CN101890073B - 预防和治疗高血脂和脂肪肝的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种防治高血脂症和脂肪肝的中药组合物及其制备方法。该中药组合物选择3~9重量份的丹参和1~1.5重量份的苘麻子作为原料制备而成。采用中药制剂的常规方法,将本发明的中药组合物加入到制备不同内服剂型所需的各种基质和辅料中,制备成任何常规剂型的内服制剂。实验结果显示,丹参与苘麻子组合物能显著降低血清甘油三酯、总胆固醇水平以及肝脏组织甘油三酯、总胆固醇含量,显著减轻肝脏脂肪病变程度,对高血脂症和脂肪肝具有良好治疗作用。丹参与苘麻子组合物在降低血清TC、TG水平,减轻肝脏脂肪病变方面作用优于单味丹参和苘麻子。
Description
技术领域
本发明涉及中药组合物,具体指一种预防和治疗高血脂症和脂肪肝的中药组合物及其制备方法。
背景技术
随着饮食结构和生活方式的改变,高血脂症和脂肪肝的患病率不断上升,对人类健康和社会发展构成严重威胁。高血脂症是许多疾病的高危因素,脂肪肝包括酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝两大类,其中,以非酒精性脂肪肝为主。非酒精性脂肪肝是一类无过量饮酒史(每周饮酒精量小于40g),以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为临床病理特征,而酒精性脂肪肝伴随有过量饮酒史。近年来,随着肥胖和糖尿病的高发,NAFLD的发病率逐年升高,并被认为是隐原性肝硬化的主要原因之一,酒精性脂肪肝与肝硬化、肝癌的相关性更紧密。非酒精性脂肪肝和酒精性脂肪肝比较,防治非精酒性脂肪肝更具意义,因为人群中绝大多数是不饮酒者或偶尔饮酒者。至今NAFLD的发病机制尚不完全清楚,大多数学者认为,NAFLD不是一个独立的疾病,而是由于各种原因如肥胖、糖尿病、营养不良、感染、缺氧等使肝脏代谢发生障碍,致脂类物质的动态调节平衡失调,从而造成脂肪在肝细胞内蓄积的一种病理状态。其疾病谱包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(NASH)、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化四个从轻到重的病理阶段。单纯性脂肪肝是一病变较轻的临床过程,而脂肪性肝炎则是公认的肝脏纤维化和肝硬化的病因,据报道50 % NASH可进展为肝纤维化,15 %可发展成肝硬化,3 %可发展成终末期肝衰竭,需要进行肝移植。
目前临床上用于治疗非酒精性脂肪肝的措施主要包括(1)病因治疗;(2)饮食疗法;(3)药物治疗等。近年来用于非酒精性脂肪肝的药物主要有:A、降脂药物治疗,包括力平脂、洛伐他汀、普伐他汀、甘糖酯,银杏叶片等。B、保肝药物治疗,保肝药大体包括四类:促进肝细胞再生、协助肝细胞解毒、去除肝内过多脂肪和改善肝组织代谢的药物。如:改善胰岛素抵抗的双胍类药物,过氧化物酶体增殖激活剂受体的高亲和力配体胰岛素增敏剂噻唑烷二酮类药物(TZD),维生素B15的有效成分二氯醋酸二异丙胺具有促进胆碱合成、肝脂肪分解,抑制三酰甘油和胆固醇合成的作用。虽然保肝药物种类繁多,但多数药物缺乏严格的双盲试验,难以评估其确切疗效。且大多数药物通过肝脏代谢,因此对已有肝损害的患者来说,用药应慎重,且要求合理用药,以免加重肝功能损害。
中医古文献中并无与“脂肪肝”相对应的病名,但根据临床表现一般认为可将其归属于中医的积聚、肝痞、胁痛、痰浊、肥气、臌胀等范畴。由于化学合成药物治疗脂肪肝存在很大的副作用,而中医药治疗脂肪肝的治疗以疏肝利胆、健脾化湿、清热化痰、活血通络为原则,方法多样,疗效可靠,毒副作用小,且在治疗的同时,对其相关联疾病如肥胖、高血脂、高血压、糖尿病等有一定的治疗作用,具有广阔的前景。因此,开发和研究防治脂肪肝的天然药物,不仅具有重大社会意义,更有巨大市场前景。
发明内容
本发明的目的在于提供一种防治高血脂症和脂肪肝的中药组合物。
本发明的另一目的在于提供该中药组合物的制备方法。
本发明的用于预防和治疗高血脂症和脂肪肝的中药组合物选择3~9重量份的丹参和1~1.5重量份的苘麻子作为活性组分进行组合,在该配比范围内,丹参和苘麻子具备最佳的协同作用,对降脂和抗脂肪肝具有较好疗效。
