CN105943788A - 一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，可有效解决高血脂症的治疗用药问题，方法是，取鲜槐花，洗净，真空干燥，然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀，粉碎成细粉，即为槐花珍，包装，灭菌。本发明原料丰富，制备方法简单，有效用于治疗高脂血症，实现槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，是治疗高脂血症药物上的创新，经济和社会效益显著。

Description

一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用。

背景技术

高脂血症是指血脂水平过高，可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，如动脉粥样硬化、冠心病、胰腺炎等，高脂血症可分为原发性和继发性两类。原发性与先天性和遗传有关，是由于单基因缺陷或多基因缺陷，使参与脂蛋白转运和代谢的受体、酶或载脂蛋白异常所致，或由于环境因素(饮食、营养、药物)和通过未知的机制而致。继发性多发生于代谢性紊乱疾病(糖尿病、高血压、黏液性水肿、甲状腺功能低下、肥胖、肝肾疾病、肾上腺皮质功能亢进)，或与其他因素年龄、性别、季节、饮酒、吸烟、饮食、体力活动、精神紧张、情绪活动等有关。

高脂血症的临床表现主要是脂质在真皮内沉积所引起的黄色瘤和脂质在血管内皮沉积所引起的动脉硬化。尽管高脂血症可引起黄色瘤，但其发生率并不很高；而动脉粥样硬化的发生和发展又是一种缓慢渐进的过程。因此在通常情况下，多数患者并无明显症状和异常体征。不少人是由于其他原因进行血液生化检验时才发现有血浆脂蛋白水平升高。

现虽有治疗高脂血症的多种药物，但由于种种原因，其使用和疗效并不尽人意，因此，研制新的治疗高脂血症的药物是必需认真解决的技术问题。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，可有效解决高血脂症的治疗用药问题。

本发明解决的技术方案是，一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，该槐花珍是，取鲜槐花，洗净，真空干燥，然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀，粉碎成细粉，即为槐花珍(粉)，包装，灭菌。

本发明原料丰富，制备方法简单，有效用于治疗高脂血症，实现槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，是治疗高脂血症药物上的创新，经济和社会效益显著。

具体实施方式

以下结合具体情况对本发明的具体实施方式作详细说明。

本发明在具体实施中，一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，该槐花珍是，取鲜槐花，洗净，60℃真空干燥，然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀， 粉碎成过100目筛的细粉，即为槐花珍(粉)，包装，灭菌，鲜槐花与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草的重量比为3︰2︰1︰0.5︰0.3︰0.2。

在上述组分中，其中槐花是豆科植物的花及花蕾，鲜槐花是指从槐树上采集的新鲜槐花，槐花味苦，性平，无毒，具有清热、凉血、止血、降压的功效。对吐血、尿血、痔疮出血、风热目赤、高血压病、高脂血症、颈淋巴结核、血管硬化、大便带血、糖尿病、视网膜炎、银屑病等有显著疗效；还可以驱虫、治咽炎。槐花能增强毛细血管的抵抗力，减少血管通透性，可使脆性血管恢复弹性的功能，从而降血脂和防止血管硬化。

土炒怀山药是怀山药用用东墙土或灶心土(公知技术)，以增强补脾健胃的功效。

粉葛：粉葛是豆科，葛属植物葛的变种(拉丁学名：Pueraria lobata(Willd.)Ohwi var.thomsonii(Benth.)Vaniot der Maesen)，中药名，主治外感发热、头项强痛、麻疹初起、疹出不畅、温病口渴、消渴、泄泻、痢疾、高血压、冠心病。

玫瑰花甘、微苦，温。归肝、脾经，行气解郁，和血，止痛。用于肝胃气痛，食少呕恶，月经不调，跌扑伤痛。

陈皮味苦、辛，性温，归肺、脾经，理气健脾，燥湿化痰。

甘草气微，味甜而特殊。功能主治清热解毒、祛痰止咳、脘腹等。

上述组分的有效组合，互相支持，具有降血脂之功效，有效用于治疗高脂血症，实现槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，并经实地试验和应用取得了非常好的有益技术效果，有关试验资料如下：

