CN105030979B - 一种抗骨瘤复方软膏制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药外用制剂技术领域，具体涉及一种抗骨瘤复方软膏制剂及其制备方法，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏8‑12份、大黄3‑7份、黄柏3‑7份、白芷8‑12份、黑蚂蚁3‑7份、土鳖虫3‑7份、芒硝8‑12份、薄荷脑2‑4份、冰片0.4‑1.4份、对羟基苯甲酸乙酯5‑15份、羊毛脂20‑30份和凡士林40‑60份；本发明提供的抗骨瘤复方软膏制剂具有良好的止痛、抑制骨肿瘤生长的效果，且对于骨瘤切除后的伤口具有显著的抗炎和抗菌作用。

Description

一种抗骨瘤复方软膏制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于中药外用制剂技术领域，具体涉及一种抗骨瘤复方软膏制剂及其制备方法。

背景技术

牡丹籽饼粕是牡丹籽榨油后剩余的产物，研究发现，牡丹籽饼粕乙醇提取物在乙酸乙酯萃取部位含有大量的芪类化合物，正丁醇萃取部位含有丰富的单萜苷类化合物，据文献报道，芪类化合物具有抗菌和消炎以及抗肿瘤等生物活性，尤其是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）表现明显，而单萜苷类化合物是许多常用中药的有效成分，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等的生物活性，因此，牡丹籽饼粕乙醇提取物的开发和应用具有广阔的市场前景。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种抗骨瘤复方软膏制剂及其制备方法，该软膏制剂具有良好的止痛、抑制骨肿瘤生长的效果，且对于骨瘤切除后的伤口具有显著的抗炎和抗菌作用。

本发明所采用的技术方案是：一种抗骨瘤复方软膏制剂，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏8-12份、大黄3-7份、黄柏3-7份、白芷8-12份、黑蚂蚁3-7份、土鳖虫3-7份、芒硝8-12份、薄荷脑2-4份、冰片0.4-1.4份、对羟基苯甲酸乙酯5-15份、羊毛脂20-30份和凡士林40-60份；

所述的牡丹籽饼粕浸膏由牡丹籽饼粕经乙醇溶液提取、浓缩制得。

较优的，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏10份、大黄5份、黄柏5份、白芷10份、黑蚂蚁5份、土鳖虫5份、芒硝10份、薄荷脑3份、冰片1份、对羟基苯甲酸乙酯10份、羊毛脂25份和凡士林50份。

所述的抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取牡丹籽饼粕，室温下阴干后粉碎，得到牡丹籽饼粕粉末，备用；向牡丹籽饼粕粉末中加入体积百分数为85%-95%的乙醇溶液，采用超声辅助浸渍法提取，得到提取液，然后将提取液在室温下静置40-48h，再经减压浓缩，得到牡丹籽饼粕浸膏，备用；

步骤二、按照上述重量份数分别取牡丹籽饼粕浸膏、大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁、土鳖虫、芒硝、薄荷脑、冰片、对羟基苯甲酸乙酯、羊毛脂和凡士林，备用；

步骤三、将步骤二得到的羊毛脂在水浴中熔化，然后加入凡士林，搅拌并冷却至室温，得到基质，备用；

步骤四、将步骤二得到的大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁和土鳖虫混合，并用粉碎机粉碎至80-100目，然后将芒硝加入到混合粉末中，烘干，粉碎至80-100目，得到混合细粉，备用；

步骤五、向步骤二得到的牡丹籽饼粕浸膏中加入对羟基苯甲酸乙酯，搅拌均匀后分别加入步骤三得到的基质、步骤四得到的混合细粉、步骤二得到的薄荷脑和冰片，搅拌均匀，即得到抗骨瘤复方软膏制剂。

进一步优化，步骤一所述的向牡丹籽饼粕粉末中加入乙醇溶液进行超声辅助浸渍法提取的操作至少重复两次，合并提取液进行减压浓缩。

进一步优化，步骤三所述的水浴温度控制为40-50℃。

进一步优化，步骤五得到的抗骨瘤复方软膏制剂的pH控制为6.0-7.0。

与现有技术相比，本发明至少具有下述优点及有益效果：

1、本发明提供的复方外敷软膏制剂具有良好的止痛、抑制骨肿瘤生长的效果，对于骨瘤切除后的伤口具有显著的抗炎和抗菌作用，本发明为“带瘤生存”理念研究提供了科学依据，也为牡丹籽饼柏的药用价值，开阔了新的思路。

