，具有防病治病、延年益寿之功效，素有" 仙草"之誉。东汉时期的《神农本草经》、明代著名医药学家李时珍的《本草纲目》，都对灵芝的功效有详细的记载。如今，灵芝已作为药物正式被国家药典收载，同时它又是国家批准的新资源食品，无毒副作用，可以药食两用。
灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一，因此，也特别受到医药科技工作者的重视，研究报道也最多。现知灵芝多糖有广泛的药理活性，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿瘤、抗辐射，提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力，延长寿命，灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。
卵黄抗体是用特定抗原多次免疫产蛋母鸡，使机体产生相应的特异性抗体，并转移、贮存在卵黄中，经提取纯化的免疫球蛋白。卵黄抗体化学性质稳定、对于动物福利政策的提倡、制备成本低、产量高、可制作口服免疫球蛋白、制备提取纯化过程简单、纯度较高、相对于哺乳动物抗体交叉反应少和实验动物来源广泛等优点。血清抗体在母鸡体内形成过程中，由于其具有继续合成和转移能力，浓度可以保持平衡稳定。另一方面，鸡产生的抗体相比于系统发育高度保守的哺乳动物产生的抗体在对抗蛋白质和肽方面往往更有效。卵黄抗体作为一种高效的生物制剂已被开发，并被广泛应用于生产实践。
综上研究，灵芝多糖本身属于保健品，需要长期服用方能发挥提高免疫力效果，卵黄抗体治疗效果明显，二者复配可以兼顾预防与治疗。而现有技术尚未有关于灵芝多糖与卵黄抗体复配的相关报道。
发明内容
本发明的目的，提供一种将灵芝多糖与新城疫卵黄抗体复配，得到对新城疫预防与治疗双重效果的口服液。
本发明的技术方案是：
一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于116-126℃高压灭菌1.2-2.8小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提0.5-1.5小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入6-14倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为8.5%-11.5%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心15-45分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
上述一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，优选的方案是，步骤（1）于119-123℃高压灭菌（优选于121℃高压灭菌）。
上述一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，优选的方案是，步骤（1）高压灭菌1.6-2.4小时（优选高压灭菌2.0小时）。
上述一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，优选的方案是，步骤（1）于100℃热水浸提0.7-1.3小时（优选于100℃热水浸提1.0小时）。
上述一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，优选的方案是，步骤（2）加入8-12倍体积纯化水（优选加入10倍体积纯化水）。
上述一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，优选的方案是，步骤（2）加入体积比为9.5%-10.5%的辛酸（优选加入体积比为10%的辛酸）
上述一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，优选的方案是，步骤（2）3000r离心25-35分钟（优选3000r离心30分钟）。
本发明的优良效果还表现在：
1、本发明采用适合大批量生产的现代卵黄抗体提取技术及优化的灵芝多糖提取工艺，将新城疫卵黄抗体与灵芝多糖作用相结合，对新城疫既能起到治疗作用，又有良好的预防效果；
2、本发明的复配工艺简单，成熟，所用原料易购，成本低廉，既能保证抗体的活性，同时二者复合后作用效果增强，服用安全，无副作用，具有较大的市场推广价值。
具体实施方式
下面结合实施例和实验例详细说明本发明的技术方案，但保护范围不限于此。
实施例1：一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于116℃高压灭菌1.2小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提0.5小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入6倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为8.5%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心15分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
实施例2：一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于126℃高压灭菌2.8小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提1.5小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入14倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为11.5%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心45分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
实施例3：一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于119℃高压灭菌1.6小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提0.7小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入8倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为9.5%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心25分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
实施例4：一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于123℃高压灭菌2.4小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提1.3小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入12倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为10.5%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心35分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
实施例5：一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于121℃高压灭菌2.0小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提1.0小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入10倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为10%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心30分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
试验例 本发明所得一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品（实施例5）的应用研究：
1.血凝抑制试验
选取50周龄母鸡共80羽，随机分成实验组和对照组，两组母鸡在健康状况、体重等方面经统计学检验，无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。其中实验组每只口服2羽份本发明产品；对照组不加药。5天后两组均攻击NDV强毒，10-9稀释，每羽鸡1.0mL胸肌注射。并分别在加药前3天和攻毒后10天采血，按常规方法测总效价。结果如表1所示。
表1 本发明产品对ND-HI效价的影响（Log2x±SD）
组别 加药前3天 攻毒后10天
实验组 3.17±1.39 11.24±1.38
对照组 3.18±1.24 6.12±1.01
由表1数据可知，实验组和对照组母鸡在加药前3天，其ND-HI效价均较低，一旦受到NDV强毒攻击极易发生新城疫病。但是由于实验组服用了本发明所得产品，在受到NDV强毒攻击后10天，其ND-HI效价由之前的明显提高，且远远高于对照组（P＜0.05）。由此说明本发明提供的复合产品能显著增强机体的体液免疫机能，能够有效预防和治疗新城疫。
2.治疗试验
选取100只患有新城疫的病鸡，随机分为实验组和对照组，两组病鸡在病情、体质方面等方面经统计学检验，无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。其中实验组每只口服2羽份本发明产品；对照组服用市售乳酸环丙沙星可溶性粉（购置于甘肃牧远动物药业有限公司），服用方法：按0.05%比例添加至饲料中。共观察治疗7天。结果如表2所示。
表2 实验组和对照组治疗结果对比
组别 病鸡数 治愈数 治愈率
实验组 50羽 48羽 96.0%
对照组 50羽 40羽 80.0%
由表2数据可知，服用本发明所得产品的实验组治愈率为96.0%，而服用市售乳酸环丙沙星可溶性粉的对照组治愈率为80.0%。由此表明，本发明所得产品对新城疫病毒具有更高的治疗效果。
应当指出的是，具体实施方式只是本发明比较有代表性的例子，显然本发明的技术方案不限于上述实施例，还可以有很多变形。本领域的普通技术人员，以本发明所明确公开的或根据文件的书面描述毫无异议的得到的，均应认为是本专利所要保护的范围。

Claims (7)

1.一种灵芝多糖与卵黄抗体的复合产品的制备方法，其特征是，步骤如下：
（1）灵芝多糖液的制备：配制灵芝固体发酵培养基，装袋，于116-126℃高压灭菌1.2-2.8小时，接种灵芝麦粒菌种，25℃培养至长满菌袋底部，于100℃热水浸提0.5-1.5小时，离心，取上清液；
（2）卵黄抗体的制备：按照常规方法制取抗鸡新城疫病毒高免鸡蛋，消毒，打碎鸡蛋，分离卵黄，加入6-14倍体积纯化水，组织匀浆机中匀浆，加入体积比为8.5%-11.5%的辛酸，于4℃静置过夜，3000r离心15-45分钟，取下层清液，甲醛消毒；
（3）将步骤（1）所得灵芝多糖液与步骤（2）所得精制卵黄抗体按照3:1比例复配，即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，步骤（1）于119-123℃高压灭菌（优选于121℃高压灭菌）。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，步骤（1）高压灭菌1.6-2.4小时（优选高压灭菌2.0小时）。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，步骤（1）于100℃热水浸提0.7-1.3小时（优选于100℃热水浸提1.0小时）。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，步骤（2）加入8-12倍体积纯化水（优选加入10倍体积纯化水）。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，步骤（2）加入体积比为9.5%-10.5%的辛酸（优选加入体积比为10%的辛酸）。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，步骤（2）3000r离心25-35分钟（优选3000r离心30分钟）。
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