1实验材料

1.1实验动物及环境

大鼠，种系：Wistar，等级：SPF级，雄性，180-220g，合格证号：37005400000040，提供单位：山东鲁抗医药股份有限公司。实验动物使用许可证号2015-005。饲料为消毒饲料，垫料为消毒垫料，均由河南省实验动物中心提供。饮水为消毒蒸馏水。饲养条件：温度20～25℃，相对湿度40％～60％，自然光照，每笼6只，常规饲养，隔天更换垫料。

1.2实验药品和试剂

槐花珍，河南中医药大学实验室提供，每袋10g，每次1-2袋，每天3次；；辛伐他汀片，山东鲁抗医药集团赛特有限责任公司；生理盐水，河南双鹤华利药业有限公司生产；丙二醇，天津市致远化学试剂有限公司；吐温-80，天津市富宇精细化工有限公司；脱氧胆酸钠，北京奥博星生物有限责任公司；丙硫氧嘧啶片，上海朝晖药业有限公司；胆固醇，上海吴县生物化学厂；总胆固醇(T-CHO)测试盒，南京建成生物工程研究所；甘油三酯(TG)测试盒，南 京建成生物工程研究所；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测试盒，南京建成生物工程研究所；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测试盒，南京建成生物工程研究所。

高脂肪乳的配置：油相:猪油25g、胆固醇10g、丙硫氧嘧啶片1g、吐温-80 25ml；水相:蒸馏水30ml、1.2-丙二醇20ml、脱氧胆酸钠2g。制备方法:油相:猪油25g放入200ml的烧杯里，加热至100℃，加入胆固醇10g熔化，再加入丙硫氧嘧啶片1g，充分混匀后加入吐温-80 25ml；水相:蒸馏水30ml加入到200ml烧杯里，60℃水浴锅水浴，加入1，2-丙二醇20ml，脱氧胆酸钠2g充分溶解；然后将水相加入油相，充分搅拌，冷却后放4℃冰箱保存备用。

高脂饲料的配置：猪油10％，蛋黄粉5％，胆固醇1％，丙硫氧嘧啶0.2％。脱氧胆酸钠0.5％，蔗糖5％，基础饲料78.3％的比例配置

1.3实验仪器

FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司；HWS12型电热恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；KDC-160HR高速冷冻离心机，科大创新股份有限公司中佳分公司；680型酶标仪，美国BIO-RAD公司；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司。

1.4统计学处理方法

数据分析用SPSS17.0医用统计包进行数据资料的统计学处理，计量资料用平均数±标准差表示，各组间比较采用单因素方差分析，方差检验齐者用LSD法，方差不齐者用Games-Howell法检验，等级资料采用Ridit检验。

实验方法与结果

取体重180-200g雄性大鼠60只，随机分为5组，每组12只。其中4组造高脂血症模型，分别上午灌服大、小剂量的槐花珍混悬液(8g/kg、4g/kg，0.4g/ml、0.2g/ml，2ml/100g)、辛伐他汀片混悬液(1.67mg/kg)和同体积的生理盐水(2ml/100g)，给药组上午给予相应药物，下午给高胆固醇乳2ml/100g；同时每天给予高脂饲料喂养，每天给药一次，连续给药21天。另一组为空白对照组，不造高脂血症模型，仅灌同体积的生理盐水。每周称体重一次，根据体重调整用药量。于第21日给药后2小时摘眼球取血，3000r/min离心5min，分离血清，分装后于－20℃冷冻保存测定生化指标，供测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇水平、低密度脂蛋白胆固醇水平，结果见表 1。称重后取肝脏组织少许，按1：9的比例加生理盐水，置于玻璃匀浆管内，全程冰上操作；研磨完全后3 000rpm·min^{－ 1}离心15min，制备肝脏匀浆，测肝匀浆TC、TG水平，结果见表 2。大鼠取血后脱颈锥处死，解剖取肝脏，称重，计算肝指数(肝脏比重＝肝重/体重×100％)，结果见表 3。各组取肝脏正中叶相同 部位的组织，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切片，苏木素-伊红(HE)染色，观察肝脏组织形态学变化。

2.1(1)胆固醇的测定

试剂组成及配制(96T)