2、本发明依据牡丹籽饼柏中含有丰富的单萜类及芪类化合物活性成分为基础进行制备，并通过对牡丹籽饼中有效成分乙醇浸渍提取，使牡丹籽饼柏中单萜类及芪类化合物有效成分充分富集被提取出来，具有较高的应用价值。

3、本发明的复方在中医药理论的指导下复配而成，其制备工艺简单，易于质量监控，使用方便，成本低，效果好，无毒副作用。通过在洛阳正骨医院初步临床验证，证实了该制剂具有推广应用于骨癌患者，并以“带瘤生存”取代或挑战肿瘤手术治疗以及化疗的治疗潜力，大大减少患者的痛苦。

附图说明

图1为没食子酸标准溶液的吸光度标准曲线；

图2为苯甲酸标准溶液浓度系列吸光度标准曲线；

图3为骨肿瘤病例1的影像图（1）；

图4为骨肿瘤病例1的影像图（2）；

图5为骨肿瘤病例2的影像图（1）；

图6为骨肿瘤病例2的影像图（2）；

图7为骨肿瘤病例2的影像图（3）。

具体实施方式

一种抗骨瘤复方软膏制剂，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏8-12份、大黄3-7份、黄柏3-7份、白芷8-12份、黑蚂蚁3-7份、土鳖虫3-7份、芒硝8-12份、薄荷脑2-4份、冰片0.4-1.4份、对羟基苯甲酸乙酯5-15份、羊毛脂20-30份和凡士林40-60份；

所述的牡丹籽饼粕浸膏由牡丹籽饼粕经乙醇溶液提取、浓缩制得。

较优的，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏10份、大黄5份、黄柏5份、白芷10份、黑蚂蚁5份、土鳖虫5份、芒硝10份、薄荷脑3份、冰片1份、对羟基苯甲酸乙酯10份、羊毛脂25份和凡士林50份。

所述的抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取牡丹籽饼粕，室温下阴干后粉碎，得到牡丹籽饼粕粉末，备用；向牡丹籽饼粕粉末中加入体积百分数为85%-95%的乙醇溶液，采用超声辅助浸渍法提取，得到提取液，向牡丹籽饼粕粉末中加入乙醇溶液进行超声辅助浸渍法提取的操作至少重复两次，合并提取液，然后将提取液在室温下静置40-48h，再经减压浓缩，得到牡丹籽饼粕浸膏，备用；

步骤二、按照上述重量份数分别取牡丹籽饼粕浸膏、大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁、土鳖虫、芒硝、薄荷脑、冰片、对羟基苯甲酸乙酯、羊毛脂和凡士林，备用；

步骤三、将步骤二得到的羊毛脂在水浴中熔化，浴温度控制为40-50℃，然后加入凡士林，搅拌并冷却至室温，得到基质，备用；

步骤四、将步骤二得到的大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁和土鳖虫混合，并用粉碎机粉碎至80-100目，然后将芒硝加入到混合粉末中，烘干，粉碎至80-100目，得到混合细粉，备用；

步骤五、向步骤二得到的牡丹籽饼粕浸膏中加入对羟基苯甲酸乙酯，搅拌均匀后分别加入步骤三得到的基质、步骤四得到的混合细粉、步骤二得到的薄荷脑和冰片，搅拌均匀，即得到抗骨瘤复方软膏制剂。

进一步优化，步骤五得到的抗骨瘤复方软膏制剂的pH控制为6.0-7.0。

本发明所制得的抗骨瘤复方软膏制剂的有效期为12-15个月。

为使本发明的内容更明显易懂，以下结合具体实施例，对本发明进行详细描述。

实施例1：

一种抗骨瘤复方软膏制剂，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏10份、大黄5份、黄柏5份、白芷10份、黑蚂蚁5份、土鳖虫5份、芒硝10份、薄荷脑3份、冰片1份、对羟基苯甲酸乙酯10份、羊毛脂25份和凡士林50份。

