CN106135001A - 一种卡特兰组培繁殖方法 - Google Patents
一种卡特兰组培繁殖方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106135001A CN106135001A CN201610659481.6A CN201610659481A CN106135001A CN 106135001 A CN106135001 A CN 106135001A CN 201610659481 A CN201610659481 A CN 201610659481A CN 106135001 A CN106135001 A CN 106135001A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- outer implant
- seedling
- bowring cattleya
- tissue culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Abstract
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种卡特兰组培繁殖方法，包括以下步骤：材料选取、外植体预处理、外植体消毒、诱导培养、增殖培养、壮苗生根和移栽，通过本发明能对卡特兰进行快速培养繁殖，并且培养后的卡特兰苗株成苗率高，苗株品质好，栽培后适应性强，通过生物技术手段在短时间内，满足了商业化生产的需求，为企业规模化、产业化培养卡特兰提供了技术支持。同时本组培繁殖方法消毒效果好、褐变率低，从而大大提高了成苗率及工作效率，节约了资源。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种卡特兰组培繁殖方法。
背景技术
卡特兰，是国际上最有名的兰花之一。原产美洲热带，为巴西、哥伦比亚等国国花。品种在数千个以上，颜色有白、黄、绿、红紫等。繁殖用分株、组织培养或无菌播种，性喜温暖、潮湿和充足的光照。卡特兰高效繁殖的主要手段就是组织培养。国外一些发达国家常常采用工厂化育苗技术以及组织培养快繁技术，不仅可以创造巨大的经济效益，同时也培育了很多优良品种，然而我国关于卡特兰组织培养的快繁技术研究仍然处于初级阶段，在很大程度上阻碍了卡特兰的规模化生产。并且现有的其他兰花品种的组织培养不能直接运用到卡特兰培养上，所以现在目前急需一种卡特兰组培繁殖方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种消毒效果好、培养繁殖快、成苗率高、褐变率低的卡特兰组培繁殖方法。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：一种卡特兰组培繁殖方法，包括以下步骤：
(1)材料选取：选取无病虫害长势良好的卡特兰植株，进行5～8d的遮光处理，遮光处理后，选取长势健壮植株上的新芽作为外植体；
(2)外植体预处理：用抗氧化剂溶液洗涤刚切割的外植体花芽伤口表面；
(3)外植体消毒：用软刷毛将选取的外植体花芽在水池中进行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗洁精清洗干净，置于流水下冲洗30min，然后在超净台上剥除外植体花芽最外面的一层苞叶，在经高温灭菌过的75％酒精中浸泡1～2s，然后在浸泡在10％的次氯酸钠溶液中初次消毒10min，初次消毒后，用无菌水冲洗5遍，再剥去一层苞叶，放入5％的次氯酸钠溶液中再次消毒5min，接着采用重复消毒的方式，每次次氯酸钠的浓度为上次消毒的一半，消毒时间也为上次消毒的一半，直至剥至留下最后的芽体，最后切取5mm左右的芽尖，泡在0.5％的次氯酸钠溶液中消毒1min，用无菌水冲洗6～8次，用消毒滤纸吸干表面水分后放置于培养皿中备用；
(4)诱导培养：将消毒后的外植体，接种在诱导培养基中进行培养，先进行7～10d的弱光照培养，光照强度为500～700lx，然后在进行常规光照培养，光照强度为1500～2000lx，培养温度为24～26℃，光照时间为13h/d；所述诱导培养基为：1/2MS+0.4～0.8mg/L6-BA+0.05～0.08mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+490～510mg/L柠檬酸+5～7g/L PVP，pH值为5.4～5.5；
(5)增殖培养：诱导培养后转移至增殖培养基中继续培养，所述增殖培养基为：1/2MS+2～4mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+490～510mg/L柠檬酸+2～4g/L PVP，pH值为5.4～5.5；培养温度25～28℃，光照时间为13h/d，光照强度为1500～2000lx；
(6)壮苗生根：增殖培养后，选择高2cm以上、外植体上有明显突起的小苗转入生根培养基中，所述生根培养基为：MS+1.4～1.6mg/L 6-BA+0.05～0.08mg/LNAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+8～12％香蕉汁+7～10％土豆泥，pH值为5.4～5.5；培养条件：培养温度25～28℃，光照时间为13h/d，光照强度为1500～2000lx；
(7)移栽：当试管苗生长至4～5cm高，根2～4条，叶1～2片时，将试管苗放在自然光下炼苗5～7天，打开瓶盖炼苗1～2天；然后取出培养苗，用清水洗净附着在根部的培养基，清洗时注意不要损害根部，然后移栽至培养基质中，保持湿度和通风，空气湿度为75～85％，温度为20～25℃。