本发明中丹参是指唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的根,具有活血化瘀作用。本发明所述的苘麻子是指锦葵科植物苘麻Abutilon theophrastii Medic.的干燥成熟种子。别名冬葵子、青麻、葵子、白麻子,具有清热利湿化痰作用。
本发明中,组合物疗效最佳的重量配比为:丹参9份,苘麻子1份。
可以采用以下三种方法制备本发明的中药组合物的活性组分:
方法一:将配比量的丹参、苘麻子加入提取器中,加药材重量6~10倍水浸泡15分钟~1小时,加热煎煮,第一次1.5小时,第二次1小时,过滤,滤液加热挥发至稠膏状,40℃~65℃烘干,粉碎得浸膏粉。
方法二:将配比量的丹参药材40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,加入丹参药材重量10~16倍无水乙醇于70℃以下回流提取3次,每次1.5小时,过滤得滤液,减压回收乙醇得浸膏,再用浸膏重量6~10倍石油醚提取浸膏,直到石油醚提取液颜色接近石油醚本色,过滤,滤液减压回收得丹参油备用;另将配比量的苘麻子药材于40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,加苘麻子药材重量8~12倍石油醚(60℃-90℃),于常温下过夜浸提2次,过滤,合并滤液减压回收,得苘麻子油。将丹参油和苘麻子油混合,得本发明中药组合物的活性组分。
方法三:将配比量的丹参在40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,另将配比量的苘麻子药材于40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,分别或混和后利用超临界CO2萃取技术提取,工艺条件为:萃取温度40~50℃,萃取时间1.5 h,萃取压力20~35MPa,乙醇浓度900 ml/L。将丹参油和苘麻子油混合,得本发明中药组合物的活性组分。
可以采用中药制剂的常规方法,将本发明的中药组合物的活性组分加入到制备不同内服剂型所需的各种基质和辅料中,制备成任何常规剂型的内服制剂。如可以将方法一所得到的浸膏粉直接制成茶剂、也可包于软胶囊内,制成胶囊剂,还可加入其它制剂辅料制成片剂、颗粒剂等剂型。将方法二和三得到的丹参油和苘麻子油混合物包于软胶囊内,或者加入适当辅料制成片剂、胶囊等剂型。
根据中医对脂肪肝病的认识,以清热利湿化痰、活血通络为治则,发明人利用丹参油部位与苘麻子油组合,并经过实验得到协同作用最好,效果最佳的配比,从而提出本发明的中药组合物。由动物实验结果显示,丹参与苘麻子组合物能显著降低血清甘油三酯、总胆固醇水平以及肝脏组织甘油三酯、总胆固醇含量,显著减轻肝脏脂肪病变程度,对高血脂症和脂肪肝具有良好治疗作用。丹参与苘麻子组合物在降低血清TC、TG水平,减轻肝脏脂肪病变方面作用优于单味丹参和苘麻子。并且,本发明制备方法简单,制备成本低,便于大规模工业化生产。
附图说明
图1是模型组HE染色光镜下肝组织切片图;
图2是正常组HE染色光镜下肝组织切片图;
图3是中药高剂量组HE染色光镜下肝组织切片图;
图4是中药中剂量组HE染色光镜下肝组织切片图;
图5是中药低剂量组HE染色光镜下肝组织切片图;
图6是西药组HE染色光镜下肝组织切片图;
图7是苘麻子油组HE染色光镜下肝组织切片图;
图8是丹参组HE染色光镜下肝组织切片图;
图9是各实验组肝细胞脂肪变性程度对照表。
具体实施方式
实施例1
1275g丹参药材40℃烘干,粉碎成100目药粉,加药材重量10倍的无水乙醇于60℃回流提取3次,过滤得滤液,滤液合并减压回收乙醇得浸膏,再用312g苘麻子药材重量5倍石油醚提取浸膏,过滤,滤液回收得丹参油7.2ml备用。另将312g苘麻子药材于40℃烘干,粉碎成100目药粉,加10倍量石油醚(60℃-90℃),于常温下过夜浸提,过滤,合并滤液减压回收,得苘麻子油50ml。将丹参油和苘麻子油混合,包于软胶囊内,制成胶囊剂。
实施例2
2550g 丹参和312g苘麻子加入提取器中,加药材重量6倍水浸泡1小时,加热煎煮,第一次1.5小时,第二次1小时,过滤,滤液加热挥发至稠膏状,40℃烘干,粉碎得浸膏粉。将浸膏粉直接制成茶剂,或装袋制成袋泡剂。
实施例3
635g丹参药材50℃烘干,粉碎成100目药粉,另将312g苘麻子药材于40℃烘干,粉碎成100目药粉,分别利用超临界CO2萃取技术提取,工艺条件为:萃取温度50℃,萃取时间1.5 h,萃取压力35MPa,乙醇浓度900 ml/L。将丹参油和苘麻子油混合,包于软胶囊内,制成胶囊剂。
实施例4 本发明的药效学实验
一、实验材料
1.实验动物
SD大鼠63只,清洁级,雄性,体重180-200g购于上海斯莱克实验动物有限责任公司,合格证号:SCXK(沪)2002-0010号。
2.实验药物
(1)中药实验组
A.组合物高剂量组:2550g丹参生药材,312g苘麻子生药材,以实施例1所述的方法制备19g丹参油浸膏,50mL苘麻子油,将丹参油浸膏溶于苘麻子油备用。
B.组合物中剂量组:1275g丹参生药材,312g苘麻子生药材,以实施例1所述的方法制备9.5g丹参油浸膏19g, 50mL苘麻子油,将丹参油浸膏溶于苘麻子油备用。
C.组合物低剂量组:637.5g丹参生药材,312g苘麻子生药材,以实施例1所述的方法制备4.25g丹参油浸膏,50mL苘麻子油,将丹参油浸膏溶于苘麻子油备用。
D.丹参油组:取丹参药材,以实施例3所述的超临界CO2萃取技术萃取丹参油备用。
E.苘麻子油组:取苘麻子药材,以实施例3所述的超临界CO2萃取技术萃取苘麻子油备用。
(2)易善复胶囊(多烯磷脂酰胆碱胶囊):228mg/粒,赛诺菲安万特(北京)制药有限公司生产(批号D9073),使用前用蒸馏水超声乳化,配制成每毫升含多烯磷脂酰胆碱132.4 mg。
实验试剂
胆固醇 | 中国医药(集团)上海化学试剂公司 |
胆酸钠 | 上海蓝季科特发展有限公司 |
丙硫氧嘧啶 | 上海朝晖药业有限公司 |
猪油、蔗糖 | 购自农贸市场 |
主要仪器
MP-120-2型电子天平 | 上海第二天平仪器厂 |
LEICA DM LB2型双目显微镜 | 麦克奥迪实业集团公司 |
Motic B5 显微摄像系统 | 麦克奥迪实业集团公司 |
Shandon325型石蜡切片机 | 英国Shandon公司产 |
TG16-WS台式高速离心机 | 湖南湘仪实验仪器开发有限公司 |
电热恒温培养箱 | 北京科伟永兴仪器有限公司 |
CL-7200全自动生化分析仪 | 日本岛津 |
低温冰箱 | 日本三洋公司 |
实验方法
非酒精性脂肪肝大鼠模型的建立
以高脂饲料胆固醇2%、胆酸钠0.5%、丙硫氧嘧啶0.2%、蔗糖5%、猪油10%、基础饲料82.3%连续喂养8周,造成NAFLD模型。
实验分组及给药
83只大鼠随机选取10只为空白组,普通饲料喂养;剩余83只给予高脂饲料喂养8周,于8周末随机选取3只处死,验证造模成功后改普通饲料喂养,并随机分为模型组、组合物高剂量组、组合物中剂量组、组合物低剂量组、丹参油组、苘麻子油组、西药组。丹参油组、苘麻子油组按每天0.03g/100g体重灌胃;组合物高剂量组、组合物中剂量组、组合物低剂量和西药组(多烯磷脂酰胆碱)组分别按每天0.12ml/100g体重灌胃;正常对照组、模型组给药相同体积的蒸馏水灌胃。
取材
灌胃给药4周后处死各组大鼠,处死前禁食禁水12h,予3%戊巴比妥钠麻醉后,腹主动脉取血,分离血清,置-20℃冰箱保存待测;取同一部位肝组织两块,一块浸入4%多聚甲醛溶液中,固定48小时,取块石蜡包埋,切片观察病理改变;另一块匀浆测肝组织TC、TG。
观察指标及方法
2.4.1观察各组新鲜肝脏色泽、形态,称肝脏湿重,测算肝脏指数。
2.4.2HE染色镜下观察肝脏组织病理改变。
肝脏称重后置4%多聚甲醛固定,梯度酒精脱水,石蜡包埋,切片,常规HE染色,置光学显微镜下观察。HE染色镜下评估脂肪变性程度和计算炎症活动度计分。肝细胞脂肪变性程度判断标准,根据肝小叶内含脂滴细胞数与总细胞数之比,0为阴性,<1/3为+,1/3-2/3为++,>2/3为+++,几乎均成脂滴肝细胞为++++。
2.4.2肝脏TC、TG测定
称取500mg新鲜肝组织匀浆,参照文献介绍[89]脂质抽提法,按1:9与氯仿-甲醇混合液(1:1)充分混匀,静置过夜。3000转/min离心15min,取上清液于全自动生化仪检测TC、TG。
2.4.3 全自动生化分析仪测定血清AST、ALT、TC、TG、HDL-C、LDL-C。
统计学处理
实验结果
肝脏组织病理学观察
3.1.1肉眼观察:
正常组肝表面颜色普遍暗红,色泽鲜亮,中等硬度,切面略有颗粒感,无油腻感。模型组多数肝脏表面颜色发黄,肝脏体积明显增大,包膜紧张,部分肝脏呈奶黄色,切面油腻有油滴,无颗粒感。其余各用药组颜色、质地介于两者之间。肝湿重及肝指数(肝湿重/体重×100%)变化见表1。
组别 | 体重(g) | 肝脏湿重(g) | 肝脏指数(%) |
正常对照组 | 467.5±52.3△ | 13.11±1.91 | 2.81±0.17△ |
模型组 | 393.0±31.4 | 13.81±2.02 | 3.48±0.29 |
组合物高剂量组 | 399.9±28.8 | 14.0±1.47 | 3.51±0.19 |
组合物中剂量组 | 397.2±36.3 | 13.82±1.68 | 3.47±0.19 |
组合物低剂量组 | 389.3±36.0 | 13.58±1.24 | 3.50±0.21 |
丹参油组 | 384.4±35.2 | 13.92±1.28 | 3.49±0.21 |
苘麻子油组 | 390.5±34.7 | 13.47±1.75 | 3.46±0.19 |
西药组 | 386.6±36.1 | 12.88±1.27 | 3.21±0.22 |
与模型组比较△P<0.01
3.1.2 HE染色光镜下观察:
见附图1-8,空白组肝组织形态结果正常;模型组肝小叶内肝细胞, 弥漫性脂肪变,大泡形与小泡形均存在, 部分肝细胞肿胀,胞质疏松呈气球样改变。中药各组及西药组病理改变介于正常空白组与模型组之间。组合物各剂量组优于丹参油组和苘麻子油组。各组肝细胞脂肪变性程度见图9。
肝脏组织TC、TG含量:空白组、药物各治疗组及西药组肝脏TC、TG含量比模型组均明显降低(P<0.01或P<0.05);空白组、药物各剂量组、西药组之间比较肝脏TC含量无明显差异;组合高剂量组、组合中剂量组、西药组之间比较肝脏TG含量无明显差异,丹参油组和苘麻子油组降肝脏TG效应不如组合物高、中剂量组(P<0.05),见表2
组别 | 肝TC(mmol/g) | 肝TG(mmol/g) |
正常空白组 | 1.05±0.20* | 0.27±0.11* |
模型组 | 1.57±0.26 | 0.51±0.12 |
组合物高剂量组 | 1.16±0.23* | 0.31±0.08* |
组合物中剂量组 | 1.18±0.33* | 0.35±0.07* |
组合物低剂量组 | 1.21±0.24* | 0.41±0.12△ |
丹参油组 | 1.28±0.25* | 0.45±0.06△▲ |
苘麻子油组 | 1.31±0.21* | 0.46±0.07△▲ |
西药组 | 1.15±0.14* | 0.33±0.09* |
与模型组比较*P<0.01、△P<0.05;与组合物高、中剂量组比较▲P<0.05
血清AST(天门冬氨酸氨基转移酶)、ALT(丙氨酸氨基转移酶)、TC(总胆固醇)、TG(甘油三脂)、HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白胆固醇浓度)
AST、ALT浓度各组之间比较无明显差异; 空白组、中药各治疗组及西药组TC浓度明显低于模型组(P<0.01),中药各治疗组及西药组之间TC浓度无明显差异;空白组、组合物高剂量组及西药组TG浓度明显低于模型组(P<0.05),组很物各剂量组、西药组之间比较无明显差异;模型组与空白组之间比较HDL-C浓度无明显差异,空白组、组合物各治疗组及西药组LDL-C浓度明显低于模型组(P<0.01)。丹参油组与各组合物组比较,在AST、ALT、TC、TG无显著差异,但在HDL-C方面,组合物高剂量组显著优于丹参油组,LDL-C方面,组合物低剂量组显著优于丹参油组。见表3。
组别 | AST(u/l) | ALT(u/l) | TC(mmol/l) | TG(mmol/l) | HDL-C(mmol/l) | LDL-C(mmol/l) |
正常空白组 | 168.1±69.5 | 46.78±9.87 | 1.73±0.56* | 0.60±0.18▲ | 0.44±0.10 | 0.58±0.12* |
模型组 | 183.5±50.8 | 68.74±11.8 | 2.55±0.68 | 1.06±0.63 | 0.48±0.06 | 1.33±0.45 |
组合物高剂量 | 151.1±55.5 | 57.56±17.5 | 1.43±0.54* | 0.70±0.32▲ | 0.54±0.09▲ | 0.73±0.11* |
组合物中剂量 | 179.4±57.1 | 66.97±18.7 | 1.43±0.44* | 0.75±0.23 | 0.53±0.16▲ | 0.64±0.11* |
组合物低剂量 | 183.3±49.9 | 68.24±18.2 | 1.54±0.50* | 0.82±0.61 | 0.39±0.06 | 0.48±0.13*▲ |
丹参油组 | 180.4±50.3 | 67.2±20.1 | 1.47±0.43 | 0.78±0.31 | 0.42±0.07 | 0.71±0.15* |
苘麻子油组 | 179.7±48.6 | 68.1±17.5 | 1.48±0.37 | 0.74±0.34 | 0.41±0.08 | 0.68±0.17* |
西药组 | 173.2±64.0 | 46.62±14.2 | 1.89±0.61* | 0.70±0.23▲ | 0.57±0.10*# | 0.76±0.14* |
TC:与模型组比较* P<0.01;
TG:与模型组比较▲P<0.05,
HDL-C:与低剂量组比较* P<0.01,▲P<0.05;与空白组比较# P<0.05
LDL-C: 与模型组比较* P<0.01;与高剂量组、西药组比较▲P<0.01
4.结论
由动物实验结果可知,丹参与苘麻子组合物能显著降低血清甘油三酯、总胆固醇水平以及肝脏组织甘油三酯、总胆固醇含量,显著减轻肝脏脂肪病变程度,对高血脂症和脂肪肝具有良好治疗作用。丹参与苘麻子组合物在降低血清TC、TG水平,减轻肝脏脂肪病变方面优于丹参油和苘麻子油。
Claims (7)
1.一种预防和治疗高血脂与脂肪肝的中药组合物,其特征在于:该中药组合物由3~9重量份的丹参和1~1.5重量份的苘麻子作为原料制备而成。
2.如权利要求1所述的中药组合物,其特征在于:丹参重量份为9份,苘麻子重量份为1份。
3.如权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法,其特征在于包含下述步骤:将配比量的丹参、苘麻子加入提取器中,加药材重量6~10倍水浸泡15分钟~1小时,加热煎煮,第一次1.5小时,第二次1小时,过滤,滤液加热挥发至稠膏状,40℃~65℃烘干,粉碎得浸膏粉,即得所述中药组合物。
4.如权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法,其特征在于包含下述步骤:将配比量的丹参药材40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,加入丹参药材重量10~16倍无水乙醇于70℃以下回流提取3次,每次1.5小时,过滤得滤液,减压回收乙醇得浸膏,再用浸膏重量6~10倍石油醚提取浸膏,直到石油醚提取液颜色接近石油醚本色,过滤,滤液减压回收得丹参油备用;另将配比量的苘麻子药材于40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,加苘麻子药材重量8~12倍石油醚,于常温下过夜浸提2次,过滤,合并滤液减压回收,得苘麻子油;将丹参油和苘麻子油混合,得所述中药组合物。
5.如权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法,其特征在于包含下述步骤:将配比量的丹参在40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,另将配比量的苘麻子药材于40℃~50℃烘干,粉碎成100~200目药粉,分别或混和后利用超临界CO2萃取技术提取,工艺条件为:萃取温度40~50℃,萃取时间1.5 h,萃取压力20~35MPa,乙醇浓度900 ml/L;将丹参油和苘麻子油混合,得所述中药组合物。
6.由权利要求1或2所述的中药组合物制成的中药内服制剂。
7.如权利要求6所述的中药内服制剂,其特征在于:所述制剂为胶囊剂。
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