操作表：

混匀后，37℃孵育10分钟，510nm，酶标仪测定各孔吸光度。

计算公式：血清中等液体样本计算公式：酶标仪比色：胆固醇量(mmol/L)＝(样本OD值—空白OD值)÷(标准OD值—空白OD值)×校准品浓度(5.17mmol/L)。

(2)甘油三脂的测定

试剂组成及配制(96T)

操作表：

混匀后，37℃孵育10分钟，510nm，酶标仪测定各孔吸光度。

计算公式：血清中等液体样本计算公式：酶标仪比色：胆固醇量(mmol/L)＝(样本OD值—空白OD值)÷(标准OD值—空白OD值)×校准品浓度(2.26mmol/L)。

(3)高密度蛋白胆固醇(HDL-C)的测定

试剂组成及配制(96T)

操作表：

混匀后，37℃孵育5分钟，546nm，酶标仪测定各孔吸光度A2。

计算公式：血清中等液体样本计算公式：酶标仪比色：HDL-C(mmol/L)＝{(样本A2值—样本A1值)—(空白A2值—空白A1值)}÷{(标准A2值—标准A1值)—(空白A2值—空白A1值)}×校准品浓度(1.8mmol/L)。

(4)低密度蛋白胆固醇(LDL-C)的测定

试剂组成及配制(96T)

操作表：

混匀后，37℃孵育5分钟，546nm，酶标仪测定各孔吸光度A2。

计算公式：血清中等液体样本计算公式：酶标仪比色：HDL-C(mmol/L)＝{(样本A2值—样本A1值)—(空白A2值—空白A1值)}÷({(标准A2值—标准A1值)—(空白A2值—空白A1值)}×校准品浓度(4.3mmol/L)。

(5)组织中胆固醇的测定

试剂组成及配制(96T)

操作表：

混匀后，37℃孵育10分钟，510nm，酶标仪测定各孔吸光度。

计算公式：组织中样本计算公式：酶标仪比色：胆固醇量(mmol/L)＝(样本OD值—空白OD值)÷(标准OD值—空白OD值)×校准品浓度(5.17mmol/L)÷待测蛋白浓度

(6)组织中甘油三脂的测定

试剂组成及配制(96T)

操作表：

混匀后，37℃孵育10分钟，510nm，酶标仪测定各孔吸光度。

计算公式：血清中等液体样本计算公式：酶标仪比色：胆固醇量(mmol/L)＝(样本OD值—空白OD值)÷(标准OD值—空白OD值)×校准品浓度(2.26mmol/L)÷待测蛋白浓度

3结果

表 1槐花珍对高血脂症模型大鼠血清TC、TG、HDLC及LDLC水平的影响(mmol/ml，n＝12)

*表示与模型组相比p<0.05；**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，模型组血清中TC、TG和LDLC水平均显著升高(P<0.01),血清HDLC水平显著降低(P<0.01)，说明造高血脂症模型成功；与模型组相比，大、小剂量槐花珍组和辛伐他汀组均可以显著降低血清TC、TG和LDLC水平(P<0.01)，显著升高HDLC水平(P<0.01)。以大剂量槐花珍组降血脂作用为强。

表 2槐花珍对高血脂症模型大鼠肝浆TC、TG水平的影响

*表示与模型组相比p<0.05；**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，模型组肝匀浆TC和TG含量均显著升高(P<0.01),说明肝脏已有脂肪蓄积；与模型组相比，大、小剂量槐花珍组和辛伐他汀组均可以显著降低肝匀浆TC中TG水平(P<0.01)。以大剂量槐花珍组降肝匀浆中TC中TG水平作用为强。

表 3槐花珍对高血脂症模型大鼠肝脏指数的影响

*表示与模型组相比p<0.05；**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，模型组大鼠肝脏指数显著升高(P<0.01)；与模型组相比，大剂量槐花珍组和辛伐他汀组均可以显著降低高脂血脂大鼠肝脏指数(P<0.01)，小剂量槐花珍组可明显降低肝脏指数(P<0.05)。以大剂量槐花珍组降肝指数作用为强。

表 4槐花珍对高血脂症模型大鼠体重的影响(g，)

*表示与模型组相比p<0.05；**表示与模型组相比p<0.01

从上表可看出，与空白组相比，在第7、14、21天模型组大鼠的体重增长显著很低(P<0.01)；与模型组相比，大、小剂量槐花珍组和辛伐他汀组均可以显著增大高脂血脂大鼠的体重(P<0.01)。

表 5槐花珍对高血脂症模型大鼠肝脏的影响(单位：个)

“-”正常；“+”轻度脂肪变性；“++”中度脂肪变性；“+++”重度脂肪变性。

由表 1可以看出，经Ridit检验，与空白组相比，模型组大鼠肝脏出现显著的脂肪变性的病理变化(P<0.01)，说明造高脂血症模型成功。与模型组相比，大剂量槐花珍组均可显著减轻大鼠肝脏的病理变化(P<0.01)，小剂量槐花珍组均可明显减轻大鼠肝脏的病理变化(P<0.05)。

各组肝脏组织形态观察：空白组大鼠肝脏基本无异常情况，肝小叶结构正常，细胞内未见脂滴；模型组大鼠肝小叶结构被破坏，肝细胞脂肪变性严重，充满大、小脂滴，肝细胞极度肿胀，成圆形，体积较正常明显增加，胞质内充满大量脂肪空泡,酷似泡沫细胞，界限不清；辛伐他汀组大鼠肝小叶结构正常，较少肝细胞内可见细小脂滴，肝脏脂肪变性不明显；大剂量槐花珍组大鼠肝小叶结构基本正常，大脂滴较少，小脂滴散在分布，肝脏脂肪变性显著减轻；中剂量槐花珍组大鼠肝小叶结构基本正常，大脂滴较少，小脂滴散在分布，肝脏脂肪变性明显减轻；小剂量槐花珍组大鼠脂变肝细胞极度肿胀，成圆形，体积较正常明显增加，胞质内充满大量脂肪空泡，酷似泡沫细胞，界限不清。

临床资料

按照”中华心血管病杂志”编委会血脂异常防治对策专题组”血脂异常防治建议”高脂血症诊断标准执行.TC≥5.20mmol/L,TG≥1.7mmol/L,LDL-C≥3.80mmol/L,HDL-C≤0.88mmol/L,其中任何一项指标异常为轻型；有2-3项指标异常,且经常出现头晕、目眩、无力等症状为中型。参照“中药新药临床研究指导原则”中药疗效评定标准制定本观测的标准：显效：临床症状消失，体征基本恢复正餐，TC水平下降>20％，TG>40％，HDL-C水平上升>0.26mmol/L；有效：临床症状和体征基本消失，TC水平下降≥10％--20％，TG水平下降≥1％--40％，HDL-C水平上升>0.10mmol/L--0.26mmol/L。

本观测总计轻、中型高脂血症68例，其中男42例，女26例，年龄42-66岁。病程6个月—2年。槐花珍：每次1-2袋，开水冲服，每天3次。每袋10g.一个月为一个疗程。疗程结束：68例轻、中型高高脂血症患者，10例有效、53例显效，5例无效。总有效率92.6％。

结论

经上述实验充分证明，大、小剂量槐花珍组和辛伐他汀组均可以显著降低血清TC、TG和LDLC水平，显著升高HDLC水平。大、小剂量槐花珍组均可以显著降低肝匀浆TC中TG水平，大剂量槐花珍组均可以显著降低高脂血脂大鼠肝脏指数，小剂量槐花珍组可明显降低肝脏指数，大、小剂量槐花珍组均可以显著增大高脂血脂大鼠的体重，大剂量槐花珍组均可显著减轻大鼠肝脏的病理变化，小剂量槐花珍组均可明显减轻大鼠肝脏的病理变化，以大剂量槐花珍组降血脂作用为强，可有效用于制备治疗高脂血症的药物，实现槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，具有实际的应用价值，经济和社会效益显著。

Claims (1)

1.一种槐花珍在制备治疗高血脂症药物中的应用，该槐花珍是，取鲜槐花，洗净，60℃真空干燥，然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀，粉碎成过100目筛的细粉，即为槐花珍，包装，灭菌，鲜槐花与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草的重量比为3︰2︰1︰0.5︰0.3︰0.2。