如上所述的一种卡特兰组培繁殖方法，进一步说明为，所述诱导培养基为：1/2MS+0.6mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+500mg/L柠檬酸+6g/L PVP。
如上所述的一种卡特兰组培繁殖方法，进一步说明为，所述增殖培养基为：1/2MS+3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+500mg/L柠檬酸+3g/L PVP。
如上所述的一种卡特兰组培繁殖方法，进一步说明为，所述生根培养基为：MS+1.5mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+10％香蕉汁+9％土豆泥。
如上所述的一种卡特兰组培繁殖方法，进一步说明为，所述抗氧化剂溶液选用谷胱甘肽。
本发明的有益效果是：通过本发明能对卡特兰进行快速培养繁殖，并且培养后的卡特兰苗株成苗率高，苗株品质好，栽培后适应性强，通过生物技术手段在短时间内，满足了商业化生产的需求，为企业规模化、产业化培养卡特兰提供了技术支持。同时本组培繁殖方法消毒效果好、褐变率低，从而大大提高了成苗率及工作效率，节约了资源。
附图说明
图1为本发明流程示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明实施方式做进一步的阐述。
如图1所示，本发明提供的一种卡特兰组培繁殖方法，包括以下步骤：材料选取、外植体预处理、外植体消毒、诱导培养、增殖培养、壮苗生根和移栽，本方法消毒效果好、培养繁殖快、成苗率高及褐变率低，从而能够降低卡特兰在组培过程中的褐变率，增大成苗率，提高工作效率，下面对方法中的每个步骤做详细阐述。
(1)材料选取：选取无病虫害长势良好的卡特兰植株，进行5～8d的遮光处理，遮光处理后，选取长势健壮植株上的新芽作为外植体；采用无病虫害长势良好的卡特兰植株能够降低苗株的发病率，保证在组培过程中不受其他因素的干扰，增加外植体成活率，并且经过遮光处理，能够降低褐变率。
(2)外植体预处理：用抗氧化剂溶液洗涤刚切割的外植体花芽伤口表面；能够最大程度地减少氧气与外植体切面接触的机会，同时充分的析出外植体中水溶性的多酚物质和醌类物质，较少酚类物质的氧化，从而有效地减轻卡特兰外植体在组织培养过程中的褐变，作为优选，所述抗氧化剂选用谷胱甘肽溶液，还可以选用抗坏血酸，还可以将几种抗氧化剂结合在一起使用。
(3)外植体消毒：用软刷毛将选取的外植体花芽在水池中进行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗洁精清洗干净，置于流水下冲洗30min，然后在超净台上剥除外植体花芽最外面的一层苞叶，在经高温灭菌过的75％酒精中浸泡1～2s，然后在浸泡在10％的次氯酸钠溶液中初次消毒10min，初次消毒后，用无菌水冲洗5遍，再剥去一层苞叶，放入5％的次氯酸钠溶液中再次消毒5min，接着采用重复消毒的方式，每次次氯酸钠的浓度为上次消毒的一半，消毒时间也为上次消毒的一半，直至剥至留下最后的芽体，例如接下来用2.5％的次氯酸钠溶液再次消毒2.5min，冲洗后剥去一层苞叶，再用1.25％的次氯酸钠溶液再次消毒1.25min，依次类推；最后切取5mm左右的芽尖，泡在0.5％的次氯酸钠溶液中消毒1min，用无菌水冲洗6～8次，用消毒滤纸吸干表面水分后放置于培养皿中备用。采用阶梯式消毒法，在不断剥去苞衣的同时，采用不同的浓度的次氯酸钠溶液进行消毒，可以使消毒效果更好，减少细菌污染的同时，提高成活率。
(4)诱导培养：将消毒后的外植体，接种在诱导培养基中进行培养，先进行7～10d的弱光照培养，光照强度为500～700lx，然后在进行常规光照培养，光照强度为1500～2000lx，培养温度为24～26℃，光照时间为13h/d；先进行一段时间的弱光照培养，能够使外植体在培养过程中逐渐适应培养条件，有利于存活，同时抑制褐变的发生。所述诱导培养基为：1/2MS+0.4～0.8mg/L6-BA+0.05～0.08mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+490～510mg/L柠檬酸+5～7g/L PVP，pH值为5.4～5.5；表1为诱导培养基的多种实施例：
作为优选，所述诱导培养基为：1/2MS+0.6mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+500mg/L柠檬酸+6g/L PVP，即为表1中培养基1的成分及用量。
(5)增殖培养：诱导培养后转移至增殖培养基中继续培养，所述增殖培养基为：1/2MS+2～4mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+490～510mg/L柠檬酸+2～4g/L PVP，pH值为5.4～5.5；培养温度25～28℃，光照时间为13h/d，光照强度为1500～2000lx；表2为增殖培养基的多种实施例：
作为优选，所述增殖培养基为：1/2MS+3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+500mg/L柠檬酸+3g/L PVP，即为表2中培养基7的成分及用量。
(6)壮苗生根：增殖培养后，选择高2cm以上、外植体上有明显突起的小苗转入生根培养基中，所述生根培养基为：MS+1.4～1.6mg/L 6-BA+0.05～0.08mg/LNAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+8～12％香蕉汁+7～10％土豆泥，pH值为5.4～5.5；培养条件：培养温度25～28℃，光照时间为13h/d，光照强度为1500～2000lx；表3为生根培养基的多种实施例：
作为优选，所述生根培养基为：MS+1.5mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+10％香蕉汁+9％土豆泥，即为表3中培养基13的成分及用量。
(7)移栽：当试管苗生长至4～5cm高，根2～4条，叶1～2片时，将试管苗放在自然光下炼苗5～7天，打开瓶盖炼苗1～2天；然后取出培养苗，用清水洗净附着在根部的培养基，清洗时注意不要损害根部，然后移栽至培养基质中，保持湿度和通风，空气湿度为75～85％，温度为20～25℃。通过本发明能对卡特兰进行快速培养繁殖，并且培养后的卡特兰苗株成苗率高，苗株品质好，栽培后适应性强，通过生物技术手段在短时间内，满足了商业化生产的需求，为企业规模化、产业化培养卡特兰提供了技术支持。同时本组培繁殖方法消毒效果好、褐变率低，从而大大提高了成苗率及工作效率，节约了资源。
本发明并不限于上述实例，在本发明的权利要求书所限定的范围内，本领域技术人员不经创造性劳动即可做出的各种变形或修改均受本专利的保护。
Claims (5)
1.一种卡特兰组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)材料选取：选取无病虫害长势良好的卡特兰植株，进行5～8d的遮光处理，遮光处理后，选取长势健壮植株上的新芽作为外植体；
(2)外植体预处理：用抗氧化剂溶液洗涤刚切割的外植体花芽伤口表面；
(3)外植体消毒：用软刷毛将选取的外植体花芽在水池中进行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗洁精清洗干净，置于流水下冲洗30min，然后在超净台上剥除外植体花芽最外面的一层苞叶，在经高温灭菌过的75％酒精中浸泡1～2s，然后在浸泡在10％的次氯酸钠溶液中初次消毒10min，初次消毒后，用无菌水冲洗5遍，再剥去一层苞叶，放入5％的次氯酸钠溶液中再次消毒5min，接着采用重复消毒的方式，每次次氯酸钠的浓度为上次消毒的一半，消毒时间也为上次消毒的一半，直至剥至留下最后的芽体，最后切取5mm左右的芽尖，泡在0.5％的次氯酸钠溶液中消毒1min，用无菌水冲洗6～8次，用消毒滤纸吸干表面水分后放置于培养皿中备用；
(4)诱导培养：将消毒后的外植体，接种在诱导培养基中进行培养，先进行7～10d的弱光照培养，光照强度为500～700lx，然后在进行常规光照培养，光照强度为1500～2000lx，培养温度为24～26℃，光照时间为13h/d；所述诱导培养基为：1/2MS+0.4～0.8mg/L 6-BA+0.05～0.08mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+490～510mg/L柠檬酸+5～7g/L PVP，pH值为5.4～5.5；
(5)增殖培养：诱导培养后转移至增殖培养基中继续培养，所述增殖培养基为：1/2MS+2～4mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+490～510mg/L柠檬酸+2～4g/L PVP，pH值为5.4～5.5；培养温度25～28℃，光照时间为13h/d，光照强度为1500～2000lx；
(6)壮苗生根：增殖培养后，选择高2cm以上、外植体上有明显突起的小苗转入生根培养基中，所述生根培养基为：MS+1.4～1.6mg/L 6-BA+0.05～0.08mg/LNAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L琼脂+10～15％椰汁+8～12％香蕉汁+7～10％土豆泥，pH值为5.4～5.5；培养条件：培养温度25～28℃，光照时间为13h/d，光照强度为1500～2000lx；
(7)移栽：当试管苗生长至4～5cm高，根2～4条，叶1～2片时，将试管苗放在自然光下炼苗5～7天，打开瓶盖炼苗1～2天；然后取出培养苗，用清水洗净附着在根部的培养基，清洗时注意不要损害根部，然后移栽至培养基质中，保持湿度和通风，空气湿度为75～85％，温度为20～25℃。
2.根据权利要求1所述的一种卡特兰组培繁殖方法，其特征在于：所述诱导培养基为：1/2MS+0.6mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+500mg/L柠檬酸+6g/L PVP。
3.根据权利要求1所述的一种卡特兰组培繁殖方法，其特征在于：所述增殖培养基为：1/2MS+3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+500mg/L柠檬酸+3g/LPVP。
4.根据权利要求1所述的一种卡特兰组培繁殖方法，其特征在于：所述生根培养基为：MS+1.5mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L琼脂+13％椰汁+10％香蕉汁+9％土豆泥。
5.根据权利要求1所述的一种卡特兰组培繁殖方法，其特征在于：所述抗氧化剂溶液选用谷胱甘肽。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610659481.6A CN106135001A (zh) | 2016-08-12 | 2016-08-12 | 一种卡特兰组培繁殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610659481.6A CN106135001A (zh) | 2016-08-12 | 2016-08-12 | 一种卡特兰组培繁殖方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106135001A true CN106135001A (zh) | 2016-11-23 |
Family
ID=57329853
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610659481.6A Pending CN106135001A (zh) | 2016-08-12 | 2016-08-12 | 一种卡特兰组培繁殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106135001A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106804425A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-06-09 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 一种卡特兰高效组织培养的培养方法 |
| CN109601386A (zh) * | 2019-01-24 | 2019-04-12 | 北京农业职业学院 | 一种国兰茎尖组织培养中切芽外植体的消毒方法 |
| CN110036910A (zh) * | 2019-04-15 | 2019-07-23 | 中国医学科学院药用植物研究所海南分所 | 一种血叶兰组培快速繁殖方法 |
-
2016
- 2016-08-12 CN CN201610659481.6A patent/CN106135001A/zh active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106804425A (zh) * | 2016-12-23 | 2017-06-09 | 中国林业科学研究院林业研究所 | 一种卡特兰高效组织培养的培养方法 |
| CN109601386A (zh) * | 2019-01-24 | 2019-04-12 | 北京农业职业学院 | 一种国兰茎尖组织培养中切芽外植体的消毒方法 |
| CN110036910A (zh) * | 2019-04-15 | 2019-07-23 | 中国医学科学院药用植物研究所海南分所 | 一种血叶兰组培快速繁殖方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101822220B (zh) | 一种春兰名品茎尖组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103461134A (zh) | 睡莲实生无菌苗的培育方法 | |
| CN101292630B (zh) | 丽格海棠组织培养快速繁殖方法 | |
| CN106106163A (zh) | 一种蝴蝶兰培养繁殖方法 | |
| CN103931493A (zh) | 一种半夏一步成苗的组织培养方法以及新的半夏培养基 | |
| CN107155898A (zh) | 一种铁皮石斛利用茎段薄片进行扩繁的方法 | |
| CN102090327A (zh) | 三叶木通果种苗试管快速繁殖方法 | |
| CN105191792B (zh) | 扁桃斑鸠菊的快速繁殖方法 | |
| CN109105263A (zh) | 一种国兰根状茎组织培养快速繁殖方法 | |
| CN106172008A (zh) | 一种卡特兰快速培养繁殖方法 | |
| CN106135001A (zh) | 一种卡特兰组培繁殖方法 | |
| CN106613079B (zh) | 一种半夏种茎生产方法 | |
| CN105918126B (zh) | 掌叶覆盆子脱毒种苗的离体快繁方法 | |
| CN101238794A (zh) | 野百合试管鳞茎的诱导方法 | |
| CN109220789A (zh) | 苹果砧木m9-t337的组培快繁方法 | |
| CN102613087A (zh) | 生物组织培养繁育考来木的方法 | |
| CN105123512B (zh) | 一种金线莲的培育方法 | |
| CN105010123B (zh) | 通过离体挽救培养获得草莓远缘杂种的方法及培养基 | |
| CN113383706B (zh) | 一种基于led光质调控的杜仲高效再生方法 | |
| CN104255532B (zh) | 一种养心菜的组织培养一步成苗快速繁殖方法 | |
| CN106258967A (zh) | 一种卡特兰组培快速繁殖方法 | |
| CN106258968A (zh) | 一种褐变率低的蝴蝶兰组培方法 | |
| CN112167060A (zh) | 一种背蛇生的人工高效繁殖方法 | |
| CN101375670B (zh) | 五唇兰的无菌播种和组织培养方法 | |
| CN107027631B (zh) | 一种鹧鸪茶的繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20161123 |