CN105950482B - 一株产菊粉酶的菌株及其应用 - Google Patents

一株产菊粉酶的菌株及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105950482B
CN105950482B CN201610561058.2A CN201610561058A CN105950482B CN 105950482 B CN105950482 B CN 105950482B CN 201610561058 A CN201610561058 A CN 201610561058A CN 105950482 B CN105950482 B CN 105950482B
Authority
CN
China
Prior art keywords
inulin
inulinase
fermentation
bacterial strain
alpha
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610561058.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105950482A (zh
Inventor
欧阳嘉
许茜茜
刘鹏
郑兆娟
勇强
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Forestry University
Original Assignee
Nanjing Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Forestry University filed Critical Nanjing Forestry University
Priority to CN201610561058.2A priority Critical patent/CN105950482B/zh
Publication of CN105950482A publication Critical patent/CN105950482A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105950482B publication Critical patent/CN105950482B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/80—Penicillium
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/56—Lactic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01007—Inulinase (3.2.1.7)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明一株产菊粉酶的菌株，其分类命名为草酸青霉(Penicillum oxalicum)，菌株号为XL01，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2016355，保藏日期为2016年6月28日。以此青霉菌为发酵菌株，以菊粉为碳源、牛肉膏为氮源等组成发酵培养基发酵生产菊粉酶。发酵后经检测，该酶同时具有菊粉酶活性和转化酶活性，酶活最高可达到46.2IU/mL，33.6IU/mL。将菊粉酶添加到60‑120g/L菊粉溶液中发酵法制备D‑乳酸。实验结果表明同步糖化发酵乳酸得率远高于分步糖化发酵，发酵72h，D‑乳酸得率高达97.9‑100％。

