CN103461134A - 睡莲实生无菌苗的培育方法 - Google Patents

睡莲实生无菌苗的培育方法 Download PDF

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孙春青
潘跃平
戴忠良
马志虎
孙国胜
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Abstract

本发明公开了一种睡莲实生无菌苗的培育方法,包括以下步骤:(1)种子采集处理,选取睡莲种子,用灭菌水冲洗,先用70%的酒精消毒1分钟,再用10%的次氯酸钠消毒,然后在无菌条件下再用灭菌水冲洗干净后放入无菌水瓶内催芽。(2)睡莲小苗培育及移植,当睡莲小苗长出第三片真叶后,把睡莲小苗分栽到装有无菌水和无菌细塘泥的锥形瓶内培养,当睡莲小苗长到第七至第八片真叶时,将睡莲苗移栽到种植盆内继续培养。本发明直接能大量繁殖实生苗,既省工省时,又节约成本。睡莲种子发芽整齐,睡莲种子消毒彻底,育苗成本低,出苗率达80%以上,克服了睡莲种子常规播种出苗不整齐以及外界因素的干扰,效果十分显著。

Description

睡莲实生无菌苗的培育方法
技术领域
本发明涉及一种水生植物的育苗方法,特别涉及一种睡莲的育苗方法,属于植物繁育技术领域。
背景技术
睡莲是睡莲科睡莲属( Nymphaea) 植物的泛称,睡莲以其丰富的花色、圣洁的寓意及茎叶对水中富营养物和有害物质的强吸附能力,深受人们的喜爱,被广泛应用于园林水景中。但是,睡莲实生苗初期阶段比较嫩弱,睡莲小苗容易受到外界因素的影响,在育苗过程也易受到蚊子及摇蚊幼虫的危害。因此,睡莲实生苗的培育必须排除这些外界因素的影响,无菌苗的培育无疑是解决这一问题的最佳途径。目前,高等植物无菌苗的培育一般是依靠组织培养技术来获得。如2005年1月19日公开的公开号为CN1565172的《一种生长藏红花无菌苗的方法》,此方法是将藏红花的愈伤组织接种到含有稀土素的培养基上培养,得到藏红花体胚货胚性愈伤组织,再将体胚或胚性愈伤组织接种到稀土素培养基上培养,得到藏红花无菌苗。再如2006年3月1日公开号为CN1739341的《安祖花无菌苗组织培养和试管苗炼苗移栽技术》,选用安祖花幼嫩器官组织培养获得无菌苗。对于上述技术都是选用愈伤组织作为外植体诱导无菌苗,愈伤组织的染色体倍性变化不稳定;对于睡莲来言,利用种子诱导愈伤组织的技术还不成熟,愈伤组织诱导率低,污染率很高,选择愈伤组织作为外植体培育无菌苗的方法无法实际使用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供一种睡莲实生无菌苗的培育方法,直接模拟睡莲幼苗的生长环境,突破现有睡莲实生无菌苗获得途径,从而能大量繁殖睡莲实生苗。
    本发明通过以下技术方案予以实现:                                            
一种睡莲实生无菌苗的培育方法,包括以下步骤:
   (1)种子采集处理
    选取形态饱满完整的睡莲种子,用灭菌水将睡莲种子冲洗2次,用灭菌的吸水纸吸干,用70%的酒精消毒1 分钟,再用10%的次氯酸钠消毒15 分钟,然后在无菌条件下再用灭菌水冲洗干净后放入无菌水瓶内催芽,催芽温度保持在26℃,光照度2500 Lx;
   (2)睡莲小苗培育及移植
    当睡莲小苗长出第三片真叶后,把睡莲小苗分栽到装有无菌水和无菌细塘泥的锥形瓶内培养,每瓶3-5苗,当睡莲小苗长到第七至第八片真叶时,将睡莲苗移栽到种植盆内继续培养。
本发明的目的还可以通过以下技术措施来进一步实现。
    前述的睡莲实生无菌苗的培育方法,其中步骤(2)中睡莲小苗培养条件为:温度26℃,光照2500 Lx,日光照12 小时;无菌水和无菌细塘泥均是经高温120℃和高压103kPa灭菌20分钟,冷却至室温后制得。
    本发明直接模拟睡莲幼苗的生长环境,突破传统意义上无菌苗获得的途径,从而能大量繁殖实生苗,既省工省时,又节约成本。睡莲种子发芽整齐、消毒彻底;育苗成本低。本发明能够保证整个培育过程的无菌化操作,种子发芽整齐,出苗率达80%以上,克服了睡莲种子常规播种出苗不整齐以及外界因素的干扰,效果十分显著。
    本发明的优点和特点,将通过下面优选实施例的非限制性说明进行解释,这些实施例是仅作为例子给出的。
具体实施方式
下面结合睡莲品种"彼得"自交种子实生无菌苗的培育方法,对本发明作进一步说明。
本实施例包括以下步骤:
   (1)种子采集处理
采种:在果实快成熟开裂前,将果实摘下放入有水的容器中,待果实成熟开裂释放出种子时,全留在容器中。
种子清洗:从果实中释放出的种子,带有膜质鞘漂浮在水面,并和萼片、花瓣和胶质物混合在一起。用细布将这些混合体包住,挤去胶质物和水分,然后用手轻轻揉搓。在水中漂洗去残渣和发育不完全漂浮的空粒,用清水将种子洗净即可贮存。种子一定要清洗干净,彻底清除杂物和发育不全的种子。
种子贮藏:种子洗净后,阴干3-5个小时,种子表面不带水,如暂时不用,用保鲜膜把种子包好,4℃温度下冷藏保存备用。
种子处理:睡莲种子采集于自然水体中,其携带的细菌种类和数量较多,种子的消毒至关重要。为了保证睡莲种子的无菌性和成活率,选取形态饱满完整的睡莲种子,用灭菌水将睡莲种子冲洗2次,用灭菌的吸水纸吸干,用70%的酒精消毒1 分钟,再用10%的次氯酸钠消毒15 分钟,然后在无菌条件下用灭菌水冲洗干净后放入无菌水瓶内催芽,催芽温度保持在26℃,光照度2500 Lx。这一措施既能保证睡莲种子消毒彻底,又能保证酒精和次氯酸钠对种子的胚造成损害。酒精和次氯酸钠属于常规药品,价格便宜,适用于大规模的消毒灭菌。
   (2)睡莲小苗培育及移植
当小苗长出第三片真叶后,把小苗分栽到装有无菌水和无菌细塘泥的锥形瓶内培养,每瓶3-5苗,培养条件为:温度26℃,光照2500 Lx,日光照12 小时;当小苗长到第七至第八片真叶时,将苗移栽到种植盆内继续培养。本发明利用细塘泥作为培养基质,原料来源简单,成本仅限于除杂和消毒,且细塘泥含有丰富的营养物质,不需要添加更多的有机附加物,能满足植物培养过程中对矿物质的需要。本发明避免了常规育苗过程中由于睡莲的实生苗比较细弱易受外界因素影响造成的损失,种子发芽整齐,出苗率达80%以上,克服了睡莲种子常规播种育苗困难的现象。
    除上述实施例外,本发明还可以有其他实施方式,凡采用等同替换或等效变形成的技术方案,均落在本发明要求的保护范围内。

