CN106265808A - 鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统及其制备方法，包括：鹅不食草油25～59份、丙二醇单月桂酸甘油酯14～56份、聚氧乙烯蓖麻油42～84份、无水乙醇42～84份、泊洛沙姆407 73～99份、泊洛沙姆188 33～99份、蒸馏水614～680份。本发明制备的鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，室温条件下药物呈纳米级微乳溶液，在鼻腔给药后液体遇鼻腔温度固化为凝胶，可黏附于鼻腔，明显改善了鹅不食草挥发油在水中的溶解度，提高了鹅不食草挥发油的稳定性及鼻用生物利用度。

Description

鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统及其制备方法

技术领域

本发明具体涉及一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统及其制备方法。

背景技术

鹅不食草系菊科(Compositae)石胡荽属植物鹅不食草[Centipeda minima(L.)A.Br.et Aschers.]的带花全草，为常用中药，收载于《中华人民共和国药典》(2015年版)一部。别名石胡荽、鸡肠草、地花椒，味辛性温，具有通鼻窍、止咳喘的功效，中医临床主要用于风寒头痛，咳嗽痰多，鼻塞不通，鼻渊流涕等。鹅不食草在我国主要分布于福建、广东、湖北、浙江、江苏等地，江西、广西等多地亦产。鹅不食草油(VOCM)是从鹅不食草药材中提取的挥发油，含有反式乙酸菊烯酯、麝香草酚、棕榈酸、马鞭草烯醇、石竹烯等化学成分，不同产地鹅不食草所含挥发油中成分存在一定的差异性，其中含量较高的成分多为乙酸菊烯酯、麝香草酚等，经硅胶柱色谱分离所得上述2种成分的分离物具有显著的抗炎镇痛活性。

申请人前期研究表明，从鹅不食草提取的鹅不食草油是治疗过敏性鼻炎、咳嗽变异性哮喘的药效部位，具有良好的开发应用前景；鹅不食草油是脂溶性、淡黄色油状液体，易挥发、味苦，其黏膜吸收及生物利用度较低。因此，依据鹅不食草油的药效作用、性质及吸收特点，研发可提高其生物利用度的临床应用制剂具有现实意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一，在于提供一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统。

本发明是这样实现的：一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，包括以下重量份的各组分：

进一步地，包括以下重量份的各组分：

本发明要解决的技术问题之二，在于提供一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统的制备方法。

本发明是这样实现的：一种所述的鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统的制备方法，包括以下步骤：

步骤1：取鹅不食草油、聚氧乙烯蓖麻油、无水乙醇、置于烧杯中，涡旋分散，再于25℃下恒温磁力搅拌均匀，得到微乳浓缩液；

步骤2：加蒸馏水总量20％的蒸馏水于所述微乳浓缩液中充分混匀，制成微乳中间体，备用；

步骤3：往剩余的蒸馏水中加入泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，4℃放置至溶胀完全，得温敏凝胶基质；

步骤4：将所述微乳中间体加入所述温敏凝胶基质中，25℃恒温充分搅拌均匀，即得鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统。

本发明的优点在于：以鹅不食草油为原料，制备的鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，室温条件下药物呈纳米级微乳溶液，在鼻腔给药后液体遇鼻腔温度固化为凝胶，可黏附于鼻腔，且药物以纳米级颗粒被吸收，明显改善了鹅不食草挥发油在水中的溶解度，提高了鹅不食草挥发油的稳定性及鼻用生物利用度。

附图说明

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的说明。

图1是本发明中鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统中的乙酸菊烯酯的累积释放百分率曲线图。