Description

一株产菊粉酶的菌株及其应用
技术领域
本发明涉及一种生产菊粉酶的菌株，以及该菌株发酵生产的菊粉酶粗酶液转化菊粉发酵制备D-乳酸的方法，属于生物化工技术领域。
背景技术
近年来由于土壤盐碱化、土地荒漠化程度不断加深，如何利用大面积盐碱地发展农业已经成为目前亟待解决的重大课题。因此，如何选育耐盐性植物广受科学界的重视。菊芋、菊苣等植物抗逆性强，抗寒，抗盐碱，抗风沙，再生能力极强。种植这些植物不仅不占用耕地，还能使我国数千万亩滩涂地和盐碱地得到开发利用，有利于环境保护。将菊芋等植物经过简单去皮、切片、烘干、打粉获得菊粉。菊粉是一种储存性多糖，因而研究菊粉的生物炼制，制备经济附加值更高的化学品前景非常广阔。
菊粉很容易被菊粉酶水解成果糖和葡萄糖，菊粉酶属于水解酶类，一般微生物来源的菊粉酶同时具有菊粉酶活性(Inulinase,I)和转化酶活性(Sucrase,S)。产菊粉酶的菌株包括丝状真菌、酵母和细菌，其中研究较多的是曲霉属(Aspegillius sp.)、青霉属(Penicillium sp.)和克鲁维酵母属(Kluyveromyces sp.)。目前报道来看，酵母来源的菊粉酶转化酶活性要高于霉菌来源的转化酶活性。
本发明围绕生物催化转化制备D-乳酸，筛选到一株产菊粉酶的微生物，证明了此酶可以同步糖化发酵较高浓度菊粉得到高得率D-乳酸，具有潜在工业价值。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的微生物，它能够生产高酶活的菊粉酶。
本发明的另一个目的是提供该菊粉酶应用于D-乳酸生产的方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一株产菊粉酶的菌株，其分类命名为草酸青霉(Penicillum oxalicum)，菌株号为XL01，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学，邮编430072，保藏编号为CCTCC NO：M 2016355，保藏日期为2016年6月28日。该菌株是发明人于2015年1月从来源于江苏的菊芋生长处土壤中筛选得到的，该酶同时具有较高的菊粉酶活性和转化酶活性。
本发明所述草酸青霉为圆形，凸起，质地疏松，外观干燥不透明，呈绒毛状，直径1-3厘米的菌落。菌落正面呈青绿色背面呈棕黄色。菌株液体培养时菌丝球均匀悬浮于培养液。
对该菌株DNA提取及18srRNA基因PCR扩增，进行测序分析，如SEQIDNo：1所示，结果显示该菌株为草酸青霉(Penicillum oxalicum)。
上述产菊粉酶的菌株在生产菊粉酶中的应用也在本发明的保护范围之内。
具体的生产方法包括如下步骤：
(1)种子培养
草酸青霉(Penicillum oxalicum)于24-36℃(优选30℃)条件下在种子培养基中培养16-26h(优选20h)活化该菌株；
(2)发酵培养
将步骤(1)得到的种子液，以0.5％-3.5％(v/v)(优选2％v/v)接种量接种到发酵培养基中，在24-36℃发酵3-9天(优选7天)生产菊粉酶。
步骤(1)中，所述的种子培养基配方如下：蛋白胨2-8g/L，牛肉膏2-8g/L，葡萄糖5-10g/L，氯化钠2-5g/L，溶剂为水；优选的配方如下：蛋白胨5g/L，牛肉膏3g/L，葡萄糖5g/L，氯化钠5g/L，溶剂为水。
步骤(2)中，所述的发酵培养基配方如下：菊粉10-30g/L，牛肉膏10-30g/L，硫酸铵5g/L，氯化钠5g/L，七水合硫酸镁0.5g/L，溶剂为水，pH 3-7。
将步骤(2)得到的发酵液经离心收集上清液即为粗酶液，经检测该酶同时具有菊粉酶活性和转化酶活性，酶活最高可达到46.2IU/mL(I，菊粉酶活力)，33.6IU/mL(S，转化酶活力)。
本发明方法制备得到的菊粉酶最适反应温度为65℃，但在此高温下酶易失活。50℃时，菊粉酶活力较高，同时酶活稳定性较高，48h仍有86％左右菊粉酶活和转化酶活。本发明方法制备得到的菊粉酶最适反应pH为5，同时在此pH条件下保温2h剩余92％酶活。
上述产菊粉酶的菌株在转化菊粉制备D-乳酸中的应用也在本发明的保护范围之内。
具体的转化菊粉制备D-乳酸的方法包括如下步骤：
(1)草酸青霉(Penicillum oxalicum)发酵生产菊粉酶；
(2)向菊粉水溶液中添加乳酸菌和菊粉酶同步糖化发酵制备D-乳酸。
步骤(1)的方法同上。
步骤(2)中，菊粉水溶液中，菊粉的浓度为60-120g/L。
步骤(2)中，菊粉酶酶用量以转化酶活力计为30IU/g菊粉；乳酸菌接种量10％(优选德氏乳杆菌亚种保加利亚乳杆菌Lactobacillus bulgaricus CGMCC 1.6970)
其中，菊粉酶的定义如下：一个菊粉酶活力(I)单位定义为1min催化菊粉转化为1μmol果糖所需的酶量，一个转化酶活力(S)单位定义为1min催化1μmol蔗糖所需的酶量。
步骤(2)中，发酵条件为：反应温度37-47℃(优选42℃)，pH4.8-6.0(优选pH5.2)，反应48-72h；发酵前或者发酵过程中添加2/3菊粉重量的CaCO3作为中和剂。
本发明的有益效果是：本发明涉及一株从土壤中筛选而来的草酸青霉菌株，以此青霉菌为发酵菌株，以菊粉为碳源、牛肉膏为氮源等组成发酵培养基，在30℃，pH 5，接种量2％(v/v)，转速220rpm，发酵生产菊粉酶。发酵后经检测，该酶同时具有菊粉酶活性和转化酶活性，酶活最高可达到46.2IU/mL(I)，33.6IU/mL(S)。将菊粉酶添加到60-120g/L菊粉溶液中转化菊粉制备D-乳酸，发酵72h，得率为97.9％-100％。本发明方法利用草酸青霉生产菊粉酶，并将该酶应用于D-乳酸生产上，具有转化率高、产量高等特点，在制备乳酸化学品上具有很大的应用前景。
附图说明
