CN103655929A - 一种具有护肝作用药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有护肝作用药物组合物，该组合物包括如下重量份物质：红茶多酚6～15份；水飞蓟提取物2～6份。本发明水飞蓟素和红茶多酚分别以不同的药效物质从不同的作用靶点和途径有非常明确的防治化学性肝损伤的作用，而且相辅相成，可有效的预防和治疗化学性肝损伤。两药合用，共同强肝益肝、疏肝解毒和免疫调节之功效，经过试验证明本发明提供的药物组合物可以防治肝损伤。

Description

一种具有护肝作用药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有护肝作用药物组合物及其制备方法。属于医药和食品领域。 

背景技术

肝脏是人体最大的腺体，它在人的代谢、胆汁生成、解毒、凝血、免疫、热量产生及水与电解质的调节中均起着非常重要的作用。一般来说，造成肝损伤主要有两大类致病因素，一类是由病原微生物如病 毒感染而引起的肝脏炎症，如甲肝、乙肝等。另一类则是化学性肝损伤，化学性肝损伤,是由化学性肝毒性物质所造成的肝损伤。作为人体的重要解毒器官的肝脏，具有肝动脉和肝静脉双重血液供应。化学物质可通过胃肠道门静脉或体循环进入肝脏进行转化，因此肝脏容易受到化学物中的毒性物质损害。肝损伤引发的肝脏疾病已成为常见病、多发病，更为严重的是引发的肝功能衰竭和肝性脑病等，发病率和死亡率高，极大地威胁着人类的健康。对肝脏损害大的物质在生活中也较常见，如脂肪醇类（甲醇、乙醇、异丙醇等）能增强卤代烃类（四氯化碳、氯仿等）的毒性。这些化学物质包括酒精、环境中的化学毒物及某些药物。 

化学毒物损伤肝脏机理包括：①脂肪变性。如四氯化碳、黄磷等可干扰脂蛋白的合成与转运，形成脂肪肝。②脂质过氧化反应。这是中毒性肝损伤的特殊表现形式，如四氯化碳在体内代谢产生一种氧化能力很强的中间产物，导致生物膜上的脂质过氧化，破坏膜的磷脂，改变细胞的结构与功能。③胆汁郁积反应。主要与肝细胞膜和微绒毛受损，引起胆汁酸排泄障碍有关。 

目前，在化学毒性物质所造成的肝损伤中，以酒精性肝损伤所占比例最高。欧美国家的嗜酒人群中，酒精性肝病的患病率高达84%，其中20%-30%可发展为肝硬化。在美国，每年大概有将近15000-20000人死于酒精性肝病。英格兰和威尔士每年因肝硬化和慢性肝病死亡约3000例，其中有1200多例为酒精性肝病。在葡萄牙因肝病住院的患者中，酒精性肝病占63%。在我国，酒精性肝病的发病率成逐年梯度上升。在2000-2004年的5年中，酒精性肝病的发病率占同年同期的其他肝病住院患者的比例分别为2.4%、2.7%、2.8%、3.4%和4.3%。此外，我国酒精性肝病患者肝脏损伤严重，其中酒精性肝炎患者占28.8%，酒精性肝硬化患者占37.4%。因此研究一种可以降低酒精毒性，并可对酒精所致肝损伤有恢复作用的药物有着较大的社会效益及应用前景。 

水飞蓟，一年或二年生菊科草本植物，主要以种子供用。茎直立，高30～120cm,多分枝，基生叶大，莲座状，叶上面有光泽，有很多乳白色斑点；瘦果椭圆形，棕色，表面有纵纹，腺体突起。原产南欧、北非，亚洲亦有，中国有引种栽培。欧洲最早以叶和嫩芽作蔬菜食用，已有2000余年历史，同时用种子作为治疗肝、脾、消化道疾病和促进泌乳的草药。水飞蓟的主要成分有水飞蓟素（silybin）A和水飞蓟素B、异水飞蓟素(isosilybin)A、异水飞蓟素B、水飞蓟亭（silychristin）、异水飞蓟亭（isosilychristin）、水飞蓟宁（silydianin），以上均为黄酮类物质，常统称为水飞蓟素（类）；另含酪胺、5，7-二羟色原酮类等。水飞蓟素类（水飞蓟种子提取物）对化学性肝炎、脂肪肝、肝坏死、自由基损伤、肝脏缺血性损伤、病毒性肝炎均有良好的临床效果。单一使用水飞蓟的局限性在于抗发炎的效果较差。 