图2是本发明中鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统中的麝香草酚的累积释放百分率曲线图。

图3是本发明中大鼠鼻黏膜组织切片图。

图4是本发明中大鼠心脏组织切片图。

图5是本发明中大鼠肝脏组织切片图。

图6是本发明中大鼠脾脏组织切片图。

图7是本发明中大鼠肺组织切片图。

图8是本发明中大鼠肾脏组织切片图。

其中，图3至图8中的A、B、C分别表示：

A空白对照组；B空白凝胶组；C鹅不食草油微乳温敏凝胶释药系统组

具体实施方式

实施例1

一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统的制备方法，包括以下步骤：

步骤1：取59重量份的鹅不食草油、20重量份Lauglycol FCC(丙二醇单月桂酸甘油酯)、61重量份CrEL(聚氧乙烯蓖麻油)、61重量份无水乙醇，置于烧杯中，涡旋分散，再置于25℃恒温磁力搅拌均匀，得微乳浓缩液；

步骤2：取133重量份蒸馏水与所述微乳浓缩液充分混匀，制成微乳中间体。

步骤3：另取86重量份泊洛沙姆407、66重量份泊洛沙姆188，加于514重量份蒸馏水中，4℃放置使之溶胀完全，得温敏凝胶基质。

步骤4：将步骤2所得微乳中间体加入步骤3所得温敏凝胶基质中，25℃恒温充分磁力搅拌均匀，即得鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统。

实施例2

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、56重量份Lauglycol FCC、42重量份CrEL、42重量份无水乙醇。

实施例3

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、14重量份Lauglycol FCC、84重量份CrEL、42重量份无水乙醇。

实施例4

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、14重量份Lauglycol FCC、42重量份CrEL、84重量份无水乙醇。

实施例5

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、35重量份Lauglycol FCC、63重量份CrEL、42重量份无水乙醇。

实施例6

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、35重量份Lauglycol FCC、42重量份CrEL、63重量份无水乙醇。

实施例7

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、14重量份Lauglycol FCC、63重量份CrEL、63重量份无水乙醇。

实施例8

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：59重量份的鹅不食草油、28重量份Lauglycol FCC、56重量份CrEL、56重量份无水乙醇。

实施例9

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：42重量份的鹅不食草油、22重量份Lauglycol FCC、68重量份CrEL、68重量份无水乙醇。

实施例10

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：25重量份的鹅不食草油、25重量份Lauglycol FCC、75重量份CrEL、75重量份无水乙醇。

实施例11

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤1：置于室温恒温磁力搅拌均匀，得微乳浓缩液。

实施例12

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤3：取99重量份泊洛沙姆407、66重量份泊洛沙姆188，加于501重量份蒸馏水中。(蒸馏水总计634重量份。)

实施例13

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤3：取73重量份泊洛沙姆407、66重量份泊洛沙姆188，加于528重量份蒸馏水中。(蒸馏水总计661重量份。)

实施例14

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤3：取86重量份泊洛沙姆407、33重量份泊洛沙姆188，加于547重量份蒸馏水中。(蒸馏水总计680重量份。)

实施例15

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤3：取86重量份泊洛沙姆407、99重量份泊洛沙姆188，加于481重量份蒸馏水中。(蒸馏水总计614重量份。)

实施例16

本部分与实施例1不同之处在于：

步骤4：室温恒温充分磁力搅拌均匀。

其中，将实施例1制得的产品鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，生产三批，并测验其各项性能，具体实验结果见表1。

表1

本发明将鹅不食草挥发油与辅料充分混匀制得纳米级鹅不食草油微乳，再与温敏凝胶基质混合，得到鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶，将鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶进行体外释药特性研究，及与原料药进行药代动力学比较研究，实验结果表明鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统体外释药良好，且有助于提高鹅不食草挥发油的生物利用度。体外释放度是将制剂在体外环境下模拟体内情况进行的实验，可用于评价制剂的体外释药特性。为考察鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统主要组分群的体外释药行为，本发明建立了鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统体外释放度顶空GC-MS分析方法，本发明模拟体内环境，采用Franz扩散池法，以半透膜模拟鼻黏膜，考察鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统在人工鼻液中的体外释药行为，具体结果见图1、图2、表2、表3、表4。

