CN106138726A - 一种逆转肿瘤多药耐药的中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有逆转肿瘤多药耐药作用的中药组合物,属中药领域;以中药布尾狗、半春莲、百合子、鹅肠草和蜂窝草为原料组合制成活性组分。
Description
技术领域
本发明涉及一种逆转肿瘤多药耐药的中药组合物,属中药领域。
技术背景
恶性肿瘤是严重影响人类健康的主要疾病,目前化疗仍是治疗恶性肿瘤的重要方法之一,但是临床实践中常常出现化疗不敏感或化疗效果差等问题,或者某些肿瘤开始阶段化疗尚敏感,而化疗进行过程中出现耐药,这些病例在手术治疗后往往出现肿瘤转移、复发,最终导致死亡。肿瘤细胞对抗肿瘤药物的多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致肿瘤化学药物治疗失败的常见因素,所谓MDR是指肿瘤细胞不单对原来使用过的药物产生耐药,同时对未接触过的、结构无关、机制各异的多种抗肿瘤药物也具有的交叉耐药性。目前国内肿瘤患病率呈上升趋势,并且90%的肿瘤患者死亡在不同程度上受肿瘤耐药影响,如何抑制肿瘤耐药基因的表达和逆转MDR成为肿瘤治疗亟待解决的问题,这就急切寻求符合上述理想的新一代耐药逆转剂。
现有的研究结果表明多种机制参与肿瘤细胞多药耐药形成,主要包括:细胞膜P-糖蛋白(Permeability-glycoprotein,P-gP)、多药耐药相关蛋白(Multidrug ResistanceAssociated Protein,MRP)过度表达形成药物外输泵,使抗癌药物在肿瘤细胞内蓄积下降;谷胱甘肽-S-转移酶(GST)单独或与谷胱甘肽(GSH)一起参与多种细胞毒代谢及解毒过程;与细胞凋亡相关的因子及基因如bcl-2,p53等异常。国内外针对上述环节进行了广泛研究以寻求拮抗和/或逆转肿瘤细胞MDR,体外被证实具有逆转耐药活性的化合物或生物制剂很多,但真正进入临床研究的只有异博定、环孢菌素A等极少数,而且疗效不理想。目前还没有一种药物或方法在临床被广泛接受原因在于:现有逆转剂大多为“老药新用”,逆转耐药往往不是其主要功能,临床使用禁忌症多,毒副作用大;生物制剂在体内不稳定,难以作用到靶点且毒副反应多;临床耐药往往数种机制同时参与,只对单一机制起作用的逆转剂难以发挥显著的效应。某些中药能在逆转MDR中提高化疗效果,具有很好的应用和开发前景,但对于有些中药或有效单体成分研究结果而言,真正能结合临床疗效和中医药理论的甚少。
中国发明专利CN200710070320.4公开了“姜黄素在制备肿瘤多药耐药预防剂中的用途”,中国发明专利CN200710143393.1公开了“青蒿素在制备抗肿瘤多药耐药药物中的应用”,中国发明专利CN1463701公开“联苯双酯作为肿瘤多药耐药逆转剂的新用途”;中国发明专利CN102603692A公开了“一种抗肿瘤多药耐药抑制剂色满和色烯衍生物及其制备方法和应用”,中国发明专利CN101780068A公开了“片叶苔素D在制备抗肿瘤药物和抗肿瘤多药耐药逆转药物中的应用”,中国发明专利CN102274220A公开了“索拉菲尼在制备逆转肿瘤多药耐药性的药物中的应用”;目前有关制备肿瘤多药耐药逆转剂的发明专利基本集中在化学药物和中药单体成分,结合中医药理论和临床评价的中药组合物基本未见。
发明内容
本发明的目的是提供一种逆转肿瘤多药耐药中药组合物。
本发明的另一个目的是提供一种逆转肿瘤多药耐药中药组合物的制备方法。
本发明上述具有逆转肿瘤多药耐药中药组合物的制备方法包括如下步骤:
1)称取各原料药布尾狗、半春莲、百合子、鹅肠草和蜂窝草备用。
2)按上述重量配比的布尾狗、半春莲、百合子、鹅肠草和蜂窝草,按照上述重量比混合,加3-5倍量水浸泡1-2小时,加热煎煮1.5小时,过滤,药渣再加2-3倍量水加热煎煮1小时,过滤,合并两次滤液,静置0.5小时,倒出上清液。
3)上清液浓缩至相对密度1.08-1.10,进喷雾干燥器,进风温度控制120-130℃,出风温度105-120℃,雾化器转速20-30转/分钟,进料速度为3-5ml/分钟,得喷雾干燥粉。
4)粉碎喷雾干燥粉,过筛后得细粉,即该中药组合物的活性组分。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:布尾狗为豆科狸尾草属植物长穗猫尾射Uraria crinita Desv.var.macrostachya Wall.全草,性淡、凉,具有清热化痰功效;半春莲Tulotis ussuriensis(Regel et Macck)Hara为兰科植物小花蜻蜒兰的全草,性凉、苦,具有清热解毒功效;百合子Lilium lancifolium Thunb为百合科植物百合的种子,性甘、苦、凉,具有清热凉血功效;鹅肠草Myosoton aquaticum Moench.为石竹科植物牛繁缕的全草,性甘、酸、平,具有清热解毒、散瘀消肿功效;蜂窝草为唇形科绣球防风属植物蜂窝草Leucas zeylanica(L.)R.Brown的全草,性辛、苦、平,具有清热解毒功效。上述药物配伍,从中医药角度确定其具有清热化痰散瘀功效;在本发明中该中药组合物应用在肿瘤多药耐药治疗中,起到逆转肿瘤多药耐药,且该中药组合物无毒副作用。
以下结合实施例对本发明作进一步的阐述
实施例1本发明中药组合物的制备(以十倍原料配比量为例)
1.按下述重量配比称取各原料药
布尾狗100克、半春莲100克、百合子100克、鹅肠草50克和蜂窝草50克备用。
2.按照上述重量比药材混合,加3倍量水浸泡1小时,加热煎煮1.5小时,过滤,药渣再加2倍量水加热煎煮1小时,过滤,合并两次滤液,静置0.5小时,倒出上清液;.上清液浓缩至相对密度1.08时,进喷雾干燥器,进风温度控制120℃,出风温度105℃,雾化器转速20转/分钟,进料速度为3ml/分钟,得喷雾干燥粉20克,粉碎过筛后可得细粉。
实施例2本发明中药组合物的制备(以十倍原料配比量为例)
1.按下述重量配比称取各原料药
布尾狗300克、半春莲300克、百合子300克、鹅肠草250克和蜂窝草250克备用。
2.按照上述重量比药材混合,加3倍量水浸泡1小时,加热煎煮1.5小时,过滤,药渣再加2倍量水加热煎煮1小时,过滤,合并两次滤液,静置0.5小时,倒出上清液;上清液浓缩至相对密度1.10时,进喷雾干燥器,进风温度控制130℃,出风温度120℃,雾化器转速30转/分钟,进料速度为5ml/分钟,得喷雾干燥粉70克,粉碎过筛后可得细粉。
实施例3本发明中药组合物的制备(以十倍原料配比量为例)
1.按下述重量配比称取各原料药
布尾狗150克、半春莲150克、百合子150克、鹅肠草90克和蜂窝草90克备用。
2.按照上述重量比药材混合,加3倍量水浸泡1小时,加热煎煮1.5小时,过滤,药渣再加2倍量水加热煎煮1小时,过滤,合并两次滤液,静置0.5小时,倒出上清液;上清液浓缩至相对密度1.09时,进喷雾干燥器,进风温度控制125℃,出风温度110℃,雾化器转速25转/分钟,进料速度为4ml/分钟,得喷雾干燥粉30克,粉碎过筛后可得细粉。
实验例1本发明中药组合物逆转多药耐药细胞株HL60/ADR耐药性研究
人白血病细胞株HL60/S为敏感株,HL60/ADR为人白血病细胞阿霉素耐药株;HL60/ADR是由HL60/S细胞接触递增浓度的ADR诱导而成,具有典型多药耐药性。细胞株均培养于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中。
含药血清制备:NIH小鼠适应性饲养3天后,称重,根据随机数目表随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、空白对照组共4组,每组10只。
给药方法与剂量:中药组合物高剂量组按40g/kg灌胃给药,中剂量组按20g/kg灌胃给药,低剂量组按10g/kg灌胃给药,空白对照组以生理盐水灌胃。
上述给药组小鼠分别给药2h后取血离心分离血清,56℃灭活30min,用RPMI1640配制不同浓度的血清培养液。
取对数生长期HL60/ADR细胞以1×105/ml、HL60/S以0.5×105/ml分别接种于96孔培养板,100μl/孔。在37℃、5%C02条件下培养过夜后,加不同浓度的受试含药血清和ADR共100μl,调零组和对照组加相应体积的培养液,每组设4个平行孔。培养72h后,每孔加5mg/mlMTT20μl(调零组除外),再培养4h,倾去培养液,加DMS0100μl/孔,待完全溶解后,用酶联免疫仪在波长570nm处调零组调零后读取吸光度(A)值。
取4孔A值的均数按公式计算细胞抑制率,细胞抑制率(IR)=[1-(试验孔A均值/对照孔A均值)]×100%;计算IR并求出半数抑制浓度(IC50),以上实验重复3次;逆转倍数=空白对照组IC50/用药组IC50。
表1 本发明中药组合物对HL60/ADR耐药株逆转作用
本发明组合物含药血清与ADR联合使用可致ADR对HL60/ADR的IC50明显下降,不同给药浓度对HL60/ADR逆转倍数为1.55-3.51,且呈浓度正相关,提示本发明中药组合物对HL60/ADR耐药株具有逆转作用。
Claims (4)
1.一种逆转肿瘤多药耐药的中药组合物,其特征在于它的活性组分是由下列重量份的原料药制成:布尾狗10-30份、半春莲10-30份、百合子10-30份、鹅肠草5-25份和蜂窝草5-25份。
2.根据权利要求1的中药组合物,其中各原料药的用量为:布尾狗15份、半春莲15份、百合子15份、鹅肠草9份和蜂窝草9份。
3.根据权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法,包括如下步骤:
1)称取各原料药布尾狗、半春莲、百合子、鹅肠草和蜂窝草备用。
2)按上述重量配比的布尾狗、半春莲、百合子、鹅肠草和蜂窝草,按照上述重量比混合,加3-5倍量水浸泡1-2小时,加热煎煮1.5小时,过滤,药渣再加2-3倍量水加热煎煮1小时,过滤,合并两次滤液,静置0.5小时,倒出上清液。
3)上述2)上清液浓缩至相对密度1.08-1.10,进喷雾干燥器,进风温度控制120-130℃,出风温度105-120℃,雾化器转速20-30转/分钟,进料速度为3-5ml/分钟,得喷雾干燥粉。
4)粉碎上述3)喷雾干燥粉,过筛后得细粉,即该中药组合物的活性组分。
4.权利要求1所述中药组合物在制备逆转肿瘤多药耐药药物中的应用。
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