CN106279455A - 一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法 - Google Patents

一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，步骤为：（1）原料预处理；（2）配制双水相体系；（3）双水相萃取；（4）提取虫草素；（5）提取虫草多糖。本发明的一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，工艺流程简单，操作方便，成本低，可同时提取蛹虫草中的虫草素和虫草多糖，有效避免单一提取造成的资源浪费、降低蛹虫草的深加工成本。

Description

一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法
技术领域
本发明涉及一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，属于天然产物有效成分的分离纯化领域。
背景技术
虫草是我国的传统中药，尤其以冬虫夏草最为著名，但至今为止冬虫夏草还未能规模化地人工栽培，而市场上不断增加的需求和高昂的价格导致人们对野生冬虫夏草的过度采集，使野生资源日益稀缺。现代科学研究证明，蛹虫草具有与冬虫夏草相类似的作用，有些活性成分含量甚至比冬虫夏草还要高。由于蛹虫草容易培养，因此普遍用其来生产虫草子实体和菌丝体以开发虫草的系列产品，以满足市场和人民健康之需要。
蛹虫草所含的虫草素、虫草多糖具有独特的药理及保健功效：虫草素具有抗病毒、抑菌、明显抑制肿瘤生长，与环磷酰胺有明显的协同作用，并有降血糖的作用；虫草多糖具有提高机体免疫功能，抑制肿瘤作用。
双水相萃取技术是近几十年来研究并发展起来的一项极具发展前景的新型萃取分离技术。由于其条件温和，质量传输快，成本低，易操作，可调节，容易放大，可连续操作等特点，与传统的有机溶剂萃取体系相比较，在生物物质的分离中有独到的优越之处。
发明内容
本发明的目的是提供一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，该方法为蛹虫草的深加工提供了一种新的途径。
具体技术方案如下：
（1）、原料预处理：将蛹虫草子实体于65℃干燥至恒重，粉碎，过100目筛，得蛹虫草粉末；
（2）、配制PEG/(NH4)2SO4双水相体系：PEG/(NH4)2SO4双水相按重量百分比由35％的聚乙二醇6000、25％的(NH4)2SO4、18％的NaCl和余量的去离子水组成；
（3）、将10g蛹虫草粉末加入至400ml的PEG/(NH4)2SO4双水相体系中，采用微波辅助提取，静置分相，得到上相和下相；
（4）、所得双水相中的上层液相，在转速为5000转/分钟的条件下离心2分钟，去其沉淀物得上层清液，依次用乙酸乙酯和石油醚洗涤后，真空干燥，得虫草素；
（5）、所得双水相中的下层液相，加入3倍量乙醇使其沉淀，沉淀再加少量水溶解，加入2倍量乙醇使其沉淀，得到虫草多糖。
上述方法中，步骤（3）中，微波辅助提取的提取温度为40℃，提取时间为20-40分钟，微波功率为200W。
上述方法中，步骤（3）中，静置分相为静置10-20分钟，分相温度为室温。
上述方法中，步骤（5）中，所加乙醇溶液的体积分数为50%。
本发明利用双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，为蛹虫草产品深加工提供一条新的途径，适合国家“十二五”规划产业政策，产品前景非常广阔。本发明具有以下优点：
（1）本发明方法独特，工艺流程简单，操作方便，成本低。
（2） 本发明的双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖，方法简单、易操作、分相快、萃取率高、不需要挥发性有机溶剂、环境污染小、萃取系统的萃取液可循环利用、节省资源、具有较高的选择性和专一性。
（3）本发明可同时提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖，有效避免单一提取造成的资源浪费，降低蛹虫草的深加工成本。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行进一步的阐述，应该明白的是，下述说明仅是为了解释本发明，并不对其进行限定。如无特别说明，下述实施例中出现的百分数均为重量百分数。
实施例 1
1、将蛹虫草子实体于65℃干燥至恒重，粉碎，过100目筛，得蛹虫草粉末。
2、PEG/(NH4)2SO4双水相按重量百分比由35％的聚乙二醇6000、25％的(NH4)2SO4、18％的NaCl和余量的去离子水组成。
3、将10g蛹虫草粉末加入至400ml的PEG/(NH4)2SO4双水相体系中，采用微波辅助提取，微波辅助提取的提取温度为40℃，提取时间为20分钟，微波功率为200W。室温下静置分相10分钟，得到上相和下相。
4、所得双水相中的上层液相，在转速为5000转/分钟的条件下离心2分钟，去其沉淀物得上层清液，依次用乙酸乙酯和石油醚洗涤后，真空干燥，得虫草素，虫草素提取率为50.3％。
5、所得双水相中的下层液相，加入3倍量50%乙醇使其沉淀，沉淀再加少量水溶解，加入2倍量50%乙醇使其沉淀，得到虫草多糖，其提取率为33.4%。
实施例 2
1、将蛹虫草子实体于65℃干燥至恒重，粉碎，过100目筛，得蛹虫草粉末。
2、PEG/(NH4)2SO4双水相按重量百分比由35％的聚乙二醇6000、25％的(NH4)2SO4、18％的NaCl和余量的去离子水组成。
3、将10g蛹虫草粉末加入至400ml的PEG/(NH4)2SO4双水相体系中，采用微波辅助提取，微波辅助提取的提取温度为40℃，提取时间为40分钟，微波功率为200W。室温下静置分相20分钟，得到上相和下相。
4、所得双水相中的上层液相，在转速为5000转/分钟的条件下离心2分钟，去其沉淀物得上层清液，依次用乙酸乙酯和石油醚洗涤后，真空干燥，得虫草素，虫草素提取率为52.4％。
5、所得双水相中的下层液相，加入3倍量50%乙醇使其沉淀，沉淀再加少量水溶解，加入2倍量50%乙醇使其沉淀，得到虫草多糖，其提取率为34.1%。
实施例 3
采用实施例1的方法利用双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖，不同的是：步骤3中，微波辅助提取时间为30分钟，室温下静置分相20分钟。最后，虫草素提取率为51.5％，虫草多糖的提取率为33.8%。

Claims (4)

1.一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，其特征是包括以下步骤：
（1）、原料预处理：将蛹虫草子实体于65℃干燥至恒重，粉碎，过100目筛，得蛹虫草粉末；
（2）、配制PEG/(NH4)2SO4双水相体系：PEG/(NH4)2SO4双水相按重量百分比由35％的聚乙二醇6000、25％的(NH4)2SO4、18％的NaCl和余量的去离子水组成；
（3）、将10g蛹虫草粉末加入至400ml的PEG/(NH4)2SO4双水相体系中，采用微波辅助提取，静置分相，得到上相和下相；
（4）、所得双水相中的上层液相，在转速为5000转/分钟的条件下离心2分钟，去其沉淀物得上层清液，依次用乙酸乙酯和石油醚洗涤后，真空干燥，得虫草素；
（5）、所得双水相中的下层液相，加入3倍量乙醇使其沉淀，沉淀再加少量水溶解，加入2倍量乙醇使其沉淀，得到虫草多糖。
2.根据权利要求1所述的一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，微波辅助提取的提取温度为40℃，提取时间为20-40分钟，微波功率为200W。
3.根据权利要求1所述的一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，静置分相为静置10-20分钟，分相温度为室温。
4.根据权利要求1所述的一种双水相综合提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法，其特征在于：所述步骤（5）中，所加乙醇溶液的体积分数为50%。
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