图1为实施例5中菊粉在菊粉酶粗酶液催化下转化为单糖和低聚果糖的高效阴离子交换色谱图。
图2为实施例3中菊粉酶温度稳定性。
具体实施方式
以下结合应用实施例对本发明作进一步的阐述。实施实例是为说明而非限制本发明。本领域中任何普通技术人员能够理解这些实施实例不以任何方式限制本发明，可做适当的修改而不违背本发明的实质和偏离本发明的范围。
实施例1：一种产菊粉酶菌株的筛选和鉴定
(1)初筛
取菊芋生长处的土壤和菊芋堆放处的土壤，于含有无菌水和玻璃珠的锥形瓶中，稀释一定倍数涂布在以菊粉为唯一碳源的培养基上，30℃，培养3-7d，筛选出能利用菊粉的菌株50株。
(2)复筛
选取培养基上的单菌落接种于发酵培养基中，30℃，200rpm摇瓶发酵3天测定菊粉酶活性，选出其中发酵性能最优的一株菌。
(3)鉴定
对该菌株DNA提取及18srRNA基因PCR扩增，进行测序分析，如SEQIDNo：1所示，结果显示该菌株为草酸青霉。
在上述实验中，初筛培养基为：菊粉20g/L，硝酸钠2g/L，七水合硫酸镁1g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，七水合硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L。复筛活化培养基为：蛋白胨5g/L，牛肉膏3g/L，葡萄糖5g/L，氯化钠5g/L。发酵培养基为：菊粉20g/L，牛肉膏20g/L，硫酸铵5g/L，氯化钠5g/L，七水合硫酸镁0.5g/L。
实施例2：PenicillumoxalicumXL01发酵产菊粉酶
用PenicillumoxalicumXL01进行发酵产酶，发酵条件为30℃，pH 5，接种量2％(v/v)，转速220rpm，通过对不同发酵时间产酶的检测，最终选择发酵7天作为终止发酵时间。发酵时间对菊粉酶酶活的影响如表1。其中，一个菊粉酶活力(I)单位定义为1min催化菊粉转化为1μmol果糖所需的酶量，一个转化酶活力(S)单位定义为1min催化1μmol蔗糖所需的酶量。
表1 发酵时间对产酶的影响
实施例3：菊粉酶XL01最适反应温度和温度稳定性
50μL菊粉酶粗酶液加入到450μL 5％(v/v)菊粉溶液或5％(v/v)蔗糖溶液中，不同温度下(40-80℃)反应10分钟后，DNS法测定酶活，结果见表2，通过比较酶活大小确定最适反应温度为65℃。将粗酶液保温在不同温度下3天，隔一段时间检测不同温度下酶活大小，确定菊粉酶活和转化酶活温度稳定性，两种酶活温度稳定性趋势一致，相对酶活也很接近，图2是转化酶活温度稳定性。可以看出，65℃下酶活快速降低，仅保温半小时酶活就只剩初始酶活的40％以下。而50℃保温48h仍有初始酶活的86％。
表2 温度对酶活影响
实施例4：菊粉酶XL01最适反应pH和pH稳定性
50μL菊粉酶粗酶液加入到450μL 5％(v/v)菊粉溶液或5％(v/v)蔗糖溶液中(不同pH NaAc-HAc缓冲液溶解)，60℃下反应10分钟后，DNS法测定酶活，结果见表3，通过比较酶活大小确定最适反应pH。结果表明pH 5时酶活最高。将粗酶液经不同pH NaAc-HAc缓冲液稀释后立即测酶活作为各pH下的初始酶活，然后将粗酶稀释液在40℃下保温2h后测酶活，确定菊粉酶活和转化酶活pH稳定性，以相对酶活表示，见表4。可以看出，菊粉酶在pH 3-7内较为稳定，保温2h基本保持酶活在90％左右，其中，最适pH 5保温2h酶活约为初始酶活的92％。
表3 pH对酶活影响
表4 pH稳定性
实施例5：利用XL01发酵粗酶液催化酶解60g/L菊粉
向60g/L菊粉溶液中添加菊粉酶催化转化，转化条件为：底物菊粉浓度60g/L，菊粉酶酶用量为30IU/g菊粉(以S计)，pH 4.8，50℃，反应时间24h，降解得到单糖和低聚果糖浓度见表5(单位：g/L)，
表5 60g/L菊粉酶法催化降解
实施例6：利用XL01发酵粗酶液催化酶解120g/L菊粉
向120g/L菊粉溶液中添加菊粉酶催化转化，转化条件为：底物菊粉浓度120g/L，菊粉酶酶用量为30IU/g菊粉(以S计)，pH 4.8，50℃，反应时间48h，得到单糖和低聚果糖浓度见表6(单位：g/L)，转化率算法同实施例3。
表6 120g/L菊粉酶法催化降解
实施例7：利用菊粉酶粗酶液同步糖化发酵60g/L菊粉制备D-乳酸
向60g/L菊粉溶液中加入乳酸菌、菊粉酶进行同步糖化发酵制备D-乳酸，发酵条件为：菊粉浓度60g/L，乳酸菌接种量10％(v/v)，菊粉酶酶用量为30IU/g菊粉(以S计)，42℃，pH 5.2，40g/LCaCO3，发酵72h，D-乳酸浓度见表7。发酵48h，D-乳酸得率为97.5％，发酵72h，D-乳酸得率为100％。其中，
表7 60g/L菊粉同步糖化发酵制备D-乳酸
实施例8：利用菊粉酶粗酶液分步糖化发酵60g/L菊粉制备D-乳酸
向60g/L菊粉溶液中加入菊粉酶粗酶液催化48h获得菊粉酶解液，再向酶解液中接入10％(v/v)乳酸菌发酵制备D-乳酸，发酵条件为：菊粉酶解液60g/L，菊粉酶酶用量为30IU/g菊粉(以S计)，42℃，pH 5.2，40g/LCaCO3，发酵72h，D-乳酸浓度见表8。发酵48h，D-乳酸得率为38.8％，发酵72h，D-乳酸得率为42.1％。
表8 60g/L菊粉同步糖化发酵制备D-乳酸
实施例9：利用菊粉酶粗酶液同步糖化发酵120g/L菊粉制备D-乳酸
向120g/L菊粉溶液中加入乳酸菌、菊粉酶进行同步糖化发酵制备D-乳酸，发酵条件为：菊粉浓度120g/L，乳酸菌接种量10％，菊粉酶酶用量为30IU/g菊粉(以S计)，42℃，pH5.2，80g/LCaCO3，发酵72h，D-乳酸浓度见表9。发酵48h，D-乳酸得率为83.9％，发酵72h，D-乳酸得率为97.9％。
表9 120g/L菊粉同步糖化发酵制备D-乳酸