从表2、图1和图2可见，在60h时，鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统中的乙酸菊烯酯和麝香草酚的累积释放百分率达80％。表4、表5表明，鹅不食草油微乳温敏凝胶释药系统中乙酸菊烯酯的释药行为符合Weibull方程，相关系数为0.9835；麝香草酚的释药行为符合Weibull方程，相关系数为0.9877，提示鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统的释药行为遵循Weibull动力学。

表2三批鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶累积释放百分率

表3鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统中的乙酸菊烯酯体外释放的方程拟合结果

表4鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统中的麝香草酚体外释放的方程拟合结果

生物利用度是指药物被机体吸收进入体循环的相对量和速率，是衡量不同制剂剂型疗效的一个重要指标，生物利用度又分为绝对生物利用度和相对生物利用度。微乳温敏凝胶是一类新型纳米制剂，它可通过增加药物在给药部位的作用时间从而提高药效成分的生物利用度。本发明建立了测定大鼠血浆样品中鹅不食草油主要成分乙酸菊烯酯与麝香草酚的顶空GC-MS分析方法，分析比较鼻腔给药及口服给药的药物动力学特性及相对生物利用度，通过鼻腔给药鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，和口服给药1％鹅不食草油-0.5％吐温80溶液。从表5和表6可以看到，鼻腔给药鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，乙酸菊烯酯与麝香草酚的达峰时间t_max均为5min，达峰浓度C_max分别为(0.2982±0.0489)μg·mL^-1和(0.7362±0.0574)μg·mL^-1。口服鹅不食草油-吐温80溶液，乙酸菊烯酯与麝香草酚达峰时间t_max均为90min，达峰浓度C_max分别为(0.0790±0.0524)μg·mL^-1和(0.0936±0.0079)μg·mL^-1，表明鼻腔给药比口服给药起效快，鼻腔给药血浆中的半衰期及平均驻留时间较短，鼻腔给药鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，乙酸菊烯酯与麝香草酚的C_max分别是口服给药的3.775倍和7.865倍；药鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统中乙酸菊烯酯与麝香草酚的相对生物利用度是口服给药的1.279倍和1.323倍，表明鼻腔给药纳米制剂鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统后生物利用度获得提高。

表5乙酸菊烯酯主要药动学参数比较(n＝6，)

表6麝香草酚主要药动学参数比较(n＝6，)

由于鼻用微乳温敏凝胶在制剂过程要添加特定功能的辅料才能以鼻腔制剂的形式使用，故需要考察所采用的辅料对鼻黏膜可能产生的刺激性等，避免安全隐患。本发明通过观察鼻腔给药后大鼠的局部刺激性反应及外观特征、行为活动等，并选择大鼠鼻黏膜及主要脏器组织的形态学为检测指标，考察大鼠鼻腔给药后鼻黏膜及主要脏器的形态学结构变化，研究鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统的鼻黏膜刺激性及对主要脏器的影响，评价释药系统配方的安全性，为鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶的应用开发提供初步的安全性评价。

实验：取实验大鼠18只，随机分为3组，每组6只。A组为空白对照组，鼻腔给予生理盐水；B组为空白微乳温敏凝胶组，滴入空白温敏凝胶基质，观察温敏凝胶基质是否对黏膜产生毒性；C组为鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统组，鼻腔给予鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统。采用SPSS statistics 20.0统计学软件进行分析处理，结果用表示，多组间比较用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

实验结果表明，空白对照组、空白微乳温敏凝胶组、鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统在给药期间大鼠无一死亡，外观体征正常，觅食行为正常，呼吸状况未见异常，未见明显中毒现象，鼻腔给药后5min内各组均有前爪挠鼻现象，挠鼻次数组间比较无差异(P>0.05，见表7)；未见打喷嚏、流涕、哮喘、咳嗽、呕吐等局部刺激反应；眼、鼻、耳等未见异常分泌物；粪便状况无异常；肉眼观察大鼠鼻腔未出现充血、红肿现象。大鼠处死后肉眼观察鼻黏膜及各脏器，各组鼻黏膜及脏器未有明显外观性状差异。

给药期间，空白微乳温敏凝胶组、鹅不食草油微乳温敏凝胶释药系统组与空白对照组的大鼠体重增加量差异均无统计学意义(P>0.05)，提示其应用具有一定安全性，结果见表8。

表7挠鼻次数比较表(n＝6)

表8体重情况变化表(n＝6)

从图3可以看到，空白对照组大鼠鼻中隔软骨上有完整纤毛和正常的黏膜细胞存在，未见明显的血管充血现象；空白凝胶组及鹅不食草油微乳温敏凝胶释药系统组均无明显的黏膜细胞坏死、脱落及出血现象，表明给药后鼻黏膜均无细胞坏死、脱落及出血。

从图4可以看到，各组大鼠心脏组织切片心肌纤维排列整齐，未见纤维素渗出及炎细胞浸润，无明显细胞病变、坏死现象，表明给药后对心脏组织未见明显影响。

从图5中可以看到，各组大鼠肝脏组织切片肝细胞结构完整，排列整齐，胞质丰富，核大而圆，核仁清晰，未见明显水肿、坏死现象，表明给药后对肝脏组织未见明显影响。

从图6中可以看到，各组大鼠脾组织切片脾髓结构完整，未见细胞坏死现象，表明给药后脾组织均无明显细胞坏死现象。

从图7可以看到，各组大鼠肺组织切片被膜完整，未见炎细胞浸润及明显细胞坏死现象，表明给药后肺组织均无明显细胞坏死现象。

从图8可以看到，各组大鼠肾脏组织切片有正常的肾小管边界，完整的肾小球，未见纤维素渗出及炎细胞浸润，未见明显水肿、病变及坏死现象，表明给药后肾脏组织均无明显水肿病变及坏死现象。

本发明以生理盐水为空白对照，对鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统及空白凝胶组正常剂量下连续给药7天的安全性进行了考察，结果显示，大鼠外观体征正常，呼吸状况、体重增加量、挠鼻次数无差异，未见明显局部刺激反应。该制剂鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统在正常剂量下的鼻黏膜刺激性与空白对照组相近，刺激性小；大鼠鼻腔给药鹅不食草油微乳温敏凝胶释药系统后，主要脏器的组织切片图结构显示与正常组及空白凝胶组一样，均未见明显的组织细胞结构病变、水肿、坏死等变化，表明应用鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统具备安全性。

综上所述，本发明的鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，室温条件下药物呈纳米级微乳溶液，在鼻腔给药后液体遇鼻腔温度固化为凝胶可黏附于鼻腔，药物以纳米级颗粒被吸收，明显改善了鹅不食草挥发油在水中的溶解度，提高了鹅不食草挥发油的稳定性及鼻用生物利用度。

Claims (3)

1.一种鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，其特征在于：包括以下重量份的各组分：

2.如权利要求1所述的鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统，其特征在于：包括以下重量份的各组分：

3.一种如权利要求1所述的鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：取鹅不食草油、聚氧乙烯蓖麻油、无水乙醇、置于烧杯中，涡旋分散，再于25℃下恒温磁力搅拌均匀，得到微乳浓缩液；

步骤2：加蒸馏水总量20％的蒸馏水于所述微乳浓缩液中充分混匀，制成微乳中间体，备用；

步骤3：往剩余的蒸馏水中加入泊洛沙姆407和泊洛沙姆188，4℃放置至溶胀完全，得温敏凝胶基质；

步骤4：将所述微乳中间体加入所述温敏凝胶基质中，25℃恒温充分搅拌均匀，即得鹅不食草油鼻用微乳温敏凝胶释药系统。