红茶多酚是从红茶中提取精制而成的多酚类物质。红茶是我国的主要茶类，作为全发酵茶，其中含有的多酚类物质主要是儿茶素经多酚氧化酶与过氧化物酶的作用，氧化聚合而成的茶黄素和茶红素，其中茶黄素的活性最为特出。茶黄素是一类具有苯骈卓酚酮结构的混合物，主要有TF1\TF2A\TF2B和TF3四种结构，其具有极强的生理活性，是衡量红茶品质的重要指标，也是红茶发挥生物学作用的主要物质。茶黄素具有降血脂、抗动脉粥样硬化、抗凝、促纤溶、抗脂质过氧化、清除自由基、抑制肝癌、增强免疫力、保护肝损伤，改善微循环、抗肿瘤等药理作用。 

红茶多酚具有增强免疫力作用。由于自由基与人们的身体健康息息相关，过多或过少都会给机体造成损伤。自由基产生和清除功能失去平衡，就会导致疾病的发生。当自由基作用于免疫系统，或作用于淋巴细胞使其受损，引起细胞免疫与体液免疫功能减弱，并使免疫识别力下降，使机体免疫力低下，出现自身免疫性疾病。茶黄素具有高效的抗氧化功能和清除自由基功能，能有效切断脂类氧化的链式反应，防止脂质过氧化，间接起到增强机体免疫力的作用。另有报道，茶黄素可通过改善红细胞变性、调整红细胞聚集性及血小板的粘附聚集性，降低血浆粘度，改善微循环，保障组织血液和氧的供应，提高机体整体免疫力和组织代谢水平，达到防病和治病的目的。洪阳等对28例免疫功能低下的肝硬化患者应用茶色素治疗后，其血中CD3、CD4、CD4/CD8增加，CD8降低，表明茶色素具有增强机体免疫力作用，可作为该病的免疫调节辅助用药。 

红茶多酚对化学性肝损伤具有辅助保护功能。临沂市中医医院牟乃洲、任广来等研究了茶黄素对脂肪肝的影响。研究结果表明，茶黄素具有降脂作用，对肝功能障碍、ALT异常者改善效果显著。第二临床学院茶色素临床研究中心幕德林，于建勋等对26例脂肪肝患者进行为期2个月的茶色素治疗。结果显示，总有效率为77%，明显优于东宝肝泰治疗组。可能是茶色素具有明显降血脂作用，可使三酸甘油脂、低密度脂蛋白、胆固醇明显降低，提高高密度脂蛋白，清除肝内过多堆积的脂肪酸外，且能够降低血液粘滞度、改善微循环、抑制脂质过氧化、清除自由基，有利于损伤肝细胞的修复与再生，降低转氨酶，使肝功得以恢复。 

杨淑清等应用茶色素治疗1000例脂肪肝病人1-2个疗程（30d为1个疗程），结果显示，显效率为61.4%，有效率为30.5%，总有效率为91.9%。国立台湾大学医学研究所的Lin CL等研究显示，茶黄素可通过激活人体肝癌细胞中腺苷酸活化蛋白酶（AMPK）而减少肝脏脂肪的积累。由于脂质过氧化反应，是中毒性肝损伤的特殊表现形式，如四氯化碳经体内代谢使得体内脂质过氧化产物丙二醛（MDA）升高，谷胱甘肽（GSH）和NADPH降低，导致生物膜上的脂质过氧化，破坏膜的磷脂，改变细胞膜结构与功能，此类反应最严重可导致肝坏死。S. Mahaboob Khan研究表明，红茶提取物对农药引起的小鼠肝脂质过氧化损伤具有保护作用，可显著降低肝损伤小鼠的脂质过氧化水平，显著提高肝损伤小鼠肝脏中超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）、总巯基、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽还原酶（GR）和谷胱甘肽-S-转移酶（GST）活性，并使其恢复到正常水平。 

红茶多酚具有增加免疫力作用，免疫的增强可有效降低化学性肝损伤发生的几率，而未损伤的肝脏也有利于增强机体的免疫力，维护自身的健康。单一使用红茶多酚的局限性在于抑制脂肪氧化的能力较弱。 

  

发明内容

本发明的目的之一在于克服上述不足，提供一种抑制脂肪氧化强、且抗发炎的效果好，兼备防与治化学性肝损伤功能的具有护肝作用药物组合物。 

本发明的目的之二在于提供一种具有护肝作用药物组合物的制备方法。 

本发明的目的是这样实现的： 

一种具有护肝作用药物组合物，该组合物包括：红茶多酚6～15份；水飞蓟提取物2～6份。按照上述比例（重量比）混合组成活性成份与药用辅料制成的。

一种具有护肝作用药物组合物的制备方法： 

   （1）用水飞蓟籽经榨油后，用5～10倍的乙酸乙酯室温下浸提6-9h,共2～3次，合并提取液，经减压浓缩后，真空干燥，粉碎后得到黄色粉末状水飞蓟提取物，经重结晶和真空干燥后得到高含量（含量80%以上）水飞蓟提取物；

（2）红茶多酚是用红茶，按重量比用5～15倍的纯水进行浸泡提取，控制温度为60～90℃，10～60min后，过滤出茶水，再加入纯水同法浸泡1～3次，过滤出茶水，合并滤液，浓缩到含固率为0.5%～2%，用1～2倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取后的乙酸乙酯浓缩到含固率1～10%，用0.1～0.5体积的酸水，pH值控制在1～6，进行反相水洗去除杂质，同法反洗1～10次，取乙酸乙酯相，浓缩回收乙酸乙酯，加少量水转溶，控制浓度10%~60%,喷雾干燥，得到富集茶黄素的红茶多酚（茶黄素含量大于40%以上）。

（3）然后将步骤1）和2) 得到的药物提取物分别过40-80 目筛，混合后，加入药学上可接受的载体或稀释剂，按照等量递加法混合均匀，制备成各种剂型。 

本配方中的草药都是卫生部公布的药食两用品种和食品可用品种。 

本发明提供的药物组合物是依据中医理论参考有关的实验研究资料，结合实际应用体会组方的。中医认为肝主疏泄，主藏血，其“体阴而用阳”任何因素伤肝都可能伤及其体”和“用”，且肝与脾肾关系密切，肝失疏泄可影响脾的运化而出现脾罚症状，中医有肝与肾“乙癸同源”肝肾同治之说，益肾亦可调肝。因此，任何因素伤肝都可能伤及其“体”和“用”而殃及脾肾，故益肝护肝关键在于护其“体”和“用”，并注意调理脾肾。 

水飞蓟在《新华本草纲要》中有解毒的功能，用于黄疸、肝硬化、肝肿大及其他肝病、胆结石。水飞蓟中最主要的活性成份为水飞蓟素，已经证实在各种毒性肝损害病理模型中，水飞蓟素能中和由毒蕈素、α－鹅膏菌素（在鬼笔鹅膏真菌中发现的毒性物质)、四氯化碳、半乳糖胺、硫代乙酰胺和肝病毒FV3引起的中毒。水飞蓟素的疗效归功于其具备数个作用点和作用机制由于其对自由基的捕获能力，水飞蓟素具有抗过氧化活性。脂类化合物过氧化的病理生理学过程(造成细胞膜的损坏)，可被水飞蓟素阻断或阻止。并且在已经遭受损伤的肝细胞内．水飞蓟素刺激蛋白质的合成并使磷脂代谢正常化。总之，水飞蓟素最大的贡献是对肝细胞膜有稳定作用，它阻止或避免溶解性细胞成分(例如转氨酶)的流失。水飞蓟素可限制某些肝毒性物质(如：α－鹅膏菌素)穿透进入细胞内部。蛋白质合成能力的增强是由于水飞蓟素刺激细胞核中RNA聚合酶I的活性，因此帮助肝细胞中核糖体RNA的合成，同时导致结构和功能蛋白质(酶)的大量合成。因此，水飞蓟素可增强肝细胞的修复能力和再生能力。因此水飞蓟对多种肝脏毒物引起的肝脏损伤有明显的保护作用。 

红茶多酚是红茶中的最主要的活性物质，其具有提高免疫力和护肝的作用。由于自由基与人们的身体健康息息相关，过多或过少都会给机体造成损伤。自由基产生和清除功能失去平衡，就会导致疾病的发生。当自由基作用于免疫系统，或作用于淋巴细胞使其受损，引起细胞免疫与体液免疫功能减弱，并使免疫识别力下降，使机体免疫力低下，出现自身免疫性疾病。茶黄素具有高效的抗氧化功能和清除自由基功能，能有效切断脂类氧化的链式反应，防止脂质过氧化，间接起到增强机体免疫力的作用。另有报道，茶黄素可通过改善红细胞变性、调整红细胞聚集性及血小板的粘附聚集性，降低血浆粘度，改善微循环，保障组织血液和氧的供应，提高机体整体免疫力和组织代谢水平，达到防病和治病的目的。免疫的增强可有效降低化学性肝损伤发生的几率。 

红茶多酚具有明显降血脂作用，可使三酸甘油脂、低密度脂蛋白、胆固醇明显降低，提高高密度脂蛋白，清除肝内过多堆积的脂肪酸外，且能够降低血液粘滞度、改善微循环、抑制脂质过氧化、清除自由基，有利于损伤肝细胞的修复与再生，降低转氨酶，使肝功得以恢复。红茶多酚中的茶黄素可通过激活人体肝癌细胞中腺苷酸活化蛋白酶（AMPK）而减少肝脏脂肪的积累。红茶多酚对农药引起的小鼠肝脂质过氧化损伤具有保护作用，可显著降低肝损伤小鼠的脂质过氧化水平，显著提高肝损伤小鼠肝脏中超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）、总巯基、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽还原酶（GR）和谷胱甘肽-S-转移酶（GST）活性，并使其恢复到正常水平。 

红茶多酚可以通过提高免疫力，提高人体整体防御能力，可有效降低化学性肝损伤发生的几率，同时红茶多酚中的活性成份茶黄素等还具有上述所讲的明显的护肝效果。因此红茶多酚具有明显的保护肝损伤的作用。 

本发明运用传统中医学的理论和现代药理研究成果，从增强人体防御能力和修复肝细胞，解除毒素，补肝、养肝的角度，经过大量的临床实验，科学选取水飞蓟提取物、红茶多酚这两种药物制备而成。 

水飞蓟素和红茶多酚分别以不同的药效物质从不同的作用靶点和途径有非常明确的防治化学性肝损伤的作用，而且相辅相成，可有效的预防和治疗化学性肝损伤。两药合用，抑制脂肪氧化强、且抗发炎的效果，共同强肝益肝、疏肝解毒和免疫调节之功效，经过试验证明本发明提供的药物组合物可以防治肝损伤。 

由于本发明首次公开了由水飞蓟提取物和红茶多酚组成的组合物具有防治肝损伤的作用，因此，将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于预防和治疗肝损伤，均属于本发明的保护范围。本发明的组合物在制成任何一种剂型时，均具有预防和治疗肝损伤的作用。 

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。 

实施例1 ：益甘胶囊 

1.组成：

红茶多酚100kg，水飞蓟提取物40kg。 

2.制备方法： 

（1）红茶多酚制备：取红茶，按重量比用10倍的纯水进行浸泡提取，控制温度为80℃，30min后，过滤出茶水，再加入纯水同法浸泡1次，过滤出茶水，合并滤液，浓缩到含固率为1%，用1.2倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取后的乙酸乙酯浓缩到含固率5%，用0.1倍体积的酸水（pH值控制在3）进行反相水洗去除杂质，同法反洗5次，取乙酸乙酯相，浓缩回收乙酸乙酯，加少量水转溶（控制浓度40%）,喷雾干燥，得到富集茶黄素的红茶多酚（茶黄素含量大于40%以上）。

（2）水飞蓟提取物制备：水飞蓟籽经榨油后，用10倍的乙酸乙酯室温下浸提8h,共2次，合并提取液，经减压浓缩后，真空干燥，粉碎后得到黄色粉末状水飞蓟提取物，经重结晶和真空干燥后得到高含量水飞蓟提取物（含量大于80%）。 

（3）上述产品分别过80目筛，按上述组成重量比，进行混合，再加入微晶纤维等药用辅料，混合均匀，通过干式制粒机制成20~100目颗料，再通过胶囊灌装机制作胶囊产品，胶囊选用0号胶囊壳，内填充物为500mg/粒。 

用法用量：每日2 次，每次1 粒。 

  

实施例2 ：益甘冲剂

 1.组成：

 红茶多酚110kg，水飞蓟提取物30kg。 

2.制备方法： 

（1）红茶多酚制备：取红茶，按重量比用8倍的纯水进行浸泡提取，控制温度为90℃，20min后，过滤出茶水，再加入纯水同法浸泡1次，过滤出茶水，合并滤液，浓缩到含固率为1%，用1.2倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取后的乙酸乙酯浓缩到含固率5%，用0.1倍体积的酸水（PH值控制在2.5）进行反相水洗去除杂质，同法反洗6次，取乙酸乙酯相，浓缩回收乙酸乙酯，加少量水转溶（控制浓度30%）,喷雾干燥，得到富集茶黄素的红茶多酚（茶黄素含量大于40%以上）。

（2）水飞蓟提取物制备：水飞蓟籽经榨油后，用8倍的乙酸乙酯室温下浸提10h,共3次，合并提取液，经减压浓缩后，真空干燥，粉碎后得到黄色粉末状水飞蓟提取物，经重结晶和真空干燥后得到高含量水飞蓟提取物（含量大于80%）。 

（3）上述产品分别过80目筛，按上述组成重量比，进行混合，再加入糊精等药用辅料，混合均匀，通过沸腾制粒机制成20~60目颗料（纯水为粘合剂），装入小袋，制成预防肝损伤的益甘冲剂，每小袋内颗料物1.5克。 

 用法用量：每日2 次，每次1袋。 

  

实施例3：益甘片

1.组成：

红茶多酚250kg，水飞蓟提取物60kg。 

2.制备方法： 

（1）红茶多酚制备：取红茶，按重量比用8倍的纯水进行浸泡提取，控制温度为80℃，30min后，过滤出茶水，再加入纯水同法浸泡2次，过滤出茶水，合并滤液，浓缩到含固率为1.5%，用1.5倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取后的乙酸乙酯浓缩到含固率8%，用0.2倍体积的酸水（PH值控制在3）进行反相水洗去除杂质，同法反洗4次，取乙酸乙酯相，浓缩回收乙酸乙酯，加少量水转溶（控制浓度50%）,喷雾干燥，得到富集茶黄素的红茶多酚（茶黄素含量大于40%以上）。

（2）水飞蓟提取物制备：水飞蓟籽经榨油后，用15倍的乙酸乙酯室温下浸提8h,共2次，合并提取液，经减压浓缩后，真空干燥，粉碎后得到黄色粉末状水飞蓟提取物，经重结晶和真空干燥后得到高含量水飞蓟提取物（含量大于80%）。 

（3）上述产品分别过80目筛，按上述组成重量比，进行混合，再加入微晶纤维等药用辅料，混合均匀，通过干式制粒机制成20~100目颗料，按比例置入自动旋转压片机压片，包衣，即可，控制每粒片型重量为500mg. 

用法用量：每日2 次，每次1 粒。

  

实施例1益甘胶囊对化学性肝损伤有辅助保护功能动物试验情况

1.材料和方法

1.1样品:实施例1益甘胶囊、水飞蓟提取物、红茶多酚。

试验时用蒸馏水作溶剂配制成所需浓度的受试物溶液。 

1.2无水乙醇:分析纯，由天津市兴复科技发展有限公司生产，批号:20100617。 

1.3实验动物:由成都达硕生物科技有限公司提供的雄性SD大鼠50只，体重180-220g，生产许可证号为SCXK(川)2008-24.SPF级。实验动物房为屏障系统，使用许可证号为SYXK  (川)2008-043,温度为20-25℃，相对湿度40-70%。 

1.4试验分组及剂量设计:将雄性SD大鼠随机分为五组，每组10只，试验设8 3mg/kg.BW、250mg/kg.BW、500mg/kg.BW三个剂量组(分别相当于人体每日推荐量的5、 15、30倍)，分别称取4.15g、 12.50g、25.00g受试物，依次加蒸馏水至500m1混匀备用，冰箱保存，用完再配。另设蒸馏水对照组和50%乙醇模型对照组。用乙醇(分析纯)造成肝损伤模型，乙醇浓度为50%(以蒸馏水稀释)，灌胃量12m1/kg.BW(折合乙醇的剂量为6000mg/kg.BW)。 

1.5试验方法:采用酒精肝损伤模型法，三个剂量组给予不同剂量的受试物，阴性对照组和模型对照组给予蒸馏水，按10ml/kg.BW每天经口灌胃一次，连续给予30天，每周称两次体重，以此调整给药量。试验结束时将模型对照组和三个剂量组一次经口灌胃给予50%无水乙醇，剂量为12m1/kg.BW，阴性对照组给予同体积的蒸馏水，禁食16h后处死动物取肝脏称重，计算脏体比，并用肝脏进行生化指标检测及组织病理学检查。 

2.检测指标 

2.1肝匀浆中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA )、还原型谷胱甘肤( GSH )及甘油三酯(TG)的测定:MDA和GSH测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，用上海天美科学仪器有限公司生产的UV1100分光光度计厕定；TG测定试剂盒由广州标佳科技有限公司提供，用美国贝克曼库尔特有限公司生产的CX4全自动生化分析仪进行测定。

2.2肝脏称重及脏器系数的计算 

2.3肝脏组织病理学诊断标准

2.3.1病理观察材料:从动物肝左叶中部做横切面取材、切片、染色、镜下观察脂滴在肝脏中的分布、范围和面积。

2.3.2病理观察方法:每例动物肝组织用40倍物镜连续记录70个视野，每个视野根据阳性细胞多少和分布的范围，按0、1、2、3、4分进行评分。将70个视野所得分数的平均值作为该例肝组织的脂肪染色评分。 

2.3.3病理诊断标准: 病理组织学观察以肝细胞脂滴染色作为观察指标，并根据病理改变程度"0"、"1"、"2"、 "3"、 "4"量化，。进行肝损伤程度的评价。 

2.3.4肝细胞脂肪染色共分为五级: 

      肝细胞内脂滴散在、稀少               0分

      含脂滴的肝细胞不超过1/4              1分

      含脂滴的肝细胞不超过1/2              2分

      含脂滴的肝细胞不超过3/4              3分

      肝组织几乎被脂滴代替                 4分

2.4试验数据统计: 试验数据统计采用SPSS 11.0 for windows软件包处理。对照组与各剂量组的数据经方差齐性检验，方差齐，进行方差分析，如P值小于0.05，则用Dunnett法进行两两比较；若方差不齐，则进行数据转换，仍不齐，改用秩和检验，如P值小于0.05，则用Dunnett' s T3法进行两两比较。阴性对照组与模型对照组数据则采用T检验。

3.试验结果 

3.1实施例1益甘胶囊对大鼠体重、肝重、肝体比的影响

由表1可见，实施例1益甘胶囊各剂量组大鼠的初始体重、水飞蓟提取物、红茶多酚与阴性对照组及模型对照组比较，方差齐(P>0.05)，方差分析结果(P>0.05)，说明各组动物初始体重是均衡的，各剂量组动物的中期体重、终重、肝重及肝体比与模型对照组比较，无显著性差异(P>0.05 )。