所述的抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取牡丹籽饼粕，室温下阴干后粉碎，得到牡丹籽饼粕粉末，备用；向牡丹籽饼粕粉末中加入体积百分数为85%的乙醇溶液，采用超声辅助浸渍法提取，得到提取液，向牡丹籽饼粕粉末中加入乙醇溶液进行超声辅助浸渍法提取的操作至少重复两次，合并提取液，然后将提取液在室温下静置40h，再经减压浓缩，得到牡丹籽饼粕浸膏，备用；

步骤二、按照上述重量份数分别取牡丹籽饼粕浸膏、大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁、土鳖虫、芒硝、薄荷脑、冰片、对羟基苯甲酸乙酯、羊毛脂和凡士林，备用；

步骤三、将步骤二得到的羊毛脂在水浴中熔化，浴温度控制为40℃，然后加入凡士林，搅拌并冷却至室温，得到基质，备用；

步骤四、将步骤二得到的大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁和土鳖虫混合，并用粉碎机粉碎至80目，然后将芒硝加入到混合粉末中，烘干，粉碎至100目，得到混合细粉，备用；

步骤五、向步骤二得到的牡丹籽饼粕浸膏中加入对羟基苯甲酸乙酯，搅拌均匀后分别加入步骤三得到的基质、步骤四得到的混合细粉、步骤二得到的薄荷脑和冰片，搅拌均匀，即得到抗骨瘤复方软膏制剂。

进一步优化，步骤五得到的抗骨瘤复方软膏制剂的pH控制为6.0。

实施例2：

一种抗骨瘤复方软膏制剂，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏8份、大黄3份、黄柏3份、白芷8份、黑蚂蚁3份、土鳖虫3份、芒硝8份、薄荷脑2份、冰片0.4份、对羟基苯甲酸乙酯5份、羊毛脂20份和凡士林40份；

所述的抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取牡丹籽饼粕，室温下阴干后粉碎，得到牡丹籽饼粕粉末，备用；向牡丹籽饼粕粉末中加入体积百分数为95%的乙醇溶液，采用超声辅助浸渍法提取，得到提取液，向牡丹籽饼粕粉末中加入乙醇溶液进行超声辅助浸渍法提取的操作至少重复两次，合并提取液，然后将提取液在室温下静置48h，再经减压浓缩，得到牡丹籽饼粕浸膏，备用；

步骤二、按照上述重量份数分别取牡丹籽饼粕浸膏、大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁、土鳖虫、芒硝、薄荷脑、冰片、对羟基苯甲酸乙酯、羊毛脂和凡士林，备用；

步骤三、将步骤二得到的羊毛脂在水浴中熔化，浴温度控制为50℃，然后加入凡士林，搅拌并冷却至室温，得到基质，备用；

步骤四、将步骤二得到的大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁和土鳖虫混合，并用粉碎机粉碎至80目，然后将芒硝加入到混合粉末中，烘干，粉碎至80目，得到混合细粉，备用；

步骤五、向步骤二得到的牡丹籽饼粕浸膏中加入对羟基苯甲酸乙酯，搅拌均匀后分别加入步骤三得到的基质、步骤四得到的混合细粉、步骤二得到的薄荷脑和冰片，搅拌均匀，即得到抗骨瘤复方软膏制剂。

进一步优化，步骤五得到的抗骨瘤复方软膏制剂的pH控制为7.0。

实施例3：

一种抗骨瘤复方软膏制剂，所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏12份、大黄7份、黄柏7份、白芷12份、黑蚂蚁7份、土鳖虫7份、芒硝12份、薄荷脑4份、冰片1.4份、对羟基苯甲酸乙酯15份、羊毛脂30份和凡士林60份；

所述的抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、取牡丹籽饼粕，室温下阴干后粉碎，得到牡丹籽饼粕粉末，备用；向牡丹籽饼粕粉末中加入体积百分数为90%的乙醇溶液，采用超声辅助浸渍法提取，得到提取液，向牡丹籽饼粕粉末中加入乙醇溶液进行超声辅助浸渍法提取的操作至少重复两次，合并提取液，然后将提取液在室温下静置44h，再经减压浓缩，得到牡丹籽饼粕浸膏，备用；