Claims (10)

1.一株产菊粉酶的菌株，其分类命名为草酸青霉(Penicillum oxalicum)，菌株号为XL01，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2016355，保藏日期为2016年6月28日。
2.权利要求1所述的产菊粉酶的菌株在生产菊粉酶中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，生产方法包括如下步骤：
(1)种子培养
草酸青霉(Penicillum oxalicum)于24-36℃条件下在种子培养基中培养16-26h活化该菌株；
(2)发酵培养
将步骤(1)得到的种子液，以0.5％-3.5％v/v接种量接种到发酵培养基中，在24-36℃，转速160-240rpm发酵3-9天生产菊粉酶。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述的种子培养基配方如下：蛋白胨2-8g/L，牛肉膏2-8g/L，葡萄糖5-10g/L，氯化钠2-5g/L，溶剂为水。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，所述的发酵培养基配方如下：菊粉10-30g/L，牛肉膏10-30g/L，硫酸铵5g/L，氯化钠5g/L，七水合硫酸镁0.5g/L，溶剂为水，pH 3-7。
6.权利要求1所述的产菊粉酶的菌株在转化菊粉制备D-乳酸中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，转化菊粉制备D-乳酸的方法包括如下步骤：
(1)草酸青霉(Penicillum oxalicum)发酵生产菊粉酶；
(2)向菊粉水溶液中添加乳酸菌和菊粉酶同步糖化发酵制备D-乳酸。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，菊粉水溶液中，菊粉的浓度为60-120g/L。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，菊粉酶酶用量以转化酶活力计为30IU/g菊粉；乳酸菌接种量为10％v/v。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，步骤(2)中，发酵条件为：反应温度37-47℃，pH 4.8-6.0，反应48-72h；发酵前或者发酵过程中添加2/3菊粉重量的CaCO3作为中和剂。
CN201610561058.2A 2016-07-15 2016-07-15 一株产菊粉酶的菌株及其应用 Active CN105950482B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610561058.2A CN105950482B (zh) 2016-07-15 2016-07-15 一株产菊粉酶的菌株及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610561058.2A CN105950482B (zh) 2016-07-15 2016-07-15 一株产菊粉酶的菌株及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105950482A CN105950482A (zh) 2016-09-21
CN105950482B true CN105950482B (zh) 2019-04-02