表1    实施例1益甘胶囊对大鼠体重、肝重、肝体比的影响（X士S） 

3.2实施例1益甘胶囊对大鼠肝匀浆中MDA, GSH, TG含量的影响

  由表2可见，模型对照组大鼠肝匀浆中的MDA、 GSH、TG含量与阴性对照组比较，经t检验，MDA, TG含量显著升高(P<0.05、P<0.01),GSH含量显著降低(P<0.05),表明该模型是成功的，实验系统可靠。三个剂量组的MDA, GSH、TG含量与模型对照组比较，可见中、高剂量组的MDA显著降低(P<0.05, P<0.01）、三个剂量组的GSH升高无显著性差异(P>0.05)、三个剂量组的TG降低有显著性差异(P<0.05），与单独的水飞蓟提取物和单独的红茶多酚对比，可见中、高剂量组的MDA显著降低(P<0.05, P<0.01），三个剂量组的GSH升高无显著性差异(P>0.05)、三个剂量组的TG降低无显著性差异(P<0.05）。

表2实施例1益甘胶囊对大鼠肝匀浆中MDA、 GSH、 TG含量的影响(x士S) 

注:△表示与阴性对旅组比较P<0.05, △△表示与阴性片照组比较P<0.01，*表示与模型对感组比较P<0.05；**表示与模型对照组比较P<0.01。

3.3肝脏组织病理学检查结果 

    结果见表3、表4，模型对照组大鼠的肝细胞脂肪染色评分与阴性对照组比较，升高有

极显著性差异(P<0.01)，表明该模型是成功的，实验系统可靠。三个剂黄组大鼠的肝细胞

脂肪染色评分与模型对照组比较，中、高剂量组降低有显著性差异(P<0.5)。

                表3实施例1益甘胶囊对大鼠肝脏病理变化砚察记录 

            表4实施例1益甘胶囊对大鼠肝脏组织病理学检查结果(X士S) 

注:△△表示与阴性对照组比较P<0.01，*表示与模型对照组比较P<0.05

  4.小结:

    实施例1益甘胶囊连续30天经口灌胃给子雄性SD大鼠后，可见动物生长发育正常。

在酒精性肝损伤模型成立的基础上，中、高剂量组能显著降低大鼠肝匀浆中的过氧化脂质 

降解产物丙二醛含量(P<0. 05, P<0.01 )；三个剂量组大鼠肝匀装中的甘油三醋降低均有显著性差异((P<0.05)；而各剂量组大鼠肝匀浆中的谷胱甘肤含量与模型对照组之间无显著性差异(P>0.05)；中、高剂量组的脂肪染色评分降低有显著性差异((P<0.05)，组织病理学检查结果为阳性。依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中之规定，实施例1益甘胶囊对雄性SD大鼠具有酒精性肝损伤辅助保护作用。

Claims (2)

1.一种具有护肝作用药物组合物，其特征在于：该组合物包括如下重量份物质：红茶多酚6～15份；水飞蓟提取物2～6份。

2.一种具有护肝作用药物组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

   （1）用水飞蓟籽经榨油后，用5～10倍的乙酸乙酯室温下浸提6-9h,共2～3次，合并提取液，经减压浓缩后，真空干燥，粉碎后得到黄色粉末状水飞蓟提取物，经重结晶和真空干燥后得到含量80%以上的水飞蓟提取物；

（2）红茶多酚是用红茶，按重量比用5～15倍的纯水进行浸泡提取，控制温度为60～90℃，10～60min后，过滤出茶水，再加入纯水同法浸泡1～3次，过滤出茶水，合并滤液，浓缩到含固率为0.5%～2%，用1～2倍体积的乙酸乙酯进行萃取，萃取后的乙酸乙酯浓缩到含固率1～10%，用0.1～0.5体积的酸水，pH值控制在1～6，进行反相水洗去除杂质，同法反洗1～10次，取乙酸乙酯相，浓缩回收乙酸乙酯，加少量水转溶，控制浓度10%~60%,喷雾干燥，得到富集茶黄素的红茶多酚（茶黄素含量大于40%以上）；

（3）然后将步骤1）和2) 得到的药物提取物分别过40-80 目筛，按权利要求1中的配比混合后，加入药学上可接受的载体或稀释剂，按照等量递加法混合均匀，制备成各种剂型。