Claims (3)

1.一种睡莲实生无菌苗的培育方法,其特征是,包括以下步骤:
 1)种子采集处理
 选取形态饱满完整的睡莲种子,用灭菌水将睡莲种子冲洗2次,用灭菌的吸水纸吸干,用70%的酒精消毒1 分钟,再用10%的次氯酸钠消毒15 分钟,然后在无菌条件下再用灭菌水冲洗干净后放入无菌水瓶内催芽,催芽温度保持在26℃,光照度2500 Lx;采种:在果实快成熟开裂前,将果实摘下放入有水的容器中,待果实成熟开裂释放出种子时,全留在容器中;
   (2)睡莲小苗培育及移植
    当睡莲小苗长出第三片真叶后,把睡莲小苗分栽到装有无菌水和无菌细塘泥的锥形瓶内培养,每瓶3-5苗,当睡莲小苗长到第七至第八片真叶时,将睡莲苗移栽到种植盆内继续培养。
2.根据权利要求1所述睡莲实生无菌苗的培育方法,其特征是,步骤(2)中睡莲小苗培养条件为:温度26℃,光照2500 Lx,日光照12 小时。
3.    根据权利要求1所述睡莲实生无菌苗的培育方法,其特征是,步骤(2)中无菌水和无菌细塘泥均是经高温120℃和高压103kPa灭菌20分钟,冷却至室温后制得。
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