Family

ID=56900885

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610561058.2A Active CN105950482B (zh) 2016-07-15 2016-07-15 一株产菊粉酶的菌株及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105950482B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110396512B (zh) * 2019-07-26 2021-03-02 江南大学 一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用
CN111500486B (zh) * 2020-03-19 2022-04-15 南京工业大学 一株可以利用菊粉作为唯一碳源直接合成丁醇的菌株及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103232941A (zh) * 2013-04-04 2013-08-07 山东大学（威海） 一株高产菊粉酶真菌的制备方法
CN105308171A (zh) * 2012-07-19 2016-02-03 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 Agse缺陷菌株

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105308171A (zh) * 2012-07-19 2016-02-03 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 Agse缺陷菌株
CN103232941A (zh) * 2013-04-04 2013-08-07 山东大学（威海） 一株高产菊粉酶真菌的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
高产菊粉酶菌株的诱变选育及其酶的固定化;魏微;《中国优秀硕士学位论文全文论文数据库》;20111215;摘要 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN105950482A (zh) 2016-09-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101445786B (zh) 一株高产四甲基吡嗪的枯草芽孢杆菌及其发酵生产四甲基吡嗪的方法
CN105861346A (zh) 一株低产尿素、产风味的异常威克汉姆酵母菌株及其在食品生产中的应用
CN101717728B (zh) 一株青霉菌及其用于催化水解木质纤维素的用途
CN105861345A (zh) 一株低产尿素、产风味的库德里阿兹威毕赤酵母及其在食品发酵中的应用
CN105802879B (zh) 类芽孢杆菌d7及其在降解纤维素中的应用
CN105861348A (zh) 一株低产尿素的酿酒酵母及其在食品生产中的应用
CN109370924B (zh) 一株米曲霉za112及其应用
CN104498365A (zh) 一株产甲壳素脱乙酰酶菌株及在发酵产甲壳素脱乙酰酶中的应用
CN102080046A (zh) 一株高产漆酶菌株及发酵产漆酶的方法
CN105950482B (zh) 一株产菊粉酶的菌株及其应用
CN102766663B (zh) 桑黄活性多糖的制备方法
CN104762229B (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌株及其应用
CN101861794A (zh) 一种北冬虫夏草液体菌种的生产方法
CN104059857B (zh) 一株曲霉及其在制备果糖基转移酶中的应用
CN105441334B (zh) 产灰树花多糖的菌株及其应用
CN105838697A (zh) 一种海洋黑曲霉生产耐盐纤维素酶的发酵方法
Le et al. Optimisation of submerged culture conditions for the production of mycelial biomass and exopolysaccharide by Pleurotus nebrodensis
CN104673681A (zh) 一株桦褐孔菌qd04及其转化虎杖生成白藜芦醇、三萜皂苷和多糖的方法
CN106282145A (zh) 一种腺苷酸脱氨酶的液态发酵方法
CN107674839A (zh) 一种腐皮镰刀菌及其发酵生产右旋糖酐酶的方法
CN108192848A (zh) 一种产乳糖酶的嗜冷杆菌菌株及使用该菌株制备低温乳糖酶的方法
CN106754829A (zh) 一种利用芽孢杆菌hs17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用
CN107418901B (zh) 一种高产糖化酶的紫红曲霉菌及其生产红曲米的方法
CN106811486B (zh) 一种桔子皮发酵提取物及其制备方法和应用
CN105238710B (zh) 一种产加氧酶的枯草芽孢杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant