CN103977014B - 一种应用于治疗代谢综合征的药物 - Google Patents
一种应用于治疗代谢综合征的药物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,其药用成分按质量百分比计,包括:木通皂苷D60‑90%,姜黄素10‑30%。本发明所述药物可应用于治疗代谢综合征。在实际应用中可以制成片剂、胶囊或者针剂。本发明的有益效果是本发明所述药物可以调节患者的蛋白质、脂质和碳水化合物的代谢过程,对代谢综合征起到很好的预防和治疗的作用。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,主要涉及到一种应用于治疗代谢综合征的药物。
背景技术
代谢综合征的特征在于一个人所具有的一组代谢风险因素,包括腹部肥胖、胰岛素抵抗或葡萄糖不耐性、致动脉粥样硬化的血脂异常、血栓前状态(prothromboti cstate)、促炎症状态(proinflammatory state)和高血压。如果患者显示至少三种以下症状,成人治疗小组(AdultTreatment Panel)就定义为代谢综合征:腰围测量男性至少40英寸,女性35英寸;血清甘油三酯水平至少150mg/dl;HDL胆固醇水平男性低于40mg/dl,女性低于50mg/dl,血压至少135/80mmHg和血糖(血清葡萄糖)至少110mg/dl。据估计,美国高达25%的人口受代谢综合征困扰。代谢综合征的根本原因是胰岛素抵抗,其中胰岛素摄取血中葡萄糖的能力削弱。这导致在进食后葡萄糖水平维持升高状态,而胰腺对进食是通过分泌胰岛素作出响应的。如果不治疗,代谢综合征显著增加II型糖尿病、心血管疾病和涉及动脉壁中粥样斑块聚集的其它疾病的风险。目前,治疗代谢综合征的药物中一般都是重点治疗其中一种代谢紊乱。
鉴于上述描述,亟待有一种对代谢综合征患者的蛋白质、脂质和碳水化合物代谢的水平均有调节和治疗作用的药物的出现。
发明内容
本发明的目的在于提供一种应用于治疗代谢综合征的药物,以期能够从蛋白质、脂质和碳水化合物代谢的三个水平同时进行调节,达到好的治疗和预防效果。
为了实现上述目的和一些其他目的,本发明提供一种应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,其药用成分按质量百分比计,包括:
木通皂苷D 60-90%
姜黄素 10-30%
优选的是,药用成分按质量百分比计,包括:
木通皂苷D 90%
姜黄素 10%
优选的是,所述应用于治疗代谢综合征的药物可制成片剂、胶囊或者针剂。
一种药物应用于治疗代谢综合征。
优选的是,所述药物用于治疗和预防糖尿病、肥胖症、胰岛素抗性、高胆固醇血症和高血压。
优选的是,所述药物用于治疗和预防高脂血症。
优选的是,所述药物用于治疗和预防增加的血清三酰基甘油浓度。
优选的是,所述糖尿病患者的空腹血糖水平介于125mg/dl-200mg/dl之间。
优选的是,所述药物使所述患者的空腹血糖水平降低至110mg/dl以下。
对于被定义为患有代谢综合征的人员而言,他们必须具有:
中心性肥胖(对于欧洲男性(Europid man)定义为腰围≥94cm,以及对于欧洲女性(Europid woman)≥80cm,并且针对其他组为种族特异性数值)
加上以下4种因素的任何两种:
升高的甘油三酯(TG)水平:≥150mg/dL(1.7mmol/L);
或针对这种脂质异常的特异性治疗,降低的高密度脂蛋白(HDL)胆固醇:在男性中<40mg/dL(1.03mmol/L*),以及在女性中<50mg/dL(1.29mmol/L*),或针对这种脂质异常的特异性治疗;
升高的血压(BP):收缩BP≥130或舒张BP≥85mmHg,或先前诊断的高血压的治疗;
升高的空腹血糖(FPG)≥100mg/dL(5.6mmol/L),或先前诊断的2型糖尿病,如果高于5.6mmol/L或100mg/dL。
木通皂苷D是中药续断中的主要有效成分之一,其含量达到2%以上,木通皂苷D具有降低血脂的作用。
姜黄素是一种从姜科植物姜黄等的根茎中提取得到的黄色色素。为酸性多酚类物质,主链为不饱和脂族及芳香族基团。通常用作肉类食品着色剂和酸碱指示剂,同时具有抗炎、抗氧化等药理作用。
本发明的有益效果是本发明所述药物可以调节患者的蛋白质、脂质和碳水化合物的代谢过程,对代谢综合征起到很好的预防和治疗的作用,本发明所述药物的药用成分木通皂苷D和姜黄素是从天然中药物中提炼获得,提炼方法比较简单,木通皂苷D和姜黄素的毒性较低,符合国家安全用药标准,尤其是是姜黄素还是国际上认可的可食用色素,开发前景好,且这两种药用成分在普通药店即可买到,价格适中,按照本发明所述药物的质量百分比配比后应用于治疗代谢综合征效果好,适用于普通患者,可进行大规模生产。
附图说明
图1为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对肝细胞活力的影响。
图2为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对棕榈酸PA诱导的肝细胞内脂质沉积影响(图2a为标准组、图2b模型组、图2c-图2e为用药组)。
图3为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对PA诱导的肝细胞内脂质含量变化分析(图3a为标准组、图3b模型组、图3c-图3e为用药组)。
图4为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物PA诱导的肝细胞凋亡率的影响的FlowJo软件分析。
图5为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物PA诱导的肝细胞凋亡率的影响的柱形图。
图6为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对小鼠血清转氨酶水平的影响。
图7为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对脂肪肝小鼠肝脏脂肪变性的影响。
图8为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对于预防胰岛素抵抗的药效学研究。
图9为本发明所述应用于治疗代谢综合征的药物对脂肪细胞糖代谢的影响。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
实施例1
应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,其药用成分按质量百分比计,包括:木通皂苷D70%,姜黄素30%。
实施例2
应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,其药用成分按质量百分比计,包括:木通皂苷D80%,姜黄素20%。
实施例3
应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,其药用成分按质量百分比计,包括:木通皂苷D90%,姜黄素10%。
应用本发明的治疗代谢综合征的药物按照实施例3中药物的质量百分比配制基础药物并应用试验方法检测药物应用于治疗代谢综合征的治疗效果:
细胞实验是将上述比例的药物溶解于二甲基亚砜(DMSO)中进行加药,小鼠实验是将上述比例药物制成混悬液进行口服灌胃给药。
1、木通皂苷D和姜黄素联合用药(MG)对肝细胞(BRL)生长、增殖的作用
材料来源:大鼠BRL细胞;
DMEM培养基(Gibco);
涉及试剂:胎牛血清(FBS,Gibco);二甲基亚砜(DMSO);四甲基偶氮唑盐(MTT,sigma);
方法:取对数生长期BRL细胞,消化后制成单细胞悬液,用培养基调整细胞浓度为5×104/mL的细胞于96孔板培养,待细胞贴壁,更换培养基,向培养基中加入木通皂苷D和姜黄素混合药物,使混合药物在培养基中的终浓度为25、50、100、200、400、800μmol/L,孵育48h后,每孔加入10μL MTT(5mg/mL),在细胞培养箱内继续孵育4h,弃去培养基,每孔加入150μLDMSO,用酶标仪在492nm波长处检测每孔的光密度。每组设6个复孔,至少重复3次,计算细胞生长抑制率。结果见图1。
由图1结果显示,随着药物浓度的提高细胞活力逐渐降低,细胞存活率逐渐下降,说明本发明应用于治疗代谢综合征的药物对细胞蛋白质代谢具有显著的影响。
2.木通皂苷D和姜黄素联合用药对脂肪肝细胞脂质沉积的影响
取对数期细胞,细胞计数后接种于6孔板中,每孔10000个,细胞分组为:正常组(用正常培养基培养)、模型组(加入棕榈酸PA诱导)、木通皂苷D和姜黄素联合用药低、中、高浓度(25、50、100μmol/L)预保护组。待细胞培养48h后弃去培养基,磷酸盐缓冲液PBS冲洗3次,4%中性甲醛固定30min,氟化硼二吡咯(Bodipy)493/503荧光染色30min,PBS冲洗3次,荧光显微镜下摄片、观察细胞内脂质沉积情况,结果见图2,荧光显微镜下可见正常组图2a和模型组(48h)图2b肝细胞排列紧密,边缘清晰;模型组肝细胞细胞质周围均可见明显脂滴,显示强烈绿色荧光;木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组(图2c、图2d和图2e)肝细胞内脂滴数量较模型组相比均有明显减少,荧光强度减弱。采用DMSO溶解染料后,检测吸光度(OD),结果见图3,相比起正常组图3a,模型组图3b的OD值显著升高(P<0.05);相比起模型组,木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组(图3c、图3d和图3e)的OD值均有降低,其中高剂量组有统计学意义(P<0.05)(见图3),表明木通皂苷D和姜黄素联合用药可抑制肝细胞内脂质沉积。
3.木通皂苷D和姜黄素联合用药对非酒精脂肪肝细胞凋亡的影响
取对数期细胞,细胞计数后接种于6孔板中,每孔10000个,细胞分组为:正常组(用正常培养基培养)、模型组(加入PA诱导)、木通皂苷D和姜黄素联合用药低、中、高浓度(25、50、100μmol/L)预保护组。待细胞培养48h后弃去培养基,PBS冲洗3次,用不含乙二胺四乙酸(EDTA)的胰酶消化收集;用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;加入500μL的结合缓冲液(Binding Buffer)悬浮细胞;加入5μL膜联蛋白V(Annexin V-FITC)混匀后,加入5μL碘化丙啶(Propidium Iodide),混匀;室温、避光、反应5~15min;在1h内,将细胞置激发光为488nm波长的流式细胞仪上检测。上机测定时获取1×105个以上细胞,重复3次。得到的数据用Flow Jo软件分析结果(如图4所示)并画柱状图如图5所示。正常对照组(图4a)、标准组PA(图4b)、木通皂苷D和姜黄素联合用药不同浓度(25μmol/L-图4c、50μmol/L-图4d、100μmol/L-图4e)干预保护组细胞凋亡率分别为1.00±0.10、6.80±0.45、6.60±0.10、4.90±0.15、1.70±0.10。棕榈酸PA诱导的BRL细胞凋亡率较正常对照组相比显著增加(p<0.05);木通皂苷D和姜黄素联合用药各浓度组干预后,细胞凋亡率较PA组相比有所降低,其中木通皂苷D和姜黄素联合用药中、高浓度组存在显著性差异(P<0.05),表明木通皂苷D和姜黄素联合用药可抑制肝细胞凋亡率。
4.木通皂苷D和姜黄素联合用药对脂肪肝小鼠的影响。
取ob/ob小鼠36只,体重37±2g,随机分成4组,即模型组,木通皂苷D低、中、高剂量治疗组,每组9只。正常对照组用小鼠为C57BL/6J野生型小鼠,9只,体重20±2g,小鼠分笼饲养在SPF级实验动物房内,自由进食饮水。小鼠用基础饲料适应性喂养1周后,正常组小鼠继续喂食基础饲料,其它实验组小鼠喂食高脂饲料,在喂食高脂饲料的同时,进行给药干预治疗。正常组和模型组小鼠均给予腹腔注射等量生理盐水,木通皂苷D和姜黄素联合用药低、中、高剂量治疗组分别给予腹腔注射30、60、120mg/kg木通皂苷D和姜黄素,药物均以生理盐水溶解。每天腹腔注射1次,连续注射4周。末次给药后禁食不禁水24h,称量体重,摘眼球取血后断颈处死小鼠,离心分离血清,用试剂盒测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)含量;取肝脏,迅速解剖摘取肝脏,生理盐水漂洗,滤纸吸干后称重,拍照,取肝脏右叶于4%中性甲醛固定后切片HE染色病理观察,取肝脏左叶置于-80℃冰箱中保存用于测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量。实验结果如下表1-3和图6-7所示。
表1木通皂苷D和姜黄素联合用药对小鼠体重、肝指数的影响
注:与正常组比较,*P<0.05;与模型组比较,#P<0.05。
由表1结果显示,与模型组相比木通皂苷D和姜黄素联合用药中、高剂量组可明显降低肝指数。此外,联合用药高剂量组可明显降低小鼠体重。
表2木通皂苷D和姜黄素联合用药对小鼠血脂功能的影响
注:与正常组比较,*P<0.05;与模型组比较,#p<0.05。
由表2和图7结果显示,与模型组相比木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组小鼠TC、TG、LDL-C三项指标的水平均降低,其中高剂量组三项指标差异均有统计学意义(P<0.05);木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组小鼠HDL-C水平均高于模型组,比较均有统计学意义(P<0.05)。木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组可明显降低小鼠转氨酶含量,结果提示,木通皂苷D可在一定程度上改善高脂饮食诱导的小鼠血脂紊乱和肝功能异常。
表3木通皂苷D和姜黄素联合用药对小鼠肝脏氧化应激功能的影响
注:与正常组比较,*P<0.05;与模型组比较,#P<0.05。
由表3结果显示,与模型组小鼠相比,木通皂苷D和姜黄素联合用药各剂量组小鼠GSH-PX、SOD水平均有显著升高,MDA水平均有显著下降,且存在剂量依赖性(P<0.05)。结果提示,木通皂苷D和姜黄素联合用药对病变小鼠的氧化应激/脂质过氧化物损伤具有一定的保护作用。由图7结果显示,正常组大鼠肝脏颜色深红,表面光滑,边缘锐利,质地较软;模型组肝脏较正常组体积增大、色黄、边缘变钝、质脆、切面带油腻,联合用药各剂量组大鼠肝脏色泽、质地较模型对照组均明显改善。显微镜下观察肝脏病理切片,正常组小鼠肝小叶结构清晰,细胞排列整齐,大小均匀,分界清楚,细胞核位于细胞中央,圆而清晰,胞浆内未见脂肪空泡,无脂肪变性、坏死。模型组肝细胞出现不同程度的脂肪变性,细胞体积明显变大,细胞核被挤在边缘,细胞质内存在大量脂肪空泡,形态与脂肪细胞类似。联合用药各剂量组小鼠肝脏肝细胞排列轻度紊乱,肝细胞脂肪变性和胞浆内脂滴沉积均有不同程度改善,其中以高剂量组改善最为明显。
5.木通皂苷D和姜黄素联合用药预防胰岛素抵抗的药效学研究
3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,分为正常组,模型组(IR),阳性药组(罗格列酮,Ros20μmol/mL),联合用药低、中、高浓度(50、100、200μg/mL)组,每组加入浓度为1.7μmol/L的胰岛素,除正常组外,其它各组另外加入1.0μmol/L的地塞米松,培育48h后,吸取细胞上清液,采用葡萄糖氧化酶法检测上清残余葡萄糖,计算出细胞消耗的葡萄糖。结果如图8所示,模型组摄糖量仅为正常组的2/3,联合用药组与模型组相比摄糖量增加了8%-11%,阳性药组增加了26.5%。结果提示,联合用药可显著预防胰岛素抵抗的形成。
6.木通皂苷D和姜黄素联合用药对脂肪细胞糖代谢的影响
3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,分为正常组,模型组(IR),阳性药组(罗格列酮,Ros20μmol/mL),联合用药低、中、高浓度(50、100、200μg/mL)组,直接加药48h后检测残余葡萄糖,计算出消耗的葡糖糖。结果如图9所示,联合用药中、高浓度组脂肪细胞对葡糖糖的吸收和代谢较模型组有明显的增加趋势,表明联合用药可在一定程度上增强细胞摄取葡糖糖的功能。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出的实施例。
Claims (9)
1.一种应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,其药用成分按质量百分比计,包括:
木通皂苷D 60-90%
姜黄素 10-30%。
2.如权利要求1所述的应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,药用成分按质量百分比计,包括:
木通皂苷D 90%
姜黄素 10%。
3.如权利要求1所述的应用于治疗代谢综合征的药物,其特征在于,所述应用于治疗代谢综合征的药物可制成片剂、胶囊或者针剂。
4.一种如权利要求1所述药物在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用。
5.如权利要求4所述的药物在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用,其特征在于,所述药物用于治疗和预防糖尿病、肥胖症、胰岛素抗性、高胆固醇血症和高血压。
6.如权利要求4所述的药物在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用,其特征在于,所述药物用于治疗和预防高脂血症。
7.如权利要求4所述的药物在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用,其特征在于,所述药物用于治疗和预防增加的血清三酰基甘油浓度。
8.如权利要求5所述的药物在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用,其特征在于,所述糖尿病患者的空腹血糖水平介于125mg/dl-200mg/dl之间。
9.如权利要求8所述的药物在制备治疗或预防代谢综合征的药物中的应用,其特征在于,所述药物使所述患者的空腹血糖水平降低至110mg/dl以下。
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230818 Address after: China Japan Friendship Hospital, No.2 Yinghua East Street, Chaoyang District, Beijing 100029 Patentee after: China Japan Friendship Hospital (China Japan Friendship Institute of clinical medicine) Address before: Courtyard 16, Xinjiekou Outer Street, Xicheng District, Beijing, 100020 Patentee before: Liu Lihong |
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TR01 | Transfer of patent right |