步骤二、按照上述重量份数分别取牡丹籽饼粕浸膏、大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁、土鳖虫、芒硝、薄荷脑、冰片、对羟基苯甲酸乙酯、羊毛脂和凡士林，备用；

步骤三、将步骤二得到的羊毛脂在水浴中熔化，浴温度控制为45℃，然后加入凡士林，搅拌并冷却至室温，得到基质，备用；

步骤四、将步骤二得到的大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁和土鳖虫混合，并用粉碎机粉碎至100目，然后将芒硝加入到混合粉末中，烘干，粉碎至100目，得到混合细粉，备用；

步骤五、向步骤二得到的牡丹籽饼粕浸膏中加入对羟基苯甲酸乙酯，搅拌均匀后分别加入步骤三得到的基质、步骤四得到的混合细粉、步骤二得到的薄荷脑和冰片，搅拌均匀，即得到抗骨瘤复方软膏制剂。

进一步优化，步骤五得到的抗骨瘤复方软膏制剂的pH控制为6.0。

试验研究数据

一、牡丹籽饼粕浸膏中单萜及芪类化合物的含量测定

将实施例1的步骤一得到的牡丹籽饼粕浸膏加入7-10倍水，分别用乙酸乙酯和正丁醇溶剂进行萃取，得到牡丹籽乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏，备用；通过分别对乙酸乙酯浸膏中芪类成分及正丁醇浸膏中单萜类成分的含量测定，反映牡丹籽饼粕浸膏中芪类和单萜类成分的含量。

1、乙酸乙酯浸膏中芪类成分含量计算：

通过Folin-Ciocalteu比色法测定乙酸乙酯部位芪类成分含量研究结果表明：没食子酸的吸光度与其质量浓度在0.5~3.5μg/ml范围内呈非常好的线性关系，如图1所示。

通过计算，乙酸乙酯浸膏中芪类成分含量为67.89%。

2、正丁醇层浸膏中单萜苷含量的计算：

选用苯甲酸作为标准对照品，并发现以85%乙醇配制的标准品溶液在227nm处线性关系最好，如图2所示。得到标准曲线为y=0.10756x+0.00047，R2=0.9998，正丁醇浸膏中单萜苷含量的计算公式如下：

上述公式中各个字母代表的量：

通过计算单贴类成分含量为85.56%。

二、实施例1步骤五得到的复方软膏制剂的质量评价

1、物理性质的检测：（1）外观：颜色为棕褐色，色泽均匀，质地细腻无粗糙感，适中的稀稠度，有良好的稳定性。（2）酸碱度PH：取软膏样品适量用乙醇充分溶解后，用酸度计测定，pH=5.7-7.0

2、刺激性研究

将适量的上述软膏涂敷在受试者的手臂或大腿内侧等柔软的皮肤表面，刚涂抹上有冰凉的感觉，此后逐步消失，大约2-3h后洗掉，受试者涂敷部位的皮肤没有出现红肿、过敏等不良反应。

3、稳定性研究

取3-4组本软膏适量，分别放入已经消毒了的加盖锥形瓶中贴上标签，将这3-4组软膏分别放入温度为40-50℃的烘箱中，温度为4-6℃的冰箱中以及温度为20-25℃左右的室温中，分别观察15d、25d、35d后软膏的状态，快速检测pH=6.0-6.8，证明没有氧化和水解等反应的发生，每次检查其结果均符合规定，说明该药物稳定性较好。

4、防腐性研究

将本软膏置于消毒的玻璃烧杯中用滤纸盖上并在滤纸上弄几个小孔，观察10d、20d、30d后，再测芪类和单萜苷吸光度与提取浸膏对比，对应吸光度数值无明显改变，证明均没有变质现象的发生。

三、临床应用研究效果：

本药物的临床应用在河南省洛阳正骨医院进行。此次临床应用分为手术前和手术后的治疗。

1、术前诊断治疗应用方法：手术前的病人患处会肿胀，在医院找几例病人，由于肿瘤不规则所以先对其肿胀的肿瘤处用铅笔画一条横径，再画一条竖径，用测量尺量没有用本发明复方软膏时的横径和竖径并记录其数值。然后先用酒精对病人患处消毒，再将复方软膏均匀涂抹在患处，并包裹上纱布。每隔六小时将纱布拆下，再用测量尺量上述横径和竖径记录数值。重复上述步骤继续记录横径和竖径的尺寸，根据尺寸的变化确定药物起效的时间以及本发明复方软膏是否有抗肿瘤的效果。

经统计，本发明具有良好的抗肿瘤效果，在用药期间，肿瘤的尺寸没有增长趋势，有效抑制了肿瘤生长，为“带瘤生存”理念研究提供了科学依据。

2、术后止痛消炎应用观察方法：手术后的病人患处会出现疼痛现象，先用酒精对手术处消毒，然后将软膏均与的涂抹在患处，并包裹上纱布。观察并记录此复方软膏是否有副作用，起效时间和维持时间，以及止痛效果。

病例1：

相关病人信息：姓名：孙某，年龄：14，性别：男，诊断：右胫骨骨样骨瘤并骨髓炎，相关影像如图3、4所示。

给病人涂敷上本发明软膏，先有凉凉的感觉，过段时间后清凉感消失，随着用药时间的延长，疼痛感逐渐减弱。通过临床观察和记录结果，表明本发明止痛消炎效果非常明显，如表1所示。

表1：抗肿瘤试验品药物疗效观察表

病例2：

相关病人信息：杨某，年龄：78，性别：男，诊断：淋巴癌，化疗后双下肢多发转移，诊断为右胫骨骨样骨瘤并骨髓炎。相关影像图如图5、6和7所示。

给病人涂敷上本发明软膏，通过临床观察和记录结果，表明本发明止痛效果非常明显，如表2所示。

表2：抗肿瘤试验品药物疗效观察表

由表1和表2可知，本发明的复方软膏具有良好的止痛效果，对于骨瘤切除后的伤口具有显著的抗炎和抗菌作用。

Claims (4)

1.一种抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，其特征在于：所述的复方软膏制剂按照重量份数由以下原料制成：牡丹籽饼粕浸膏8-12份、大黄3-7份、黄柏3-7份、白芷8-12份、黑蚂蚁3-7份、土鳖虫3-7份、芒硝8-12份、薄荷脑2-4份、冰片0.4-1.4份、对羟基苯甲酸乙酯5-15份、羊毛脂20-30份和凡士林40-60份，制备方法包括以下步骤：

步骤一、取牡丹籽饼粕，室温下阴干后粉碎，得到牡丹籽饼粕粉末，备用；向牡丹籽饼粕粉末中加入体积百分数为85%-95%的乙醇溶液，采用超声辅助浸渍法提取，得到提取液，然后将提取液在室温下静置40-48h，再经减压浓缩，得到牡丹籽饼粕浸膏，备用；

步骤二、按照上述重量份数分别取牡丹籽饼粕浸膏、大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁、土鳖虫、芒硝、薄荷脑、冰片、对羟基苯甲酸乙酯、羊毛脂和凡士林，备用；

步骤三、将步骤二得到的羊毛脂在水浴中熔化，然后加入凡士林，搅拌并冷却至室温，得到基质，备用；

步骤四、将步骤二得到的大黄、黄柏、白芷、黑蚂蚁和土鳖虫混合，并用粉碎机粉碎至80-100目，然后将芒硝加入到混合粉末中，烘干，粉碎至80-100目，得到混合细粉，备用；

步骤五、向步骤二得到的牡丹籽饼粕浸膏中加入对羟基苯甲酸乙酯，搅拌均匀后分别加入步骤三得到的基质、步骤四得到的混合细粉、步骤二得到的薄荷脑和冰片，搅拌均匀，即得到抗骨瘤复方软膏制剂。

2.如权利要求1所述的一种抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，其特征在于：步骤一所述的向牡丹籽饼粕粉末中加入乙醇溶液进行超声辅助浸渍法提取的操作至少重复两次，合并提取液进行减压浓缩。

3.如权利要求1所述的一种抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，其特征在于：步骤三所述的水浴温度控制为40-50℃。

4.如权利要求1所述的一种抗骨瘤复方软膏制剂的制备方法，其特征在于：步骤五得到的抗骨瘤复方软膏制剂的pH控制为6.0-7.0。